JPH02149593A - 抗生物質ｇｅ２２７０ - Google Patents

Abstract

(57)【要約】本公報は電子出願前の出願データであるた
め要約のデータは記録されません。

Description

【発明の詳細な説明】 本発明は抗生物質ＧＥ　　２２７０と命名された新規な
抗生物質、それの付加塩類、それの薬学的組成物、およ
び特にそれらに敏感な微生物が関与する感染症の治療に
おける薬物としてのそれらの使用に関するものである。

本発明を要約すれば、本発明は抗生物質ＧＥ２２７０と
命名された新規な抗生物質、それの付加塩類、それの薬
学的組成物、および特にそれらに敏感な微生物が関与す
る感染症の治療における薬物としてのそれらの使用に関
するものである。

本発明の化合物類は、例えば家禽類、豚、反飼動物類な
どの如き動物類の成長促進剤としても活性である。

本発明の他の目的は、プラノビスポラ・ロセアＡＴＣＣ
５３７７３の菌糸体またはそれのＧＥ２２７０生成用変
種もしくは変異体を培養し、そして本発明の抗生物質を
菌糸体および／または発酵ブロスから単離することから
なる抗生物質ＧＥ　　２２７０の製造方法である。

プラノビスポラ・ロセア　ＡＴＣＣ５３７７３は土壌試
料から単離されそして１９８８年６月１４日に米国、メ
リーランド州、ＭＤ　　２０８５２、ロックヴイル、パ
ークローン、１２３０１のアメリカン・タイプ・カルチ
ャー・コレクション（ＡＴＣＣ）にブダペスト条約の条
項下で貯蔵されている。

この菌株は受は入れ番号ＡＴＣＣ５３７３３として認可
されている。

抗生物質ＧＥ　　２２７０の製造は、それを製造たはそ
れの抗生物質　ＧＥ　　２２７０生成用変種もしくは変
異体を好気性条件下で炭素、窒素および無機塩類の同化
可能な原料を含有している水性の栄養素媒体中で培養す
ることにより、実施される。

発酵技術で一般的に使用されている多くの栄養素媒体を
使用できるが、ある種の媒体が好適である。

好適な炭素原料は、グルコース、マンノース、ガラクト
ース、澱粉、トウモロコシミールなとである。好適な窒
素原料は、アンモニア、硝酸塩類、大豆ミール、ペプト
ン、肉エキス、酵母エキス。

トリプトン、アミノ酸類などである。培養媒体中に加え
ることのできる無機塩類には、ナトリウム、カリウム、
鉄、亜鉛、コバルト、マグネシウム、カルシウム、アン
モニウム、塩化物、炭酸塩、硫酸塩、燐酸塩、硝酸塩な
どのイオンを生成可能な一般的可溶性塩類が包含される
。

一般的に、抗生物質−生成用菌株は振盪フラスコ中で予
備培養され、そして次に実質的な量の抗生物質を製造す
るために培養物を使用してジャー発酵器に接種させる。

予備培養用に使用される媒体はそれより大規模の発酵用
に使用されるものと同一であってもよいが、他の媒体を
使用することもできる。抗生物質ＧＥ　　２２７０生成
用菌株は２０〜４０°Ｃの間の、好適には２４〜３５°
Ｃの間の、温度において成長可能である。

発酵中に、ブロスまたは菌糸体抽出試料を例えば生検定
またはＴＬＣもしくはＨＰＬＣ工程により抗生物質活性
を試験することにより、抗生物質の生成を監視すること
ができる。

例えば枯草菌および黄色ブドウ球菌の如き抗生物質Ｇ−
Ｅ２２７０に敏感な微生物を試験微生物として使用でき
る。生検定は簡便には寒天板上で寒天拡散方法により行
われる。抗生物質活性の最大生成は一般的に発酵から２
日目〜５日目の間に起きる。

抗生物質ＧＥ　　２２７０は、菌株プラノビスボラ・ロ
セアＡＴＣＣ５３７３３またはそれの抗生物質ＧＥ　　
２２７０生成用変異体もしくは変種を培養することによ
り製造され、そしてそれは主として菌糸体中で見いださ
れる。

本出願の開示では、本発明の化合物類をそれらの生化学
的または生物学的性質に関して取り扱う時には、［抗生
物質ＧＥ　　２２７０Ｊは一般的に発酵工程の終了時に
回収される抗生物質ＧＥ　　２２７０複合体（実施例２
参照）並びにそれの主成分である抗生物質ＧＥ　　２２
７０　７アクターＡをさしていると考えられる。

プラノビスボラ・ロセア　ＡＴＣＣ５３７３３の生態学
的特性 プラノビスポラ　ロセア　ＡＴＣＣ５３７３３は、はと
んどの標準的媒体上でよく成長する。植物性の菌糸体は
長くそして不規則的に分枝鎖化されたフィラメント（０
，５〜１．０マイクロメートル）を生成して寒天に浸透
しそしてそれの表面上で密に成長する。菌糸体は、液体
中または固体媒体中で、未分割のまま残る。それの色は
ほとんどの試験媒体上で薄いさんご色からピンクさんご
色の範囲である。空気菌糸体が存在している時には、そ
れは白−ピンク色を有する。胞子嚢が単独でまたは空気
菌糸体の菌糸と共に許状で生成し、そしてそれらは約６
．０・〜８．０ミクロンの長さおよび１．０〜１．２ミ
クロンの幅である。それらは菌糸に短い胞子真情（１，
０〜２．０マイクロメートルの長さ）により結合されて
いる。縦の一対の紡錘状直線胞子（３，０〜３．５Ｘ１
．０−１．２マイクロメートル）が各胞子嚢中に生成す
る。胞子嚢中では、胞子は横隔壁により分離されている
。胞子嚢包から解放された後に、胞子は周毛性鞭毛によ
り運動性になる。

プラノビスポラ・ロセア　ＡＴＣＣ５３７３３の培養特
性 培養特性の試験のｔ；めに、プラノビスポラ・ロセア　
ＡＴＣＣ５３７３３を、シャーリング（Ｓｈｉｒｌｉｎ
ｇ）およびゴツトリーブ（Ｇｏｔｔｌｉｅｂ）により示
唆されている種々の標準媒体（シャーリングＥ、Ｂ。

およびゴツトリーブＤ、、１９６ロ一ストレブトマイセ
ス種の同定方法（Ｍｅｔｈｏｄ　ｆｏｒ　ｃｈａｒａｃ
ｔｅｒｉｚａｔｉｏｎ　ｏｆ　Ｓｔｒｅｐｔｏｍｙｃｅ
ｓ　５ｐｅｃｉｅｓ）−ザ魯ジャーナル・オブ・インタ
ーナショナル・システマティック・バタテリオロジイ（
Ｉｎｔ、Ｊ、　５ｙｓｔ、　Ｂａｃｔｅｒｉｏｌ）、１
６．３１３−３４０）上で、ワクスマン（Ｗａｋｓｍａ
ｎ）が推奨している５、６種の媒体（ワクスマン。

Ｓ、Ａ、、１９６１−放線菌症（Ｔｈｅ　ＡｃＬｉｎｏ
ｍｙｃｅｔｅｓ）、ザ・ウィリアムス・アンド・ウィル
キンス・カンパニイ、バルチモア、７巻、３２８−３３
４）を添加して、培養した。

必要な時には、色測定はメルフ（Ｍａｅｒｚ）およびボ
ール（Ｐａｕｌ）の方法（メルフＡ、およびＭ、レア・
ボール、１９５０、ア・ディクショナリイ・オブ・カラ
ー（Ａ　Ｄｉｃｔｉｏｎａｒｙ　ｏｆ　Ｃｏ１ｏｒ）、
２版、マツフグロラーヒル・ブック・カンバニイ・イン
コーホレーテッド、ニューヨーク）により行われた。

荷機体の種々の炭素原料の使用可能性は、シャーリング
およびゴツトリーブが記載している方法により研究され
た。

培養および生理学的特性並びに炭素原料利用性を、表１
、■、■中に報告する。

表Ｉ中の表示値は、２８°Ｃにおける２週間の培養後に
得られたものである。

オートミール寒天６％ ＩＳＰ　２　（酵母エキス 麦芽寒天） ノ５Ｐ３（オートミール 寒天２％） ＩｓＰ　４　（無機塩類澱粉 寒天） ＩＳＰ　ｎ　５　（グリセロール アスパラギン寒天） ＩＳＰ　６　（ペプトン酵母 エキス鉄寒天） 表ｆ 円滑な表面およびさんごピンク色の 大量の成長（２−）ｉ−１の、淡いピンク色の空気菌糸
体の大量の成長（１−Ａ−９）しわのある表面および淡
いピンク色の 大量の成長（２−Ｅ−９）、痕跡量の淡色の空気菌糸体 円滑な表面および淡いピンク色の中程 度の成長（２−Ｅ−８）、痕跡量のピンク色がかった白
色の空気菌糸体 円滑な表面およびさんごピンク色の 中程度の成長（２−Ｅ−１０） 円滑で平らな表面および淡いピンク色 の中程度の成長（２−Ａ−９）、白色の空気菌糸体の大
量の成長 わずかにしわのある淡いさんごピンク 色の中程度の成長（１−Ａ−１０） 表Ｉ（続き） 菌株プラノビスポラ・ロセアＡＴＣＣ５３７３３の培養
特性表１　（続き） 菌株プラノビスボラ・ロセアＡＴＣＣ５３７３３の培養
特性ｓＰ　７ 寒天 （チロシン寒天）円滑で薄い表面および淡いピンク色の
中程度の成長（１−Ａ−９）、淡いピンク色の空気菌糸
体の大量の成長（１−Ｃ−９）厚くしわのある表面およ
び淡いさんご ピンク色の大量の成長（１−Ａ−１０）、淡いピンク色
の空気菌糸体の中程度の成長 円滑で薄い表面の非常に少量の成長、 淡いピンク色の空気菌糸体の中程度の 成長 円滑で薄い表面の無色の中程度の成長、空気菌糸体の不
存在 円滑な表面およびピンク色がかった 淡い橙色の良好な成長 ヒツキーおよび アスパラギン寒天 グルコース チャベック・グルコース トランスナー寒天 栄養素寒天 べ不ツト寒天 リンゴ酸カルシウム スキムミルク寒天 卵白寒天 わずかにしわのある表面および淡い 琥珀ピンク色の中程度の成長（１０−Ａ−［））円滑で
平らな表面および無色の中程度 の成長 円滑な表面およびさんごピンク色の 中程度の成長（２−Ｆ−９） 円滑で薄い表面および無色ないし淡い ピンク色の劣悪な成長（２−Ａ−８） 成長なし デキストロース トリプトース寒天 ポテト寒天　　　　　　円滑な表面およびピンク色がか
った橙色の良好な成長 文字および数字は、ミルクおよびボール（上記参照）に
従い測定された色を指示している。

プラノビスポラ・ロセア　ＡＴＣＣ５３７３３の表■ 生理学的特性 表■ 澱粉加水分解 硫化水素生成 チロシン反応 カゼイン加水分解 リンゴ酸カルシウム消化 ゼラチン液化 牛乳凝固 牛乳ペプトン化 硝酸塩還元 陽性 陰性 陽性 弱陽性 陰性 弱陽性 陰性 陰性 陽性 アラヒノース キシロース リポース フルクトース ガラクトース グルコース ラムノース ラクトニス スクロース マルトース ラフィノース セルロース マンニトール サリシン イノシト−ル ＋ →・ ＋／− ＋ ＋ ＋ 十 ＋　　中程度の成長 ＋／−少量の成長 成長なし この試験用には媒体番号８を使用し、そして２８−３０
℃に８ける２週間の培養後に結果を評価しｔこ。

