JPH02131495A - 抗レトロウィルス作用物質 - Google Patents
抗レトロウィルス作用物質Info
- Publication number
- JPH02131495A JPH02131495A JP1179431A JP17943189A JPH02131495A JP H02131495 A JPH02131495 A JP H02131495A JP 1179431 A JP1179431 A JP 1179431A JP 17943189 A JP17943189 A JP 17943189A JP H02131495 A JPH02131495 A JP H02131495A
- Authority
- JP
- Japan
- Prior art keywords
- added
- amphotericin
- filtrate
- sulfonating agent
- pyridine
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- Pending
Links
Classifications
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07H—SUGARS; DERIVATIVES THEREOF; NUCLEOSIDES; NUCLEOTIDES; NUCLEIC ACIDS
- C07H17/00—Compounds containing heterocyclic radicals directly attached to hetero atoms of saccharide radicals
- C07H17/04—Heterocyclic radicals containing only oxygen as ring hetero atoms
- C07H17/08—Hetero rings containing eight or more ring members, e.g. erythromycins
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P31/00—Antiinfectives, i.e. antibiotics, antiseptics, chemotherapeutics
- A61P31/12—Antivirals
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Abstract
(57)【要約】本公報は電子出願前の出願データであるた
め要約のデータは記録されません。
め要約のデータは記録されません。
Description
【発明の詳細な説明】
（産業上の利用分野）
本発明は優れた抗レトロウィルス作用を有する物質に関
し、更に詳しくはレトロウィルス増殖抑制作用を有する
アムホテリシンＢ （ＡｍｐｈｏｔｅｒｉｃｉｎＢ）と
スルホン化剤との反応生成物又はその塩に関する。
し、更に詳しくはレトロウィルス増殖抑制作用を有する
アムホテリシンＢ （ＡｍｐｈｏｔｅｒｉｃｉｎＢ）と
スルホン化剤との反応生成物又はその塩に関する。
（従来技術）
エイズ（後天性免疫不全症候群）はレトロウィルスの一
種であるヒト免疫不全ウイルス（Ｉ｛ＩＶ）の惑染によ
り生じる致死的ないし極めて悪性の疾患であり、その阻
止と撲滅は現在、全世界のレベルで人類が克服すべき最
重要問題となっている。
種であるヒト免疫不全ウイルス（Ｉ｛ＩＶ）の惑染によ
り生じる致死的ないし極めて悪性の疾患であり、その阻
止と撲滅は現在、全世界のレベルで人類が克服すべき最
重要問題となっている。
従来、エイズの治療にはＨ Ｉ Ｖの有する逆転写酵素
を阻止する抗レトロウィルス剤を用いて治療する試みが
なされており、かかる抗レトロウィルス剤の代表的なも
のとして、例えば、アジドチミジン等が知られている〔
医学のあゆみ．． １ ４ ２巻、第９号、６１９〜６
２２頁（１９８７年）。
を阻止する抗レトロウィルス剤を用いて治療する試みが
なされており、かかる抗レトロウィルス剤の代表的なも
のとして、例えば、アジドチミジン等が知られている〔
医学のあゆみ．． １ ４ ２巻、第９号、６１９〜６
