JPH01213309A - マレイミド基含有共重合体 - Google Patents

Abstract

(57)【要約】本公報は電子出願前の出願データであるた
め要約のデータは記録されません。

Description

【発明の詳細な説明】 産業上の利用分野 本発明はマレイミド基を有する新規な共重合体に関する
。

本発明により提供されるマレイミド基含有共重合体は、
医薬としての有用性が注目されているスーパーオキシド
ジスムターゼの血中半減期を延長さ仕るための化学修飾
剤として有用である。また、メルカプト基を有するゲル
担体、例えばチオプロピル−セファロース６Ｂ（商品名
、ファルマシア社製）よりメルカプト基を遊離させた担
体に本発明により提供されるマレイミド基含有共重合体
を反応させて得られる担体は、アルブミンに代表される
生体タンパク質の分離用吸着剤として用いられる。さら
に、本発明により提供されるマレイミド暴食を共重合体
は、メルカプト基を有するポリビニルアルコールの化学
修飾剤として有用である。

末端にメルカプト基を有するポリビニルアルコールに該
マレイミド基含有共重合体を反応させて得られる新規な
高分子化合物（以下、これを新規高分子化合物と称す）
は、他の親水性または疎水性のビニル系高分子化合物と
の相溶性が良好である。

従って、新規高分子化合物と親水性または疎水性のビニ
ル系高分子化合物とのブレンド製品、およびポリビニル
アルコールと疎水性のビニル系高分子化合物とを新規高
分子化合物を加えることによって混和して得られるブレ
ンド製品は、従来ポリビニルアルコールおよび他の親水
性または疎水性のビニル系高分子化合物がそれぞれ有す
る用途分野を併有する。

’ｔｏ’ 従来、スーパーオキシドジスムターゼ［以下、これをＳ
ＯＤと略記するコは動物、植物、微生物などの生体内に
広く存在し、生体に有害なスーパーオキシドを分解する
酵素として知られている。

最近、単離されたＳＯＤを抗炎症剤として用いようとす
る試みがなされている［ファルマシア、１７巻、４１１
頁（１９８１年）およびカレント・セラボイテイツク・
リサーチ（Ｃｕｒｒｅｎｔ　ＴｈｅｒａｐｅｕｔｉｃＲ
ｅｓｅａｒｃｈ）、　１６．７０６（１９７４）参照］
。

ＳＯＤを静脈内投与しｔこ場合、その血中半減期は僅か
４〜６分とされており、ＳＯＤは速かに尿中に排泄代謝
される。ＳＯＤの血中半減期を延長さ仕ろためにＳＯＤ
をフィコール、ポリエチレングリコールまたはアルブミ
ンで修飾し、巨大分子化することが試みられてきたが、
フィコールまたはポリエチレングリコールで修飾された
ＳＯＤではＳＯＤの酵素活性が大幅に低下し、またアル
ブミンで修飾されたＳＯＤには抗原性があることが報告
されている。またイヌリンで修飾されたＳＯＤでは、そ
の血中半減期が大幅に延長されることが知られているが
、同時にＳＯＤに比べて酵素活性の低下が認められる［
特開昭５８−３２８２６号公報参照］。

また本発明者らのうちの１人は、ＳＯＤ分子表面にリジ
ン残基を介してスチレン−マレイン酸骨格を有する疎水
性有機酸構造を酸アミド結合により導入することにより
得られたＳＯＤ誘導体は、血中でアルブミンを主体とす
る血清タンパク質と可逆的に結合・解離し、これによっ
てＳＯＤの血中半減期が延長され、また臓器への移行性
が良好となることを報告した［第３７回タンパク質構造
討論会講演要旨集、６１−６４頁（昭和６１年９月１０
日発行）参照］。

明が解決しようとする課題 上３己のフィコール、ポリエチレングリコール、アルブ
ミンまたはイヌリンで修飾されたＳＯＤはすでに述べた
理由、または巨大分子化に伴う生体組織内浸透性の低下
などの点でいずれも実用上問題がある。

従来知られている種々の修飾ＳＯＤはすべてＳＯＤにそ
の分子内のアミノ基を介して各種の高分子物質を結合さ
せることによって得たものである。

ヒト型ＳＯＤは１分子当りアミノ基を２２個または２４
個有しており、またウシ型ＳＯＤは１分子当りアミノ基
を２０個有する。このようにＳＯＤは多数のアミノ基を
存しており、ＳＯＤに高分子物質を結合させるに際して
該ＳＯＤ分子内の結合部位となるアミノ基を特定するこ
とは非常に難しい。しかしながら、医薬の有効成分化合
物は単一の化学構造を有する化合物であることが好まし
い状況にあることを考慮すれば、医薬用途に供する修飾
ＳＯＤはＳＯＤ分子内の特定の部位に高分子物質を結合
させ几化学構造を有する化合物であることが望まれる。

ＳＯＤはアミノ基以外に官能基としてメルカプト基を有
している。ヒト型ＳＯＤには反応し得る遊離のメルカプ
ト基は２個存在する。これらのメルカプト基を利用して
ＳＯＤに前記のスチレン−マレイン酸骨格を有する疎水
性有機酸構造を導入することができれば、延長されｆ二
面中半減期と良好な臓器への移行性を有し、かつ単一の
化学構造を存するスーパーオキンドジスムターゼ誘導体
が得られることが期待される。

しかして、本発明の１つの目的は、ＳＯＤの酵素活性を
概ね保持したままで該ＳＯＤに比べて大幅に延長された
血中半減期と良好な臓器への移行性を有し、かつ単一の
化学構造を有する新規な非巨大分子化スーパーオキシド
ジスムターゼ誘導体を与えるＳＯＤの新規な化学修飾剤
を提供するにある。

本発明の他の１つの目的は、生体タンパク質の分離用吸
着剤を与えるメルカプト基を有するゲル担体の新規な化
学修飾剤を提供するにある。

本発明のさらに他の１つの目的は、メルカプト基を宵す
るポリビニルアルコールの新規な化学修飾剤を提供する
にある。

課題を解決するための　段 本発明によれば、上記の目的は、 よびＲＳはそれぞれ水素原子またはメチル基を表わし、
Ｒ″は水素原子、塩素原子、臭素原子またはメチル基を
表わし、Ｒ４は水素原子、炭素数１ないし６のアルキル
基または炭素数３ないし６のシクロアルキル基を表わし
、Ｒ１はメチル基またはエチル基を表わす）で示される
基からなる群から選ば、れる基ならびに （ロ）　　−ＣＨ−Ｃ）ｌ　− ＣＯＯＲ’　　Ｃ０ＯＨ（式中、Ｒ７は水素原子を表わ
ずか、または炭素数１ないし８のアルカノール、炭素数
ｌないし４のアルキル基部分を含むニチレングリコール
モノアルキルエーテルもしくは炭素数１ないし４のアル
キル基部分を含むグリセリンジアルキルエーテルから水
酸基を除いた残基を表わす）で示される基を構成単位と
し、かつ（ハ）片末端に ■ （式中、Ｗは２価の有機基を表わす）で示される基を有
するか、または構成単位間に −ＣＩ−ＣＩ−［式中、Ｑ目およびＱｆｉｌは一方が力
Ｑ”Ｑ″′ ルボキシル基、他方が ＩＣ−Ｃ ＼ 運 ことを条件にカルボキシル基または 噸 −Ｎ−（式中、Ｒ８は水素原子もしくは炭素数１ないし
４のアルキル基を表わす）で示される基または　−ＮＨ
−Ｃ−ＮＨ−で示される基で中断されてい〇 てもよい二価の炭化水素基を表わす］で示される基を有
し、かつ平均分子量が４００ないし２０．０００である
共重合体（以下、これをマレイミド基含有共重合体と称
す）を提供することによって達成される。

マレイミド基含有共重合体において、Ｗで表わされる有
機基はマレイミド基の窒素原子の結合手と、構成単位（
イ）および（ロ）からなる共重合体とを連結させるもの
である。マレイミド基と該共重合体とを連結させる方法
の一例として、後で詳しく述べるとおり、重合時に加え
られた連鎖移動剤により、該共重合体の片末端には連鎖
移動剤に起因する基が存在するので、この連鎖移動剤に
起因する基にマレイミド基を連結させる方法が挙げられ
る。この場合、種々の連鎖移動剤を用いて、種々の結合
方法によって連結することが可能であるので、有機基は
いろいろな構造であってよい。

マレイミド基含有共重合体において、 ■ ＩＣ−Ｃ ＼ ■ で示される基の代表例として、 Ｑ３−　ＣＩ（−ＣＨ− ＋　　　１　　　　　　　　　　　　　　　（Ｉ−２）
Ｑｌｌ　Ｑｌｌ （これらの式中　ＱｌｌおよびＱｌｌは前記定義のとお
ってあり、Ｑ３は有機基を表わし、Ｑ４およびＱ５はそ
れぞれ水素原子または炭素数１ないし３のアルキル基を
表わし、ＡＩは前記定義のとおりであり、〇 または Ｃ−ＣＨ−Ｓ− ０ないし４の整数を表わす）で示される基などが挙げら
れる。

このマレイミド基含有共重合体は構造上次の３つのタイ
プを含む。

（１）前記（イ）および（ロ）で示される基を構成単位
とし、かつ片末端に式（１−２）で示される基を（ＩＶ
−２）で示される基を有する共重合体［以下、これをマ
レイミド基含有共重合体（１）と弥す］（２）前記（イ
）および（ロ）で示される基を構成単位とし、かつ片末
端に式（ｎ−２）で示される基を有する共重合体［以下
、これをマレイミド基含有共重合体（２）と称す］ （３）前記（イ）および（ロ）で示される基を構成単位
とし、かつ片末端に式（ＩＩＩ−２）で示される基を有
する共重合体［以下、これをマレイミド基含有共重合体
（３）と称すコ マレイミド基含有共重合体は例えば次の１）〜３）の方
法により製造される。

ｌ）マレイミド基含有共重合体（１）の製造構成単位（
イ）に対応する単量体と無水マレイン酸との共重合体を
、その１分子中に無水マレイン酸環が平均０．５〜２個
、好ましくは約１個存在するように常法により片エステ
ル化または／および加水分解する。次に、得られた共重
合体にその無水マレイン酸環において式 （式中、ＡＩは前記定義のとおりである）で示される化
合物を片アミド型で結合させることによりマレイミド基
含有共重合体（１）を得る。このアミド生成反応は通常
炭酸ナトリウム、重炭酸ナトリウム、酢酸ナトリウム、
リン酸ナトリウム、リン酸カリウムなどの塩の水溶液中
で行われるか、またはクロロホルム、１．２−ジクロル
エタン、ジオキサン、テトラヒドロフラン、アセトニト
リル、ジメチルホルホキンド、Ｎ、Ｎ−ジメチルホルム
アミドなどの有機溶媒中で必要に応じて重炭酸ナトリウ
ム、炭酸カリウム、ピリジン、トリエチルアミンなどの
塩基の存在下に行われる。反応を塩の水溶液中で行う場
合には、マレイミド環の安定性の点で、該反応はｐＨ９
以下で水冷下ないし室温までの温度で行うのが好ましく
、特に水冷下に行うのか好ましい。反応時間は通常１時
間ないし１日間である。一般式（Ｖ）で示される化合物
の仕込み量は前記の無水マレイン酸環を有する共重合体
に対して約０．５〜１０倍モル量である。また反応を有
機溶媒中で行う場合には該反応は水冷下ないし約８０℃
までの加温下の温度で約１〜１０時間を要して行う。

一般式（Ｖ）で示される化合物の仕込み量は上記の塩の
水溶液中での反応の場合におけると同様であるが、塩基
を使用する場合のその使用量は該一般式（Ｖ）で示され
る化合物に対して約１〜ｌＯ倍モル量が々子ましい。

２　マレイミド基含有共重合体（２の製造構成単位（イ
）に対応する単量体と無水マレイン酸とをラジカル共重
合反応さ仕ろに際して、式（式中、Ｑ４、ＱＳおよびｍ
は前記定義のとおりであ−ＮＯ３または−ＣＮで示され
る基を表わし、ここでＲ９、ＲＩＯおよびＲ１１はそれ
ぞれ炭素敗亀ないし４のアルキル基を表わす）で示され
る化合物を連鎖移動剤かつ反応溶媒として用い、必要に
応じてオクタン、ベンゼン、アセトンなどの育種溶媒を
共存させろことに上り、片末端に式 （式中、Ｘ、　Ｑ’、Ｑ’およびｌはｉｉ？７記定義の
とおりである）で示される基を有する共重合体を得る。

