JPH0160007B2 - - Google Patents

Description

【発明の詳細な説明】 本発明は、抗癌性物質徐放性塞栓剤に関し、さ
らに詳しくは癌又は腫瘍の治療及び診断法、たと
えば血管閉塞療法又は穿刺法などの施術に際して
好適に使用しうる抗癌性物質徐放性塞栓剤に関す
るものである。

肝臓癌、乳癌などの治療法として血管閉塞療法
が有効な手段であることが近年、富に認められつ
つある。血管閉塞療法は、血管カテーテルの先端
を、癌又は腫瘍組織への栄養動脈に到達させ、他
端より塞栓物質を注入してこの栄養動脈を閉塞し
て血流を止めることにより、癌又は腫瘍組織への
栄養補給を断ち、これらの組織を壊死させること
を目的として行われるものである。血管閉塞療法
に用いられる塞栓物質として、先に本出願人が提
案した（特開昭54―135214号など。）血液凝固第
因子とトロンビンを固定化した創傷部保護材
料が有効に利用できることが報告されているが
（第18回日本人工臓器学会など）、この療法には癌
又は腫瘍の治療の有効な手段である化学療法を並
行して行うことができないという欠点がある。す
なわち血管閉塞療法施術後においては、抗癌性物
質を経口もしくは注射により投与しても、栄養動
脈が閉塞されているので、もはや癌又は腫瘍組織
に到達し得ず、投与は無意味なこととなる。従つ
て血管閉塞療法を施術する場合は、化学療法を放
棄するか又は施術する以前に血管カテーテルを通
じて抗癌性物質を注入してから閉塞を行うといつ
た２段階法が取られる。しかしながら、この方法
にて注入される抗癌性物質は量的にも充分なもの
ではなく、また通常、溶液状で注入されることと
栄養動脈はいまだ閉塞されていないという理由の
ため極短時間にて、標的癌又は腫瘍組織以外の部
位に流れ散つてしまうので効果は期待しにくい。
このように血管閉塞療法の持つ問題点、すなわち
化学療法を並行させることができないという点は
いまだ未解決のままである。

一方、血管閉塞療法とともに新しい癌治療法と
して期待されている療法に穿刺法がある。穿刺と
は元来は中空の針を体に刺して内部の液体を吸い
取らせることを意味するが、ここにいう穿刺法と
は、特に癌又は腫瘍組織の検査法及び治療法に関
するものを指す。

検査法とは、一般に穿刺生検法といわれている
ものを意味し、生体から被検査組織を採つて検査
する方法のことであり、癌又は腫瘍と思われる組
織を針先にてかき採りこの針先に付着した組織を
体外に取り出してこれを検査するものである。こ
の穿刺生検法における問題点として、針先に付着
した癌又は腫瘍組織が、抜針の際に、他の正常組
織上に散布される危惧があるということが指摘さ
れているが、このことに対する対策はなんらなさ
れていない。いま一つの問題点として出血が起り
やすく止血が困難となる場合が多いということが
指摘されている。すなわち穿刺法は、血管を通じ
てカテーテルを挿入する血管閉塞療法とは異なり
体表面から直接、標的組織に達するごとくに針を
つき刺すのであるから、針により損傷された部位
から出血が起ることとなる。損傷される部位が正
常な場合には、出血があつても自然と止血されて
比較的短期間に損傷血管は修復され、穿刺法施術
以降に悪影響を及ぼさない。しかしながら、癌又
は腫瘍組織に対して穿刺を行う場合には、通常、
癌又は腫瘍組織自体のみならず付近の組織におい
ても止血能力及び損傷血管修復能力が不充分とな
つていることが多く、出血傾向が大きくなり、止
血が困難であつたりまた多量の出血が予想される
場合には穿刺法施術を断念せざるを得なかつたり
する。特に〓臓への穿刺は、その出血のために余
り行われていない現況である。従つて穿刺を行う
場合には止血対策は大きな問題であり、止血を行
いながら抜針を行うことが必要となる場合が多
い。この際の止血の方法としては、通常トロンビ
ンの水溶液を徐々に注入しながら抜針を行うとい
つた方法が取られているが、トロンビン自体の止
血能力が不充分なこと、トロンビンが液状である
ために修復を要する部位から他の部位へ流れ散つ
てしまうといつた理由で満足な止血が行えていな
い。一方、治療法とは、穿刺針を通じて抗癌性物
質を標的となる癌又は腫瘍組織上へ直接注入する
治療法のことを意味する。現在では穿刺針からの
薬物の注入は、通常、使用する穿刺針が19G〜
23G程度の極細いものであるため抗生物質などの
溶液状のものの注入のみしか行われていない。し
かるに、抗癌性物質を溶液状態で注入した場合
は、直ちに標的組織以外の部位に流出し局所的に
直接投与した意義が失なわれるので十分な効果は
期待できない。このようなことから、通常使用さ
れる程度の口径を有する穿刺針を通じて標的組織
上及び穿刺針経路付近に散布することが可能で、
かつ散布された部位に付着して長時間留まり抗癌
性物質を徐放しうるような製剤が待望されてい
る。

