JPH01501706A - 経口投与及び腸管外投与用のｎ，ｎ′―ビス―ｌ―アミノ酸―ｌ―シスチン―ペプタイドを含有するアミノ酸製剤 - Google Patents

Abstract

(57)【要約】本公報は電子出願前の出願データであるため要約のデータは記録されません。

Description

【発明の詳細な説明】 １、発明の名称 ２、発明の詳細な説明 含硫アミノ酸システィン及び酸化により容易に生成する安定なダイマーであるジ スルフイッド生成物シスチンは、なるほど、古典的な必須アミノ酸には属してい ないが、シスチンは哺乳類の栄養投与の際、慢性尿毒症の場合、肝硬変の場合及 び傷害の場合には、その際に提供されるアミノ酸製剤中の不可欠の構成成分とし て格付けされている。それらの場合における必要性の根拠は、先段階として役立 つ含硫アミノ酸メチオニン若しくはシスティンから生体中でシスチンが不充分に しか合成されていないか或いは完全に合成されないことである。

多くの場合、新生児又は早生児及び上記症状を有する患者は、血管経由で栄養投 与されなければならないので、シスチンを適当な栄養液中に適当量混入すること が必要である。このことは、然し乍ら、遊離のシスチンがｉＩｌの水に僅かにＯ ，ＩｇＬか溶けない極めて難水溶性によって妨げられている。

システィンをアシル化することにより、アミノ酸製剤に少量使用される溶解性誘 導体が既に創られている。しかし乍ら、このシスティン化合物も水溶液中で急速 にジスルフィッド生成物に激化される。

しかし、遊離のシスチンとは反対に、このＮ、Ｎ’−ビス−アセチルシスチンは 比較的良く水に溶けるので、溶解状態に留まるので。

このジアセチル化シスチンを注射製剤に使用することも試みられた。

しかし乍ら、極最近の研究によりアセチル化アミノ酸は人体では極めて評価され 難く、極めて僅かの量でしか人体独自の蛋白の構成に用いられ得ないことが明ら かになった。ジグリシル−シスチンは既に古くから溶解性シスチン化合物として 知られており、ペプチダーゼ測定用の基質として使用されている。それは、その ベプタイドの分解が不溶性シスチンの沈殿によって容易に測定されうるからであ る（Ｊ、Ｂｉｏｌ、Ｃｈｅ＋５ｉｓｔｒｙ、Ｂｄ、　１２８，２４１−２４３（ １９３９）参照）、栄養投与目的には、このシスチンベプタイドは、その必要性 があるに拘らず。

今まで実際に使用されていない。

チロシンやシスチンの様な難溶性のアミノ酸を二塩基性のアミノ酸であるリジン と縮合させることにより、極めて水溶性のベブタイドに変えることが出来ること も公知である。即ち殊に、ＥＰ−ＰＳ　８７７５１には、Ｎ”Ｌ−シスチニルー Ｎ’Ｌ−シスチニルーし一リジンであって、二つのシスチン残基が存在するに拘 らず、水溶性の良好なトリペプタイドの製造と利用とが説明されている。そのも のでは、二つのシスチン残基が、それぞれそのカルボキシル基の一つを以って、 リジンの二つの７ミノ基に結合している。

２モルのアラニンと１モルのシスチンからなり、公知のシスチン誘導体と同様に アラニン分子のそれぞれのアミノ基が、シスチンのカルボキシル基と結合されて いるトリペブタイドを合成することにより、容易に且つ安価であるが、良く消化 されうる水溶性のシスチントリベプタイドを創るという試みは、なるほど、その シスチンの二つのカルボキシル基がそれぞれアラニンのアミノ基と結合している 。

このＬ−シスチニルービスーＬ−アラニンが極めて水溶性であるが、加熱滅菌（ １２１℃）に際し、不安定であり、既に８分後には別の誘導体を形成するに到り 、結果としてシスチンの生体利用が軽減するか若しくは消失してしまうことが明 らかになった。