−般式（ＶＴ）で示される化合物としては、例えばｐ−
エチルベンジル＝アセテート、ｐ−イソブロビルベシジ
ル＝アセテート、５−ｐ−イソプロピルフ。

エニル＝チオアセテート、５−ｐ−イソプロピルベンジ
ルコチオアセテート、ｐ−イソプロピルベンズアルデヒ
ドニジメチルアセタール、ｐ−イソプロピルベンズアル
デヒドニジブチルアセタール、ｐ−ニトロクメン、ｐ−
シアノクメンなどが使用される。得られた共重合体を常
法により片エステル化または／および加水分解し、該共
重合体に存在する無水マレイン酸環を消失させたのち、
その片末端に存在する上記の式（■゛）で示される基に
おけるＸで表わされる基を反応性の官能基Ｙに変換させ
ることにより、片末端に式 （式中、Ｑ“、Ｑ’および１は前記定義のとおりであり
、Ｙはヒドロキシル基、メルカプト基、ホルミル基、ア
ミノ基またはアミノメチル基を表わす）−Ｃ）ｌ（ＯＲ
”　）ｔで示される基は常法により加水分解されてそれ
ぞれヒドロキシル基、メルカプト基またはホルミル基に
変換され、またニトロ基またはシアノ基は常法により還
元されてそれぞれアミノ基またはアミノメチル基に変換
される。共重合体（■）に官能基Ｙを利用してＡ２で表
わされる結合により （式中、ＡＩは前記定義のとおりである）で示される基
を導入することにより、マレイミド基含有共重合体（２
）を得る。結合Ａ！を生ぜしめる反応について次に詳し
く説明する。

■Ｙがヒドロキシル基、アミノ基またはアミノメチル基
である共重合体（■）を用いる場合共重合体（■）に式 （式中、Ａ１は前記定義のとおりである）で示されるカ
ルボン酸の反応性誘導体または式 （式中、八１は前記定義のとおりである）で示されるイ
ソシアナート化合物を反応させることにより、マレイミ
ド基含有共重合体（２）を得る。式（■−１）で示され
るカルボン酸の反応性誘導体としては酸クロリド、酸無
水物、Ｎ−オキシコハク酸イミドエステル、アシルイミ
ダゾール、８−オキンキノリンエステルなどが挙げられ
る。これらのカルボン酸の反応性誘導体と共重合体（■
）との反応は常法に従い水またはクロロホルム、Ｎ、Ｎ
−ジメチルホルムアミド、テトラヒドロフラン、アセト
ン、ベンゼン、アセトニトリルなどの有機溶媒の存在下
、必要に応じてピリジン、トリエチルアミン、重炭酸ナ
トリウムなどの反応助剤の共存下に行われる。この反応
によりＶが　−Ｃ−Ｏ−１であるマレイミド基含有共重
合体（２）が得られる。

また、式（■−２）で示されろイソシアナート化合物と
共重合体（■）との反応は常法に従い、クロロホルム、
テトラヒドロフラン、アセトン、ジメチルスルホキシド
、Ｎ、Ｎ−ジメチルホルムアミドなどの有機溶媒中で室
温ないし使用する溶媒の沸点までの加温下の温度で行わ
れる。この反応によ−ＮＨ−Ｃ−ＮＨ−ＣＨｔ−で示さ
れる基であるマレイミド基含有共重合体（２）が得られ
る。

■Ｙがホルミル基である共重合体（■）を用いる場合 共重合体（■）に式（Ｖ）で示される化合物を反応させ
ることにより、Ａ１が　−Ｎ＝ＣＩ＋−で示される基で
あるマレイミド基含有共重合体（２）を得る。

反応は常法に従いシッフ塩基の生成条件下、すなわち温
和な脱水条件下で行われ、通常クロロホルム、テトラヒ
ドロフラン、アセトニトリルなどの有機溶媒中で行われ
る。この反応を水素化シアノホウ素ナトリウムなどの存
在下に行うか、または得られたＡ！が　−Ｎ＝ＣＨ−で
示される基であるマレイミド基含有共重合体（２）を水
素化シアノホウ素ナトリウムなどで還元することにより
、Ａｔが−ＮＨ−Ｃ１，−で示される基であるマレイミ
ド基含有共重合体（２）を得る。

■Ｙがメルカプト基である共重合体（■）を用いる場合 共重合体（■）に式 （式中、ＡＩは前記定義のとおりである）で示されるビ
スマレイミド化合物［以下、これをビスマレイミド化合
物（ＩＸ）と称す］を反応させることによ雪 マレイミド基含有共重合体（２）を得る。反応は通常水
、クロロホルム、テトラヒドロフラン、エタノール、ア
セトン、アセトニトリルなどの溶媒中で、必要に応じて
ピリジン、トリエチルアミン、重炭酸ナトリウム、重炭
酸アンモニウムなどの反応助剤の存在下に行われる。共
重合体（■）およびビスマレイミド化合物（ＩＸ）の溶
解性、マレイミド環およびメルカプト基の安定性などの
点から、溶媒としてはクロロホルムおよびアセトニトリ
ルを使用するのが好ましい。ビスマレイミド化合物（Ｉ
Ｘ）の使用量は共重合体（■）に対して過剰量が好まし
く、通常１．５〜ｌＯ倍モル量、より好ましくは３〜５
倍モル量である。反応は水冷下ないし室温までの温度で
約１−１０時間を要して行う。

３　マレイミド基　　共電ム　３の”□構成単位（イ）
に対応する単量体と無水マレイン酸とをラジカル共重合
反応させるに際して、式１式％（） （式中、ＡＩは前記定義のとおりであり、ＲＩ２は炭素
数１ないし４のアルキル基を表わす）で示される化合物
を連鎖移動剤かつ反応溶媒として用い、必要に応じてオ
クタン、ベンゼン、エチルベンゼン、クメン、アセトン
などの有機溶媒を共存させることにより、片末端に式 ％式％（） （式中、ＡｌおよびＲ目は前記定義のとおりである）で
示される基を有する共重合体を得る。一般式（Ｘ）で示
される化合物としては、例えば１．２−二タンノチオー
ル、１．３−プロパンジチオール、１．４−ブタンジチ
オール、２−メルカプトエチルスルワイド、ジ（２−メ
ルカプトエチル）エーテル、２．２°−ジチオビスエタ
ンチオール、１．２−ベンゼンジチオール、１．３−ベ
ンゼンジチオール、３．４−トルエンジチオール、１．
３−ビス（メルカプトメチル）ベンゼン、１，４−ビス
（メルカプトメチル）ベンゼンなどの酢酸、プロピオン
酸、酪酸などとの各片エステルなどが挙げられる。得ら
れた共重合体を常法により片エステル化または／および
加水分解し、該共重合体に存在する無水マレイン酸環を
消失させたのち、その片末端に存在する上記の式（Ｘ゛
）で示される基におけろ末端基Ｒ１″−Ｃ−８−を常法
により加水分解してメルカプト基に変換させることによ
り、片末端に式１式％（［） （式中、Ａ１は前記定義のとおりである）で示される基
を有する共重合体［以下、これを共重合体（ＸＩ）と称
す］を得る。共重合体（ＸＩ）にビスマレイミド化合物
（ＩＩ）を反応させることにより、マレイミド基含有共
重合体（３）を得る。この反応は前記２）の■における
と同様にして行われる。

以上の方法により得られた反応液からのマレイミド基含
有共重合体の分離精製操作を次に説明する。反応を水溶
媒中で行った場合には、得られた反応液をそのままセフ
ァデックスＧ−２５またはセファデックスＧ　−１５（
いずれも商品名、ファルマシア社製）を充填したカラム
に注入し、溶出液として重炭酸アンモニウム水溶液を用
いて約０〜５℃の温度でゲル濾過し、目的とする溶出液
を分取し、凍結乾燥する。また反応を有機溶媒中で行っ
た場合には、得られた反応液を必要に応じてこれより有
機溶媒を除去したのち同様にしてゲル濾過し、目的とす
る溶出液を凍結乾燥するか、または反応液を必要に応じ
てａｍするか、もしくはこれより有機溶媒を除去したの
ち、展開液としてテトラヒドロフラン、クロロホルム、
アセトンなどを用いて行う分取液体クロマトグラフィー
に付し、目的とする溶出液を分取し、凍結乾燥する。か
かる方法によりマレイミド基含有共重合体を分離取得す
ることができる。また反応を水溶媒中で行って得られた
反応液から酸沈澱法により、また反応を有機溶媒中で行
って得られた反応液から該有機溶媒を除去し、その残渣
を水に溶解して得られた水溶液から酸沈澱法により、そ
れぞれマレイミド基含有共重合体を分離取得することが
できる。

次に、前記の構成単位（イ）に対応する単量体と無水マ
レイン酸との共重合体ならびにその片エステル化または
／および加水分解された共重合体の製造方法について説
明する。

構成単位（イ）に対応する単量体と無水マレイン酸との
ラジカル共重合反応はジクミルバーオキンド、アゾイソ
ブチロニトリル、過酸化ベンゾイル、ｔ−ブチルパーベ
ンゾエートなどの触媒の存在下に行われる。触媒の使用
量は構成単位（イ）に対応する単量体に対して約１−１
０重量％である。ラジカル共重合反応を行うに際して式
（Ｖ［）で示される化合物または式（×）で示される化
合物を連鎖移動剤として用いる場合には、前述のとおり
、該化合物に反応溶媒としての役割を兼ねさせることが
でき、また必要に応じて他の有機溶媒を併用することが
できる。この場合に得られる共重合体は主として前記の
マレイミド基含有共重合体（２）またはマレイミド基含
有共重合体（３）を製造するために使用される。式（Ｖ
ｌ）で示される化合物または式（Ｘ）で示される化合物
の不存在下にラジカル共重合反応を行う場合には、反応
溶媒としてクメン、シメン、トルエン、エチルベンゼン
、アセトン、メチルエチルケトン、テトラヒドロフラン
、ジエチレングリコールジメチルエーテルなどが使用さ
れる。これらの溶媒中、クメン、シメン、トルエンまた
はエチルベンゼンを使用するのが好ましい。

この場合、反応系にベンジルアルコール、ドデシルメル
カプタン、ベンズアルデヒドなどの連鎖移動剤を存在さ
せてもよい。得られる共重合体は前記のマレイミド基含
有共重合体（１）を製造するために使用される。いずれ
の場合においても、無水マレイン酸の仕込み量は構成単
位（イ）に対応する単量体に対して約１〜５倍モル量、
好ましくは約２倍モル量である。かかる割合の構成単位
（イ）に対応する単量体と無水マレイン酸との仕込み総
量は溶液中の１度が約５〜４０重量％、好ましくは約１
０〜３０重量％となろように調整する。反応は約４０〜
１８０℃の範囲、好ましくは約１１０−１６０℃の範囲
の温度で行われる。このラジカル共重合反応は、溶媒中
に無水マレイン酸を溶解させて得られた溶液に上記の温
度下に構成単位（イ）に対応する単量体を触媒とともに
徐々に添加することにより行うのが好ましい。かくして
ラジカル共重合反応させて得られた共重合体は、そのま
ま分別することなく、または分別して分子量分布を狭く
したのち、次の無水マレイン酸環の片エステル化反応ま
たは／および加水分解反応に供される。

構成単位（イ）に対応する単量体と無水マレイン酸との
共重合体における無水マレイン酸環を片エステル化して
得られるエステルとしては、メチルエステル、エチルエ
ステル、プロピルエステル、ｎ−ブチルエステル、ｎ−
ペンチルエステル、イソペンチルエステル、ｎ−ヘキシ
ルエステル、ｎ−ヘプチルエステル、ｎ−オクチルエス
テル、メトキシエチルエステル、エトキシエチルエステ
ル、プロポキシエチルエステル、２−ブトキシエチルエ
ステル、１．３−ジメトキシ−２−プロピルエステル、
２．３−ジメトキシ−１−プロピルエステル、１．３−
ジェトキシ−２−プロピルエステル、２−エトキン−３
−メトキシ−１−プロピルエステル、１．３−ジプロポ
キシ−２−プロピルエステル、１．３−ジブトキシ−２
−プロピルエステル、ベンジルエステルなどが挙げられ
る。これら片エステル化された共重合体は、構成単位（
イ）に対応する単量体と無水マレイン酸との共重合体に
それぞれ対応するアルコールを必要に応じて酢酸リチウ
ムなどの触媒の存在下に約５０〜１２０℃の範囲の温度
で反応させることにより得られる。対応するアルコール
を過剰に用いて、そのアルコールに溶媒として役割を兼
ねさせることができる。また溶媒としてのジオキサン、
テトラヒドロフランなどを使用することかできる。

構成単位（イ）に対応する単量体と無水マレイン酸との
共重合体における無水マレイン酸環の加水分解反応は、
水酸化ナトリウム、水酸化カリウム、重炭酸ナトリウム
などの塩基の水溶液を用いて常法により行われる。反応
液からの目的とする共重合体の分離精製は常法に従いゲ
ル濾過法または酸沈澱法により行われる。

構成単位（イ）に対応する単量体としては、例えばスチ
レン、ｐ−クロロスチレン、ｐ−ブロムスチレン、α−
メチルスチレン；エチレン、プロピレン、α−ブチレン
、イソブチレン、ｌ−ペンテン、２−メチル−１−ブテ
ン、ビニルシクロヘキサン、ｌ−ヘキセン、１−ヘプテ
ン；酢酸ビニル：（メタ）アクリル酸メチル、（メタ）
アクリル酸エチルなどが挙げられる。