２２頁（１９８７年）。
しかしながら、従来知られている抗レトロウィルス関係
の薬物はエイズの治療に対して有効かつ安全であるかど
うか未だ充分には検証かつ薙認されていない。
の薬物はエイズの治療に対して有効かつ安全であるかど
うか未だ充分には検証かつ薙認されていない。
（発明の構成及び効果）
本発明者らは種々研究を重ねた結果、アムボテリシンＢ
とスルホン化剤との反応生成物又はその塩が優れた抗レ
トロウィルス作用、とくにＨ Ｉ Ｖに対する優れた増
殖抑制作用を有していることを見出し、本発明を完成す
るに至った。
とスルホン化剤との反応生成物又はその塩が優れた抗レ
トロウィルス作用、とくにＨ Ｉ Ｖに対する優れた増
殖抑制作用を有していることを見出し、本発明を完成す
るに至った。
本発明のアムホテリシンＢとスルホン化剤との反応生成
物は、例えばアムホテリシンＢを適当な溶媒中スルホン
化剤と反応させることにより製することができる。溶媒
としては、例えば第三級アミン（例えば、ビリジン、ピ
コリン、ルチジン、Ｎ，Ｎ−ジメチルアニリン）などを
好適に用いることができる。スルホン化剤としては、例
えば二酸化イオウーピリジン・コンプレックス、無水硫
酸、濃硫酸、クロロ硫酸などを使用することができる。
物は、例えばアムホテリシンＢを適当な溶媒中スルホン
化剤と反応させることにより製することができる。溶媒
としては、例えば第三級アミン（例えば、ビリジン、ピ
コリン、ルチジン、Ｎ，Ｎ−ジメチルアニリン）などを
好適に用いることができる。スルホン化剤としては、例
えば二酸化イオウーピリジン・コンプレックス、無水硫
酸、濃硫酸、クロロ硫酸などを使用することができる。
マタ、スルホン化剤の使用量はアムホテリシンＢに対し
て過剰量用いるのが好ましく、例えばスルボン化剤とし
て三酸化イオウーピリジン・コンプレックスを用いる場
合には、アムホテリシンＢｌモルに対して５モル〜１０
０モル使用するのが好ましい。本反応は冷却〜加熱下で
行うことができ、好ましくは加熱下で実施するのが適当
である。
て過剰量用いるのが好ましく、例えばスルボン化剤とし
て三酸化イオウーピリジン・コンプレックスを用いる場
合には、アムホテリシンＢｌモルに対して５モル〜１０
０モル使用するのが好ましい。本反応は冷却〜加熱下で
行うことができ、好ましくは加熱下で実施するのが適当
である。
かくして、例えば溶媒としてピリジンを用い、スルホン
化剤として二酸化イオウ・ピリジンコンプレックスを用
いた場合には、アムホテリシンＢとスルボン化剤との反
応生成物が油伏物として得られるが、核油状物中には溶
媒として用いたピリジンや未反応の三酸化イオウ・ピリ
ジンコンブレノクス等が不純物として含まれているので
、これら不純物を除去するのが好ましい。不純物の除去
は、例えば上記油状物を水に溶解し、強酸性イオン交換
樹脂で処理して塩基性物質たるピリジンを除去し、次い
で水酸化バリ゛ウム及び／又は炭酸バリウムを加えて硫
酸イオンを硫酸バリウムとして沈澱させ、この沈澱を除
去することにより行うことが出来る。更に、硫酸バリウ
ムを除去した後に得られる溶液は、強酸性イオン交換樹
脂で処理してバリウムイオンを脱離し、これに水酸化ア
ルカリ金属（例えば水酸化カリウム）を加えた後不溶物
を除去し、次いで凍結乾燥することにより、目的物をア
ルカリ金属塩として取得することが出来る。
化剤として二酸化イオウ・ピリジンコンプレックスを用
いた場合には、アムホテリシンＢとスルボン化剤との反
応生成物が油伏物として得られるが、核油状物中には溶
媒として用いたピリジンや未反応の三酸化イオウ・ピリ
ジンコンブレノクス等が不純物として含まれているので
、これら不純物を除去するのが好ましい。不純物の除去
は、例えば上記油状物を水に溶解し、強酸性イオン交換
樹脂で処理して塩基性物質たるピリジンを除去し、次い
で水酸化バリ゛ウム及び／又は炭酸バリウムを加えて硫
酸イオンを硫酸バリウムとして沈澱させ、この沈澱を除
去することにより行うことが出来る。更に、硫酸バリウ
ムを除去した後に得られる溶液は、強酸性イオン交換樹
脂で処理してバリウムイオンを脱離し、これに水酸化ア
ルカリ金属（例えば水酸化カリウム）を加えた後不溶物
