JPH0160010B2

JPH0160010B2 -

Info

Publication number: JPH0160010B2
Application number: JP14987181A
Authority: JP
Inventors: Shigeaki Muto; Takao Ando; Masahiko Fujii; Koichi Niimura; Akihiko Sugano
Original assignee: Kureha Corp
Current assignee: Kureha Corp
Priority date: 1981-09-22
Filing date: 1981-09-22
Publication date: 1989-12-20
Also published as: JPS5852221A

Description

【発明の詳細な説明】

本願はセフアロスポリン系抗生物質よりなる薬
剤に関する。詳しくはセフアロスポリン系抗生物
質に化学修飾をほどこすことにより抗菌活性は失
なうが生体内に吸収されると再度抗菌活性を回復
することを特徴とするセフアロスポリン様活性を
有する薬剤に関する。セフアロスポリン系抗生物質は現在広く用いら
れ、細菌に対する選択毒性がすぐれている薬剤で
ある。しかしながら、生体内に常在する有用菌叢に対
しても等しく抗菌作用を有するために、生体内、
特に腸内の菌叢を乱すという重大な欠点を前記薬
剤は有する。この欠点は抗生物質を経口摂取した
場合に著しい。その結果、菌交代症等の疾病を引きおこし、場
合によつては大腸炎、下痢等を引きおこす。本発明者らは、これらの欠点のないセフアロス
ポリン様活性を有する抗生物質を鋭意検討した結
果、一般式（）で示されるセフアロスポリン系
誘導体が有効であることを見い出し本発明に至つ
たものである。したがつて本発明の目的はセフア
ロスポリン系抗生物質を有効成分とする抗菌剤を
提供することにある。以下本発明を詳しく説明する。本発明は一般式（）〔式中、R₁は

