JPH01117797A - 試験紙の作製法 - Google Patents

試験紙の作製法

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JPH01117797A
JPH01117797A JP27330387A JP27330387A JPH01117797A JP H01117797 A JPH01117797 A JP H01117797A JP 27330387 A JP27330387 A JP 27330387A JP 27330387 A JP27330387 A JP 27330387A JP H01117797 A JPH01117797 A JP H01117797A
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JP
Japan
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oxidase
substrate
aqueous solution
paper
test paper
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Pending
Application number
JP27330387A
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Masao Goto
正男 後藤
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Nok Corp
Original Assignee
Nok Corp
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Publication date
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  • Measuring Or Testing Involving Enzymes Or Micro-Organisms (AREA)
  • Investigating Or Analyzing Non-Biological Materials By The Use Of Chemical Means (AREA)

Abstract

(57)【要約】本公報は電子出願前の出願データであるた
め要約のデータは記録されません。

Description

【発明の詳細な説明】 〔産業上の利用分野〕 本発明は、試験紙の作製法に関する。更に詳しくは、酸
化酵素によって酸化され得る被検出物質を呈色によって
定量的に検出可能な試験紙の作製法に関する。
〔従来の技術〕
酸化酵素によって酸化され得る被検出物質、例えばグル
コースなどを酸化酵素によって酸化し、これら両者間の
酸化反応に伴って発色する色素の呈色によって定量する
方法が従来から行われている。
この定量法においては、酸化酵素および色素の水溶液を
口紙に含浸させて乾燥し、これを適当な大きさにカット
した後プラスチック片などに貼り付けて作製された試験
紙が用いられている。しかしながら、このような一連の
工程を経て作製される試験紙は、−旦口紙に酸化酵素お
よび色素を固定化させた後、更にこれをプラスチック片
に貼り付ける操作が必要であって、それの作製が煩雑で
あるという問題点を有している。
〔発明が解決しようとする問題点〕
そこで、本発明者は1作製工程を簡略化した試験紙の作
製法を求めて種々検討の結果、酸化酵素および色素の水
溶液中に水溶性感光性樹脂を添加して用い゛、それを光
硬化させることにより、プラスチック片への貼り付は工
程を省略し得る試験紙の作製法を見出した。
〔問題点を解決するための手段〕
従って、本発明は試験紙の作製法に係り、試験紙の作製
は、被検出物質、それの酸化酵素およびこれら両者間の
酸化反応に伴って発色する色素を水溶性感光性樹脂水溶
液中に添加し、これらの混合物水溶液を基板上に展開、
塗布した後、酸化酵素を失活させない波長の光線で光硬
化させることにより行われる。
本発明で用いられる被検出物質、それの酸化酵素および
色素の組合せ例を示すと、次の如くである。
(以下余白) [色素=2,7−ジアミノフルオレインーオルトトリジ
ン] 一被JIト良l−ヒ グルコース   グルコースオキシダーゼガラクトース
  ガラクトースオキシダーゼコレステロール コレス
テロールオキシダーゼ尿酸    ウリカーゼオキシダ
ーゼ 乳酸    乳酸オキシダーゼ しゅう酸   しゆう酸デカルボキシラーゼしゆう酸オ
キシダーゼ ピルビン酸   ピルビン酸オキシダーゼモノアミン 
