JPH01149730A - レトロウイルス増殖抑制剤 - Google Patents

Abstract

(57)【要約】本公報は電子出願前の出願データであるた
め要約のデータは記録されません。

Description

【発明の詳細な説明】 産業上の利用分野 本発明は、新規なレトロウィルス増殖の抑制剤に関する
ものであり、更に詳しくは、医学並びに獣医学の分野に
於けるレトロウィルス感染症に対し有用かつ有効な薬物
を提供するものであり、特に、後天性免疫不全症候群（
ＡｑｕｉｒｅｄＩｍｍｕｎｏｄｅｆｉｃｉｅｎｃｙ　Ｓ
ｙｎｄｒｏｍｅ：ＡＩＤＳ、以下「エイズ」という）に
対する薬物療法剤を開示することにより、斯かる感染症
の進行と発症の阻止、治療及び予防に寄与するものであ
る。

従来技術とその問題点 周知の通り、エイズや成人Ｔ細胞白血病（Ａｄｕｌｔ　
Ｔ−ｃｅｌｌ　Ｌｅｕｋｅｍｉａ　ｓ以下ｒＡＴＬＪと
いう）は、致死的乃至は極めて悪性の疾患であり、斯か
る伝染病の阻止と撲滅は現在、全世界のレベルで人類が
克服すべき最重要課題となっている。

また、これ等の疾患は、レトロウィルス感染症として包
括され現在、各方面で盛んに各種レトロウィルスを用い
て比較研究されている（ｐｒｏｇｒｅｓｓｉｎ　Ｍｅｄ
ｉｃａｌ　Ｖｉｒｏｌｏｇｙ　　第３２巻、１７４〜２
１１ページ、　Ｓ、　Ｋａｒｇｅｒ　１９８５年発行ｊ
医学のあゆみ、第１４２巻、６１３〜６３６ページ；１
９８７年等）。以下、本発明の技術上関連する範囲を明
確にするため、レトロウィルスの共通の属性に関する公
知の知見を説明する。

レトロウィルス科に属するウィルスに共通の主な特徴は
、エンベロープ、単鎖ＲＮＡ型ゲノム、及び逆転写酵素
を有することである。このウィルスは直径的１１００ｎ
の球形で、そのゲノムは分子量的３×１０６の単鎖ＲＮ
Ａ２分子からなり、これ等２分子は２量体乃至は２倍体
になっている。

マタ、該ゲノムは、逆転写酵素及びウィルス粒子構成蛋
白と複合体を形成し、プライマーｔ　ＲＮＡと共に、ウ
ィルス粒子内部に存在する。そして、このウィルスは次
の各過程を経て増殖することが知られている：宿主細胞
膜への吸着−細胞内への侵入−ウィルスの脱外被−逆転
写酵素によるウィルスゲノムＲＮＡからＤＮＡへの逆転
写→逆転写により合成されたＤＮＡの宿主細胞ＤＮＡへ
の組込み一転写一翻訳一子ウイルスの生成。更にまた、
レトロウィルス科は、次の三つの亜科分類されている：
オンコウイルス亜科、レンティウイルス亜科、及びスプ
ーマウイルス亜科［ＣＩａｓｓｉｆｉｃａｔｉｏｎａｎ
ｄ　Ｎｏｍｅｎｃｌａｔｕｒｅ　ｏｆ　Ｖｉｒｕｓｅｓ
　（Ｆｏｕｒｔｈ　Ｒｅｐｏｒｔｏｆ　ｔｈｃ　Ｉｎｔ
ｅｒｎａｔｉｏｎａｌ　Ｃｏｍｍ１ｔｔｅｅ　ｏｎ　Ｔ
ａｘｏｎｏｍｙｏｆ　Ｖｉｒｕｓｅｓ　）　、Ｉｎｔｅ
ｒｖｉｒｏｌｏｇｙ　、第１７巻、１２４〜１２８ペー
ジ、１９８２年〕。オンコウイルス亜科に属するウィル
スは、ＲＮＡ腫瘍ウィルスとも呼ばれ、ヒトを含む哺乳
類、鳥類、爬虫類に感染して腫瘍、を髄障害、関節炎、
脳炎等を誘発する。この亜科に属するウィルスとして、
例えば、ヒトＴ細胞白血病ウィルス（以下「ＨＴＬＶ−
ＩＪという）、ネコ白血病ウィルス、ネズミ内押ウィル
ス、マウスのモロニー白血病ウィルス、ウシ白血病ウィ
ルス、トリ白血病ウィルス、トリ内押ウィルス等が公知
である。レンティウィルス亜科に属するウィルスは、ス
ローウィルス感染症を生じるウィルスとして知られてお
り、ヒト、ヒツジ、ヤギ、ウマ、ウシ等に遅発性の感染
をする。

即ち、ウィルス感染の後、数カ月から数年を経て徐々に
、リンパ節腫脹、関節炎、肺炎、髄膜脳炎、脳症、を髄
膜、免疫不全等が生じ、発症した大抵の患者や患畜は死
に至る。この亜科に属するウィルスとして、例えば、ヒ
ト免疫不全ウィルス〔以下ｒＨＩＶＪという；従来ＨＴ
ＬＶ−ｍ又はＬＡＶ　（Ｌｙｍｐｈａｄｅｎｏｐａｔｈ
ｙ−ａｓｓｏｃｉａｔｅｄ　Ｖｉｒｕｓ）と呼ばれてい
た名称をＨＩＶに統一（Ｓｃｉｅｎｃｅ　、第２３２巻
、６９７ページ、１９８６年）；現在ＨＩＶ−１及び２
の２種類が分離同定されている〕、サル免疫不全ウィル
ス、ヒツジ脳炎のビスナウィルス、ヒツジ肺繊維症のマ
エディウイルス、ヤギ関節炎脳炎ウィルス、ウマ伝染性
貧血ウィルス、ウシリンパ節病変ウィルス等が知られて
いる。スプーマウイルス亜科に属するウィルスは、フォ
ーミイウイルスとも呼ばれ、ヒト、サル、ウシ、ネコ等
の哺乳動物での感染が報告されているが、これ等の病原
性については未だ特記すべき事項は知られていない。以
上の通り本発明において、レトロウィルスは、上記レト
ロウィルス科に属する各ウィルスを意味するものである
。

レトロウィルスは、各種動物の感染症及び人畜共通伝染
病の観点から重大なウィルスであるだけではなく、これ
とは逆に、腫瘍や系統発生の解明゛の材料として、また
、遺伝子工学で用いるウィルス性ベクターとして極めて
重要かつ有用なウィルスである。従って、該ウィルスに
関し、種々の膨大な報告がなされているが、ここでは便
宜的に、代表的なレトロウィルスに関する現状を疫学的
側面から、以下に説明する。

エイズは、エイズウィルス、即ちＨＩＶの感染により生
じる疾患であり、その恐ろしさが主に免疫不全症の誘発
とそれに起因する諸疾患の併発と合併にあることは、既
に世界中で周知されている通りである。１９８１年米国
でエイズが発見されて以来、その患者数は年毎に増加の
一途を辿り、ＷＨＯの発表によれば、１９８７年９月３
０日現在、既に全世界で６０６５３人に達している（Ｗ
ＩＩＯＷｅｅｋｌｙ　Ｅｐｉｄｅｍｉｏｌｏｇｉｃａｌ
　Ｒｅｐｏｒｔ　、第６２巻、第４０号、３０１ページ
、１９８７年１０月２日）。しかも現在、世界の患者は
毎月、約２５００例の割合で発生増加しつつあり、更に
、ＷＨＯに対する各国当局の報告の精度には差があるた
め、実際には世界中に、約１０万人の患者、約１千万人
の感染者がいると推定されている。現在、世界中がエイ
ズに対する恐怖と対策に包まれていることは、周知の通
りである。

