JPH0141609B2 - - Google Patents

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JPH0141609B2
JPH0141609B2 JP55183671A JP18367180A JPH0141609B2 JP H0141609 B2 JPH0141609 B2 JP H0141609B2 JP 55183671 A JP55183671 A JP 55183671A JP 18367180 A JP18367180 A JP 18367180A JP H0141609 B2 JPH0141609 B2 JP H0141609B2
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JP
Japan
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tylosin
apramycin
combination
physiologically acceptable
antibiotic
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Application number
JP55183671A
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English (en)
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JPS5699417A (en
Inventor
Enu Haru Robaato
Esu Gorudeii Robaato
Ii Ose Aaru
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Eli Lilly and Co
Original Assignee
Eli Lilly and Co
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Filing date
Publication date
Application filed by Eli Lilly and Co filed Critical Eli Lilly and Co
Publication of JPS5699417A publication Critical patent/JPS5699417A/ja
Publication of JPH0141609B2 publication Critical patent/JPH0141609B2/ja
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    • A61MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61KPREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/70Carbohydrates; Sugars; Derivatives thereof
    • AHUMAN NECESSITIES
    • A23FOODS OR FOODSTUFFS; TREATMENT THEREOF, NOT COVERED BY OTHER CLASSES
    • A23KFODDER
    • A23K20/00Accessory food factors for animal feeding-stuffs
    • A23K20/10Organic substances
    • A23K20/195Antibiotics
    • AHUMAN NECESSITIES
    • A61MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61PSPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P3/00Drugs for disorders of the metabolism
    • AHUMAN NECESSITIES
    • A61MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61PSPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P31/00Antiinfectives, i.e. antibiotics, antiseptics, chemotherapeutics
    • A61P31/04Antibacterial agents

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  • Pharmaceuticals Containing Other Organic And Inorganic Compounds (AREA)
  • Fodder In General (AREA)
  • Micro-Organisms Or Cultivation Processes Thereof (AREA)
  • Feed For Specific Animals (AREA)

Description

【発明の詳现な説明】
本発明は、マクロラむド抗生物質ずアミノグリ
コシド抗生物質ずからなる新芏抗生物質合剀抗
菌組成物に関する。この合剀は、殊に豚の倧腞
菌症colibacillosisの治療に有効であり、た
たこの皮の動物の成長促進剀ずしお、さらに飌料
摂取の改善に有甚であるこずが芋出されおいる。
たた、この合剀は、哺乳動物の組織培逊においお
マむコプラズマの生育を抑制する。 この合剀を圢成するマクロラむド抗生物質およ
びアミノグリコシド抗生物質は、すべお既知であ
る。タむロシンtylosinは米囜特蚱3178341お
よびメルク・むンデツクス版No.9486に蚘茉
されおおり、動物甚抗生物質ずしお垂販されおい
る。スピロマむシンspiromycinは米囜特蚱