を除去し、次いで凍結乾燥することにより、目的物をア
ルカリ金属塩として取得することが出来る。
かくして得られる本発明の物質は、下記の物理化学的性
質を有する。
質を有する。
［１］ＫＢｒ錠刑法による赤外線吸収スペクトル３４５
０〜３４２０． １６３０， １２４０． １１２０〜
１１１０及び６２０ｃｍ−’の近傍に吸収｛↑Ｆを有す
る■炭素、窒素及び硫黄原子の比率 Ｃ：Ｎ：Ｓセ２ １〜２ ２ ＝ １：３〜４■溶解性 水に易溶、エタノールに難溶、酢酸エチル及びエーテル
に不溶。
０〜３４２０． １６３０， １２４０． １１２０〜
１１１０及び６２０ｃｍ−’の近傍に吸収｛↑Ｆを有す
る■炭素、窒素及び硫黄原子の比率 Ｃ：Ｎ：Ｓセ２ １〜２ ２ ＝ １：３〜４■溶解性 水に易溶、エタノールに難溶、酢酸エチル及びエーテル
に不溶。
上記本発明の物質のうち、好ましいものはカリウム塩で
あり、後記実施例で得られるカリウム塩は下記物理化学
的性質を有する。
あり、後記実施例で得られるカリウム塩は下記物理化学
的性質を有する。
（実施例１で得られる物質）
［１］ＫＢｒ錠剤法による赤外線吸収スペクトル３４５
０． １Ｇ３０． １２４０． １１２０及び６２０ｃ
ｌ’の近傍に吸収帯を有する ■高速液体クロマトグラム 〔条件；固定相：オクタデカニル化されたシリカゲル、
１５ｃｍＸ４．６ｍｌ１ｌΦ、移動相：メタノール：水
＝４０：６０，カラム温度：２５゜Ｃ、検出器：Ｕ Ｖ
２５４ｎｍ，流量速度：０．５ｒｔｄｌｌ分〕主ピーク
のＲｔ（保持時間）（分）：１．９付近（実施例２で得
られる物質） ［１］ＫＢｒ錠刑法による赤外線吸収スペクトル３４２
０， １６３０． １２４０． １１１０及び６２０ｃ
ｍ−’の近傍に吸収帯を有する ■高速液体クロマトグラム 〔条件；固定相：オクタデカニル化されたシリカゲル、
１５ｃｍ Ｘ ４．６ｍｍΦ、移動相：メタノール：水
＝４０：６０．カラム温度＝２５゜Ｃ１検出器：ＵＶ２
５４ｎｍ，流量速度：０．５ｍ１／分〕主ピークのＲｔ
（保持時間）（分”）：１．Ｂ付近本発明のアムホテリ
シンＢとスルホン化剤との反応生成物又はその塩は前述
の通り、優れた抗レトロウィルス作用、特にＩｆ Ｉ
Ｖに対する優れた増殖抑制作用を有するため、エイズ（
ＡＩＤＳ）等のレトロウィルス感染症の予防及び／又は
治療に使用することができる。
０． １Ｇ３０． １２４０． １１２０及び６２０ｃ
ｌ’の近傍に吸収帯を有する ■高速液体クロマトグラム 〔条件；固定相：オクタデカニル化されたシリカゲル、
１５ｃｍＸ４．６ｍｌ１ｌΦ、移動相：メタノール：水
＝４０：６０，カラム温度：２５゜Ｃ、検出器：Ｕ Ｖ
２５４ｎｍ，流量速度：０．５ｒｔｄｌｌ分〕主ピーク
のＲｔ（保持時間）（分）：１．９付近（実施例２で得
られる物質） ［１］ＫＢｒ錠刑法による赤外線吸収スペクトル３４２
０， １６３０． １２４０． １１１０及び６２０ｃ
ｍ−’の近傍に吸収帯を有する ■高速液体クロマトグラム 〔条件；固定相：オクタデカニル化されたシリカゲル、
１５ｃｍ Ｘ ４．６ｍｍΦ、移動相：メタノール：水
＝４０：６０．カラム温度＝２５゜Ｃ１検出器：ＵＶ２
５４ｎｍ，流量速度：０．５ｍ１／分〕主ピークのＲｔ
（保持時間）（分”）：１．Ｂ付近本発明のアムホテリ
シンＢとスルホン化剤との反応生成物又はその塩は前述
の通り、優れた抗レトロウィルス作用、特にＩｆ Ｉ
Ｖに対する優れた増殖抑制作用を有するため、エイズ（
ＡＩＤＳ）等のレトロウィルス感染症の予防及び／又は
治療に使用することができる。
本発明のアムホテリシンＢとスルホン化剤との反応生成
物又はその塩は経口的にも非経１コ的（例えば、静脈内
、皮下）にも投与することができる。
物又はその塩は経口的にも非経１コ的（例えば、静脈内
、皮下）にも投与することができる。
本発明の目的物質を医薬として使用する場合、経口もし
くは非経口投与に適した医薬賦形剤と混合した医薬製剤
として使用することができ、かかる医薬製剤は錠剤、カ
プセル剤、座剤の如き固形剤であってもよく、溶液、懸
濁液、乳液の如き液剤であってもよい． （原理） ヒトＴ細胞白血病ウィルスＩ型（ｈｕｍａｎ Ｔ−ｃｅ
ｌｌＬｅｕｋｅｍｉａ ｖｉｒｕｓ，ＩＩＴＬＶ− １
（＾ＴＬＶ） ）持続感染細胞株であるＭＴ−４細胞