温度敏感性 最適成長温度は、２８°Ｃ〜３７°Ｃの範囲である。

１５°Ｃおよび５０°Ｃにおいては成長は観察されず、
２０℃においては適度の成長は観察されなかった。

走化特性 細胞壁分析： 細胞壁中に存在しているアミノ酸類の分析は、ベラカー
（Ｂｅｃｋｅｒ）他が記している方法（「加水分解され
た全細胞の濾紙クロマトグラフィーによるノカルジアお
よびストレプトマイセスの間の急速判別（Ｒａｐｉｄ　
ｄｉｆｆｅｒｅｎｔｉａｔｉｏｎ　ｂｅｔｗｅｅｎ　Ｎ
ｏｃａｒｄｉａａｎｄ　Ｓｔｒｅｐｔｏｍｙｃｅｓ　ｂ
ｙ　ｐａｐｅｒ　ｃｈｒｏｍａｔｏｇｒａｐｈｙ　ｏｒ
ｗｈｏｌｅ　ｃｅｌｌ　ｈｙｄｒｏｌｙｚａｔｅｄ）Ｊ
　、アプライド・マイクロバイオロジイ（Ａｐｐｌ、　
Ｍｉｃｒｏｂｉｏｌ、）、±２．　４２１−４２３．１
９６４）により行われた。

加水分解された全細胞の分析では、メソ−ジアミノピメ
リン酸の存在がわかった。

カワモト（Ｋａｗａｍｏｔｏ）他の方法（カワモト１１
、Ｏ，テツオ（Ｔｅｔｓｕｏ）、およびＮ、タカシ（Ｔ
ａｋａｓｈｉ）、［ミクロモノスポラ・オリヴオアステ
ロスボリア、ミクロモノスポラ・サガミエンシスおよび
関連有機体の細胞壁組成（Ｃｅｌｌ　ｗａｌｌ　ｃｏｍ
ｐｏｓｉｔｉｏｎ　ｏｆ　Ｍｉｃｒｏｍｏｎｏｓｐｏｒ
ａ　ｏｌｉｖｏａｓｔｅｒｏｓｐｏｒｉａ、　Ｍｉｃｒ
ｏｍｏｎｏｓｐ。

ｒａ　　ｓａｇａｍｉｅｎｓｉｓ　　ａｎｄ　　ｒｅｌ
ａｔｅｄ　　ｏｒｇａｎｉｓｍ）Ｊ　　、　ザ　・ジャ
ーナル・オブ・バタテリオロジイ（Ｊ、　ｏｆ　Ｂａａ
ｔｅｒｉｏｌ、）、１４６．５２７−５３４．１９８］
）に従い得られた純粋な細胞壁調合物の分析では、グリ
シンは見いだされなかった。

全細胞の糖パターン： 加水分解された全細胞中の糖含有量の分析は、レケヴ了
リアー（Ｌｅｃｈｅｖａｌｉｅｒ）Ｍ　、　Ｐ　、の方
法（［臨床的重要性のある好気性菌である放線菌の同定
（Ｉｄｅｎｔｉｆｉｃａｔｉｏｎ　ｏｆ　ａｅｒｏｂｅ
　ａｃｔｉｎｏｍｙｃｅｔｅｓ　ｏｆｃｌｉｎｉｃａｌ
　ｉｍｐｏｒｔａｎｃｅ）Ｊ　、ザージャーナル拳オブ
自うボラトリイ・クリニカル・メデイスン（Ｊ、　１．
ａｂ。

Ｃｌ１ｎ、　Ｍａｄ、）により、スタネック（Ｓｉａｎ
ｅｃｋ）　Ｊ　、　Ｌ　。

およびＧ、Ｄ、ロバーツ（Ｒｏｂｅｒｔｓ）が記してい
る薄層クロマトグラフィーセルロースシート（ｒＷＩＭ
クロマトグラフィーによる好気性の放線菌の簡単な同定
方法（Ｓｉｍｐｌｉｒｉｅｄ　ａｐｐｒｏａｃｈ　ｔｏ
　ｉｄｅｎｔｉｆｉｃａｔｉｏｎ　　ｏｆ　　ａｅｒｏ
ｂｉｃ　　ａｃｔｉｎｏｍｙｃｅｔｅｓ　　ｂｙ　　ｔ
ｈｉｎ　　ｌａｙｅｒｃｈｒｏｍａｔｏｇｒａｐｈｙ）
Ｊ　、アプライド・マイクロバイオロジイ（Ａｐｐｌ、
　Ｍｉｃｒｏｂｉｏｌ、）、２８．２２６−２３１．１
９７４）を使用して、下記の溶媒系：酢酸エチル−ピリ
ジン−水（ｔｏｏ：３５二２５容量／容量）を用いて、
実施された。

得られた結果は、マジュロース（３−０−メチル−Ｄ−
ガラクトース）の存在並びにアラビノースおよびガラク
トースの不存在を示していた。

菌株プラノビスポラ・ロセア　ＡＴＣＣ５３７３３の同
定 この菌株は、下記の形態学的および化学的特性ａ）細胞
壁（細胞壁化学型■）中のメソ−ジアミノピメリン酸の
存在およびグリシンの不存在ｂ）加水分解された全細胞
（全細胞糖パターンＢ）中のマジュロースの存在 Ｃ）空気菌糸体上での一対の運動性胞子を含有している
長い円筒状の胞子嚢の生成 ｄ）植物性菌糸体のピンク色。

上記で報告さねているプラノビスポラ・ロセアＡＴＣＣ
５３７３３の形態学的特性は、Ｊ、Ｅ。

チエマン（Ｔｈｉｅｍａｎ）他が［放線菌目（Ｔｈｅ　
Ａｃｔｉｎｏｍｙｃｅｔａｌｅｓ）Ｊ　、ザ・ジエナ・
インターナショナル・シンポジウム・オン・タクソン、
１９６８年９月、Ｈ，プラウサー赤ジェナ（Ｐｒａｕｓ
ｅｒ　、　Ｊｅｎａ）編集中に記載しているプラノビス
ポラ・ロセアの菌株のものと実質的に違いはない。それ
はアメリカン・タイプ・カルチャー・コレクションに受
は入れ番号２３８６６として受理され貯蔵されている。

この菌株に関しては抗生物質の製造は記載されていなか
った。

他の微生物の如く、ＧＥ　　２２７０生成用菌株の特性
は変位を受ける。例えば、菌株の人工的な変種および変
異体は紫外線、Ｘ線、高周波、放射線の如き種々の公知
の変異誘発物質、並びに亜硝酸、Ｎ−メチル−Ｎ′−二
トローＮ−二トロングアニジンなどの如き化学物質を用
いる処理により、得られる。プラノビスボラ属の種類に
属しておりそして抗生物質ＧＥ　　２２７０を生成する
全ての天然および人工的変種並びに変異体は本発明の目
的用には菌株プラノビスポラ・ロセア　ＡＴＣＣ５３７
３３と同等であると考えられ、そしてそれらは本発明の
範囲内に含まれる。

上記の如く、抗生物質ＧＥ　　２２７０は一般的には生
成用菌株の菌糸体中で主として見いだされるが、少量の
物質は発酵ブロス中でも見いだされる。

生成用菌株の菌糸体または発酵ブロスからの抗生物質Ｇ
Ｅ　　２２７０の回収は、例えば溶媒を用いる抽出、非
溶媒の添加もしくは溶液のｐＨ変化による沈澱、分配ク
ロマトグラフィー、逆相分配クロマトグラフィー、イオ
ン交換クロマトグラフィ、分子除外クロマトグラフィー
などの如きそれ自体は公知の技術に従い実施される。

本発明の抗生物質を菌糸体から回収するための好適な工
程は、濾過または遠心された菌糸体を水−混和性有機溶
媒を用いて抽出し、抽出物を濃縮し、そして粗製抗生物
質を任意に沈澱剤を添加してもよい沈澱により、水−不
混和性有機溶媒を用いる水性残渣の抽出により、または
吸着クロマトグラフィーおよびその後の吸収マトリック
スからの希望する生成物の溶離により、回収することか
らなっている。

本発明の抗生物質を発酵ブロスから回収するだめの好適
な工程は、水−混和性有機溶媒を用いて抽出し、その後
、濃縮された抽出物をできれば沈澱剤を添加する沈澱に
より、またはそれの水性残渣を水−不混和性有機溶媒を
用いて、抽出することからなっている。或は、発酵ブロ
スを吸着マトリックスと接触させ、その後、極性溶離混
合物を用いて溶離することもできる。このクロマトグラ
フィー工程は、ブロス自体に対してではなく発酵ブロス
から得られる濃縮抽出物に適用することもできる。

本出願で使用されている「水−混和性溶媒」という語は
、当接術でこの語に対して最近与えられている意味を有
するものであり、そしてそれは使用条件下で水とかなり
広い濃度範囲で混和性である溶媒を示している。

菌糸体物質からの本発明の抗生物質の抽出で使用できる
水−混和性有機溶媒の例は、低級アルカノール類、例え
ば（ｃ＋　　Ｃ３）アルカノール類、例えばメタノール
、エタノールおよびプロパツール；フェニル（Ｃ１Ｃ３
）アルカノール類、例、ｔばベンジルアルコール−低級
ケトン類、例えば（Ｃ１−Ｃ＊）ケトン類、例えばアセ
トンおよびエチルメチルケトン；環式エーテル類、例え
ばジオキサンおよびテトラヒドロ７ラン；グリコール類
およびそれらの部分的エーテル化生成物、例えばエチレ
ングリコール、プロピレングリコールおよびエチレング
リコールモノメチルエーテル：低級アミド類、例えばジ
メチルホルムアミドおよびジエチルホルムアミド、であ
る。

本出願で使用されている「水−不混和性溶媒」という語
は、当技術でこの語に対して最近与えられている意味を
有するものであり、そしてそれは使用条件下で意図する
用途に適しているかなり広い濃度範囲で水とわずかに混
和性であるかまたは実質的に不混和性である溶媒を示し
ている。

発酵ブロスからの本発明の抗生物質の抽出で使用できる
水−不混和性有機溶媒の例は、線状、分枝鎖状もしくは
環式であることのできる一般的な炭化水素溶媒類、例え
ばヘキサンまたはシクロヘキサン；ハロゲン化された炭
化水素類、例えばクロロホルム、四塩化炭素、’；クロ
ロエタン、フルオロブロモエタン、ジブロモエタン、ト
リクロロプロパン、クロロトリフルオロオクタンなど；
芳香族炭化水素類、例えばトルエン、キシレンなど；炭
素数が少なくとも４のエステル類、例えば酢酸エチル、
酢酸プロピル、酪酸エチルなど；線状、分枝鎖状もしく
は環式であることのできる炭素数が少なくとも４のアル
カノール類、例えばブタノール、■−ペンタノール、２
−ペンタノール、３−ペンタノール、ｌ−ヘキサノール
、２−ヘキサノール、３−ヘキサノール、３．３−ジメ
チル−１−ブタノール、４−メチル−１−ペンタノール
、３−メチル−１−ペンタノール、２２−ジメチル−３
−ペンタノール、２．４−ジメチル−３−ペンタノール
、４．４−’；メチルー２−ペンタノール、５−メチル
−２−ヘキサノール、ｌ−ヘプタツール、２−ヘプタツ
ール、５−メチル−１−ヘキサノール、２−エチル−１
−ヘキサノール、２−メチル−３−ヘキサノール、ｌ−
オクタノール、２−オクタ／−ル、シクロペンタノール
、２シクロペンチルエタノール、３−シクロペンチル−
１−プロパツール、シクロヘキサノール、シクロヘプタ
ツール、シクロオクタツール、２．３−ジメチルシクロ
ヘキサノール、４−エチルシクロヘキサノール、シクロ
オクチルメタノール、６−メチル−５−へブテン−２−
オール、■−ノナノール、２−ノナノール、ｌ−デカノ
ール、２−デカノールおよび３−デカノール：直鎖もし
くは分枝鎖状のアルキルエーテル類およびそれらの混合
物、例えば石油エーテル、エチルエーテル、プロピルエ
ーテル、ブチルエーテルなど；並びにそれらの混合物類
または官能性誘導体類である。

