JPH01503594A - 細胞免疫応答の増強 - Google Patents

Abstract

(57)【要約】本公報は電子出願前の出願データであるため要約のデータは記録されません。

Description

【発明の詳細な説明】 発明の背景 を椎動物は２つの基本的免疫応答、即ち体液性および細胞性免疫応答を有する。

体液性免疫はＢりンパ細胞によって産生される特別な組の細胞によってもたらさ れる。これらの細胞は抗体を生産し、該抗体は血液およびリンパ液中を循環する 。他方、細胞媒介免疫はリンパ系のＴ細胞によってもたらされる。

この細胞性免疫応答は真菌、寄生虫、細胞内ウィルス感染、ガン細胞および異物 質に対して特に有効であり、一方で体液性応答は細菌並びにウィルス感染の細胞 外段階に対する防禦を行う。

侵入位置における抗原の拘束は局所的な炎症による領域の隔絶によって達成され る。急性の炎症は血漿タンパクおよび多形核白血球の流入によって特徴付けられ る。慢性炎症はＴ−リンパ細胞およびマクロファージの浸潤により特徴付けられ る。急性（抗体誘起）および慢性（Ｔ−細胞誘起）の炎症が皮膚内で生ずる場合 、これらは夫々即時型過敏症反応（ＩＴＨ）および遅延型過敏症反７２時間でピ ークに達する。ＤＴＨ反応に関与するＴ細胞のサブセットはここではＤＴＨ−エ フェクタ細胞と呼ぶ。

エビグリカニン（ｅｐｉ）　（ｅｐｉｇｌｙｃａｎｉｎ）は哺乳頻脈ガン移植可 能なセルラインＴＡ３Ｈａにより産生される主要な細胞表面糖タンパクである。

７ライバーグ　ジュニア（Ｆｒｉｂｅｒｇ、　Ｊｒ、）、　Ｊ、　Ｎ、　Ｃ，１ 。

４８：１４６３　（１９７２）；コディントン（Ｃｏｄ　ｉｎｇｔｏｎ）等、Ｃ ａｎｃ、Ｒｅｓ、、４３：４３７３　（１９８３）−このＴＡ３Ｈａガン細胞は 主としてエピグリカニンを含むムチン状のグリコカリタス（ｇｌｙｃｏｃａｌ　 ｉｘ）によって覆われている。コディントン（Ｃｏｄ　ｉｎｇｔｏｎ）等、Ｊ、 Ｎ、Ｃ，１，，６０：８１１　（１９１８）；ミラー（Ｍｉｌｌｅｒ）等、Ｊ、 Ｎ、Ｃ，１，６８：９８１　（１９８２）、Ｅｐｉはその組成において主として 炭水化物からなり、多重ＴおよびＴｎ決定基を表現する。ＴおよびＴｎは一般に ガン自己抗原である。スプリンガー（Ｓｐｒｉｎｇｅｒ）　ｓ　５ｃｉｅｎｃｅ 、　２２４　：　１１９８　（１９Ｂ　４）　＊合成ＴおよびＴｎ抗原が調製さ れ、かつＤＴＨ診断において使用されている。レミｓ　−（Ｌｅｓｉｅｕｘ）、 　Ｅｐ　Ａｐｐｌ、　４４．　１８８　ｍ　Ｌ／かしながら、これらの治療また は予防上の利用については記載されていない。

フ゛レフシャー（Ｂｒｅｔｓｃｈｅｒ）、　Ｅｕｒ、　Ｊ、　Ｉｍｍｕｎｏｌ、 　＋　９　：　３１１−３１６　（１９７９）はＤＴＨ−エフェクタ細胞をイン ビトロで培養し、これを感作抗原（ロバの赤血球）と共にマウスの足の肉踵に注 入した。我々はガン−関連の十分に特徴付けされた炭水化物抗原を用いて、エフ ェクタ細胞を感作し、これらの治療上の使用を教示した。

