JPH01209366A - アミノ酸の分離方法 - Google Patents
アミノ酸の分離方法Info
- Publication number
- JPH01209366A JPH01209366A JP63032691A JP3269188A JPH01209366A JP H01209366 A JPH01209366 A JP H01209366A JP 63032691 A JP63032691 A JP 63032691A JP 3269188 A JP3269188 A JP 3269188A JP H01209366 A JPH01209366 A JP H01209366A
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- JP
- Japan
- Prior art keywords
- separation
- eluent
- amino acid
- column
- amino acids
- Prior art date
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- Pending
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- Treatment Of Liquids With Adsorbents In General (AREA)
Abstract
(57)【要約】本公報は電子出願前の出願データであるた
め要約のデータは記録されません。
め要約のデータは記録されません。
Description
【発明の詳細な説明】
〔産業上の利用分野〕
本発明はアミノ酸の分離方法に係り、特にアミノ酸のイ
オン交換クロマトグラフ装置における圧力変動が少なく
、分離性の優れたアミノ酸の分離に好適な溶離液を用い
たアミノ酸の分離方法に関するものである。
オン交換クロマトグラフ装置における圧力変動が少なく
、分離性の優れたアミノ酸の分離に好適な溶離液を用い
たアミノ酸の分離方法に関するものである。
従来の溶離液は、クエン酸緩衝液が用いられているが、
これのみでは、トレオニン及びセリンの分離が悪く、そ
の改善法として、緩衝液にエチルアルコールを添加して
用いている。イオン交換法で用いる緩衝液は、最低３種
の緩衝液が用いられ、トレオニン及びセリンは初期に溶
出する成分であるため、エチルアルコールは第１緩衝液
に添加され、その量は約１０〜１６％（ｖ／ｖ）の範囲
にある。
これのみでは、トレオニン及びセリンの分離が悪く、そ
の改善法として、緩衝液にエチルアルコールを添加して
用いている。イオン交換法で用いる緩衝液は、最低３種
の緩衝液が用いられ、トレオニン及びセリンは初期に溶
出する成分であるため、エチルアルコールは第１緩衝液
に添加され、その量は約１０〜１６％（ｖ／ｖ）の範囲
にある。
分離能向上、分析時間の短縮をはかろうとするにしたが
い、用いるイオン交換樹脂の粒径を小さくして交率を高
めることが試みられている。このとき、特に問題となる
のはカラム抵抗、すなわち、カラムに緩衝液を流すとき
の圧力上昇である。現在使用しているイオン交換体は、
スチレン／ジビニルベンゼンの共重合体を母体としたも
のがよく、その架橋度は、分難性の面で低いところに抑
える必要がある。 ゛ このため、緩衝液にエチルアルコールを混入したとき、
その膨潤性からカラムの圧力抵抗が上昇する。さらに、
このカラムに流す溶離液は一定のものでなく、グラジェ
ントあるいはステップワイズ法を用いるため、カラム圧
力は常に変動し、充てん剤は徐々に出口側へと詰ってい
き、分離性が低下していく。すなわち、分離カラムの寿
命が短かくなる。
い、用いるイオン交換樹脂の粒径を小さくして交率を高
めることが試みられている。このとき、特に問題となる
のはカラム抵抗、すなわち、カラムに緩衝液を流すとき
の圧力上昇である。現在使用しているイオン交換体は、
スチレン／ジビニルベンゼンの共重合体を母体としたも
のがよく、その架橋度は、分難性の面で低いところに抑
える必要がある。 ゛ このため、緩衝液にエチルアルコールを混入したとき、
その膨潤性からカラムの圧力抵抗が上昇する。さらに、
このカラムに流す溶離液は一定のものでなく、グラジェ
ントあるいはステップワイズ法を用いるため、カラム圧
力は常に変動し、充てん剤は徐々に出口側へと詰ってい
き、分離性が低下していく。すなわち、分離カラムの寿
命が短かくなる。
本発明の目的は、圧力上昇を小さく抑えることができ、
同一の分離性を得ることができるアミノ酸の分離方法を
提供することにある。
同一の分離性を得ることができるアミノ酸の分離方法を
提供することにある。
上記目的は、溶離液である緩衝液にアセトニトリルを添
加した溶離液を用いてアミノ酸を分離するようにして達
成するようにした。
加した溶離液を用いてアミノ酸を分離するようにして達
成するようにした。
アセトニトリルはエチルアルコールに比べ粘性抵抗が小
さく、拡散が速やかであることから、分析成分のピーク
もシャープになり、分離性が向上すると同時に、カラム
圧力低下を満たしてくれる。
さく、拡散が速やかであることから、分析成分のピーク
もシャープになり、分離性が向上すると同時に、カラム
圧力低下を満たしてくれる。
その結果、同一の分離性を得るために添加する量も従来
のエチルアルコール量に対し約２／３以下で同じ効果を
得ることができるため、樹脂の膨潤量も小さく抑えるこ
とができる。
のエチルアルコール量に対し約２／３以下で同じ効果を
得ることができるため、樹脂の膨潤量も小さく抑えるこ
とができる。
以下本発明の方法の一実施例を第１図、第２図を用いて
詳細に説明する。
詳細に説明する。
第１表はアミノ酸分析用第１溶離液組成表で、第１表の
Ａは従来用いているエタノールを添加した溶離液で、Ｂ
はエタノールの代りにアセトニトリルを添加した溶離液
である。この二者の溶離液を用いて得られたクロマトグ
ラムがそれぞれ第１図の（Ａ）、（Ｂ）である。有機溶
媒が混入した溶離液では、グリシンとアラニンが接近し
て分離不良になるが、アセトニトリル系では、この点も
エタノールより優れている。