ＡＴＬは、１９７７年に我が国で発見された疾患であり
、ＨＴＬＶ−Ｉの感染により生じることが知られている
。また、ＡＴＬは臨床上、急性型、リンパ腫型、慢性型
及びくすぶり型に大別されている。この疾患の恐ろしさ
は、慢性型やくすぶり型から突然、急性型に転化するこ
とであり、発病すると、患者はエイズと同様に免疫不全
症に陥る。

現在、我が国には、ＨＴＬＶ−Ｉに感染した無症状のウ
ィルスキャリアが約百万人、そして年間の患者発生が約
３００例に及ぶと推定されている。

更にまた、ＨＴＬＶ−Ｉが、日本だけではなく熱帯及び
亜熱帯に亘るμ界のベルト地帯に広く分布すると共に、
ＨＴＬＶ−Ｉ感染による歩行、排尿、感覚などの障害や
異常を伴うを髄障害乃至はミニｑパシーの生じることも
報告されており、斯かる理由からも現在、ＡＴＬはエイ
ズと共に重大な感染症である。

ヒト以外の動物に感染する上記ＲＮＡ腫瘍ウィルスのう
ち、ニワＩ・りの肉腫ウィルス及び白血病ウィルスは、
伝染性が高く、多数のニワトリを冒すので、この病気は
養鶏業界では経済的に非常に重要である。また、ネコ白
血病ウィルスの感染により生じるネコ白血病は、飼猫に
おいて最も流行し被害の大きい病気であり、世界に於け
る高い発生率と死亡率が推測されている。

上述の基礎研究並びに疫学以外に、斯かるレトロウィル
ス感染症の予防と治療については既に、慎重かつ大々的
な対策や多数の研究開発が試みられている。そして、こ
れ等は概ね、次の３つに大別される：防疫体制の強化に
関する公衆衛生並びに医療行政上の施策と工夫；ワクチ
ンの開発；及び薬物療法剤の開発。以下、この順序で現
状を説明する。

公衆衛生並びに医療行政上の諸施策と工夫：例えば、エ
イズの場合で代表される諸対策では、血液製剤での加熱
処理、注射器や容器・器具・用品の滅菌等によるウィル
スそのものの不活化；また、検疫による母子感染防止、
広報による性行為感染症防止方法の周知、エイズ防止を
目的とする立法による行政措置等のウィルスの水平伝播
及び垂直伝播を考慮した感染ルートの遮断が、実施又は
計画されている。しかしながら、前述の通り世界レベル
では、現在もなおエイズ罹患例は毎月、急激に増加しつ
つあるため、慣習や生活様式等が相互に異なる諸国間で
の国際交流が激しい今日では当然、上記諸対策だけでは
確実な効果が期待されない。例外的に、ニワトリの肉腫
及び白血病ウィルスに関しては、検疫下での種部の選別
とアイソレーター内での育雛により、ウィルスに感染し
ていないニワトリ集団の確立に成功してはいるが、これ
は局地的であり、かつ斯かる確立とその維持には高度の
技術や高価な設備機器を要するため、実験的でこそあれ
、実用的ではない。

ワクチンの開発ニレトロウィルスワクチンの開発は既に
、種々試みられている。例えば、ネコ白血病ワクチン（
特開昭５６−１２７３１８号、及び特開昭６２−１５１
１８６号）；ネコ白血病ワクチンを実施例とするレトロ
ウィルスワクチンの製法（特開昭６２−１１６５２３号
）；ワクチン用のヒトＲＮＡ型腫瘍ウィルス抗原の誘導
法（特開昭５８−１２６７８５号）、ＡＴＬワクチン用
抗原を大量に産生ずるＭＴ−２細胞株の樹立（特開昭５
８−１４６５１２号）、ＡＴＬワクチン（特開昭６０−
１６６６２４号）；エイズワクチン（ＷＯ８５１０４８
９７号、特開昭６２−２６３００号、特開昭６２−１６
４６９６号、特開昭６２−２４４３９３号、及び特表昭
６２−５００５９２号）等が公知である。しかしながら
、これ等は臨床上、ワクチンとしての安全性、有効性並
びに均質性が十分には確認されていないため、未だ実用
化の域には程遠い現状にある。特に、エイズワクチンの
研究と開発は、ウィルスの抗原変異の解析とそれへの対
応、試験管内実験、動物実験、臨床試験、ワクチン製造
等に於けるバイオハザード対策に要する高価な設備と有
能な人材の確保、臨床試験に於ける一般社会の協力等、
技術、経済上並びに倫理上の難題に囲まれている（ＷＩ
ＩＯＷｅｅｋｌｙ　Ｅｐｉｄｃｍｉｏｌｏｇｉｃａｌ　
Ｒｅｐｏｒｔ　、第６２巻、９３〜１００ページ、１９
８７年；　Ｎａｔｕｒｅ、第３２７巻、４５８ページ、
１９８７年；　ＡＳＭ　Ｎｅｗｓ、第５３巻、４８４〜
４８９ページ、　ＡｍｅｒｉｃａｎＳｏｃｉｅｔｙ　ｆ
ｏｒ　Ｍｉｃｒｏｂｉｏｌｏｇｙ　１９８７年発行）。

換言すれば、エイズで代表されるレトロウィルス感染症
に対する有効かつ公認のワクチンの実用化は、ここ数年
間は、達成される見込みがない。

薬物療法剤の開発：上記の通り、エイズで代表されるレ
トロウィルス感染症に係る緊急対策の効果と成果が、い
ずれも不確実若しくは未定の状態にある現状ではＩＱ、
薬物療法に最も期待が寄せられるのも道理である。例え
ば、エイズの薬物療法では、制癌剤として２３年前に開
発されたアジドデオキシチミジン（以下ｒＡＺＴＪとい
う；西独公開特許第３６０８６０６号）が急拠流用され
、米国、英国、フランス、日本等の諸国で既に公認され
、エイズ患者への一般投与が開始されている。

しかしながら、ＡＺＴの使用により、発熱、悪心頭痛、
食欲減退、不眠、筋痛、ヘモグロビン減少を伴う貧血、
顕著な骨髄抑制（白血球減少、好中球減少等）、大赤血
球増多症等の副作用並びに毒性が、プラセボーに比べ有
意の差で生じることが報告されている（Ｎｅｗ　Ｅｎｇ
ｌａｎｄ　Ｊｏｕｒｎａｌ　ｏｆＭｅｄｉｃｉｎｅ　、
第３１７巻、１９２〜１９７ページ。

１９８７年）。また、ＡＺＴの抗レトロウィルス剤とし
ての作用機序は次のように考えられている：前述ウィル
ス増殖の逆転写過程でのＤＮＡ合成に於いて、逆転写酵
素の正常基質、例えば、デオキシチミジン三リン酸との
間でＡＺＴが疑似基質として競合作用し、該酵素により
合成されるＤＮＡ鎖にＡＺＴが一旦結合してしまうと、
それ以降のＤＮＡ鎖の伸長が阻止される（Ｊｏｕｒｎａ
ｌ　ｏｆＭｅｄｉｃａｌ　Ｃｈｅｍｉｓｔｒｙ、第２９
巻、１５６１〜１５６９ページ、１９８６年）。即ち、
ＡＺＴによりウィルスの細胞膜への吸着と侵入過程は阻
止されないため、セルフリー感染は抑制されたが、感染
細胞と未感染細胞とが集合体乃至は組織形成下にある細
胞間感染は抑制されないという欠点が指摘されている（
月刊薬事、第２９巻、１３９１〜１３９５ページ、１９
８７年）。それゆえ、ＡＺＴの上記欠点を克服するため
、種々の工夫と研究が、エイズ療法剤や抗レトロウィル
ス剤の観点から、試みられている。例えば、サイトメガ
ロ感染症及び陰部ヘルペスの治療薬として公知のアシク
ロビルとＡＺＴとの併用による相乗作用、ＡＺＴに化学
構造が類似のデオキシヌクレオシド誘導体によるＨＩＶ
の増殖抑制等が報告されている（Ｎａｔｕｒｅ。

