〔技術分野〕〔Technical field〕
本発明はセンダン樹皮の抽出物からなる新規な
抗菌剤に関する。本発明の抗菌剤は各種の細菌感
染症の治療に有用である。
〔先行技術〕
センダン樹皮は漢方で、苦楝皮（クレンピ）と
称し、煎じて回虫、鈎虫、条虫の駆除あるいはマ
ラリア熱の治療に使用されている。しかし、セン
ダン樹皮に抗菌作用を有する成分が含まれている
ことは従来知られていない。
発明の目的
本発明者等は、センダン樹皮に含まれている成
分の薬理作用について鋭意研究を重ねた結果、セ
ンダン樹皮を特定の溶媒で抽出して得られる成分
が優れた抗菌活性も示すことを知つた。
従つて本発明の目的は、センダン樹皮の抽出物
を有効成分とする抗菌剤を提供することにある。
発明の具体的説明
本発明の抽出物は、センダン樹皮を極性有機溶
媒で抽出処理することによつて得られる。
本発明において、センダン樹皮とは、センダン
（Melia azedarach L.var、Japonica Makino）、
タイワンセンダン（Melia azedarach L.）また
はトウセンダン（Melia azedarach var.
toosendan Makino）の樹皮を意味する。樹皮は
乾燥細断したものが望ましく、市販の苦楝皮が好
適に使用される。
本発明のセンダン樹皮抽出物は、上記樹皮に極
性有機溶媒を加え、室温あるいは加熱して抽出処
理し、抽出混合物を過し、液から溶媒を留去
することによつて得られる。抽出溶媒として使用
される極性有機溶媒の例としては、メタノール、
エタノール、ｎ−プロパノール、イソプロパノー
ル、ｎ−ブタノールのようなアルコール、ピリジ
ン、アセトン等が挙げられる。アルコール特にメ
タノールまたはエタノールが好適である。抽出処
理時間は、原料の種類、品質等に従つて適宜決定
されるが通常数時間乃至２日間程度である。
本発明のセンダン樹皮の抽出処理に当り、極性
有機溶媒による抽出処理操作に先立つて、非極性
有機溶媒でセンダン樹皮を抽出前処理すると、不
要な成分が除去されて効力の強いセンダン樹皮抽
出物が得られる。抽出前処理で使用される非極性
有機溶媒北例としては、ベンゼン、トルエン、キ
シレン、ｎ−ヘキサン、クロロホルム、四塩化炭
素、酢酸エチル等が挙げられる。抽出前処理は、
上記の溶媒をセンダン樹皮に加え、室温あるいは
加熱して不要な成分を抽出除去することによつて
行なわれる。抽出前処理は通常、数時間乃至２日
間である。抽出前処理後、混合物を過し、残渣
を抽出工程に供する。
本発明におけるセンダン樹皮抽出物の特性は次
の通りである。
(1) 色と形状
褐色粉末
(2) 紫外線吸収スペクトル
第１図に示す通りである（実施例４メタノー
ル画分）。
UVλMeOH nax293nｍ（アルカリ条件）
280nｍ（酸性条件）
279nｍ（中性条件）
(3) 赤外線吸収スペクトル
第２図に示す通りである（実施例４メタノー
ル画分）。
IRνKBr naxcm-1：1610、2930、3350〜3400
(4) 溶解性
メタノール、エタノールに可溶、ベンゼン、
酢酸エチルに不溶。
(5) 急性毒性
ICR雄４週令マウス（体重20±１ｇ）腹腔内
投与でLD50＝260mg／Kgであつた。
本発明のセンダン樹皮抽出物は、各種の細菌感
染症の治療に有用であり、その投与形態として
は、例えば皮下注射、静脈内注射、筋肉内注射に
よる非経口投与、または錠剤、カプセル剤、顆粒
剤、散剤、シロツプ剤等による経口投与または軟
膏による経皮投与をあげることができる。本抽出
物の投与量は投与経路、患者の年令、体重、症状
によつて異なるが成人男子に対して１日約１〜５
ｇである。
本発明の抽出物は、常法に従つて製剤化され投
与される。例えば、本抽出物の乾燥粉末をバイア
ル等の容器にいれ、別にアンプル等の容器に生理
食塩水、ブドウ糖液あるいはカルボキシメチルセ
ルロース（CMC）懸濁液を用意し、用時粉末を
懸濁溶解して注射する。その他、エマルジヨンに
して注射してもよい。例えば油中水（Ｗ／Ｏ）型
エマルジヨンの場合は流動パラフイン等の鉱物
油、ゴマ油、ピーナツツ油等の植物油にソルビタ
ン脂肪酸エステル等の界面活性剤を組み合せて用
いる。
次に参考例、実施例および試験例をあげて本発
明をさらに具体的に説明する。
参考例 １
センダンの乾燥樹皮30.0ｇにメタノール300ml
を加え室温で１日抽出処理を行なつた。抽出混合
物を過してメタノール抽出液を得た。抽出残渣
に再びメタノール300mlを加え、上記と同様に抽
出処理を行なつた。この操作を計３回行ない、メ
タノール抽出液３回分を集め、ロータリーエバポ
レーターを用いて濃縮乾固し、粉末化した。これ
をメタノール画分とする。メタノール画分585.6
mgが得られた。
参考例 ２
メタノールの代りにエタノールを用いる以外は
参考例１と同様に抽出処理を行ない、506.8mgの
エタノール画分を得た。
参考例 ３
センダンの乾燥樹皮30.0ｇにベンゼン300mlを
加え、室温で１日抽出前処理操作を行なつた。抽
出混合物を過し、残渣に再びベンゼン300mlを
加えて上記と同様に抽出前処理操作を行なつた。
