JPH02149506A - 植物病害防除用組成物 - Google Patents

Abstract

(57)【要約】本公報は電子出願前の出願データであるた
め要約のデータは記録されません。

Description

【発明の詳細な説明】 ［産業上の利用分野］ 本発明は、細菌菌体を有効成分とする植物病害防除用組
成物に関し、さらに詳しくは、細菌菌体な有効成分とし
、細菌菌体の存在、生存を示す植物病害防除用組成物に
関する。

［従来の技術２発明が解決しようとする問題点コ野菜等
の収益性が高い作物の連作は、土壌の理化学性の悪化お
よび土壌病害虫の発生などにより、一般に困難とされて
いる。

近年、土壌病害菌の防除を、その病原菌に対して抗菌活
性を有する微生物を用いて行なう方法が種々検討されて
いる。

すなわち、たとえば、トマトのかいよう病の防除には、
その病原菌であるコリネバクテリウムミチガネンスに抗
菌活性を示す、たとえば、シュードモナスセパシア、シ
ュードモナスグラジオリイー、シュードモナスアベナエ
およびシュードモナスグルマエなどの細菌が有効である
（芯木ら２日本植物病理学会報、第５２巻、第５号、第
８３５〜８４２頁、昭和６１年１２月）。また、シュー
ドモナスグラジオリイーと同定された分離菌株　Ｍ−２
１９６が、フザリウム（Ｆｕｓａｒｉｕｍ）属菌、バー
チシリウム（Ｖｅｒｔｉｃｉ　Ｉ　Ｉ　ｉｕｍ）属菌、
アルタナリア（Ａｌｔｅｒｎａｒｉａ）属菌、コーチシ
ウム（Ｃｏｒｔｉｃｉｕｍ）属菌、リゾクトニア（Ｒｉ
　２０Ｃｔｏｎ　ｉ　ａ　）属菌、ピリキュラリア（Ｐ
ｙｒｉｃｕｌａｒｉａ）属菌、スクＬ／ｃ７チウム（Ｓ
ｃｌｅｒｏｔｉｕｕｎ）属菌、ピチウム（Ｐｙｔｈｉｕ
ｍ）属菌。

マクロホミナ（Ｍａｃｒｏｐｈｏｍｉｎａ）属菌、コレ
クトトリチウム（Ｃｏｔ　ｌｅｔｏｔｒｉｃｈｉｕｍ）
属菌、ボッリチス（Ｂｏｔｒｙｔｉｓ）属菌およびコリ
ネバクテリウム（Ｃｏｒｙｎｅｂａｃｔｅｒｉｕｍ）属
菌などに対して抗菌活性を示し、さらに、Ｍ−２１９６
はこれらの病原菌によって惹き起こされるイチゴ萎黄病
、キュウリつる割病、スイカつる割病、ニラ白絹病、ト
マトかいよう病およびコンニャク白絹病などの植物病害
の防除に有効であることも知られている（化学と生物、
第２６巻、第５号、第２８４〜２８６頁、　１９８８年
）。

一方、本発明者らは、シュードモナスセパシア、シュー
ドモナスグラジオリイー、シュードモナスグルマエ、シ
ュードモナスプランクリ−シュードモナスカリオフエリ
−、シュードモナスソラナセアラム、シュードモナスア
ベナエおよびシュードモナスカドレアのそれぞれに属す
る菌株がフザリウムオキシスポラムに抗菌活性を示し、
フザリウムオキシスポラムにより惹き起こされる腐敗病
、萎黄病、つる割病、萎ちょう病、立枯病、乾腐病など
の土壌病害を防除することが出来ることを見出し、この
知見に基づいて発明を完成し、さきに特許出願した。

植物病害防除剤の有効成分として使用される細菌（以下
成分菌体と記す）は使用時において生存していることが
必要である。このような成分菌体を生きたままで保存す
るために血清、グルコースおよびフラクトースなどの各
種の糖、グ刃セリンならびにジメチルスルホキシドなど
の保護剤を添加し、低温保存、凍結保存あるいは真空凍
結乾燥保存が行なわれる。

しかしながら、これらの従来の方法では、その製品の色
は成分菌体および保護剤の色のみであり、これを水で希
釈して、使用する際にはほとんど無色となり、希釈の程
度を間違えてもそれがわからず、成分菌体の童を適量と
することが出来ず、この成分菌体を含む植物病害防除剤
を効率よく使用することは困難である。