第３２５巻、７７３〜７７８ページ、１９８７年；Ｊｏ
ｕｒｎａｌ　ｏｆ　Ｍｅｄｉｃａｌ　Ｃｈｅｍｉｓｔｒ
ｙ、第３０巻、８６２〜８６６ページ、１９８７年）。

また、現在、エイズの流行は、ＨＩＶ並びにレトロウィ
ルスの増殖抑制剤のスクリーニングと研究開発に拍車を
かけ、その努力は、エイズの薬物療法を中心に展開され
ている。そして、その動向は、下記の３つに大別される
：既知の抗ウィルス剤、抗生剤、制癌剤等の利用；既知
の免疫増強調節剤乃至は免疫賦活剤の活用；合併症、悪
性腫瘍、日和見感染症等に対するその他の治療法。尚、
これに関する総説は既に、各方面で公表されているＣＪ
ｏｕｒｎａｌ　ｏｆＭｅｄｉｃａｌ　Ｃｈｅｍｉｓｔｒ
ｙ、第２９巻、１５６１〜１５６９ページ、１９８６年
；　Ｐｈａｒｍａ　Ｍｅｄｉｃａ　、第２９巻、７３〜
７７ページ、１９８７年；医学のあゆみ、第１４２巻、
６１９〜６２２ページ及び６６２〜６６９ページ、１９
８７年、ＡＩＤＳ研究・最新の動向（日本臨肚、１９８
７年別冊）２３５〜３２７ページ、日本臨壮社１９８７
年発行〕。

而して、例えば、抗ウイルス剤関係では、ＡＺＴ（ウェ
ルカム社製）、ジデオキシヌクレオシド（Ｎ　Ｉ　Ｃ社
製）、ジデオキシシチジン（ロシュ社製）、スミラン（
バイエル社製）、ホスカーネット（アストラ社製）、リ
バビリン（ヤマサ醤油■製）、アンサマイシン（ファル
ミタリア社製）、インターフェロン−α（バイオジエン
社製）、ＨＰＡ−２３（パスツール研究新製）　、ＡＬ
−７２３（ワイツマン研究所製）　、ＵＦＣ−Ａ　（上
野製薬■製）、ランブレン（チバガイギー社製）等が公
知である。また、免疫増強剤関係ではイソプリノシンに
ューポート社製）　、ＩＭＲＥＧ−１（イムレグ社製）
、５Ｋ８１８（三相化学■製）、イムチオール（メリュ
ー社製）、レバミソール（ヤンセン社製）、サイモペン
チン（シララグ社製）、シメチジン（スミス・クライン
社製）、インドメタシン（ＭＳＤ社製）、ナルトレキラ
ン（デュポン社製）、アジメクソン、ノイロトロピン（
日本臓器■製）、レンチナン（味の素■製）、グリチル
リチン（ミノファーゲン■製）、インターフェロン−γ
（ジエネテク社製）、インターロイキン−２（試用薬品
■）、インターロイキン−４（ゼンザイム社製）、サイ
モスティミュリン（ワイツマン研究所製）、サン上シン
／アスピリン（ジョーシワシントン大学型）、γ−グロ
ブリン（ミドリ十字■製）、トランスファー・ファクタ
ー、ＬＣ９０１８（ヤクルト■製”）　、ＡＬ−７２１
（ワイツマン研究所製）、人参湯等が知られている。ま
た、その他の治療法関係では、Ｄ−ペニシラミン（大正
製薬■製）の投与、免疫能阻害物質を除去するブロソブ
ラ（イムレ社製）、免疫抑制剤シクロスポリン（サンド
社製）、血漿交換、血漿濾過、骨髄移植等が行われてい
る。更にまた、ＨＴＬＶ−Ｉモノクローナル抗体による
ＡＴＬの治療（特開昭５８−１４６５１２号）、抗Ｔ４
細胞抗体を有効成分とするエイズ治療剤（特開昭６１−
１４３３２８号）、抗生剤ネプラノシンを有効成分とす
るＡＴＬ治療剤（特開昭６１−２６３９１９号）、イン
ターロイキン−２とシクロスポリン又はイムランやプレ
ドニゾロン等のステロイドとを配合したエイズの治療薬
（特開昭６２−１８５０２８号）、ペントースやヘキソ
ース重合体の硫酸エステルである分子量５千〜５０万の
硫酸多糖体を有効成分とする抗レトロウィルス剤（特開
昭６２−２１５５２９号）、免疫不全の治療に有効なチ
ロシン及びグリシン残基を有する分子量２００〜１５０
０のポリペプチド（特開昭６２−２２８０２３号）等が
公知である。しかしながら、上記の抗ウイルス剤関係に
記載の薬物は全て試用の段階にあり、これ等が有効かつ
安全であることは未だ十分には検証かつ確認されていな
い。また、上記の通り、免疫増強剤並びにその他の治療
法関係でも、種々の薬剤や処置が臨床上、試みられては
いるが、朱だ著効を示すという報告は知られていない。

以上から明らかな通り、エイズやＡＴＬで代表されるレ
トロウィルス感染症の予防と治療には未だ、確固たる手
段がどこにも存在しない。そして一方では、前述の通り
、斯かる感染症が、世界的規模の社会問題が提起される
程、急速に蔓延しつつあることも事実である。従って、
安全性と有効性とを兼備した抗レトロウィルス剤の出現
が人類に待望の福音をもたらすことは必定であり、かつ
その実用化は急務の課題である。

問題点を解決するための手段 本発明者等は、前述の従来技術の課題を克服するため、
鋭意研究を行った結果、従来の薬物に比べ優れて安全性
と有効性とを兼備したレトロウィルス増殖抑制剤の開発
を達成した。驚くべきことに、単糖類又は二糖類の誘導
体、例えば、イノシトール硫酸エステル、イノシトール
リン酸エステル等により、レトロウィルス、特に、ＨＩ
Ｖの増殖が十分に抑制されることを発見した。更に驚く
べきことに、ＨＩＶの研究に於いて汎用されているＭＴ
−４細胞株（Ｇａｎｎ　Ｍｏｎｏｇｒａｐｈ　ｏｎ　Ｃ
ａｎｃｅｒＲｅｓｅａｒｃｈ　、第２８巻、２１９〜２
２８ページ。