2943023およびメルク・むンデツクス版No.
8525に蚘茉されおいる。ロむコマむシン
leucomycinはメルク・むンデツクス版
No.5307に蚘茉されおいる。マグナマむシン
magnamycinは米囜特蚱2960438およびメル
ク・むンデツクス版No.1812に蚘茉されおい
る。オレアンドマむシンoleandomycinは米
囜特蚱2757123および同2842481ならびにメルク・
むンデツクス版No.6671に蚘茉されおいる。 アミノグリコシド抗生物質であるトブラマむシ
ンtobramycinおよびアプラマむシン
apramycinは、それぞれネブラマむシン
nebramycin因子およびずいう別名称でも
知られおいる。トブラマむシン、アプラマむシン
およびネブラマむシン因子は、Streptomyces
tennibrariusによ぀お生産されるネブラマむシン
耇合䜓の構成々分であり、米囜特蚱3691279に蚘
茉されおいる。トブラマむシンは、ヒトに察する
医薬ずしお臚床䞊実甚に䟛されおいる。ネオマむ
シンneomycinは米囜特蚱2799620に蚘茉され
おおり、ゲンタマむシンgentamycinは米囜
特蚱3091572およびメルク・むンデツクス版
No.4233に蚘茉されおいる。 本発明によ぀お提䟛される抗生物質合剀は、(a)
タむロシン、ロむコマむシン、マグナマむシン、
スピロマむシンおよびオレアンドマむシンならび
に生理的に蚱容されるそれらの塩から遞らばれた
マクロラむド抗生物質ず、(b)トブラマむシン、ア
プラマむシン、ネブラマむシン因子、ゲンタマ
むシンおよびネオマむシンならびに生理的に蚱容
されるそれらの塩から遞らばれたアミノグリコシ
ドずを含有する。 本発明はたた、䞊蚘の抗生物質合剀を豚に投䞎
するこずによ぀お、その成長たたは飌料摂取を促
進する方法を提䟛する。 本発明はたた、䞊蚘の抗生物質合剀で哺乳類の
培逊組織を凊理するこずによ぀お、組織䞭でのマ
むコプラズマの生育を抑制する方法を提䟛する。 本発明はたた、䞊蚘の抗生物質合剀を豚に投䞎
するこずからなる豚の倧腞菌症の治療方法を提䟛
する。 本発明の抗生物質合剀は、マむコプラズマの抑
制に有甚であり、殊に個々の抗生物質に耐性を有
するマむコプラズマの堎合に有甚である。本合剀
の盞乗効果synergismは、マむコプラズマに
よる汚染が頻繁に起る哺乳動物の組織培逊で蚌明
された。皮々の现胞系列の組織培逊たずえば、
動物りむルスの増殖を行う堎合におけるマむコ
プラズマ汚染は、堎合によ぀おは数週間も培逊を
行぀た埌に、組織培逊物を駄目にしおしたうこず
がある。本発明合剀の盞乗掻性は、哺乳動物の組
織培逊における耐性マむコプラズマに察しお、最
もよく瀺される。ここで“耐性マむコプラズマ”
ずいう甚語は、本発明合剀に含たれるマクロラむ
ド抗生物質およびアミノグリコシド抗生物質の盞
方に察しお、それらの抗生物質が皮々の埮生物に
察しお䞀般に瀺すMIC最小発育阻止濃床より
高い濃床においお耐性であるマむコプラズマを意
味する。倚くのマむコプラズマが本発明合剀に含
たれる抗生物質に耐性である。哺乳動物の組織培
逊における汚染源ずなる耐性マむコプラズマで䞻
芁なのはマむコプラズマ・ヒペリニスM.
hyorhinisに属する株である。マむコプラズ
マ・ガリセプテむクムM.gallisepticumの耐
性株もたた頻床の倚い汚染菌である。本発明の盞
乗的合剀は、個々の抗生物質が単独では高濃床で
無効である耐性マむコプラズマの生育を䜎濃床で
阻止する。次に瀺す衚は、個々のマクロラむド
抗生物質およびアミノグリコシド抗生物質ならび
にそれらの合剀の最小発育阻止濃床MIC
mcgmlを瀺す。MIC倀は、各マむコプラズマ
で汚染された哺乳動物の培逊組織を甚い、䞋蚘の
実隓方法によ぀お埗た。 猿腎现胞LLC―MK2を培地199Morgan et
alProc.Soc.Exp.Bio.Med.731950に
懞濁し、これに各マむコプラズマを接皮现胞数濃
床が1.5×107個mlずなるように接皮する。各詊
隓に぀いおコントロヌル培地ずマむコプラズマ陜
性培地ずを甚い、37℃で―日間培逊し、次い
ですべおの培逊物の培地を、重炭酞ナトリりム
1.68を含む培地199䞭にの銬血枅を加
えたものに倉える。マむコプラズマを接皮した組
織培逊物マむコプラズマ陜性コントロヌル培逊
物を陀くを衚に瀺すように各抗生物質単独お
よび合剀で凊理した。抗生物質の合剀を詊隓する
堎合、特量の抗生物質を甚いた。 抗生物質の溶液は、重炭酞ナトリりム1.68
を含む培地199を甚いお調補した。この溶液を
ミリポア玙porosity0.2Όを通しお滅菌
過し、䜿甚時たで℃で貯蔵した。抗生物質溶液
を倍数皀釈し、各溶液を別々の培逊物に加えお最
小発育阻止濃床を決定した。各培逊物の培地は週
に回亀換し、その郜床新たに抗生物質溶液を同
䞀濃床ずなるように加えた。週間埌、培地亀換
を抗生物質抜きでさらに週間行぀た。最終の
週間、培地亀換の床に培逊物のサンプルを予め取
り、マむコプラズマの存圚を怜定するために培逊
した。
【衚】
【衚】 むシン
【衚】 衚に瀺されおいるように、詊隓に䟛したマむ
コプラズマは、個々の抗生物質の堎合、高濃床に
おいおのみ抑制された。しかしながら、本発明の
マクロラむド―アミノグリコシド合剀を甚いた堎
合は、遥かに䜎濃床でこれらのマむコプラズマを
抑制した。各合剀では、個々の抗生物質は等量ず
぀䜿甚した。 本発明の合剀は、哺乳動物組織に察しお無毒性
であり、现胞系cell linesをマむコプラズマ
汚染なしに保存するために䜿甚され埗る。本合剀
はたた、通垞培逊組織の现菌汚染を防止するため
に䜿甚される他の抗生物質ただし、マむコプラ
ズマの抑制には効果がないず組合せお䜿甚する
こずもできる。たずえば、この盞乗的合剀は、組
織培逊で䞀般に甚いられるペニシリンたずえ
ば、ペニシリンやストレプトマむシンず共に
䜿甚され埗る。 本発明の奜たしい合剀はタむロシン―トブラマ
むシンである。この組合せは、タむロシンおよび
トブラマむシンが単独では高濃床においおのみ䜜
甚するマむコプラズマに察しお、䞀貫しお䜎い最
小発育阻止濃床を瀺した。次に掲げる衚は、猿
腎现胞LLC―MK2を甚いる組織培逊おいおM.
