JPH01157985A - バレロラクトン化合物およびその製法 - Google Patents

Abstract

(57)【要約】本公報は電子出願前の出願データであるた
め要約のデータは記録されません。

Description

【発明の詳細な説明】 〔産業上の利用分野〕 本発明は新規な駆虫化合物、それらの製法、それらを含
む薬剤組成物、並びにヒトまたは動物の医療面でのそれ
らの使用に関する。

〔従来の技術〕

ミルベマイシンおよびアベルメクチンは微生物の培養に
よって製造されたマクロライド系抗生物質の一群に含ま
れ、例えばＧＢ−Ａ　（英国特許）−１３９０３３６号
明細書、Ｊ、Ａｎｔｉｂｉｏｔｉｃｓ　２９　（３）　
。

７６−１４ないし７６−１６および２９（６）、７６−
３５ないし７６−４２、ＧＢ−Ａ　−２１７０４９９号
明細書、ＥＰ−Ａ（欧州特許）−００７３６６０号明Ｉ
￥ｉＢ書、ＥＰ−Ａ　−０２０４４２１号明細書に開示
されている。それらは駆虫作用を有する。駆虫活性ミル
ベマイシンおよびアベルメクチンはさらにＧＢ±Ａ−２
１７６１８０。

ＥＰ−Ａ−０２１２８６７、ＥＰ−Ａ−０２３７３３９
、ＥＰ−Ａ−０２４１１４６、ＥＰ−Ａ−０２１４７３
１、ＥＰ−Ａ−０１９４１２５。

ＥＰ−Ａ−０１７０，００６、およびＵＳ−Ａ　（米国
特許）−４２８５９６３号明細書に開示されている。

上記文献に記載された化合物には式（Ａ）の化合物が含
まれる： ＲＣ Ｂ、＆ 〔式中、Ｒａ　はメトキシまたはヒドロキシであり、Ｒ
ｂ　は水素であり、ＲＣＨ水素、ペンタノイルオキシ、
ヘプタノイルオキシ、または２−メチルヘキサノイルオ
キシであり、セしてＲｄはメチルまたはエチルである、
但しＲＣが水素であるとき、Ｒａはメトキシである；ま
たはＲａはメトキシまたはヒドロキシであり、Ｒｂ　は
水素であり、Ｒｃは２−メチルブタノイルオキシ、２．
４−ジメチルベント−２−エノイルオキシ、または２．
４−ジメチルペンタノイルオキシであり、そしてＲｄは
メチル寸たはエチルである、但しＲｄ　がエチルである
トキ、Ｒａはヒドロキシであり且つＲＣは２．４−ジメ
チルペンタノイルオキシである；もしくはＲａ　はメト
キシまたはヒドロキシであり、Ｒｂ　は次式の基： （４’−（α−Ｌ−オレアンドロシル）−α−り一オレ
アンドロシルオキシ）であり、Ｒｃ　はヒドロキシであ
り、そしてＲｄは１−メチルプロピルである。〕 ＥＰ−Ａ−０２５４５８３号明細書（ＵＳＳＮ０７６２
７４号明細書）は式（Ｂ）の化合物を開示している：Ｒ
ｆ 〔式中、Ｒｅは水素虜たはＥ２−メチル２−ブテノイル
オキシであり、そしてＲｆ　はメトキシまたはヒドロキ
シである。但しＲｅ３　がＥ２−メチル２−ブテノイル
オキシであるとき、Ｒｆ　はメトキシである。〕 式（Ｂ）の化合物を産生する微生物はまた式（Ｃ）の化
合物を産生ずることが見出された：Ｈ 〔式中、ＲｇおよびＨｈは下記の表に示す通りである。

〕 ＥＰ−Ａ−０２８８２０５号明細！　（ＵＳＳＮ　３８
３５８１号明細省）は式ＣＤ）の化合物を開示している
：Ｊ 〔式中、Ｒｉ　はヒドロキシまたはメトキシであり。

Ｒｊ　およびＨｋは同一であるが又は異なり、それぞれ
必要に応じて保護されたヒドロキシ、アルコキシ、アシ
ルオキシ、スルホニルオキシ、オキソおよび場合により
０−置換されたオキシイミノから選ばれる。〕 式（Ａ）〜（Ｄ）の化合物の絶対配置は次の通りである
と考えられる： 〔発明の構成〕 今や、Ｃ−２２位にヒドロキシ置換基を有する出発物質
から新規化合物を爬造することが可能であり、これらの
化合物は駆虫活性化合物として有用であることが判明し
た。

本発明によれば、式（Ｉ）の化合物が提供される：〔式
中、Ｒ１は水素または必要に応じて保護されたヒドロキ
シであり；Ｒ２はアルコキシ、必要に応じて保護された
ヒドロキシ、オキソまたは場合により〇−置換されたオ
キシイミノであり；Ｒ３は水素、必要に応じて保護され
たヒドロキシ、ま１ｔＪＡ４’−（α−Ｌ−オレアンド
ロシル）−α−Ｌ−オレアンドロシルオキシもしくはα
−Ｌ−オレアンドロシルオキシ（ここでその末端ヒドロ
ギシ基は場合により保護される）であり；Ｒ４とＲ５の
一方は水素であって、他方はメチルであり：Ｒ６とＲ７
の一方は水素であって、他方はメチルである；但し％（
ａ）Ｒ１が必要に応じて保護されたヒドロキシであると
き、Ｒ３は水素であり、そして（ｂ）Ｒ２がメトキシま
たは必要に応じて保護されたヒドロキシでないとき　Ｂ
ｌ　　およびＲ３は両方とも水素である。〕 適当なヒドロキシ保Ｕφ基ＶｉＴＢＤＭＳ　（ｔ−ブチ
ルジメチルシリル）およびアシルである。別の適当な保
護基は例えば ”ｐｒｏｔｅｃｔｉｖｅ　Ｇｒｏｕｐｓ　ｉｎ　Ｏｒｇ
ａｎｉｃ　５ｙｎｔｈｅｓｉｓ’Ｔｈｅｏｄｏｒａ　Ｗ
、　Ｇｒｅｅｎｅ、Ｗｉｌｅｙ−Ｉｎｔｅｒｓｃｉｅｎ
ｃｅ　１９８１Ｃｈ　２．１０−８６ に記載されている。

オキシムのための適当な置換埜はＥＰ−Ａ−０２８８２
０５に記載される通りである。

本発明化合物またはそれらの混合物は適当には実質的に
純粋な形で、例えば少なくとも５０％の純度、適当には
少なくとも６０％の純度、有利には少なくとも７５％の
純度、好ましくは少なくとも８５チの純度、より好まし
くは少なくとも９５％の純度、とりわけ少なくとし９８
％の純度（すべての百分率は重ｆ／重債として計算）で
提供される。不純物の混じった、すなわち純度の低い本
発明化合物は、例えば、より純度の高い同一化合物を夷
造するために、あるいは医薬用途に適する関連化合物（
例えば対応する誘導体）を製造するために使用できる。

本発明化合物は、例えばトリコストロンギルス・コルブ
リホルミス（Ｔｒｉｃｈｏｓｔｒｏｎｇ）’ｌｕｓ　ｃ
ｏｌｕｂｒｉ−ｆｏｒｍｉｓ　）のような線虫に対して
、殺寄生虫作用を有し、ヒトおよび家畜を含めた補元類
のごとき動物の情虫病を治療するのに有用である。

従って、本発明はまたヒトや動物の治療、特に内部およ
び外部寄生生物インフエステーシヨンの治療、とりわけ
家畜の喘虫病の治療、に使用するための本発明化合物を
提供する。

ａＮ虫病１なる用語は円虫、回虫、鉤虫、肺虫。

糸状虫（フイラリア）および鞭虫のような寄生虫の侵入
（インフエステーシヨン）により起こるヒトおよび動物
の病気を意味する。本発明化合物はまた土の中に存在す
る線虫や植物に寄生する線虫にも使用できる。

さらに、本発明化合物は節足動物に対しても有効である
。節足動物門は昆虫綱（例えばサシバエ、シラミ、ナン
キンムシ、甲虫、ノミ）およびクモ形綱（例えばマダニ
、ダニ）を含む。