１９８２年；　Ｊｏｕｒｎａｌ　ｏｆ　Ｖｉｒｏｌｏｇ
ｉｃａｌ　Ｍｅｔｈｏｄｓ。

第１６巻、１７１〜１８５ページ、１９８７年）の培養
液中に該誘導体が共存すると、ＨＩＶによるセルフリー
感染及び細胞間感染が共に阻止されることを発見した。

即ち、ＭＯＩ　　（Ｍｕｌｔｉｐｌｉｃｌｔｙｏｆ　Ｉ
ｎｆｅｃｔｉｏｎ：感染多重度）′約０．００１にてＨ
ＩＶを感染させたＭＴ−４細胞培養の培地中に該誘導体
を共存させると、ＭＴ−４細胞の増殖は抑制されないけ
れども、該培養下でのクラスター（細胞集合）形成細胞
並びにクラスター形成のない遊離分散細胞のいずれに於
いてもＨＩＶ感染が広がらずＨＩＶ増殖の抑制されるこ
とを、ＣＰＥ（Ｃｙｔｏｐａｔｈｉｃ　Ｅｆｆｅｃｔ　
：細胞変性効果）、細胞の生死判定、及び蛍光抗体法に
よるＨＩＶ抗原の測定により発見し゛た。このことは該
誘導体がレトロウィルスによる細胞への吸着・侵入過程
及び逆転写過程を共に阻止することを示唆する。更にま
た、該誘導体に関し次の利点が判明している：抗レトロ
ウィルス剤として試用されている前述の公知硫酸多糖体
（特開昭６２−２１５５２９号）が分子量約５千から数
十刃にも及ぶ高分子物質であるのに対し、上記誘導体の
分子量はいずれも千数百以下であり、極めて低分子物質
であるため、生体内の免疫系では異物として認識されず
、かつ、それ自身、抗原性を発現しないので、アレルギ
ー原にはなりにくい。このことは、本発明に係るレトロ
ウィルス増殖抑制剤が、アレルギーを誘発することなく
長期間に亘る薬物療法下での連用に十分に耐え、かつ、
適していることを意味する。更に、低分子物質であるこ
との利点として上記高分子多糖体に比べ、生体内への吸
収が優れて迅速、かつ、脳を含む各臓器・組織への分布
が広く円滑に行われると共に、代謝系酵素により分解を
受ける確率が低く、熱に対し安定であるので、変性若し
くは化学構造上の変化を来たすことなく、該誘導体は生
体内で長時間に亘り貯留される。このことは、本発明に
係るレトロウィルス増殖抑制剤の薬効の出現が迅速で、
しかも、広く全身に及ぶと共に、その持続が長時間に亘
ることを意味している。また上記誘導体は、公知公用の
下で汎用されているにも拘らず、諸方面での毒性試験や
発癌性試験に於いて未だ、その有毒性や為害作用等の報
告が見られない。例えば、イノシトール六硫酸のアルミ
ニウム塩、カリウム塩、ナトリウム塩、ナトリウム−ア
ルミニウム塩等のマウス及びラットでの急性毒性（ＬＤ
５ｏ）は、皮下接種では２５００ｍｇ／ｋｇ以上、経口
投与では５０００ｍｇ／ｋｇ以上（特開昭５３−１１３
０３０号、特開昭５４−１１３３４４３号、特開昭５７
−１１２３２４号）；イノシトール六リン酸（フィチン
酸）のマウスでの急性毒性（ＬＤ５０）は静脈内接種で
５００　ｍｇ／ｋｇ　（Ｔｏｘｉｃ　５ｕｂｓｔａｎｃ
ｅｓ　Ｌｉ５ｔ　　（１９８２〜１９８３年版）　、Ｎ
　Ｉ　ＯＳ　Ｈ（Ｎａｔｉｏｎａｌ　１ｎｓｔ１ｔｕｔ
ｅ　ｆｏｒＯｑｕｐａｔｉｏｎａｌ　５ａｆｅｔｙ　ａ
ｎｄ　Ｈｅａｌｔｈ）発行〕であり、急性毒性はいずれ
も極めて低い。更にまた、上記誘導体は、動植物界に多
量に存在することが古くから知られている。例えば、イ
ノシトール誘導体は、穀類、豆類、柑橘類、キャベツ類
、グリーンピース、牛心臓、生肝、ビール酵母等の食品
１００ｇ中に数１０〜数１００ｍｇ含まれており、また
、動物体では筋肉、肺臓、心臓、赤血球、脳、眼、甲状
腺、華丸等に広く分布している（「食品化学」訂正第７
版、３０ページ及び１２３〜１２４ページ、岩田久敬著
、１９６２年養賢堂発行）。このことは、既に常用され
ている公知の栄養剤やビタミン剤等と同様に、本発明に
係るレトロウィルス増殖抑制剤は、レトロウィルス感染
予防のための一般用医薬品として、家庭での連用若しく
は日常服薬にも適していることを意味する。本発明は、
これ等の知見に基づき完成した。

即ち、本発明によれば、以下の第１項から第３項に記載
のレトロウィルス増殖抑制剤が提供される。

■　単糖類又は二糖類の誘導体を有効成分とすることを
特徴とするレトロウィルス増殖抑制剤。

■　単糖類又は二糖類が、単糖又は二糖或いはその糖ア
ルコール、デオキシ糖、アミノ糖、ウロン酸、糖酸、硫
黄糖又はシクリトールである上記の第１項に記載のレト
ロウィルス増殖抑制剤。

■　単糖類又は二糖類の誘導体が、該糖類の無機酸エス
テル、有機酸エステル又はエーテルである上記第１また
は２項に記載のレトロウィルス増殖抑制剤。

本発明のレトロウィルス増殖抑制剤は、単糖類又は二糖
類の誘導体を有効成分とするものである。

即ち、単糖類の誘導体及び二糖類の誘導体からなる群か
ら選ばれた少なくとも１種を有効成分とし、通常該有効
成分を少なくとも薬効を奏する量含有してなるものであ
る。

以下、本発明に係る有効成分及び薬剤につき、更に詳細
に説明する。

（１）単糖類：本発明における単糖類としては、以下に
記載の炭素数が３〜１０の範囲にある各単糖とその異性
体が含まれ、例えば、グリセロース、ジヒドロキシアセ
トン等のトリオース、エリトリット、トレオース、エリ
トルロース等のテトロース、アラビノース、キシロース
、リボース、リキソース、リブロース、キシルロース、
アビオース等のペント−ス、グルコース、ガラクトース
、マンノース、タロース、フルクトース、ソルボース、
タガトース、プシコース、ストレプトース等のヘキソー
ス、アルドヘプトース、セドヘプツロース等のへブトー
ス、オクトース、ノノース、デコース等の天然又は合成
の公知のものを挙げることができる。また、本発明にお
ける単糖類としては、上記単糖類の糖アルコール、デオ
キシ糖、アミノ糖、ウロン酸、糖酸、硫黄糖、シクリト
ール等の各種類縁体が包含される。具体例としては、デ
オキシリボース、デオキシヘキソース、ジデオキシヘキ
ソース等のデオキシ糖、グルコサミン、ガラクトサミン
、アミノウロン酸、シアル酸、ムラミン酸等のアミノ糖
、グルクロン酸、ガラクツロン酸、マンヌロン酸、グル
ロン酸等のウロン酸、チオグルコース、チオメチルリボ
ース等の硫黄糖、グリセリン、トレイット、エリトリッ
ト、アラビット、リビット、キシリット、ソルビット、
マンニット、イジツト、タリット、ズルチット、アリッ
ト等の糖アルコール、イノシトール、クエルシトール等
の環式糖アルコール即ちシクリトール等の天然又は合成
の公知のものを挙げることができる。

本発明では、上記単糖類のうち、特に、シクリトール、
例えばイノシトールの使用が望ましい。

但し、本発明は、これに限定されるものではない。

（２）二糖類：本発明における二糖類は、上記単糖類と
して述べた炭素数３〜１０の各単糖、その異性体及びこ
れらの各種類縁体の内から選ばれた同−又は異なった２
つの分子が結合したものである。具体例としては、スク
ロール、マルトース、ラクトース、ツラノース、セロビ
オース、トリハロース等を挙げることができる。

（３）単糖類又は二糖類の誘導体二本発明における有効
成分たる該誘導体としては、上記（１）及び（２）の糖
類の無機酸エステル、有機酸エステル、エーテル等が包
含される。例えば、上記の各種単糖類又は二糖類と既知
の無機酸又は有機酸との化合物であるリン酸エステル、
硫酸エステル、酢酸エステル、酪酸エステル等を挙げる
ことができる。また、上記各種単糖類又は二糖類とメタ
ノールあるいはエタノール等との化合物であるメチルあ
るいはエチルエーテル体等を挙げることができる。更に
詳しくは、上記各種単糖類又は二糖類にエステル結合又
はエーテル結合している無機酸又は有機酸等の分子数は
約１〜２０であり、エステルの場合には、通常糖類とエ
ステル結合している酸がカリウム、ナトリウム、カルシ
ウム、マグネシウム、バリウム、アルミニウム、アンモ
ニア等の１種以上の陽イオンと塩を形成した状態で使用
に供される。