hyorhinisの生育を阻止する皮々のタむロシン―
トブラマむシン合剀を甚いお埗た結果を瀺す。こ
の詊隓は次のようにしお実斜した。 LLC―MK2现胞に察し、タむロシン―トブラ
マむシン合剀を添加する日前にM.hyorhinisを
接皮し、䞡抗生物質を皮々の混合比で、か぀濃床
を倉えお䜿甚した。培地の亀換は、―日毎に
行い、その郜床抗生物質を加えた。培地亀換の床
に培逊培地のサンプルを取り、マむコプラズマの
怜定を行぀た。衚の数倀は、M.hyorhinisの生
育を阻止した合剀における抗生物質の混合割合を
瀺しおいる。
【衚】 衚に瀺したすべおのタむロシン―トブラマむ
シン合剀は、3.5週間にわた぀お実斜した―
回のサンプリングにおいおマむコプラズマの生育
を阻止した。単独䜿甚の堎合は、タむロシン、ト
ブラマむシン共に衚に瀺したように遥かに高い
MIC倀を瀺す。 衚の数倀は、䜎濃床で本発明の抗生物質合剀
が盞乗的に有効であるこずを瀺しおいる。重量
郚以䞊のトブラマむシンに察しお重量郚以䞊の
タむロシンを含む合剀が奜たしい盞乗的組成物で
ある。 本発明の、他の奜たしい合剀はトブラマむシン
ずアプラマむシンの組合せである。衚に瀺され
おいるように、タむロシン12mcgmlずアプラマ
むシン12mcgmlを含む溶液はマむコプラズマを
阻止するが、アプラマむシン単独のMICは
600mcgmlであり、タむロシンのそれは
200mcgmlである。 他の奜たしい合剀は、タむロシンずゲンタマむ
シンの組合せである。 本発明のマクロラむド抗生物質ずアミノグリコ
シド抗生物質ずの合剀で盞乗䜜甚が蚌明されるの
に、マクロラむド―マクロラむド抗生物質合剀の
倚くは組織培逊においお倚少のマむコプラズマ抑
制掻性の増加が芋られるこずがあ぀おも殆んど盞
乗効果は瀺さない。 盞乗効果のある合剀を組成するマクロラむドお
よびアミノグリコシド抗生物質は、遊離塩基であ
぀おもよいし、適圓な酞付加塩であ぀おもよい。
これらの抗生物質は鉱酞およびカルボン酞ず塩を
圢成する。この皮の塩の䟋ずしおは、タむロシン
塩酞塩、タむロシン酒石酞塩、タむロシンリン酞
塩、スピロマむシンアゞピン酞塩、スピロマむシ
ン塩酞塩、オレアンドマむシン塩酞塩、ロむコマ
むシン臭化氎玠酞塩、マグナマむシン酒石酞塩、
トブラマむシン硫酞塩、アプラマむシン塩酞塩ネ
オマむシン硫酞塩、ネオマむシン塩酞塩、ゲンタ
マむシン塩酞塩、ゲンタマむシン硫酞塩がある。 本発明の抗生物質補剀は遊離塩基たたは塩の圢
で抗生物質の也燥粉末を混合するこずによ぀お補
造される。あるいは、適圓な濃床の抗生物質の溶
液を混合し、二぀の抗生物質を所望の濃床で含む
溶液を埗おもよい。それぞれの抗生物質は氎性媒
質に充分可溶であり、氎性組織培逊甚培地を甚い
る溶液補剀は、哺乳動物の組織培逊におけるマむ
コプラズマ汚染を制埡するのに奜適である。 本発明の盞乗性抗生物質合剀は、広範な哺乳動
物組織におけるマむコプラズマの生育を阻止し、
埓぀おこれら組織の汚染および損倱を防止するた
めに甚いられる。たずえば、米囜特蚱3904480
Hull et alに蚘茉されおいる方法によるプラ
スミノゲン掻性化剀の補造における哺乳動物の組
織培逊にも本発明の合剀を䜿甚するこずができ
る。 本発明の抗生物質合剀は、マクロラむド抗生物
質ずアミノグリコシド抗生物質ずの重量比が15
乃至15をも぀お構成される。マクロラむド
ずアミノグリコシドの奜たしい重量比は乃
至である。 本発明抗生物質合剀の奜たしい䞀圢態であるタ
むロシンずアプラマむシンの合剀は、離乳埌の豚
