JPH01275533A - 記憶力増強剤 - Google Patents

Abstract

(57)【要約】本公報は電子出願前の出願データであるた
め要約のデータは記録されません。

Description

【発明の詳細な説明】 星呈上五五月欠里 本発明は次式： ％式％ （式中、ＸはＧｌｎまたは単に結合部を示し、ＹはＴｈ
ｒまたはＬｅｕを示し、ＺはＭｅｔまたはＮｌｅを示す
）で表わされるペプチド類（以下単に本ペプチドという
）またはその製薬上許容される塩を有効成分とする新規
な記憶力増強剤に関する。

更米弦遭 本発明が取り扱うペプチドは公知の化合物であす、バイ
オケミカル・ファーマコロジー（Ｂｉｏ−ｃｈｅｍｉｃ
ａｌ　Ｐｈａｒｍａｃｏｌｏｇｙ　１１０３−１１０７
．３４（７）、　１９８５Ｍ、　Ｆｕｊｉｍｏｔｏ　ａ
ｔ　ａｌ）に開示されテール。藤本等はＷ＃臓や脳に分
布するフレシストキニン（以下ＣＣＫという）受容体と
の親和性を各ペプチドについて研究している。しかし、
これらペプチドに記憶力増進作用があるという事は記述
もなく、示唆−もされていない。

一方、ＣＣＫには分子の大きいものから小きいものまで
いろいろあるが、脳には８個のアミノ酸からなるペプチ
ドが多く存在し、Ｃ末端から７番目のアミノ酸に硫酸基
のついているのが特徴である。これは略してＣＣＫ−８
と呼ばれているが、伊藤等は各種の実験から、ＣＣＫ−
８には学習・記憶増進効果がある事をつきとめている（
　Ｐｅｐｔｉ−ｄｅＳ７．１０５−１１０　（１９８６
）；　Ｄｒｕｇ　Ｄｅｖｅｌ、　Ｒｅｓ、　７゜２６９
−２７６　（１９８６）；　Ｃａｎ、　Ｊ、　Ｐｈ１ｏ
１．　Ｐｈａｒｍａｃｏｌ　６４゜７４５−７４７　（
１９８６）；　１ｂｉｄ、　６５．２２６０−２２６４
　（１９８７戸Ｄｒｕｇ　Ｒｅｖ、　Ｒｅｓ、　１２．
６３−７０　（１９８８））　−特公昭第６０−４１０
５２号にはセルレインの向精神薬、特に分裂病に効果の
あることが記載きれている。

明が　決する課題 近年、平均寿命が年々のびるに従い、老人福祉が大きな
社会問題となっている。特に、老人の記憶力減退に伴っ
た問題が多く、記憶力増進剤または記憶力減退防止剤の
開発が強く望まれている。

課　を解決する手段 本発明者らは以上の点に鑑み、鋭意研究を重ねた結果、
次式： ％式％） （式中、Ｘ、Ｙ、およびＺは前記と同意義）で表わきれ
る本ペプチドまたはその製薬上許容される塩が記憶力の
保持を延長すると共に記憶の喪失を防止する効果をもつ
を見出し、本発明を完成した０本発明者らの研究によれ
ば、本ペプチドは同作用を有するＣＣＫ−８と比較して
、約１０倍の効力を示す。

本発明において、アミノ酸、ペプチド、活性基等に関し
て略号で表示する場合、ＩＵＰＡＣまたは当該分野の慣
用記号に従った。以下に主なものを例示する。

Ａｓｐ　：アスパラギン酸 Ｇｌｎ　：グルタミン Ｇｔｙ　ニゲリシン Ｌｅｕ　：ロイシン Ｍｅｔ　：メチオニン Ｎｌｅ　：ノルロイシン Ｐｈｅ　：フェニルアラニン Ｐｙｒ　：ピログルタミン酸 Ｔｈｒ　：スレオニン τｒｐＨトリプトファン Ｔｙｒ　：テロシン 以下に本ペプチドのいくつかを例示するが、本発明はこ
れらに限定されるものではない。