腫瘍はＩＬ−２およびＩＬ−２−活性化キラー細胞の組合せによって治療できる ことが知られている。スチープンローゼンバーグ（Ｓｔｅｖｅｎ　Ｒｏｓｅｎｂ ｅｒｇ）の研究に関する報告Ｆｏｒｔｕｎｅ、１６−２１（１９８５年１１月２ ５日）参照、このローゼンバーグの研究に係る問題はこの治療がＬＡＫ　（リン ホカイン活性化キラー）細胞として知られている細胞の集団を誘起することであ る。ＬＡＫ細胞は抗原−特異的ではないので、正常な組織が攻撃される可能性が ある。また、ＬＡＫ細胞は非特異性であるから、所定の抗−腫瘍活性を誘起する ためには比較的大量のＩＬ−２が必要である。

最後に、ＬＡＫ細胞は免疫系に記憶を残すとは考えられない、逆に、ＤＴＨエフ ェクタ細胞は抗原特異的であるから、感作後はより少量のリンホカインが増殖を 誘起するのに必要とされる。また、その特異性のために、ＤＴＨエフェクタ細胞 は自己を攻撃する恐れが少ない、更に、ＤＴＨエフェクタ細胞は記憶をもつと思 われる。

発明の概要 我々は、ガン細胞に対する細胞−媒介免疫応答が天然もしくは合成ガン−関連炭 水化物抗原の非経口投与により、あるいはこのような抗原により感作されたＤＴ ）Ｉエフェクタ細胞の非経口投与によって増強されることを見出した。この増強 は、ある攻撃に対する身体の一次防禦が細胞免疫応答、例えば腫瘍に対する応答 である場合に治療並びに予防両面に対して有利である。多糖、糖脂質および糖タ ンパクを含む他の特異的炭水化物抗原の使用は、他のＴ細胞によって制御される 脅威に対し対象を保護において有用であり得る。寄生虫、ウィルス、細菌および 真菌は表面炭水化物決定基をもつことが知られている。

リンホカインは特異的抗原または本発明の感作ＤＴＨ−エフェクタ細胞と共に用 いて、特異的ＣＭＩ応答を増強できる。

図面の簡単な説明 第１図はｅｐｉ−感作肺細胞がｅｐｉの存在下で局部的ＤＴＨ膨潤を誘起し、一 方抗原のない状態で未感作牌細胞、照射腫瘍細胞および感作細胞は誘起しないこ とを示す。

第２図は、この反応が表面抗原としてプライマーを有するガンセルラインに特異 的であることを示している。

第３図は、この反応がｅｐｉのＴα、ＴＦおよびＴｎ決定基との反応であったこ とを示している。

第４図は抗−炭水化物ＤＴＨエフェクタ細胞の表現型が１ｈｙ−１＋、ｔｙｔ　 −１＋、ｔｙｔ−ｚ−であることを示す。

第５図は、エフェクタの■投与後の、照射腫瘍細胞へのＤＴＨ反応によるＤＴＨ の系統的伝達を示す。

第６図は、腫瘍細胞と混合したＤＴＨ−エフェクタ細胞の局所的伝達後の腫瘍成 長阻害を示す。

第７図は、感作投与量の重要性を示す。

第８図は、抗原の低投与量においては細胞応答が支配的であったことを示す。

発明の詳細な説明 爽施■上　腫瘍に対する細胞免疫応答を増強するための５−ＴＡＧＳの使用 合成腫瘍−関連塘タンパク（Ｓ−ＴＡＧＳ）および他の炭水化物抗原が当分野に おいて知られており、任意の有利な方法で調製できる。

ＴおよびＴｎ抗原が好ましい０合成法についてはカイフ（Ｋａｉｆｕ）＆オーサ ワ（Ｏｓａｗａ）、　Ｃａｒｂｏｈｙｄｒ、　Ｒｅｓ、、　５８　：　２３５　 （１９７？）　；ラットクリフｘ　（Ｒａｔｃｌｉｆｆｅ）等、９３＝３５　（ １９８１）ｉボールセン（Ｐａｕｌｓｅｎ）等、１０４：１９５　（１９８２） ；ベンコモ（Ｂｅｎｃｏｓｏ）　＆シネイ（Ｓｉｎａｙ）、１１６：６９　（１ ９Ｂ３）参照。