に旧Ｖを感染させるとＩＩＩＶが急速に増殖し、５〜６
日でＭＴ−４細胞は細胞傷害の為に死滅することが知ら
れている。従って、旧Ｖ感染させたＭＴ−４細胞の生細
胞数を１旨標として検体のＩＩＩＶ増殖抑制作用を調べ
ることが出来る。
くは非経口投与に適した医薬賦形剤と混合した医薬製剤
として使用することができ、かかる医薬製剤は錠剤、カ
プセル剤、座剤の如き固形剤であってもよく、溶液、懸
濁液、乳液の如き液剤であってもよい． （原理） ヒトＴ細胞白血病ウィルスＩ型（ｈｕｍａｎ Ｔ−ｃｅ
ｌｌＬｅｕｋｅｍｉａ ｖｉｒｕｓ，ＩＩＴＬＶ− １
（＾ＴＬＶ） ）持続感染細胞株であるＭＴ−４細胞
に旧Ｖを感染させるとＩＩＩＶが急速に増殖し、５〜６
日でＭＴ−４細胞は細胞傷害の為に死滅することが知ら
れている。従って、旧Ｖ感染させたＭＴ−４細胞の生細
胞数を１旨標として検体のＩＩＩＶ増殖抑制作用を調べ
ることが出来る。
（方法）
ＭＴ−４細胞ニＩＩＩＶ（ＴＡＬＬ−１／ＬＡＶの培養
上清）を０．００１ＴＣＩＤｓｏ（ｍｅｄｉａｎ ｔｉ
ｓｓｕｅ ｃｕｌｔｕｒｅ ｉｎｆｅｃｔｉｏｕｓ ｄ
ｏｓｅ，５０％組織培養感染量）／ｃｅｌｌとなるよう
に３７゜Ｃで１時間感染させた後洗浄し、ＦＣＳ （ｆ
ｅｔａｌ ｃａｌｆｓｅｒｕｍ：牛胎児血清）を２０％
含むＲＰ旧−１６４０培地に２Ｘ１０’ｃｅｌｌ／ａｌ
ｌ度で浮遊させた。平底カルチャ一プレートに、ＦＣＳ
を含まないＲＰ旧−１６４０培地で段階希釈した検体を
１濃度あたり８穴ずつｌＯＯμｆｆｉ／ｗｅｌｌｌｉ入
れた。そのうち半数の４穴の希釈列には先のＩＩＩＶ感
染済みのＭＴ−４細胞浮遊液を１００ｌノｉ／ｗｅｌｌ
ｌづつ加え、残りの４穴の希釈列にはＩＩＩＶ非感染の
ＭＴ− ４細胞浮遊液を１００μｆ／ｗｅｌｌづつ加え
、５日間培養した。培養後、各ｗｅｌ１から１００μ！
づつ細胞浮遊液を採りトリバンブルー染色法により生細
胞数のカウン１−を行った。検体のＩＩＩＶ増殖抑制作
用は下弐より算出される細胞傷害抑制率（％）を指標と
して調べた。
上清）を０．００１ＴＣＩＤｓｏ（ｍｅｄｉａｎ ｔｉ
ｓｓｕｅ ｃｕｌｔｕｒｅ ｉｎｆｅｃｔｉｏｕｓ ｄ
ｏｓｅ，５０％組織培養感染量）／ｃｅｌｌとなるよう
に３７゜Ｃで１時間感染させた後洗浄し、ＦＣＳ （ｆ
ｅｔａｌ ｃａｌｆｓｅｒｕｍ：牛胎児血清）を２０％
含むＲＰ旧−１６４０培地に２Ｘ１０’ｃｅｌｌ／ａｌ
ｌ度で浮遊させた。平底カルチャ一プレートに、ＦＣＳ
を含まないＲＰ旧−１６４０培地で段階希釈した検体を
１濃度あたり８穴ずつｌＯＯμｆｆｉ／ｗｅｌｌｌｉ入
れた。そのうち半数の４穴の希釈列には先のＩＩＩＶ感
染済みのＭＴ−４細胞浮遊液を１００ｌノｉ／ｗｅｌｌ
ｌづつ加え、残りの４穴の希釈列にはＩＩＩＶ非感染の
ＭＴ− ４細胞浮遊液を１００μｆ／ｗｅｌｌづつ加え
、５日間培養した。培養後、各ｗｅｌ１から１００μ！
づつ細胞浮遊液を採りトリバンブルー染色法により生細
胞数のカウン１−を行った。検体のＩＩＩＶ増殖抑制作
用は下弐より算出される細胞傷害抑制率（％）を指標と
して調べた。
細胞傷害抑制率（％）
（結果）
結果は下記第１表の通りであり、本発明物質は７．５μ
ｇ７ｍｌの低濃度で７０％以上の細胞傷害抑制率を示し
、優れたＩＩＩＶ増１Ａ？ｉｌｒｌ＋制作用を有してい
ることがわかる。
ｇ７ｍｌの低濃度で７０％以上の細胞傷害抑制率を示し
、優れたＩＩＩＶ増１Ａ？ｉｌｒｌ＋制作用を有してい
ることがわかる。
第１表
検体Ｎｏ．１：実施例１で得た物質
検体Ｎｏ．２：実施例２で得た物質
＊：測定値のバラツキにより１００を越える場合は（１
００）として表記 実験例２ コ 包 ノ ′ １１，１ ．（原理） Ｍｏ１ｔ−４細胞とＩＩＩＶに持続感染しているＭｏｌ
ｔ−４／１１１ｖ細胞を混合すると１〜２ｌコ間で巨細
胞が形成される。この現象はＭｏｌｔ−４細胞表面のＣ
Ｄ４レセプターとＭｏ１ｔ−４／ＩＩＩＶ細胞表面に発
現されているＩＩＩＶのエンベロープ蛋白であるｇｐｌ
２０が結合して起こるものである。従って、巨細胞形成
の有無により検体のＩＩＩＶとＣＤ４分子結合（ＩＩＩ
Ｖのリンパ球への吸着）の抑制効果を調べることができ
る。
００）として表記 実験例２ コ 包 ノ ′ １１，１ ．（原理） Ｍｏ１ｔ−４細胞とＩＩＩＶに持続感染しているＭｏｌ