当技術で公知の如く、相分離は塩析により改良できる。

抽出後に実質的な量の有機溶媒を含有している水相を回
収する時には、水をそこから共沸蒸留することが簡便で
ある。一般的に、これには水との最少量の共沸混合物を
生成可能な溶媒を加え、その後、必要に応じて沈澱剤を
加えて希望する生成物を沈澱させることが必要である。

水との最少量の共沸混合物を生成可能な有機溶媒の代表
例は、ｎ−ブタノール、ベンゼン、トルエン、ブチルエ
ーテル、四塩化炭素、クロロホルム、シクロヘキサン、
２，５−ジメチル７ラン、ヘキサンおよびｍ−キシレン
であり、好適な溶媒はｎ−ブタノールである。

沈澱剤の例は、石油エーテル、低級アルキルエーテル類
、例エバエチルエーテル、プロピルエーテルおよびブチ
ルエーテル、並びに低級アルキルケトン類、例えばアセ
トン、である。

本発明の抗生物質の回収において簡便に使用できるクロ
マトグラフィーシステムの例は、ポリスチレンまたは混
合ポリスチレン−ジビニルベンゼン樹脂、例えばアンベ
ルライトＸＡＤ２もしくはＸＡＤ４　（ローム・アンド
・ハース）、５ｌ１２（ダウ・ケミカル・カンパニイ）
およびダイアイオンＨＰ２０（ミツビシ）、アクリル系
樹脂、例えばＸＡＤ７またはＸＡＤ８　（ローム・アン
ド・ハース）、一般に１〜５の範囲の孔容量（ｍＱ／　
ｇ　）、１−ｉｏｏの範囲の表面積（ｍ”／ｇ）、０．
１．５〜０．５０の範囲の見掛は密度Ｃｇ／ｒｎＱ）、
１００〜３０００の範囲の平均孔直径（オングストロー
ム単位）および粒子寸法の少なくとも４０％が３００マ
イクロメートルより小さいような粒子寸法分布を有する
ポリカプロラクタム類、ナイロン類および架橋結合され
たポリビニルピロリドン類の如きポリアミド類、例えば
ポリアミド−ＣＣ６、ポリアミド−３Ｃ６、ポリアミド
−ＣＣ６，６、ポリアミド−ＣＣ６ＡＣおよびポリアミ
ド−３Ｃ６ＡＣ（マチェレイーナゲル・アンド・カンパ
ニイ、西ドイツ）、ポリビニルピロリドン樹脂ＰＶＰ−
ＣＬ（アルドリッヒ・ヘミイ・ＧｍｂＨ・アンド・カン
バニイ・ＫＧ１西ドイツ）、ポリアミド樹脂ＰＡ４００
（Ｍ、ウールム・ＡＧ、西ドイツ）、並びに炭素である
。

ポリスチレンまたはアクリル系樹脂の場合に好適な溶離
剤は例えば上記で報告されている如き水混和性溶媒の極
性溶媒混合物であり、ポリアミド樹脂の場合に好適な溶
離剤は例えば上記のものの如き水−混和性溶媒の水性混
合物であるが、炭素用の好適な溶離剤は例えばアセトン
の如き低級ケトンまたは例えばメタノールの如き低級ア
ルコールで°ある。

抗生物質ＧＥ　　２２７０の粗製調合物の精製は公知の
技術のどれを用いて行ってもよいが、好適にはクロマト
グラフィー工程により行われる。

これらのクロマトグラフィー工程の例は回収段階に関し
て上記で報告されているものであり、そしてそれらには
ハロゲン化された炭化水素類、エーテル類、上記の型の
高級ケトン類などの溶媒の混合物からなる有機溶離相を
用いる例えばシリカゲル、アルミナ、７０リシルなどの
如き静止相上のクロマトグラフィー、または種々の官能
性誘導化作用を有しておりそして上記の型の水−混和性
溶媒の水性混合物を用いて溶離させるシラン化シリカゲ
ル上での逆相クロマトグラフィーが包含される。

簡便には、いわゆる立体除外クロマトグラフィー技術も
使用できて良好な精製結果を与える。特に、はとんどの
ヒドロキシル基がアルキル化されている多孔性が調節さ
れている架橋結合されたデキストラン類、例えばセファ
デックスＬＨ−２０（７アーマシア・ファイン・ケミカ
ルス、Ａｂ）、がこの技術でよく使用される。

当接術で一般的なように、例えば紫外線または微生物留
保段階を含んでいてもよい濾紙ディスクの如き生検査ま
たは敏感性微生物上での寒天拡散検査またはＴＬＣもし
くはＨＰＬＣ工程などの種々に分析工程により、製造並
びに回収および精製段階を監視することができる。

好適なＨＰＬＣ技術は、シラン化シリカゲル、例えば均
一な直径を有するＣ−１８アルキル基で官能化されたシ
リカゲル（例えば５マイクロメートル・ウルトラスフェ
アＯＤＳアルテックス、ベックマン・カンパニイ）の多
孔性球状粒子を有するカラム、Ｃ−１８アルキル基で官
能化されたシリカゲルであるプレーカラム（例えばＲＰ
１８ブラウンリー・ラボラトリイス）および水性の緩衝
溶液中の例えば上記のものの如き極性の水混和性溶媒の
線状勾配混合物である溶離剤を使用する逆相ＨＰＬＣに
より代表される。最も好適な溶離剤は溶離剤Ｂ中の４５
％〜７０％の線状勾配の溶離剤Ａにより代表され、ここ
で溶離剤Ｂはアセトニトリル／水性緩衝液の混合物、ｐ
Ｈ５−７、ｌＯ：９０であり、そして溶離剤Ａはアセト
ニトリル／水性緩衝液の混合物、ｐＨ５−７，７０：　
３０である。

抗生物質ＧＥ　　２２７０　　ファクターＡの生理化学
的特性： Ａ）添付図面の第１図に示されている下記の最大吸収を
示す、紫外線吸収スペクトル： ０、ＩＩＪ　ＨＣＱ　　　　　　　　　　　２４５（肩
）０．１Ｍ　ＫＯＨ２４５（肩） 燐酸塩緩衝液ｐＨ７，４２４５（肩） メタノール　　　　　　　　２４４（肩）Ｂ）添付図面
の第２図に示されている下記の最大吸収（ｃｍ−’）を
示す、赤外線スペクトル（ヌジョールマル）： ３７００−３０６０．３０６０−２６６０Ｃヌジａ　−
ｊＬ＝）、１６５０．１５９０−１４９０．１４９０−
１４２０（ヌジョール）、１３７５（ヌジョール）、１
３１０．１２４５．１２１０．１１６５．１０９０．　
＋０６０．１０２０゜９７０．９３０，８４０．８１０
，７５０．７２０（ヌジョール）、７ｏ。

このスペクトルの主要な官能基赤外線吸収帯は下記の如
く分布することができるニ ジ（ｃｍ”’ン　　　指定 ３６００−３１００　　　　ｙＮＨ１ｙＯＨ１６５０７
ミドＩ　（ＦＣ＝Ｏ） １５４５　　　　　　複素環式ＩＣ＝ＣオヨびｙＣ＝Ｎ
１５２５．１４９５　　　アミド１　（ＪＮＲ）１２５
０、】２０５　　　芳香族ＪＣＨ８７０複素環式γＣＨ ７４５，７００芳香族７ＣＨ Ｃ）添付図°面の第３図に示されているＤＭＳＯ−ｄＳ
（ヘキサジュートロジメチルスルホキシド）中で内部標
準（０，００ｐ　ｐｍ）　トｌ、テＴＭｓを使用して記
録された５００ＭＨｚにおける下記の信号群（ｐｐｍ）
を示す’Ｈ−ＮＭＲスペクトル：各信号に関するプロト
ン数はかっこ内に報告されている： ９．０２（１）、８．６８（１）、８．７０（１）、８
．５７（１）、８．５０（１）、８．４３（１）、８．
３７（Ｊ）、８．２６（１）、８．２５（１）、７．４
−７．２０（９）、６．９６（２）、６．０２（１）、
５．３０−５．１８（３）、５．０１（１）、４．９７
（２）、４．８０（］）、４．５６（１）、４．３０（
１）、４．２６（１）、３．９８（＋）、３．８１（１
）、３．７９（１）、３．３８（３）２．７２（ｉ）、
２．５８（３）、２．４８（３）、２．１６（１）、２
．１３（１）、１．９６（２）、１．８８（１）、１．
３４（１）、０．８７（３）、０．８４（３）Ｄ）添付
図面の第３図に報告されているＤＭＳＯ−ｄ、中で内部
標準（０，００ｐ　ｐｍ）としてＴＭＳを使用して記録
された１２５ＭＨｚにおける下記の信号群（ｐｐｍ）を
示す１３ｃ　−ＮＭＲスペクトル；Ｑは第四級炭素原子
またはＣ−Ｏ基を意味する： １７３．６９．Ｑ、　１７１　、ＩＯ，Ｑ、　１６９．
８３．Ｑ、　１６９．５１　、Ｑ。

１６８．４５．Ｑ、　１６８．２６．０％１６７．８４
．Ｑ、　１６５．６８．Ｑ。

１６４．７５．Ｑ、　１６１．４０．Ｑ、　１６１．２
３．０％１６０．４６．Ｑ。

１６０．２９．Ｑ１１５９．３５．０％１５３．４２．
ＱＸ１５０．３１．Ｑ。

１５０．１１，０％１４９．４１．Ｑ、　１４６．９３
．Ｑ、　１４４．７３．Ｑ。

１４３．７５．Ｑ、１４２．ｉｏ、Ｑ、１４１．７８．
Ｑ、１４１．３３．ＣＩ。

１４０．９７．ＱＳ１３９．５３．Ｑ、　１２８．６８
．ｃＨ，１２７，９９，２［ｃ旧、１２７．６７、Ｑ、
　１２７．６７、ＣＨ，１２６，８８，ＣＨ，１２６，
７６，２［Ｃ旧、１２３．１７．ｃＨ，１１８，６６、
ＣＨ，１１６，４２，ＣＨ，７３，８１，ＣＨ。