そこで、この成分菌体の存在および生存を示すような製
剤が望まれていた。

［問題点を解決するための手段、作用］本発明者らは、
シュードモナス属に属する細菌菌体を含有する植物病害
防除剤の製剤について、成分菌体の存在および生存を容
易に示すことが可能な方法を種々検討したところ、この
植物病害防除剤にレサズリン（ｒｅｓａｚｕｒｉｎ）を
含有させることにより、レサズリンが発色する赤色乃至
はうすいピンク色の色の濃淡より、成分菌体の存在を表
示することが可能であることを見出し、本発明を完成す
るに至った。

すなわち、本発明は、シュードモナス属に属し植物病原
菌に対して抗菌活性を有する細菌と、レサズリンとを少
なくとも含有していることを特徴とする植物病害防除用
組成物である。

本発明に使用される細菌は、シュードモナス属に属し、
植物病原菌に対して抗菌活性を有す・る細菌であればよ
く、その代表的な細菌としては、たとえば、シュードモ
ナスセパシア、シュードモナスグラジオリイー、シュー
ドモナスグルマエ。

シュードモナスブランタリー、シュードモナスカリオフ
エリ−、シュードモナスソラナセアラム、シュードモナ
スアベナエおよびシュードモナスカドレアなどに属する
菌株がある。また、さらに、シュードモナス属に属する
これらの菌株から誘導された変異株でもよい。

これらの菌株の代表例として、シュードモナスセパシア
ＡＴＣＣ１０８５６，同ＡＴＣＣ１３９４５，同ＡＴＣ
Ｃ１７４６０、同ＡＴＣＣ１７６１６，同ＡＴＣＣ１７
７５９（＝ｊＣＭ２７９９）、同ＡＴＣＣ１？７６２．
同ＡＴＣＣ１７７６５，同ＡＴＣＣ２５４１６（＝ＪＣ
Ｍ　５９６４＝ＩＦ０１４０７４）、同ＡＴＣＣ２５６
０８゜同ＡＴＣＣ２５６０９，同ＡＴＣＣ２５６１０，
同ＡＴＣＣ２７５１５゜同ＡＴＣＣ２９３５１，同ＡＴ
ＣＣ２９３５２，同ＡＴＣＣ２９４２４゜同ＡＴＣＣ３
５１３０，同ＡＴＣＣ３５２５４，同ＡＴＣＣ３９２７
７゜同ＡＴＣＣ３９３５６，同ＪＣＭ　２８００．同Ｊ
ＣＭ　２８０１および同ＩＦＯ３７３９，シュードモナ
スグラジオリ°イーＡＴＣＣ１９３０２，同ＡＴＣＣ１
０２４７，同ＡＴＣＣ１０２４８（＝ＩＦ０１３７００
）、同　ＡＴＣＣ１０８５４および同　ＡＴＣＣ２５４
１７、シュードモナスグルマエ　ＮＩＡＥＳ　１１６９
（ＡＴＣＣ３３６１７）、シュードモナスブランタリー
ＪＣＭ５４９２　、シュードモナスカリオフエリ−ＡＴ
ＣＣ５４２１８（ＤＳＭ　５０３４１）、同ＡＴＣＣ１
１４４１，同ＩＦＯ１２９５０゜同ＩＦＯ１２９５１，
同ＩＦＯ１２９５２，同ＩＦＯ１２９５３，同ＩＦＯ１
３５９１および同ＩＦ０１３６９４．シュードモナスソ
ラナセアラムＡＴＣＣ１１６９６，同ＡＴＣＣ１０６９
２，同ＡＴＣＣ１１６９７，同ＡＴＣＣ２５２３７，同
ＤＳＭ　１９９３および同ＤＳＭ　５０９０５．シュー
ドモナスアベナエＡＴＣＣ１９８６０ならびにシュード
モナスカドレアＡＴＣＣ３３６１９およびＡＴＣＣ１０
２００などがある。