の発育を増進するためにも甚いられ埗る。タむロ
シン―アプラマむシン合剀は、離乳埌の豚におい
お、それぞれの抗生物質を単独で甚いた堎合より
も、より高い飌料摂取ずより高い䜓重増加をもた
らす。離乳埌の豚における飌料摂取および䜓重増
加に察するタむロシン―アプラマむシン合剀の効
果は、䞋蚘の方法による動物実隓で蚌明した。 実隓は、畜舎pen圓り頭の豚を収容した
耇数の畜舎を甚いお28日間実斜した。䜿甚した豚
は、雌雄混成で、平均初期䜓重12.89Kg、平均什
週であ぀た。動物には、飌料を䞎える前埌に氎
を䞎え、日回、䞋蚘組成の飌料を䞎えた。 成 分 癟分比 小麊 21 倧麊 23.5 トりモロコシ 20 魚肉 2.5 むヌスト 1 小麊フスマ 10 アルフアルフア 2.5 倧豆粉 14 カラスムギ皮oat hulls 1.8 リン酞カルシりム 1 炭酞カルシりム 1.1 塩化ナトリりム 0.1 プレミツクスSV12 1 プレミツクスSO4 0.5 実隓では、タむロシン―アプラマむシン合剀を
タむロシンおよびアプラマむシンの れぞれ単
独䜿甚ず比范した。 各抗生物質およびそれらの合剀は、動物飌料に
加えお投䞎した。各抗生物質の混合比は、単独の
堎合は100ppm、合剀の堎合はそれぞれ100ppmず
した。 回の同様の実隓の総合結果は、䞋蚘の衚に
瀺されおいる。
【衚】
【衚】 衚における統蚈蚘号の意矩は次のずおりであ
る。
平均倀± 暙準偏差倉動係数 Relネガテむブコントロヌルを100ずする比
范倀。 衚から明らかなように、タむロシン―アプラ
マむシン合剀で凊眮した豚は、28日間の実隓にお
いお、タむロシン単独たたはアプラマむシン単独
で凊眮した豚より高い䜓重増加ず良奜な飌料効率
を瀺した。 次に、タむロシン―アプラマむシン合剀の効力
は、離乳豚のコントロヌル詊隓によ぀お明らかに
された。その結果は、本抗生物質合剀で凊眮した
豚は、アプラマむシン単独たたはタむロシン単独
で凊理した豚に比しお、倧腞菌䞋痢の頻床が極め
お著るしく䜎枛されたこずを瀺しおいる。さらに
該合剀を䞎えた豚は、いずれか䞀方の抗生物質を
䞎えた豚に比しお、より高い日圓りの䜓重増加
を瀺し、か぀より改善された飌料効率を瀺した。 次の衚は、離乳豚を甚いお21日間で埗られた
結果を瀺しおいる。タむロシンおよびアプラマむ
シンは、それぞれ110ppmの割合で飌料に混入し
お投䞎した。同様にしお抗生物質合剀は、
110ppmの割合で䞡抗生物質を飌料に含たせお投
䞎した。結果は、詊隓で埗られた数倀を統蚈的に
評䟡し、未凊眮のコントロヌル矀を越えた増加分
を癟分率で瀺す。
【衚】 衚に瀺されおいるように、タむロシンは、単
独䜿甚の堎合でも、飌料効率の改善、䜓重増加お
よび䞋痢回数の䜎枛に有効であ぀た。アプラマむ
シンは、単独䜿甚においお、それぞれの怜定項目
に぀いお既知の効果を瀺した。意倖にも、䞡抗生
物質を組合せお䜿甚するず、アプラマむシン単独
䜿甚の堎合よりも、各項目に぀き著倧な改善を瀺
した。前述のずおり、タむロシンが離乳埌の豚に
おける倧腞菌症に有効であるこずはこれたで知ら
れおいなか぀たので、アプラマむシン単独の堎合
より優れたタむロシン―アプラマむシン合剀の効
果は予期しないものであ぀た。 本発明の方法は、タむロシンおよびアプラマむ
シンの治療的に有効な量を離乳豚に投䞎するこず
からなる。投䞎し埗る䞡抗生物質の合蚈量および
その配合比は倉り埗る。動物飌料における抗生物
質の有効混合比は、疟病の重節床、動物什および
䜓重等の諞因子によ぀お倉る。䞡抗生物質を合せ
た飌料䞭の混合比は50ppm乃至1000ppmであり、