６９、旧、ｃｕｔ、６７．９７．ｃｏ、６７．３６．ｃ
Ｈｔ、６０．１２．ｃｏ。

５８．６３．ＣＩ（３，５８，２４，ＣＩ（，５５，４
１，ＣＩ（，４８，１５゜ＣＨ。

４７．０３．ＣＨ２，４１，１９，ＣＨ２，３７，６０
，ＣＨ２，３４，０６，ＣＨ。

２９．７６、ＣＨ２，２５，８５，ＣＨ３，２４，２８
，Ｃ：Ｈ！、１８．４９．ｃＨ３，１７，９８，ＣＨ３
，１１，９９，ＣＨ２Ｆ）下記の条件下で逆相ＨＰＬＣ
により分析された時の１４，９分の保持時間（Ｒ、）　
：カラム：ウルトラスフエア０ＤＳ（逆相シラン化シリ
カゲル：５マイクロメートル）アルテックス（ベックマ
ン）、４．６　ｍｍ（内径）Ｘ　２５０　ｍ プレー力ラム：ブラウンリー・ラボス・ＲＰ１８（オク
タデシルシランシリカゲル；５マイクロメートル） 溶離剤Ａ：ｐＨ７，０に調節されたアセトニトリル：１
ｇｍＭ燐酸ナトリウム　７０：３０（容量／容量）、 溶離剤Ｂ：ｐＨ７，０に調節されたアセトニトリル：１
８ｍＭ燐酸ナトリウム　１０：９０（容量／容量）、 溶離方式：溶離剤Ｂ中の溶離剤Ａの線状勾配、４５％〜
７０％、２０分 流速：Ｌ、８ｒｎＱ／分 紫外線検出器＋２５４ｎｍ 内ｓｉ準：クロラムフェニコール（Ｒ、＝　３．７分） Ｆ）試料をあらかじめ約１４０°Ｃにおいて不活性雰囲
気下で乾燥した後の、下記の組成を示す元素分析：炭素
、水素、窒素、硫黄 Ｇ）ジクｏｏメタンクメタノール　９：１（容量／容量
）、シリカゲル板（シリカゲル６０Ｆ２５いメルク・カ
ンパニイ）、可視；紫外線２５４ｎｍ、ヨウ素蒸気を伴
う黄色点を使用するクロマトグラフィーシステム、また
は最少量のデヴイス媒体上で枯草菌ＡＴＣＣ６６３３、
内ｓ標準：　クロロアンフェニコール（ＲｆＯ。

５６）を使用するバイオオートグラフィーにおける、０
，３７のＲ，値 Ｈ）ｍ／ｚ　　１２９０．３±０．１ダルトンにおける
プロトン化分子イオンの最低の質量同位体を示すＦＡＢ
−ＭＳ分析。クラトスＭＳ−５０二重焦点質量分析計を
用いて下記の実験条件下で分析すると、スペクトルの８
００　ｍ　／　ｚ質量単位（同位体ピークは数えない）
以上の全ての他のピークは分子イオンの２０％以下であ
った：　６Ｋｖにおけるキセノン急速原子衝撃；グリセ
ロールマトリックス；正のイオン化方式 ■）下記の実験条件下で下記の天然アミノ酸類ニゲリシ
ン、（Ｌ）ズロリンおよび（Ｌ）セリン：の存在を示す
塩酸加水分解酵素のアミノ酸分析： 試料を１％のフェノールを含有している６ＮＨ（ｌの存
在下で２０時間にわたり１０５℃で加水分解し、そして
次に下記の如き二段階で誘導化する： ａ）無水プロパツール中での２Ｍ　Ｈ（ｌを用いてカル
ボン酸官能基のｎ−プロピルエステル類の製造（９０°
Ｃ，１時間）、およびその後の窒素下での乾燥、 ｂ）室温における１時間にわたる無水ペンタフルオロプ
ロピオン酸／無水ジクロロメタン、ｌ／９（容量／容量
）を用いる遊離アミ７基からアミド類への転化、および
その後の窒素下での乾燥；このようにして得られた誘導
化された残渣をジクロロメタン中に溶解させ、そしてＩ
（Ｐ５９８５Ｂシステムを使用する下記の条件下でのＧ
Ｃ−ＭＳにより分析する：カラム：キラールｎ−プロピ
オニル−し−バリンｔ−ブチルアミドポリシロキサンで
コーティングされた融解シリカ毛管カラム（２５ｍＸ０
．２ｍｍ内径、Ｃ，Ｇ、Ｃ，アナリティック）、温度プ
ログラム：８０°Ｃで４分、次に４℃／分。

Ｌ）イオン化検査 メチルセロソルブ／水中でのＯ，ｌＮ　　ＨＣＱおよび
０．ＩＮ　　ＮａＯＨを用いる滴定によりイオン化可能
官能基は検出されない。弱塩基性官能基は非−水系媒体
（酢ａ）中での０．１ＮＨＣＱＯ、を用いる滴定により
現れない。

Ｍ）比旋光度 【アルファ１！０−プログラム１４０．８、無水エタノ
ール、約５ｇ／ｉ２の濃度。

本発明の化合物類の抗微生物剤活性を一連の試験管内で
の標準試験により示すことができる。

ラギルスに対するＭＩＣは、寒天希釈（接種物１０’Ｃ
ＦＵ）により測定された。他の微生物に対するＭＩＣは
、マイクロブロス希釈（接種物１０　’−１０’ＣＦ　
Ｕ／ｍＱ）　４’：−ヨ’）　測定サレｆ：。ウレアプ
ラズマ・ウレアリチクムに対する接種物は約１０４変色
単位／ｒｎＱであった。培養時間は、淋菌、カタル球菌
、インフルエンザ菌、Ｃ，ジフイシル、Ｐ、アクネスお
よびＢ、７ラギリス（４８時間）以外は、１８−２４時
間であった。カンジダ・アルビカンス（３０℃）以外の
全ての有機体は約３７°Ｃで培養した。嫌気性菌である
すおよびヱンフルエンザ菌は５％ＣＯ２雰囲気下で嫌気
性気体混合物中で培養した。使用した媒体は、イソーセ
ンシテスト・ブロス（オキソイド〕　（ブドウ球菌、ス
トレプトコッカス・フエカーリス、ストレブトコツカス
・フェシウム、大腸菌、シュートモロス（ジ７コ）（他
のストレプトコッカス類）、ＧＣ基剤ブロス（ジフコ）
＋１％イソヴイタレックスＢＢＬ（ｍ菌）、ブレーン拳
ハート・インフュージョン・ブロス（ジフコ）＋１％補
足剤Ｃ（ジ７コ）（インフルエンサ菌）、ミューラーー
ヒントン中プロス（ＢＢＬ）（カタル球菌）、ＡＣ媒体
（ジフコ）（ウェルシュ菌）、ウィルキンスチャルグレ
ン寒天（オキソイド）（他の嫌気性菌類）（Ｔ、Ｄ、ウ
ィルキンス（Ｗｉｌｋｉｎｓ）およびＳ、チャルグレン
（Ｃｈａｌｇｒｅｎ）、アンチマイクロバイアル・二一
ジエンツ・ケモセラビイ（ＡｎＬｉｍｉｃｒｏｂ、　Ａ
ｇ。

Ｃｈｅｍｏｔｈｅｒ、）、１０．９２６．１９７６）、
Ｕ、ウレアリチカム用の工ヴアンス・アンド・テイラー
ロビンソン・ブロス（ジフコ）および補足剤、酵母窒素
ブロス（ジ７コ）（カンジダ・アルビカンス）である。

数種の微生物に対する最少抑制濃度（ＭＩＣ、マイクロ
グラム／ｍＱ）を下表■に報告する。

表■ 菌株　　　　　　　　　　　　　　　Ｍ、１．Ｃ，（マ
イクログラム／ｍＱ）抗生物質ＧＥ　２２７０７アクタ
−Ａ 黄色ブドウ球菌Ｔｏｕｒ　Ｌｉ２Ｓ　　　　　　　　　
　　　０．２５黄色ブドウ球菌Ｔｏｕｒ　Ｌｉ２Ｓ（１
０’ｃｆｕ／ｍ１２）　　　　　　　０．２５黄色ブド
ウ球菌Ｔｏｕｒ　Ｌｉ２Ｓ　＋３０％牛血清　　　　　
　０．２５表皮ブドウ球菌Ｌ１４７　ＡＴＣＣ１２２２
８０，１３スタフイロコツカス・ヘモリチクスＬ６０２
　　　　　０．５スタフイロコツカス・ヘモリチクスＬ
６０２　　　　　１（１０’ｃｆｕ／＋＋ｏ２） 化膿連鎖球菌Ｃ２０３０，２５ 肺炎連鎖球菌ＵＣ４１０，１３ ストレプトコツカス・フエカーリスＡＴＣＣ７０８００
，＋３ストレプトコツカス・ミチスＬ７９６　　　　　
　　　０．１３ウエルシユ菌ＩＳＳ　３０５４３　　　
　　　　　　　　　０．０３クロストリジウム・ジフィ
シルＡＴＣＣ９６８９０，０３プロピオニバタテリウム
・アクネスＡＴＣＣ６９１９５０，００４バクテロイデ
ス・フラギルスＡＴＣＣ２３７４５２淋菌ｌ５Ｍ６８／
１２６　　　　　　　　　　　　　　　　　３２力タル
球菌ＡＴＣＣ８１７６１ インフルエンザ菌ＡＴＣＣ１，９４１８１２８ウレアプ
ラズマ・ウレアリチカムＬ　１４７９　　　　　３２大
腸菌ＳＫＦ　１２１４０　　　　　　　　　　　　　　
　　＞１２８プロテウス・ブルガリスＡＴＣＣ８８１＞
１２８緑膿菌ＡＴＣＣ１０１４５＞１２８ 肺炎棹菌Ｌ　１４２　　　　　　　　　　　　　　　　
＞１２８カンジダ・アルビカンスＳＫＦ　２２７０　　
　　　　　　＞１２８抗生物質ＧＥ　　２２７０の活性
は、エンテロコツカス類の臨床単離物に対する試験管内
実験でも確認された。

表Ｖにこれらの実験の結果を報告する。

表Ｖ 臨床的に単離されたコアグラーゼー陰性スパフィロコッ
カス類に対する試験管内試験の一部に関する結果を下表
■に報告する。

表■ ストレプトコッカス・ フエカーリス １５本 ０．０３−０．２５　０．０６ ０．２５ 本４個のヴアンコマイシン耐性菌を含むストレプトコッ
カス・ １５本 ０．０６−０．５　０．０６ ０．１３ 表皮ブドウ球菌 ＭＩＧ（マイクログラム／１ｆｆ） ＧＥ　２２７０ Ｌ４０８　　　　０．５ Ｌ４２３　　　　　０．２５ Ｌ４１０　　　　　０．５ Ｌ３９３　　　　　０．５ Ｌ４２５　　　　　０．２５ フェシウム 本５個のヴアンコマイシン耐性菌を含むスタフィロコッ
カス・ ヘモリチカス Ｌ３５３　　　　　　　０．２５ Ｌ６０２　　　　　　　１ Ｌ３８３　　　　　　　０．５ Ｌ６２６　　　　　　　０．５ ＬａＢ５　　　　　　　１ Ｌ６２０　　　　　　　１ 抗生物質ＧＥ　　２２７０の抗微生物分野活性には、下
表■に報告されている試験管内実験結果に示されている
ような嫌気性菌も包含される。

表■ 嫌気性菌に対する抗生物質ＧＥ　　２２７０の活性Ｐ、
アク洋スに対する活性も１１個の臨床的に単離された菌
株を含む試験管内実験で確認され、それらの結果を以下
に報告する。