今、驚くべきことは、上記トリベブタイドとは異なって、一般式式中、ＲはＬ− アミノ酸−残基を意味する、で示されるＮ、Ｎ’　−ビスーＬ−７ラニルーＬ− シスチンーペブタイド、及び一般的にＮ。

Ｎ′−ビスーＬ−７ミノ１ｌ−Ｌ−シスチンーペブタイドが良好な水溶性である 許りでなく、水溶液中での加熱滅菌に際しても、安定を保っていること、即ち、 その場合、変化を受けず、またその様な安定性に拘らず、生体中で容易に分解さ れ利用されるから、栄養の経口投与及び腸管外投与用のアミノ酸製剤及びオリゴ ベブタイドー製剤中で生物利用性のシスチン化合物として極めて好適なものであ ることが確認された。

それら二種のベブタイド１例えばＬ−シスチニルービスーし一アラニン及び本発 明によるビスーＬ−７ラニルーＬ−シスチンの場合のアミノ酸組成が同一である から、その一つのトランス−アミノ酸ペブタイドの驚くべき安定性の解明は異な るアミノ酸配列の中にあるに違いない、シスチン残基がＮ−末端位置にあるとき は、シスチンの双方の遊離アミノ基は空間的に極めて近接して並んでいる。その 結果、熱負荷の下にアンモニアが遊離して分子内環化が起こりうる。

しかし乍ら、シスチンがＣ−末端位に組み込まれているときは、その遊離アミノ 基は、置換したそのアミノ酸残基のところに存在する。

これらの条件下では、環化は極めて起こり難い、何故ならば、それらアミノ基は 空間的に相互に離れているからである。ＣＯ，を遊離しての遊離の二つのカルボ キシル基の間の環化は、それらの基の新核性が低いために加熱に際して起こらな い様に見える＝不安定なＬ−シスチニルービスーＬ−アラニンの加熱処理に際し 、生成する熱処理生物質は、すべて２５４ｎｍで吸収するという事実も亦、その ことを示している。そのことは、シスチン基のジスルフィド結合が加熱滅菌処理 の間、攻撃されないことを示している。その上、熱処理に際して生成する新規生 成物はすべて２０６ｎｍに高いＵＶ吸収を示した。そのことからペブタイド結合 自体はなお、そのままの形で存在していることを結論することが出来る。

それらの結果から、カルボキシル−位のシスチン−残基を有するシスチントリペ ブタイドがＮ−位のアミノ酸一種類に係りなく、腸管外栄養投与用の溶液を加熱 滅菌する場合に充分な熱安定性を有していることが判る。このことは、システィ ンのＮ、Ｎ’−ビスーアラニルートリベプタイドについてだけでなく、自体古く より公知のＮ。

Ｎ′−ビス−グリシル−Ｌ−シスチン同様、類似のシスチンーペブタイドについ ても、また、本発明により経口栄養投与又は腸管外栄養投与用のアミノ酸製剤、 若しくはオリゴペブタイド製剤中のシスチン誘導体として使用にも適している。

Ｎｐ　Ｎ’　−ビスーＬ−ロイシルーＬ−シスチン、Ｎ、Ｎ’　−ビスーＬ−イ ソロイシルーＬ−シスチン又はＮ、Ｎ’　−ビスーＬ−フェニルアラニル−Ｌ− シスチンについても言えることである。そして、Ｎ、Ｎ’　−ビスーＬ−アラニ ルーＬ−シスチンが殊に、それら投与のために適している。