本発明者らは、上述のごとき現況に鑑み、血管
閉塞療法に使用した場合には血管の閉塞を迅速、
確実に行ことができ、かつ癌又は腫瘍組織に対し
て抗癌性物質を長時間有効に作用させうる性能を
有し、穿刺法に使用した場合には、施術に際して
の出血を迅速、確実に抑え、損傷血管を早期に修
復することができ、かつ癌又は腫瘍組織自体のみ
ならず生検法の施術にあたつて穿刺針経路付近に
散布される恐れの高い癌又は腫瘍組織にも抗癌性
物質を長時間有効に作用させうる性能を有する製
剤を開発することを目的として鋭意研究を重ねた
結果、驚くべきことに抗癌性物質と血液凝固剤と
を固定化した構造物が、血管閉塞能力、止血能力
及び損傷血管修復能力に優れているという事実さ
らには体外部より注入され体内に到達した場合速
やかに到達部位、すなわち癌又は腫瘍組織あるい
はそれらの近縁部付着して留まり、血液や体液に
よつて洗い流されることもなく、また抗癌性物質
を長期間に渡つて徐放するという事実を見い出
し、本発明に到達したものである。

すなわち本発明は、生体吸収性物質を素材とし
た繊維集合体、スポンジ、粉末、モノフイラメン
ト、フイルム、マイクロカプセルなどの形状を有
する構造物に抗癌性物質と血液凝固剤が固定化さ
れてなる抗癌性物質徐放性塞栓剤である。

本発明において塞栓剤とは、血管内に注入して
血流を停止させる製剤及び血管損傷部位を埋め止
血を行い、かつ損傷血管の修復を行う製剤のこと
をいい、本発明においては血管カテーテル又は穿
刺針内を速やかに通過する必要があるため、水な
どの媒体に微細に懸濁しうるものであることが好
ましい。

本発明において構造物を構成する素材としては
体内に注入して使用し、かつ体外への回収が不可
能である場合が多いこと。また体内に異物が残留
することは癌又は腫瘍の治ゆに悪影響を及ぼすこ
となどのゆえに生体吸収性である必要があり、本
発明においては、たとえばゼラチン、キチン、コ
ラーゲン、ポリグリコール酸、グリコール酸―乳
酸共重合体、ポリグルタミン酸、アミロースなど
があげられ、なかでもゼラチン、アミロース、キ
チンが好ましく用いられる。