上記に係る望ましい具体例として、特に、イノシトール
六リン酸ナトリウム塩、イノシトール六硫酸カリウム塩
、ガラクトース五硫酸カリウム塩、グルコース五硫酸カ
リウム塩、ズルチット六硫酸カリウム塩、ソルビット六
硫酸カリウム塩等の単糖類誘導体、スクロース八硫酸カ
リウム塩、ラクトース八硫酸カリウム塩、マルトース八
硫酸カリウム塩等の二糖類誘導体等を挙げることができ
る。

但し、本発明はこれ等の物質に限定されるものではない
。

（４）薬剤の混合又は配合二本発明によれば、上記（３
）に於いて示されている糖類の誘導体からなる群から１
種の物質を適宜選択して、該物質のみを有効成分として
含有する薬剤が提供される。

また、上記群から２種以上の物質を選択した後、これ等
の物質を有効成分として混合若しくは配合し調製される
薬剤をも提供できる。更にまた、薬効の相加作用乃至は
相乗作用が認められる場合には、本発明に係る物質と、
前述の従来技術で示した公知薬剤、例えば、グリチルリ
チン、イソプリノシン等とを配合し調合される薬剤の提
供が可能である。尚、公知薬剤を混合する場合には、前
述のレトロウィルス増殖過程に於ける薬剤の作用機序が
、本発明に係る物質とは異なる公知薬剤を選択し配合す
ることが望ましい。

（５）使用量又は投与量：これに関しては、本発明に係
る上記誘導体群から選ばれる物質により相違する。また
、剤形、投与回数、年齢、体重、症状の重度、感染前の
予防又は感染後の発症への進行阻止等に関する使用目的
によっても異なる。

目安として、１日当りの使用量又は投与量は、体重１ｋ
ｇ当りヒトでは約１〜１０００ｍｇ、家畜等の動物では
約１〜２０００ｍｇの範囲が望ましい。

（６）剤形と製剤二本発明のレトロウィルス増殖抑制剤
は、公知の剤形、例えば、散剤、錠剤、カプセル剤、顆
粒剤、液剤、シロップ剤、注射剤、油脂と界面活性剤と
の乳剤、リポソーム剤、軟膏剤、活性炭やリン酸カルシ
ウムゲル等への支持体吸着製剤、パップ剤、エアゾル剤
、半開等として使用に供することができる。上述の各剤
形の製造乃至は製剤に於いては、その目的に応じて常用
されている溶媒、賦形剤及び添加剤を用いることができ
る。例えば、溶媒や賦形剤としては、水、生理的食塩水
、アルコール、デンプンや乳糖等の炭水化物、ゼラチン
、ポリビニルピロリドン、結晶セルロース、ポリエチレ
ングリコール、ヒドロキシプロピルセルロース、カルボ
キシメチルセルロース、グリセロールエステル、リン酸
カルシウム等；また、添加剤としては、ステアリン酸マ
グネシウム、ステアリン酸カルシウム、無水ケイ酸、そ
の他、タルク等の滑沢剤、防腐剤、滅菌剤、湿潤剤、乳
化剤、着色剤、香料、マスキングフレーバー等から適宜
選択し、これ等を組合わせることにより常套手段に従っ
て製剤可能である。

本発明のレトロウィルス増殖抑制剤は、通常、バイアル
瓶、アンプル、薬包シール等の中で密封された状態で、
固形の乾燥、シロップ状、又は液状の形態で提供できる
。また、斯かる抑制剤は、各製剤に添付されている用法
・用量等の効能書の記載に従い、服用、皮下注射等にて
使用する。

実施例 以下、本発明の具体例につき実験例及び実施例を挙げて
説明する。但し、本発明は、以下の実験例及び実施例に
のみ限定されるものではない。

実験例１ 細胞培養培地の調製二市販の細胞培養用液体培地、ＲＰ
ＭＩ−１６４０（英国フロー社製）に、最終濃度がＩＯ
Ｖ／Ｖ％になるようウシ胎児血清（英国フロー社製）を
添加混合し調製した。該調製物を増殖培地並びに維持培
地として使用した。これを、以下「培地」という。また
、培地のｐＨ調製は、７．　５Ｗ／Ｖ％炭酸水素ナトリ
ウム水溶液と炭酸ガスとを適量添加混合して行った。培
地は通常ｐＨ６，８に調整の後、細胞培養に使用した。

実験例２ ＨＩＶシードウィルス液の調製：急性白血病患者の骨髄
に由来のＴ細胞間から株化されたＴＡＬＬ−１細胞株（
Ｎａｔｕｒｅ、第２６７巻、８４３〜８４４ページ、１
９７７年）にＬＡｖを感染サセテ作出したＨＩｖ持続感
染細胞、ＴＡＬＬ−１細胞（ＴＡＬＬ−１／ＬＡＶ）株
（第３４回日本ウィルス学会演説抄録、６７ページ、１
９８６年）を実験例１に記載の培地中で３７°Ｃにて５
日間培養の後、該細胞培養を低速遠心し、その上清をＨ
ＩＶシードウィルス液として使用した。

実験例３ ＨＩＶ液の調製：ＴＡＬＬ−１細胞株を、実験例１記載
の培地を用い、２００　ｍＱ容プラスチック製培養フラ
スコ内で３７℃で、３日間培養後、低速遠心により集め
た細胞数１．５Ｘ１０７個の細胞培養ペレットを、感染
量１０４・５ＴＣＩＤｓ。

／ｍＱのＨＩＶシードウィルス液４０ｍＱに浮遊し、十
分に混合した後、３７℃に設定した炭酸ガス保温器（５
Ｖ／Ｖ％炭酸ガス／空気、湿度９５％）内で４時間静置
して細胞にＨＩＶを吸着させた。吸着完了後、低速遠心
により未吸着のＨＩＶを除去すると共に、細胞を洗浄し
た。次いで、洗浄済みの感染細胞に培地を添加して細胞
を再浮遊させると共に、その体積を４０ｍＱにする。こ
れを２００１ＴＩｉ２容プラスチツク製培養フラスコ内
に移し、上記３７°Ｃ炭酸ガス保温器内で５日間、ＨＩ
Ｖ培養した。

培養終了の後、ＨＩＶ培養物を低速遠心し、その上清を
採取し、ＨＩＶ液として爾後の使用に供した。

（注）ＴＣＩＤ５　ｏ　：５０％組織組織感染世（ｍｅ
ｄｉａｎ　ｔｉｓｓｕｅ　ｃｕｌｔｕｒｅｉｎｆｅｃｔ
ｉｖｅ　ｄｏｓｅ） 実験例４ ＨＩＶ増殖抑制剤の力価検定用の細胞培養：ＡＴＬ患者
末梢血から分離した白血病白血球と、正常ヒト末梢血か
ら分離した正常白血球とを混合培養することにより得ら
れた形質転換体、ＭＴ−４細胞株（前述）を用いた。尚
、この細胞株は、ヘルパーＴ細胞表面の特異的糖蛋白Ｔ
４抗原（市販のモノクローナル抗体ｒＯＫＴ４Ｊで認識
される）を他の細胞株に比べ多量に有することによるＨ
ＩＶ感染に対する高い感受性、細胞表面でのＨＴＬＶ−
Ｉ特異抗原の発現、ＨＩＶ感染によるＣＰＥの出現等が
知られているので、ＨＩＶの研究で汎用されている（前
述）。ＭＴ−４細胞株の培養には実験例１に記載の培地
を用いた。植え込みの際の細胞濃度は３Ｘ１０５細胞／
　ｍＱ　、培養容器には２００戒容プラスチツク製培養
フラスコを使用し、実験例３に記載の３７℃炭酸ガス保
温器内で、５日間培養を行った。得られた細胞培養は、
ＨＩＶ増殖抑制剤の力価検定に供した。