可溶性Ｓ−Ｔａｇｓまたはその会合体を皮肉、筋肉内または腹腔内投与用のアジ ュバントと混合する。静脈内投与も同様に有効であると考えられる。

ある時点で５匹のマウスからなる群をＴα（ＴＦ）　、ＴＦ（アシアロ−ＧＭＩ ジサンカライド）およびＴｎ　Ｓ−Ｔａｇｓの特定量で感作した。７〜１０日後 、これらを３Ｘ１０”個の生きたＴＡ３Ｈａ細胞で攻撃した。著しく延長された 生存率が約ｌμｇの合成抗原を与えたマウスについて記録された。かくして、Ｔ Ｆについては、以下の結果が見られた（第１表）。

−重−１−１− 膜力」ＬＬＬＬＬ　（日） ０．２　２０．２７．２７．２９．３１１．０　２７，３８，４３，４３．４９ ２．０　１６．２１．２４．３０ １０、　２０，２１，２８．３３ ２０　２１．２１．２８．２８ ５０　１６、　１８．３１ １００　２０．２０，２１，２７．２９ＰＢ５　２３．　２７．　２９ Ｎｏｒ＋ｓ　１３．　１３．　１８．　２７．　２８ＴＡ３Ｈａは極めて致死的 であることに注目すべきである。マウスの正常（Ｎｏｒｍ）な後−移植平均余命 はわずかに１５〜２０日である。

！　腫瘍阻害剤としての培養ＤＴＨエフェクタ細胞の使以下の手順により、我々 はマウスの感作ＤＴＨエフェクタ細胞を得た。我ｋＯ）動物部門から（７）　Ｃ ＡＦＩ／Ｊ　（Ｂａｌｂ　ｘ　Ａ／Ｊ）　マウスを、５０％完全フロインドアジ ュバント中の３０μｇのＥｐｉ　（または２μｇの任意の合成抗原）で腹腔内経 路で免疫し、１週間後に同れら動物を殺し、その肺臓を取出し、単一細胞懸濁物 とするためにナイロンメツシュに通した。この細胞を洗浄し、１．５Ｘ１０’細 胞／８ｍｌにてコスターウェル（ｃｏｓｔａｒ　ｗｅｌｌ）内で培養した（（Ｒ ＰＭＩ十Ｐ、Ｓ、　＋　ｌ　Ｑ％ＦＣ５）　／ウェ／ｌｚ）、各ウェルには１０ μｇのｅｐｉを入れた（または任意の合成抗原１〜２μｇを入れた）。

これら細胞を３７℃、５％ＣＯ８にて６日間培養し、次いでゴムポリスマンでプ ラスチックから細胞を穏かに分離することにより収穫した０次に、この感作細胞 を多数の抗原とのＤＴＨ反応性およびインビボでのＴＡ３Ｈａセルラインの生長 阻害能につきテストした。

ヒト感作ＤＴＨエフェクタ細胞を得るために、我々はローゼンバーグの方法を改 良して用いた。血漿分離交換法により、リンパ球を生きた対照の血液から取出し た。このリンパ球を特異的抗原、例えばガンー関連娠タンパク（エビグリカニン またはＴもしくはＴｎ　Ｓ−丁ＡＧ）あるいはＩＬ−２単独ではなく、むしろ特 異的抗原とＩＬ−２との組合せなどと共に培養する。ヒトリンパ細胞を、好まし い１度、即ち約１０′細胞／ｍｌにて適当な培地中で６日間培養する。この細胞 を洗浄して、抗原を除く０次いで、この細胞を患者に、静脈内経路で、治療また は予防上の目的で戻すことができる。

我々は哺乳動物に、エピグリカニンー感作ＤＴＩ（エフェクタ細胞と抗原（照射 腫瘍細胞）とを同時に注入することにより、ＤＴＨ反応が誘起されることを立証 した（第１図）、３０μｇおよび２０μｇのＴＡ３Ｈａ腹水から抽出かつ精製し たｅｐｉおよびＣＦＡ（予め１および２週間前に腹腔内投与された）により感作 されかつ二次免疫されたマウスからの肺細胞を、（８１１０８ｇ　ｅｐｉ／ルミ ／ウェルおよび（′ｂ）抗原なしの状態で、１．５Ｘ１０’細胞／ウエルにて培 養した。更に、未感作牌細胞を、（Ｃ１１０μｇ　ｅｐｉ／ルミ／ウェルおよび ｌｄｌ抗原のない状態で培養した。培養物を６８目に収穫し、かつ１０？個の細 胞を、１０６個の照射ＴＡ３Ｈａ細胞と共に免疫されていないマウスの足の肉踵 に皮下投与した。コントロールｔｅｌとして、１０６照射ＴＡ３Ｈａ細胞を単独 で注射した。すべてのＤＴＨ価を正味のＤＴＨ腫張、即ち〔感作細胞の腫張＋Ａ ｇ、　）　−〔感作細胞の腫張のみ〕として表す。大きな応答差は、ガンムチン にする免疫が、細胞表面にムチンを有するガン細胞にＤＴＨ反応を誘起できるこ とを立証した。