ジアミノ准−シスチンーベブタイドは、Ｎ−カルボキシ−無水物−法（ＮＣＡ− 法）を用いて常法で製造できる。その際、次いで、Ｒ。

ヒルシュマン外によりＪ、Ｏｒｇ、Ｃｈｅｍ、、Ｂｄ、３２，３４１５−３４２ ５（１９６７）；　Ｊ、Ａｍ。

Ｃｈｅｍ、Ｓｏｅ、　、Ｂｄ、９３．２７４７−２７５５（１９７１）に説明さ れている方法に準じて。

Ｓ−７セタミドメチルーＬ−システィンの遊離のアミノ基を添付すべきアミノ酸 のそれぞれＮ−カルボキシル無水物と反応させる。続いて保護基を分離し、准化 することによって対応するシスチンーペブタイドが取得できる。

ビスーアミノ象−シスチンーペブタイドの生体利用の生理学的−検討のためには 、例として、ビス−グリシル−Ｌ−シスチン及びビスーＬ−アラニルーＬ−シス チンが選ばれ、雄のウィスターラットに。

パブタイド−１回注射（５０，ｕｍｏｌ／１００ｇ　ＫＧ若しくは２０　ｐｅａ ｌ／１００ｇ　ＫＧ、注射量０．５−１　ｍｌ）をベナ　カバーカテーテルを用 いて、５秒以内に注射した。血液採取（ヘパリン添加注射器中１■ｌ）はバブタ イド投与後、　３０．６０，１２０，１８０及び３００秒に行なった。遠心分離 により取得した血清を、次いでプロティン沈殿するため３ｏ％５ＳＡ（試料：　 ＳＳＡ　１０：１）と混合し、１時間４℃に保持し、次いで遠心分離した。　゛ ペブタイド　ビス−グリシル−Ｌ−シスチン、モノ−グリシル−Ｌ−シスチン、 ビスーＬ−アラニルーＬ−シスチン、モノーＬ−アラニルーＬ−シスチン並びに 遊離の７ミノ准　グリシン、アラニン及びシスチンを定量するため、沈殿血清− 試料を５−ジメチルアミノナフタリン−１−スルホニルクロリド−（ＤＡＮＳＹ Ｌ−Ｃ１）で前カラム分離により高圧液体クロマトグラフィで分析した。

分析条件を下記に総括する。

ｎＡＮｓｙＬ−＝カラム　離によるＲＰ−ＨＰＬＣカラム：　スフェリソルブ　 ００５１１３μ■（１２５Ｘ４．６ｍ）溶出液：　（Ａ）　１２．５ｍＭリンｉ ｌ　−Ｎａ−バッファ　−ｐＨ６，６（Ｂ）４０％Ａ；６０％Ａ　ＣＮ 溶出量：　１．２ｍｌ／ｗｉｎ 検出　：　螢光Ｅ■５５０／Ｅス３２５第１表には、（Ｇｌｙ−Ｃｙｓ　）、　 （５０μｍｏｌ／１００１　ＫＧ　）を１回注射した後の各試料採取時点におけ るその都度測定されたバブタイド／アミノ准濃度が記されている。トリペプタイ ド（ＧｌｒＣｙｓ　）ｘの濃度は測定時間中１次第に減少する。その際、注射の ５分後には３０秒後に測定した値の約１０％に達しただけである−　（ＧｌｒＣ ｙｓ　）ｚの外に、すべての試料中にモノ置換ジペブタイドＧｌｙ−（Ｃｙｓ　 ）ｔ　（トリペブタイド［Ｇｌｙ−Ｃｙｓｌｚの加水分解の際の中間生成物）が 証明できる。