化合物（１）（セルレイン）： Ｐｙｒ−Ｇ　１ｎ−Ａｓｐ−Ｔｙｒ　（Ｓｏ　ｓ　Ｈ）
−Ｔｈｒ−Ｇｌｙ−Ｔｒｐ−Ｍａｔ−Ａｓ　ｐ−Ｐｈａ
−Ｎ）ｌ　ｇ化合物〈２）： Ｐｙｒ−Ａｓｐ−Ｔｙｒ（Ｓｏ　ｓ　Ｈ）−Ｔｈｒ−Ｇ
ｌｙ−Ｔｒｐ−Ｍｅｔ−Ａｓｐ−Ｐｈｅ−ＮＨ１化合物
（３）： Ｐｙｒ−Ｇｉｎ−Ａｓｐ−Ｔｙｒ　（Ｓｏ　ｓ　Ｈ）−
Ｌｅｕ−Ｇｌｙ−Ｔｒｐ−Ｎ　ｌｅ−Ａｍｐ−Ｐｈｉ−
ＮＨ＊ＣＣＫ−８： Ｈ−Ａｓｐ−Ｔｙｒ（Ｓｏ　ｓ　Ｈ）−Ｍｅｔ−Ｇｌｙ
−Ｔｒｐ−Ｍｅｔ−Ａｓｐ−Ｐｈｅ−ＮＨ１本ペプチド
は製薬上許容きれる塩、例えばナトリウム、カリウム等
のアルカリ金属塩、カルシウム等のアルカリ土類金属塩
、ジエチルアミン、トリエチルアミン等のアミン塩また
はアンモニアとのアンモニウム塩としても良い。

本ペプチドはそれぞれ単独または混合物で用いることが
できる。製剤化にあたっては、非経口投与形態が好まし
く、常法に従って注射剤、瘍剤、貼布剤、鼻腔内スプレ
ー等に製剤化すれば良く、要すれば、増量剤、賦形剤、
溶解助剤、安定化剤、防腐剤、局麻剤等を添加し得るの
は当然であるが、更番こ、本ペプチドの効力を低下させ
ない限り他の薬剤も添加できる。

本ペプチドは非常に低毒性なので、かなり大量に使用可
能である０人体への投与量は、性別、年齢、症状、病歴
、投与方法によって変化するので一概に規定できないが
、通常、０．０１〜１０μｇ／ｋｇ体重、より好ましく
は０．０５〜５μｇ／ｋｇ体重を毎週１回〜２回投与す
ればよい。

本ペプチドは上記の使用方法で、例えば、脳外傷によっ
て生じた記憶喪失の治療、パーキンソン病やハンチント
ン病等の脳疾患や過度のストレス状態における記憶障害
の改善、老年期精神活動減退の改善、脳外科手術によっ
て生じる脳機能障害の予防等に臨床的効果が期待される
。

以下に実施例を示し本発明をさらに詳しく説明するが、
これらは同等本発明を限定するものではない。

（以下余白） 実施例　１ （受動的回避反応） ウィスター系雄性ラット（体重約２２０ｇ）を２５±１
℃、１２時間毎の明暗条件（点灯：午前７時）の下で飼
育し、その間摂食（標準ラット用ビスケット）および水
は自由に与えた。以下の実験は午前９時〜午後３時の間
に行なった。

受動的回避行動は一試行学習法によって調べた。うす暗
い防音室内で実験を行なった。装置は黒色壁の暗い箱と
、その−面に明るい走路をつけたものである。暗箱の床
にはラットの足に電気ショック（Ｆｏｏｔ　５ｈｏｃｋ
：以下、ＦＳという）を与えられるようにグリッドを配
した。グリッドを配した部屋を暗箱とし、走路の中央部
６００Ｔ１１上方に６０Ｗの電球を取り付けた０以上の
装置を用いて、受動的回避反応学習の一回試行をニーダ
−とドウ・ウィード（Ａｄｅｒ　ａｎｄ　ｄｅ　Ｗｉｅ
ｄ　［１９７２コ）の方法に従って観察した。ラットを
暗箱に背を向けるように走路上に置き、そのまま暗箱に
入れるという順応訓練を実験の第１日に一回、回訓練を
翌日に３回行なった。３回目の訓練終了後直ちに、ラッ
トに強制的電気ショック（０，２＋ｎＡ、２秒間）を−
回与えた。この学習訓練の後、ラットを装置から取出し
た。学習訓練終了後２４時間と４８時間目に記憶保持を
テストした。ラットを走路上に置き、ラットが暗室に入
るまでの時間（反応潮時）を最大３００秒まで測定した
。