こうして、本発明の広範な面は、本発明組成物捷たはそ
の誘導体を節足動物、線虫もしくはそれらの環境へ適用
することから成る、節足動物または線虫の侵入の根絶方
法を提供する。

従って、本発明は、エーロゾル削のような、本発明化合
物またはその誘導体を適当なキャリアーもしくは賦形剤
と共に含有してなる殺虫剤組成物を提供する。

本発明はまた、本発明化合物または薬学的に許容される
その誘導体を％製剤上許容されるキャリアーまたけ賦形
剤と共に含有してなるヒトまたは動物用の薬剤組成物を
提供する。

本発明はさらに、無毒かつ有効量の本発明化合物または
その薬学的に許容される誘導体、もしくは本発明組成物
を、患者に投与することから成る、動物（特にヒトおよ
び家畜）の内部および外部寄生虫インフエステーシヨン
（とりわけ喘虫病）の治療または予防方法を提供する。

本発明組成物は、ヒトまたは動物の医療面で使用するた
めに有利な方法で投与すべく、他の駆虫薬から類推して
処方される。

適当な処方物において、その薬物は経口的に（ペースト
、飲薬、巨丸削、カプセルまたは錠剤として）、非経口
的に、経皮的に、食品添加物として（例えば顆粒、ペレ
ットまたは粉末）動物に投与されるか、あるいはエーロ
ゾルスプレー配合物として調製される。

本発明化合物は互いとの混合物および／または他の、駆
虫剤、殺虫剤、ダニ駆除剤または薬理学的に活性な物質
との混合物として処方される。

適当には、本発明組成物は１回あたｌ：１０．０１〜１
ｏｏｍ９／ｋｌ動物の体＊）、好ｔＬ＜ｉｄｌ、０〜１
００ｍ９／ｋｇの活性成分を提供するのに十分な物質か
ら成る。本発明組成物は適当には、投与方法に応じて、
０．１重量係から、好ましくは１．０賃借チから一重ｔ
チまでの本発明化合物（組成物の全重量基準）を含有す
る。

いくつかの場合において、感染した又は感染した可能性
のあるヒトまたは動物への本発明化合物の投薬を、駆虫
剤に対して用いられる慣用の投薬療法に従って繰り返す
ことは有利であることが理解されるであろう。

本発明の別の面は、式（ｆｌ）の化合物：〔式中％Ｒ１
％Ｒ７は先に定義した通りであり、Ｒ１４は水素または
低級アルキル（特にＣ１−３アルキル）である〕ｆｔ酸
触媒により環化することから成る、式（Ｉ）の化合物の
製法を提供する。

式（Ｉ）の化合物のＣ２１の立体配置は熱力学的コント
ロールを受けるらしいことが認められ（例えばＰ、Ｄｅ
ｓｌｏｎｇｃｈａｍｐｓら、Ｃａｎａｄｉａｎ　Ｊ、Ｃ
ｈｅｍ。

（Ｉ９８１）　５９　、１１０５　　に論じられている
）、すなわちＣ２１の立体配置が自然界に存在する式（
Ａ）。

（Ｂ）および（Ｃ）の化合物のそれと同じであるエピマ
ーは一般に熱力学的に有利であると考えられる。

式（Ｉ）の化合物は、式（ＩＩＩ）の化合物：〔式中Ｒ
１〜Ｒｓは先に定義した通りである〕から、下記の反応
式１１７Ｃ示すσ路を経て得られる：（＋　）　ＭＣＥ
Ｃ、ＣＲ’Ｒ５，ＣＲ’Ｒ７０Ｐ　（式中、ＭＨＬｌｔ
たはＢｒＭｇのような金属化剤であり、Ｐは苦（テトラ
ヒドロピラニル）のような酸に不安定な保穫基である〕 （Ｉｆ　）　Ｈｚ／　！Ｊンドラー触媒または他の適当
な触媒（Ｉ＋ｌ）　Ｒｔ４ｏｕ／Ｈ＋ 式（Ｉ）／の化合物は新規であり、本発明の別の面を構
成する。式（Ｉ）の化合物はＣ２２にヒドロキシ置換基
をもつ前駆物質（例えば式（Ａ）　、　（Ｂ）　。

（Ｃ）および（Ｄ）の化合物）の２１−２２炭素−炭素
結合を開裂することにより製造できる。

従って、式（［）の化合物の製法は、式（ＩＶ）の化合
物を２１−２２炭素−炭素結合の開裂て付すことから成
る： 〔式中、Ｒ’　、　Ｒ”訃よびＲ３は式（Ｉ）に関して
先に定義した通りであり、Ｒ８は水素または必要に応じ
て保護されたヒドロキシであり、セしてＲ９はメチル、
エチル、１−メチルプロピルまたは（Ｚ）ブドー２−エ
ン−２−イルである：但しくａ）Ｒ１が必要に応じて保
護されたヒドロキシである場合、Ｒ３は水素であり　Ｒ
１１は水素であり、そしてＲ９は（Ｚ）ブドー２−エン
−２−イルである、（ｂ）Ｒ”が水素でない場合、そし
てその場合のみ　Ｒ９は１−メチルプロピルである、（
ｃ）Ｒ”　　が水素でない場合　Ｒ８は必要に応じて保
護されたヒドロキシである、（ｄ）Ｒ’　カ（Ｚ）プ）
−２−エン−２−イルであり且つＲｅ　が必要に応じて
保護されたヒドロキシである場合、Ｒ”　　は水素であ
り　Ｒ２は必要に応じて保護されたヒドロキシである、
そして（ｅ）Ｒ２がメトキシオたけ必要に応じて保護さ
れたヒドロキシでない場合ｓ　Ｒ’　＊　Ｒ’およびＲ
８は水素であり且つＲ９ば（Ｚ）ブドー２−エン−２−
イルである。〕 Ｒ１およびＲ８が保護ヒドロキシであるとき、Ｒ１およ
びＲ・のための特定の保護等は上８と（Ａ）〜（Ｃ）の
自然界て存在する化合物中に見られるものである。

当業者はアシル基が、例えば塩基加水分解により、容易
に除去できることを認めるであろう。こうして　Ｒ１が
ヒドロキシまたは保護ヒドロキシ（その保護基はアンル
基であっても、なくてもよい）であり、Ｒ２がメトキシ
または必要に応じて保護されたヒドロキシであり、そし
てＲ３が水素である式（＋）の化合物は、Ｒ１が自然界
に存在するアシルオキシ基である式（Ｂ）および（Ｃ）
の対応化合物から容易に誘導可能である。

サラに、４’−（α−Ｌ−オレアンドロシル）−α−Ｌ
−オレアンドロシルは、例えば酸加水分解により、容易
に除去されるか、又は部分的に除去されることが理解さ
れるであろう。従って　Ｒ３が場合により保護されたヒ
ドロキシまたはα−Ｌ−オレアンドロシルオキシ（その
末端ヒドロキシ基は必要に応じて保護される）である式
（Ｉ）の化合物ハ、Ｒｂ　が４−（α−Ｌ−オレアンド
ロシル）−α−Ｌ−オレアンドロシルオキシである式（
Ａ）の化合物から容易に誘導することができる。

好適な本発明方法において、Ｒ１は水素であり、Ｒ２は
メトキシま念はヒドロキシであり　Ｒ３およびＲ８は水
素であり、そしてＲｅ　　は（Ｚ）ブドー２−エン−２
−イルである。

２１−２２炭素−炭素結合の開裂方法は、Ｃ２２ヒドロ
キシ基をケトンに酸化し、そのケトンを対応するオキシ
ムに変換し、そしてそのオキシムをベックマン条件下で
転位させることを包含する。ベックマン転位は”Ｔｈｅ
　ＣｈｅｍｉＳｔｒ３’　ｏｆ　ｔｈｅ　ｃａｒｂｏｎ
−ｎｉｔｒｏｇｅｎ　ｄｏｕｂｌｅ　ｂｏｎｄ”Ｅｄ、
５ａｕｌ　Ｐａｔａｉ　Ｗｉｌｅｙ−Ｉｎｔｅｒｓｃｉ
ｅｎｃｅ　１９７０　＊　４０８　に詳述されている。