実施例１　レトロウィルス増殖抑制剤の調製塩化ナトリ
ウム８．０ｇ、塩化カリウム０．２ｇ、リン酸−水素ナ
トリウム１．１５ｇ及びリン酸二水素カリウム０．２ｇ
を夫々、秤取し、蒸留水に溶解してＩＱとし、高圧滅菌
してリン酸塩緩衝塩化ナトリウム液（以下ｒＰＢｓＪと
いう）を調製した。次いで、イノシトール六硫酸６カリ
ウム塩〔米国シグマ社製〕を１ｇ秤取し、上記ＰＢＳで
溶解して１０ｍ（２とした後、５０ｍＧ容バイアル瓶に
移し、レトロウィルス増殖抑制剤として使用に供した。

また、イノシトール六リン酸１２ナトリウム塩〔米国シ
グマ社製〕についても上記と同様に、１ｇを秤取の後、
１０ｍＧになるようＰＢＳで溶解し、１００ｍｇ／ｍＱ
Ｐ　Ｂ　Ｓ溶液を調製後、５Ｏｍ（！容バイアル瓶に移
し、レトロウィルス増殖抑制剤として使用した。

実施例２　レトロウィルス増殖抑制剤の力価検定（イ）
ＨＩＶ感染細胞浮遊液の調製：実験例４で得たＭＴ−４
細胞培養を用いて、細胞濃度が４×１０５細胞／−の細
胞浮遊液５ｍ（２を、５０ｎＢ２容の遠心管内で調製し
た。これに、実験例３で得たウィルス感染量が４　Ｘ　
１０３ＴＣＩ　Ｄ５０　／ｍＱのＨＩＶウィルス液０．
５ｍＱを接種し、Ｍｏｌが約０．００１ＴＣＩＤｓ　ｏ
　／細胞になるようＭＴ−４細胞をＨＩＶに感染させた
。接種後、十分に混合し、以降の手順と条件は実験例３
の記載と同様にして、ＨＩＶ吸着を行った。但し、吸着
時間は１時間とした。次いで、４４　ｍＱの培地を添加
混合し、低速遠心により未吸着ＨＩＶを除去すると共に
、感染細胞を洗浄した。遠心管底の感染細胞に実験例１
に記載の培地を添加して細胞を浮遊させ、全体積を１０
ｍＱにしＨＩＶ感染細胞浮遊液とじて使用した。また同
時に、細胞濃度が２×１０５細胞／ｍＱの細胞浮遊液１
０ｒｌｌ１２を調製し、ＨＩＶを感染させずに、比較対
照として使用した。

（ロ）レトロウィルス増殖抑制剤の稀釈調製物：実施例
１で得た各レトロウィルス増殖抑制剤を実験例１に記載
の培地で稀釈し、種々の濃度になるよう調整した。イノ
シトール六硫酸塩１００　ｍｇ／１１１０ＰＢＳ溶液に
ついては、先ず、上記培地で５倍稀釈し、濃度２０　ｍ
ｇ／　ｍＱの溶液４購を調製した。

更に、これを培地で２倍階段稀釈して、培地１戒当りの
濃度μｇが夫々２００００．１００００．５０００．２
５００．１２５０及び６２５のイノシトール六硫酸塩溶
液を各濃度２ＩＴＩＩ２ずつ調製した。

上記と同様にして、イノシトール六すン酸塩１００ｍｇ
／ｍＱＰＢｓ溶液についてもまた、上記培地で２５倍稀
釈した後、２倍階段稀釈し、培地１脱当りの濃度μｇが
夫々４０００．２０００．１０００．５００．２５０及
び１２５のイノシトール六リン酸塩溶液を各濃度２ｍｆ
２ずつ調製した。これ等の各稀釈調製物は、レトロウィ
ルス増殖抑制剤の有効量測定のため、以下の力価検定に
供した。

（ハ）検体プレートの調製：縦列８穴×横列１２穴から
なる９６穴・平底のプラスチック製マイクロカルチャー
プレート（米国コーニング社製）（以下「プレート」と
いう）を用いて行った。培養の間にプレー）・内の乾燥
を防ぎ湿潤を保つため、先ず、縦笛１．６．７及び１２
列の各人、並びに横笛１及び８列の各人に、マルチチャ
ンネルピペット（英国フロー社製）によりＰＢＳを２０
０μＱずつ分注し、これ等の穴は、以下の操作に使用し
なかった。次いで、プレートの横第２列４穴、２か所の
各人に夫々、実験例１で調製した培地を１００μＱずつ
、上記ピペットを用いて分注した。

横第３列４穴、２か所の各人には上記（ロ）で得た稀釈
調製物１検体を上記と同様に１００μＱずつ分注した。

以下同じ要領により、各稀釈調製物につき横列４穴、２
か所を割り当て、各式に同一検体を１００μＱずつ分注
した。次に、縦第２〜５列の各式に夫々、上記（イ）で
得た比較対照用の細胞浮遊液を１００μＱずつ、上記ピ
ペットを用いて分注した。また縦第８〜１１列の各式に
は、」−記（イ）で得たＨＩＶ感染細胞浮遊液を上記と
同様に、１００μＱずつ分注した。次いで、該プレート
を振盪機にかけ、上記両者を十分に混和させた後、検体
プレートとした。斯かる検体プレートは、実験例３の記
載と同様に、３７℃炭酸ガス保温器内で５日間培養した
。尚、上記検体プレートは、同一のものを２枚調製し、
うち１枚はパイロット用として、培養中の経時変化を観
察するために使用した。また、残り１枚は、生細胞数算
定及び間接蛍光抗体法の検体として使用した。

（ニ）生細胞数算定二上記（ハ）で調製した検定プレー
ト内では、ＭＴ−４細胞の増殖、及びＨＩＶの急速な増
殖と感染細胞の広がりが同時に進行した。そして、感染
細胞では、ＨＩＶの増殖に伴い、細胞の膨化、ジンシチ
ウム形成、多核巨細胞形成、肥満化、活力低下、死滅等
のＣＰＥが見られる。上記ＣＰＥのうち、ＨＩＶ感染に
よる細胞の死滅度を指標として用い、力価検定を行った
。

即ち、ＨＩＶ感染下に於ける生細胞の算定に基づき、レ
トロウィルス増殖抑制剤の効果と有効量を定量する。生
細胞数算定は、実験例１に記載のＰＢＳに溶解し調製し
た０、２Ｗハ％トリパンブルー染色液を用い°Ｃ次の如
くに行った。小試験管内に分注したトリパンブルー染色
液０．５噌に、上記（ハ）に記載の培養完了後の検体プ
レートの穴から採取した細胞培養浮遊液０．５ｍｆ２を
添加混合し、細胞を染色した。死細胞はトリパンブルー
染色液で青果されるが、生細胞は染色されないので、こ
れを判定基準として、検鏡により血球計算板」二で生細
胞数を計数し算定した。算定の結果を第１表及び第２表
に示した。イノシトール六硫酸塩では、培養液中の濃度
２５００μｇ　／　ｍＱにて、細胞の生残率が約１００
％であり、ＨＩＶの増殖が、はぼ完全に抑制された（第
１表）。イノシトール六リン酸塩では培養液中の濃度２
０００μｇ／ｍＱにて、ＨＩＶの増殖が約９０％抑制さ
れた（第２表）。

第　　１　　表 （イノシトール六硫酸塩の抗ＨＩＶ作用）※　１００　
Ｘ　（１）／（２）に基づき算出；測定値のバラツキに
より１００を超える場合は、（１００）として表Ｍ己第
　　２　　表 （イノシトール六リン酸塩の抗ＨＩＶ作用）茶　１００
　Ｘ　（１）／（２）に基づき算出。