このジペブタイドの濃度が、最初の二つの測定時点に於いて一定に保たれている が、次いで（ＧｌｒＣｙｓ　）ｘにほぼパラレルに減少する。

注射の３０秒には既に、グリシン若しくはシスチンの濃度は、最初の濃度に対比 して幾倍（Ｇｌｙ：１２倍；　（Ｃｙｓ）＊：１４倍）も上昇している。

グリシンの各時点での濃度は同様に高い水準に保たれているけれども、曲線経過 から６ｏ秒若しくは１８０秒のところに二つの最大値を認めることができる。こ のＩＮ察は（Ｇｌｙ−Ｃｙｓ　）ｚの段階的な加水分解によって説明できる。そ の際、最初の段階では、グリシン及びモノ置換ジペプタイドＧｌｒ（Ｃｙｓ　） ａが遊離し、第二の相で、そのジペブタイドはアミノ酸グリシンとシスチンに分 解される。この場合、先ず存在しているトリペブタイドの急速な分解が起こり、 トリペブタイド濃度の減少後にはじめて、ジペブタイドのその後の加水分解が起 こるように見える。そのことは、測定したシスチン値によって証明された。グリ シンとは反対に、シスチン濃度は注射後５分までは連続して上昇し、最初の値の 約３０倍である値に達する。

２−コンパートメント−モデルをカイネチックな評価の基礎に置くときは、レシ ジュアル法を利用して、２４０±８９秒（ｎ＝５）なる半減期が計算できる。

浄書（内容１−＝ｚなし）　ｃｑ咬ν１り堕）第２図には、　２０μｓ’ｏｌ　 （Ｇｌｙ−Ｃｙｓ　）１／１００ｇ　ＫＧの注射後に測定された各採血時点での 血漿濃度が記されている。基本的にはその場合。

極めて類似した濃度経過が観察できる。最初の測定時間には二つのアミノ酸グリ シン及びシスチンの濃度は、出発時点に対比して可成り高い（Ｇｌｙ：５倍；　 （Ｃｙｓ）、：１０倍）。

シスチンの濃度が連続的に増加している間、グリシンは最初の１８０秒の間は比 較的一定に保たれ、３００秒後に僅かに低下する。１８０秒後に測定した値は、 １２０秒後よりも幾分高いけれども、この場合、第二の著しいグリシン最大値で あるものについては取り立てて言うことが出来ない。

興味のあることには、注射後３０秒には既に、加水分解中間生成物Ｇｌｙ−（Ｃ ｙｓ　）ｚについて、（Ｇｌｙ−Ｃｙｓ　）ａと似た様な濃度が測定される。そ れら二つのベプタイドの濃度は、その後の経過中に、連続的に同じ程度に低下す る。

ｂ）ビス−７ラニルーシスチン＝　（Ａｌａ−Ｃｙｓ　）ｚの注射第３図には（ Ａｌａ−Ｃｙｓ　）、（２０μｍｏｌ／１００ｇ　ＫＧ）の注射後の各試料採取 時点についてそれぞれ測定したパブタイド／アミノ酸濃度が記されている。

調査されていなかったトリペブタイド（Ａｌａ−Ｃｙｓ　）ｚは６匹の実験動物 すべてにおいて最初の２分に証明されただけであった。注射後１８０秒には、既 に（Ａｌａ−Ｃｙｓ　）、がなお一つの試料だけに僅かの濃度（約２５μｍｏｌ ／ｍｌ）で証明された。最後の採血時間には、何れの動物にも（Ａｌａ−ＣｙＳ 　）ｉは証明されなかった。

加水分解の中間生成物Ａｌａ−（Ｃｙｓ　）ｚの濃度は、注射後３０秒後には既 に、トリペブタイド（Ａｌａ−Ｃｙｓ　）ｔの濃度より約５倍高かった。

その後の経過においては、Ａｌａ−（Ｃｙｓ　）ｘの濃度は、極めて急速に低下 した。３ｏＯ秒後の実験の終結時には、なお、１匹の実験動物に極少量のＡｌａ −（Ｃｙｓ　）！が証明出来た。アラニンの濃度は、最初の間は出発時のほぼ７ 倍であったが、全測定時間中連続して低下した。３００秒後には、３倍の出発水 準に対応する値が達成された。