この操作を計３回行ない、ベンゼン抽出液３回分
を集め、ロータリーエバポレーターを用いて濃縮
乾固し、粉末化した。これをベンゼン画分とす
る。抽出前処理操作で得られた抽出残渣にメタノ
ール300mlを加え、室温で１日抽出操作を行なつ
た。抽出混合物を過し、残渣に再びメタノール
300mlを加えて上記と同様に抽出操作を行なつた。
この操作を計３回行ない、メタノール抽出液３回
分を集め、ロータリーエバポレーターを用いて濃
縮乾固し、粉末化して本発明のセンダン樹皮抽出
物を得た。これをメタノール画分とする。ベンゼ
ン画分450.0mg、メタノール画分480.2mgが得られ
た。
参考例 ４
センダンの乾燥樹皮の代りに市販の苦楝皮を使
用する以外は、参考例３と同様に抽出前処理およ
び抽出処理を行なつてベンゼン画分421.1mgおよ
びメタノール画分993.5mgが得られた。
参考例 ５
メタノールによる抽出処理を室温で行なう代り
に加熱還流して行なう以外は参考例３と同様に抽
出前処理および抽出処理を行なつてベンゼン画分
439.2mgおよびメタノール画分521.5mgが得られ
た。
参考例 ６
センダンの樹皮の代りに苦楝皮を使用する以外
は参考例５と同様に抽出前処理および抽出処理を
行なつてベンゼン画分415.9mgおよびメタノール
画分1013.1mgが得られた。
実施例 １
センダン樹皮抽出物1000mgを無菌５％注射用ブ
ドウ糖溶液500mlに溶解し、この溶液を５mlずつ
バイアルに無菌的に分注し、凍結乾燥した。この
ようにして１バイアル中10mgのセンダン樹皮抽出
物を含む抗菌剤を得た。用時、注射用蒸留水に溶
解して使用する。
実施例 ２
上記実施例１と同様にしてバイアル製剤の抗菌
剤をつくつた。ただし、無菌５％注射用ブドウ糖
溶液500mlの代りに生理食塩水500mlを使用た。用
時、注射用蒸留水に溶解して使用する。
発明の具体的作用効果
上記参考例で得られたセンダン樹皮抽出物につ
いて抗菌作用の効果を測定した。
試験例
抗菌活性
参考例４で得られたセンダン樹皮のメタノール
画分について普通寒天を用いた希釈法で常法に従
つて抗菌活性を試験した。結果を表１に示す。表
１に示すように、本メタノール抽出物はグラム陽
性菌に対して抗菌活性を示す。
The present invention relates to a novel antibacterial agent consisting of an extract of Meli bark. The antibacterial agent of the present invention is useful for treating various bacterial infections. [Prior Art] In Chinese medicine, chili bark is called bitter bark and is used in decoction to exterminate roundworms, hookworms, and tapeworms, or to treat malarial fever. However, it has not been previously known that the bark of melium contains components that have antibacterial effects. Purpose of the Invention As a result of intensive research into the pharmacological effects of the components contained in the bark of chili, the present inventors have discovered that the components obtained by extracting the bark from the bark of chili with a specific solvent also exhibit excellent antibacterial activity. I knew. Therefore, an object of the present invention is to provide an antibacterial agent containing an extract of melium bark as an active ingredient. DETAILED DESCRIPTION OF THE INVENTION The extract of the present invention is obtained by extracting the bark of Melium with a polar organic solvent. In the present invention, melium bark refers to melium (Melia azedarach L.var, Japonica Makino),
Melia azedarach L. or Melia azedarach var.