酸化は一般にＤＭＳＯ／塩化オキサリル（Ｓｗｅｒｎ酸
化）、またはクロム含有酸化剤（例えばクロロクロム酸
ピリジニウム：　ＰＣＣ）　’ｅ用いて、必要に応じて
他のヒドロキシ基を例えばＴＢＤＭＳにより保護して行
われるであろう。

その後、オキシムは例えば水性メタノールのような適当
な溶媒中一般には周囲温度で、例えば塩酸塩の形の、場
合によりＯ−置換されたヒドロキシアミンと反応させる
ことにより、慣用手段で製造される。

オキシムは直接ベックマン転位に使用されるか、あるい
は無水スルホンｌ’ｆ！またはハロゲン化スルホニル（
有利には、少量の対応するスルホン酸ヲ含む）のような
適当なスルホン化削を用いてスルホン化することにより
、−層反応性の誘導体に初めに変換される。

ベックマン転移は一般にＰＰ５Ｅ　（ポリリン酸シリル
エーテル）のような酸触媒を用いて行われる。

オキシムを例えばスルホン化により活性化した場合には
、温和な酸性条件がベックマン転位を行う念めに用いら
れる。

上記φ方法のいずれか又は全部において、感受性の基は
当分野で慣用的な保護基を用いて必要に応じて保護され
る。

式（ＤＩ）のバレロラクトンはアルコールの存在下で対
応する開環エステルと平衡状態にあることが理解される
であろう。

当業者は、本発明方法がＣ２２位にヒドロキシ（または
オキソもしくはオキシム）基をもつミルベマイシンまた
はアベルメクチンに適用できることを認めるであろう。

その後１式（Ｉ）および（ＩＩ）の化合物はそれ自体当
分野でよく知られた技法。

例えばＮａｔｕｒａｌ　Ｐｒｏｄｕｃｔｓ　Ｒｅｐｏｒ
ｔｓ　３　（２）（Ｉ９８６）８７およびＭａｃｒｏｌ
ｉｄｅ　Ａｎｔｉｂｉｏｔｉｃｓ（Ｉ９８４）　Ｃｈ、
　１４．５５３　　に記載される技法を用いて、さらに
修飾することができる。従って、本発明の広範な面は、
部分式（Ｉ）のミルベマイシンまたはアベルメクチン、
並びに部分式（Ｉ１）のミルベマイシンまたはアベルメ
クチンの酸触媒による環化を行うことから成るその製法
を提供する：（Ｉ）　　　　　　　　　　　（Ｉ＋）〔
式中、Ｒ４−Ｒ７およびＢ１４は先に定義した通りであ
る〕 本発明のさらに広範な面は、下記の部分式（ｖ）のミル
ベマイシンまたはアベルメクチン、並びにＣ２２位にヒ
ドロキシ（またはオキソもしくはオキシイミノ）置換基
をもつミルベマイシンまたはアベルメクチンの２１−２
２炭素−炭素結合を開裂することから成るその製法を提
供する： 以下の実施例は本発明を例示するためのものである。Ｖ
Ｍ　４４８６４およびＶＭ　４４８６６けＲ１が水素。

Ｒ３とＲ８が共に水素、Ｒ９が（Ｚ）ブドー２−エン−
２−イル、そしてＲ２がそれぞれメトキシおよびヒドロ
キシである式（ＩＶ）の化合物を表す。

ＶＳ４７７０９けＲ１およびＲ３が共に水素であり、セ
してＲ２がメトキシである式（ＩＩＩ）の化合物を表す
。

ＧＢ−Ａ−２１７０４９９の化合物６けＲａ−１）Ｅメ
トキシ、Ｒが水素、Ｒｅ　が２．４−ジメチルペンタノ
イルオキシ、そしてＲｄ　がメチルである式（Ａ）の化
合物を表す。′Ｘ１は下記の摘造を表す：〔実施例〕 実施例１ 乾燥ジクロロメタンｌ　ｒＩｌｔ中の塩化オキサリル０
．０５　！Ｒ１の溶液に一７０℃、窒素雰囲気下で乾燥
ジクロロメタン１−中のジメチルスルホギシド０．０５
４Ｉ４の溶液を滴下し念。この溶液に乾燥ジクロロメタ
ｙＱ、５ａ＋４中のＶＭ４４８６４　（ＥＰ−Ａ−０２
５４５８３（ＵＳＳＮ　０７６２７４）の実施例２に記
載される通りに製造したもの）８ｍ９の溶液を滴下し、
得られた溶液を一７０°Ｃで１．５時間攪拌した。その
後、乾燥ジクロロメタンｌ　ａｔ中のトリエチルアミン
０．２Ｍの溶液を加え、この温合物’ｒ　１，２５時間
攪拌しながらをエーテルで抽出し、合わせたエーテル抽
出物を水、ブラインで洗った後乾燥させた（　Ｍｇ５Ｏ
４）。

エーテルを蒸発させ、生成物を分、＃ｉ用薄層クロマト
グラフィー（アナルテク・シリカφテーパー・プレート
使用、メタノール／ジクロロメタン２：９８混合溶剤で
溶出）で精製して表題化合物１．４　ｍ９を得た。

ｍａｘ（ＣＨｓＯＨ）２４４ｎｍ、ｍ／ｚ　（ＦＡＢ　
Ｎａ＋Ｎｏｂａ　）　（相対強度）　６１９（ＭＮａ　
）　＋（Ｉ００％）メタノール５Ｎ中のη−ケトＶＭ４
４８６４１８■の溶液に、水１蛯中の塩化ヒドロキシル
アンモニウム２４ｍりの溶液を滴下した。この溶液を室
温で１５分間攪拌し、その後減圧下で蒸発させてメタノ
ールを除いた。水】５酎およびエーテル１５ｕｔを加え
、エーテル層を蒸発させ、水１５ｍ１で抽出し、乾燥（
Ｍｇ５Ｏ４）後に蒸発させた。粗生成物を分離用薄層ク
ロマトグラフィー（シリカ使用、　　５９５　ＭｅＯＨ
／ＣＨｚＣｌｔで溶出）にかけて精製し、表題化合物１
０■を得た。ｍ／ｚ　（ＦＡＢ　Ｎａ＋／Ｎｏｂａ　）
　（相対強度）６３４（ＭＮａ　］　＋１００　’ｌｐ δＣＣＣＤＣｌ５　）、　１７３．８　、１５６．８　
、１４２．４　、１３９．８　、１３７．３　。

１３５．９，１３３．７．１２４．１．１２３．５，１
２０．５．］１９．５．］１８．５゜９８．０．８１．
９　、８０．４　、７７．６　、７６．９　、６８．７
．６８．４　、６８．３．５７．８　。

４８．５　、４５．７　、３６．４　、３５．９　、３
５．８　、３４．５　、３２．９　、２７．１　、２２
．４　。

１９．９．１７．７．１５．６．１３．２　、１０．９
卿。

ジクロロメタ７２０ａｔ中のどリジンｌ　ａｔの溶液に
、−３０’Ｃでトリフリック・アンハイドライド（ｔｒ
ｔｆｌｉｃ　ａｎｈｙｄｒｉｄｅ　）　０．２　ｍ１１
次にｎ−ケトＶＭ　４４８６４のｎ−オキシイミノ誘導
体３７　ｍ９を加え念。−関℃で２時間攪拌後、この溶
液を５℃まで温めて、２Ｍ塩酸に注入した。酸と共に振
とう後、ジクロロメタン層を分離し、乾燥して（Ｍｇ５
Ｏ４）蒸発させた。粗生成物を分離用薄層クロマトグラ
フィー（シリカ、エーテルで溶出）にかけて精製し、表
題化合物５ｒｎ９ヲ得た。”Ｃｎ、ｍ、ｒ、（ＣＤＣＡ
ｓ）スペクトルは次のシグナルを示した： １７２．９．１６８．４．１４２．６．１３９．９，１
３９．１，１３６．４，１２３．６゜１１９．５　、１
１８．８　、１１８．０　、８０．６　、７７．８　、
７６．７　、７６゜６．６８．１゜６６．１．５７．８
．４８．４．４５．６．３６．８．３５．９．３４．６
．３４．１　。