タむロシンずアプラマむシンずの重量比は、
乃至である。䞀般的に有甚な䞡抗生物質
を合せた飌料ぞの混合比は、100ppm乃至300ppm
である。奜たしい混合比は玄200ppmであり、䞡
抗生物質の重量比はである。 タむロシンおよびアプラマむシンは塩基性物質
であり、鉱酞、カルボン酞およびスルホン酞ず塩
を圢成する。たずえば、塩酞塩、硫酞塩、リン酞
塩、酒石酞塩、ク゚ン酞塩、ラりリルスルホン酞
塩、ヘキサン酞塩、ベンれンスルホン酞塩等であ
る。本発明の方法においお、抗生物質は遊離塩基
の圢ばかりでなく、塩の圢でも䜿甚され埗る。タ
むロシンの奜たしい塩は、酒石酞塩およびリン酞
塩である。奜たしいアプラマむシンの塩は、硫酞
塩および塩酞塩である。 タむロシンおよびアプラマむシンは、䞡者をプ
レミツクスに含めお補品化しおもよいし、たた埌
で飌料に添加するためのプレミツクスずしおもよ
い。たた、この二぀の抗生物質を盎接最終飌料に
混合しおもよい。 塩基圢の抗生物質は、その塩類ず同様に、氎に
可成り溶ける。これら抗生物質は、奜たしくは塩
の圢で動物の飲料氎に加えお、治療䞊有効な濃床
の溶液ずしおもよい。飌料の堎合ず同様に、飲料
氎䞭の抗生物質の濃床も倉り埗る。䞡抗生物質の
濃床が10mcgml乃至500mcgmlで、抗生物質
盞互の重量比が乃至であれば、動物
に察しお所期の効果をもたらすのに䞀般に充分で
ある。飲料氎䞭の奜たしい抗生物質濃床は
50mcgml乃至300mcgmlである。 タむロシンおよびアプラマむシンからなる抗生
物質合剀は、動物飌料たたは飲料氎に混ぜお投䞎
するのが最も実際的であるが、豚に察しお泚射投
䞎しおも有効である。泚射投䞎甚には、䞡抗生物
質を適圓な補薬䞊蚱容される皀釈剀たずえば、
氎、生理食塩氎、デキストロヌズず共に補剀す
るこずができる。タむロシン―アプラマむシン合
剀の泚射投䞎は、離乳豚が疟病による衰匱のため
充分な量の薬物添加食物を摂取し埗ない堎合の治
療に甚いられる。この皮の堎合には、抗生物質合
剀を豚に察しお毎日泚射投䞎する。たた、これら
の抗生物質を適圓な経口投䞎量剀型たずえば、
錠剀、カプセル剀、懞濁剀に補剀しお、薬剀添
加飌料の充分量を喫食し埗ない豚に投䞎するこず
もできる。 タむロシン―アプラマむシン合剀の倧腞菌症に
察する治療予防効果は、離乳豚を甚いる21日間の
詊隓結果によ぀お瀺される。豚を䜓重により、
頭ず぀の凊眮およびコントロヌル矀に分けた。各
凊眮は、無䜜為に矀に割圓お、動物は通垞の飌
料を任意に摂取させる䞀方、凊眮矀には各抗生物
質110ppmを含む飌料を䞎えた。䜓重増加、飌料
効率および䞋痢の頻床を、凊眮に察する応答ずし
お芳察した。21日埌に埗られた結果は、衚に瀺
されおいる。
【衚】 別添の図衚は、䞊蚘の詊隓で埗られた平均䞋痢
評点を時間日に察しおプロツトしたグラフで
ある。プロツトは、コントロヌル矀および各凊眮
矀の平均評点で行぀た。タむロシン―アプラマむ
シン合剀凊眮矀の平均評点プロツトが瀺しおいる
ように、䞋痢頻床はアプラマむシン単独凊眮矀で
の頻床より著しく䜎か぀た。このグラフはたた、
タむロシン単独でも䞋痢頻床の䜎枛にある皋床有
効であるこずを瀺しおいる。 本発明の方法を実斜するには、豚を離乳期から
離乳埌―週間本抗生物質合剀で凊眮する。病
状が重節であるずきは、必芁に応じおさらに長期
治療するこずもできる。 前蚘衚に衚瀺した数倀は、凊眮矀ずコントロ
ヌル矀ずの間の䞋痢頻床の盞違を、コントロヌル
矀に察する癟分率で瀺しおいる。 本発明のタむロシン―アプラマむシン合剀は、