これら細菌の菌学的性質は、バージイズマニュアルオブ
システマティックバクテリオロジー（Ｂｅｒｇｅｙｊｓ
　Ｍａｎｕａｌ　ｏｆ　５ｙｓｔｅ＋ｎａｔｉｃ　Ｂａ
ｃｔｅｒｉｏｌｏｇｙ）第１巻編集者クリーグ（Ｋｒｉ
ｅｇ）およびホルト（Ｈｏ１ｔ）：ウィリアムズアンド
ゥィルキンス（Ｗｉｌｌｔａ＋ｎｓ　＆　Ｗｉｌｋｉｎ
ｓ）社（１９８４）　、およびインターナショナルジャ
ーナルオブシステマティックバクテリオロジイー（Ｉｎ
ｔｅｒｎａｔｉｏｎａｌ　Ｊｏｕｒ−ｎａｌ　ｏｆ　Ｓ
ｙｓｔｅｍａｔｉｃ　Ｂａｃｔｅｒｉｏｌｏｇｙ）　、
第３７巻、第１４４〜１５２頁（１９８７）に記載され
ている。

なお、これらの菌株のうち、ＮＩＡＥＳは農林水産省農
業環境技術研究所（Ｎａｔｉｏｎａｌ　Ｉｎ５ｔｉｔｕ
ｔｅ　ｏｆＡｇｒｏ−Ｅｎｖｉｒｏｎｍｅｎｔａｌ　５
ｃｉｅｎｃｅ、茨城県つくば市観音台３−１−１）に、
　ＪＣＭは理化学研究所微生物系統保存施設（、Ｊａｐ
ａｎ　Ｃｏ１１ｅｃｔｉｏｎ　　ｏｆ　Ｍｉｃｒｏｏｒ
−ｇａｎｉｓｍｓ、埼玉県和光市広沢２−１）、ＡＴＣ
Ｃはアメリカンタイプカルチャーコレクション（Ａｍｅ
ｒｉｃａｎ　Ｔｙｐｅ　Ｃｕ１ｔｕｒｅ　Ｃｏ１１ｅｃ
ｔｉｏｎ、　１２０３１Ｐａｒｋｌａｗｎ叶ｉｖｅ　Ｒ
ｏｃｋｖｉｌｌｅ、　Ｍａｒｙｌａｎｄ　２０８５２゜
Ｕ、Ｓ、Ａ）に、　ＤＳＭはドイチェザンメルングフオ
ンミクロオルガニズメン（Ｄｅｕｔｓｃｈｅ　Ｓａｍｍ
ｅｌｕｎｇｖｏｎ　Ｍｉｋｒｏｇａｎｉｓｍｅｎ、　Ｇ
ｒｉｓｅｂａｃｈｓｔｒａｓｓｅ　８．　Ｇｏｔｔ−ｎ
ｇｅｎ、　Ｆｅｄｅｒａｌ　Ｒｅｐｕｂｉｌｉｃ　ｏｆ
　Ｇｅｒｍａｎｙ）にそれぞれ保存されていることを示
す。

本発明の植物病害防除用組成物（以下単に　組成物と記
すこともある）は、少なくとも成分菌体有していてもよ
い。

本発明の組成物の一成分として使用される成分菌体とし
ては、培養液から、たとえば遠心分離およびろ過などの
通常の固液分離手段で分離された湿潤菌体ならびにこの
湿潤菌体を低温保存、凍結および凍結乾燥などの処理を
経た処理菌体などが好適である。低温保存、凍結または
凍結乾燥された菌体は、たとえば、血清、糖類およびグ
リセリンなどの通常使用されている保存用保護剤との混
合物であってもよい。

本発明の好ましい組成物としては、たとえば、培養液お
よびこの培養液から分離した湿潤成分菌体および前記の
ような処理菌体のそれぞれを水に再ｉ％５ｆｉさせた液
のそれぞれにレサズリンをを添加した懸濁液、前記の湿
潤成分菌体および処理筒体を、レサズリン水溶液に再懸
濁した懸濁液ならびにこのような懸濁液の凍結品および
凍結乾燥品などがある。

この懸濁液中の成分面体濃度には特に制限はないが、実
用上、通常はｌＯ″〜１０′個／　ｍ　Ｉ程度とされる
。

レサス′リンとしては、レサス゛リン自体およびレサズ
リンナトリウムのようなレサズリンの水溶性塩を使用す
ることができるが、実用上、レサズリンの水溶性塩が好
ましい（レサズリン自体とレサズリン水溶性塩の両者を
レサズリン類と記すこともある）。

レサズリン類は固体のままおよび水溶液として使用する
ことができる。

レサズリン類の使用量は、成分菌体に悪影響を及ぼさな
いような量であれば特に制限はない。

本発明の組成物が懸濁液の場合には、実用上、通常はレ
サズリン類の濃度がレサズリンとして１ｗｔ％以下が好
ましく、０．５吋％以下が特に好ましく、０．００１〜
０．１ｗｔ％程度がさらに好ましい。