最大のシスチン濃度（出発濃度の２３倍）は、６０秒後に測定された６ｗＡ定時 間中、このアミノ酸の濃度はなるほど緩徐ではあるが、連続して低下した。

極めて急速なペブタイド消失の故に、それらデーターによって（Ｇｌｙ−Ｃｙｓ 　）ｚ同様に半減期を測定することは可能でなかった。それら既存データーから は、血漿半減期は２分以下にあるに違いないことが推定できるだけである。

それら二つの本発明により利用すべきビス−アミノ酸−シスチンペブタイドを以 って得られた結果は、（Ｇｌｙ−Ｃｙｓ　）ａも（Ａｌａ−Ｃｙｓ　）＊も、１ 回の注射後、急速に血漿から除かれることを明瞭に示している。それぞれのモノ 置換ジペブタイドの生成と、対応するｉ離のアミノ酸シスチンとグリシン若しく はアラニンの出発値に対比しての急速な濃度上昇とは、それらペブタイドの消失 が、主に（Ｇｌｙ−Ｃｙｓ）２若しくは（Ａｌａ−ＣｙＳ　）ｚの段階的な加水 分解によるものであると結論させる。モノ置換ジペブタイドの高い血漿濃度は、 その場合。

血漿中若しくはプラズマ膜における加水分解の示唆として解釈することが出来る 。

第２図若しくは第３図から判る様に、トリベブタイド（Ａｌａ−Ｃｙｓ　）２は （Ｇｌｙ−Ｃｙｓ　）ｔよりも可成り早く遊離のアミノ酸に分解される。

（Ｇｌｙ−Ｃｙｓ　）＊（２０μｍ／１００　ＫＧ）の注射後３０秒には、なお 、６５５μｍｏｌ／ｍｌのトリペブタイドが証明されたけれども、（Ａｌａ−Ｃ ｙｓ　）１った、（Ａｌａ−Ｃｙｓ　）、の急速な加水分解に基づいての薬力学 的な評価は可能な訳でないけれども、（Ａｌａ−（ｙｓ　）＊の半減期が（Ｇｌ ｙ−ｃｙｓ）、についてよりも可成り短いことは明白である。

（Ａｌａ−Ｃｙｓ　）、の生体内での迅速な利用は、アミノ謙濃度の中にも明ら かである。　（Ｇｌｙ−Ｃｙｓ　）ｚ投与の後、グリシンの濃度は試験期間中同 じ水準を保っており、シスチンは連続して上昇するが（第３表）、（ム１ａ−Ｃ ｙｓ　）ｚ注射後には、アラニン若しくはシスチンの濃度は、最後の採血時点ま で著しく低下する。その際、最大値は既に３０秒後（アラニン）若しくは６０秒 後（シスチン）に観察された。

本発明で血管内に注射されたシスチン含有のトリベプタイドの利用性についての その生体試験は、ペブタイド（Ｇｌｙ−Ｃｙｓ　）ｚと（Ａｌａ−それらの成果 から、それらペブタイドが血清中又はプラズマ膜のところで分解されることを推 論することができるから、（Ａｌａ−Ｃｙｓ　）、の可成り迅速な利用、及びそ れと関連する細胞への取り込みによる血漿からの促進された消失は、（Ｇｌｙ− Ｃｙｓ　）ｔに比べてのアラニンーペブタイドの利点を示している。それら二つ のトリペブタイドは、生体中で利用され、従って腸管外栄養投与又は経口栄養投 与の適当なシスチン基質であるけれども、ビスーＬ−アラニル−し一シスチンー ペブタイドは優れたシスチン源と見做すことが出来る。然し乍ら、高級のビス− アミノ酸−シスチンーベプタイド１例えばビスーＬ−ロイシルーＬ−シスチンー ペブタイド、ビスーＬ−イソロイシルーＬ−シスチンーペプタイド又はビスーＬ −フェニルアラニルーＬ−シスチンーペブタイドも、同様に生体自体の蛋白合成 の際のシスチンの迅速供給の際に極めて好適である。その際、このシスチンベブ タイドにとっては、必須アミノ酸の利用の場合に、生体に供給されるべきそれら アミノ酸はシスチンと共に生体に提供されることが出来る。