２２．３．１９．９．および１５．７　。

実施例λ （ａ）　　５−　ＴＢＴｈＭＳ−保護ＶＭ　４４８６６
ＥＰ−Ａ−０２５４５８３（ＵＳＳＮＯ７６２７４）の
実施例３に記載の如く製造されたＶＭ４４８６６１０．
９■、イミダゾール２０Ｉｎ９．塩化ｔ−ブチルジメチ
ルシリル３０ｍり、および無水ジメチルホルムアミド５
　ｍｔの混合物を窒素雰囲気下に加℃で１６時間攪拌し
た。この混合物に塩化ｔ−ブチルジメチルシリル３０ｍ
９゜イミダゾール２０ｒｎ９ヲ加え、２１°Ｃで５時間
攪拌を続けた。この混合物を水ＩＱ　ａｔに注ぎ、エー
テル２Ｘ５蛯で抽出した。合わせたエーテル抽出物を水
１〇−で洗い、乾燥しく　Ｍｇ５Ｏ４）　、蒸発させて
油状物を得た。この残留物を分離用薄層クロマトグラフ
ィー（シリカ、エーテル／ヘキサン３０／７０）にかけ
て精製し、２種類の生成物を得た。

生成物１５−ｔ−ブチルジメチルシリル■４４８６６　
（６，０ｍ９　）　：　ｔＪ！、ｃ、Ｒｆ＝０．３３　
　エーテル／ヘキサン１　：　Ｉ　Ｓｉｇｈ　：　Ｍ／
Ｚ　　（ＦＡＢＮａ　／Ｎｏｂａ　）（相対強度）　７
２１　（Ｉ００％）　（ＭＮａ　）＋生成物２．　５．
２２−ジ−ｔ−ブチルジメチルシリル■（４４８６６（
Ｉ，０＃　）　：　ｔ、Ｊ、ｃ、Ｒｆ＝０．６６　　エ
ーテル／ヘキサ７１　：　Ｉ　５ｉｆｔ　：　Ｍ／Ｚ　
（ＦＡＢ　Ｎａ　　／Ｎｏｂａ　）　（相対強度）　８
３５　（Ｉ００％）〔八へａ）＋（ｂ）　　５−　ＴＢ
ＤＭＳ−保＝１４２２−　ケトＶＭ４４８６６乾燥ジク
ロロメタンＺ　ｍｊ中の塩化オキサリル０．１２　ｍｔ
の溶液を一７０°Ｃで窒素下に、乾燥ジクロロメタン２
　ｒｎｔ中のジメチルスルホキシドＱ、１．７ＬＡの溶
液で滴下処理し、その後乾燥ジクロロメタン１．０ｍｌ
中の５−ｔ−ブチルジメチルシリルＶＭ　４４８６６４
６■の溶液で滴下処理した。この溶液を一７０℃で１．
５時間攪拌し、その後乾燥ジクロロメタンｌ　ｒａｔ中
のトリエチルアミンｇ、４ｍｔの溶液で滴下処理した。

この反応混合物を冷却せずに１時間攪拌し、冷水オよび
エーテル（Ｉ：１）の混合物中に注入した。水層をエー
テルで抽出した。合わせた有機層を水で洗い、乾燥しく
Ｍｇ５０４）、蒸発させた。

残留物はシリカのクロマトグラフィーにかけ、ジクロロ
メタンからジクロロメタン／メタノール９８：２までの
勾配を用りて溶出し、表題化合物１６■を得た。これは
以下に示す如く脱保護された。

（ｃ）　　　Ｚ２−　ケ　ト　ＶＭ　４４８６６メタノ
ール５　ｍｔ中の５−ｔ−ブチルジメチルシリル−２２
−ケ）　ＶＭ４４８６６１６！Ｏ溶ｉ’！ｉ”ｐ−）／
’エンスルホン酸１０ｍｔ？で処理し、この混合物を２
１°Ｃで１．５時間攪拌した。その後、この混合物を蒸
発乾固させ、水１０１ＬｔおよびエーテルｌＱｍｇｉ加
えた。

層分離後、エーテル層を水ＩＱ　ｒｒｔｔで洗い、乾燥
しく　Ｍｇ５Ｏ４）　、蒸発させて油状物を得た。この
残留物を分離用薄層クロマトグラフィー（シリカ：ジク
ロロメタン／メタノール９８　：　２　）で梢契して表
題化合物１０ｍ１；ｌ？：得たｏ　Ｍ／　Ｚ　（Ｆ　Ａ
　Ｂ　Ｎａ　／Ｎｏｂａ　）（相対強度）　６０５　（
Ｉ００％　）　（ＭＮａ　）＋δｃ　（ＣＤＣｌ５）　
、　２０２．５，１７３．７．１４２．７．１３９．７
，１３７．９゜１３７．７．１３３．２．１２４．９．
１２３．５．１２０．３．１２０．２，１１８．０゜９
９．２　、８１．８　、８０．２　、７９．２　、６９
．１　、６８．５　、６８．４　、６７．８　、４８．
５　。

４５．７．４３．３．３７．１．３６．３．３６．０．
３４．６．３３．９．２２．４゜１９．９　、１８．２
　、１５．６　、　］　３．３　、１０．９　、　ｐａ
ｎ　。

表題化合物は実施例１（ｂ）に記載した方法と類似した
方法により５−　ＴＢＤＭＳ　−２２−ケ）　ＶＭ４４
８６６から製造した。

ジクｏｏメタン１０Ｉｎｔ中の５−　ＴＢＤＭＳ　−２
２−ヒドロキシイミノＶＭ４４８６６１，５　！ｉおよ
びトリエチルアミン１．０ｇの攪拌溶液に０℃で塩化４
−ニトロベンゼンスルホニル０．９４９　ｋ　２Ｍ下し
た。この混合物に室温まで温めた抜水１０ｒＩＬｔを加
え次。ジクロロメタン層を分離し、水ＩＱ　ｍｔで洗い
、乾燥しく　Ｍｇ５Ｏ４）　、そして蒸発させた。テト
ラヒドロフラン５０社中の残留物の溶液に、４−トルエ
ンスルホン酸１．０９を加え、この混合物を室温で３時
間攪拌した。蒸発乾固させた後、この混合物にジクロロ
メタン２５ａｄおよび炭酸水素ナトリウム溶液がｍｔを
加えた。分離後、ジクロロメタン層を水２０　ｒｎｔで
洗い、乾燥しく　Ｍｇ５Ｏ４）　、Ｍ発させて油状物を
得た。この残留物をカラムクロマトグラフィー〔シリカ
；ヘキサン／エーテルで溶出）で精製して表題化合物を
得た。

５−　ＴＢＤＭＳ−デー０−　メチルＶＳ４７７０９　
　（２００ｍｙ　＞、ｍｔｚ　（ＦＡＢ　Ｎａ＋／Ｎｏ
ｂａ　）　（相対強度）５８１（ＭＮａ　）＋（Ｉ００
％　） ５−デーＯ−メチルＶＳ４７７０９　　（４５０ｍ９　
）、ｍｔｚ　（ＦＡＢ　Ｎａ＋／Ｎｏｂａ　）　（相対
強度）　４６７　（ＭＮａ　）＋（Ｉ００％）、 δＣ（ＣＤＣ１３）　１７２．３．１６８．６．１４２
．．６，１３９．４−１３８．９゜１３７．７，１２３
．３．１２０．０．１１８．７，１１７．６．８０．２
　、７９．４　。

７６．５　、６８．０　、６７．４　、６５．９．４８
．１　、４５．４．３６．７　、３５．７　。

３４．３．３３．８．２２．１．１９．７．１５．５噌
実施例３ 実施例１に記載の方法によりＣＢ−Ａ−２１７０４９９
の化合物１０■を酸化してｎ−ケト誘導体５■を得、こ
れは分離用ｔｌｃ　（シリカ：エーテル／ヘキサン＋ ６０　：　４０で溶出）で精製したａ　ｍｔｚ　（ＦＡ
ＢＮａ　／＋ Ｎｏｂａ　）　７０７　（ＭＮａ　）　　ｏ　　ＨＰＬ
Ｃ保持時間１５分〔２５ｃＩｎＸ　４．６　ｍウルトラ
スフイア（ｕｌｔｒａｓｐｈｅｒｅ　）　ＯＤＳ。