本発明にいう抗癌性物質とは、一般に抗癌剤又
は制癌剤又は抗腫瘍剤と呼ばれている物質並びに
一般に免液製剤又は免疫賦活剤と呼ばれている物
質を意味し、前者の物質としては、たとえばニト
ロゲンマスタード、ニトロミン、クロラムブシ
ル、サイクロフオスフアミド、メルフアラン、ウ
ラシルマスタード、マンノムスチン、ドーパン、、
BCNU、トリエチレンメラミン、チオ―TEPA、
Aza―TEPA、トレニモン、イソプロキユオン、
ブスルフアン、ジメチルミレラン、ピポスルフア
ン、エトグルシド、エポキシプロピジン、エポキ
シピペラジン、ヘキサメチルメラミン、ジブロモ
マンニトール、ピポブロマンなどのアルキル化
剤、アミノプリテン、メトトレキセート、グアニ
ン、８―アザガニン、６―メルカプトプリン、ア
ザチオプリン、ウラシル、５―フルオロウラシ
ル、シタラビン、アザセリン、ジアゾマイシンな
どの代謝拮抗剤、アクチノマイシンＤ、サイクロ
マイシン、マイトマイシンＣ、ダウノマイシン、
プレオマイシン、クロモマイシン、カルジノフイ
リンなどの抗性物質、５―HP、IQ―１などの合
成剤、チオテバ、シクロホスフアミド、ドキソル
ビシン、ダウノルビシン、ネオカルチノスタンな
どの植物成分、Hg―ヘマトポルフイリン、Co―
プロトポルフイリン、ステイルベストロール、ヒ
ドロキシウレア、プロカルバジン、メチルグリヨ
キザル―ビス―グアニルヒドラゾン、Ｌ―アスパ
ラギナーゼなどがあげられ、これらはそれぞれ単
独にて用いても２種以上を用いてもよいが、アル
キル化剤から１種、代謝拮抗剤から１種、抗出物
質から１種を選んで組み合わせて使用する方法な
どは一般的であり、エンドキサン、５―フルオロ
ウラシル、マイトマイシンあるいはプレオマイシ
ンの３者の組み合わせなどは特に一般的である。
後者の物質としては、たとえばチミツクホルモン
とその関連物質、BCG、細胞壁スケルトン及び
そのメタノール不溶分画、コリネバクテリウムパ
ルバム、OK―432などの細菌及び細菌成分、ピ
シバニール、レエンチナン、SPG、マンナン、
レバン、グルカンなどの多糖体、ムラミルジペプ
ト及びその誘導体、レバミソール、ベスタチン、
イソプリノシン、NPT15392、アジメクリン、ト
ランスフアーフアクター、リンホオカイン、イム
ノRNA、インタフエロン及びそのインデユーサ
ー、丸山ワクチンなどのワクチン類などがあげら
れ、これらはそれぞれ単独にて用いても２種以上
用いてもよいが、前述の抗癌剤又は制癌剤又は抗
腫瘍剤と呼ばれている物質と併用するものが一般
的である。

本発明に用いられる血液凝固剤としては、たと
えば血液凝固の第因子、第因子、第因子、
第因子、第因子、第因子、第因子、第
因子、第因子、第XI因子、第XII因子及び第
因子、プレカリクレン、高分子キニノーゲン、ト
ロンビンなどがあげられる。これらは単独で用い
ることもできるし、２種以上組み合わせて用いる
こともできる。本発明においては血液凝固第
因子（以降Ｆと略記する。）、トロンビンが特
に好ましく使用される。Ｆはフイブリン安定
化因子と呼ばれ、フイブリン分子間のイソペプチ
ド結合による安定化フイブリンの生成を促進する
因子である。Ｆは人、牛などの血液あるいは
胎盤より分離されるが、人に適用する場合には人
由来のＦを用いるのが好ましい。トロンビン
は、フイブリノーゲンをフイブリンに転化するこ
とができるタン白分解酵素である。トロンビンは
人、牛、豚などの血液より分離されるが、人に適
用する場合には人トロンビンを用いるのが好まし
い。

本発明に用いる抗癌性物質及び血液凝固剤は、
前記構造物に結合させるか、又は吸着させるか、
又は内包させることにより固定化することができ
る。抗癌性物質及び血液凝固剤を構造物に結合さ
せるには、たとえばO.Zaborsky、“Immobilized
Enzymes”CRC Press.1973に記載されているよ
うな従来より公知の共有結合法やイオン結合法を
採用することができるし、また吸着させるには、
同じく物理的吸着法や抱括法を採用することがで
きるし、また内包させるには構造物を構成する素
材を外壁として、公知のマイクロカプセル化法に
てマイクロカプセル化する方法を採用することが
できる。