ラットの記憶を喪失きせるために、ＦＳ直後、両耳に取
り付けた金属クリップを介して電流を通しく　６０　ｍ
Ａ、　０．４秒間）、電気Ｍ傘シａ　ツク（Ｅｌｅｃｔ
ｒｏｃｏｎｖｕｌｓｉｖｅ　５ｈｏｃｋ　：以下、ＥＣ
８と言う）を与えた。

薬剤は生理食塩水に溶解して０．１ｍｌ／　１００ｇ体
重宛でＥＣＳ直後に皮下投与した。対照群にも同量の生
理食塩水を皮下投与した６反応潜時の値は秒で示し、平
均反応潜時と共にカツフ内に２５％〜７５％の分布値を
表１に示した。尚、実験動物は一回のみ、実験に使用し
た。

尚、本試験および以下の諸実施例で用いる化合物は以下
の通りである。

化合物（１）（セルレイン）： Ｐｙｒ−Ｇｌｎ−Ａｓｐ−Ｔｙｒ（ＳｏｓＨ）−Ｔｈｒ
−Ｇｌｙ−Ｔｒｐ−Ｍｅｔ−Ａｓｐ−Ｐｈａ−ｍ（を化
合物（２）： Ｐｙｒ−Ａｓｐ（ｙｒ（Ｓｏ　ｓ　Ｈ）−Ｔｈｒ−Ｇｌ
ｙ−Ｔｒｐ−Ｍｅｔ−Ａｓｐ−Ｐｈｅ−ＮＨ！化合物（
３）： Ｐｙｒ−Ｇｌｎ−Ａｓｐ−Ｔｙｒ（Ｓｏ　ｓ　Ｈ）−Ｌ
ｅｕ−Ｇｌｙ−Ｔｒｐ−Ｎｌｅ−Ａｓｐ−Ｐｈｅ−ＮＨ
１対照化合物（ＣＣＫ−８）： Ｈ−Ａｓｐ−Ｔｙｒ（Ｓｏ　Ｉ　Ｈ）−Ｍｅｔ−Ｇｌｙ
−Ｔｒｐ−Ｍｅｔ−Ａｓｐ−Ｐｈｅ−ＮＨを急玉 表１の結果から明らかな様に、本化合物１〜３はいずれ
も、ＣＣＫ−８と比較して約１０倍もの効果を示し、記
憶力減退を防止する効果が確認された。また、統計結果
を表１（附）に示した。

表１ 実施例　２ （能動的回避反応） ウィスター系雄性ラット（体重的２２０ｇ）を２５±１
℃、１２時間毎の明暗条件（点灯：午前７時）の下で飼
育し、その間摂食（標準ラット用ビスケット）および水
は自由に与えた゛。以下の実験は午前９時〜午後３時の
間に行なった。

受動的回避行動はガムズ（Ｇａｍｚｕ、　１９８５）　
（７）方法に準じたプラットホーム型による実験を行な
った。一連の試行を開始する１０分前にラットを実験箱
に入れて慣らし、その後プラットホーム上に置いた。プ
ラットホーム（１８Ｘ　Ｌｏｃｍ　）は実験箱（４０Ｘ
　３５％　４０ｃｍ　）の床上１１ｃｍにあり、箱の隅
に取り付けられた。各試行の開始毎に条件側ｉ！ｔ　（
Ｃｏｎ−ｄｉｔｉｏｎｉｎｇ　ｓｔｉｍｕｌｕｓ：以下
ｃｓという）の為にブザーを鳴らし、ラットをプラット
ホームからグリッドを配した床に降した。Ｃ８は１５秒
間行ない、次いで２ｍＡの電流を１５秒間通じてＦＳを
与えた。ラットはプラットホームへ飛び乗る事によりこ
れを回避し得た。ショック終了から次ぎの試行までの１
５秒間を安全期間とした。これを１試行として、５試行
を１セツシヨンとした。各セツションは約４時間の間隔
をあけ、朝・夕に各−回ずつ行なった。第２セツシヨン
終了後（訓練日）直ちに全てのラットに、所定量の薬剤
または生理食塩水を皮下投与した。被検群には薬剤を生
理食塩水に溶解してＱ、１ｍｌ／１００ｇ体重宛を、対
照群には同量の生理食塩水を投与した。