メタノール／水（９０：　１０　）、１ｙＦＬｔ／分）
ｏ　２２−’ｒト誘導体５■はメタノール５ＩｎｔＫ溶
解し、ヒドロ中ジルアミン塩酸塩の水溶液を加えた。こ
の溶液を５℃で２日間貯蔵し、上記条件のＨＰＬＣを用
いて２櫨類の新しい生成物、すなわち８．７分および９
．１分の保持時間をもつ表題化合物のｌ　５ｙｎｌおよ
び”ａｎｔｉ”異性体を得な。この混合物を水に注入し
、ジクロロメタンで抽出し、抽出物を乾燥して（Ｍｇ５
０４）蒸発させた。粗生成物は次の反応に直接使用した
。

上記の粗オキシムをジクロロメタン５　ｒｎｔとトリエ
チルアミンｌ　ｍｔに溶解した。塩化４−ニトロベンゼ
ンスルホニル３０■を少量ずつ加え、ＨＰＬＣで全ての
オキシムが反応したことを確かめた。この溶液を蒸発さ
せ、残留物をメタノールに溶解し。

４−トルエンスルホン酸３０ｒｎ９を加えた。この反応
混合物を５℃で１５時間貯蔵し、蒸発させ、残留物をジ
クロロメタンに溶解した。この溶液を炭酸水素ナトリウ
ム溶液で洗い、乾燥し、蒸発させた。

分離用ｔｉｃ　（シリカ；エーテル／ベトロール８０：
頒で溶出）によりＶＳ　４７７０９の純粋々サンプル１
■ヲ得た。ｍｌｚ　（ＦＡＢ　Ｎａ＋／　Ｎｏｂａ　）
　４８１　（ＭＮａ”　）。

実施例４ ＴＨＦ　５　ｒ／Ｌｔ中の（３Ｒ’　、　４Ｒ’）　−
３−メチル−４−（テトラヒドロビラン）−２−イルオ
キシ）−１−ペンチン１１０■（０，６ミリモル）の溶
液に、−７８℃で窒素下にブチルリチウム（ヘキサン中
１．６Ｍ　：　０．３２ｍｊ、０，５　ミ！Ｊモル）を
加え、この混合物を一７８℃でＩＴ時間貯蔵した。この
混合物にＴＨＦｌ　ｍｔ中のＶＳ４７７０９９０ｍ９　
（０，２ミ！Ｊ　モル）　ノ’ＲＥ液を加え、−７８℃
で３時間攪拌した。塩化アンモニウム希薄水溶液５　ｍ
ｌでこの反応を停止させ、その後反応混合物を０℃まで
温めた。水相をジエチルエーテル（２ｘ”ＸＪｍｌ）で
抽出し、合わせた有機抽出物を水ＩＱ　ｍｔで洗い、乾
燥しく　Ｍｇ５Ｏ４）、蒸発させて粗生成物１５０ｒｎ
９を得た。

酢酸エチル２０耐中のこの粗生成物１５０りの溶液ヲリ
ンドラー触媒９０ｍ９上で１６時間水素化した。この混
合物はセライトを通して濾過し、蒸発させて油状物を得
た。

この未精製生成物にメタノールＩＱ　ｍｔと希塩酸（Ｉ
Ｍ）１ｍｔ′Ｉｒ、加えた。この混合物を１時間攪拌し
、蒸発乾固させて粗生成物を得た。残留物？分離用ｔｌ
ｃ　（シリカプレート；酢酸エチル／ヘキサン３０　：
　７０で溶出）で精製して表題化合物１０ｍ９を得た。

ｍｌｚ（ＦＡＢＮａ＋／Ｎ０ＢＡ　）　　（相対強ｉ　
）　５６３（ＭＮａ　）＋（Ｉ００％）： δＣ（ＣＤＣｌ２）　１７４．０．１４２．５，１３９
．７．１３７．０．１３６．０゜１３５．５，１２７．
５．］２３．５．１２０．８．１１９．４．ｉ１８．３
．９６．２゜８０．３．７７．４．７７．０．６８．６
．６８．３．６８．２．６５．６．５７．８゜４８．５
　、４５．６　、４０．４　、３６．３　、３５．９　
、３４．９　、３２．９　、２２．３　。

１９．９．１７．９．１５．５．１２．１ｕ。

実施例５ ジデヒドロ−２４、２５−ジメチル−Ｘ実施例４に類似
した方法により、（３Ｒ’　、　４８”）−３−メチル
−４−（テトラヒドロビラン−２−イルオキシ）−１−
ペンチン１５２■（０，８４ミリモル）オよびＶＳ４７
７０９１００１Ｗ　（０，２１ミリモル）から２種類の
生成物（２４８，２５Ｒ）および（２４Ｒ。

２５Ｓ）−２２，２３−ジデヒドロ−２４、２５−ジメ
チル−Ｘを混合物として得た。分離用ＨＰＬＣで精製し
て（２４Ｒ，２５Ｓ）−２２，２３−ジブヒトｏ　−２
４、２５−ジメチルーＸ　３．９　＃、ｍｌｚ　（ＦＡ
Ｂ　Ｎａ＋／Ｎｏｂａ　）（相対強度）　５６３　（Ｍ
Ｎａ＋）　（Ｉ００％　）　：および（２４８，２５Ｒ
）−Ｚ２．２３−ジブヒト０−２４１２５−ジメチル−
Ｘ２２．０ｍ９、ｍｌｚ　（ＦＡＢ　Ｎａ　／Ｎｏｂａ
　）（相対強度）　５６３　（ＭＮａ＋）　（Ｉ００％
）；δＣ（ＣＤＣ１１）　１７３．８．１４２．６，１
４２．４，１３９．７゜１３７．１，１３５．９，１３
５．４．１２７．９，１２３．５，１２０．７゜１１９
．４，１１８．３．９５．７．８０．３．７７．４．７
６．９．６９．７゜６８．４．６８．３．６８．２．５
７．８．５３．４．４８．５．４５．６．４０．３゜３
６．３．３６．１．３５．９．３４．８．２２．３．１
９．９　、１９．０　、１６．６　。

１５．５１１１ｍ。

製造例１ 一オール 文献九記載の方法により、トランス−２，３−エボギシ
ブタンおよびジメチルスルホキシド中のりチウムアセチ
リド−エチレンジアミン複合体から製造した（　Ｊ　Ａ
ｍ　Ｃｈｅｍ　Ｓｏｃ　（Ｉ９７０）　１０１　、５３
６７　）製造例２ 水浴中で冷却したジヒドロビラン１．３９に（３Ｒ’　
、　４Ｒ”）−３−メチル−１−ペンチン−４−オール
１．３ｇ次に濃塩酸１滴を加え、この混合物を室温で１
６時間攪拌した。炭酸カリウム１００ｒｎ９を加え、こ
の混合物を１５分間攪拌した。ジエチルエーテルｌ□＋
＋ｔｉ加え、濾過後に蒸発させて油状物を得た。この残
留物を蒸留して表題化合物１．２ｇを得た（Ｉ０価度で
沸点１３０〜１３５℃）。

製造例３ −オール ジメチルスルホキシドｌＱｍ中のりチウムアセチリド−
エチレンジアミン複合体４９　（４４ミリモル）の懸濁
液にシス−２，３−エポキシブタン２．９９（４０ミ！
Ｊモル）を加え、この混合物を窒素下に室温で１０日間
攪拌した。この反応を水２５縦で停止させ、ジエチルエ
ーテル（３Ｘ５０ｍｔ）で抽出した。

し 合わせたエーテル抽出物を乾燥ＶＣＭｇＳ０４）、蒸発
させて油状物を得た。この残留物を蒸留して無色油状の
表題化合物１．２９を得たＣ３０ｍｍＨＩで沸点３５〜
４５°Ｃ）。

製造例４ 製造例２と類似した方法により、　　（３Ｒ’　、　４
８’）−３−メチル−１−ペンチン−４−オールカラ無
色油状の表題化合物１．２９を得た（４０ｍｍＨＦで沸
点１１５〜１２０°Ｃ）。