Ｐ、アクネスに対する抗生物質ＧＥ　　２２７０の固判 ＭＩＣ（マイクロダラム／ｍ１２） ＧＥ　　２２７０ バクテロイデス・　　　　　Ｌ１２３６フラギリス　　
　　　　　　Ｌ１２３７ｌ０ＩＯ プロピオニバクテリウム・　Ｌ１０１４アクネス ０．００４ ０．０３ テリア剤活性 撹拌せずに３７°Ｃで培養されたｌｏｏｍｆ２のエルレ
ンマイヤー・フラスコ中のｌＯｍＱのトツドーヒュイッ
］・・ブロス中で時間−死滅曲線を製作した。

エンテロコツカス・フェーカリス菌株Ｌ１４９の対数的
に成長する培養物を１．４　Ｘ　Ｉ　Ｏ’ＣＦＵ／ｒｎ
Ｑで接種した。

対照用抗生物質（ティコプラニン、８ｍｇ／Ｑ）は感染
バクテリアの９９％を４８時間で死滅させたが、抗生物
質ＧＥ　　２２７０　　ファクターＡ（０，１３ｍｇ／
（２）は２時間以内にバクテリアの９９．８％を、そし
てこの投与量では４８時間以内にまたは４ｍｇ／Ｑでは
２４時間以内に９９゜９９％を死滅させた。

エンテロコツカス・フエーカリスに対するこの活性は、
グルコペプチド系抗生物質に耐性のある菌株にも及んだ
。

スマン寒天上で５％の兎プロスおよび０．１５％の溶解
した兎の血液を用いて試験した（接種物、約１０’ｃＦ
Ｕ）。抗生物質ＧＥ　　２２７０　　ファクターＡのＭ
ＩＣは２−４ｍｇ／４の範囲であり、Ｍｒｃｓ。は２　
ｍ　ｇ／Ｑであった。培養は嫌気性気体混合物中で３７
°Ｃにおいて４８時間行われＩこ　。

ハツカネズミ中の実験的敗血症 本発明の化合物類の抗微生物剤活性は、ノ＼ツカネズミ
中の実験的敗血症でも確認された。

８匹の雌雄両方のＣＤＩハッカ不ズミ群（チャールス・
リバー、平均体重１８−２２ｇ）に！魯ブドウ球菌ＡＴ
ＣＣ１９６３６を腹腔内感染させた。０．５１の５％の
細菌学的ムチン（ジフコ）中に懸濁させて抗微生物剤抗
原投与（１０６個の細胞／ハツカネズミ）を行った。５
％のジメチルホルムアミドおよび１０％のタレモアオル
’ＥＬ（ポリエトキシル化されたヒマシ油）を含有して
いる殺菌性水溶液中での感染直後に、試験化合物を腹腔
内に一回投与した。

７日目にスペアマン・アンド・ケルベルより各投与量毎
に生存動物の百分率からＥＤ．。を計算した。その値は
１．１３ｍｇ／ｋｇであった。

直中の実験的心内膜炎 体重が約２００−ｇの雄のＣＤ鼠（チャールス・リバー
）中で心内膜炎を誘発させた。ポリエチレンカテーテル
（ＰＰ．２５ポルテツクス）を大動脈弁を通して右頚動
脈を介して左心室に挿入し、モして絹結紮糸で固定した
。カテーテルの正確な位置は圧力変換器付きの記録用増
幅器（ヒューレット・バラカード・モデル７７８２Ａ）
を使用して調節した。２日後に、鼠にｉ’ｏ’ｃＦＵの
黄色ブドウ球菌を含有している０、５ｍＱの食塩水の静
脈注射により感染させた。処置は感染後１６時間に開始
されて５日間行われた。ポリプロピレングリコールニク
レモ７オルＥＬ：５％グルコース（ｌＯ：２０ニア０）
中で可溶化された抗生物質ＧＥ　　２２７０　　ファク
ターＡを１日２回２０ｍｇ／ｋｇの割合で静脈内投与し
た。生存している鼠を処置から６日目に殺し、そしてそ
れらの心臓を取り出した。治療の終了前に死んだ動物は
解剖し、そしてそれの心臓を取り出した。各心臓の重量
を計り、そして均質化した。均質物を連続的に希釈し、
そしてトッド−ヒユーウィツト寒天の上に置いて、バク
テリア負荷を測定した。血液中のバクテリア滴定は常に
心臓負荷より少なくとも１０００倍低いため、全心臓均
質物中の血液の存在は結果に影響を与えなかった。デー
タをシエ７フエの複数比較試験により統計学的に分析し
た。感染後４０時間以内に死んだ鼠は統計学的分析から
除外された。

この実験の結果を以下に報告する。

感染有機体林治療 １日の投与量 鼠の数 Ｌｏｇ　ｌ　ｏｃＦＩＩ／　ｇ （ｍｇ／ｋｇ） 心臓 方法 （平均上ＳＤ）＊＊＊ 黄色ブドウ　なし 球菌Ｌ１５２４　　賦形薬 ＧＥ　２２７０ ファクターＡ ９．４８±０．３３ 静脈内　　　１３　　９．６１旬、３１（２０Ｘ２）　
　　　　　　　　１２　　　　４．８９±１．２９＊静
脈内 本　　ｐ＜０．００１対対照用（未処理または賦形薬で
処理）４昧　　治療の開始時の心臓バクテリア負荷ニア
、３昨０．３２　（平均上５匹の動物に対する心臓のｌ
ｏｇ＋　ｏＣＦＵ／ｇのＳＤ）林　黄色ブドウ球菌ＬＩ
５２４に対する抗生物質ＧＥ　２２７０フアクターＡの
１．ｔｉｃ：　０．２５マイクログラム／ｍＱ急性毒性 ハツカネズミ中で実施された急性毒性試験によると、抗
生物質ＧＥ　　２２７０　　フｒクターＡに対するＬＤ
、。は静脈内投与ではｌｏｏｍｇ／ｋｇ以上であり、そ
して該動物種類中で腹腔内投与では５００ｍｇ／ｋｇ以
上であることが示された。

本発明の化合物類は、それらの性質を考慮すると、人間
または動物の処置用薬物の製造において活性成分として
使用することができる。

特に抗生物質ＧＥ　　２２７０　　ファクターＡは、主
としてグラム陽性バクテリア並びにダラム陽性およびダ
ラム陰性嫌気性菌類に対して活性である抗微生物剤であ
る。それはメチシリン、アミノグリコシド類またはグリ
コペプチド抗生物質類と交差耐性なしに黄色ブドウ球菌
による心内膜炎において非常に活性であることが見いだ
された。

従って、本発明の抗生物質の主な治療上の指定はそれに
敏感な微生物の存在に関連している感染症の処置である
。

「処置」という語は、予防、治療および治癒を含んでい
る。

この処置を受ける患者は、霊長類、特に人間、並びに他
の哺乳動物、例えば馬、牛、豚および羊、並びに家禽類
および一般的なベットを包含している罹患動物である。

本発明の化合物はそのままでまたは薬学的に許容可能な
担体と混合して投与でき、そして例えばペニシリン類、
セファロスポリン類、アミノグリコシド類およびグリコ
ペプチド類の如き他の抗微生物剤と一緒に投与すること
もできる。従って複合治療においては、最初に投与され
たものの治療効果が次の投与時に完全に消失していない
ような方法による活性化合物の連続的、同時および別個
の投与が包含される。

好適な薬学的調合物は、もとのままのまたは傷ついた皮
膚もしくは粘膜上への局所的投与に適している調合物に
より代表される。そのような調合物の例は、粉末、軟膏
、クリームおよびローションである。これらの調合物中
の賦形薬は、一般的な薬学的に許容可能な賦形薬、例え
ば油性軟膏基剤（例えばセチルエステルワックス、オレ
イン酸、オリーブ油、パラフィン、鯨ろう、澱粉グリセ
ライド）、吸収剤軟膏基剤（例えば無水ラノリン、親水
性鉱油）、乳化軟膏基剤（例えばセチルアルコール、グ
リセリルモノステアレート、ラノリン、ステアリン酸）
、水溶性軟膏基剤（例えばグリコールエーテル類、並び
にポリエチレングリコール類、ポリ（オキシ−１，２−
エタンジイル）−アルファーヒドローオメガーヒドロキ
シーオクタデカノエート、ポリソルベート類およびポリ
エチレングリコールモノ−ステアレート類などのそれら
の誘導体類）である。

これらの調合物は例えば防腐剤の如き他の公知の賦形薬
も含有でき、そしてそれらは例えばレミントンス・ファ
ーマシュチカル・サイエンセスＣＲｅｍｉｎｇｔｏｎ’
ｓ　Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ　５ｃｉｅｎｃｅｓ
）、１７版、１９８５、マッグ・パブリッシング・カン
パニイの如き参考文献中に報告されている当技術で公知
の方法で製造される。

本発明の化合物は、例えば上記の如き参考文献中に報告
されているそれ自体は当技術で公知の工程に従い非経口
的投与に適する調合物に調合することもできる。

例えば、本発明の化合物をポリプロピレングリコールま
たはジメチルアセトアミドの如き可溶化剤およびポリオ
キンエチレンソルビタンモノ−オレエートまたはポリエ
トキシル化されたヒマシ油の如き表面活性剤と共に注射
用の殺菌水中で調合することができる。

非経口的投与用の典型的な調合物の例は、１ｍＱの最終
的調合物用に１０ｍｇの抗生物質ＧＥ　　２２７０　フ
ァクター　ＡＳ　１０−２０％のポリオキシエチレンソ
ルビタン脂肪酸エステル、ポリオキシエチレンヒマシ油
誘導体またはポリオキシエチレン水素化ヒマシ油誘導体
であることのできる表面活性剤、並びに０−２０％の、
そして好適には１０−２０％の可溶化剤、例えばプロピ
レングリコール、ジメチルアセトアミド、ジメチルホル
ムアミド、ターシャリーーブチルーＮ−ヒドロキシカル
バメート、１．２−　１．３−もしくは１．４−ブタン
ジオール、エチルオレエート、テトラヒドロフル７リー
ルーポリエチレンーグリコール２００、ジメチルイソソ
ルバイト、ベンジルアルコールなどを含有している。好
適な可溶化剤はプロピレングリコールで７）６゜ ポリオキシエチレンソルビタン脂肪酸エステルは市販さ
れており、そしてそれらの一部は商品名「ツイーン」と
して販売されている。それらは「ポリソルベート類」と
いう非専売名でも知られている。それらの例は、ポリソ
ルベート２０．２１゜４０．６０．６１，６５．８０．
８１および８５である。本発明の調合物中で使用するの
に好適なものは、ポリソルベート８０（ソルビタンモノ
−９−オクタデカノエート、ポリ（オキシ−１，２−エ
タンジイル）誘導体類）である。

ポリオキシエチレンヒマシ油およびポリオキシエチレン
水素化ヒマシ油も市販されている。それらの一部は「ク
レモフオル」という商品名で販売されている。そのよう
な化合物類の例は、クレモフォルＥＬ（ポリエトキシル
化されたヒマシ油）、クレモフォルＲＨ４０（ポリエト
キシル化された水素化ヒマシ油）、タレモフオルＲＨ６
０（ＰＥＧ６０水素化ヒマシ油）またはエマルフォルＥ
　Ｌ−７１９（ポリオキシエチル化された植物油）とし
て知られているものである。

好適には、注射用調合物は７±０．５の範囲のｐＨを有
していなければならない。必要に応じて、調合物のｐＨ
を適当な緩衝剤を用いて調節することが推奨される。簡
便には、トリス（すなわちトリｊ＝ドロキシノチルアミ
ノメタン）または燐酸塩を緩衝剤として使用できる。