次に、この反応が腫瘍特異性であることを我々は立証した（第２図）。ＤＴＨエ フェクタ細胞集団を実施例１のように発生させ、ａ）　ＴＡ３Ｈａ、　ｂ）　Ｅ ｐｉ−Ｍ　（セファ０−ス微小球に結合したｅｐｉ）、Ｃ）ＥＫＳＡにより、お よびｄ）抗原なしの状態でテストした。すべてのＤＴＨ価を正味のＤＴＨ腫張、 即ち〔感作細胞の腫張十Ａｇ、　］−〔感作細胞の腫張のみ〕によって示す。結 果は、ｅｐｉルミムチン免疫がムチンおよびムチンをもつ細胞（ＴＡ３Ｈａ）に 対し特異的ＤＴＨ応答を誘起したが、ムチンをもたないもの（ｍＫｓＡ）に対し ては誘起しなかったことである。

我々は、またＤＴＨ反応の抗原特異性をより一層詳細に調べた（第３図）。１０ ７個のＴ細胞をｅｐｉで感作し、一連の抗原（ＴＡ３Ｈａ、　Ｔｎ、　Ｔａ、Ｔ ａ、Ｅｐｉ　、フコース（“Ｆｕｃ”：　Ｆｕｃｏｓｅ）、Ｈ３Ａ、ＢＳＡ、セ ファロース微小球および抗原なし）と共に同時注入した。すべての可溶性抗原は セファロース微小球に結合され、かツｅｐｉを除き（これは５０μｇ／足肉！ｔ ｈ）、１２μｇ／足肉跡の量で用いた。すべてのＤＴＨの結果は正味のＤＴＨ測 定による。この実験は、ｅｐｉの注入により測定されたＤＴＨがｅｐｉ決定基と しても知られるＳ−Ｔａｇｓ上の炭水化物決定基と反応するがＥｐｉ上に表現さ れていない炭水化物決定基（例えばフコース）と反応しないことを示す。

ＤＴＨ応答の特異性の概要 −」ぽいｌ−トリガ（ＴＲＩＧＧＥＲＩＮＧ）　ＡＥＩ！ＬＴｎ　Ｔａ　ＴＪ９ 　Ｆｕｃ　ＢＳＡ我々が目撃した反応が実際にＤＴＨ反応であったことを確認す るために、我々はＤＴＨエフェクタ細胞の細胞表面表現型をチェックするための 実験を行った（第４図）、エフェクタ細胞集団を前と同様に調製し、ａ）処理せ ず、ｂ）抗−Ｔｈｙｌ、２抗体＋補体、Ｃ）抗−Ｌｙｔｌ、２＋補体、ｄ）抗− ｔ、ｙｔｚ、ｚ＋補体およびｅ）補体のみ、で処理した。この抗原のみをコント ロールとして用いた。

すべての値は正味のＤＴＨで表されている。ＤＴＨエフェクタ細胞を抗−ｒｈｙ または補体を含む抗−Ｌｙｔ　−１抗体で処理すると、ＤＴＨエフェクタ細胞活 性がなくなるが、抗−Ｌｙｔ　−２＋補体による処理はＤＴＨエフェクタ細胞活 性を失わない、かくして、特異的抗−炭水化物ＤＴＨエフェクタ細胞の表現型は ｒｈｙ−１＋、ｔ、ｙｔ　−１＋、ｔｙｔ−２−・であり、他のＤＴＨエフェク タ細胞により示される表現型パターンはタンパクと反応する。フジワラ（Ｆｕｊ ｉｗａｒａ）、　Ｊ、　１μｍｕｎａ１．．１３５　：　２１８７　（１９８５ ，９月）参照。

