JPH0145352B2 - - Google Patents

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JPH0145352B2
JPH0145352B2 JP57217653A JP21765382A JPH0145352B2 JP H0145352 B2 JPH0145352 B2 JP H0145352B2 JP 57217653 A JP57217653 A JP 57217653A JP 21765382 A JP21765382 A JP 21765382A JP H0145352 B2 JPH0145352 B2 JP H0145352B2
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JP
Japan
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lactobacillus
medium
italicus
maltose
glucose
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JP57217653A
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JPS59106291A (ja
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Kenichiro Takayama
Izumi Masunaga
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KH Neochem Co Ltd
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Kyowa Hakko Kogyo Co Ltd
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    • CCHEMISTRY; METALLURGY
    • C12BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12PFERMENTATION OR ENZYME-USING PROCESSES TO SYNTHESISE A DESIRED CHEMICAL COMPOUND OR COMPOSITION OR TO SEPARATE OPTICAL ISOMERS FROM A RACEMIC MIXTURE
    • C12P7/00Preparation of oxygen-containing organic compounds
    • C12P7/40Preparation of oxygen-containing organic compounds containing a carboxyl group including Peroxycarboxylic acids
    • C12P7/56Lactic acid
    • CCHEMISTRY; METALLURGY
    • C12BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12NMICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
    • C12N1/00Microorganisms; Compositions thereof; Processes of propagating, maintaining or preserving microorganisms or compositions thereof; Processes of preparing or isolating a composition containing a microorganism; Culture media therefor
    • C12N1/20Bacteria; Culture media therefor
    • C12N1/205Bacterial isolates
    • CCHEMISTRY; METALLURGY
    • C12BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12RINDEXING SCHEME ASSOCIATED WITH SUBCLASSES C12C - C12Q, RELATING TO MICROORGANISMS
    • C12R2001/00Microorganisms ; Processes using microorganisms
    • C12R2001/01Bacteria or Actinomycetales ; using bacteria or Actinomycetales
    • C12R2001/225Lactobacillus