非経口的投与用の好適な調合物は下記の賦形薬を含有し
ている：クレモ７オル”ＥＬ（ポリオキシル３５ヒマシ
油ＵＳＰ／ＮＦ）２０％、プロピレングリコール５−２
０％、好適には１０−２０％。

一般的には、活性成分を有機溶媒中に溶解させ、次に撹
拌しながら表面活性成分を加え、そして最後に注射用の
殺菌水で希釈して希望する容量にすることにより、これ
らの調合物は製造できる。

例えば防腐剤または安定剤の如き他の賦形薬は、当技術
で公知の如くして加えることができる。

非経口的調合物の一例を以下に記す。

抗生物質ＧＥ　　２２７０　ファクターＡ　　　　　１
０　　　ｍｇＰＥＧ４’Ｏヒマシ油（タレモフォルＥＬ
）　　　　　０．２　　ｍＱプロピレングリコール　　
　　　　　　　　　　　０．２　　ｍＱパラヒドロキシ
安息香酸メチル　　　　　　　　　０．５　　ｍｇバラ
ヒドロキシ安息香酸プロピル　　　　　　　　０．０５
ｍｇ注射用の水　　　　　　　　　　　　１ｍ（２にす
るのに充分な量。

また、活性成分を使用前に再調合するだめの親液性化粉
末状に製造することもできる。

活性成分および例えばポリエチレングリコール６０水素
化ヒマシ油の如き表面活性剤を含有している混合物から
出発して親液性化物質を製造する場合には、簡便には有
機溶媒を添加せず水性媒体だけを用いてそれを再調合す
ることができる。

任意に、必要に応じて一般的な親液性化助剤を加えて粉
末状の親液性化物質を得ることもできる。

好適には、本発明の抗生物質に敏感な微生物が関与する
感染の処置においてはこれらの全ての調合物は静脈内投
与用に使用される。

胃腸管中の嫌気性菌の存在による偽膜大腸炎または他の
病気の処置においては、有効投与量の本発明の化合物を
例えばカプセル、錠剤または水性懸濁液の如き適当な薬
学的形状で経口的に投与することかできる。

活性成分の投与量は、患者の型、年令および症状、投与
用に選択された個々の活性成分および調合物、並びに投
与計画などの多くの要素に依存している。

一般的に、抗微生物剤有効投与量は一回の単位投与形状
で使用される。

例えば−日に２〜６回の如き繰り返し適用／投与が一般
゛的に好適である。有効投与量は一般的に０．５−５０
ｍｇ／ｋｇの体重７日である。

好適な局所用調合物は、１％〜ｌＯ％の本発明の化合物
を含有している軟膏である。

いずれにしても、処方する医師が当該症状の当該患者に
対する最適投与量を決めることができるであろう。

人間および動物の治療における薬物としての使用の他に
、本発明の化合物は動物の成長促進剤としても使用でき
る。

この目的のためには、本発明の化合物を適当な飼料中に
いれて経口的に投与する。正確な使用濃度は、通常量の
飼料が消費される時に成長促進有効量の活性剤を供給す
るのに必要な濃度である。

本発明の活性化合物の飼料への添加は好適には、有効量
の活性化合物を含有している適当な飼料予備混合物を製
造しそしてこの予備混合物を完全配合飼料中に加えるこ
とにより、行われる。

一方、活性成分を含有している中間濃縮物または飼料補
足剤を飼料中に配合することもできる。

そのような予備混合物および完全配合飼料の製造および
投与方法は参考文献中に記載されている（例えば「アプ
ライド・アニマル・ヌートリッション（Ａｐｐｌｉｅｄ
　Ａｎｉｍａｌ　Ｎｕｔｒｉｔｉｏｎ）Ｊ　、Ｗ、Ｈ、
フリートマン・アンド・カンパニイ、サンフランシスコ
、米国、１９６９または「ライブストック・フィーズ島
アンド・フィーディング（Ｌｉｖｅｓｔｏｃｋ　Ｆｅｅ
ｄｓａｎｄ　Ｆｅｅｄｉｎｇ）Ｊ　、０−アンド−Ｂ−
ブックス、コルヴアリス、オレゴン、米国、１９７７）
。

図面の簡単な記載 第１図は、抗生物質ＧＦ−２２７０ファクターＡの紫外
線スペクトルを報告している。記号および使用した溶媒
の間の照応を以下に記す：一一−−は、ＣＨ３０Ｈ中で
の検査を示す。

・　　は、Ｏ，ｌＮ　　ＨＣｌ２中での検査を示す。

■　　は、ｐＨ７，４の燐酸塩緩衝液中での検査を示す
。

ム　　は、Ｏ，ｌＮ　　ＫＯＨ中での検査を示す。

第２図は、抗生物質ＧＥ　　２２７０　　ファクタＡの
赤外線吸収スペクトル（ヌジョールマル）を表わしてい
る。

第３図は、ＤＭＳＯ−ｄ、中で５００ＭＨｚにおいて測
定された抗生物質ＧＥ　　２２７０　　ファクターＡの
’Ｈ−ＮＭＲを表わしている。

第４図は、ＤＭＳＯ−ｄ、中で１２５ＭＨｚにおいて測
定された抗生物質ＧＥ　　２２７０　　ファクターＡの
１３Ｃ−ＮＭＲを表わしている。

下記の実施例は本発明をさらに説明するだめのものであ
り、そして本発明を何ら限定しようとするものではない
。

実施例１ 抗生物質ＧＥ　　２２７０の製造 プラノビスポラ・ロセア　ＡＴＣＣ５３７３３の培養物
をオートミール寒天斜面上で２８−３０℃において２週
間にわたり成長させ、そして次に１００ｒｉ（２の下記
の組成の種媒体を含有している５００ｍＱのフラスコに
接種するために使用した：澱粉　　　　　　　　　　　
　　　２０　ｇ／（１ポリペプトン　　　　　　　　　
　５　ｇ／（２酵母エキス　　　　　　　　　　　３　
ｇＩＱ牛肉エキス　　　　　　　　　　　２　ｇＩＱ大
豆ミール　　　　　　　　　　　２　ｇＩＱ炭酸カルシ
ウム　　　　　　　　　１　ｇ／Ｑ蒸留水　　　　　　
　１００１にするのに充分な量（殺菌前にｐＨ７，０に
調節されている）。

フラスコを回転振盪器（２０Ｏｒｐｍ）上で２８−３０
°Ｃにおいて９２時間培養した。次に得られた培養物を
使用して４リツトルの同じ媒体を含有しているジャー発
酵器に接種し、そして培養物を２８−３０°Ｃにおいて
撹拌（約９０Ｏｒｐｍ）および通気（毎分約１標準リツ
トルの空気／容量）しながら４８時間培養した。

得られたブロスを５０リツトルの下記の製造用媒体を含
有している発酵器に移し、そして２８−３０°Ｃにおい
て約７２時間培養した：澱粉　　　　　　　　　　　　
　　２０　　ｇＩＱペプトン　　　　　　　　　　　　
２．５　ｇＩＱ加水分解去れたカゼイン　　　　　２．
５　ｇＩＱ酵母エキス　　　　　　　　　　　３　　ｇ
／Ｑ牛肉エキス　　　　　　　　　　　２　　ｇＩＱ大
豆ミール　　　　　　　　　　　２　　ｇＩＱ炭酸カル
シウム　　　　　　　　　ｌ　　ｇ／Ｑ蒸留水　　　　
　　１００　ｍＱにするのに充分な量（殺菌前にｐＨ７
，０に調節されている）。

最少量のディヴイス媒体上で成長した枯草菌ＡＴＣＣ５
３７３３を使用する濾紙ディスク寒天評価試験により、
抗生物質の製造を監視した。

３５°Ｃにおける一夜の培養後に、抑制部分を評価しｊ
こ。

実施例２ 抗生物質ＧＥ　　２２７０の回収 上記で得られた発酵物質（５０リツトル）を採取しそし
てフィルター助剤（クラルセル）の存在下で濾過にかけ
た。

少量は濾液から回収することもできたが、抗生物質ＧＥ
　　２２７０は主として菌糸体中で見いだされた。

ａ）濾液を約ｐＨ７，０に調節し、そして酢酸エチル（
５０リツトル）で抽出した。有機相を遠心により分離し
、そして減圧下で少量に濃縮した。

得られた油状残渣を次に石油エーテルで処理して、粗製
の抗生物質ＧＥ　　２２７０を沈澱させ、それを濾過に
より集め、そして乾燥した。４１５ｍｇの粗製抗生物質
ＧＥ　　２２７０複合体が得られた。

ｂ）菌糸体を２０リツトルのメタノールで２回抽出し、
そして−緒にした抽出物を減圧下で濃縮して水性残渣を
与え、それを酢酸エチルで２回抽出した。石油エーテル
の添加により、粗製の抗生物質ＧＥ　　２２７０（６，
０６ｇ）を濃縮された有機相から沈澱させた。

実施例３ 抗生物質ＧＥ　　２２７０　　ファクターＡの精製上記
の工程に従い菌糸体から得られた粗製物（３ｇ）をテト
ラヒドロフラン中に溶解させ、そして減圧下でシリカゲ
ル（２３０−４００メツシユ）の存在下で濃縮した。得
られた固体残渣を集め、そして塩化メチレン（ＣＨｔ　
ＣＱｚ）中で製造された３００ｇのシリカゲル（２３０
−４００メツシユ）を含有しているクロマトグラフィー
カラムに適用した。カラムを最初は塩化メチレン（２リ
ツトル）でそして次に１．５リツトルの下記の比の塩化
メチレンとメタノールの混合物で展色させた：９８／２
．９６／４．９４／６．９２／８．９０／１０８よび８
８／１２（容量／容量）。

留分類を集め、枯草菌に対してＴＬＣ％ＨＰＬＣにより
または微生物学的に分析し、そしてそれらの抗生物質含
有量に従い貯蔵した。

純粋な抗生物質ＧＥ　　２２７０　　ファクターＡを含
有している貯蔵留分類（ＨＰＬＣ保持時間＝１４．９分
、上記の物理化学的データのＥ点を参照のこと）を減圧
下で濃縮して油状残渣を与え、それをテトラヒドロフラ
ンを用いて可溶化した。

石油エーテルの添加により、この溶液から抗生物質ＧＥ
　　２２７０　　ファクター　Ａ（６００ｍｇ）が沈澱
した。

実施例４ 上記のクロマトグラフィーシステムにより分離されたが
それを不純物形で含有している（ＨＰＬＣ）別の留分類
から、別の部分の抗生物質ＧＥ２２７０　ファクターＡ
が得られた。これらの留分類す上記の如く貯蔵し、濃縮
しそして処理して、固体を得た。この抗生物質ＧＥ　　
２２７０　　ファクターＡの粗製調合物を下記の工程に
従いＨＰＬＣにより精製した。

この沈澱の一部（６ｍｇ）をアセトニトリル：水、ｌ：
１　（容量／容量）中に溶解させ、モしてシラン化シリ
カゲルカラム（リクロソルブＲＰ１８．７マイクロメー
ドル、２５０ＸＩＯｍｍ、メルク、ダルムスタクド）を
備えたＨＰＬＣクロマトグラフィーシステム中に注入し
た。