Ｒ’−ＮＨ−ＣＨＣＨ−ＮＨ−Ｒ’ 式中Ｒ′は３又はそれ以上の炭素原子を有するアミノ酸−残基を意味する、で示 されるＮ、Ｎ’−ビスーＬ−７ミノｍ−Ｌ−シスチンーペブタイドは、新規化合 物であり、それ故、本発明の対象である。

既に述べた様にそれらはシスティンを原料とするＮ−カルボキシ−無水物−法、 それに続く酸化により製造することが出来る。それらは熱に対し安定性であって 、生体中若しくは細胞中で対応するペプチダーゼにより急速に分解されるので、 生体蛋白の構成に大切なシスチンは充分量提供される。

寒施例１ ＮＣＡ−°によるＮ　Ｎ’　−ビスーＬ−７ラニルーＬ−シスチンの合成 ４龍ｏ１　（０，９１ｇ）のＳ−７セトアミドメチルーＬ−システィン（Ｓ−Ａ ｃｍ−Ｃｙｓ　）を４．５ｍｍｏｌ（０，５２ｇ）の７ラニンーＮＣＡと水溶液 中（２５０ｊ）　ｐ　Ｈｌｏ、２及び０℃で反応させる。ゲルクロマトグラフィ ーを用い、得られたＡｌａ−５（Ａｃｓ）Ｃｙｓを分離し１次いでＡＭＣ−保護 基をＨｇ（ＣＨａＣＯＯ）ｚでＰＨ４，０で分離する。Ｈ，Ｓを用い、Ｈｇ−塩 を沈殿させ１次いでｐＨ７で濾去した後、酸化してシスチントリペブタイドにす る。ｙｉ化した生成物をゲル−クロマトグラフィー後処理することにより、Ｎ、 　Ｎ’−ビスーＬ−アラニルーＬ−シスチン（融点１９５−２００”Ｃ：分解点 ）を分離する。

寒施但ｌ エスール”によるＮ　Ｎ’−ビス−Ｌ−ソロイシルーＬ−シ玉土２曵金成 ４００μ■ｏｌ　（９１，５ｍｇ）のＳ−７セトアミドメチルーＬ−システィン ・）（Ｃ１を４■ｌの０．１塩化カリウム中に溶解し、恒温反応槽（４０℃）に 入れ、水酸化ナトリウムでＰＨ９，２に調整する。その反応をジメチルスルホキ シドに溶かした２００μ■ｏｌ　（７２，５ｇ）のカルボベンゾキシ−し−イソ ロイシンーヒドロキシサクシンイミドエステルを添加することにより開始させる 。水酸化ナトリウムの連続的な滴加により、ｐＨを一定に保つ０反応終了後（４ 時間）ペブタイドを分離するために、反応物をゲル−クロマトグラフィーで後処 理する０次いで、触媒としてのパラジウム活性炭素の存在下、水性有機溶剤混合 物中で自体公知の方法で触媒水素化することにより、カルボベンゾキシ−保護基 の分離を行なう、溶剤を除去後、例１に説明したとおリアセトアミド保護基を離 脱させ、次いで酸化してシスチントリペブタイドにする。ゲル−クロマトグラフ ィーにより精製すると。

Ｎ、Ｎ’−ビスーＬ−インロイシルーＬ−シスチン（融点：２０９−２１３℃（ 分解点））が分離できる。

大蓬透ｌ エステル゛によるＮ　Ｎ’−ビスーＬ−フェニルアラニルーＬ二２五±２０含虐 実施例２に説明した様に、４００μ■ｏｌ　（９１，５ｍｇ）のアセトアミドメ チ／Ｌ／−Ｌ−システィン−ＨＣｌを２００　ｕｍｏｌ　（７９，３ｍｇ）ノカ ルボベンゾキシーＬ−フェニルアラニンーヒドロキシサクシンイミドエステルと 反応させる。後処理、保護基の離脱、そして酸化することにより、（例２に説明 したとおり）Ｎ、Ｎ’　−ビスーＬ−フェニルアラニルーシスチン（融点：２１ ７−２２０℃（分解点））が得られる。