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Description

【発明の詳細な説明】
本発明は新菌種ラクトバチルス・イタリカスに
関する。さらに、詳しくは本発明は下記の菌学的
性質を有することを特徴とするラクトバチルス・
イタリカス (1) グラム陽性 (2) 無胞子 (3) 運動性なし (4) 桿菌 (5) 嫌気性ないし通性好気性 (6) カタラーゼ陰性 (7) 生育至適温度28〜32℃ (8) 生育至適PH 5.4〜5.8 (9) グルコース及びマルトースのみを資化して
DL−乳酸、エタノール及び炭酸ガスを生成す
る。 に関する。 本新菌種は乳酸生産菌として有用である。 本発明者らは有用な乳酸生産菌を探索すべく
種々検討した結果、イタリアの菓子パンであるパ
ネトーネのパン種から分離した菌種が既知の乳酸
菌のいずれにも該当しない新菌種であることを見
い出し、該菌種をラクトバチルス・イタリカス
(Laftobacillus italicus)と命名した。 本発明の新菌種の具体例としては、ラクトバチ
ルス・イタリカスTL−1(微工研条寄第189号)
およびSH−150(微工研条寄第190号)があげられ
る。 以下にラクトバチルス・イタリカスTL−1お
よびSH−150の菌学的性質を示す。 () ラクトバチルス・イタリカスTL−1の菌
学的性質 A 形態的性質 ML培地※ において(0.8〜1.0)×(2〜7)
μの桿菌で単一または連鎖状に存在する。胞
子は形成せず、非運動性、グラム陽性であ
る。 ※ ML培地 ペプトン 12.5g 酵母エキス 12.5g リン酸一水素カリウム 250mg リン酸二水素カリウム 250mg 硫酸マグネシウム 100mg 硫酸マンガン 5.0mg 硫酸第一鉄 5.0mg システイン塩酸塩 300mg ツイーン80 300mg 酢酸ナトリウム 10g ブドウ糖 10g 麦芽糖 10g 水 1000ml 1N又は6NHClでPH5.6に調整した培地 B 培養的性質 (1) ML寒※※ 天平 板培養 30℃、2日培養で約1mmまたはそれ以下の直
径の円形、平滑、全縁、隆起状、半透明の乳
白色のコロニーを形成する。 ※※ ML寒天培地 ML培地にさらに寒天20gが添加されている
培地。 (2) ML培地液体培養 中程度の濁度で表面には生育せず、毛房状の
沈殿を生じる。 (3) ML寒天穿刺培養 穿刺に沿つて一様に生育、表面にも生育す
る。 C 生理的性質 (1) 生育温度 至適28〜32℃ 範囲15〜38℃ (2) 生育PH 至適5.4〜5.8 範囲4.2〜6.5 (3) 酸素に対する態度通気鎌気性、好気的にも
生育するがCO2カス下の方が生育良好であ
る。 (4) 生育必須物質上記ML培地中、不飽和脂肪
酸の要求性はない。 (5) 糖から酸及びガスの生成 グルコース及びマルトースから酸及びガスを
生成する。 アラビノース、キシロース、リボース、フ
ラクトース、マンノース、ガラクトースシユ
クロース、ラクトース、メリビオースサリシ
ンからは酸及びガスも生成しない。 (6) 炭素源の資化性 グルコース及びマルトースを質化する。 マルトースがグルコースより旺盛に資化さ
れる。 アラビノース、キシロース、ガラクトー
ス、酢酸、クエン酸、グルコン酸、プロピオ
ン酸を単一炭素源として資化できない。 (7) ゼラチンを液化しない。 (8) リトマスミルク:不変 (9) 硝酸塩を還元しない。 (10) 脱窒反応応陰性 (11) ウレアーゼ:陰性 (12) カタラーゼ:陰性 (13) オキシダーゼ:陰性 (14) インドールを生成しない (15) 硫化水素を生成しない (16) でん粉を加水分解しない (17) VP反応:陰性 (18) グルコース及びマルトースからの生成物
DL−乳酸とエタノール (ほゞ1:0.4〜0.6の比率) () ラクトバチルス・イタリカスSH−150上記
ラクトバチルス・イタリカスTL−1の菌学的
性質において、Cの(4)の生育必須物質の項で、
“上記ML培地中不飽和脂肪酸を要求する”と
いう性質以外はラクトバチルス・イタリカス
TL−1の菌学的性質と同じである。 上記の如く、TL−1菌及びSH−150菌はグラ
ム陽性、無胞子、通気嫌気性、カタラーゼ陰性の
桿菌であり、グルコース及びマルトースから乳酸
とアルコールを生成する故、ヘテロ発酵型のラク
トバチルス属と考えられる。 これらの菌は、グルコースとマルトースからの
み酸とガスを生成すること、通常のラクトバチル
ス属細菌はPH6.5〜7.0でも生育しうるが、本菌の
至適PHは5.4〜5.8にあること、ヘテロ発酵型のラ
クトバチルスは一般にグルコン酸を資化できるが
本菌は資化できないことなどから、本菌はバージ
ーズ・マニユアル (Bergey's Manual)8版記載のラクトバチル