  モノアミンオキシダーゼアミノ酸   アミノ酸オ
キシダーゼ アルコール   アルコールオキシダーゼ(以上、ペル
オキシダーゼと併用) [色素:ヨードニトロテトラゾリウムクロライドまたは
ニトロブルーテトラゾリ ウムクロライド] 一被Jl曳ヌーヒ イノシン   ヌクレオシドホスホリラーゼキサンチン
オキシダーゼ ヒポキサンチン キサンチンオキシダーゼまた、水溶性
感光性樹脂としては1例えば分子中に光架橋性基として
スチルバゾリウム基、ジアゾ基などの感光性基、好まし
くはスチルバゾリウム基を有するポリビニルアルコール
などが水溶液として用いられる。
被検出物質以外の各成分は、混合物水溶液として基板上
に適用される。混合物水溶液は、水溶性感光性樹脂の濃
度約3〜7%水溶液2mAに、例えば被検出物質オキシ
ダーゼ約1〜100■g、ペルオキシダーゼ約0.05
〜1++gおよび1種または2種の色素それぞれ約0.
5〜20+agを溶解させることによって調製される。
調製された水溶液は、その粘度が高い場合には、混入し
た空気を静置したりあるいは真空にしたりして脱気する
。この水溶液の基板上への展開、塗布は、スピナー法、
浸漬法、スプレー法などによって行われる。この際、マ
スクを用いれば種々のパターンに塗布することができ、
そのようなパターンを用いれば2種類以上の被検出物質
の定量を可能とさせる。
基板としては、定量用、定性用、クロマトグラフ−用の
口紙あるいはプラスチック片などが用いられる。これら
の基板上に展開、塗布され、その後乾燥させた混合物は
、酸化酵素を失活させない波長、例えば300nmの光
線で約1/2〜3分間光照射し、水溶性光硬化性樹脂を
架橋、硬化させる。
このような光硬化性樹脂の硬化によって、酸化酵素およ
び色素は、直接基板上に固定化される。
このようにして得られた試験紙は、必要に応じて任意の
形状および大きさにカットされ、冷蔵庫中に保管される
得られた試験紙を用いての被検出物質の定量は。
被検出物質の水溶液中に試験紙を浸漬することによって
行われ、約3〜30秒間浸漬後引き上げられた試験紙は
、被検出物質の濃度に応じた度合いの呈色を示すので、
目視によってそれの大よその濃度を知ることができる。
〔発明の効果〕
本発明方法によれば、従来法に比べて一工程省略した形
で酸化酵素によって酸化され得る被検出物質定量用の試
験紙を作成することができる。この試験紙は、鮮度試験
紙などとしても有効に用いられる。
〔実施例〕
次に、実施例について本発明を説明する。
実施例1 ポリビニルアルコール系感光性樹脂(感光性スチルバゾ
リウム基含有量1.4モル%、けん化度88%。
重合度1400)の5重量%水溶液2mΩに、グルコー
スオキシダーゼ60mg、ペルオキシダーゼ0.5mg
、オルトトリジン・2塩酸塩8mgおよび2,7−ジア
ミノフルオレイン・2塩酸塩11mgを溶解し、4℃に
静置して脱気、乾燥した後、プラスチック片にスピナー
で回転塗布した。このプラスチック片を紫外線(波長3
00nm)で2分間照射し、膜を硬化させた。
この硬化膜被覆プラスチック片を、それぞれ濃度0.0
2.0.1.0.2.1.2または10mg/m nの
グルコース溶液中に浸漬して引き上げると、1分間以内
に青色に呈色し、その呈色の度合はグルコース濃度にほ
ぼ比例していることが目視で確認された。
実施例2 実施例1において、プラスチック片の代りにクロマトグ
ラフ用口紙(東洋口紙製品)を用い、硬化膜を含浸させ
たクロマトグラフ用口紙を得た。
この硬化膜含浸クロマトグラフ用口紙についても、グル
コース濃度0.02〜10mg/mQの範囲内では、そ
の濃度にほぼ比例する青色の呈色が目視で確認された。

Claims (1)

  1. 【特許請求の範囲】 1、被検出物質、それの酸化酵素およびこれら両者間の
    酸化反応に伴って発色する色素を水溶性感光性樹脂水溶
    液中に添加し、これらの混合物水溶液を基板上に展開、
    塗布した後、酸化酵素を失活させない波長の光線で光硬
    化させることを特徴とする試験紙の作製法。2、被検出
    物質がグルコースである特許請求の範囲第1項記載の試
    験紙の作製法。 3、発色色素が2,7−ジアミノフルオレインおよびオ
    ルトトリジンである特許請求の範囲第1項記載の試験紙
    の作製法。 4、基板がプラスチック片またはロ紙である特許請求の
    範囲第1項記載の試験紙の作製法。
JP27330387A 1987-10-30 1987-10-30 試験紙の作製法 Pending JPH01117797A (ja)

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