前記の式（１−１）および式（１−２）におけるＱ３は
前述のとおり一価の有機基を表わすが、これはラジカル
共重合反応を行って得られた共重合体の末端基を意味す
る。その末端基としては触媒として用いたラジカル反応
開始剤から発生したラジカル基、またはそのラジカル基
が反応溶媒もしくは他の共存物質に連鎖移動して生じた
ラジカル基がなり得る。Ｑ３が表わす一価の有機基とし
ては溶媒に連鎖移動して生じたラジカル基が好ましく、
例えば塩素原子、臭素原子などのハロゲン原子、メトキ
シ基、プロポキシ基などの低級アルコキシル基、メチル
基、メトキンメチル基、ジメトキシメチル基、アセトキ
シメチル基、アセチルチオ基、アセチルチオメチル基、
メトキンカルボニル基などで核置換されていてもよいベ
ンジル基、α−メチルベンジル基、α−エチルベンノル
基、α、α−ジメチルベンジル基などのアルアルキル基
が挙げられる。

ＳＯＤとマレイミド基含有共重合体とをｐＨ６ないし９
の水溶液中で反応させることにより、式％式％］［］ ［式中、［ＳＯＤ］はメルカプト基に換えてメルカプト
基から水素原子を除いた基を１個または２個有するスー
パーオキシドジスムターゼを表わし、［Ｚ］は Ｒ３、Ｒ４、Ｒ５およびＲ＠は前記定義のとおりである
）で示される基からなる群から選ばれる基ならびに（ロ
）　　−ＣＩ　−ＣＦＩ　− Ｉ Ｃ０ＯＲ’　　Ｃ００Ｈ（式中、Ｒ７は前記定義のとお
りである）で示される基を構成単位とし、がっ（ハ）片
末端に 」 （式中、Ｗは２価の有機基を表わし、スクシンイミド環
の炭素原子の結合手は［ＳＯＤ］と結合するものである
ことを意味する）で示される基を有すＣＩ（、−Ｃ ＼ Ｃ）１．−Ｃ ＼ し、＾１は１個以上の酸素原子、硫黄原子、−Ｎ−（式
中、Ｒ＠は水素原子もしくは炭素数１ないし４のアルキ
ル基を表わす）で示される基または−Ｎ１（−Ｃ−ＮＨ
−で示される基で中断されていても― よい二価の炭化水素基を表わし、スクシンイミド環の炭
素原子の結合手は［ＳＯＤ］と結合するものであること
を意味する］で示される基を有し、かつ平均分子量が４
００ないし２０．０００である共重合体の一価の基を表
わし、ｎは［ＳＯＤ］が有するメルカプト基から水素原
子を除いた基の数に対応するｌまたは２の整数を表わす
］で示されるスーパーオキシドジスムターゼ誘導体（以
下、これをＳＯＤ誘導体と称す）を製造することができ
ろ。

（式中、■は前記定義のとおりである）で示される代表
例としては、 ０　　　　　　　　　　　　　　　（ＩＩ−１）（これ
らの式中、ＱｌおよびＱ！は一方がカルボキシル基、他
方が ■ とを条件にカルボキシル基または ■ Ｑ３、Ｑ４、Ｑ５、Ａｌ、　Ａｌおよびｍはそれぞれ前
記定義のとおりである） ＳＯＤとマレイミド基含有共重合体との反応は、通常ト
リス（ヒドロキシメチル）アミノメタン塩酸塩、炭酸ナ
トリウム、重炭酸ナトリウム、酢酸ナトリウム、リン酸
ナトリウムなどの塩の水溶液中にＳＯＤを溶解し、得ら
れた溶液に粉末状のマレイミド基含有共重合体またはジ
メチルスルホキンドなどの何機溶媒に溶解したマレイミ
ド基含有共重合体を添加することにより行われる。反応
中、溶液のｐ）Ｉは６〜ｌＯ好ましくは６〜９に維持さ
れていることが必要であり、ｐｌ（が６より低い場合に
は、マレイミド基含有共重合体の溶解性か低下して反応
は進行し難くなる。また、ｐＨ７＞（ｔｏより高い場合
には、マレイミド基含有共重合体においてマレイミド環
の開裂が起る。反応温度としては室温以下の温度が好ま
しく、−５℃〜＋５℃の範囲の温度がさらに好ましい。

また、反応時間は反応温度、マレイミド基含有共重合体
の添加方法により異なるが、通常１０分〜１日間である
。マレイミド基含有共重合体の使用量はＳＯＤ１モルに
対して約０．５〜３０モルの範囲である。

このようにして得られた反応液にはＳＯＤ誘導体と未反
応のＳＯＤおよびマレイミド基含有共重合体などが存在
するが、かかる反応液を濾過し、濾液をゲル濾過し、得
られるＳＯＤ誘導体を含む溶出液を必要に応じてハイド
ロフォービック・カラムクロマトグラフィー、アフイニ
テイカラムクロマトグラフイー、イオン交換カラムクロ
マトグラフィーなどに付したのち限外濾過に付すること
により濃縮したのち、凍結乾燥することによりＳＯＤ誘
導体の固型物を取得することができる。

上記の反応により、ＳＯＤが有するメルカプト基とマレ
イミド基含有共重合体が有するマレイミド環とが付加反
応により結合し、ＳＯＤ誘導体が生成する。ＳＯＤとマ
レイミド基含有共重合体との結合部分の代表例を構造式
で次に示す。なお式中、［Ｚ１］および［Ｚ！］はマレ
イミド基含有共重合体の主鎖を表わす。

（ｉ）［Ｚ］が片末端に式（１−１）で示される基（Ｉ
Ｖ−１）で示される基を有する場合０ＣＩＨ・ 唱 （ｉｉ）［Ｚ］が片末端に式（Ｉ［−１）で示される基
または式（［−１）で示されろ基を有する場合Ｕす 本発明のマレイミド基含有共重合体には１分子中に通常
マレイミド環がＩＩＩＮ存在し、またＳＯＤが有するメ
ルカプト基については、ヒト型ＳＯＤには反応し得ろ遊
離のメルカプト基は２個存在する。それゆえに、上記の
反応の条件により、ヒト型５ＯＤ１分子当りマレイミド
基含有共重合体が１分らしくは２分子量合した５ＯＤｉ
導体またはそれらＳＯＤ誘導体の混合物が得られる。か
かるＳＯＤ誘導体の混合物を医薬の有効成分化合物とし
て用いることに不都合はない。しかしながら、医薬の有
効成分化合物は単一の化学構造を有する化合物であるこ
とが好ましい状況にあることを考慮すれば、上記の５Ｏ
ＤＩ導体の混合物をカラムクロマトグラフィーなどの操
作に付し、分離された各々のＳＯＤ誘導体を医薬の有効
成分化合物として用いることが好ましい。なお、前記の
反応および反応後の処理において、ＳＯＤ誘導体が有す
るカルボキシル基がアルカリ金属塩またはアンモニウム
塩を形成する可能性があるが、かかる塩を形成したカル
ボキシル基を有するＳＯＤ誘導体も医薬の有効成分化合
物として用いることに不都合はない。

ＳＯＤ誘導体は５ＯＤ１分子当り高々２分子のマレイミ
ド基含有共重合体が結合して得られたものであり、ＳＯ
Ｄの酵素活性が高く保持され、かつ血中半減期が大幅に
延長されるなどの特徴を有する。

ＳＯＤは動物（ヒト、ランなど）、植物、微生物などの
生物中に含まれているものを公知の方法によりそれぞれ
の生物体から抽出されたもの、または遺伝子工学の手法
を用いて取得されたものなどである。ＳＯＤの化学構造
（配位金属、分子量、アミノ酸配列など）はかなり解明
されてきており、ＳＯＤはＦｅ配位ＳＯＤ、Ｍｎ配位５
ＯＤ１Ｃｕ・Ｚｎ配位ＳＯＤの３種類に分類され、存在
している生体組織によって異なるが３万〜８°万の分子
量を有している。ＳＯＤのアミノ酸配列も存在している
生体組織によって若干相異しているが、その詳細は「ス
ーパーオキサイドと医学」（犬柳善彦著、共立出版刊、
昭和５６年５月２５日発行）；ジャーナル・オブ・バイ
オロジカル・ケミストリー（Ｊｏｕｒｎａｌ　　ｏｒ　
Ｂｉｏｌｏｇｉｃａｌ　　Ｃｈｅｍｉｓｔｒｙ）　　、
　　２４６゜２８７５〜２８８０　（１９７１）　；同
凪、　６１０７〜６１１２　（１９７５）；プロノーデ
イングズ・オブ・ザ・ナショナル・アカデミイ・オブ・
サイエンス（Ｐｒｏｃｅｅｄｉｎｇｓ　ｏｒｔｈｅ　Ｎ
ａｔｉｏｎａｌ　Ａｃａｄｅｍｙ　ｏｆ　５ｃｉｅｎｃ
ｅｓ）　、　７０．３７２５〜３７２９　（１９７３）
　；アルカリ金属・オブ・バイオケミストリー・アンド
・バイオフィジックス（＾ｒｃｈｉｖｅｓ　ｏｆ　Ｂｉ
ｏｃｈｅｍｉｓｔｒｙ　ａｎｄ　Ｂｉｏｐｈｙｓｉｃｓ
）　。

旦Ｌ２４３〜２５６　（１９７７）などの文献の記載を
参照されたい。ヒト型のＣｕ−Ｚｎ配位ＳＯＤは分子量
が３１．２００であり、反応性の遊離のメルカプト基が
２個存在する。このヒト型ＳＯＤは、例えば、ヒトの血
液を順次熱処理、イオン交換、グル濾過に付することに
より、また遺伝子工学の手法を用いることによって取得
される。

本発明のマレイミド基含有共重合体はいずれも疎水性基
と親水性基の両者を持つことによる適度な疎水性を有し
、かつ極性の高いカルボキシル基を有する。したがって
、かかるマレイミド基含有共重合体が結合しているＳＯ
Ｄ誘導体は血清蛋白および生体膜との可逆的な結合性を
有しており、このことにより血中半減期が延長され、ま
た臓器への移行性が良好となる。なかでも構成単位（イ
）としてスチレン由来の基を有する５ＯＤｉ導体および
構成単位（ロ）として片エステル化された基を有するＳ
ＯＤ誘導体は疎水性がより高く、これらの効果を発現す
る点で好ましい。

マレイミド基含有共重合体において、構成単位（イ）と
構成単位（ロ）の構成モル比「（イ）／（ロ）」は実質
的に約１−１．３の範囲であることが好ましく、通常は
１である。構成モル比が１よりも小さいものは構成単位
（イ）に相当する単量体と無水マレイン酸との共重合で
得ることは困難である。また、構成モル比が１．３より
も大きいものは、構成単位（ロ）が片エステル化された
ものである場合、かかるマレイミド基含有共重合体を塩
の水溶液中に溶解させてＳＯＤと反応させる際に、マレ
イミド基含有共重合体の水溶液への溶解性が不良となる
ので好ましくない。

上記のマレイミド基含有共重合体の重量平均分子量は通
常４００〜２０，０００の範囲である。このマレイミド
基含有共重合体から得られるＳＯＤ誘導体の疾患局所へ
の移行性の点から、マレイミド基含有共重合体の重量平
均分子量は３，０００以下であることが好ましい。マレ
イミド基含有共重合体の分子量分布については特に制限
はないが、重量平均分子量と数平均分子量との比が約１
０２ないし１．３の範囲にあるマレイミド基含有共重合
体が医薬の有効成分化合物として好ましいＳＯＤ誘導体
を与える。

ＳＯＤ誘導体は後述の試験例２の結果から明らかなよう
に優れた抗不整脈作用を有する。またＳＯＤ誘導体は抗
炎症作用、抗ａ瘍作用、抗虚血障害作用、抗脳浮腫作用
などの薬理作用をも有する。

また、ＳＯＤ誘導体は毒性試験においてら低毒性である
ことが確認されている。

以上の結果より、ＳＯＤ誘導体は活性酸素ラジカルが関
与する種々の疾患に対して有効であり、特に抗炎症剤、
抗潰瘍剤、虚血性疾患治療剤、脳浮腫治療剤、パラコー
ト中毒治療剤として使用することができる。またＳＯＤ
誘導体は活性酸素ラジカルに起因する制癌剤の副作用を
軽減するための医薬としても有用である。

ＳＯＤ誘導体の投与量は疾病、吃音の重篤度、薬物に対
する忍容性などにより異なるが、通常成人１日あたり０
．１〜５００ｍｇ、好ましくは０．５〜１ＯＯＢの量で
あり、これを１回または分割して投与するのがよい。投
与に際しては投与ルートに適した任意の形態をとること
ができる。

ＳＯＤ誘導体は任意慣用の製剤方法を用いて投与用に調
製することができる。ＳＯＤ誘導体を少なくともＩＰ！
含有する医薬組成物は任意所要の製薬用担体、賦形剤な
どの医療上許容される添加剤などを使用して慣用の手段
によって調製される。