ｔ−４／１１１ｖ細胞を混合すると１〜２ｌコ間で巨細
胞が形成される。この現象はＭｏｌｔ−４細胞表面のＣ
Ｄ４レセプターとＭｏ１ｔ−４／ＩＩＩＶ細胞表面に発
現されているＩＩＩＶのエンベロープ蛋白であるｇｐｌ
２０が結合して起こるものである。従って、巨細胞形成
の有無により検体のＩＩＩＶとＣＤ４分子結合（ＩＩＩ
Ｖのリンパ球への吸着）の抑制効果を調べることができ
る。
（方法）
平底カルチャープレー１・の各ｗｅｌｌに段階希釈した
検体液１００μｆｆｉと、Ｍｏｌｔ−４細胞及びＭｏｌ
ｔ−４／ ＩＩＴｔｖ− ｍ細胞を９＝１の割合で混合
した細胞浮遊液（６Ｘ １０’ｃｅｌｌｓ／ｍＲ．）
１００ ｕ １．を入れ培養した。２口後、鏡検にて巨
細胞形成の有無を観察した。
検体液１００μｆｆｉと、Ｍｏｌｔ−４細胞及びＭｏｌ
ｔ−４／ ＩＩＴｔｖ− ｍ細胞を９＝１の割合で混合
した細胞浮遊液（６Ｘ １０’ｃｅｌｌｓ／ｍＲ．）
１００ ｕ １．を入れ培養した。２口後、鏡検にて巨
細胞形成の有無を観察した。
（結果）
実施例１及び２で得た物質は、それぞれ３１μｇ／ｍｌ
の濃度で巨細胞形成を１００％抑制することができた。
の濃度で巨細胞形成を１００％抑制することができた。
実験例３
ｌ五５舅ＩＪ田訓鵬ｕ１』−
（方法）
ＬＵ［！（Ｊ．Ｃ１ｉｎｃ．旧ｃｒｏｂｉｏ，第２５巻
、１７１７頁、１９８７年）らの方法に準じて行った。
、１７１７頁、１９８７年）らの方法に準じて行った。
すなわち、ＩＩＴＶの持続感染細胞であるＭｏｌｔ−４
／ＬＡＶ細胞の培養土清１００ｒｒｄｌを超遠心にかけ
、沈渣にウイルス可溶化緩衝液１０ ｍｌを加えて逆転
写酵素活性を持つ液とした。
／ＬＡＶ細胞の培養土清１００ｒｒｄｌを超遠心にかけ
、沈渣にウイルス可溶化緩衝液１０ ｍｌを加えて逆転
写酵素活性を持つ液とした。
この液５０１ｔｌ．に、段階希釈した倹休液５０μｆを
加え３０分反応させた．後、逆転写酵素（ｒｅｖｅｒｓ
ｅ ｔｒａｎｓｃｒｉｐｔａｓｅＨ ＲＴ）反応用緩衝
液を９０＃ｊ！加えた．そのうち９５μＰを”Ｉ＋チミ
ジン三リン酸１０μＣｉとテンペレー１・プライマー（
ｐｏｌｙ（ｒＡ） ・ｐ（ｄＴ）＋ｔ−＋ｓ） ２．５
μｇ／５μｌの入ったチューブに加え（全ｌ：１００μ
！）、蓋をして３７゜Ｃで２２時間反応させた． １０
％トリクロ口酢酸水溶液を加え反応を終了させた後グラ
スフィルターでろ過し、未反応の３１１チミヂン三リン
酸を５％トリクロロ酢酸水溶液で洗浄して除去した。グ
ラスフィルターを乾燥し、液体シンチレーションカウン
ターにて放射能の測定ヲ行い逆転写酵素活性を調べた。
加え３０分反応させた．後、逆転写酵素（ｒｅｖｅｒｓ
ｅ ｔｒａｎｓｃｒｉｐｔａｓｅＨ ＲＴ）反応用緩衝
液を９０＃ｊ！加えた．そのうち９５μＰを”Ｉ＋チミ
ジン三リン酸１０μＣｉとテンペレー１・プライマー（
ｐｏｌｙ（ｒＡ） ・ｐ（ｄＴ）＋ｔ−＋ｓ） ２．５
μｇ／５μｌの入ったチューブに加え（全ｌ：１００μ
！）、蓋をして３７゜Ｃで２２時間反応させた． １０
％トリクロ口酢酸水溶液を加え反応を終了させた後グラ
スフィルターでろ過し、未反応の３１１チミヂン三リン
酸を５％トリクロロ酢酸水溶液で洗浄して除去した。グ
ラスフィルターを乾燥し、液体シンチレーションカウン
ターにて放射能の測定ヲ行い逆転写酵素活性を調べた。
検体の逆転写酵素活性抑制作用は下弐より算出される逆
転写酵素活性抑制率（％）として調べた。
転写酵素活性抑制率（％）として調べた。
ｌ′ｉ
Ｐｌ ：検体無添加時の酵素活性
Ｐ２ ：検体添加時の酵素活性
（結果）
結果は下記第２表の通りであり、本発明の物質は優れた
逆転写酵素活性抑制作用を有することがわかる。
逆転写酵素活性抑制作用を有することがわかる。
第 ２ 表
検体Ｎｏ． １ ：実施例１で得た物質検体Ｎｏ．２：
実施例２で得た物質 実施例ｌ アムホテリシンＢ Ｏ．５０ ｇをピリジン１００ｄに
溶解し、二酸化イオウーピリジン・コンプレックス１０
ｇを加えた後ビリジン１００ｍｆｆｉを加え６０〜６５
゜Ｃで６時間撹拌する。冷却後、上澄液を除去し、残渣
を水１５ｍｌに溶解し、強酸性イオン交換樹脂（Ｄｏｗ
ｅｘ ５０ｘ８（Ｈ型）） １００ ｍｌ （湿潤量）
