JPH01215295A

JPH01215295A - 油脂の加水分解方法

Info

Publication number: JPH01215295A
Application number: JP63038634A
Authority: JP
Inventors: Masahide Nakada; 中田　正秀; Tadashi Funada; 船田　正
Original assignee: Nippon Oil and Fats Co Ltd
Current assignee: NOF Corp
Priority date: 1988-02-23
Filing date: 1988-02-23
Publication date: 1989-08-29
Anticipated expiration: 2012-07-02
Also published as: JP2625827B2

Abstract

(57)【要約】本公報は電子出願前の出願データであるた
め要約のデータは記録されません。

Description

【発明の詳細な説明】〔産業上の利用分野〕本発明は、リパーゼを用いて高度不飽和脂肪酸を含む油
脂を、従来より高い分解率で加水分解し、目的とする脂
肪酸の収率を高める油脂の加水分解方法に関す名。

〔従来の技術〕

油脂の加水分解には、従来、高温高圧下での反応が用い
られてきたが、この方法は高度不飽和脂肪酸など熱に不
安定な物質を含む油脂には適さない、そこで近年リパー
ゼを用いて常温常圧で加水分解を行い、高度不飽和脂肪
酸を製造しようという試みがなされている。（例えば特
開昭５８−２０５４９９号、特開昭５７−１７０１９３
号）。これらの高度不飽和脂肪酸はその生理的機能が注
目されており、医薬品またはその前駆体として有望なも
のである。

〔発明が解決しようとする課題〕

しかしながら、リパ、−ゼによる酵素法においても例え
ば魚油のようにエイコサペンクエン酸やドコサヘキサエ
ン酸などの高鎖長高度不飽和脂肪酸を多く含む油脂に対
して反応性が低く、７０％前後の分解率しか得られず、
目的とする脂肪酸の収率が低くなり、工業的に不利であ
るという問題点があった・従って、本発明は特定のリパーゼを用いて、油脂の分解
率を高め、脂肪酸の収率を上げる工業的に有利な油脂の
加水分解方法を提供することを目的とする。

〔課題を解決するための手段〕

本発明はキャンディダ・シリンドラセ（Ｃａｎｄｉｄａ
９１頂司工鉦旦り−より得られるリパーゼ（以下単にキ
ャンディダ・シリンドラセリパーゼと略す）のｐＨ依存
性を利用して、反応系のｐＨを一定に保って反応させ、
一定の分解率に達した後、ｐＨを一定に保って更に反応
を行い、通常反応性の低い油脂の加水分解率を９８％程
度まで高めた油脂の加水分解方法である。

上記キャンディダ・シリンドラセリパーゼは、ｐＨ３〜
５付近と７．５〜９付近に２つの最適反応ｐｌ（域をも
つ酵素である。従って、最も反応性の高いｐＨに反応系
を保ってやれば、より高い反応率が得られる。またこの
最適ｐＨは用いる油脂により固有の値を示すものである
。

すなわち、第一の発明はｐＨを３〜５に保って反応させ
、一定の分解率、例えば６０〜８０％前後まで分解した
後、ｐＨを７．５〜９に保って更に反応を行い、分解率
を例えば９８％まで高めることを特徴とする。また、第
二の発明はｐＨを７．５〜９に保って反応させ、一定の
分解率、例えば約２５〜４０％まで分解した後、ｐＨを
３〜５に保って更に反応を行い、分解率を例えば９８％
まで高めることを特徴とする。

いずれにしても最終的に９８％程度の高い分解率まで加
水分解することができる。

本発明に用いるギャンディダ・シリンドラセを培養して
得られるリパーゼとしては、市販のリパーゼ等を用いる
ことができ、例えばリパーゼＯＦ（多糖産業■製、キャ
ンディダ・シリンドラセの培養濾液をアセトン処理して
得られる酵素粉末）等を好ましく挙げることができる。

本発明に用いる油脂は、動物性油、植物性油のいずれも
使用可能であり、例えば牛脂、肝脂、魚油、大豆油、コ
ーン油、月見草油、オリーブ油等が挙げられるが、特に
生理活性のある高度不飽和酸を含む魚油、オリーブ油、
月見草油などが好ましい。

本発明において所定のｐＨを保つために種々の酸、アル
カリ、バッファーが用いられるが、例えば１）Ｂ３〜５
の範囲では、２０ｍＭからＩＭのギ酸−ギ酸ナトリウム
バッファー、グリシン−塩酸バッファー、酢酸−酢酸ナ
トリウムバッファー、クエン酸−クエン酸ナトリウムバ
ッファー、あるいは１ｍＭからＩＭのギ酸、酢酸、コハ
ク酸、リンゴ酸、フマル酸、マレイン酸、クエン酸、塩
酸、硫酸、硝酸、リン酸などがあげられ、ｐｉ　７．５
〜９に保つためには、２０ｍＭからＩＭのリン酸ナトリ
ウムバフファー、トリス−塩酸バッファ−、グリシン−
水酸化ナトリウムバッファー、炭酸水素ナトリウム−炭
酸ナトリウムバッファー、アンモニア−塩化アンモニウ
ムバッファーや、１ｍＭ〜ＩＭの水酸化カリウム、水酸
化ナトリウム、トリス、炭酸水素ナトリウム、アンモニ
アなどがあげられる。