この比較のプロトコールは以下の通りであった。感作細胞集団を得、洗浄し、計 数し、処理用の別々の管に分割した。この細胞を穏かにベレント化し、ルイボヴ イフッ（Ｌｅｉｂｏｗｉ　ｔｚ）培地〔１）抗−Ｔｈｙｌ、２抗体（１／１００ ０希釈率；　ＮＥＮから得た）、２）抗−Ｌｙｔｌ、２抗体（１／１０００希釈 率、ＮＥＮから得た）または３）抗−ｔｙｔ−２，２抗体（１／１０００希釈率 、ＮＥＮから得た）を含む〕に再懸濁し、４℃で４５分間インキュベートした０ 次に、この細胞を遠心沈降させ、ルイボヴインツ培地中のモルモット補体（１／ １０希釈率）中に２Ｘ１０’細胞／ｗｈｌで再懸濁し、３７℃水浴中で３０分間 インキュベートした。インキュベーシッン後、細胞をルイボヴイッツ培地＋１０ ％ＦＣ３で洗浄し、計数した。

比較としての研究を行って、この反応が遅延型であるか否かを決定した。ＤＴＨ エフェクタ細胞を丁＾３１１ａと共に注入し、この反応をＤＴＨエフェクタ細胞 のみまたはＴＡ３Ｈａのみを注射した他のマウス内での反応と比較した。この反 応が２４時間でピークに達し、９６時間で消失することがわかった。２種のコン トロールについてはＤＴＨ（遅延増強）は見られなかった。

観測された反応がＤＴＨであることを更に確認したところ、単核浸潤物が腫張サ イトに見られた。

上記実験はすべて局所的なりＴＨの伝達に関連した。我々は、またＤＴＨエフェ クタ細胞が全身的作用をもつ可能性をも調べた。

ＤＴＨエフェクタ細胞は宿主動物に静脈内投与された。４時間後照射ＴＡ３Ｒａ 細胞を足内証に注射した。６．２４．４８および７２時間後に、このＤＴＨ反応 を測定しく白抜きの四角）、負のコント白−ル（＋）と比較した（第５図）。

上記実験で用いた照射腫瘍細胞は増殖しない、しかし、次の実験では未処理腫瘍 細胞を用いた。

ＤＴＨ感作細胞を上記のように誘発した＊２．５ｘｌＧ’生腫瘍細胞十■を注入 した５Ｘ１０’感作細胞を足肉証に皮下注射した。

コントロールマウスに、正常肺細胞＋腫瘍細胞を注入した。該肉跋の腫張を典型 的には１２．２４．４８および７２時間並びにその後２日毎に測定した。ＤＴＨ と腫瘍生長の組合せに反して、ＤＴＨ反応による腫張の成分を決定するために、 マウスに感作または正常細胞＋照射腫瘍細胞を注入した。腫張はＤＴＨ反応のみ に起因するものであった。腫瘍生長はピークＤＴＨＩｌ！張の４８時間後を始点 として２日毎に測定した。ＤＴＨおよび腫瘍サイズをカリパスを用いて測定して 肉鉦厚さの増加を見積った。

第６図はこの感作細胞がＴＡ３Ｈａ腫瘍の成長を阻害したことを示している。（ 白抜きの四角、＝感作ＤＴＨエフェクタ細胞÷丁Ａ３Ｈａ　；＋＝正常細胞十Ｔ ＾３Ｈａ）　。

他の実験は、この反応の抗原に対する性質がＤＴＨエフェクタ細胞に投与したプ ライマーの投与量に依存することを示した。低投与量では、細胞媒介免疫が支配 的であるが、高投与量では逆が正しかった。

肺細胞が培養中にＴｎで感作された場合にも、投与量依存性が見られた（第７図 ）、（ここで、立上り斜綿棒は正味のＤＴＨを示し、下降斜線棒を標準偏差を示 す）。

我々は、更にｅｐｉで刺激されたＤＴＨエフェクタ細胞が腫瘍上に“進み（ｈｏ ｍｅ　ｉｎ）　”かつ腫瘍生長を阻害することを明らかにした。上記の如く、Ｄ ＴＨエフェクタ細胞をｅｐｉで感作した。ｅｐｉ−感作ＤＴＨエフェクタ細胞を 静脈内注射する１日前に、ＴＡ３Ｈａ腫瘍をマウスの足の内証に移植した。同時 に腫瘍を移植したマウスをコントロールとして用い、腫瘍生長はカリパスで該内 証の腫張を測定することにより決定した。