参考例１ 培養 ストレプトマイセス種ＮＣＩＢ　１２５０９　（ＥＰ−
Ａ−０２５４５８３：　ＵＳＳＮＯ７６２７４を参照）
は液体窒素中に貯蔵された栄養菌糸体として保持した。

第１段階接種 １００−の培地Ｙを、木綿ガーゼの栓で密封した５００
　ｍエルシンマイヤーフラスコ中でｉｓ　シタ。

培地Ｙは以下の諸成分を含んでいた： １スペシャルヘプトン　　　　　０．２５％”ラブ・レ
ムコ（Ｌａｂ　Ｌｅｍｃｏ　）　　０．２５％”トリプ
トン　　　　　　　　　　　０．２５　　％”中和大豆
ペプトン　　　　　　０．２５％”麦芽エキス　　　　
　　　　　０．２５％可溶性澱粉　　　　　　　　　０
．２５チグルコースー水和物　　　　　０．２５％グリ
セロール　　　　　　　　０．２５％φ微量元素溶液　
　　　　　　　１０ａｔ／ｌ…は未調整であった。

φ微量元素溶液は以下の諸成分を含んでいた：ＣａＣ１
ｚ、　２ＨｚＯ１，０％ ＭｆｊＣ６ｔ　、　６Ｔ（２ｏ　　　　　　　１．０％
ＮａＣ１１，０％ ＦｅＣｌ３０，３９６ ＺｎＣ１２０，０５％ ＣｕＣ１２，２Ｈ！ＯＯ，０５％ ＭｎＳＯ４，４ＨｚＯＯ，０５％ ＣｏＣ１ｘ、６Ｈｚ０　　　　　　０．０５％（２これ
らの製品は英国ハンプシャー州、パシングストークｓ　
　０ｘｏｉｄ社から供給された。）１個のフラスコ中の
培地Ｙに、１本のアンプル中の維持培養物１．５ＩＩＬ
ｔｉ接種した。このフラスコを旋回振とう器上２４０　
ｒｐｍｗ　２５℃で４８時間インキュベートした。

２段階接種 １００　Ｉｎｔの培地Ｃを、木綿ガーゼの栓で密封し念
５００ｒｎｔエルレンマイヤーフラスコ中にて滅菌した
。

培地Ｃは以下の諸成分を含んでいた： アーカソイ（Ａｒｋａｓｏｙ　）　５０　　１，０％グ
ルコース−水和物　　　　　２．０チ噴霧乾燥コーンス
テイープ液　　　　　　０．５チＮａＣ１００３％ ｐＨ６，８に調整。

（Ａｒｋａｓｏｙ　５０は英国マンチェスター、Ｂｒｌ
ｔｉｓｈＡｒｋａｄＦ社から供給された。） （Ｃｏｒｎ　５ｔｅｅｐＬｉｑｕｏｒは英国ケント州、
ターンブリッジ・ウェルズ、ＲｏＣｌｕｅｔｔｓ　ＵＫ
社から供給された。） 数本のフラスコ中の培地ＣＫ４％の第１段階接種物を接
種した。これらを旋回振とう器上２４０ｒｐｍ、２６℃
で７２時間インキュベートした。

３段階接種 １５ノの培地Ｃを０゜ｌｖ／ｖ％のポリプロピレングリ
コール（Ｐ４Ｏ１０）と共に、２０１のバイオラフイツ
ト発酵槽（仏閣ボイツセイ、　Ｂｉｏｌａｆｉｔｔａ社
）中で滅菌した。この発酵槽は完全にバッフルでさえぎ
って、３枚の羽根車を取り付けた。無菌空気をｌ　ｖ、
ｖ、ｍ、で供給し、　２００　ｒｐｍで回転させた。

２本の２段階接種フラスコの内容物を１機の加！発酵槽
に接種し、２６℃で４８時間インキュベートした。

４段階接種 １００１の培地Ｃを１５０１のブラウン発酵ｍ（西独国
メルスンゲンｓ　Ｂ、Ｂｒａｕｎ）中１２１℃で滅菌し
た。０．１チ消泡削を培地に加えた。この消泡剤は大豆
油中１０　％プルロニックＬ８１から成る。

（Ｐｌｕｒｏｎｉｃ　ＬＳＩ　　は英国クロイドン、Ｂ
ｌａｇｄｅｎ　−Ｃａｍｐｂｅｌｌ　Ｃｈｅｍｉｃａ１
社から供給され±。）この発酵槽は完全にバッフルでさ
えぎって、３枚の羽根車を取り付けた。１２０　ｒｐｍ
で回転させ、無菌空気を１　ｖ、ｖ、ｍ、で供給した。

発酵槽には４１の３段階接種物を接種し、２８℃で４８
時間インキュベートした。

発酵段階 ３０００　ｌの培地Ｆ１を４５００１のバイオエンジニ
アリング発酵槽（スイス国、Ｂｉｏｅｎｇｉｎｅｅｒｉ
ｎｇ−Ｗａ　ｌ　ｄ社）中で滅菌した。

培地Ｆ１は以下の諸成分を含んでいた：アーカソイ５０
　　　　　　　　　　　ｉ、ｏチグルコースー水和物　
　　　　　２．０チデ中ストリン０７００５　　　　　
　２，０チカゼイン　　　　　　　　　　　　０．２％
ＭｇＳＯ４０，１％ ＣａＣＯ５Ｏ，５％ 大豆油中１０チプルロニツクＬ８１　　　　　　０．ｊ
　％（テキストリン０７００５は英国マンチェスター。

Ｃｏｒｎ　Ｐｒｏｄｕｃｔｓ社から供給された。）（カ
ゼインは英国ハンプシャー州、　０ｘｏｉｄ社から供給
された。） この発酵槽は完全にバッフルでさえぎり、３枚の羽根車
を取り付けた。無菌空気ｆ　００５ｖ、ｖ６ｍで供給し
た。

発酵槽には１００１０４段階接種物を接押し、２６℃で
インキュベートした。攪拌速度は以下のように維持した
： ０〜２日　　　　　　　５０ｒｐｍ ２〜３日　　　　　　　７５ｒｐｍ ３日〜収獲日　　　　　１１００ｒＰ 発−は１７日間実施し、追加の消泡剤を必要に応じて加
えた。

分離方法 収穫時に、全発酵培地を別の攪拌容器に移し、１０　ｖ
／ｖ　％ブタンー１−オールを加えた。この混合物を７
℃で１６時間攪拌した。その後、全培地（２３３９１＞
ｆインライン静止ミキサーを通して５１／分でウエスト
ファリアＳＡ　７−０３−０７６液体／液体／固体遠心
分離機（西独国エルデ、Ｗｅｓｔｆａ−１ｉａ　５ｅＰ
ａｒａ’ｔｏｒ社）へ供給し、同時にブタン−１−オー
ルを１，７１７分で供給した。沈殿した固体は必要に応
じて断続的に取り出した。

ラフィネートおよび菌糸体を合わせ、ブタン−１−オー
ルによる２回目の類似の抽出に付した。

ブタノール抽出物を合わせ、２０１になるまで真空濃縮
した。４０　ｌのベトロリウムスピリット（６０＠〜ｗ
）を加えて着色不純物を析出させ、これを遠心により取
り除いた。上清は１５１になるまで真空濃縮した。

クロマトグラフィー精製 濃縮物はシリカゲル（３２〜６３μｍ、西独国シールズ
、Ｒｌｅｄｅｌ　ｄｅ　Ｈａｅｎ　）のカラム（直径６
００　ｍ　Ｘ２００　ｍ　）でクロマトグラフィーにか
け、ペトロリｆウムスピリット（６０″〜８σ）中酢酸
エチルの段階的勾配で溶出した。〉８ｃ４酢酸エチルを
用いて得られた、ＶＭ　４７７０４および他の活性物質
を含む画分は取りのけておいた。残りのミルベマイシン
含有画分はすべて同様のカラムで再度クロマトグラフィ
ーにかけて、追加量のＶＭ　４７７０４および他の活性
物質を分離し、すでに得られたものと合わせて蒸発後に
油状濃縮物２０８ｇを得た。