なお、本発明の組成物が湿潤菌株あるいは、処理菌体の
場合は、実用上、通常はレサズリン類の濃度がレサズリ
ンとして１０ｗｔ％以下として使用される。

この懸濁液のｐ）ｌは成分菌体が短期間に死滅しないか
乃至は短期間に抗菌活性が著しく低下しないようなｐＨ
とされ、成分面体の種類および培養条件によって異なり
、−概に特定し得ないが、実用上、通常は５〜８程度、
好ましくは６〜７．５程度とされる。

前記の懸濁液中の成分菌体を長期間にわたって生存させ
ておくためには、この懸濁液を使用に供するまで低温保
存するか、またはこの懸濁液を凍結乃至は凍結乾燥して
保存することが好ましい。

使用に供する利便と、成分菌体とレサズリンとをに封入
することが好ましい。

これらの低温保存、凍結および凍結乾燥に際して、Ｍ濁
液中に、たとえば、血清、グルコースおよびフラクトー
スなどの糖類、グリセリンならびにジメチルスルホキシ
ドなどの通常の保存用保護剤を存在させてもよい。

低温保存、凍結および凍結乾燥の条件は、通常の微生物
についてのこれらの条件と異なる処はない。

これらの処理のうち、成分菌体を損なわないためには、
凍結乾燥が好ましく、特に真空凍結乾燥によることが好
ましい。

真空凍結乾燥は通常の方法で行なわれる。たとえば、成
分菌体、レサズリンおよび保護剤（例えば５％シューク
ロース）を含む懸濁液である植物病害防除用組成物を一
定量殺菌済アンプルにとり、−８０°Ｃのような低温で
凍結した後、凍結乾燥し１、真空状態でアンプルを封じ
、植物病害防除用、１１１成物を封入したアンプルを作
成する。

本発明の組成物は、いずれの場合でも、水の存在下で赤
色乃至はうすいピンク色を示し、細菌の存在が色として
表示される。

植物病害防除用組成物は、保存中において、アンプル中
で成分菌体とレサズリンとが分離することがありうるの
で、使用にあたり、−アンプル全部を使用するが、アン
プルの内容物は必要に応じて水で希釈して使用するか、
アンプルの内容物をよく混和した後、そのうちから所定
量を採り、必要に応じて水で希釈される。成分菌体の正
確な爪を使用するため、および作業性の点から、−アン
プル全部を水で希釈して使用することが特に好ましい。

なお、施用時の菌液の成分菌体濃度は、通常は１０’−
１０’″］／ｍｌ程度として使用されるのが一般的であ
る。

本植物病害防除用組成物によって防除できる植物の病気
としては、各種の土壌病害であり、ユウガオ、トマト、
イチゴ、ニラ、ラッキョウ、ミツバ、ゴボウ、アスパラ
ガス、タマネギ、キャベツ。

キュウ１ハチシャ、ヘチマ、ナス、メロン、ハス。

スイカ、ダイコン、ホウレンソウ、セルリー、チョロギ
、サトイモ、ヤマイモ、ショウガ、ウドなどの野菜に生
じる乾腐病１株枯病、萎ちょう病、立枯病、黄黄病、つ
る割病、根腐病、半枯病、＠敗病などがある。

これらの植物の病気の防止および除去のために、本植物
病害防除用組成物を必要量の水で希釈し、土壌および植
物体に撒布、噴霧するなどして施用することができる。

しかしながら、この方法では、成分菌体が自然界で徐々
に死滅するため、本植物病害防除用組成物が多量に必要
である。

そこで、比較的少量で大きな植物病害防除効果を得るた
めに、たとえばネギ属の植物のような成分菌体に親和性
のある植物に本植物病害防除用組成物を接種し、この接
種植物を病原菌防除の対象となる植物（以下、対象植物
と記す）と混植することにより、成分菌体を土壌中で増
殖させ、成分面体の抗菌作用により、目的とする病原菌
を防止および除去する方法が行なわれる。

また、対象植物と、体成分菌体に親和性のある植物をあ
らかじめ混植しておき、その後に、本発明の植物病害防
除用組成物を接種することもできる。

本発明の組成物の成分菌体である細菌を接種した植物を
混植することにより、トマトなどの対象植物に病原菌が
発生した場合には、ネギ等の混植している植物の根部等
に生息している本発明の細菌が、対象植物の病原菌に対
し、抗菌作用を示し、病原菌を一層効率よく防除するこ
とが可能となる。