（ホ）間接蛍光抗体法によるＨＩＶ抗原の検出：ＨＩＶ
感染細胞内で産生されるＨＩＶ抗原は、−次抗体として
抗ＨＩＶ抗体陽性ヒト血清、また、二次抗体としてＦＩ
ＴＣ（フルオレセイン　イソチオシアネート）標識の抗
ヒトＩｇＧ（米国ダコ社製）を夫々用いる間接蛍光抗体
法により検出した。これによれば、ＨＩＶが増殖中の感
染細胞は、間接蛍光抗体法によりＨＩＶ抗原陽性として
検出される。上記の培養完了後の検体プレートの穴から
採取した細胞培養浮澹液１．０ｍ１２を小試験管に採取
し、実験例１で得たＰＢＳ２ｍＱで１回洗浄後、ＰＢＳ
ＩＯμＱに再浮遊させた。次いで、間接蛍光抗体法用の
１２穴スライドグラスの１穴に、上記の再浮遊細胞液の
全量を滴下した。各検体の細胞についても同様にして、
スライドグラスに移し、検体スライドを作成した。検体
スライドは、風乾燥後、冷アセトンで１０分間固定した
。尚、この間にＨＩＶは、完全に不活化された。次いで
、検体スライドの各式の固定化細胞の上に、ＰＢＳで１
０倍希釈した一次抗体である抗ＨＩＶ抗体陽性ヒト血清
１０μＱを載せ、湿潤箱中で３７℃、３０分間反応させ
た。反応終了の後、検体スライドの細胞をＰＢＳで３回
洗浄後、二次抗体であるＦＩＴＣ標識の抗ヒトＩｇＧ（
４染色単位）１０μＱを各式の固定化細胞の上に載せ、
上記と同様に、反応させた後、洗浄した。斯かるスライ
ドを、緩衝グリセリン液（０，５Ｍ炭酸ナトリウム−炭
酸水素ナトリウム緩衝液（ｐＨ９，５）を１容と無蛍光
特級グリセリン９容とを混合して調製）を用いてカバー
グラスで封入の後、蛍光顕微鏡（日本工学工業社製）に
より検鏡した。ＨＩＶ抗原陽性細胞は、蛍光を発するの
で、これを指標とし、陽性細胞数及び陰性細胞数を夫々
計数し、ＨＩＶ抗原陽性率＝１００Ｘ陽性細胞数／（陽
性細胞数＋陰性細胞数）に基づき、ＨＩＶ抗原陽性率を
算出した。その結果を第３表及び第４表に示した。

イノシトール六硫酸塩では、培養液中の濃度２５００μ
ｇ　／　ｍＱにて、ＨＩＶ抗原陽性率が０％であり、Ｈ
ＩＶの増殖がほぼ完全に抑制された（第３表）。イノシ
トール六リン酸塩では培養液中の濃度２０００μｇ／ｍ
Ｑにて、ＨＩＶの増殖が約９０％抑制された（第４表）
。

第　　　３　　　表 ＩＨ８：イノシトール六硫酸塩 第　　　４　　　表 ＩＨＰ：イノシトール六リン酸塩 実施例３　混合製剤の力価検定（Ｉ） 培地中でのイノシトール六硫酸塩の濃度を８００μｇ／
ｍＱに固定し、これにイノシトール六リン酸塩の濃度を
種々変えて添加混合して得た混合調製物について力価検
定を行った。その手順と操作は、実施例２に記載と同一
の術式により行った。

その結果を第５表に示した。イノシトール六硫酸塩とイ
ノシトール六リン酸塩との混合は、抗ＨＩＶ効果での相
乗作用をもたらした。

第５表 （１）培地中での最終濃度８００μｇ／ｍＱのイノシト
ール六硫酸塩（ＩＨ３）に添加混合したイノシトール六
リン酸塩（Ｉ）ＩＰ）の各最終濃度。※薬剤無添加の比
較対照。※米穀終濃度８００μｇ／脱のＩＨ８を含有。

（２）第１表に同じ。

実施例４　混合製剤の力価試験（ＩＩ）培地中のイノシ
トール六リン酸塩の濃度を２５０μｇ／ｙｎＱに固定し
、これにグリチルリチン（和光純薬■製）の濃度を種々
変えて添加混合して得た混合調製物について力価検定を
行った。尚、グリチルリチンは、グリチルリチン酸の配
糖体であり、せ草根由来の生薬として古くから知られて
おり、胃潰瘍や肝炎等の治療に汎用され、現在、抗レト
ロウィルス剤としても試用されている。先ず、実施例１
の記載に従って、ＰＢＳにグリチルリチンを最終濃度１
０００μｇ　／　ｍＱになるよう溶解し、以降の力価検
定の手順と操作は、実施例２に記載と同一の術式により
行った。その結果を第６表に示した。イノシトール六リ
ン酸塩とグリチルリチンとの混合は、抗ＨＩｖ効果での
相乗的作用をもたらした。

第　　６　　表 （１）培地中での最終濃度２５０μｇ　／　ｍＱのイノ
シトール六リン酸塩（ＩＨＰ）に添加混合したグリチル
リチン（Ｇ　Ｌ　Ｒ）の各最終濃度。

※薬剤無添加の比較対照。※※最終濃度２５０μｇ／ｍ
ＱのＩＨＰを含有。

（２）第１表に同じ。

実施例５　混合製剤の力価試験（Ｉ［）　　　　　　　
　　ｅ培地中のイノシトール六硫酸塩の濃度を８００　
−Ｉｇ　／　ｍＱに固定し、これにグリチルリチン（和
光　　省線薬味製）の濃度を種々変えて添加混合して得
た　　十混合調製物について力価検定を行った。力価検
定　　７の手順と操作は、実施例２に記載と同一の術式
に　　イより行った。その結果、上記第６表に示したイ
ノ　　つシトール六リン酸塩とグリチルリチンとの混合
による効果と同様に、イノシトール六硫酸塩とグリ　　
−チルリチンとの混合に於いても、実施例４と同様　　
１に相乗的作用が見られた。　　　　　　　　　　　　
　（実施例６　製剤（注射剤） イノシトール六硫酸６カリウム塩５０ｇ、塩化　　〕ナ
ナトリム４４ｇ塩化カリウム０．２ｇ、リン酸　　；−
水素ナトリウム１．１５ｇ、リン酸二水素カリウム０．
２ｇ及び硫酸第−鉄七水塩５ｍｇを８００　　「１ＴＩ
Ｑになるよう蒸留水に溶解した。塩化カリウム　　　ｆ
Ｏ，Ｉｇ及び塩化マグネシウム六水塩０６１ｇを　　１
（々１００−になるよう蒸留水に溶解した。次い５各水
溶液を混合してＩＱとし、濾過滅菌した蛇、１０ｍ１２
容バイアル瓶に５ｍ（ＩＩずつ分注し、ゴム全とアルミ
キャップで密封し注射剤を得た。このｔ射剤１　ｍＱは
、上記イノシトール六硫酸塩５０ｍｇ１含有する。

１施例７　製剤（錠剤） イノシトール六硫酸６カリウム塩２０ｇ１デングン３８
ｇ１乳糖４０ｇ及びステアリン酸カルシンム２ｇを十分
に混合した後、これを打錠機にかす１錠５００ｍｇの錠
剤を成型した。得られた錠剤１錠は上記イノシトール六
硫酸塩１００ｍｇを含有ナーる。

（施例８　製剤（錠剤） イノシトール六リン酸２マグネシウム・４カリジム塩（
米国シグマ社製）１０ｇ、乾燥ビール酵ｕ７０　ｇ、硫
酸第−鉄七水塩１ｇ及びデンプン１９ｇを十分に混合し
た後、常法により打錠機にて重さ１ｇの錠剤を成型した
。この錠剤１錠は、上記イノシトール六リン酸塩を１０
０ｍｇ含有する。