toosendan Makino) bark. The bark is desirably dried and shredded, and commercially available bittern bark is preferably used. The melium bark extract of the present invention can be obtained by adding a polar organic solvent to the bark, performing an extraction treatment at room temperature or heating, filtering the extraction mixture, and distilling off the solvent from the liquid. Examples of polar organic solvents used as extraction solvents include methanol,
Examples include alcohols such as ethanol, n-propanol, isopropanol, and n-butanol, pyridine, and acetone. Alcohols are preferred, especially methanol or ethanol. The extraction treatment time is appropriately determined according to the type, quality, etc. of the raw materials, but is usually about several hours to two days. In the extraction process of the melium bark of the present invention, by pre-extracting the melium bark with a non-polar organic solvent prior to the extraction process with a polar organic solvent, unnecessary components are removed and a highly effective melium bark extract is obtained. can get. Examples of non-polar organic solvents used in the extraction pretreatment include benzene, toluene, xylene, n-hexane, chloroform, carbon tetrachloride, ethyl acetate, and the like. Pre-extraction treatment is
This is done by adding the above-mentioned solvent to the melium bark and extracting and removing unnecessary components by heating at room temperature or heating. Pre-extraction treatment usually lasts from several hours to two days. After the extraction pretreatment, the mixture is filtered and the residue is subjected to an extraction step. The characteristics of the melium bark extract in the present invention are as follows. (1) Color and shape Brown powder (2) Ultraviolet absorption spectrum As shown in Figure 1 (Example 4 methanol fraction). UVλ MeOH nax 293 nm (alkaline conditions) 280 nm (acidic conditions) 279 nm (neutral conditions) (3) Infrared absorption spectrum As shown in Figure 2 (Example 4 methanol fraction). IRν KBr nax cm -1 : 1610, 2930, 3350-3400 (4) Solubility Soluble in methanol, ethanol, benzene,
Insoluble in ethyl acetate. (5) Acute toxicity When administered intraperitoneally to ICR male 4-week-old mice (body weight 20±1 g), the LD 50 was 260 mg/Kg. The melium bark extract of the present invention is useful for the treatment of various bacterial infections, and its administration forms include parenteral administration, such as subcutaneous injection, intravenous injection, and intramuscular injection, or tablets, capsules, and granules. Examples include oral administration in the form of tablets, powders, syrups, etc., and transdermal administration in the form of ointments. The dosage of this extract varies depending on the route of administration, age, weight, and symptoms of the patient, but for an adult male, it is approximately 1 to 5 doses per day.