Ａは従来用いているエタノールを添加した溶離液で、Ｂ
はエタノールの代りにアセトニトリルを添加した溶離液
である。この二者の溶離液を用いて得られたクロマトグ
ラムがそれぞれ第１図の（Ａ）、（Ｂ）である。有機溶
媒が混入した溶離液では、グリシンとアラニンが接近し
て分離不良になるが、アセトニトリル系では、この点も
エタノールより優れている。
第 １ 表
なお、このときの他の分離条件は、次の通りである。分
離カラムサイズ；４．６ｍｍ１．Ｄ、Ｘ６０ｍｍＬ、充
でん剤；日立カスタム陽イオン交換樹脂２６２２ＳＣ，
カラム温度：５７℃、溶離液流量；０．４ｍＱ ／ｍ
１ｎｙカラム圧力；１００〜１２０ｋｇ／ａＪである。
離カラムサイズ；４．６ｍｍ１．Ｄ、Ｘ６０ｍｍＬ、充
でん剤；日立カスタム陽イオン交換樹脂２６２２ＳＣ，
カラム温度：５７℃、溶離液流量；０．４ｍＱ ／ｍ
１ｎｙカラム圧力；１００〜１２０ｋｇ／ａＪである。
第２図はアミノ酸１８成分を分離した例で、第１図はこ
の前段の部分に相当する。また、後段で溶出する成分（
塩基性）に対してアセトニトリルの添加された溶離を用
いると、アンモニア及びアルギニンの溶出が促進される
。
の前段の部分に相当する。また、後段で溶出する成分（
塩基性）に対してアセトニトリルの添加された溶離を用
いると、アンモニア及びアルギニンの溶出が促進される
。
以上説明した本発明によれば、イオン交換樹脂の膨潤及
び溶離液の粘性にともなうカラム圧力上昇が約２／３に
抑えられ、その結果、樹脂の疲労が少なくなり、カラム
の寿命が３倍以上に伸びるという効果がある。
び溶離液の粘性にともなうカラム圧力上昇が約２／３に
抑えられ、その結果、樹脂の疲労が少なくなり、カラム
の寿命が３倍以上に伸びるという効果がある。
また、分離の最終段ｌ；新らたにアセトニトリルを添加
することにより、アンモニア、アルギニンの溶出位置を
特異的に変えることができるという効果がある。
することにより、アンモニア、アルギニンの溶出位置を
特異的に変えることができるという効果がある。
第１図は本発明の方法による場合と従来法とのクロマト
グラム結果の比較を示す図、第２図は本発明の方法によ
る実際のクロマ１〜グラムの全体を示した図である。
グラム結果の比較を示す図、第２図は本発明の方法によ
る実際のクロマ１〜グラムの全体を示した図である。
Claims (1)
- １、溶離液と、該溶離液を送液するポンプと、サンプル
注入部と、分離カラムと、該分離カラムの温度制御機能
とを備えたアミノ酸のイオン交換クロマトグラフ装置に
おいて、前記溶離液である緩衝液にアセトニトリルを添
加した溶離液を用いてアミノ酸を分離するようにしたこ
とを特徴とするアミノ酸の分離方法。
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP63032691A JPH01209366A (ja) | 1988-02-17 | 1988-02-17 | アミノ酸の分離方法 |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP63032691A JPH01209366A (ja) | 1988-02-17 | 1988-02-17 | アミノ酸の分離方法 |
Publications (1)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| JPH01209366A true JPH01209366A (ja) | 1989-08-23 |
Family
ID=12365884
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| JP63032691A Pending JPH01209366A (ja) | 1988-02-17 | 1988-02-17 | アミノ酸の分離方法 |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| JP (1) | JPH01209366A (ja) |
Cited By (3)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| JP2003528602A (ja) * | 2000-03-29 | 2003-09-30 | アーカー−ダニエルズ−ミッドランド カンパニー | 醗酵ブロスから塩基性アミノ酸を分離するための方法 |
| CN104922932A (zh) * | 2015-05-26 | 2015-09-23 | 安徽皖东树脂科技有限公司 | 一种氨基酸提取专用树脂使用方法 |
| CN109507314A (zh) * | 2018-10-29 | 2019-03-22 | 中科谱研（北京）科技有限公司 | 复方氨基酸注射液中钠、钾、镁、钙的离子色谱测定方法 |
-
1988
- 1988-02-17 JP JP63032691A patent/JPH01209366A/ja active Pending
Cited By (4)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| JP2003528602A (ja) * | 2000-03-29 | 2003-09-30 | アーカー−ダニエルズ−ミッドランド カンパニー | 醗酵ブロスから塩基性アミノ酸を分離するための方法 |
| JP2011177709A (ja) * | 2000-03-29 | 2011-09-15 | Archer-Daniels-Midland Co | 醗酵ブロスから塩基性アミノ酸を分離するための方法 |
| CN104922932A (zh) * | 2015-05-26 | 2015-09-23 | 安徽皖东树脂科技有限公司 | 一种氨基酸提取专用树脂使用方法 |
| CN109507314A (zh) * | 2018-10-29 | 2019-03-22 | 中科谱研（北京）科技有限公司 | 复方氨基酸注射液中钠、钾、镁、钙的离子色谱测定方法 |
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