【式】

【式】｛式中、R₃は、―Ｏ（CH₂）_oＨ（式中、ｎは２乃至４を示す）、―OCH
（CH₃）₂，―OC（CH₃）₃，

【式】

【式】又は

【式】を示す〕で示されるセフアロスポリン系抗生物質誘導体を有効成分と
することに特徴を有する抗菌剤に関する。本発明の抗菌剤は、特に経口用抗菌剤として使
用し得る。更に、生体内常在菌叢を乱さない、経
口用抗菌剤として使用し得る。上記一般式（）で示される化合物（以下、本
物質と称す）はセフアロスポリン系抗生物質に化
学修飾をほどこすことによつて得るものあるが、
薬剤投与時に生体内常在菌叢に影響を与えずに吸
収され、血中に入つて始めて抗菌活性を示すとい
うまつたく新しいタイプの抗生物質であり、又そ
の急性毒性も低いので極めて安全な物質といえ
る。本物質の薬理学的効果を下記に示す。 (a) 急性毒性： ICR―JCL系マウスを用いて腹腔内及び強制
経口投与による急性毒性を調べた。本物質は腹
腔内及び経口投与ともに生理食塩水に、分散
し、これを注射筒または胃ゾンデを用いて所定
の量に調整して与えた。投与後中毒症状の観察を続け、７日目までの
経時的死亡率からLD₅₀値を求めた。生存例、
死亡例とも解剖して所見を得た。LD₅₀値はリ
ツチフイールド・ウイルコクソン（Litchfield
―Wilcoxon）図計算法により求めた。その結
果、本物質のいずれも腹腔内、経口を問わず
LD₅₀値は10ｇ／Kg以上であつた。 (b) 腸内菌に対する影響：本物質をマウスに500mg／Kg２日間経口投与
して投与前と投与後１日目にマウス糞便を採取
した。この一部を各種培地で25℃又は37℃にて
１乃至５日間培養して大腸菌、緑膿菌、連鎖球
菌、乳酸菌、ビフイダス菌及びバクテロイデス
菌について調べた。本物質の投与前と投与後における上記各菌の
菌数はほとんど変らなかつた。したがつて、本
物質は腸内菌叢に実質的に影響しないことがわ
かる。 (c) 抗菌活性：日本化学療法学会標準法に準拠して調べた。
供試菌としてEsherichia coli
IFO12734Staphylococcus aureus IAM1011を
用い最小発育阻止濃度（MIC）を求めた。 (d) 体内に吸収された時に活性変化することを証
明するために代謝活性化酵素〔ラツト肝ホモジ
ネート（以下Ｓ―9mixと称す）〕を用いて次の
実験を行なつた。 Staphylcocccus aureus IAM1011の前培養
液108／mlを調整し、次に50倍量のMueller
Hinton寒天培地へ前培養液を加え平板とした。平板上に径８mmのペニシリンカツプを置き、
その中に本物質又は本物質とＳ―9mixの培養
物の0.1mlを加え、37℃18時間培養し、増阻止
円の径を測定した。セフアロチンナトリウム又
はペニシリンの増阻止円の径を100として比較
した場合、本物質のみの系のそれは０であつ
た。一方本物質＋Ｓ−9mixの系のそれは０乃
至１であつた。即ち、本物質はそのままでは抗菌性は低い
が、体内に入つてから酵素により活性化される
ことを示している。 (e) 感染症に対する効果：生体内で活性化されることを確かめるために
本物質を用いて感染症に対する治療実験を行な
つた。各群20匹のマウスの腹腔内にEsherichia
coli IFOを接種して感染させた後、各々の本
物質を感染直後及び４時間後に500mg／Kg経口
投与し、その後に７日目の感染死の有無で判定
した。無処理群は２日目に全例死亡したのに対
し、本物質のいずれでも35％以上の生存率を示
したので経口用抗感染症剤として効果のあるこ
とが知見された。上述したように、本物質は安全であり、腸内菌
叢に対しても影響がなく、且つ生体内に入つて活
性型になる新しいセフアロスポリン系抗生物質で
あるといえる。本物質は生体内でセフアロスポリン系抗生物質
に変換されるので、用途としてはセフアロスポリ
ン系抗生物質とまつたく同じ分野の抗菌剤とし
て、用いることが出来る。本物質は一般式（）で示されるセフアロスポ
リン系抗生物質の少なくとも１種と医薬として許
容されうる担体、希釈剤又は助剤を含有する医薬
組成物として、更に単位投与形態として用い得
る。これらは経口、注射または直腸投与による方
法で投与出来る。経口投与は、錠剤、カプセル、粉末、顆粒、散
剤、丸剤、アンプル剤、等の形態でおこない得
る。これらは、充填剤、伸展剤、結合剤、湿潤剤、
崩壊剤、溶解遅効剤、再吸収促進剤、吸着担体、
潤滑剤等を包含する。具体的には、殿紛、マニト
ール、ケイ酸、セルロース誘導体、ゼラチン、ア
ルギン酸塩、グリセリン、寒天、炭酸カルシウ
ム、重炭酸ナトリウム、パラフイン、第四アンモ
ニウム化合物、グリセリンモノステアレート、カ
オリン、ベントナイト、タルク、ステアリン酸カ
リウム、ステアリン酸マグネシウム、ポリエチレ
ングリコールなどがあげられる。又医薬として許容されるエマルジヨン溶液、懸
濁液であつてもよい。坐薬は、ポリエチレングリコール及び脂肪酸又
はそのエステルを含み得る。シラツプ、エリキシールは、水またはパラフイ
ンのような不活性希釈剤を含有し、経口投与に適
当な液体組成物として使用し得る。これらは湿潤
剤、甘味剤、風味剤のような助剤を含有してもよ
い。注射投与に用いる組成物は、無菌で、水性また
は非水性の溶液、懸濁液またはエマルジヨンであ
つてもよく、例えばプロピレングリコール、ポリ
エチレングリコール、オリーブ油等を含むことが
出来る。組成物として用いる場合、本物質は活性成分と
して0.01乃至99.5％、通常0.1乃至90％含有し得
る。本物質は、セフアロスポリン系抗生物質と同様
の用途に用いられ、細菌由来の感染の治療に有用
である。薬剤は、感染の度合、患者の状態によつてその
投与量は異なるが一般的に成人患者１人に１日
0.1〜10ｇを数回に分けて投与する。以下、本発明を実施例に基づいてより詳細に説
明する。しかしながら、本発明は下記実施例にの
み限定されるものではない。実施例１７―（チオフエン―２―アセトアミド）セフア
ロスポラン酸1587mgを20mlのベンゼンにサスペン
ドさせた。DMFを１滴加えた後に、1016mgのオ
キザリルクロライドをゆつくり滴下した。ゆつく
り撹拌しながら７〜10℃にて45分間反応させた。
反応終了後、減圧下にてベンゼンを留去した。こ
のようにして得られたセフアロスポリンの酸塩化
物を、10mlの塩化メチレンに溶かした。2.4ｇの
ｎ―プロピルアルコールと404mgのトリエチルア
ミンを溶かした塩化メチレン溶液４mlをゆつくり
滴下した。約１時間４℃で撹拌した。反応終了
後、塩化メチレン20mlをこゝに加えて、塩化メチ
レン層をPH３のHCl水溶液10mlで洗つた。次に１
％のNaHCO₃水溶液10mlで洗つた。最後に水10
mlで洗浄後塩化メチレン層をMgSO₄て乾燥した。
減圧・濃縮後粗結晶1210mgを得た。塩化メチレン
―ｎ―ヘキサンより再結晶して964mgの製品を得
た。収率44％であつた。元素分析値の結果を下記
に示す。Ｃ(%) Ｈ(%) Ｎ(%) 理論値 52.04 5.06 6.38 測定値 51.4 4.9 6.4 実施例２実施例２の反応におけるｎ―プロピルアルコー
ルの代りにiso―プロピルアルコールを用いて同
様の反応を行ない粗製品560mgを得た。塩化メチ
レン―ｎ―ヘキサンより再結晶して328mgの製品
を得た。収率15％、融点139〜140℃であつた。元
素分析値を下記に示す。Ｃ(%) Ｈ(%) Ｎ(%) 理論値 52.04 5.06 6.38 測定値 52.8 5.2 6.2 実施例３実施例２の反応におけるｎ―プロピルアルコー
ルの代りに、ｔ―ブチルアルコールを用いて同様
の反応を行ない粗製品516mgを得た。塩化メチレ
ン―ｎ―ヘキサンより再結晶して330mgの製品を
得た。収率15％、融点175〜176℃であつた。元素
分析値を下記に示す。Ｃ(%) Ｈ(%) Ｎ(%) 理論値 53.10 5.3 6.19 実測値 53.4 5.3 6.1 実施例４フエニル７―（チオフエン―２―アセトアミ
ド）セフアロスポラネートを下記の方法で合成し
た。７―（チオフエン―２―アセトアミド）セフア
ロスポラン酸2.0ｇ、フエノール0.47ｇおよびＮ，
N′―ジシクロヘキシルカルボジイミド1.05ｇをテ
トラヒドロフラン100mlに溶かし、その溶液を室
温で24時間撹拌した。生成したＮ，N′―ジシク
ロヘキシルウレアを除去した後に液の溶媒を留
去し、次に残留物をクロロホルム100mlに溶かし
た。そのクロロホルム溶液を５％塩酸水溶液、５
％炭酸水素ナトリウム水溶液及び水の順で洗つた
後、無水硫酸マグネシウムで乾燥した。溶媒を留
去後、残留物を酢酸エチル―ｎ―ヘキサンで再結
晶して1.6ｇ（収率68％）の結晶を得た。融点は
162〜163℃であつた。各物性値を下記に示す。 (a) 赤外吸収スペクトルν_nax（cm^-1）（KBr） 1778；1660；1492；；1230 (b) 元素分析値（C₂₂H₂₀O₆N₂S₂として）Ｃ(%) Ｈ(%) Ｎ(%) 計算値 55.46 4.24 5.93 実測値 55.40 4.23 5.88 実施例５７―（チオフエン―２―アセトアミド）セフア
ロスポラン酸1.6ｇを400mgのトリエチルアミンを
含むTHF溶液20mlに溶解させ、氷冷した。４ml
のTHFにクロロ炭酸エチルの430mgを溶かした液
をゆつくりと滴下した。１時間反応させた後、さ
らに１時間冷却した。溶媒を減圧留去後、残渣を
クロロホルム10mlに溶かした。クロロホルム液
は、１％のHCl，２％のNaHCO₃溶液及び水の
順でよく洗浄後、MgSO₄を入れて乾燥した。四
塩化炭素より再結晶をして200mgの製品を得た。
融点は96〜99℃であつた。各物性値を下記に示
す。 (a) 赤外吸収スペクトルν_nax（cm^-1）（KBr） 3301；1777；1733；1655；1535；1238 (b) 紫外吸収スペクトルn_nax（nm）（CH₃CN） 234266 (c) 元素分析Ｃ(%) Ｈ(%) Ｎ(%) 計算値 48.71 4.30 5.98 実測値 49.4 4.4 6.0 実施例６（