この組成物が経口用製剤である場合には、該製剤は消化
管からの吸収に好適な形態で提供されるのか望ましい。

経口投与の錠剤およびカプセルは単位量投与形態であり
、結合剤、例えばシロップ、アラビアゴム、ゼラチン、
ソルビット、トラガカント、ポリビニルピロリドンなど
：賦形薬、例えば乳糖、とうもろこし澱粉、りん酸カル
シウム、ソルビット、グリツツなど：潤滑剤、例えばス
テアリン酸マグネシウム、タルク、ポリエチレングリコ
ール、シリカなど；崩壊剤、例えば馬鈴薯澱粉など二ま
たは許容し得る潤湿剤、例えばラウリル硫酸ナトリウム
などのような慣用の賦形剤を含有していてもよい。錠剤
は当業界において周知の方法でコーティングしてもよい
。経口用液体製剤は水性または油性懸濁剤、溶液、シロ
ップ、エリキシル剤、その他であってもよく、あるいは
使用する前に水または他の適当なビヒクルで再溶解させ
る乾燥生成物であってもよい。このような液体製剤は普
通に用いられる添加剤、例えば懸濁化剤、例えばソルビ
ットシロップ、メチルセルロース、グルコース／糖シロ
ップ、ゼラチン、ヒドロキンエチルセルロース、カルボ
キンメチルセルロース、ステアリ“ン酸アルミニウムゲ
ル、水素化食用詣など；乳化剤、例えばレンチン、モノ
オレイン酸ソルビタン、アラビアゴムなど；非水性ビヒ
クル、例えばアーモンド浦、分別ココナツト油、油性エ
ステル、ブｄピレングリコール、エチルアルコールなど
；防腐剤、例えばｐ−ヒドロキシ安息香酸メチル、ｐ−
ヒドロキシ安息香酸プロピル、ソルビン酸などを含有し
てもよい。

また注射剤を調製する場合には、ＳＯＤ誘導体を生理食
塩水、注射用ブドウ糖液などの溶剤に溶とする。調製時
に必要により水溶液にｐｉ調製剤、緩衝剤、安定化剤、
保存剤、可溶化剤などを添加することができる。　上記
の医薬組成物は、その形態等に依存して、ＳＯＤ誘導体
を一般に約０．０１〜５０重量％、好ましくは約０．１
〜２０重量％の濃度で含有することができる。

実施例 以下に、実施例により本発明を説明する。なお、本発明
はこれらの実施例により限定されるものではない。本発
明のマレイミド基含有共重合体とＳＯＤとからＳＯＤ誘
導体を製造した例を参考例として示し、ＳＯＤ誘導体の
生化学的特性を試験例として示す。実施例中、マレイミ
ド基含有共重合体のマレイミド基含有量は４Ｐ　Ｄ　Ｓ
　（４，４′−ジヂオノピリジン）法により測定した。

実施例１ １．６−ジアミツヘキサン２３．２０ｇ　（０，２０ｍ
ｏｌｅ）をジオキサン９０−に溶解して得られた溶液に
、２−（ｔ−ブトキシカルボニルチオ）−４，６−シメ
チルピリミジン２４．６０ｇ　（０，ｌＯｍｏｌｅ）を
ジオキサン１００ｍＱに溶解して得られた溶液を攪拌下
に３時間を要して徐々に滴下した。滴下終了後、−夜＠
拌を続けた。反応液から沈澱物を濾別し、その１ｍを約
１００ｍ９に濃縮した。その濃縮液に水１５ＱｍＱを加
え、析出したビス（Ｎ、Ｎ’−ｔ−ブトキシカルボニル
）−１，６−ツアミノヘキサンの沈澱物を濾別し、その
濾液を減圧下に約１／２の容積となるように濃縮した。

そのａ縮液に塩化ナトリウム４０ｇを加え、酢酸エチル
５０ｍＱで４回抽出した。それらの抽出液を合し、これ
より酢酸エチルを減圧下に留去した。

得られた残留物を水１００ｍＱに溶解し、その水溶液に
ＩＮ塩酸を加えて水溶液のｐＨをほぼ３に調整した。

次いで、この水溶液を酢酸エチルで数回洗滌したのち、
水層に塩化ナトリウムを加えることにより、Ｎ−ｔ−ブ
トキンカルボニル−１，６−シアミツヘキサン塩酸塩を
析出させた。その収量は１５．１０ｇ［２−（ｔ−ブト
キシカルボニルチオ）−４，６−ジメチルピリミジンを
基準として算出した収率：６０％］であった。

Ｎ−ｔ−ブトキシカルボニル−１，６−ジアミツヘキサ
ン塩酸塩５．１５ｇ　（２０ｍｍｏｌｅ　）　　、無水
マレイン酸１．９５ｇ　（２Ｏｍｍｏｌら）　およびト
リエチル、アミン２、０３ｇ　（２０ｍｍｏｌｅ　）　
　をクロロホルム７５ｍ１２に加えて加熱還流下に４時
間反応させた。反応終了後、反応液から減圧下に溶媒を
留去し、その残留物に無水酢酸ナトリウム６、３０ｇお
よび無水酢酸６５−を加え、約９０℃の温度で４時間反
応させた。反応液を室温まで冷却し、沈澱物を濾去し、
この濾液から減圧下に溶媒を留去した。その残留物をア
セトンとｎ−ヘキサンの容積比が２対８の混合液を展開
液として用いるシリカゲルカラムクロマトグラフィーに
付することにより、６−（Ｎ−マレイミド）−Ｎ’−ｔ
−ブトキシカルボニル−１−アミノヘキサンを２．４８
ｇ　（Ｎ　−ｔ−ブトキシカルボニル−１，６−シアミ
ツヘキサン塩酸塩を基準として算出した収率：４１％）
得た。

６−（Ｎ−マレイミド）−Ｎ’−ｔ−ブトキシカルボニ
ル−１−アミノヘキサン２Ｊ６ｇ　（８，０開ｏｌｅ　
）を４Ｎ塩酸・ジオキサン溶液１Ｂ、８ｍＣに加え、１
５℃の温度で１時間攪拌した。得られた反応液にジエチ
ルエーテルＬ２Ｑｍ４を加え、３０分間攪拌したのち、
析出した沈澱物を濾別した。この沈澱物をクロロホルム
とメタノールの混合溶媒で再結晶することにより、下記
の物性値を有するＮ−（６−アミノヘキシル）マレイミ
ド塩酸塩を１．４０ｇ　［６（Ｎ　−マレイミド）　　
Ｎ′ｔ−ブトキシカルボニル−１−アミノヘキサンを基
準として算出した収率ニア６％コ得た。

融　　　　　　　　　点　・　１５６〜１５８°Ｃ元素
分析値（％）： 実測値：　Ｃ５１，３６，Ｈ７，４８，Ｎ１１．９２．
　Ｃ１４，９８計算値　Ｃ５１，６１，Ｈ７，３６，Ｎ
１２．０４．Ｃ１５，２３無水マレイン酸３８３．Ｏｇ
　（３，９０ｍｏｌｅ）をクメン３．７１２に加えてク
メン還流下に攪拌した。この溶液にジクミルパーオキシ
ド１６．３ｇ　（６０ｍｍｏｌｅ　）　　およびスチレ
ン２０３．０ｇ　（１，９５ｍｏｌｅ）をクメン１．７
Ｑに溶解させて得られた溶液を約４０分間を要して徐々
に滴下した。滴下終了後、１時間加熱攪拌を続けた。

得られた反応液を一夜静置し、上澄液を除去したのち、
容器に付着した粘稠生成物をアセトンに溶解させて回収
した。得られた回収液からアセトンを減圧下に留去して
スチレン−無水マレイン酸共重合体を３５３．０ｇ得た
。

スチレン−無水マレイン酸共重合体１２０．０ｇをアセ
トン３．０Ｑに溶解し、この溶液にｎ−ヘキサン４．９
Ｑを攪拌下に約１時間で滴下した。白濁したアセトンと
ｎ−ヘキサンとの混合液を別の容器に移し、この混合液
にｎ−ヘキサン９．７Ｑを攪拌下に約１．５時間を要し
て滴下した。容器の器壁に付着したアメ状物をアセトン
に溶解させて回収した。得られた回収液からアセトンを
減圧下に留去しｆこのち、その残留物を７０〜８０°Ｃ
の温度で一夜真空乾燥を行い、分別沈澱されたスチレン
−無水マレイン酸共重合体を４９２ｇ得た。

分別沈澱されたスチレン−無水マレイン酸共重合体４０
．０ｇをアセトン１０１２に溶解し、この溶液に表面シ
ラン処理をしたガラスピーズ（平均粒径０．１ｍｍ）　
３．８ｋｇを加えたのち、アセトンを蒸発させることに
よりガラスピーズ表面に分別／１ｅＸ）されｒ二スチレ
ン−無水マレイン酸共重合体を付着されに。

このガラスピーズを内径８０＋ｎｆｆ１．長さ８０ｃｍ
のカラムにアセトンとｎ−ヘキサンとの混合液（２５℃
における容積比が２４対７６であるもの）　１．４ｇと
ともに充填し、カラム系のｌ１度を２５℃に保ちつつ２
種の容積比のアセトンとｎ−ヘキサンとの混合液［アセ
トンとｎ−へキチンとの２５℃における容積比が（ｉ）
２４対７６の混合液１．６Ｑおよび（ｉｉ）３７対６３
の混合液６．０Ｑの順で］、次いでアセトン３．ＯＱの
順でカラムの上部より滴下供給した。上記のアセトンと
ｎ−ヘキサンとの容積比が３７対６３の混合液の流出分
を集めた。この流出分から減圧下に低沸点物を留去し、
ついで７０〜８０℃の温度で一夜真空乾燥することによ
り、分別されたスチレン−無水マレイン酸共重合体を３
１．８ｇ得た。このもののゲルパーミェーションクロマ
トグラフィー（以下、これをＧＰＣと略称する；溶出液
としてテトラヒドロフランを用い、標準物質としてポリ
スチレンを用いた。

以下間＋＊）による分析で重量平均分子！（Ｒｗ）およ
び数平均分子量（Ｉｉ；Ｉｎ）を求めたところ、Ｍｗは
１３４０であり、Ｍｎは１２２０であった（Ｒｗ／ｎｎ
＝１．１０）。蒸気圧浸透圧計による測定ではｎｎは１
２１０であった。また得られた分別されたスチレン−無
水マレイン酸共重合体中の構成単位である無水マレイン
酸環の含有率を電位差滴定法により求めたところ、４７
．３モル％であった。

分別されたスチレン−無水マレイン酸共重合体ｌＱ、ｏ
Ｏｇ、　ｎ−ブチルアルコール２．２０ｇ、無水酢酸リ
チウムＯ，ｌＯｇおよびジオキサン２ＱｍＱを磁気攪拌
子を備えた約４０１容のアンプルに仕込み封管した。

このアンプルの内容物を攪拌下に９０℃の温度で２０時
間加熱した。得られた反応液の一部をサンプリングし、
反応夜中の未反応ｎ−ブチルアルコール量をエチルセロ
ソルブを内部標準としてガスクロマトグラフィーにより
定量し、仕込みｎ−ブチルアルコールの反応率から共重
合体中に存在していた無水マレイン酸環の片ブチルエス
テル化度を算出したところ６２％であった。次に、反応
液をジオキサン２０ｍρで希釈し、この希釈液をｎ−ヘ
キサン４００ｍＱ中に滴下して再沈澱の操作を行い、得
られた沈澱を回収して約６０℃の温度で一夜真空乾燥す
ることにより、目的とする部分片ｎ−ブチルエステル化
されたスチレン−無水マレイン酸共重合体を１１．５０
ｇ得た。このものの赤外線吸収スペクトル（ＦＴ−ＩＲ
，ＫＢｒディスク法、以下同様）の１７８０ｃｍ−’お
よび７００ｃｍ−’における吸収強度を基にして残存無
水マレイン酸環の含有率を求めたところ、３０．３モル
％（１分子中に無水マレイン酸環が平均１．８個存在）
であった。またＧＰＣ分析から、このらののｎｗは１５
３０であり、ｎｎは１４４０であった（　Ｍ　Ｗ／　Ｆ
？ｉ　ｎ＝　１．０６）。

上記（ｂ）で得られた部分片ｎ−ブチルエステル化され
たスチレン−無水マレイン酸共重合体８００ｍｇ　（０
，５ｍｍｏｌｅ　）　　を０．８Ｍ重炭酸ナトリウム水
溶液８．０ｍｆ２に加え、約３℃の温度で３．５時間攪
拌することにより、該共重合体中の無水マレイン酸環を
１分子当り平均１個程度になるように開環させた。