これを再びシリカゲルカラム（Ｉ５０ａｒｍ　Ｘ　１８
０ｍｍ　）のクロマトグラフィーにかけ、ペトロリウム
スピリット（６σ〜８０′）中の酢酸エチルの段階的勾
配（３，３１の純粋ペトロリウムスピリット、続いてそ
れぞれ６．６１のペトロリウムスピリット中の１５％％
２５％、３０％、３５チおよび４０　％　（ｖ／ｖ　）
酢酸エチルを使用）で溶出した。初めの２５１の溶出液
は捨て、その後２１ずつの画分を集めた。両分３〜８を
合わせ、濃縮して油状物を得た。

Ｇ） この物質をセファデックス　ＬＨ２０（英国ミルトンキ
ーネス、Ｐｈａｒｍａｃｉａ社）のカラム（頁径７５瓢
Ｘ５００　ｍ　）でクロマト・グラフィーにかけ、溶離
液としてメタノールを使用した。ミルベマイシン成分を
含むすべての両分を合わせた。

逆相シリカによるクロマトグラフィーを用いてさらに精
製ヶ行つぇ。？　）Ｖヮ、□（６）。１８．、ヵ、２０
〜４５　Ａｍ、孔径６０Ａ（英国ストーンハウス、Ａｍ
ｌｃｏｎ社）をその後のすべてのカラムに対して使用し
た。

但） セファデックス　ＬＨ２０カラムから得られた産物はＣ
Ｉ８シリカの直径１００咽Ｘ　１８０　ｍカラムでクロ
マトグラフィーにかけ、８５チメタノールで溶出した。

初めの１１の溶出／Ｊ２ｉ、を捨て、その後加×１００
ｍｔの画分（すべてミルベラ１′ンン成分を含有する）
を集めて合わせた。

このようにして得られた画分は同様のカラムでクロマト
グラフィーにかけ、初めに８５％メタノールで溶出し、
その後８７．５　％のメタノールで溶出した。初めの１
１の溶出液を捨てた後、それぞれ反ｍｌずつの３６の画
分（ｖＭ４７７０４以外の活性物質を含む）を集めた。

その後８７．５チメタノールで溶離し、溶出されたＶＭ
　４７７０４は他の活性物質と混じつていた。

後者の画分を直径１００　ｍ　Ｘ　２６０　ｍカラム（
２２工と指定）でクロマトグラフィーにかけ、８５％メ
タノールで溶出した。１００ＩＩＬｔずつ画分を集めた
ＯＶＭ　４７７０４の濃縮が両分４２〜５５に観察され
た。画分３５〜４１は別の産物を含んでいた。

カラム２２Ｉからの両分４２〜５５ヲ同様のカラム（２
２Ｊと指定）でクロマトグラフィーにかけ、８２．５　
％メタノールで溶出した。最初の７．２１　’！ｒ捨て
、その後１００ｍ１ずつ画分を集めた。大部分のＶＭ　
４７７０４は画分６６〜８５に見られ、さらに、純度の
低い産物が画分５７〜６５に存在していた。

カラムη工および２２Ｊからの純度の低い両分を合わせ
、直径８０　ｔａ　Ｘ　６００．　ｔｗｓカラムでクロ
マトグラフィーにかけ、８１％メタノールで溶出した。

初めの９．３１を捨て、その後１０Ｃ１ｊずつの画分子
ｔ集めた。主としてＶＭ４７７０４ｉ含む画分７６〜８
６とカラム２２Ｊからの画分６６〜８５とｔ合わせ、同
一カラムでクロマトグラフィーにかけ、７９％メタノー
ルで溶出した。初めの２０１を捨て、１００ＩＩＬｔず
つの両分を集めた。両分３４〜５５を蒸発乾固させて■
４７７０４を２０９■得た。

ｍａｓｓ（Ｎ子衝撃マススペクトロスコピー）ＣＭ）　
＋＝６８４　： δ”Ｃ（ＣＤＣｌｓ）　１７３．０　、１７２．９　、
１４２．９．１３９．１　。

１３７゜１．１３６．４，１３４．０．１２３．６．１
２３．３，１２１．７゜１２０．５４．１２０．４７．
９８．８．８１．９．８０．３．７９．０．７１．５゜
６８．８　、６８．４　、６７．９　、６４．６　、６
４．１．４８．４．４５．５．４３．２゜３６．８．３
６．４．３６．３．３５．９．３４．６．３２．０．２
５．６．２２．４゜２２．２．１７．４，１５５．１３
，１１０．９゜接種段階および発酵段階は参考例１のよ
うに行ったが、発酵段階での攪拌は以下の速度に維持し
た： ０〜３日　　　　　５０ｒｐｍ ３日〜収穫日　　１００　ｒｐｍ 発酵培地は４０４時間後に収穫した。全培地を発酵槽か
ら排出し、ブタノールで飽和させた。産物はインライン
静止ミキサー、続いてウエストファリア液体／液体／固
体遠心分離機を用いて１／３容量のブタノールで抽出し
た。５１／分で培地を処理し、約８０チの収率をもたら
した。２回目の類似の抽出を行って、本質的回収が得ら
れた。

ブタノール抽出物を合わせ、小容１（Ｉ９１）に濃縮し
、２倍容量のペトロリウムスピリット（６０゜〜田）を
加えて着色不純物を析出させた。再濃縮により１０．８
１の褐色油状物を得、これを直径６００惰のカラムに充
填した２８　ｋｇのシリカでクロマトグラフィーにかけ
、ベトロール中の次第に増加する濃度の酢酸エチル（５
０チまで）を用いて溶出した。

ＶＭ４８１３０オよびＶＭ４８６３３１含む画分ｔ−同
定し、更なるクロマトグラフィーにかけた。

例３） ＶＭ４８１３０オ！びＶＭ４８６３３を含む画分１．８
ｇはダイナマックス−６０ＡＣ−１８カラム（５００Ｘ
２１．４　ｍ　１米国Ｒａ１ｎｉｎ　Ｉｎｓｔｒｕｍｅ
ｎｔ　Ｃｏｒｎｐａｎｙ）　を用いた分離用逆相ＨＰＬ
Ｃにかけ、メタノール：水の勾配Ｃｌｏｍｔｌ分で１４
０分間にわたりメタノール：氷８２　：　１８から１０
０チメタノールまで）で溶出し、２４４ｎｍでのＵＶ分
分析上り監視した。　ＶＭ４８１３０とＶＭ　４８６３
３はプールした同一画分中に検出され、溶媒を蒸発させ
て９７．４■の物質を得た。これはさらにダイナマック
ス−６０ＡＳｌカラム（２５０Ｘ　２１．４−１米国Ｒ
ａ１ｎｉｎ　Ｉｎｓｔｒｕｍｅｎｔ　ＣｏｍＰａｎ７　
）を用いた分離用シリカＨＰＬＣにかけ、ヘキサン：ア
セトン勾配（Ｉ０ｍｊ／分で１２０分間にわたり８７　
：　１３から８２：１８まで）で溶出することにより精
製した。両分を集め、ＴＬＣ（シリカゲルプレート使用
、ヘキサンニアセトン（イ）：４０で溶出）で同定した
。

これは実質的に純粋なＶＭ　４８６３３をもたらした（
４．９■）。

λｍａｘ　（ＣＨｓＯＨ）　２４４ｎｍｓｍａｓ　ｓ　
（ＦＡＢ　Ｎａ”／Ｎ０ＢＡ　）（ＭＮａ）”　＝　７
ｏｓ　、δ１３Ｃ（ＣＤＣｌｓ）１７３．２．１６６．
４．１５７．８゜１４２．９．１３９．２．１３７．２
，１３６．８．１３４．１．１２３．７゜１２３．４．
１２１．４．１２０．６．１２０．５．１１５．６．９
８．９．８１．９゜８０．３．７９．１．７１．６．６
８．８．６８．５．６８．０．６４．７．６３．５゜４
８．５．４５．６．３６．９．３６．４５．３６．３７
．３６．０．３４．６゜３２．１．２７．５．２２．３
．２０．３．１７，５．Ｉ５．５．１３．１．１０．９
鱗ＶＭ４８１３０　（Ｉ０，６＋Ｖ　）　’ｌ含ｔｒ画
分Ｈ半分子ｉ用ＨＰＬＣ（ハイパーシル５　μｍ０ＤＳ
　２５０　Ｘ　１０　ｗカラム、ＨＰＬＣＴｅｃｈｎｏ
ｌｏｇＴ社）による最終精製全必要としメタノール：水
の勾配（流速３−７分で（イ）分間にわたりメタノール
：水７７　：　２３から８５　：　１５まで）で溶出し
、　　２４４ｎｍでＵＶ分析により監視した。これは実
質的に純粋なＶＭ　４８１３０を４．１■もたらした。