【式】はシクロヘキサン環を示す）上記化合物は実施例５の反応の副生成物として
得られた。実施例５の再結晶液の溶媒を留去
後、残留物を酢酸エチルを少量含むｎ―ヘキサン
で再結晶して、0.24ｇ（収率21％）の結晶を得
た。融点は151〜152℃であつた。各物性値を下記
に示す。 (a) 赤外吸収スペクトルν_nax（cm^-）（KBr） 3340；2905；1782；1702；1652；1225 (b) 元素分析値（C₂₉H₃₈N₄C₆S₂として）Ｃ(%) Ｈ(%) Ｎ(%) 計算値 57.78 6.35 9.29 実測値 57.8 6.3 9.3 (c) 紫外吸収スペクトルλ_nax（nm）（CH₃CN） 236；266 実施例７腸内菌叢に対する各化合物の影響を調べた。上記の各薬剤をICR雌マウス（６週令）５匹を
１群とするものに１日当り500mg／Kgを２日間経
口投与した。投与前ならびに投与後７日目に各マウスの糞便
を採取して、100倍量の嫌気性稀釈液（リン酸緩
衝液）で希釈し摩砕し、その0.1mlを下記第１表
に示す各被測定菌の培地に塗布し37℃又は25℃で
１〜５日間好気培養ならびに嫌気培養（嫌気性グ
ローブボツクス法）を行なつて大腸菌、緑膿菌、
連鎖球菌、乳酸菌、ビフイダス菌およびバクテロ
イデス菌の各々の菌数を測定した。