この反応液に上記（ａ）で得られたＮ−（８−アミノへ
キンル）マレイミド塩酸塩１１６ｍｇ　（０，５ｍｍｏ
ｌｅ　）を添加し、約３℃の温度で２４時間反応させた
。得らシーた反応液の一部をサンプリングし、アミノ基
の反応率をＴＩＢＳ（トリニトロベンゼンスルホン酸ナ
トリウム）法によ：）側定しｆこところ、８９％であっ
た。この反応液を濾過し、そのご液をセファデックスＧ
　−１５（５ｅｐｈａｄｅｘ　Ｇ　−Ｉｓ　：商品名、
ファルマシア社製）を担体とするゲル濾過［カラム：　
Ｋ　５０／６０　（ファルマシア社製）、溶出液・５　
ｍ　Ｍ重炭酸アンモニウム水溶液と５ＬＩＩＭ炭酸アン
モニウム水溶液の容積比か６対４の混合液、＠速度：　
１１．Ｑａｍ／ｈｒｉに付し、目的とする溶出分を分取
し、凍結乾燥することにより、下記の物性値を宵するマ
レイミド基含有共重合体、すなわち、構成里位はｎ−ブ
チル基まＬは水素原子を表わす）で示ざ（式中、Ｑｌｌ
およびＱ！Ｉの一方はカルボキシル基を基を表わす）で
示される基を有する共重合体と、Ｃ００Ｒ７ｄｏＯＨ （式中、Ｒ７はｎ−ブチル基または水素原子を表ねす）
で示されろ基を有し、かつその構成単位間に１ｌＱｔ１ す で示される基を表わす）で示される基を有する共重合体
との混合物を６００ｍｇ得た。このもののマレイミド基
含有量は共重合体１分子当り平均０．７（［！てあった
。

紫外部吸収スペクトル：λ　ｍａｘ　３０５ｎｍ赤外線
吸収スペクトル：　３４４０．２９６０．１７３０゜１
７１０、　１５７０．　１１８０゜ ７００ｃｍ−’ 元素分析値（％、実測値）　：　Ｃ６２，８０，Ｈ６，
９４゜Ｎ３．０４ ＧＰＧ分析より求めた分子量： Ｒｗ＝１８１０゜ Ｑ　ｎ＝　１７００゜ ’；ａ　Ｗ／　Ｆａ　ｎ＝　１．Ｇ６ 実施例２ 実施例１の（ｂ）におけると同様の方法により得られた
スチレン−無水マレイン酸共重合体１０．０ｇをジオキ
サン３０．０ｍ１２に溶解し、次いで、得られた溶液に
水１５．ｌ］ａ１２を加えて、加熱環流下に２４時間攪
拌した。次に、反応液をそのまま凍結乾燥することによ
り、下記の物性値を有する部分加水分解されたスチレン
−無水マレイン酸共重合体を１０．２ｇ得た。このもの
の無水マレイン酸環含有量を実施例１の（ｂ）における
と同様にして赤外線吸収スベクトルの測定により求めた
ところ、共重合体１分子当り平均１．０個であった。

ＧＰＧ分匠より求めた分子量。

Ｍ冑＝　１４６０゜ ＦＡ　ｎ＝　１３４０゜ Ｑ　ｗ／　ＦＪＩ　ｎ＝　１．０９ 実施例Ｉの（ａ）におけると同様の方法により得られた
Ｎ−（６−アミノヘキシル）マレイミド塩酸塩１１６ｍ
ｇ（０，５ｍｍｏｌｅ　）　　を０．８Ｍ重炭酸ナトリ
ウム水溶液８．Ｏｍｅに加え、次いで水冷下に攪拌しな
がら上記（ａ）で得られた部分加水分解されたスチレン
−無水マレイン酸共重合体８ＱＯｍｇ（０，５５ｍｍｏ
ｌｅ）を徐々に添加し、攪拌下に４時間反応させた。得
られた反応液の一部をサンプリングし、アミノ基の反応
率をＴＮＢＳ法により測定したところ７８％であった。

この反応液を実施例１の（ｃ）におけると同様にしてゲ
ル濾過に付し、凍結乾燥することにより、目的とするマ
レイミド暴食宵共重合体、示される基を有し、構成単位
（ロ）として−Ｃ）ｌ　−ＣＨ−で示される基を有し、
かつ片末端ＣＯＯＨＣ００Ｈ 一方はカルボキシル基を表わし、他方はυ で示される基を有する共重合体と、構成単位（イ）とし
て　−Ｃ１（、−ＣＩ（−で示される基を有し、構成単
位（ロ）として　−Ｃ１（−Ｃ）Ｉ−で示される基を有
ＣＯＯ）Ｉ　　Ｃ００ＩＩ し、かつその構成単位間に　−ＣＨ−Ｃ）ｌ−（式中、
ＱＩＩＱ！Ｉ ＱｌおよびＱｔ＋の一方はカルボキシル基を表わし、す
）で示される基を有する共重合体との混合物を５６０ｍ
ｇ得た。このもののマレイミド基含有量は共重合体１分
子当り平均０．６個であった。また、このものの赤外線
吸収スペクトルを第１図に示す。

実施例３ の合成 ６−アミノ−ｎ−カプロン酸１３．２０ｇ　（０，ｌＯ
ｍｏｌｅ）および無水マレイン酸９．８０ｇ　（Ｑ、ｌ
Ｏｍｏｌｅ）をクロロホルム８０Ｊに加え、加熱環流下
に５時間攪拌した。反応液から減圧下にクロロホルムを
留去したのち、その残留物に無水酢酸８０ｍ１２および
無水酢酸ナトリウム２．５０ｇを加え、９０℃のＡ度で
４時間攪拌口ｆ二。得られｆ二反応液を室温まで冷却し
、析出した沈澱物をご去した。濾液から減圧下に溶媒を
留去することにより粘稠な液体を得た。この液体をアセ
トンとｎ−ヘキサンの容積比が２対８の混合液を展開液
として用いるンリカゲルカラムクロマトグラフイーに付
することにより、下記の物性値を有する６−（Ｎ−マレ
イミド）カプロン酸を５．４０ｇ得た。

融点・８４．０〜８５，０°Ｃ 紫外部吸収スペクトル：λ　ｍａｘ　２９８ｎｍ赤外線
吸収スペクトル：　２９４０．１７（１５，１４０６゜
８１８、７００ｃｍ−’ ６−（Ｎ−マレイミド）カプロン酸２５３＋ｏｇ　（１
，２ｍｍｏｌｅ）　、塩化チオニル７１４ｍｇ　（６，
０ｍｍｏｌｅ　）　　およびビリノン１０μＱを蒸留に
よりエタノールを除去したクロロホルム５ｍＣに加え、
室温で５時間攪拌した。

得られた反応液から低沸点を留去することにより、６−
（Ｎ−マレイミド）カプロン酸クロリドを２８３ｍｇ得
几・ 無水マレイン酸４．３０ｇ（４４ｍｍｏｌｅ　）　　を
ｐ−イソブロピルベンジルアセテート３０ｍρに加えて
１５０℃の１度で攪拌下に溶解させた。得られＴこ溶液
にジクミルパーオキンド（１，１６ｇ　（Ｏｊ９ｍｍｏ
ｌｅ　）　　およびスチレン２．３０ｇ　（２２ｍｍｏ
ｌｅ　）　　をｐ−イソプロピルヘンシルアセテート＋
５Ｉｌｆ！に溶解させて得られた溶液を約１７分間を要
して徐々に滴下しｒｓｏｍ下終了後、１５分間加熱攪拌
を続けた。得られた反応液を冷却しｆ二のち、この反応
液をヘキサン２ｇに攪拌下に約３０分間を要して滴下し
た。生成した沈澱物を濾別し、乾燥することにより、片
末端に 得られたスチレン−無水マレイン酸共重合体８、ＯＯｇ
をアセトン１６０−に溶解し、この溶液にｎ　−ヘキサ
ン２４０１を攪拌下に約２０分間を要して滴下しγこ。

白濁したアセトンとｎ−ヘキサンとの混合液を別の容器
に移し、この混合液にｎ−ヘキサン４ＱＱｍｆ２を攪拌
下に約３０分間を要して滴下した。得られたアメ状物を
アセトンに溶解させて回収した。

回収液からアセトンを減圧下に留去したのち、その残留
物を７０〜８０°Ｃの温度で一夜真空乾燥することによ
り、分別沈澱された片末端に Ｃ）１３ＣＯＯＣＲ−Ｉ　Ｃ（ＣＨ３）　！−で示され
る基を有するスチレン−無水マレイン酸共重合体を２．
８０ｇを得た。このらののＧＰＣ分升より求めたＭ　ｗ
は１４６０であり、Ｊａｎは１１９０であつｔ二（Ｆａ
　ｗ／　Ｆａ　ｎ＝　１．２３）。

分別沈澱されたスチレン−無水マレイン酸共重合体Ｌ０
０＆および無水酢酸リチウム１０ｍｇをｎ−ブチルアル
コールＮｒｍＱに加え、９５℃の温度で攪拌下に２０時
間加熱した。得られた反応液から減圧下にｎ−ブチルア
ルコールを留去した。残留物にジオキサンｌｏｍ＋２を
加えて凍結乾燥することにより、片末端にＣＨ，ＣＯＯ
山−Ｑ−Ｃ（Ｃ）１．）　２−　で示されろ基を有し、
かつ片ｎ−ブチルエステル化されたスチレン−無水マレ
イン酸共重合体の白色粉末を１．２０ｇ得た。赤外線吸
収スペクトルの測定結果より、このものには残存無水マ
レイン酸環は認められなかった。またＧＰＣ分析から、
このもののＲｈは１９００であり、ｆａｎは１５４０で
あった（Ｒｗ／Ｑｎ−１，２３）。

得られた片ｎ−ブチルエステル化されｊニスチレンー無
水マレイン酸共重合体１．００ｇをＩＮ水酸化ナトリウ
ム水溶液２Ｑ＋ｎｆ２に加え、室温で４時間攪拌した。

得られた反応液に２．５Ｎ塩酸を攪拌下に徐々に加えて
反応液のｐＨか１ないし２の範囲内になるように調整し
た。析出した沈澱物を濾別し、水洗したのち、アセトン
２０ｍｇに溶解させた。得られた溶液に２．５Ｎ塩酸１
−を加え、均一な酸性溶液を得た。この酸性溶液に水３
０ｍ１！を加えたのち、これより減圧下にアセトンを留
去し、析出した沈澱物を濾別し、水洗しｔ；のち、乾燥
することにより、下記の物性値を有する片末端に ］（ＱＣ）］　ｔ÷Ｃ（ＣＨｓ）ｔ−で示される基を有
し、かつ片ｎ−ブチルエステル化されたスチレン−無水
マレイン酸共重合体を０．８５ｇ得た。

赤外線吸収スペクトル：　３２００．２９６０．１７４
０゜１７１２、１４６０，１１７０゜ ７０８ｃｍ−’ る基を　し、かつ片ｎ−ブチルエステルイされ上記（ａ
）で得られた６−（Ｎ−マレイミド）カプロン酸クロリ
ド２８３ｍｇ（１，２ｍｍｏｌｅ）　　−ピリジン５０
μＱおよび前記（ｂ）で得られた片末端にＨＯＣＨｔ−
ｏ−Ｃ（Ｃ［１，）、−テ示すｈルＭヲ有１．、かつ片
ｎ−ブチルエステル化されたスチレン−無水マレイン酸
共重合体ＩＱＱｍｇ　（０，０５ｍ＋ｅｏｌｅ　）　　
をテトラヒドロフラン２．０ｍｆ！に加え、攪拌下に室
温で５時間反応させた。反応液を濾過し、その濾液をこ
れより未反応６−（Ｎ−マレイミド）カプロン酸クロリ
ドを除去する目的で分取ＧＰＣ（装置：日本分析工業製
ＬＣ−９．カラム：ＪＡＩＧＥＬ　　ｒＨ２０Ｘ　６０
０ｍｍφ２本、溶出液；テトラヒドロフラン）に付し、
得られた目的とする溶出液から減圧下にテトラヒドロフ
ランを留去することにより、固型の反応生成物を１０５
Ｂ得た。次に、このようにして得られた反応生成物を１
）Ｈ８，Ｏのリン酸緩衝液２００ｍＱに加え、室温で３
時間攪拌することにより、６一（Ｎ−マレイミド）カプ
ロン酸クロリドが原料の共重合体のカルボキシル基に反
応して生成した混合酸無水型の結合部分を加水分解した
。反応液に攪拌下に２，５Ｎ塩酸を加えて反応液のｐＨ
が１ないし２の範囲内になるように調整した。析出した
沈澱物を濾別し、水洗したのち、アセトン２０−に溶解
させた。得られた溶液に２．５Ｎ塩酸を０．５ｍ１２加
え、均一な酸性溶液を得た。この酸性溶液に水３０ｍ１
２を加えたのち、これより減圧下にアセトンを留去し、
析出しｆ二沈澱物を濾別し、水洗したのち、乾燥するこ
とにより、片末端に る基を有し、かつ片ｎ−ブチルエステル化されｒニスチ
レンー無水マレイン酸共重合体を８０ｍｇ得た。