前述の通り、このキャンディダ・シリンドラセリパーゼ
は用いる油脂によって固有の最適ｐｔｔを示すので、用
いる油脂に適したものを上記のうちから酸性側で１種ま
たはそれ以上、アルカリ性側で１種またはそれ以上を選
んで用いる。

酵素の添加量は油脂１ｇに対して０．０１■〜５０ｍｇ
、好ましくは０．１〜１０■であり、反応温度は１０℃
から５０℃の範囲内で行われるが、好ましくは２０℃か
ら４０℃の間が良い。

反応時間は３時間から１０時間の範囲内で行われる。

この反応は水と油脂との２層系での反応であるので、十
分な攪拌が必要である０通常１００〜５００ｒ、ｐ、ａ
＋、の範囲内で行われる。

空気との接触による酸化反応を防ぐため系中を窒素ガス
のバブリングにより空気を追い出しながら反応を行う。

〔発明の効果〕

本発明によれば、従来分解率が低く、収率も低かった酵
素による油脂の加水分解法が、分解率を高め、より高収
率に加水分解できる方法に改善され、特に高度不飽和脂
肪酸の製造において工業的に有利となる。

（実施例）以下、実施例と比較例に基づき本発明を具体的に説明す
る。

実施例１精製魚油（日本油脂■製品）ｌ１ｇに、キャンディダ・
シリンドラセリパーゼ（多糖産業■製品、リパーゼＯＦ
）５ｇを溶解させた５０ｍＭ酢酸−酢酸ナトリウムバッ
ファー、ｐｕ　４．５．１ｚを加え、窒素ガスバブリン
グしながら３７℃、５時間、２００ｒ、ｐ、ｍ、で反応
させた。反応終了後、反応物の一部を取り出し、遊離の
脂肪酸量を中和滴定により測定し、分解率を求めたとこ
ろ、約７５％であった。

その後、下層の酵素液を除き、５ｇのキャンディダ・シ
リンドラセリパーゼを溶解したＯ、ＩＭ）リスー塩酸バ
ッファー、ｐＨ８，０，１１を加え、さらに３時間反応
させた。その分解率は９８％に達した。

また脂肪酸の組成をガスクロマトグラフィーにより分析
した結果、エイコサペンタエン酸１３．５％、ドコサヘ
キサエン酸９．５％となり、原料魚油中の組成に一致し
た。

実施例２実施例１において、魚油を月見草種子油（サミソト製油
■製品）に、トリス−塩酸バッファー、ｐＨ８，０をリ
ン酸ナトリウムバッファー、ｐＨ７，５に変えた他は同
様に行った。最終分解率は９８％、脂肪酸中のＴ−リル
ン酸含量は１０．２％であり、原料中の組成に一致した
。

実施例３実施例１において、魚油をカラシ油に、酢酸−酢酸ナト
リウムバフファー、ｐＨ４，５をギ酸−ギ酸ナトリウム
バッファー、ｐ）Ｉ　４．０に変えた他は同様に行った
。最終分解率は９８％、脂肪酸中のα−リルン酸含量は
８．８％で、原料中の組成に一致した。

実施例４精製魚油（日本油脂■製品）１ｋｇにキャンディダ・シ
リンドラセリパーゼ（多糖産業■リパーゼＯＦ）５ｇを
溶解させた５０ｍＭグリシン−水酸化ナトリウムバッフ
ァーｐＨ９，０，Ｉ　ｎを加え、窒素ガスバブリソグし
ながら２０Ｏｒ、ｐ、ｍ、、３７℃、３時間反応させた
。この生成物を取り出し、分解率を′求めたところ約３
５％であった。下層の水を除き、５ｇのキャンディダ・
シリンドラセリパーゼを溶解させた。０．２　Ｍ酢酸−
酢酸ナトリウムバッファー　ｐ）１４．０、ｌｌを加え
て同様に窒素バブリングしながら２０Ｏｒ、ｐ、ｍ、、
３７℃、５時間反応させた。この生成物の分解率は約９
８％であった。

比較例１魚油１　ｋｇに１０ｇのキャンディダ・シリンドラセリ
パーゼを溶解させた水道水ｐＨ６，５、ｌｌを加え、窒
素バブリングしながら３７℃、２００　ｒ、ｐ、ｎ＋、
、３００時間反応せた。分解率は６０％、脂肪酸中のエ
イコサペンタエン酸含量は８．４％、ドコサヘキサエン
酸含量は３．１％であった。

比較例２比較例Ｉにおいて、魚油を月見草種子油に変えた他は同
様に行った。分解率は６５％、脂肪酸中のγ−リルン酸
含量は４．７％であった。

Claims

【特許請求の範囲】

（１）油脂をキャンディダ・シリンドラセリパーゼを用
いて加水分解するに際し、反応系のｐＨを３〜５に保っ
て反応させ、次いで、ｐＨを７．５〜９に保って更に反
応を行い分解率を高めることを特徴とする油脂の加水分
解方法。
（２）油脂をキャンディダ・シリンドラセリパーゼを用
いて加水分解するに際し、反応系のｐＨを７．５〜９に
保って反応させ、次いで、ｐＨを３〜５に保って更に反
応を行い、分解率を高めることを特徴とする油脂の加水
分解方法。