ス属細菌のいずれとも異なる。 また、本菌はラクトバチルス・サンフランシス
コ(Lactobacillus sanfrancisco)と類以性は高
いが、ラクトバチルス・サンフランシスコはグル
コースを殆んど資化しないこと、マルトースから
乳酸と酢酸を生成すること、生育に新鮮酵母エキ
スを必要とすることなどの点においては本菌と明
らかに異なる。 上記の理由から本発明者らはTL−1菌及びSH
−150菌を新菌種と見做し、ラクトバチルス・イ
タリカス(Lactobacillus italicus)と命名した。 尚、ラクトバチルス・イタリカスTL−1及び
SH−150の菌学的性質および新菌種として命命し
た準処について、以下に示す。 同定実験の方法は、長谷川武治編著「微生物の
分類と同定」学会出版センター(1975)によつ
た。また、分類、同定の基準として、バーギーズ
マニユアルオブデイターミナテイブバクテリオロ
ジー、第8版(1974)を、ラクトバチルス・サン
フランシスコについては、Appl.Microbiol.21、
459−465(1971)を参考にした。 次に本菌の培地法について説明する。 培地は固形培地および液体培地が目的に応じて
使用できる。ラクトバチルス・イタリカスの分離
または菌体の培養には前述のML培地が最適であ
る。 炭素源としては、グルコースとマルトースおよ
びそれらを含有する天然物例えばでん粉加水分解
液や小麦粉などが使用できる。酢酸、クエン酸な
ど有機酸の添加は生育の促進に有効である。 窒素源としては、有機窒素含有物が望ましく酵
母エキス、ペプトン、肉エキス、カゼイン、コー
ン・スチープ、リカー、トマトジユースなどが使
用できる。硫酸アンモニウム、硝酸アンモニウ
ム、リン酸アンモニウムなどの添加は生育の促進
に有効である。また、リン酸およびカリウム、ナ
トリウム、マグネシウム、マンガン、鉄、亜鉛、
モリブテンなどの金属イオンも生育の促進に有効
である。シスチン、システイン、グルタチオン、
アスコルビン酸などは酸素分圧を低下させる物質
として有効である。菌株によつて不飽和脂肪酸を
要求するものがあり、オレイン酸、ツイーン80、
レシチンなどの添加が必要である。培養温度は15
〜38℃、好ましくは28〜32℃、PHは4〜7、好ま
しくは5.4〜5.8であり、本菌はやゝ嫌気的であ
り、二酸化炭素の存在が一般に有効である。二酸
化炭素:空気の混合比は25〜95容量パーセントが
適している。 実施例 1 パネトーネ種0.3gを減菌生理食塩水10mlに懸
濁し、これを生理食塩水にて段階希釈を行い、
ML寒天上に0.1mlずつ塗布する。 これをBBL社ガスパツク嫌気培養システムを
利用し、CO2下ガスにおいて、30℃で2日間培養
する。該菌は、直径約1mmまたは、そ以下の半透
明で乳白色のコロニーとして出現する。コロニー
を平板から捨い、ML寒天に移し、30℃で1〜2
日間培養し、2種類のパネトーネから合計179株
を単離した。これらの株は、互いに極くわずかに
相違する点があるが、ほとんど類似した性状を示
し、同一種とみなしてよい。 そこで不飽和脂肪酸の要求性の有無からラクト
パチルス・イタリカスTL−1(要求なし)及び
SH−150(要求性あり)を選択した。なお、パネ
トーネ種の中の細菌数は約7×108/gであつた。 実施例 2 酵母エキス3g/L、ペプトン5g/L、
KH2PO40.25g/L、K2HPO40.25g/L、
MgSO4・7H2O0.1g/L、MnSO4・4H2O5.0
mg/L、FeSO4、7H2O5.0mg/L、システイン塩
酸塩300mg/L3ツイーン80 300mg/L(初発PH5.6)
を基礎培地とし、第1表に示すような炭素化合物
を添加し、その20mlを太型試験管に入れ120℃、
15分間オートクレープ殺菌を行なう。ML寒天培
養から集めたラクトバチルス・イタリカスTL−
1およびSH−150をそれぞれ約108/mlになるよ
うに上記培地に接種し、30℃で静置培養を行なつ
た。菌の生育量(濁度、OD660)は第1表に示す
とおりであつた。
【表】
【表】

Claims (1)

  1. 【特許請求の範囲】 1 下記の菌学的性質を有することを特徴とする
    ラクトバチルス・イタリカス (1) グラム陽性 (2) 無胞子 (3) 運動性なし (4) 桿菌 (5) 嫌気性ないし通性好気性 (6) カタラーゼ陰性 (7) 生育至適温度28〜32℃ (8) 生育至適PH 5.4〜5.8 (9) グルコース及びマルトースのみを資化して
    DL−乳酸、エタノール及び炭酸ガスを生成す
    る。
JP57217653A 1982-12-11 1982-12-11 新菌種 Granted JPS59106291A (ja)

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