It is g. The extract of the present invention is formulated and administered according to conventional methods. For example, put the dry powder of this extract in a container such as a vial, prepare physiological saline, glucose solution, or carboxymethyl cellulose (CMC) suspension in a separate container such as an ampoule, and suspend and dissolve the powder before use. Inject. Alternatively, it may be injected in the form of an emulsion. For example, in the case of a water-in-oil (W/O) emulsion, a mineral oil such as liquid paraffin, a vegetable oil such as sesame oil or peanut oil, and a surfactant such as sorbitan fatty acid ester are used in combination. Next, the present invention will be explained in more detail with reference to Reference Examples, Examples, and Test Examples. Reference example 1 30.0g of dried melid bark and 300ml of methanol
was added and the extraction process was carried out for one day at room temperature. The extraction mixture was filtered to obtain a methanol extract. 300 ml of methanol was again added to the extraction residue, and the extraction process was carried out in the same manner as above. This operation was performed three times in total, and three portions of the methanol extract were collected, concentrated to dryness using a rotary evaporator, and powdered. This is designated as the methanol fraction. Methanol fraction 585.6
mg was obtained. Reference Example 2 Extraction was carried out in the same manner as in Reference Example 1 except that ethanol was used instead of methanol, and 506.8 mg of ethanol fraction was obtained. Reference Example 3 300 ml of benzene was added to 30.0 g of dried melid bark, and extraction pretreatment was performed at room temperature for one day. The extraction mixture was filtered, 300 ml of benzene was again added to the residue, and the extraction pretreatment operation was performed in the same manner as above.
This operation was performed three times in total, and three portions of the benzene extract were collected, concentrated to dryness using a rotary evaporator, and powdered. This is referred to as the benzene fraction. 300 ml of methanol was added to the extraction residue obtained in the extraction pretreatment operation, and the extraction operation was performed at room temperature for one day. Filter the extraction mixture and add methanol to the residue again.
300 ml was added and the extraction operation was performed in the same manner as above.
This operation was performed three times in total, and three portions of the methanol extract were collected, concentrated to dryness using a rotary evaporator, and powdered to obtain the melium bark extract of the present invention. This is designated as the methanol fraction. A benzene fraction of 450.0 mg and a methanol fraction of 480.2 mg were obtained. Reference Example 4 421.1 mg of benzene fraction and 993.5 mg of methanol fraction were obtained by performing the extraction pretreatment and extraction treatment in the same manner as in Reference Example 3, except that commercially available bittern bark was used instead of the dried bark of melium. Ta. Reference Example 5 The benzene fraction was obtained by performing the extraction pretreatment and extraction treatment in the same manner as in Reference Example 3, except that the extraction treatment with methanol was performed under heating under reflux instead of at room temperature.
439.2 mg and 521.5 mg of methanol fraction were obtained. Reference Example 6 415.9 mg of benzene fraction and 1013.1 mg of methanol fraction were obtained by carrying out the extraction pretreatment and extraction treatment in the same manner as in Reference Example 5 except that bittern bark was used instead of the bark of melium. Example 1 1000 mg of melium bark extract was dissolved in 500 ml of a sterile 5% glucose solution for injection, and 5 ml of this solution was aseptically dispensed into vials and freeze-dried. In this way, an antibacterial agent containing 10 mg of melium bark extract in one vial was obtained. Before use, dissolve in distilled water for injection. Example 2 An antibacterial agent in a vial formulation was prepared in the same manner as in Example 1 above. However, 500 ml of physiological saline was used instead of 500 ml of sterile 5% glucose solution for injection. Before use, dissolve in distilled water for injection. Specific Effects of the Invention The antibacterial effect of the melium bark extract obtained in the above reference example was measured. Test Example Antibacterial Activity The methanol fraction of the melium bark obtained in Reference Example 4 was tested for antibacterial activity by a dilution method using ordinary agar according to a conventional method. The results are shown in Table 1. As shown in Table 1, this methanol extract exhibits antibacterial activity against Gram-positive bacteria.
【表】
−：菌が生育せず〓
〓37℃、24時間後に判定
＋：菌が生育 〓
[Table] −: Bacteria does not grow〓
〓Judgment after 24 hours at 37℃ +: Bacteria grows 〓
【図面の簡単な説明】[Brief explanation of drawings]
第１図は参考例４で得られたセンダン樹皮抽出
物（メタノール画分）の紫外線吸収スペクトルを
示し、第２図は同物質の赤外線吸収スペクトルを
示す。
FIG. 1 shows the ultraviolet absorption spectrum of the melium bark extract (methanol fraction) obtained in Reference Example 4, and FIG. 2 shows the infrared absorption spectrum of the same substance.