このもののマレイミド基含有量は共重合体１分子当り平
均０，４個であった。まｆ二、このものの赤外線吸収ス
ペクトルを第２図に示す。

実施例４ マレイミド暴食　共重合体２）のム成 実施例３の（ｂ）におけると同様にして得られた片末端
に　ＣＩ、Ｃ００Ｃ）１．−ζΣｃ（ｃｏ３）ｔ−で示
される基を有するスチレン−無水マレイン酸共重合体を
同様にして分別沈澱に付した。得られたアメ状物を容器
内に残し、アセトンとｎ−ヘキサンの容積比が２対８の
混合液を別の容器に移し、この混合液から減圧下に溶媒
を留去することにより、粘稠な液体を３．０ｇ得た。次
に、この粘稠な液体をテトラヒドロフラン４５ｍＱに溶
解して得られた溶液を実施例３の（ｃ）におけると同様
にして分取ＧＰＣに付し、得られた目的とする溶出液か
ら減圧下にテトラヒドロフランを留去することにより、
分別された片末端に側、Ｃ００Ｃ）！、（ンＣ（’ＣＨ
ｓ）ｔ−で示されろ基を有するスチレン−無水マレイン
酸共重・合体を０．９０ｇ得た。ＧＰＣ分析から、この
もののＭ　ｖは７９０であり、Ｍｎは７７０であった（
　’Ｆ３　ｖ／　Ｍ　ｎ−１０３）。

得られたスチレン−無水マレイン酸共重合体０．８０ｇ
を実施例３の（ｂ）におけると同様にして片ｎ−ブチル
エステル化し、次いで加水分解することにより、片末端
に　ＨＯＣＨ！　−Ｑ−Ｃ（ＣＨｓ）ｔ−で示される基
を有し、かつ片ｎ−ブチルエステル化されたスチレン−
無水マレイン酸共重合体を０．５４ｇ得た。ＧＰＣ分析
より、このもののｎｖは１０１０であり、Ｍｎは９８０
であった（　Ｆａ　ｗ／　ＫＡ　ｎ＝　１．０３）。

上記（ａ）で得られた片末端に １１０ｃＨ，÷Ｃ（ＣＨｓ）ｔ−で示される基を有し、
かつ片ｎ−ブチルエステル化されｆニスチレンー無水マ
レイン酸共重合体０　、２０ｇ　（０、２ｍｍｏｌｅ　
）　　と実施例３の（ａ）におけると同様にして得られ
た６−（Ｎ−マ・レイミド）カプロン酸クロリド０．２
３（１，０ｍｍｏｌｅ　）とを実施例３の（ｃ）におけ
ると同様の方法により反応させ、片末端に を有し、かつ片ｎ−ブチルエステル化されたスチレン−
無水マレイン酸共重合体を０．１７ｇ得た。

実施例５ 無水マレイン酸２１．６０ｇ　（０，２２ｍｏｌｅ）を
アセトン６０ｍ１２に溶解して得られた溶液にエチレン
グリコールビス（３−アミノプロピル）エーテル１７．
６０ｇ（０，１０ｍｏｌｅ）をアセトン９０ａ＋ｌ！に
溶解して得られた溶液を２５〜３０℃の１度で攪拌下に
１時間を要して徐々に滴下しｒ二。滴下終了後、反応液
に臭化リチウム０．２０ｇ、トリエチルアミン５ｔｉ）
および無水酢酸２５．５０ｇ　（０，２５ｍｏｌｅ）を
加え、６０℃の温度で２時間攪拌した。得られた反応液
を室温まで冷却したのち、これに水２００ｍ１２を滴下
した。得られた混合液を塩化メチレンで抽出し、有機層
を水洗したのち、無水硫酸ナトリウムで乾燥した。この
有機層から減圧下に溶媒を留去することにより、粘稠な
液体を得た。この粘稠な液体にシクロヘキサン５００ｒ
！ＩＱを加え、５０〜６０℃の温度で加温しながら１０
分間攪拌したのち、しばらく静置した。上澄液を室温ま
で冷却することにより、下記の物性値を有するエチレン
グリコールビス（３−Ｎ−マレイミドプロピル）エーテ
ルの白色結晶を０．８０ｇ得た。

紫外部吸収スペクトル：λ　ｍａｘ　３００ｎｍ赤外線
吸収スペクトル：　３１００．２８９０．１７００゜１
４１０、１１１６．８４４ ６９８ｃｍ−’ （ｂ）Ｓ−−イソプロピルフェニルエチオアセテートの
合成 イソプロピルベンゼン８０．０ｇ　（０，６７ｍｏｌｅ
）をクロロホルム３００＋ａＱに加え、−１０℃〜０°
Ｃの水浴で冷却しながら攪拌した。この溶液に蒸留精製
したクロルスルホン酸８９ＩＩＩＩ２（１，３４１１ｏ
ｌｅ）を約３０分間を要して徐々に滴下した。滴下終了
後、室温で３０分間攪拌した。得られた反応液を氷水中
に注ぎ、次いでクロロホルム２００ｍ１２で抽出した。

抽出液を氷水５００ｍｅで３回洗滌したのち、無水硫酸
マグネシウムを加えて乾燥した。この抽出液から減圧下
にクロロホルムを留去することにより、ｐ−イソプロピ
ルベンゼンスルホニルクロリドを５５．０ｇ　（イソプ
ロピルベンゼンを基準として算出した収率：３８％）得
た。

２Ｑ容三つロフラスコに氷５００ｇを加え、次いで濃硫
酸１００ｍＱを注意深く加えた。得られた水溶液を０℃
に冷却したのち、これに上記で得られたｐ−イソプロピ
ルベンゼンスルホニルクロリド５５．０ｇ（０，２５ｍ
ｏｌｅ）を加え、次いで溶液の温度を０〜２℃に維持し
ながら亜鉛粉末を徐々に添加したのち、攪拌下２４時間
反応させた。引続き、反応液を加熱還流下に１．５時間
攪拌した。得られた反応液を室温まで冷却したのち、ｎ
−ヘキサンで抽出した。

抽出液を無水硫酸マグネシウムで乾燥したのち、蒸留す
ることにより、沸点１０６．５〜１０７．５℃／２１ｇ
ｕ＋Ｈｇのｐ−イソプロピルチオフェノールを２４．２
８（ｐ−イソプロピルベンゼンスルホニルクロリドを基
準として算出した収率；６３％）得た。

得られりｐ−イソプロピルチオフェノール２４．２ｇ（
０，１３ｍｏｌｅ）をノエチルエーテル５００Ｉ＠１２
に溶解し、この溶液に塩化アセチルｌｏ、７ｍ１２　（
０，１４ｍｏｌｅ）を添加した。得られた溶液を水浴で
冷却しながら攪拌し、これにピリジン１１．４ｍ１２　
（０，１４ｍｏｌｅ）を１０分間を要して徐′々に滴下
した。滴下終了後、室温で一夜攪拌した。得られた反応
液から沈澱物を濾去した。濾液を蒸留水で２回洗滌した
のち、無水硫酸マグネシウムで乾燥し、蒸留することに
より、沸点１４８〜１５０℃／２０ＩＩ１ｍＨｇの５−
ｐ−イソプロピルフェニルエチオアセテートを２１．６
ｇ　（ｐ−イソプロピルチオフェノールを基準として算
出した収率：８５％）を得た。

窒素雰囲気下、上記（ｂ）で得られた５−ｐ−イソプロ
ピルフェニルエチオアセテート１５ｍｆ）に無水マレイ
ン酸４　、３０ｇ　（４４ｍｍｏｌｅ　）　　を加え、
約１５０℃の温度で攪拌下に溶解させた。この溶液に、
ジクミルパーオキンド０．１６ｇ　（０，５９＋＋ｎｏ
ｌｅ　）　　およびスチレン２．３０ｇ　（２２ｍｍｏ
ｌｅ　）　　を５−ｐ−イソプロピルフェニルエチオア
セテートＩＱｍＱに溶解されて得られた溶液を約１５分
間を要して徐々に滴下した。滴下終了後、１５分間加熱
攪拌した。得られた反応液を室温まで冷却したのち、ｎ
−ヘキサン２１！に攪拌下に約３０分間を要して滴下し
た。生成した沈澱物を濾別し、乾燥することにより、片
末端に Ｃ）１．ｃＯｓＯＣ（Ｃ１１山−で示される基を有する
スチレン−無水マレイン酸共重合体を７．６０ｇ得た。

得られたスチレン−無水マレイン酸共重合体７．６０ｇ
をアセトン１５０ｍ１２に溶解し、この溶液にｎ−ヘキ
サン２２５ｎ＋ｆ２を攪拌下に約３０分間を要して滴下
した。白濁したアセトンとｎ−ヘキサンとの混合液を別
の容器に移し、この混合液にｎ−ヘキサン３７５ｍＱを
攪拌下に約４０分間を要して滴下した。得られたアメ状
物をアセトンに溶解させて回収した。

回収液からアセトンを減圧下に留去しｆ二のち、その残
留物を室温で一夜真空乾燥することにより、分別沈澱さ
れた片末端にＣＩ（、Ｃ０５−Ｑ−Ｃ（ＣＬ）！−で示
される基を存するスチレン−無水マレイン酸共重合体を
２９０ｇ得ｆ二。このらののＧＰＣ分叶より求めたＭｗ
は１４５０であり、ＭｎはＬｉ２Ｏであっｒコ（Ｒｖ／
　Ｑ　ｎ＝　１．２３）　。

分別沈澱されたスチレン−無水マレイン酸共重合体１．
ＱＱｇおよび無水酢酸リチウム１０ｍｇをｎ−ブチルア
ルコール２０ｍＣに加え、９５℃の温室で攪拌下に２０
時間加熱した。得らたれ反応液から減圧下にｎ−ブチル
アルコールを留去した。残留物にジオキサン１０ｍｆｆ
を加えて凍結乾燥することにより、片末端に　ＣＨｓＣ
Ｏ３８Ｃ（ＣＨ３）！−で示される基を有し、・・・・
・・・・・・・・・・・・・・・・かつ片ｎ−ブチルエ
ステル化されたスチレン−無水マレイン酸共重合体を１
．２０ｇ得た。赤外線吸収スペクトルの測定結果より、
このものには残存無水マレイン酸環は認められなかった
。またＧＰＣ分析から、このものの９ｖは１９５０であ
り、Ｍｎは１５９０であった（　’ＦＡ　ｗ／　Ｑ　ｎ
＝　１．２３）。

得られた片ｎ−ブチルエステル化されたスチレノー無水
マレイン酸共重合体０２５ｇをＩＮ水酸化ナトリウム水
溶液２０ｍＱに加え、室温で２０分間攪拌しｆ二。得ら
れた反応液に２．５Ｎ塩酸を攪拌下に徐々に加えて反応
液のｐＨが１ないし２のｌ日内になるように調整した。

析出した沈澱物を濾別し、水洗したのち、アセトン２ｈ
１２に溶解させた。得られた溶液に２．５Ｎ塩酸１ｍＱ
を加え、均一な酸性溶液を得た。

この酸性溶液に水３０ｍ１２を加えたのち、これより減
圧下にアセトンを留去し、析出しに沈澱物を濾別し、水
洗したのち、乾燥することにより、下記の物性値を有す
る片末端に）ＩＳ−Ｑ−Ｃ（ＣＬ）２−　で示される基
を有し、がた片ｎ−ブチルエステル化されたスチレン−
無水マレイン酸共重合体を０．２３ｇ得ｒこ。

赤外線吸収スペクトル：　３２（ｔｏ、　２９６０．１
７４０゜１７＋０．１４５５．１１７０゜ ７０５ｃ謂−１ （ｄ）エチレングリコールビス（３−Ｎ−マレイミドプ
ロピル　エーテルと　　　に ｕｓ−Ｏ−ｃ（ｃｎｓ）＊−で示される基を有し、かつ
上記（ａ）で得られたエチレングリコールビス（３−Ｎ
−マレイミドプロピル）エーテル４０ｔｅｇ　（１，２
ｘ　１０−’ｍｏｌｅ）をアセトニトリル１ｍｆｆに溶
解し、室温で攪拌しながら、この溶液に上記（ｃ）で得
られた片末端にＨＳ−Ｑ−Ｃ（ＣＨｓ）ｔ−で示される
基を有し、かつ片ｎ−ブチルエステル化されたスチレン
−無水マレイン酸共重合体４０ｍｇ　（２Ｘ　１０−６
＋ｏｌｅ）を約５分間を要して徐々に添加した。添加後
、５時間攪拌を続けた。得られた反応液を濾過し、その
濾液をこれより未反応のエチレングリコールビス（３−
Ｎ−マレイミドプロピル）エーテルを除去する目的で分
取ＧＰＣ（装置：日本分析工業製ＬＣ−９、カラム：　
Ｊ　Ａ　Ｉ　Ｇ　Ｅ　Ｌ　　ＩＨ２０Ｘ６００ｍｍφ２
本、溶出液：クロロホルム）に付し、得られた目的とす
る溶出液から減圧下にクロロホルムを留去することによ
り、片末端に で示される基を有し、かつ片ｎ−ブチルエステル化され
たスチレン−無水マレイン酸共重合体を２８ｍｇ得た。