ＦＳを除いた以外は同様の２セツシヨンを翌日（第１日
）、第５日、１０日、１５日目にも繰り返し行なった。

各セツション毎に回避行動を取った回数を数え、４日間
に取った回避行動の平均値を表２に記した。統計処理は
ダンカン（Ｄｕｎｋａｎ　）の方法で行なった。

処理 表２の結果から明らかな様に、本化合物１〜３はいずれ
も、ＣＣＫ−８と比較して約１０倍もの効果を示し、記
憶力を増強する効果の極めて高い薬剤であることが確認
きれた。

（以下余白） 実施例３（毒性試験） （被検化合物） 化合物２および３をそれぞれ０．０４０ｍｇ／ｍｌの濃
度で生理食塩水に溶解し、溶解後４０分以内に投与した
。

（試験動物および群の構成） ＳＬＣ：ウィスター系ラット雌雄各２５匹を４週齢で購
入し、雌雄各５匹を入荷時検疫した。残り雌雄各２０匹
を４日間予備飼育した後、無作為に雌雄各９匹の２群に
分けた。きらに１日間のｖ１化飼育後、被検化合物を投
与した。投与時のラットの体重は雄９９．１±１．２ｇ
、雌８２．４±０．８ｇであった。

（投与量および投与方法） 実施例１および２で確認した、化合物２および３の皮下
投与時の有効量が０．０１μｇ／ｋｇたったので、その
１万倍に相当する０　、　１　ｍｇ／　ｋｇを投与量と
して設定した。投与口に体重を測定し、個々の動物の体
重あたりの投与容量を換算し、ラット背部皮下に注射し
た。

実験成績および結論 １４日間の観察期間で、いずれの群においても一般状態
の変化は見られず、良好な体重増加が観察された。また
、解剖して病理所見を調べたが、肉眼所見および組織学
的所見にもなんら異常は認められなかった。

従って、化合物２および３の毒性量は０．１■／ｋｇよ
り犬であると考えられ、極めて安全な薬剤と結論される
。

尚、化合物１のセルレインは既に人体にも投与され、安
全性は確認きれている（特公昭第６０−４１０５２号）
。

実施例４ 化合物１のジエチルアミン塩　　　０．３ｍｇ塩化ナト
リウム　　　　　　　　　９０　　ｍｇ注射用蒸留水を
加えて全量を１０ｍ１とする。

上記組成物を完全に溶解したのち、無菌濾過してアンプ
ル１０本に分注して注射剤とする。

実施例５ 化合物２のトリエチルアミン塩　　６　　ｍｇキンロカ
イン　　　　　　　　　　２５０　　ｍｇリン醜緩衝液
　　　　　　　　　　１００　　ｍｌ上記組成物を完全
に溶解したのち、実施例４と同様に処理して注射剤１０
０アンプルを得る。

実施例６ 化合物３のトリス・ジエチルアミン塩（５０ｍｇ）を流
動パラフィン（２５ｇ）に攪拌溶解して、これに加温溶
解したカカオ脂（５００ｇ）を加えて攪拌分散許せた後
、瘍剤５００個に成形する。

（以下余白） 特許出願人：塩野義製薬株式会社 代理人：弁理士　潮１）雄−）′。

Claims (1)

1. 【特許請求の範囲】 次式： Ｐｙｒ−Ｘ−Ａｓｐ−Ｔｙｒ（ＳＯ＿３Ｈ）−Ｙ−Ｇｌ
   ｙ−Ｔｒｐ−Ｚ−Ａｓｐ−Ｐｈｅ−ＮＨ＿３（式中、Ｘ
   はＧｌｎまたは単に結合部を示し、ＹはＴｈｒまたはＬ
   ｅｕを示し、ＺはＭｅｔまたはＮｌｅを示す）で表わさ
   れるペプチドまたはその製薬上許容される塩を有効成分
   とする記憶力増強剤。