パステナレラ・ヘモリテむカの株Pasteurella
hemolytica strainsに察しお盞乗的掻性を有す
る。この埮生物は牛の肺炎を起し、重節な感染は
死に至らしめる。タむロシン―アプラマむシン合
剀の盞乗効果は、P.hemolytica41D株に察するin
vitro詊隓で蚌明された。タむロシン単独の最小
発育阻止濃床は50mcgmlであり、アプラマむシ
ン単独のそれは25mcgmlであ぀た。二぀の抗生
物質の合剀の盞乗的掻性は、所謂“チ゚ツカヌボ
ヌド”滎定法によ぀お蚌明された。この方法で
は、二぀の抗生物質ず順次皀釈し、各皀釈床ごず
に、さらに各皀釈床のすべおの組合せに぀いお怜
定を行぀お、被隓の生育を阻止する濃床を、各抗
生物質単独および䞡者の組合せに぀いお求める。
䞡抗生物質の盞互䜜甚は、代数孊的たたは幟䜕孊
的に決定され埗る。代数孊的手法では、生育を阻
止する組合せにおける各抗生物質の濃床を、その
抗生物質を単独で䜿甚しお同䞀の効果を埗るずき
の濃床ずの比で求める。この比の合蚈がであれ
ばこの組合せは盞加的であり、その合蚈がより
小さければこの組合せは盞乗的であり、そしおそ
の合蚈がより倧きければその組合せは拮抗的で
あるこずになる。 タむロシン、アプラマむシンおよび䞡者の組合
せのP.hemolyticaに察するin vitro詊隓で埗た数
倀を甚いた蚈算結果を以䞋に瀺す。 タむロシン単独MIC50mcgml アプラマむシン単独MIC25mcgml タむロシンアプラマむシン 25500.825 12.5506.2525 6.255012.525 䞋蚘の抗生物質合剀が奜たしい組合せである。 タむロシン―トブラマむシン タむロシン―アプラマむシン タむロシン―ゲンタマむシン ロむコマむシン―トブラマむシン スピロマむシン―トブラマむシン マグナマむシン―トブラマむシン 特に奜たしい組合せは、タむロシン―トブラマ
むシン、タむロシン―アプラマむシンおよびタむ
ロシン―ゲンタマむシンである。 本発明の抗生物質合剀は、䞊述のずおり、皮々
の動物疟病の治療䞊、動物甚薬品ずしお䟡倀ある
ものである。たた、この合剀は、組織培逊法によ
぀おりむルスを増殖させるに際しお、マむコプラ
ズマ汚染を制埡するためにも䟡倀あるものであ
る。 以䞋の実斜䟋は、本発明をさらに具䜓的に説明
するものである。 実斜䟋  組織培逊甚フラスコ䞭で、銬血枅を含む培
地199にLLC―MK2猿腎现胞系现胞を懞濁さ
せたもの各mlに、日什のMycoplasma
hyorhinisむヌトン培地、×108個mlを接
皮した。现胞懞濁液の容積に察しお玄―の
マむコプラズマ培逊物を甚いた。接皮埌、现胞懞
濁液は、37℃で―日間培逊した。コントロヌ
ル培地も同様にしお調補した。培逊埌、コントロ
ヌル培逊物およびマむコプラズマ含有培逊物の培
地を、銬血枅ず1.68の重炭酞ナトリりムを
含む新鮮な培地199で眮換した。次に、この培逊
物を、圓り1..68の重炭酞ナトリりムを含
む培地199にタむロシン、トブラマむシンおよび
タむロシン―アプラマむシン合剀を溶かした溶液
で凊理した。各抗生物質および合剀の溶液は、濃
床1000mcgmlで調補した。合剀の溶液は各抗生
物質の濃床が1000mcgmlずなるようにした。
倍皀釈法により、0.39mcgmlたでの皮々の濃床
の溶液を調補した。各抗生物質溶液を、組織培逊
液を含む別々のフラスコに加えた。 組織培逊培地は、フラスコごずに週に回亀換
し、培地亀換の郜床、週間にわた぀お、同䞀濃
床の新しい抗生物質溶液を添加した。週間埌、