このもののマレイミド基含有量は共重合体１分子当り゛
平均０６個であった。・また、このものの赤外線吸収ス
ペクトルを第３図に示す。

実施例６ クロロホルム５０ｍ１２に１．６−ジアミツヘキサン１
１、Ｈｇ　（０，ｌＯｍｏｌｅ）を溶解して得られた溶
液に、無水マレイン酸１′ｇ１．６０ｇ　（０，２０ｍ
ｏｌｅ）をクロロホルム１００−に溶解させて得られた
溶液を攪拌下に約１時間を要して徐々に滴下した。滴下
終了後、クロロホルム還流下に４時間加熱反応さけた。

得られた反応液から減圧下にクロロホルムを留去し、そ
の残留物に無水酢酸ナトリウム７．５ｇおよび無水酢酸
１００ｍＱを加え、９０℃の温度で４時間撹拌しｆ二。

反応液を室温まで冷却し、析出した沈澱物を濾去し、濾
液から減圧下に溶媒を留去することにより粘稠な液体を
得た。この液体をアセトンとｎ−ヘキサンの容積比が２
対８の、昆合液を展開液として用いるシリカゲルカラム
クロマトグラフィーに付することにより粗結晶を得た。

次いで、この粗結晶をベンゼンで再結晶することにより
、下記の物性値を有するＮ、Ｎ’−ヘキサメチレンビス
マレイミドを１４７Ｂ得た。

融点：１３６〜１３７℃ 紫外部吸収スペクトル：λ　ｍａｘ　３００ｎｍ赤外線
吸収スペクトル：　３０００．２９５０．１７００゜１
４５０、１４１０．　８４０゜ ７００ｃａ＋−’ ミド基　　共電Ａ体のＡ 上記（ａ）で得られｆ二Ｎ、Ｎ’−ヘキサメチレンビス
マレイミド１９９ＩＩ＋ｇ　（７，２Ｘ　１０−’ｍｏ
ｌｅ）をアセトニトリルｌｏｍ１２に溶解させて得られ
ｒ二溶液に、実施例５の（ｃ）におけると同様にして得
られた片末端にＲ３−Ｃ）−Ｃ（ＣＨ３）　ｔ　−で示
５れる基を有し、かつ片ｎ−ブチルエステル化されたス
チレン−無水マレイン酸共重合体２４０ｍｇ　（１，２
ｘ　ｔｏ”ｍｏｌｅ）を約５分間を要して徐々に添加し
た。添加後、５時間攪拌を続けｆ二。得られた反応液か
ら減圧下にアセトニトリルを留去し、その残留物にクロ
ロホルム３ｍｊを加えた。この溶液を濾過し、そのａ液
をこれより未反応のＮ、Ｎ’−ヘキサメチレンビスマレ
イミドを除去する目的で実施例５の（ｄ）におけると同
様にして分取ＧＰＣに付することにより、片末端に基を
有し、かつ片ｎ−ブチルエステル化されたスチレン−無
水マレイン酸共重合体を１２０Ｂ得た。

この乙ののマレイミド基含有量は共重合体１分子当り平
均０．５個でめった。また、このものの赤外線吸収スペ
クトルを第４図に示す。

実施例７ マレイミド暴食　共重合体（１）の合成実施例１（ｂ）
において、ｎ−ブチルアルコール２．２０ｇの代りにｎ
−ヘキシルアルコール３．０２ｇヲ用いる以外は、実施
例１　（ｂ）と同様に行って、目的とする部分片ｎ−ヘ
キンルエステル化されたスチレン−無水マレイン酸共重
合体を９．８ｇ得た。次に実施例１　（ｃ）と同様の方
法に従って、Ｎ−（６−アミノヘキシル）マレイミド塩
酸塩１１６ｍｇと部分片ｎ−ヘキシルエステル化された
スチレン−無水マレイン酸共重合体８５０ｍｇとを反応
させ、目的とする下記のマレイミド基含有共重合体、す
なわち、構成単位（イ）として　−Ｃ）１．−Ｃ）ｌ−
で示される基を有し、構成単位（ロ）として　−Ｃ）ｌ
　−ＣＨ−ＣＯＯＲ’　　Ｃ００Ｈ （式中、Ｒ７はｎ−ヘキシル基または水素原子を表わす
）で示される基を有し、かつ片末端に方はカルボキシル
基を表わし、他方は 也 り 示される基を有する共重合体と、構成単位（イ）とヘキ
シル基または水素原子を表わす）で示される（式中　Ｑ
口およびＱ２１の一方はカルボキシル基をる基を表わす
）で示される基を有する共重合体との混合物を５５０ｍ
ｇ得た。このもののマレイミド基含有量は共重合体１分
子当り平均０．５個であった。

実施例８ 無水マレイン酸２．１６ｇをエチルベンゼン２０ｍＱに
加えて約１１０℃の温度で撹拌した。この溶液にアゾイ
ソブチロニトリル１０８ｍｇ、スチレン２．０８ｇおよ
び５−４−メルカプルトブチルチオアセート２８９ｍｇ
をエチルベンゼン１０ｍ１２に溶解させて得られｔこ溶
液を約１５分間を要して徐々に滴下した。滴下終了後、
１５分間加熱撹拌を続けた。得られた反応液を冷却した
のち、この反応液をヘキサン２Ｑに撹拌下約３０分間要
して滴下した。生成した沈澱物を濾別し、ヘキサンで洗
浄したのち乾燥するにより、片末端にＣ）１３ｃＯ３（
ＣＬ）−Ｓ−で示される基を有するスチレン−無水マレ
イン酸共重合体４．１０ｇを得た。

上記で得られた共重合体２．０Ｏｇおよび無水酢酸リチ
ウム２０＋ｓｇをイソペンチルアルコール４０ｍ１２に
加え、９５℃の温度で撹拌下に２０時間加熱した。得ら
れた反応液から減圧下にイソペンチルアルコールを留去
した。残留物にジオキサン２０ｍ（！を加えて凍結乾燥
することにより、片末端に Ｃ）１３ＣＯＳ−（ＣＨ２）、−Ｓ−で示される基を有
し、かつ片イソペンチルエステル化されたスチレン−無
水マレイン酸共重合体を２４８ｇ得た。

実施例５（ｃ）の片末端にＣＨａＣＯ３−ｏ−Ｃ（Ｃ）
Ｉｓ）ｔ−で示されろ基を有し、かつ片ｎ−ブチルエス
テル化されたスチレン−無水マレイン酸共重合体のＩＮ
水酸化ナトリウムの水溶液による処理と同様の方法に従
って、片末端にＣＨｓＣＯ３−（ＣＨｔ）４Ｓ−で示さ
れる基を有し、かつ片イソペンチルエステル化されたス
チレン−無水マレイン酸共重合体０．２５ｇをＩＮ水酸
化ナトリウム水溶液２０ｍ１！で処理して、片末端にＩ
ｓ　　（ＣＨｔ）４Ｓ−で示される基を有し、かつ片イ
ソペンチルエステル化されたスチレン−無水マレイン酸
共重合体を０．２１ｇ得た。

次に実施例５（ｄ）と同様の方法に従って、片末端にＨ
３−（ＣＨｔ）４Ｓ−で示される基を宵し、かつ片イソ
ペンチルエステル化されたスチレン−無水マレイン酸共
重合体４０ｍｇとエチレングリコールビス（３−Ｎ−マ
レイミドプロピル）エーテル４０１１ｇとを反応させ、
片末端に で示される基を有し、かつ片イソペンチルエステル化さ
れたスチレン−無水マレイン酸共重合体を２４ｍｇ得た
。このもののマレイミド基含有量は共重合体当り平均０
．４＠であった。

参考例１ Ｏ，ＩＮ　トリス塩酸水溶液（ｐＨ８，０）　２．５ｍ
ｌ！にヒト型ＳＯＤ水溶液（８７ｍｇ／ｗＯ）　３６０
μｍ！を加えて溶解させた。この溶液に、実施例１で得
られたマレイミド基含有共重合体３６．６６をジメチル
スルホキシド１５０μｇに溶解して得られｆ二溶液を撹
拌下に徐々に添加し、室温で３時間撹拌しｆ；のち、４
℃の温度で一夜放置しｆ二。得られ几反応液を濾過し、
その濾液をセファデックスＧ　−７５（５ｅｐｈａｄｅ
ｘ　Ｇ　−７５：商品名、ファルマシア社製）を担体と
して用いるゲル濾過〔溶出液：　２０ｍＭリン酸緩衝液
（ｐＨ７，２）コに付し、ＳＯＤおよびＳＯＤ誘導体を
含む画分を合して限外濾過することにより、約３ａ＋（
ｊに濃縮した。得られた濃縮液のタンパク質濃度は７．
７ｍｇ／ｍｆｆ１であった。濃縮液５００μｅを、ＡＨ
−セファロース４　Ｂ　（Ａ　Ｈ−５ｅｐｈａｒｏｓｅ
　４　Ｂ　：商品名、ファルマシア社製）を担体として
用いるアフイニテイカラムクロマトグラフイー（ゲル２
ｍ１）　）に付し、溶出液としてＱ、　１Ｍ重炭酸ナト
リウムを含む１（１ｍＭリン酸緩衝液１０ｍ１２を用い
て未反応のＳＯＤを含む画分を分取し、次いで０．１Ｍ
重炭酸ナトリウムおよび３Ｍ塩化ナトリウムを含む１０
ａｌａリン酸緩衝液１０ｍｆ２を用いてＳＯＤ誘導体を
含む画分を分取した。Ｓ。

Ｄ誘導体を含む画分を限外濾過により２００μＱに濃縮
した。ＳＯＤ誘導体の収量は１ｍｇであった。使用した
ＳＯＤ、上記で得られた反応液、ゲル濾過により得られ
たＳＯＤおよびＳＯＤ誘導体を含む画分、アフイニテイ
カラムクロマトグラフイーにより得られたＳＯＤを含む
画分、ならびにアフイニテイカラムクロマトグラフイー
により得られたＳＯＤ誘導体を含む画分をそれぞれ電気
泳動させて得られた結果を、第５図の（ａ）、（ｂ）、
（ｃ）、（ｄ）および（ｅ）に示す。また、使用したＳ
ＯＤおよびマレイミド基含有共重合体、ならびに得られ
たＳＯＤ誘導体のそれぞれの紫外部吸収スペクトルを第
６図の（１）、（２）および（３）に示す。

参考例２ リン酸緩衝液（ｐＨ７，５）　２．５ａ＋Ｑにヒト型Ｓ
ＯＤ水溶液（６８ｍｇ／ｍ１２）　１５０μｌ！　（６
，４Ｘ　１０−’ａ＋ｏｌｅ）を加え、５〜１０℃の温
度で撹拌した。得られた溶液に、実施例３で得られたマ
レイミド基含有共重合体（２）２５、ＯＢ　（１，２Ｘ
　１０−’ｍｏｌｅ）を徐々に加えたのち、２０時間撹
拌を続けた。反応液を濾過し、その濾液をセファデック
スＧ　−７５Ｓ　Ｆ　（５ｅｐｈａｄｅｘ　Ｇ　−７５
８Ｆ：商品名、ファルマシア社製）を担体として用いる
ゲル濾過（カラム：　Ｋ　２６／４０、ファルマシア社
製、溶出液：　１０ｍＭ重炭酸アンモニウム水溶液）に
付し、ＳＯＤ誘導体を含む画分を分取し、凍結乾燥する
ことにより、ＳＯＤ誘導体を１１．２ｍｇ得た。

このものの赤外線吸収スペクトルを第７図に示す。

参考例３ ヒト型ＳＯＤ水溶液（８７Ｂ１０ｆ２）　４００ａＱに
０．２５Ｍリン酸水素二カリウム水溶液４００μｅを加
えて、水溶液のｐＨを８．０に調整した。この水溶液に
、実施例３で得られたマレイミド基含有共重合体（２）
４３、ＯＢをジメチルスルホキシド１００μＱに溶解し
て得られた溶液を撹拌下に徐々に添加した。添加後、反
応液に１Ｍトリス水溶液を加えてそのｐ）Ｉを８．０に
調整し、得られた水溶液を室温で３時間撹拌したのち、
４℃の温度で一夜放置した。得られた反応液を濾過し、
その濾液をセファデックスＧ−５０（５ｅｐｈａｄｅｘ
　Ｇ　−５０：商品名、ファルマシア社製）を担体とし
て用いるゲル濾過［溶出液：　２０ｍＭリン酸緩衝液（
ｐＨ７，２）　］に付し、ＳＯＤおよびＳＯＤ誘導体を
含む画分を合して限外濾過することにより、約１　、３
ａ＋１！に濃縮した。得られたａ検液のタンパク質濃度
は２３．６ｍｇ／ｍ１２であった。濃縮液１　、２ｍ１
２を、ＡＨ−セファロース４Ｂ　（ＡＨ−３ｅｐｈａｒ
ｏｓｅ　４　Ｂ　：商品名、ファルマシア社製）を担体
として用いるアフイニテイカラムクロマトグラフイー（
ゲル１５ｍ１りに付し、溶出液として０．１Ｍトリス塩
酸水溶液（ｐＨ８，０）　４５−を用いて未反応のＳＯ
Ｄを含む画分を分取し、次いで１Ｍ塩化ナトリウムを含
む０．１Ｍトリス塩酸水溶液（ｐＨ８，０）４５＋ｌ！
を用いてＳＯＤ誘導体を含む画分を分取した。