全身的伝達　１０．１２．１２．１０．１５　５０．１５．８０．８０．５０エ フエクタ細胞 コントド藤動物　１４０．２５．３５　１９０．２００．２２０（マウス３匹） 叉鍍主 １剋象５８　１り良６Ｅ　ｉｖｆ距」」１　１剋息ＭυＩＤＴＨｚフェクタ　細 ＩＩ　１０．２０．１５．　５５．２０．１５．　１００，１４０．８０．　３ ００，３６０，３４０゜の全身的伝達　１０　２０　６０　３８０（４匹のマウ ス） コン）口幅動物　６０．７５．６０．　１７０，１６０．１７０．　３４０，３ ００，３２０．　５００（３ｙウス）。

（４匹の功ス）　１１０　１１０　３４０　４１０上記データから理解されるよ うに、■−投与、ｅｐｉ−感作ＤＴＨエフェクタ細胞は腫瘍移植した内証サイト において腫瘍阻害作用を及ぼした。

ｆｆｉ　腫瘍阻害剤としてのエピグリカニンの使用エビグリカニン（ｅｐｉ）は ＴＡ３Ｒａ腫瘍にかかったマウスの腹水か゛ら抽出した。

異系交配ＴＡ３Ｈａ　ｉｐ　１１瘍からの腹水を集め、細胞を遠心により取出し た。サンプルを凍結保存した。抽出前に、この腹水を解凍し、３７℃で２時間イ ンキュベートし、凝集物をすべて遠心により除いた。凍結、解凍および凝固操作 をＰＮＡ抽出前に２度行った。

２５〜４０−１の床体積をもつＰＮＡアガロース（Ｅ、Ｙ、ラボラトリーズ（Ｌ ａｂｏｒａｔｏｒｉｅｓ）　）をＰＢＳで洗い、腹水と混合し、４℃にて２４〜 ４８時間穏かに混転した。このスラリーをカラムに注ぎ、室温にてＰＢＳで徹底 的に洗浄した。ガラクトースを用いてＥｐｉをＰＮＡアガロースから溶出した。

次に、溶出したｅｐｉ−ガラクトース混合物を水に対して透析してガラクトース を除いた。このサンプルを凍結乾燥し、デシケータ中で一２０℃にて保存した。

同時に、５匹のマウスからなる群を特定量のｅｐｉで感作した。

２〜３日後、これらを３Ｘ１０’生ＴＡ３Ｈａ細胞により攻撃した。

以下の第２表は感作投与量と生存率との関係を示す。

（ｄ、　ｓｏ　Ｃ：ｔ１ｃ＋７） １０μｇ　２０．２２．２２．２５　２２．３　．９　０／４４９日と算出され たデータは、これらマウスが依然として生存していることを示す。これらマウス を殺しく８８日目）で、実験を続けた。

かくして、好ましい感作投与量は１μｇであり、かつこの投与量はＴＡ３Ｈａ細 胞に対し防禦免疫性を付与すると思われた。

もう一つの実験において、この投与量における液性応答は無視でき（第８図）、 このことはこの腫瘍が抗体以外の機序、恐らくＣＭＩによって阻害されることを 示唆するものと理解された。マウス（ＣＡＦＩ／Ｊ）に、ｉ、ｐ、経路で、５０ ％ＣＦＡ中の指定したｅｐｉＯ量を注射した。１０日後に、これらを照射ＴＡ３ Ｈａ細胞で攻撃して、ＤＴＨ反応性を調べた（黒塗りの四角）、ｅｐｉに対する 抗体（白抜きの丸）をＥＬＩＳＡで決定した。

腫瘍阻害におけるＥｐｉおよびＴαによる我々の経験をまとめて以下の第３表に 与える。

気主衷：インビボ予防；４週後に生存している動物の数０．１μｇ　１／２０　 ４／１５’　０／１００７５μｇ　５／２０　７／１５　０／１０１．０μｇ　 ８／２０　５／１５　０／１０５．０μｇ　８／１５　６／１５　０／１０１０ ．０μｇ　？／２０　３／１５　０／１０コントロール　Ｏ／２０　０／１５　 ０／１０Ｇｌｕ−ＢＳ＾／Ｈ５ＡがＴＡ３Ｈａ腫瘍細胞の表面上に表現されない 炭水化物を表すので、この物質の投与は予防を可能としなかった。　ＴＡ３）１ ａ細胞上の支配的な表面炭水化物抗原であるｅｐｉ、およびＥｐｉ決定基の一つ であるＴαは予防を可能とした。