加胆滅苗賦獣 収得された本発明によるトリペプタイド（トリス−バッファー中２ｍｅａｌ／　 Ｑ　）の親溶液から０．ＩＮ塩酸若しくは水酸化カリウムを添加して、ｐＨ−値 ５．５．６．５．７．５及び８．５の溶液を製造する０次いで。

その溶液のそれぞれ０．５■ｌを硫酸クロムで洗浄したアンプルに充填し、真空 下熔閉８．１２．１５若しくは３０分間１２１℃で滅菌した。

同様にしてシスチニルービスーアラニンートリペブタイドの溶液も製造され、処 理せられた。

次いで親溶液と滅菌試料とをキャピラールーイソタコホレーゼ及びＨＰＬＣで分 析した。Ｌ−シスチニルービスーアラニンートリベブタイドと興なって１本発明 のＮ、Ｎ’−ビス−Ｌ−アミノ酸−Ｌ−システンペブタイドは３０分間加熱した 後でも、実際上不変の状態で保持された。そのことは、加熱滅菌に際しての驚く べき安定性を示すものである。これらトリペブタイドは、それ故、経口製剤とし てのみならず、殊に腸管外の注射液の製造用にも適している。

以下の実施例は、腸管外投与用の注射液を示すものである。

叉斑偲土 （Ａｌａ−Ｃｙｓ　）ａ　４　、８ Ｇｌｙ−Ｔｙｒ　Ｌ）６．６ Ｌ−ヒスチジン　５．５ Ｌ−イソロイシン　７・Ｏ Ｌ−ロイシン　１１．０ Ｌ−リジン−モノアセテート７．７ Ｌ−メチオニン　９．Ｏ Ｌ−フェニルアラニン　６．Ｏ Ｌ−スレオニン　５．０ Ｌ−）−リブトファン　２．５ し一バリン　８．０ 夾施伍旦 Ｌ−リジン−アセテート　４．３７ Ｌ−トリプトファン　１．０Ｏ Ｌ−バリン　２・３０ Ｌ−フルギニン　７．０゜ Ｌ−ヒスチジン　ｌ・７５ Ｌ−アラニン　０．７ Ｌ−グルタミン酸　５・　ＯＯ （Ｐｈｅ−Ｃｙｓ　）、　４．０ Ｇｌｙ−Ｔｙｒ　”　２．６ 水激化カリウム　１．９６ 水准化ナトリウム　２．５７ カルシウムグリセローリン酸−２−水和物　０．４９塩化マグネシウム　０．６ １ ナトリウムグリセロリン酸　５．５１ 塩化カリウム　０．３７ Ｌ−アラニル−グルタミン それら二つのジペプタイドは、安定形若しくは易溶性の形でＬ−グルタミン又は Ｌ−チロシンを含有している。