【表】結果を第２表に示す。

【表】

【表】第２表より明らかのようにセフアロチン投与剤
では大腸菌の増大がみられるが、本物質のそれぞ
れは投与前とあまり変らない。又セフアロチンは
乳酸菌が減少するのに対して本物質のそれぞれは
投与前の乳酸菌数と変らない。実施例８抗菌活性を日本化学療法学会標準法に準拠して
寒天平板希釈法により測定した。試験方法：供試菌 Esherichia coli IFO 12734 Staphylococcus aureus IAM 1011 上記菌株をMueller―Hinton培地に接種し37℃
で18〜48時間培養した後に10⁶／mlに調整したも
のを供試菌液とした。各所定温度の検体液を薬剤感受性測定用培地と
してMueller―Hinton培地にそれぞれ1/9量加え、
寒天平板を作製した。上記供試菌液を各平板に白
金耳にて約２cm画線塗抹した後37℃18時間〜24時
間培養を行い、完全に菌の発育が阻止された濃度
をもつて最小発育阻止濃度とした。結果を第３表
に示す。

【表】実施例９体内で活性化されることを証明するモデル実験
として次の方法を採用した。代謝活性化酵素とし
てラツト肝ホモジネート（Ｓ―９、オリエンタル
酵母社製）を以下の組成（以下Ｓ―9mixと呼ぶ）
にて用いた。１ml中の組成Ｓ―９ 0.5ml KCl 3.3μmol MgCl₂・6H₂O 8μmol Glucose―６―phosphate 5μmol NADH 4μmol NADPA 4μmol 0.2Mリン酸緩衝液 0.5ml （PH7.4）検体液0.1mlとＳ―9mix0.9mlあるいは対照とし
て0.1Mリン酸緩衝液0.9mlを混和し、37℃にて20
分振とう培養し、感受性試験を行つた。
Staphylococcus aureus IAM1011をMueller―
Hinton培地に接種し37℃18時間培養した後、
10⁸／mlに調整し50倍量のMueller―Hinton寒天
培地を混和し平板とした。その上にペニシリンカ
ツプ（径８mm）を置き、その中に上記反応液0.1
mlを加え４℃で２時間放置後、37℃で18時間培養
し、増殖阻止円の径を測定した。結果を第４表に
示す。

【表】実施例 10 マウス実験的感染症に対する効果： ddY系SPFマウス各群20匹にEsherichia doli
IFO 12734 1.4×10⁸をそれぞれ腹腔内接種して感
染させ、感染直後並びに４時間後の２回、本物質
を500mg／Kg経口投与し、７日間感染死の有無を
観察したところ、無処置対照群では感染２日目に
全数死亡したが、本物質投与群のいずれにおいて
も感染７日目でもなお20％以上の生存がみられ
た。実施例 11 〔１〕錠剤実施例１で得られた本物質 175mg 乳糖 16mg でん粉５mg ハイドロキシプロピルセルロース 3.0mg ステアリン酸マグネシウム 1.0mg 200mg／錠本物質、乳糖を混合しハイドロキシプロピルセ
ルロース水溶液を加え練合してから乾燥粉砕す
る。この粉砕物にあらかじめ、でん粉に分散した
ステアリン酸マグネシウムを添加混合し、通常の
方法で打錠を行い錠剤とした。〔２〕顆粒剤実施例２で得られた本物質 176mg 乳糖 16mg でん粉４mg ハイドロキシプロピルセルロース４mg 本物質、でん粉、乳糖を混合しておき、ハイド
ロキシプロピルセルロース水溶液を加え、混合乾
燥、粉砕する。12乃至48メツシユの範囲で篩別す
ることにより顆粒剤を得た。

Claims

【特許請求の範囲】１一般式（）［式中、R₁は【式】を示し、Ｙは【式】｛式中、R₃は、―Ｏ（CH₂）_oＨ（式中、ｎは２乃至４を示す）―OCH
（CH₃）₂，―OC（CH₃）₃，【式】【式】又は【式】を示す］で示されるセフアロスポリン系抗生物質誘導体を有効成分とす
ることを特徴とする抗菌剤。２前記抗菌剤が経口投与形態を有していること
を特徴とする特許請求の範囲第１項に記載の抗菌
剤。３前記抗菌剤が腸内菌叢を乱さない効果を有す
ることを特徴とする特許請求の範囲第１項又は第
２項に記載の抗菌剤。