０ド 〉 足肉鉦腫張 勿０ＴＩ−１図Ｓｏ　Ｘシ　使用 投与量　（μｇ　Ｅｐｉ） 国際調斉報告 □１□１ｐ−〒／ＩＩＳＲ７１０ｉ５５９

Claims (30)

【特許請求の範囲】
1. １．特異的抗原担持炭水化物決定基を感作量で含む媒質中でＤＴＨエフェクタ細 胞を培養する工程を含む、該ＤＴＨエフェクタ細胞の免疫活性を増強するための 該細胞の感作法。
2. ２．該決定基が腫瘍関連決定基である請求の範囲第１項記載の方法。
3. ３．該抗原がムチンである請求の範囲第１項記載の方法。
4. ４．該抗原がエピグリカニンである請求の範囲第３項記載の方法。
5. ５．該抗原が糖タンパクである請求の範囲第１項記載の方法。
6. ６．該抗原が糖脂質である請求の範囲第１項記載の方法。
7. ７．該抗原がＴα決定基を担持する請求の範囲第１項記載の方法。
8. ８．該抗原がＴβ決定基を担持する請求の範囲第１項記載の方法。
9. ９．該抗原がＴｎ決定基を担持する請求の範囲第１項記載の方法。
10. １０．該抗原が免疫担体と複合化された合成炭水化物ハプテンを含む請求の範囲 第１項記載の方法。
11. １１．該ハプテンが腫瘍関連炭水化物決定基を担持する請求の範囲第１０項記載 の方法。
12. １２．該決定基がＴα，ＴβおよびＴｎ決定基からなる群から選ばれる請求の範 囲第１１項記載の方法。
13. １３．該抗原が多糖である請求の範囲第１項記載の方法。
14. １４．該媒質が更にリンホカインをも含む請求の範囲第１項記載の方法。
15. １５．該リンホカインがＩＬ−２である請求の範囲第１４項記載の方法。
16. １６．該抗原が照射腫瘍細胞である請求の範囲第１項記載の方法。
17. １７．感作ＤＴＨエフェクタ細胞の本質的に生物学的に純粋な培養物。
18. １８．ＤＴＨエフェクタ細胞が上記請求の範囲第１〜１６項のいずれか１項に記 載の方法によって感作されたことを特徴とする、感作された該細胞の本質的に生 物学的に純粋な培養物。
19. １９．製薬上許容された担体中に有効量の感作ＤＴＨエフェクタ細胞を含むこと を特徴とする治療組成物。
20. ２０．製薬上許容された担体中に請求の範囲第１〜１６項のいずれか１項に記載 の方法により感作されたＤＴＨエフェクタ細胞を有効量で含有する治療組成物。
21. ２１．請求の範囲第１９または２０項に記載の治療組成物を投与することを特徴 とする哺乳動物中の細胞免疫を増強する方法。
22. ２２．製薬上許容される担体中に、有効量で特異的抗原担持炭水化物決定基を含 むことを特徴とする哺乳動物の細胞免疫を増強するための組成物。
23. ２３．該決定基が腫瘍関連決定基である請求の範囲第２２項記載の組成物。
24. ２４．該抗原がムチンである請求の範囲第２２項記載の組成物。
25. ２５．該ムチンがエピグリカリンである請求の範囲第２４項記載の組成物。
26. ２６．該決定基がＴαである請求の範囲第２２項記載の組成物。
27. ２７．該決定基がＴβである請求の範囲第２２項記載の組成物。
28. ２８．該決定基がＴｎである請求の範囲第２２項記載の組成物。
29. ２９．該抗原が、免疫担体に複合化された合成ハプテンと、該ハプテンとを含む 請求の範囲第２６、２７または２８項のいずれか１項記載の組成物。
30. ３０．請求の範囲第２２〜２９項のいずれかに記載の治療組成物を投与すること を特徴とする、細胞免疫増強法。