実施例９　製剤（顆粒剤） イノシトール六硫酸６カリウム塩８ｇ、イノシトール六
リン酸１２ナトリウム塩２．５ｇ、硫酸第−鉄七水塩１
ｇ、ブドウ糖３９ｇ、結晶セルロース４０ｇ及びステア
リン酸マグネシウム１０ｇを十分に混合した後、常法に
より造粒並びに乾燥することにより顆粒剤を得た。この
顆粒剤１ｇは、上記イノシトール六硫酸塩８０ｍｇ及び
イノシトール六リン酸塩２５ｍｇを夫々含有する。

実施例１０　いムスターによる抗レトロウイルス増殖抑
制剤の効果判定試験 トリ内押ウィルス（ラウスザルコーマウィルスシュミッ
ト・ルピン株（以下ｒＳＲ−Ｒ８ＶＪという）　　（Ｖ
ｉｒｏｌｏｇｙ、第２３巻、３１３〜３２１ページ、１
９６４年）をＳ　Ｐ　Ｆ　（ｓｐｅｃｉｆｉｅｄ−ｐａ
ｔｈｏｇｅｎ−ｆｒｅｅ　）ニワトリ胎児繊維芽細胞を
宿主に用いて培養し、その培養上清を５Ｒ−Ｒ８Ｖ液と
して使用した。５Ｒ−Ｒ８Ｖ液Ｆは、そのウィルス感染
量が１０７フオーカス形成単位／ｍ１２になるよう調整
して用いた。一方、４週令のゴールチンハムスター４０
匹（平均体重５２ｇ）を調達し、１０匹を１群として次
の４群に分けた。第１群（無処理対照群）は、５Ｒ−Ｒ
３Ｖを接種せず、薬剤投与をしない無処理の正常ハムス
ターからなる。第２群（比較対照群）の各ハムスターに
は、各背中に夫々、上記５Ｒ−Ｒ８Ｖ液１　ｍＱを皮下
接種するが、薬剤投与をしない。第３群（薬物皮下接種
ｎ＞の各ハムスターには、各背中に夫々、上記５Ｒ−Ｒ
８Ｖ液１戒を皮下接種した後、実施例６で得た注射剤の
ＰＢＳによる２５倍希釈液０．５−を観察期間中毎日、
注射器にて皮下接種する。第４群（薬物経口投与群）の
各ハムスターには、各背中に夫々、上記５Ｒ−Ｒ８Ｖ液
１　ｍＱを皮下接種した後、実施例６で得た注射剤の蒸
留水による２５倍希釈液０．５＋ｎＱを観察期間中毎日
、カテーテルにて経口投与する。ハムスターは、各群毎
に別の飼育ケージに入れ、飼育観察した。観察期間中毎
日、各ハムスターの体重測定及び触診による接種部位に
於ける内挿形成の有無の観察等を行った。そして、ウィ
ルス接種後３０日日に、各ハムスターの血清中の５Ｒ−
Ｒ８Ｖのｇｓ抗体を補体結合反応により測定するため、
採血すると共に、剖検により各ハムスターの接種部位に
於ける５Ｒ−Ｒ８Ｖによる内挿形成の有無を最終判定し
た。尚、５Ｒ−Ｒ８Ｖによる内挿形成ハムスターの血中
では、ｇｓ抗原（Ｒ８Ｖのヌクレオカプシド由来の群特
異的な共通抗原）に対する抗体の上昇することが知られ
ている。また、補体結合反応は、常法に従って、市販の
９６穴・Ｖ底マイクロプレート（三光純薬味社製）を用
いて行った。

即ち、２倍階段希釈した各ハムスター血清（５６°Ｃ１
３０分加熱非働化済み）、上記５Ｒ−Ｒ８Ｖ培養細胞の
凍結融解上清から精製した抗原液及びモルモット補体を
夫々、２５μＱずつ、この順序でプレート穴に滴下し混
合の後、４℃に一昼夜静置し反応させた。次いで、更に
、反応プレートの各式にヒツジ感作赤血球２５μＱを添
加混合し、３７℃で６０分間保温後、５０％溶血を呈す
るハムスター血清の希釈倍数を以て、補体結合反応の値
とした。その結果を第７表に示した。第２群（比較対照
群）では全ハムスターに内挿形成、ｇｓ抗体の上昇及び
体重減少が見られた。これに対し、薬剤投与群（第３及
び４群）では共に、内挿形成はなく、ｇｓ抗体も検出さ
れなかった。また、薬剤投与昨冬ハムスターの体重増加
に関し、第１群（無処理対照群）との間に有意差が認め
られなかった（を検定による；危険率α＝０．０５）第
　　　７　　　表 ※分母は各群のハムスター総数、 分子は内押形成が見られたハムスターの数。

発明の作用と効果 （１）本発明の薬物は極めて微量で、レトロウィルスの
増殖を十分に抑制するので、レトロウィルス感染症の進
行と発症の阻止、治療及び予防を目的とする薬物療法に
於いて、優れて有効な手段として使用に供することがで
きる。

（２）公知の硫酸多糖体、インターフェロン、インター
ロイキン等の高分子物質に比べ、本発明の糖類の誘導体
は極めて低分子であるため、それ自身、抗原性を発現せ
ず、アレルギーを誘発しないので、長期間に亘る薬物療
法下での連用に十分に耐える。

（３）更に、本発明の薬物は、低分子であるため、高分
子薬物に比べ次の利点を有する。即ち、生体内での薬物
の吸収が優れて迅速、かつ、脳を含む各臓器・組織への
分布が極めて広く円滑であり、また、代謝系酵素により
分解を受ける確率が低く、熱に対して安定であるので、
変性若しくは化学構造上の変化を来たすことなく生体内
で貯留する時間が長い。換言すれば、薬効の出現が迅速
で、しかも、その範囲が広く全身に及び、かつ、薬効の
持続時間が長い。

（４）本発明の薬物に関する有毒性乃至は為害作用につ
いての報告は全く見られない。また、該薬物又はそのア
ナログは、動植物界に広く分布し、食品中にも多量に含
有されているので、日常茶飯事に、摂食されている。従
って、本発明の薬物は、乳幼児、虚弱体質、重症患者へ
の使用並びに長期連用に於いても極めて安全である。

（５）本発明の薬物は、それ自身安全であるため、混合
、併用等による副作用の増強や薬効の低減を考慮するこ
となく、これ等のうち２種以上を混合若しくは調合する
ことにより、薬効の相乗効′果を得ることができる。ま
た、公知薬物との配合も可能であり、上記と同様の相乗
的作用を得ることができる。

（６）また、上記（３）に記載の観点から、汎用されて
いる栄養剤やビタミン剤と同様に、家庭用一般医薬品と
して、エイズ、ＡＴＬ等のレトロウィルス感染症予防の
ため、日常生活での服薬に適している。

（７）以上から明確な通り、本発明の薬物は、従来技術
に比べ、優れて安全性と有効性とを兼備したレトロウィ
ルス増殖抑制剤で有り、医療用並びに一般用医薬品とし
て、広く使用に供することができるものである。

（以　上）

Claims (3)

【特許請求の範囲】
1. （１）単糖類又は二糖類の誘導体を有効成分とすること
   を特徴とするレトロウイルス増殖抑制剤。
2. （２）単糖類又は二糖類が、単糖又は二糖或いはその糖
   アルコール、デオキシ糖、アミノ糖、ウロン酸、糖酸、
   硫黄糖又はシクリトールである特許請求の範囲第１項に
   記載のレトロウイルス増殖抑制剤。
3. （３）単糖類又は二糖類の誘導体が、該糖類の無機酸エ
   ステル、有機酸エステル又はエーテルである特許請求の
   範囲第１項又は第２項に記載のレトロウイルス増殖抑制
   剤。