本発明の塞栓剤を製造する際には、たとえば次
のようにして構造物に抗癌性物質及び血液凝固剤
を結合させることができる。すなわち抗癌性物質
や血液凝固剤が、アミノ基、カルボキシル基など
の共有結合又はイオン結合形成能を持つ官能基を
有する場合には、これらを含む溶液にて、これら
の官能基と共有結合又はイオン結合し得る官能基
を持つ構造物を処理することにより目的とする結
合による固定化を行うことができる。またこの際
構造物が抗癌性物質又は血液凝固剤のもつ官能基
と共有結合又はイオン結合し得る官能基を全く有
しないか又は少ししか有しない場合には、予め構
造物にそれらの官能基を化学反応により導入した
後、抗癌性物質及び血液凝固剤をその構造物に結
合することができる。抗癌性物質又は血液凝固剤
が官能基を有しない場合には、前述の場合と同様
に化学反応にて官能基を導入して後、使用するこ
とも可能であるが、多くの場合このような化学反
応にて抗癌性物質又は血液凝固剤の薬剤としての
特性がそこなわれることとなるのでこの方法は好
ましくは採用されることはない。なお共有結合さ
せる場合には、ジシクロヘキシルカーボジイミ
ド、１―シクロヘキシル―３―（２―モルホリノ
エチル）―カーボジイミド―メト―ｐ―トルエン
スルホネートなどの脱水縮合剤を用いるのが好ま
しい。

また、本発明の塞栓剤を製造する際には、次の
ようにして構造物に抗癌性物質及び血液凝固剤を
物理的吸着法や包括法などにより吸着することが
できる。すなわち、構造物を湿潤しうる溶媒に抗
癌性物質及び血液凝固剤を溶解又は懸濁し、この
溶液により構造物を処理することにより抗癌性物
質及び血液凝固剤を物理的に吸着することができ
る。包括法は抗癌性物質及び血液凝固剤をゲルの
微細な格子の中に包み込んで脱離できないように
する方法である。この吸着法及び包括法はどのよ
うな抗癌性物質、血液凝固剤、構造の組み合わせ
にも有効であり、簡便でかつ薬剤としての特性を
そこなうことも少ないので本発明においては好ま
しく採用される。

本発明の塞栓剤を製造するには、前記のごとく
構造物に抗癌性物質及び血液凝固剤を結合させる
か又は吸着させる方法のほかに、まず構造物に加
工する前の素材そのものに抗癌性物質及び血液凝
固剤を結合させるか又は吸着させ、しかるのち抗
癌性物質及び血液凝固剤を結合するか又は吸着し
た素材を構造物に加工して製造することもでき
る。たとえばあらかじめ高分子物質に抗癌性物質
を結合させるか又は吸着させたものを用いて構造
物を得て本発明の塞栓剤を製造することができ
る。

上記のいずれの方法により抗癌性物質及び血液
凝固剤を固定化する場合も、抗癌性物質及び血液
凝固剤を同時に固定化してもよいし、あるいは先
に抗癌性物質を固定化しておいてから、引き続き
血液凝固剤を固定化してもよいし、その逆であつ
てもよい。

本発明の塞栓剤の製造に際しては、抗癌性物
質、血液凝固剤の他にアンチプラスミン、アルブ
ミン、α₂―マクログロブリンなどのプロテアーゼ
インヒビター、セルロプラスミン、ハプトグロビ
ン、コールドインソルブルグロブリンなどの血し
ようたん白、フアイブロネクチン、抗生物質など
を構造物に固定化することができる。アンチプラ
スミンはフイブリン溶解酵素であるプラスミンの
阻害剤であり、従つてプラスミンを阻害すること
により効果を発揮するものである。本発明におい
てはアンチプラスミンとしては、例えばε―アミ
ノカプロン酸、トラネキサム酸などが好ましく用
いられる。

本発明の塞栓剤は癌又は腫瘍の治療に好ましく
使用されるが、特に血管閉塞法、穿刺法などに特
に好ましく使用される。

本発明の塞栓剤の血管閉塞療法への適用は、例
えば血管を通じ血管カテーテル先端を標的癌又は
腫瘍組織への栄養動脈まで到達させ、他端より塞
栓剤を生理食塩水などに懸濁させたものを注入す
ることによつてなされる。この際に塞栓剤は、一
部は標的組織上及びその近傍組織にまで達し、到
達部位に付着して留まり、一部は栄養血管内部に
留まり迅速に血管を閉塞する。また閉塞された血
管は再開通を起さない。さらに標的組織上及びそ
の近傍組織及び血管閉塞部に留まつた塞栓剤は抗
癌性物質徐放性剤として働き、このものからは抗
癌性物質が徐放され、癌又は腫瘍組織に局所的に
長時間作用していき壊死を早めかつ確実にする。
このことは、すなわち本発明の塞栓剤を使用した
場合には迅速かつ正確に血管閉塞療法を施術する
ことが可能であり、同時にこの塞栓剤は抗癌性物
質徐放性剤として働くので、従来は並行して行い
得なかつた化学療法を、並行して行うことが可能
となることを意味する。