を加え３０分間撹拌する。不溶物をろ別し、ろ液を１０
％水酸化バリウム水溶液でｐｌ１ ５．５とした後粉末
炭酸バリウムでｐｌ＋ ７．５とする。活性炭を加えた
後セライトを用いて不溶物をろ別する。ろ液に強酸性イ
オン交換樹脂（ロｏｗｅｘ５０ Ｘ ８ （ Ｈ型））
３０ｍｌ（湿潤量）を加え２０分間撹拌後、不溶物をろ
別する．ろ液を０．２％水酸化カリウム水溶液でｐｌｌ
？．３とした後この溶液の液量が約１００ｄとなる迄
濃縮する。活性炭を加え不溶物をろ別し、ろ液を凍結乾
燥することにより下記物理化学的性質を有する物！（ア
ムホテリシンＢ・スルホン化剤反応生成物・カリウム塩
）１８５■を得る． （１）赤外線吸収スペクトル（ＫＢ，中）（図１）３４
５０，１６３０．１２４０．１１２０，６２０ ｃｌ’
（２）紫外線吸収スペクトル（メタノール）アムホテシ
リンＢ由来のスペクトルは消失（３）元素分析値 実測値（％）； Ｃ．２４．９７． ＩＬ２．８２；
Ｎ，１．３９．Ｓ．１１．５１Ｋ．２０．６４ （４）高速液体クロマトグラム（図２）主ピークのＲｔ
（保持時間）（分）：１．９付近〔条件〕 固定相：オクタデカニル化されたシリカゲル１５ｃｍＸ
４．（ｉｍｍφ 移動相：メタノール：水＝ ４０ ： ６０カラム温度
：２５℃ 検出器： ＵＶ２５４ｎｍ 流量速度：０．５ｍｌｌ分 （５）溶解性 水に易溶、エタノールに難溶、酢酸エチル及びエーテル
に不溶 実施例２ アムホテリシン８０．５０ｇをピリジン１００ｍＲに熔
解し、三酸化イオウービリジン・コンブレンクスｌｏｇ
を加えた後ピリジン１０ ０ ｍｌを加え７０゜Ｃで６
時間撹拌する。冷却後、上澄液を除去し、残渣を水１５
Ｉｄに溶解し、強酸性イオン交換樹脂（Ｄｏｈｅｘ５０
Ｘ８（Ｈ型）） １００ｍｌｌ （湿潤量）を加え２０
分間撹拌する．不溶物をろ別し、ろ液を水酸化バリウム
水溶液でｐｌ１ ５．５とした後粉末炭酸バリウムでｐ
ｌ＋７．５とする。析出沈澱を遠心分離（７．００Ｏｒ
ｐｍ， ２ ０分）した後上澄液に活性炭を加えろ過す
る。ろ液に強酸性イオン交換樹脂（Ｄｏｗｅｘ ５０ｘ
Ｒ（Ｈ型）〕１５＋ｄ！（湿潤量）を加え１５分間撹拌
後、不溶物をろ別する。ろ液を１％水酸化カリウム水溶
液でｐｌ１７．３とした後この溶液の液量が約５０ｍｌ
となる迄濃縮する。メンプランフィルターでろ過後、ろ
液を凍結乾燥することにより下記物理化学的性質を有す
る物質（アムホテリシンＢ・スルホン化剤反応生成物・
カリウム塩） ２５０ｍｇを得る。
実施例２で得た物質 実施例ｌ アムホテリシンＢ Ｏ．５０ ｇをピリジン１００ｄに
溶解し、二酸化イオウーピリジン・コンプレックス１０
ｇを加えた後ビリジン１００ｍｆｆｉを加え６０〜６５
゜Ｃで６時間撹拌する。冷却後、上澄液を除去し、残渣
を水１５ｍｌに溶解し、強酸性イオン交換樹脂（Ｄｏｗ
ｅｘ ５０ｘ８（Ｈ型）） １００ ｍｌ （湿潤量）
を加え３０分間撹拌する。不溶物をろ別し、ろ液を１０
％水酸化バリウム水溶液でｐｌ１ ５．５とした後粉末
炭酸バリウムでｐｌ＋ ７．５とする。活性炭を加えた
後セライトを用いて不溶物をろ別する。ろ液に強酸性イ
オン交換樹脂（ロｏｗｅｘ５０ Ｘ ８ （ Ｈ型））
３０ｍｌ（湿潤量）を加え２０分間撹拌後、不溶物をろ
別する．ろ液を０．２％水酸化カリウム水溶液でｐｌｌ
？．３とした後この溶液の液量が約１００ｄとなる迄
濃縮する。活性炭を加え不溶物をろ別し、ろ液を凍結乾
燥することにより下記物理化学的性質を有する物！（ア
ムホテリシンＢ・スルホン化剤反応生成物・カリウム塩
）１８５■を得る． （１）赤外線吸収スペクトル（ＫＢ，中）（図１）３４
５０，１６３０．１２４０．１１２０，６２０ ｃｌ’
（２）紫外線吸収スペクトル（メタノール）アムホテシ
リンＢ由来のスペクトルは消失（３）元素分析値 実測値（％）； Ｃ．２４．９７． ＩＬ２．８２；
Ｎ，１．３９．Ｓ．１１．５１Ｋ．２０．６４ （４）高速液体クロマトグラム（図２）主ピークのＲｔ
（保持時間）（分）：１．９付近〔条件〕 固定相：オクタデカニル化されたシリカゲル１５ｃｍＸ
４．（ｉｍｍφ 移動相：メタノール：水＝ ４０ ： ６０カラム温度