λｍａｘ　（ＣＨ３０Ｔ（）　２４４ｎｍ　ｅ　ｍａｓ
ｓ　（ＦＡＢ　ｔ　Ｎａ＋／Ｎ０ＢＡ　）（ＭＮａ′３
”　＝　６９３　：δ”Ｃ（ＣＤＣＪｓ）１７７．８．
１７３．７゜１４２．８．１３９．５．１３７．９，１
３７．４．１３３．１．１２４．９゜１２３．４．１２
０．４．１２０．３．１１８．１．１００．２．８０．
２．７９．２゜７６．０．７５．４．６８．５．６８．
］　、６７、’！　、４８．５，４５．７．３７．７゜
３６．２１ｅ３６．１４＠３６．０ｅ３４．６．３４．
３＠２２．３＠１９．９１１９．２．１９．０．１５．
６．１３．２．１３．０．１０．８ｐｐ。

それらは下記条件下でＨＰＬＣにかけたとき１２．３分
（ｖＭ４８１３０　）　オよび１２．９分（ｖＭ４８６
３３　）　ノ保持時間を有していた：　ＵＩｔｒａｓｐ
ｈｅｒｅ　ＣＤ５５μｍカラム２５０　Ｘ　４，６　ｍ
　ＣＡｌｔｅｘ社）：流速１　ｍＡ　７分でメタノール
：水（８５：　１５　）により溶出：　２４４ｎｍでＵ
Ｖ分光分析ｆより監視。

実施例で用いた温度は、特に表示しない限り、℃である
。

代理人　弁理士　　秋　沢　政　光 他１名 １自発手＠に打１１正ｍ 昭和／−？年〃ル４備 ？１昏ｎ１１ユＪ子長′巴１役 １、事件の表示 特願昭ｌ、ｊ−、？Ｚ％ρｇ号 ２、発明の名称 新規化合物、その製法及びそれを含む医薬組成物３、補
正をする者 事件との関係　　出　願　人 住　所　イギリス国、ミドルセックス用、ブレンドフォ
ード、グレートウェストロード、ビーヂ、トムハウス（
番地なし）名　（？１；　　ビーヂャム・グループ・ピ
ーエルシー４、代理人 居　所　東京都中央区日本橋兜町１２番１号太洋ビル７
、補正の内容　　別紙の通り、手ＩＪ明細四のタイプ浄
書（内容に変更なし）

Claims (1)

1. 【特許請求の範囲】 １、式（ I ）の化合物： ▲数式、化学式、表等があります▼（ I ） 〔式中、Ｒ＾１は水素または必要に応じて保護されたヒ
   ドロキシであり；Ｒ＾２はアルコキシ、必要に応じて保
   護されたヒドロキシ、オキソまたは場合により０−置換
   されたオキシイミノであり；Ｒ＾３は水素、必要に応じ
   て保護されたヒドロキシ、または基４′−（α−Ｌ−オ
   レアンドロシル）−α−Ｌ−オレアンドロシルオキシも
   しくはα−Ｌ−オレアンドロシルオキシ（ここでその末
   端ヒドロキシ基は必要に応じて保護される）であり；Ｒ
   ＾４およびＲ＾５の一方は水素であつて他方はメチルで
   あり；そしてＲ＾６およびＲ＾７の一方は水素であつて
   他方はメチルである；但し（ａ）Ｒ＾１が必要に応じて
   保護されたヒドロキシである場合、Ｒ＾３は水素であり
   、そして（ｂ）Ｒ＾２がメトキシまたは必要に応じて保
   護されたヒドロキシでない場合、Ｒ＾１およびＲ＾３は
   両方とも水素である。〕 ２、ヒトまたは動物の内部寄生性生物および外部寄生生
   物インフエステーシヨンの治療または予防に使用される
   、請求項１記載の化合物。 ３、請求項１記載の化合物またはその誘導体を節足動物
   または線虫もしくはそれらの環境に適用することから成
   る、節足動物または線虫インフエステーシヨンの根絶方
   法。 ４、請求項１記載の化合物またはその誘導体を、そのた
   めのキャリアーまたは賦形剤と共に含有してなる殺虫剤
   組成物。 ５、請求項１記載の化合物またはその薬学的に許容され
   る誘導体を、薬学的もしくは獣医学的に許容されるキャ
   リアーまたは賦形剤と共に含有してなるヒトまたは動物
   用の薬剤組成物。 ６、式（II）の化合物： ▲数式、化学式、表等があります▼（II） 〔式中、Ｒ＾１〜Ｒ＾７は請求項１で定義した通りであ
   り、Ｒ＾１＾４は水素または低級アルキルである〕を酸
   触媒により環化することから成る、請求項１記載の式（
   I ）の化合物を製造する方法。 ７、式（III）の化合物： ▲数式、化学式、表等があります▼（III） 〔式中、Ｒ＾１〜Ｒ＾３は請求項１で定義した通りであ
   る〕８、式（IV）の化合物： ▲数式、化学式、表等があります▼（IV） 〔式中、Ｒ＾１〜Ｒ＾３は請求項１で定義した通りであ
   り、Ｒ＾８は水素または必要に応じて保護されたヒドロ
   キシであり、そしてＲ＾９はメチル、エチル、１−メチ
   ルプロピルまたは（Ｚ）プト−２−エン−２−イルであ
   る；但し（ａ）Ｒ＾１が必要に応じて保護されたヒドロ
   キシである場合、Ｒ＾３およびＲ＾８は水素であり、そ
   してＲ＾９は（Ｚ）プト−２−エン−２−イルである、
   （ｂ）Ｒ＾３が水素でない場合、そしてその場合のみ、
   Ｒ＾９は１−メチルプロピルである、（ｃ）Ｒ＾３が水
   素でない場合、Ｒ＾８は必要に応じて保護されたヒドロ
   キシである、（ｄ）Ｒ＾９が（Ｚ）プト−２−エン−２
   −イルであり且つＲ＾８が必要に応じて保護されたヒド
   ロキシである場合、Ｒ＾１は水素であり、そしてＲ＾２
   は必要に応じて保護されたヒドロキシである、および（
   ｅ）Ｒ＾２がメトキシまたは必要に応じて保護されたヒ
   ドロキシでない場合、Ｒ＾１、Ｒ＾３およびＲ＾８は水
   素であり、そしてＲ＾９は（Ｚ）プト−２−エン−２−
   イルである〕を２１−２２炭素−炭素結合の開裂に付す
   ことから成る、請求項７記載の式（III）の化合物の製
   法。 ９、部分式（ｉ）または（ｖ）のミルベマイシンまたは
   アベルメクチン： ▲数式、化学式、表等があります▼（ｉ）▲数式、化学
   式、表等があります▼（ｖ） 〔式中、Ｒ＾４〜Ｒ＾７は請求項１で定義した通りであ
   る。〕 １０　部分式（ｉｖ）のミルベマイシンまたはアベルメ
   クチン： ▲数式、化学式、表等があります▼（ｉｖ） 〔式中Ｒ＾１＾４は請求項６で定義した通りである〕を
   酸触媒により環化することから成る、部分式（ｉｉｉ）
   のミルベマイシンおよびアベルメクチン：▲数式、化学
   式、表等があります▼（ｉｉｉ） 〔式中、Ｒ＾１＾０およびＲ＾１＾１の一方は水素であ
   つて他方はメチルであり、そしてＲ＾１＾２およびＲ＾
   １＾３の一方は水素であつて他方はメチルである〕 を製造する方法。