本発明の塞栓剤の穿刺法への適用は、例えば標
的とする癌又は腫瘍組織上へ到達させた穿刺針を
通じて塞栓剤を生理食塩水などに懸濁させたもの
を必要量注入した後、さらにこの懸濁液を徐々に
注入しながら抜針を行うことによつてなされる。
このことによつて塞栓剤は標的組織上及び穿刺針
の経路付近の組織上に分散されその部位に付着し
て留まる。標組織上に留まつた塞栓剤は直ちに出
血を停止させ血管損傷部位を修復する一方、抗癌
性物質徐放剤として働き、抗癌性物質を徐放して
癌又は腫瘍組織に長時間有効に作用していく。一
方、抜針時に注入され穿刺針の経路付近の組織上
に分散され付着して留まつた塞栓剤は近傍の血管
の損傷部位からの出血を直ちに押え修復を行い、
かつ針の経路付近に散布された癌又は腫瘍組織に
対して長時間有効に作用していく。

以上のごとくに、本発明の塞栓剤は血管閉塞療
法及び穿刺法などの施術に際して使用され、優れ
た塞栓剤としての性能と抗癌性物質徐放製剤とし
ての性能を合わせもつものである。

さらに本発明の塞栓剤は単に抗癌性物質徐放性
剤として用いた場合にも大きな効果を発揮する。
すわち従来の抗癌性物質徐放性剤を例えば切開手
術を行い露出した癌組織上に散布して局所的に作
用するごとくに投与しても、徐放性剤は血液、体
液などのため散布後直ちに局所から流れさつてし
まい効果が期待しにくいが本発明の塞栓剤を同様
に投与した場合には、局所に直ちに粘着し流れさ
つてしまうことはない。

以下に実施例をあげて本発明をさらに具体に説
明する。

実施例 １ 粉末ゼルフオーム（吸収性粉末ゼラチン、日本
アツプジヨン製）200mgを、フイブロガミン水溶
液〔人Ｆの濃縮乾燥製剤（ヘキスト製）１ビ
ンを水４mlに溶解したもの。〕４ml、トロンビン
の生理食塩水溶液（人トロンビンの濃縮乾燥製剤
（ミドリ十字製）１ビンを生理食塩水５mlに溶解
したもの。〕４ml及びマイトマイシンＣ水溶液
〔20mg／４ml〕４mlの混合液に室温にて５分間浸
漬した後、−30℃にて凍結乾燥を15時間行つてＦ
とトロンビンとマイトマイシンＣとが固定化
された固定化粉末ゼルフオームを得た。

一方、内径４mmのシリユン医用チユーブ34cmを
用いてループを作り、２℃の部屋において、これ
に２mlのACD保存血にCacl₂の10重量％水溶液１
mlを添加したものを充てんしたのち、先に調製し
た固定化粉末ゼルフオーム20mgを加えた後23度の
傾斜を持つ回転板の上で16回転／分にて回転させ
た。回転開始後１分にて血中に凝血塊の形成が認
められた。この時点において回転を停止させ、停
止後１時間目にペーパーデイスク（東洋製作所
製、抗生物質試験用ペーパーデイスク、径８mm）
をループ内の血液又は凝血塊に充分に浸漬又は密
着させ、このものをサンプルとし、試験菌として
Bacillus Subtilis ATCC6633を用い、円筒平板
法にて生ずる阻止円の大きさを求め、この阻止円
の大きさより１時間目のマイトマイシンＣの血中
濃度を求めたところ10μｇ／mgであつた。同様に
して５時間目、10時間目、24時間目、1.5日目、
２日目、３日目の血中濃度を求めたところそれぞ
れ15μｇ／mg、21μｇ／mg、41μｇ／mg、82μｇ／
mg、112μｇ／mg、198μｇ／mgであつた。