：２５℃ 検出器： ＵＶ２５４ｎｍ 流量速度：０．５ｍｌｌ分 （５）溶解性 水に易溶、エタノールに難溶、酢酸エチル及びエーテル
に不溶 実施例２ アムホテリシン８０．５０ｇをピリジン１００ｍＲに熔
解し、三酸化イオウービリジン・コンブレンクスｌｏｇ
を加えた後ピリジン１０ ０ ｍｌを加え７０゜Ｃで６
時間撹拌する。冷却後、上澄液を除去し、残渣を水１５
Ｉｄに溶解し、強酸性イオン交換樹脂（Ｄｏｈｅｘ５０
Ｘ８（Ｈ型）） １００ｍｌｌ （湿潤量）を加え２０
分間撹拌する．不溶物をろ別し、ろ液を水酸化バリウム
水溶液でｐｌ１ ５．５とした後粉末炭酸バリウムでｐ
ｌ＋７．５とする。析出沈澱を遠心分離（７．００Ｏｒ
ｐｍ， ２ ０分）した後上澄液に活性炭を加えろ過す
る。ろ液に強酸性イオン交換樹脂（Ｄｏｗｅｘ ５０ｘ
Ｒ（Ｈ型）〕１５＋ｄ！（湿潤量）を加え１５分間撹拌
後、不溶物をろ別する。ろ液を１％水酸化カリウム水溶
液でｐｌ１７．３とした後この溶液の液量が約５０ｍｌ
となる迄濃縮する。メンプランフィルターでろ過後、ろ
液を凍結乾燥することにより下記物理化学的性質を有す
る物質（アムホテリシンＢ・スルホン化剤反応生成物・
カリウム塩） ２５０ｍｇを得る。
（１）赤外線吸収スペクトル（ Ｋ Ｂ ｒ中）（図３
）３４２０． １６３０， １２４０， １１１０，
６２０ｃｌ ’（２）紫外線吸収スペクトル（メタノー
ル）アムボテシリンＢ由来のスペクトルは消失（３》元
素分析値 実測値（％）； Ｃ，２４．７２： ＩＩ．２．９６；
Ｎ．１．３４；Ｓ．１１．８３Ｋ．２０．０２ （４）高速液体クロマトダラム（図４）主ピークのＲｔ
（保持時間）（分ｈｌ．８付近〔条件］ 固定相：オクタデカニル化されたシリカゲル１５ｃｍＸ
４，５胴φ 移動相：メタノール：水＝４０：６０ カラム温度：２５゜Ｃ 検出器： ＵＶ２５４、 流量速度：０．５ｄ／分 （５）溶解性 水に易溶、エタノールにＨ？容、酢酸エチル及びエーテ
ルに不溶
）３４２０． １６３０， １２４０， １１１０，
６２０ｃｌ ’（２）紫外線吸収スペクトル（メタノー
ル）アムボテシリンＢ由来のスペクトルは消失（３》元
素分析値 実測値（％）； Ｃ，２４．７２： ＩＩ．２．９６；
Ｎ．１．３４；Ｓ．１１．８３Ｋ．２０．０２ （４）高速液体クロマトダラム（図４）主ピークのＲｔ
（保持時間）（分ｈｌ．８付近〔条件］ 固定相：オクタデカニル化されたシリカゲル１５ｃｍＸ
４，５胴φ 移動相：メタノール：水＝４０：６０ カラム温度：２５゜Ｃ 検出器： ＵＶ２５４、 流量速度：０．５ｄ／分 （５）溶解性 水に易溶、エタノールにＨ？容、酢酸エチル及びエーテ
ルに不溶
第１図及び第２図は実施例１で得た物質の赤外線吸収ス
ペクトル及び高速液休クロマ１・ダラムをそれぞれ表し
、第３図及び第４図は実施例２で得た物質の赤外線吸収
スペクトル及び高速液体クロマトグラムをそれぞれ表す
。 第２図 Ａ蓼 特 口寺閏 （帝） 箋４図 イ１ミ 持 幡Ｆ．’ｒ Ｉ分）
ペクトル及び高速液休クロマ１・ダラムをそれぞれ表し
、第３図及び第４図は実施例２で得た物質の赤外線吸収
スペクトル及び高速液体クロマトグラムをそれぞれ表す
。 第２図 Ａ蓼 特 口寺閏 （帝） 箋４図 イ１ミ 持 幡Ｆ．’ｒ Ｉ分）
Claims (8)
- （１）アムホテリシンＢとスルホン化剤との反応生成物
またはその塩。 - （２）抗レトロウィルス作用を有する請求項（１）記載
の物質。 - （３）ＨＩＶ増殖抑制作用を有する請求項（１）記載の
物質。 - （４）下記物理化学的性質を有する請求項（３）記載の
物質。 ［１］ＫＢｒ錠剤法による赤外線吸収スペクトル３４５
０〜３４２０、１６３０、１２４０、１１２０〜１１１
０及び６２０ｃｍ＾−＾１の近傍に吸収帯を有する［２
］炭素、窒素及び硫黄原子の比率 Ｃ：Ｎ：Ｓ＝２１〜２２：１：３〜４ ［３］溶解性 水に易溶、エタノールに難溶、酢酸エチル 及びエーテルに不溶 - （５）下記物理化学的性質を有する請求項（４）記載の
物質。 ［１］ＫＢｒ錠剤法による赤外線吸収スペクトル３４５
０、１６３０、１２４０、１１２０及び６２０ｃｍ＾−
＾１の近傍に吸収帯を有する ［２］高速液体クロマトグラム 〔条件；固定相：オクタデカニル化されたシリカゲル、
１５ｃｍ×４．６ｍｍΦ、移動相：メタノール：水＝４