Ｂ中の５０％〜８５％のＡである溶液ＡとＢとの線状勾
配混合物を用いて２０分間にわたり約４ｍ（１７分の流
速で溶離を行った。溶液ＡはｐＨ６に調節されているア
セトニトリルと１８ｍＭ燐酸ナトリウム緩衝液との７０
／３０（容ｆｆｃ／容量）混合物であり、溶液ＢはｐＨ
６に調節されているアセトニトリルと１８ｍＭ燐酸ナト
リウム緩衝液との１０／９０（容量／容量）混合物であ
った。

カラムをパーキン・エルマーＬＣ８５ｇ外線検出器に３
３０ｎｍのところで連結した。均質な内容物を有′する
１１回の連続的クロマトグラフィー実験の留分類を一緒
にし、そして減圧下で濃縮してアセトニトリルを除去し
、それにより抗生物質ＧＥ　　２２７０″フアクターＡ
を含有している分離された残存溶液を得た。これらの溶
液を等容量の酢酸エチルで２回抽出し、そして石油エー
テルの添加による濃縮有機相からの沈澱により抗生物質
が得られた。濾過により回収しそして乾燥すると、２７
ｍｇの抗生物質ＧＥ　　２２７０　　ファクターＡが得
られた。

本発明の主なる特徴および態様は以下のとおりである。

１、下記の特性を有する、非−塩形の抗生物質ＧＥ　　
２２７０　７アクター　Ａ： Ａ）下記の最大吸収を示す、紫外線吸収スペクトル： ０．１Ｍ　ＨＣＱ　　　　　　　　　　　　　　　２４
５（屑）０．１Ｍ　ＫＯＨ２４５（肩） 燐酸塩緩衝液ｐＨ７，４２４５（肩） メタノール　　　　　　　　　２４４（肩）Ｂ）下記の
最大吸収（ｃｍ−りを示す、赤外線スペクトル（ヌジョ
ールマル）： ３７００−３０６０．３０６０−２６６０（ヌジョール
）、１６５０．１５９〇−１４９０，１４９０−１４２
０（ヌジコール）、１３７５（ヌジｄ−ル）、１３１０
．１２４５．１２１０．１１６５．１０９０．１０６０
．１０２０．９７０．９３０．８４０．８１０，７５０
，７２０（ヌジョール）、７００このスペクトルの主要
な官能基赤外線吸収帯は下記の如く分布することができ
るニ ジ（ｃｍ−’　）　　　　指定 ３６００−３１００　　　　　＊ＮＨ，ＦＯＨ１６５０
アミドＩ　（ｒｃ＝ｏ） １５４５　　　　　　複素環式Ｆ　Ｃ＝ＣおよびｙＣ＝
Ｎ１５２５、Ｉ４９５　　　アミドｎ　（ＪＮＨ）Ｉ２
５０．１２０５　　　芳香族１ｃＨ８７０複素環式γＣ
Ｈ ７４５，７００芳香族γＣＨ Ｃ）ＤＭＳＯ−ｄ、（ヘキサシュートロジメチルスルホ
キシド）中で内部標準（０，００ｐ　ｐｍ）としてＴＭ
Ｓを使用して記録された５００ＭＨｚにおける下記の信
号群（ｐｐｍ）を示す’Ｈ−ＮＭＲスペクトル：各信号
に関するプロトン数はかっこ内に報告されている：９．
０２（１）、８．６８（１）、８．７０（１）、８．５
７（１）、８．５０（１）、８．４３（１）、８．３７
（１）、８．２６（１）、８．２５（１）、７．４−７
．２０（９）、６．９６（２）、６．０２（１）、５．
３０−５．１８（３）、５．０１（１）、４．９７（２
）、４．８０（１）、４．５６（１）、４．３０（１）
、４．２６（１）、３．９８（１）、３．８１（１）、
３．７９（１）、３．３８（３）２．７２（１）、２．
５８（３）、２．４８（３）、２．１６（１）、２．１
３（１）、１．９６（２）、１．８８（１）、１．３４
（１）、０．８７（３）、０．８４（３）Ｄ）ＤＭＳＯ
−ｄＩ中で内部標準（０，ＯＯｐｐｍ）としてＴＭＳを
使用して記録された１２５ＭＨｚにおける下記の信号群
（ｐｐｍ）を示す１３Ｃ−ＮＭＲスペクトル：Ｑは第四
級炭素原子またはＣ−Ｏ基を意味する： １７３．６９．Ｑ、　１７１．１０．Ｑ、１６９．８３
．ｃ＋、　１６９．５１．Ｑ。

１６８．４５．Ｑ、　！６８．２６．Ｑ、　１６７．８
４．Ｑ、　１６５．６８．Ｑ。

１６４．７５，０Ｘ１６１．４０．Ｑ、　１６１．２３
．Ｑ、１６０．４６．Ｑ。

１６０．２９　、　Ｑ、　１５９．３５　、　Ｑ、　１
５３．４２　、　Ｑ、１５０．３＋、０゜１５０．１１
．Ｑ、　１４９．４＋、　、Ｑ、　１４６．９３．Ｑ、
　１４４．７３．Ｑ。

１４３．７５．Ｑ、ｌ４２．ｌＯ，Ｑ、１４１．７８，
０Ｓ１４１．３３．ＣＨ。

１４０．９７．Ｑ、　１３９．５３．ｏ、　１２８−６
８．ＣＨ，１２７，９９，２［ｃＨ］、１２７．６７、
Ｑ、　ｌ２７．６７、ＣＩ、１２６．８８．ｃ、Ｈ１１
２６，７６，２［Ｃ旧、１２３．１７．ＣＨ，ｌ１８．
６６、ｃＨ，１１６，４２，ｃＨ，７３，８１，ＣＨ。

６９．４１．ＣＨ，，６７，９７，ＣＨ，６７，３６，
ＣＨ，，６０，１２，ＣＨ。

５８．６３．ＣＨ３，５８，２４，ＣＨ，５５，４１，
ＣＨ，４８，１５，ＣＨ。

４７．０３．ＣＨ２，４１，１９，ＣＨ２，３７，６０
，ＣＨ２，３４，０６，ＣＨ。

２９．７６、ＣＨ２，２５，８５，ＣＨ３，２４，２８
，ＣＨ２，１８，４９，ＣＨ３，１７，９８，ＣＨ３、
＋１．９９．ＣＨ。

Ｅ）下記の条件下で逆相ＨＰＬＣにより分析された時の
１４．９分の保持時間（Ｒ、）　：カラム：ウルトラス
７エア０ＤＳ（逆相シラン化シリカゲル；５マイクロメ
ートル）アルテックス（ベックマン）、４．６　ｍｍ（
内径）Ｘ　２５０　ｍ プレー力ラム：ブラウンリー・ラボス・ＲＰ１８（オク
タデシルシランシリカゲル；５マイクロメートル） 溶離剤Ａ：ｐＨ７，０に調節されたアセトニトリル：１
８ｍＭ燐酸ナトリウム　７０：３０（容量／容ｆ）、 溶離剤Ｂ：ｐＨ７，０に調節されたアセトニトリル：１
８ｍＭ＃Ｑ酸ナトリウム　１０：９０（容量／容量）、 溶離方式：溶離剤Ｂ中の溶離剤Ａの線状勾配、４５％〜
７０％、２０分 流速：１．８ｍＬ／分 紫外線検出器：２５４ｎｍ 内ｓｉ準：　クロラムフェニコール（Ｒ，−３，７分） Ｆ）試料をあらかじめ約１４０　’Ｃ！において不活性
雰囲気下で乾燥した後の、下記の組成を示す元素分析：
炭素、水素、窒素、硫黄 Ｇ）ジクロロメタン：メタノール　９：１（容量／容量
）、シリカゲル板（シリカゲル６０Ｆ□いメルク・カン
パニイ）、可視；紫外線２５４ｎｍ、ヨウ素蒸気を伴う
黄色点を使用するクロマトグラフィーシステム、または
最少量のデヴイス媒体上で枯草菌ＡＴＣＣ６６３３、内
ｓｔｐ準：クロロラムフェニコール（Ｒｆｏ。

５６）を使用するバイオオートグラフィーにおける、０
．３７のＲ９値 Ｈ）ｍ／ｚ　　１２９０．３±ｏ、ｉダルトンにおける
プロトン化分子イオンの最低の質量同位体を示すＦＡＢ
−ＭＳ分析。クラトスＭＳ−５０二重焦点質量分析計を
用いて下記の実験条件下Ｓ分析すると、スペクトルの８
００ｒｎ／ｚ質量単位（同位体ピークは数えない）以上
の全ての他のピークは分子イオンの２０％以下であった
：　６Ｋｖにおけるキセノン急速原子衝撃；グリセロー
ルマトリックス；正のイオン化方式 ■）下記の実験条件下で下記の天然アミノ酸類ニゲリシ
ン、（Ｌ）プロリンおよび（Ｌ）セリン：の存在を示す
塩酸加水分解酵素のアミノ酸分析： 試料を１％のフェノールを含有している６ＮＨＣＱの存
在下で２０時間にわたり１０５℃で加水分解し、そして
次に下記の如き二段階で誘導化する二 ａ）無水プロパツール中での２Ｍ　Ｈ（ｌを用いてカル
ボン酸官能基のｎ−プロピルエステル類の製造（９０°
Ｃ％　１時間）、およびその後の窒素下での乾燥、 ｂ）室温における１時間にわたる無水ペンタフルオロプ
ロピオン酸／無水ジクロロメタン、ｌ／９（容量／容量
）を用いる遊離アミノ基からアミド類への転化、および
その後の窒素下での乾燥；このようにして得られた誘導
化された残渣をジクロロメタン中に溶解させ、そして）
ＩＰ５９８５Ｂシステムを使用する下記の条件下でのＧ
Ｃ−ＭＳにより分析する：カラム：キラールｎ−プロピ
オニル−Ｌ−バリンｔ−ブチルアミドポリシロキサンで
コーティングされた融解シリカ毛管カラム（２５ｍＸ　
０．２　ｍｍ内径、Ｃ，Ｇ、Ｃ，アナリティック）、温
度プログラム：８０’Ｏで４分、次に４℃／分。

Ｌ）イオン化検査 メチルセロソルブ／水中での０．ｌＮ　　ＨＣｆｆおよ
びＯ，ｌＮ　　ＮａＯＨを用いる滴定によりイオン化可
能官能基は検出されない。弱塩基性官能基は非−水系媒
体（酢酸）中での０１ＮＨＣｆｆＯ，を用いる滴定によ
り現れない。

Ｍ）比旋光度 ［ア／Ｌ／７７］”−プロゲラＡｌ４０．８、無水エタ
ノール、約５ｇ／Ｑの濃度。

２、プラノヒスポラ・ロセア　ＡＴＣＣ５３７３３の菌
糸体またはそれのＧＥ　　２２７０生成用変種もしくは
変異体からの回収時に得られる抗生物質である抗生物質
ＧＥ　　２２７０複合体。

３、プラノビスポラ・ロセアＡＴＣＣ５３７３３の菌糸
体またはそれのＧＥ　　２２７０生成用変種もしくは変
異体を浸水好気性条件下で炭素、窒素および無機塩類の
同化可能な原料の存在下で培養し、そして生成した抗生
物質をそこから回収することからなる、上記１または２
の化合物の製造方法。