比較例 １ Ｆとトロンビンを使用しなかつた他は実施
例１と同様にして得たマイトマイシン固定化ゼル
フオーム20mgを用いて実施例１と同様の回転ルー
プによる。凝血試験及びマイトマイシンの血中濃
度の測定を行つたところ回転開始後３時間経過し
ても凝血塊の形成は認められず、この時点でのマ
イトマイシンＣの血中濃度は600μｇ／mlであつ
た。この結果はほとんどのマイトマイシンＣが30
時間以内で血中に放出されてしまつていることを
示し、徐放性をもたないことを意味する。

実施例 ２ 粉末ゼルフオーム（吸収性粉末ゼラチン、日本
アツプジヨン製）200mgを、フイブロガミン水溶
液〔人Ｆの濃縮乾燥製剤（ヘキスト製）１ビ
ンを水８mlに溶解したもの。〕４mlに室温にて３
分間浸漬した後、−30℃にて凍結乾燥を15時間行
つた。次いで、このものを５―フルオロウラシル
25mgを４mlのジメチルホルムアミドに懸濁させた
懸濁液に室温にて５分間浸漬した後、−30℃にて
凍結乾燥を15時間行い、Ｆと５―フルオロウ
ラシルの固定化された固定化粉末ゼルフオームを
得た。このものを20mg用いて実施例１と同様に回
転ループによる凝血試験を行つたところ、回転開
始後1.5分にて凝血塊の形成が認められた。この
時点において回転を停止させ、停止後５時間目、
10時間目、24時間目、1.5日目、２日目、３日目
において血液又は凝血塊を50μｇずつサンプリン
グし、各々を凍結乾燥後、水酸化ナトリカム及び
水の混液を吸収液とし酸素フラスコ燃焼法のフツ
素の定量操作法により、各サンプルに含まれる５
―フルオロウラシルの重量を測定し、各サンプリ
ング時の５―フルオロウラシルの血中濃度を求め
たところ、それぞれ120μｇ／mg、170μｇ／mg、
380μｇ／mg、780μｇ／mg、1010μｇ／mg、1620μ
ｇ／mgであつた。

実施例 ３ 粉末ゼルフオームにかえて粉末キチン（共和油
脂製、分子量100万）を用いたほかは実施例１と
同様にしてＦとトロンビンとマイトマイシン
Ｃの固定化された固定化粉末キチンを得た。この
ものを20mg用いて実施例１と同様に凝血試験及び
血中濃度の測定を行つたところ、回転開始後１分
にて凝血塊が形成され管内の血液の流動性は失な
われた。また、１時間目、５時間目、10時間目、
24時間目、1.5日目、２日目及び30日目において
の血中のマイトマイシンＣの濃度はそれぞれ8μ
ｇ／ml、14μｇ／ml、19μｇ／ml、38μｇ／ml、
78μｇ／ml、108μｇ／ml、178μｇ／mlであつた。

実施例 ４ スポンゼル（吸収性スポンジ状ゼラチン、山之
内製薬製）１枚（2.5cm×５cm×0.5cm）を、トロ
ンビンの生理食塩水溶液（１ビンを10mlに溶解）
10mlにブレオマイシン200mg及び１―シクロヘキ
シル―３―（２―モルホリノエチル）―カーボジ
イミド―メト―ｐ―トルエンスルホネート20mgを
溶解した溶液に室温にて５分間浸漬した後、−30
℃にて凍結乾燥を15時間行つてトロンビンとブレ
オマイシンの固定化された固定化スポンゼルを得
た。このものを20mg用いて実施例１と同様に回転
ループによる凝血試験及びプレオマイシンの血中
濃度の測定を行つたところ、回転開始後１分にて
凝血塊の形成が認められ、またこの時点にて回転
を停止後、１時間目、５時間目、10時間目、24時
間目、1.5日目、２日目、３日目のブレオマイシ
ンの血中濃度はそれぞれ5μｇ／mg、7μｇ／mg、
11μｇ／mg、21μｇ／mg、41μｇ／mg、62μｇ／mg、
123μｇ／mgであつた。

Claims (1)

【特許請求の範囲】
1. １ 生体吸収性物質を素材とした繊維集合体、ス
   ポンジ、粉末、モノフイラメント、フイルム、マ
   イクロカプセルなどの形状を有する構造物に抗癌
   性物質と血液凝固剤が固定化されてなる抗癌性物
   質徐放性塞栓剤。