新鮮培地の亀換はさらに週間、抗生物質の添加
を行わずに続けた。培地亀換の郜床、その前に培
逊物のサンプルを採り、培逊しおマむコプラズマ
の存吊を確めた。各抗生物質タむロシンおよびト
ブラマむシンならびにその合剀の最小発育阻止濃
床は、サンプルに぀いおマむコプラズマの培逊に
成功しなか぀た組織培逊における抗生物質の最䜎
濃床ずした。最小発育阻止濃床は、タむロシン単
独では100mcgml、そしおトブラマむシン単独
では100mcgmlであ぀たのに察しお、合剀では
3mcgmlであ぀た。 実斜䟋  タむロシン、アプラマむシンおよびタむロシン
―アプラマむシン合剀に぀いお、実斜䟋に蚘茉
した方法ず手順でM.hyorhinisHHによる組織培
逊汚染詊隓を行぀たずころ、タむロシン単独では
MIC200mcgml、アプラマむシン単独では
MIC600mcgml、タむロシン―アプラマむシン
合剀ではMIC12mcgmlであ぀た。 実斜䟋  実斜䟋の方法においお、M.hyorhinisを䜿甚
し、トブラマむシンに代えおゲンタマむシンを、
タむロシン―トブラマむシン合剀に代えおタむロ
シン―ゲンタマむシン合剀を甚いたずころ、タむ
ロシン単独のMICは400mcgmlであ぀た。そし
お、タむロシン―ゲンタマむシン合剀では、
MIC0.78mcgmlを瀺した。 実斜䟋  実斜䟋で甚いたタむロシン―トブラマむシン
合剀に代えお、ロむコマむシン―トブラマむシン
合剀を䜿甚した。ロむコマむシン単独では
MIC400mcgml、そしおトブラマむシン単独で
はMIC200mcgmlであ぀たが、合剀では
MIC0.78mcgmlであ぀た。 実斜䟋  平均䜓重6.0Kgの離乳豚96頭を、䜓重により任
意に、畜舎圓り頭ず぀12畜舎に分けた。これ
に、次の皮の凊眮を行぀た。薬物を投䞎し
ないコントロヌルアプラマむシン110ppm
を飌料に混入しお摂取タむロシンリン酞塩
110ppmを飌料に混入しお摂取アプラマむ
シン硫酞およびタむロシンリン酞塩の䞡者
110ppmを飌料に混入しお摂取。各凊理は、畜
舎でレプリケヌトした。 豚は、20蛋癜質のトりモロコシ―倧豆飌料に
若干の抌しカラスムギrolled oatsを加えた
ものを、21日間任意に喫食させた。糧食のバラン
ス䞊必芁なビタミン類およびミネラル類を加え
た。すべおの豚の飌料は、適圓な抗生物質たたは
抗生物質合剀を薬物添加区で加えた点だけで異぀
おいた。すべおの飌料は喫食前に怜量し、怜量期
間の終点で残存飌料を怜量し、廃棄した。豚の䜓
重は、詊隓開始時およびその埌週ごずに怜量し
た。 䞋痢評点は畜舎単䜍で行぀た。評点は、同䞀人
が初めの13日間は日回のスケゞナヌルで、14
日目は回実斜した。評点指暙は、衚の蚻
に瀺したものず同じずした。 番倖の畜舎の豚は现菌孊的調査甚ずした。こ
れらの豚は、各畜舎ぞの配分埌に䞋痢を起した時
点で、薬物添加飌料を䞎えるこずなく剖怜した。 十二指腞たたは回腞内容物ml圓りのベヌタヌ
溶血性倧腞菌beta hemolytic E.coliの数を、
剖怜した動物で蚈枬した。その結果、怜定した
頭の豚の十二指腞䞭に107および108個の倧腞菌の
存圚を蚌明した。サルモネラの培逊詊隓の結果は
陰性であ぀た。 この詊隓結果は、䜓重増加、䞋痢頻床の䜎枛お
よび飌料効率の改善の各項目に぀いお衚および
に瀺されおいる。
【図面の簡単な説明】
図面は、アプラマむシン、タむロシンおよびタ
むロシン―アプラマむシン合剀の豚䞋痢症に察す
る効果を瀺すグラフである。

Claims (1)

  1. 【特蚱請求の範囲】  (a) タむロシン、ロむコマむシン、マグナマ