ＳＯＤ誘導体を含む画分を限外濾過に付し、次いでその
濃縮液を２０ｍＭリン酸緩衝液（ｐＨ７，２）を透析液
として用いる透析処理（１，５１２Ｘ　３回）に付する
ことにより、ＳＯＤ誘導体を含む溶液を１．６ｍＣ得た
。ＳＯＤ誘導体の収量は１７ｍｇであった。使用したＳ
ＯＤ、上記で得られた反応液、ゲル濾過により得られた
ＳＯＤおよびＳＯＤ誘導体を含む画分、アブイニテイカ
ラムクロマトグラフイーにより得られたＳＯＤを含む画
分、ならびにアフイニテイカラムクロマトグラフイーに
より得られたＳＯＤ誘導体を含む画分をそれぞれ電気泳
動させて得られた結果を、第８図の（ａ）、（ｂ）、（
ｃ）、（ｄ）および（ｅ）に示す。

参考例４ 参考例２において実施例３で得られたマレイミド基含有
共重合体（２）２５．０ｍｇを用いる代りに実施例４で
得られたマレイミド基含有共重合体（２）１３．０ｍｇ
　（１，３Ｘ　１０−’ｍｏｌｅ）を用いる以外は同様
にして反応および分離操作を行うことにより、目的とす
るＳＯＤ誘導体をＬ８ｍｇ得た。

参考例５ 参考例２において実施例３で得られたマレイミド基含有
共重合体（２）２５．０ｍｇを用いる代りに実施例５で
得られたマレイミド基含有共重合体（２）２９．２Ｂ　
（ｔ、ａｘ　１０−’ｍｏｌｅ）を用いる以外は同様に
して反応および分離操作を行うことにより、目的とする
ＳＯＤ誘導体を１０４ｇ１ｇ得だ。

参考例６ 参考例２において実施例３で得られたマレイミド基含有
共重合体（２）２５．ｈｇを用いる代りに実施例６で得
られたマレイミド基含有共重合体（２）２６．０ｍｇ　
（１，３ｘ　ｔｏ−’ｍｏｌｅ）を用いる以外は同様に
して反応および分離操作を行うことにより、目的とする
ＳＯＤ誘導体を９．ｌ１ｍｇ得た。使用したＳ。

Ｄおよびマレイミド基含有共重合体、ならびに得られた
ＳＯＤ誘導体のそれぞれの紫外部吸収スペクトルを第９
図の（１）、（２）および（３）に示す。また、得られ
たＳＯＤ誘導体の赤外線吸収スペクトルを第１０図に示
す。

参考例７ 参考例１において、実施例１で得られたマレイミド基含
有共重合体（１）３１５．ｌ１ｍｇの代りに実施例７で
得られたマレイミド基含有共重合体（１）４５．０ｍｇ
を用いる以外は同様にして反応および分離操作を行うこ
とにより、目的とするＳＯＤ誘導体３５．８１１＋ｇを
得た。

参考例８ 参考例２において実施例３で得られたマレイミド基含有
共重合体（２）２５．０ｍｇを用いる代りに実施例８で
得られたマレイミド基含有共重合体（３）３０Ｂを用い
る以外は同様にして反応および分離操作を行うことによ
り、目的とするＳＯＤ誘導体を１３．８Ｂ得た。

試験例１ ＳＯＤ誘導体の血中濃度 ＳＯＤまたは参考例１で得られたＳＯＤ誘導体のそれぞ
れの水溶液に２５μＣ４のＩｔＳｉ−ポルトンハンター
試薬を加え、室温で１時間振盪下に反応させ、得られた
反応液を４℃の温度で一夜放置した。得られた反応液を
０．１５Ｍ塩化ナトリウムを含む２０＋＊Ｍリン酸緩衝
液（ｐｌ！７．３）を透析液として用いて透析した（５
１！×３回）。透析処理された液について単位容積当た
りの放射活性を測定し、次いで、この液を生理食塩水で
希釈し、所定の濃度に調整した。

ベンドパルビタール麻酔下にラット（ＳＤ系雄性、７適
齢０体重約２ｕｇ）の大腿静脈よりカニュレーションを
行い、ヘパリン溶液（１００（ｌｔｌ／　ｍ（２）を０
．２１注入した。ラット１６当たり上記で得られた標識
ＳＯＤまたは標識ＳＯＤ誘導体の調製液をそれぞれ２０
Ｑ、０００ｃｐｍ　（ＳＯＯμ１２）大腿静脈に注射し
た。経時的に１００μｇづつ大腿静脈より採血し、ガン
マ−カウンターで放射活性を測定することにより血中濃
度を測定した。ＳＯＤの血中濃度およびＳＯＤ誘導体の
血中１度の経時変化を第１１図の（１）および（２）に
示す。

試験例２ ラット（５ｉｓｔｅｒ系雄性０体重２００〜２３０ｇ）
を−晩絶食させたのち、ベンドパルビタール（５０ａ＋
ｇ／ｋｇ体重）を腹腔内投与することにより麻酔した。

麻酔したラットを、気管切断してレスピレータにより呼
吸管理しく１回の排気ｊｌ　：　１．５ｃｍ３／ｌｏＯ
ｇ体重５換気回数−６０日／Ｉ）、胸骨縦切間により心
臓を露出させた。冠動脈の閉塞を、左冠動脈前下行技を
回旋技分岐部より約３ｆｆｉＩ１１末梢で吸引すること
より１５分間行った。閉塞−再潅流の操作を３０分間隔
で２回行い、第１回目の再潅流１５分後に、薬剤をラッ
トの大腿静脈に５１１＋ｇ／ｋｇ体重（総量０．ｌｏ＋
Ｉ２）投与した。薬剤として、ヒト赤血球より分離した
ＳＯＤまたは参考例１で得られた５ＯＤｙＪ導体の生理
食塩水による調製液を用いた。各再潅流時に心電図（■
誘導）を３分間連続モニターし、心室性期外収縮（ＰＶ
Ｃ）　、心室性頻拍（ＶＴ）および心室細動（Ｖｆ）を
調べた。第２回目の虚血萌、第２回目の虚血後１５分経
過時、ならびに第２回目の再潅流後１０秒経過時、３０
秒経過時および３分経過時における心電図を第１２図の
横列（１）、（２）、（３）、（４）および（５）に示
す。なお図中、ヒト赤血球より分離したＳＯＤを投与し
た群の心電図を縦列（Ａ）に示し、参考例１で得られた
ＳＯＤ誘導体を投与した群の心電図を縦列（Ｂ）に示す
。

薬剤を投与しないコントロール群において、前後２回の
再潅流時の不整脈の出現に有意差はなかった。第１２図
より明らかなとおり、ＳＯＤを投与した群では再清流時
に出現する不整脈は抑えられなかったが、ＳＯＤ誘導体
を投与した群では該ＳＯＤ誘導体の著明な抗不整脈作用
が認められた。

ＨＦ）１１ 本発明によればＳＯＤの酵素活性を概ね保持したままで
該ＳＯＤに比べて大幅に延長された血中半減期と良好な
臓器への移行性を有し、かつ単一の化学構造を有する新
規なＳＯＤ誘導体を与えるＳＯＤの新規な化学修飾剤と
なるマレイミド基含有共重合体が提供される。また本発
明によれば、生体タンパク質の分離用吸着剤を与えるメ
ルカプト基を有するゲル担体の新規な化学修飾剤または
メルカプト基を有するポリビニルアルコールの新規な化
学修飾剤となるマレイミド基含有共重合体が提供される
。

【図面の簡単な説明】

第１〜４図は、それぞれ実施例２、実施例３、実施例５
および実施例６で得られたマレイミド基含有共重合体の
赤外線吸収スペクトルを示す図である。第５図は電気泳
動の結果を示す写真であり、写真中の（ａ）、（ｂ）、
（ｃ）、（ｄ）および（ｅ）（よ、それぞれ参考例１で
使用したＳＯＤ、得られた反応液、ゲル濾過により得ら
れたＳＯＤおよびＳＯＤ誘導体を含む両分、アフイニテ
イカラムクロマトグラフイーにより得られたＳＯＤを含
む画分、ならびにアフイニテイカラムクロマトグラフイ
ーにより得られたＳＯＤ誘導体を含む画分を電気泳動さ
せて得られた結集を示す。第６図は紫外部吸収スペクト
ルを示す図であり、図中の（１）、（２）および（３）
は、それぞれ参考例１で使用したＳＯＤおよびマレイミ
ド基含有共重合体、ならびに得られたＳＯＤ誘導体の紫
外部吸収スペクトルを示す。第７図は参考例２で得られ
たＳＯＤ誘導体の赤外線吸収スペクトルを示す図である
。第８図は電気泳動の結果を示す写真であり、写真中の
（ａ）、（ｂ）、（ｃ）、（ｄ）および（ｅ）は、それ
ぞれ参考例３で使用したＳＯＤ、得られた反応液、ゲル
濾過により得られたＳＯＤおよびＳＯＤ誘導体を含む画
分、アフイニテイカラムクロマトグラフイーにより得ら
れたＳＯＤを含む画分°、ならびにアフイニテイカラム
クロマトグラフイーにより得られたＳＯＤ誘導体を含む
画分を電気泳動させて得られた結果を示す。第９図は紫
外部吸収スペクトルを示す図であり、図中の（１）、（
２）および（３）は、それぞれ参考例６で使用したＳＯ
Ｄおよびマレイミド基含有共重合体、ならびに得られた
ＳＯＤ誘導体の紫外部吸収スペクトルを示す。第１θ図
は参考例６で得られたＳＯＤ誘導体の赤外線吸収スペク
トルを示す図である。第１１図は試験例１で測定した血
中濃度の経時変化を示す図であり、図中の（１）および
（２）は、それぞれＳＯＤの血中濃度およびＳＯＤ誘導
体の血中濃度の経時変化を示す。第１２図は試験例２で
連続モニターした心電図（■誘導）の１部を示す図であ
り、図中の縦列（Ａ）および（Ｂ）はそれぞれＳＯＤ投
与群およびＳＯＤ誘導体投与群の心電図を示し、横列（
１）、（２）、（３）、（４）および（５）はそれぞれ
第２回目の虚血前、第２回目の虚血後１５分経過時、な
らびに第２回目の再ｔｉ流１０秒経過時、３０秒経過時
および３分経過時における心電図を示す。 特許出願人　株式会社　り　ラ　し

Claims (1)

1. 【特許請求の範囲】 （イ）▲数式、化学式、表等があります▼ または▲数式、化学式、表等があります▼（これらの式
   中、Ｒ＾１、 Ｒ＾３およびＲ＾５はそれぞれ水素原子またはメチル基
   を表わし、Ｒ＾２は水素原子、塩素原子、臭素原子また
   はメチル基を表わし、Ｒ＾４は水素原子、炭素数１ない
   し６のアルキル基または炭素数３ないし６のシクロアル
   キル基を表わし、Ｒ＾６はメチル基またはエチル基を表
   わす）で示される基からなる群から選ばれる基ならびに （ロ）▲数式、化学式、表等があります▼ （式中、Ｒ＾７は水素原子を表 わすか、または炭素数１ないし８のアルカノール、炭素
   数１ないし４のアルキル基部分を含むエチレングリコー
   ルモノアルキルエーテルもしくは炭素数１ないし４のア
   ルキル基部分を含むグリセリシンアルキルエーテルから
   水酸基を除いた残基を表わす）で示される基を構成単位
   とし、かつ （ハ）片末端に ▲数式、化学式、表等があります▼ （式中、Ｗは２価の有機基を表わす）で示される基を有
   するか、または構成単位間に ▲数式、化学式、表等があります▼［式中、Ｑ＾１＾１
   およびＱ＾２＾１は一方がカルボキシル基、他方が ▲数式、化学式、表等があります▼で示される基である
   こ とを条件にカルボキシル基または ▲数式、化学式、表等があります▼で示される基を表わ
   し、 Ａ＾１は１個以上の酸素原子、硫黄原子、 ▲数式、化学式、表等があります▼（式中、Ｒ＾８は水
   素原子もしくは炭素数１ないし４のアルキル基を表わす
   ）で示される基または▲数式、化学式、表等があります
   ▼で示される基で中断さ れていてもよい二価の炭化水素基を表わす］で示される
   基を有し、かつ平均分子量が４００ないし２０，０００
   である共重合体。