大庭医且 Ａｌａ−Ｇｉｎ　’）１．５ し−イソロイシン　７．６Ｏ Ｌ−ロイシン　８．５Ｏ Ｌ−リジン−モノマラード　７．６７ Ｌ−メチオニン　０．２５ Ｌ−フェニルアラニン　０．１Ｏ Ｌ−スレオニン　１．２０ Ｌ−トリプトファン　０．１Ｏ Ｌ−バリン　６．４Ｏ Ｌ−フルギニン　４．９Ｏ Ｌ−ヒスチジン　０．６０ Ｌ−オルニチン−し−アスパルテート　８．０３Ｌ−アラニン　１．５゜ Ｌ−グルタミン酸　１．００ グリシン　０．５Ｏ Ｌ−プロリン　１．２Ｏ Ｌ−セリン　１．７５ （ＧｌｒＣｙｓ　）ａ　’０．２０ Ｔｙｒ−Ｌｙｓ　（Ｔｙｒ）リ　０．２０ナトリウムグリセロリン酸−５−水和 物　４．５２塩化マグネシウム　１．０２ 塩化カリウム　１．３４ Ｎ”−Ｌ−チロシニルーＮ’−Ｌ−チロシニルーし一リジンそれら二つのジペプ タイドは、安定形若しくは易溶性の形でＬ−グルタミン又はＬ−チロシンを含有 している。

叉鳳医ヱ （Ａｌａ−Ｃｙｓ　）、　４　、８ Ｔｙｒ−Ｌｙｓ　（Ｔｙｒ）リ　６．１し一インロイシン　６．０ Ｌ−ロイシン　９．４ Ｌ−リジン−モノアセテート　４．２３Ｌ−メチオニン　６．５ Ｌ−フェニルアラニン　６．０ し一スレオニン　４．５ Ｌ−トリプトファン　２・２ Ｌ−バリン　７°Ｏ Ｌ−ヒスチジン　４・５ Ｌ−アラニン　７・０ Ｌ−アルギニン　５．Ｏ Ｌ−グルタミン３　４．５ グリシン　２．Ｏ Ｌ−セリン　２．５ Ｌ−プロリン　５．０ Ｇｌｙ−Ｇｌｎ　”　８．３ それら二つのジペプタイドは、安定形若しくは易溶性の形でＬ−グルタミン又は Ｌ−チロシンを含有している。

浄書（内容に変更なし） 手続補正書（方式）′− 平成元年３月１４日

Claims (1)

1. 【特許請求の範囲】 １）一般式 ▲数式、化学式、表等があります▼ 式中、ＲはＬ−アミノ酸−残基を意味する、で示されるＮ，Ｎ′−ビス−Ｌ−ア ミノ酸−Ｌ−シスチン−ペプタイドを含有することを特徴とする栄養の経口投与 及び腸管外投与用のアミノ酸製剤。 ２）Ｎ，Ｎ′−ビス−Ｌ−アラニル−Ｌ−シスチン−ペプタイドまたはＮ，Ｎ′ −ビス−Ｌ−ロイシル−Ｌ−シスチン−ペプタイドを含有することを特徴とする 請求項１のアミノ酸製剤。 ３）一般式 ▲数式、化学式、表等があります▼ 式中、ＲはＬ−アミノ酸−残基を意味する、で示されるＮ，Ｎ′−ビス−Ｌ−ア ミノ酸−Ｌ−シスチン−ペプタイドの栄養の経口投与及び腸管外投与用のアミノ 酸製剤製造のための使用法４）一般式 ▲数式、化学式、表等があります▼ 式中、Ｒ′は３またはそれ以上の炭素原子を意味する、で示されるＮ，Ｎ′−ビ ス−Ｌ−アミノ酸−Ｌ−シスチン−ペプタイド５）Ｎ，Ｎ′−ビス−Ｌ−アラニ ル−Ｌ−シスチン−ペプタイド６）Ｎ，Ｎ′−ビス−Ｌ−ロイシル−Ｌ−シスチ ン−ペプタイド７）Ｎ，Ｎ′−ビス−Ｌ−イソロイシル−Ｌ−シスチン−ペプタ イド ８）Ｓ−アセトアミドメチル−Ｌ−システインをそれぞれ関連するアミノ酸のＮ −カルボキシー無水物と反応させ、その保護基を脱離させ、そして酸化すること によりシスチン−トリペプタイドをうることを特徴とするＮ，Ｎ′−ビス−Ｌ− アミノ酸−Ｌ−シスチン−ペプタイドの製造法