４、上記ｌまたは２の化合物を薬学的に許容可能な担体
と混合して含有している、薬学的組成物。

５、薬品として使用するための、上記ｌまたは２の化合
物。

６、抗生物質として使用するための薬物を製造するため
の、上記ｌまたは２の化合物の使用。

７、プラノビスポラ・ロセア　ＡＴＣＣ５３７３３゜ ８、好気性条件下で炭素、窒素および無機塩類の同化可
能な原料の存在下で抗生物質ＧＥ　　２２７０　ファク
ター　Ａを製造可能な、プラノビスポラ・ロセア　ＡＴ
ＣＣ５３７３３、または、プラノビスポラ・ロセア　Ａ
ＴＣＣ２３８６６以外の、それのＧＥ　　２２７０生戊
用変種もしくは変異体の生物学的に純粋な培養物。

【図面の簡単な説明】

第１図は、抗生物質ＧＥ　　２２７０　　ファクターＡ
の紫外線スペクトルを示している。 第２図は、抗生物質ＧＥ　　２２７０　　ファクターＡ
の赤外線吸収スペクトル（ヌジョールマル）を表わして
いる。 第３図は、ＤＭＳＯ−ｄａ中で５００ＭＨｚにおいて測
定された抗生物質ＧＥ　　２２７０　　ファクター　Ａ
のＩＨ−ＮＭＲを表わしている。 第４図は、ＤＭＳＯ−ｄ、中で１２５ＭＨｚにおいて測
定された抗生物質ＧＥ　　２２７０　　ファクター　Ａ
の１３Ｃ−ＮＭＲを表わしている。

Claims (1)

1. 【特許請求の範囲】 １、下記の特性を有する非塩形の抗生物質ＧＥ２２７０
   ファクターＡ： Ａ）下記最大吸収を示す紫外線吸収スペクトル：▲数式
   、化学式、表等があります▼ Ｂ）下記の最大吸収（ｃｍ＾−＾１）を示す赤外線スペ
   クトル（ヌジョール）： ３７００−３０６０、３０６０−２６６０（ヌジョール
   ）、１６５０、１５９０−１４９０、１４９０−１４２
   ０（ヌジョール）、１３７５（ヌジョール）、１３１０
   、１２４５、１２１０、１１６５、１０９０、１０６０
   、１０２０、９７０、９３０、８４０、８１０、７５０
   、７２０（ヌジョール）、７００このスペクトルの主な
   官能基赤外線吸収帯は下記の如く分布することができる
   ： ▲数式、化学式、表等があります▼ Ｃ）ＤＭＳＯ−ｄ＿６（ヘキサジュートロジメチルスル
   ホキシド）中で内部標準としてＴＭＳ（０．００ｐｐｍ
   ）を使用して記録された５００ ＭＨｚにおける下記の信号群（ｐｐｍ）を示す＾１Ｈ−
   ＮＭＲスペクトル；各信号に関するプロトン数はかっこ
   内に記載されている： ９．０２（１）、８．６８（１）、８．７０（１）、８
   ．５７（１）、８．５０（１）、８．４３（１）、８．
   ３７（１）、８．２６（１）、８．２５（１）、７．４
   −７．２０（９）、６．９６（２）、６．０２（１）、
   ５．３０−５．１８（３）、５．０１（１）、４．９７
   （２）、４．８０（１）、４．５６（１）、４．３０（
   １）、４．２６（１）、３．９８（１）、３．８１（１
   ）、３．７９（１）、３．３８（３）２．７２（１）、
   ２．５８（３）、２．４８（３）、２．１６（１）、２
   ．１３（１）、１．９６（２）、１．８８（１）、１．
   ３４（１）、０．８７（３）、０．８４（３）Ｄ）ＤＭ
   ＳＯ−ｄ＿６中で内部標準としてＴＭＳ（０．００ｐｐ
   ｍ）を使用して記録された１２５ＭＨｚにおける下記の
   信号群（ｐｐｍ）を示す＾１＾３Ｃ−ＮＭＲスペクトル
   ；Ｑは第四級炭素原子またはＣ＝Ｏ基を意味する： １７３．６９、Ｑ；１７１．１０、Ｑ；１６９．８３、
   Ｑ；１６９．５１、Ｑ；１６８．４５、Ｑ；１６８．２
   ６、Ｑ；１６７．８４、Ｑ；１６５．６８、Ｑ；１６４
   ．７５、Ｑ；１６１．４０、Ｑ；１６１．２３、Ｑ；１
   ６０．４６、Ｑ；１６０．２９、Ｑ；１５９．３５、Ｑ
   ；１５３．４２、Ｑ；１５０．３１、Ｑ；１５０．１１
   、Ｑ；１４９．４１、Ｑ；１４６．９３、Ｑ；１４４．
   ７３、Ｑ；１４３．７５、Ｑ；１４２．１０、Ｑ；１４
   １．７８、Ｑ；１４１．３３、ＣＨ；１４０．９７、Ｑ
   ；１３９．５３、Ｑ；１２８．６８、ＣＨ；１２７．９
   ９、２［ＣＨ］；１２７．６７、Ｑ；１２７．６７、Ｃ
   Ｈ；１２６．８８、ＣＨ；１２６．７６、２［ＣＨ］；
   １２３．１７、ＣＨ；１１８．６６、ＣＨ；１１６．４
   ２、ＣＨ；７３．８１、ＣＨ；６９．４１、ＣＨ＿２；
   ６７．９７、ＣＨ；６７．３６、ＣＨ＿２；６０．１２
   、ＣＨ；５８．６３、ＣＨ＿３；５８．２４、ＣＨ；５
   ５．４１、ＣＨ；４８．１５、ＣＨ；４７．０３、ＣＨ
   ＿２；４１．１９、ＣＨ＿２；３７．６０、ＣＨ＿２；
   ３４．０６、ＣＨ；２９．７６、ＣＨ＿２；２５．８５
   、ＣＨ＿３；２４．２８、ＣＨ＿２；１８．４９、ＣＨ
   ＿３；１７．９８、ＣＨ＿３；１１．９９、ＣＨ＿３；
   Ｅ）下記の条件下で逆相ＨＰＬＣにより分析されたとき
   の１４．９分の保持時間（Ｒ＿ｔ）：カラム：ウルトラ
   スフェアＯＤＳ（逆相シラン化シリカゲル；５マイクロ
   メートル）アルテックス（ベックマン）、４．６ｍｍ（
   内径）×２５０ｍｍ プレーカラム：ブラウンリー・ラボス・ＲＰ１８（オク
   タデシルシランシリカゲル；５マイクロメートル） 溶離剤Ａ：ｐＨ７．０に調節されたアセトニトリル：１
   ８ｍＭ燐酸ナトリウム７０：３０（容量／容量）、 溶離剤Ｂ：ｐＨ７．０に調節されたアセトニトリル：１
   ８ｍＭ燐酸ナトリウム１０：９０（容量／容量）、 溶離方式：溶離剤Ｂ中の溶離剤Ａの線状勾配、４５％〜
   ７０％、２０分で、 流速：１．８ｍｌ／分 紫外線検出器：２５４ｎｍ 内部標準：クロラムフェニコール（Ｒ＿ｔ＝３．７分） Ｆ）試料をあらかじめ約１４０℃において不活性雰囲気
   下で乾燥した後の、下記の組成を示す元素分析：炭素、
   水素、窒素、硫黄 Ｇ）ジクロロメタン：メタノール９：１（容量／容量）
   、シリカゲル板（シリカゲル６０Ｆ＿２＿５＿４、メル
   ク・カンパニイ）、可視；紫外線２５４ｎｍ、ヨウ素蒸
   気を伴う黄色点を使用するクロマトグラフィーシステム
   、または最少量のデヴィス媒体上で￥枯草菌￥ＡＴＣＣ
   ６６３３、内部標準：クロロラムフェニコール（Ｒｆ０
   ．５６）を使用するバイオオートグラフィーにおける、
   ０．３７のＲ＿ｆ値 Ｈ）ｍ／ｚ１２９０．３±０．１ダルトンにおけるプロ
   トン化分子イオンの最低の質量同位体を示すＦＡＢ−Ｍ
   Ｓ分析。クラトスＭＳ−５０二重焦点質量分析計を用い
   て下記の実験条件下で分析すると、スペクトルの８００
   ｍ／ｚ質量単位（同位体ピークは数えない）以上の全て
   の他のピークは分子イオンの２０％以下であった：６Ｋ
   ｖにおけるキセノン急速原子衝撃；グリセロールマトリ
   ックス；正のイオン化方式 Ｉ）下記の実験条件下で下記の天然アミノ酸類：グリシ
   ン、（Ｌ）プロリンおよび（Ｌ）セリン：の存在を示す
   塩酸加水分解酵素のアミノ酸分析： 試料を１％のフェノールを含有している６ＮＨＣｌの存
   在下で２０時間にわたり１０５℃で加水分解し、そして
   次に下記の如き二段階で誘導化する： ａ）無水プロパノール中での２ＭＨＣｌを用いてカルボ
   ン酸官能基のｎ−プロピルエステル類の製造（９０℃、
   １時間）、およびその後の窒素下での乾燥、 ｂ）室温における１時間にわたる無水ペンタフルオロプ
   ロピオン酸／無水ジクロロメタン、１／９（容量／容量
   ）を用いる遊離アミノ基からアミド類への転化、および
   その後の窒素下での乾燥；このようにして得られた誘導
   化された残渣をジクロロメタン中に溶解させ、そしてＨ
   Ｐ５９８５Ｂシステムを使用する下記の条件下でのＧＣ
   −ＭＳにより分析する： カラム：キラールｎ−プロピオニル−Ｌ−バリンｔ−ブ
   チルアミドポリシロキサンでコーティングされた融解シ
   リカ毛管カラム（２５ｍ×０．２ｍｍ内径、Ｃ．Ｇ．Ｃ
   ．アナリティック）、温度プログラム：８０℃で４分、
   次に４℃／分。 Ｌ）イオン化検査 メチルセロソルブ／水中での０．１ＮＨＣｌおよび０．
   １ＮＮａＯＨを用いる滴定によりイオン化可能官能基は
   検出されない。弱塩基性官能基は非−水系媒体（酢酸）
   中での０．１ＮＨＣｌＯ＿４を用いる滴定により現れな
   い。 Ｍ）比旋光度 ［アルファ］＾２＾０＿Ｄ＝＋１４０．８、無水エタノ
   ール、約５ｇ／ｌの濃度。 ２、￥プラノビスポラ・ロセア￥ＡＴＣＣ５３７７３の
   菌糸体またはそれのＧＥ２２７０生成用変種もしくは変
   異体からの回収時に得られる抗生物質である抗生物質Ｇ
   Ｅ２２７０複合体。 ３、￥プラノビスポラ・ロセア￥ＡＴＣＣ５３７７３の
   菌糸体またはそれのＧＥ２２７０生成用変種もしくは変
   異体を浸水好気性条件下で炭素、窒素および無機塩類の
   同化可能な原料の存在下で培養し、そして生成した抗生
   物質をそこから回収することからなる、特許請求の範囲
   第１または２項に記載の化合物の製造方法。 ４、特許請求の範囲第１または２項に記載の化合物を薬
   学的に許容可能な担体と混合して含有している、薬学的
   組成物。 ５、￥プラノビスポラ・ロセア￥ＡＴＣＣ５３７７３。 ６、好気性条件下で炭素、窒素および無機塩類の同化可
   能な原料の存在下で抗生物質ＧＥ２２７０ファクターＡ
   を製造可能な、￥プラノビスポラ・ロセア￥ＡＴＣＣ５
   ３７７３、または、￥プラノビスポラ・ロセア￥ＡＴＣ
   Ｃ２３８６６以外の、それのＧＥ２２７０生成用変種も
   しくは変異体の生物学的に純粋な培養物。