０：６０、カラム温度：２５℃、検出器：ＵＶ２５４ｎ
ｍ、流量速度：０．５ｍｌ／分〕主ピークのＲｔ：１．
９付近 - （６）下記物理化学的性質を有する請求項（４）記載の
物質。 ［１］ＫＢｒ錠剤法による赤外線吸収スペクトル３４２
０、１６３０、１２４０、１１１０及び６２０ｃｍ＾−
＾１の近傍に吸収帯を有する ［２］高速液体クロマトグラム 〔条件；固定相：オクタデカニル化されたシリカゲル、
１５ｃｍ×４．６ｍｍΦ、移動相：メタノール：水＝４
０：６０、カラム温度：２５℃、検出器：ＵＶ２５４ｎ
ｍ、流量速度：０．５ｍｌ／分〕主ピークのＲｔ：１．
８付近 - （７）アムホテリシンＢとスルホン化剤との反応生成物
またはその塩を有効成分としてなる抗レトロウィルス薬
。 - （８）ＨＩＶ増殖抑制剤である請求項（７）記載の抗レ
トロウィルス薬。
Applications Claiming Priority (2)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP63-176133 | 1988-07-14 | ||
| JP17613388 | 1988-07-14 |
Publications (1)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| JPH02131495A true JPH02131495A (ja) | 1990-05-21 |
Family
ID=16008239
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| JP1179431A Pending JPH02131495A (ja) | 1988-07-14 | 1989-07-11 | 抗レトロウィルス作用物質 |
Country Status (2)
| Country | Link |
|---|---|
| EP (1) | EP0351173A3 (ja) |
| JP (1) | JPH02131495A (ja) |
Families Citing this family (2)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| US5607691A (en) * | 1992-06-12 | 1997-03-04 | Affymax Technologies N.V. | Compositions and methods for enhanced drug delivery |
| FR2723187B1 (fr) * | 1994-07-29 | 1996-09-27 | Centre Nat Etd Spatiales | Systeme de transfert d'energie entre une source chaude et une source froide |
Family Cites Families (1)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| PL122884B1 (en) * | 1978-07-19 | 1982-08-31 | Politechnika Gdanska | Method of manufacture of quaternary trimethylammonium salts of inorganic derivatives of polyene macrolides |
-
1989
- 1989-07-10 EP EP19890307000 patent/EP0351173A3/en not_active Withdrawn
- 1989-07-11 JP JP1179431A patent/JPH02131495A/ja active Pending
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
| EP0351173A3 (en) | 1991-06-05 |
| EP0351173A2 (en) | 1990-01-17 |
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