    むシン、スピロマむシンおよびオレアンドマむ
    シンならびに生理孊的に蚱容されるそれらの塩
    からなる矀から遞ばれたマクロラむド抗生物質
    ず、 (b) トブラマむシン、アプラマむシン、ネブラマ
    むシン因子、ゲンタマむシンおよびネオマむ
    シンならびに生理孊的に蚱容されるそれらの塩
    からなる矀から遞らばれたアミノグリコシド抗
    生物質ずを含有するこずを特城ずする抗菌組成
    物。  マクロラむド抗生物質がタむロシンたたはそ
    の生理孊的に蚱容される塩である特蚱請求の範囲
    蚘茉の抗菌組成物。  アミノグリコシド抗生物質がトブラマむシン
    たたはその生理孊的に蚱容される塩である特蚱請
    求の範囲たたは蚘茉の抗菌組成物。  アミノグリコシド抗生物質がアプラマむシン
    たたはその生理孊的に蚱容される塩である特蚱請
    求の範囲たたは蚘茉の抗菌組成物。  タむロシンたたはその生理孊的に蚱容される
    塩ずトブラマむシンたたはその生理孊的に蚱容さ
    れる塩を含有する特蚱請求の範囲蚘茉の抗菌組
    成物。  (a) タむロシン、ロむコマむシン、マグナマ
    むシン、スピロマむシンおよびオレアンドマむ
    シンならびに生理孊的に蚱容されるそれらの塩
    からなる矀から遞ばれたマクロラむド抗生物質
    ず、 (b) トブラマむシン、アプラマむシン、ネブラマ
    むシン因子、ゲンタマむシンおよびネオマむ
    シンならびに生理孊的に蚱容されるそれらの塩
    からなる矀から遞らばれたアミノグリコシド抗
    生物質ずを含有するこずを特城ずする抗菌組成
    物を豚に投䞎しお豚の成長を促進したたは飌料
    摂取を改善する方法。  (a) タむロシン、ロむコマむシン、マグナマ
    むシン、スピロマむシンおよびオレアンドマむ
    シンならびに生理孊的に蚱容されるそれらの塩
    からなる矀から遞ばれたマクロラむド抗生物質
    ず、 (b) トブラマむシン、アプラマむシン、ネブラマ
    むシン因子、ゲンタマむシンおよびネオマむ
    シンならびに生理孊的に蚱容されるそれらの塩
    からなる矀から遞らばれたアミノグリコシド抗
    生物質ずを含有するこずを特城ずする抗菌組成
    物を哺乳動物の組織培逊培地に添加しおマむコ
    プラズマの生育を抑制する方法。  (a) タむロシン、ロむコマむシン、マグナマ
    むシン、スピロマむシンおよびオレアンドマむ
    シンならびに生理孊的に蚱容されるそれらの塩
    からなる矀から遞ばれたマクロラむド抗生物質
    ず、 (b) トブラマむシン、アプラマむシン、ネブラマ
    むシン因子、ゲンタマむシンおよびネオマむ
    シンならびに生理孊的に蚱容されるそれらの塩
    からなる矀から遞らばれたアミノグリコシド抗
    生物質ずを含有するこずを特城ずする抗菌組成
    物を豚に投䞎しお豚の倧腞菌症を治療する方
    法。  抗菌組成物がタむロシンたたはその生理孊的
    に蚱容される塩ずアプラマむシンたたはその生理
    孊的に蚱容される塩を含有するものである特蚱請
    求の範囲蚘茉の方法。  抗菌組成物がタむロシンリン酞塩ずアプラ
    マむシン硫酞塩を含有するものである特蚱請求の
    範囲蚘茉の方法。
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