［実施例］ 次に、本発明を実施例によってさらに具体的に説明する
が、本発明はこれらの実施例に限定されるものではない
。

実施例】 １文言三角フラスコに肉汁培地（デイフコ社製。

Ｄｉｆｃｏ）を２００ｍ１入れ、１２０℃で高圧滅菌処
理をした。この培地を９個用意した。この各々にシュー
ドモナス属の各菌株を接種し、３０°Ｃで１日間回転振
どう培養した。

各々のフラスコの培養液を殺菌済遠心管に入れ、１２０
００ＸＧで２０分間遠心し、上澄液を捨て、得られた菌
体のそれぞれと、ろ過除菌した５％シュクロース含有馬
血清を各々５ｍｌおよびろ過除菌した１ｗｔ％レサズリ
ンナトリウ゛ム（レサズリンとして約０．９ｗｔ％）水
溶液−１ｔＯ、５ｍｌとを無菌的に混合して、懸濁液を
得た。この懸濁液を０．２＋ｎｌずつ殺菌済アンプルに
とり、−８０°Ｃて凍結したのち、真空凍結乾燥し、真
空状態でアンプルを封じ、植物病害防除用組成物が封入
されたアンプルを得た。

５°Ｃで６父月間保存していたこのアンプルを開封し、
殺菌水１文で希釈し、この菌液の生菌数および菌液の色
を調べた。結果を第１表に示す。また、ポテトデキスト
ロース寒天培地（日永製薬製）に、シュードモナス属の
菌を含む前記の各ｖｉ液およびこれと対置させてフザリ
ウムオキシスポラムエフニスビー　リコビルシシイ−（
Ｆｕｓａｒｉｃｕｎｏｘｙｓｐｏｒｕｍ　ｆ、ｓｐ、　
１ｙｃｏｐｅｒｓｉｃｉ）　Ｊ−３（病原菌）を接種し
、２５℃で７日間培養し、フザリウムオキシスポラム　
Ｊ−３の細菌の生育状態を観察した。結果を第１表に示
す。

なお、第１表中、フザリウムオキシスポラムＪ−３のコ
ロニーの生成および菌糸の生育の両者を阻害した菌株を
抗菌活性あり（＋十）とした。

一方、フザリウムオキシスポラム　Ｊ−３の色素を産生
ずるコロニーの生成は阻止するが、菌糸の生育を阻止し
ないものを活性あり（＋）とした。

（以下余白） 第１表 実施例２ 実施例１と同様にして作成し、５°Ｃて６父月間保存し
ていたシュードモナス　グルマエ　ＮＩＡＥＳ１１６９
　　の植物病害防除用組成物が封入されたアンプルを開
封し、１父の殺菌水で希釈した（生菌数１．８Ｘ１０’
コ／ｍ１）ところ、うすいピンク色を示した。

その液にニラの鱗茎を浸漬接種した。

そして、この接種ニラをトマトの定植時にその株元約２
０ｃｍ付近に混植させた。トマトの根腐れ萎ちょう病の
防除試験の結果を第２表に示す。

第２表 なお、 菌を夜の色は、 全て うすいピンク であった。

実施例３ 実施例１と同様にして作成し、５℃で６ケ月間文の殺菌
水で希釈した（生菌数　１．０Ｘ１０’］／ｍｌ）とこ
ろ、うすいピンク色を示した。その液にニラの鱗茎を浸
漬接種した。

そして、この接種ネギをイチゴの定植時にその株元約２
０ｃｍ付近に混植させた。イチゴの萎黄病の防除試験結
果を表３に示す。

第３表 ［発明の効果コ 本発明の植物病害防除用組成物は、その中の微生物の存
在を表示することができ、この植物病害防除用組成物を
使用することにより、腐敗病、萎黄病、つる割病、萎ち
ょう病、立枯病、乾腐病。

かいよう病、白絹病などの植物の土壌病害をより的確に
、かつより効率よく防除することが容易となり、野菜等
の栽培の生産性を著しく向上させることが可能となる。

Claims (1)

【特許請求の範囲】
1. シュードモナス属に属し、植物病原菌に対して抗菌活性
   を有する細菌と、レサズリンとを少なくとも含有してい
   ることを特徴とする植物病害防除用組成物。