JPH02163017A - イリス属植物の組織培養方法 - Google Patents

Abstract

(57)【要約】本公報は電子出願前の出願データであるた
め要約のデータは記録されません。

Description

【発明の詳細な説明】 ［産業上の利用分野］ 本発明は、イリス属植物の組織培養方法に関し、特には
イリス属植物において、そのカルス様組織を誘導する方
法、カルス様組織を継代培養する方法、及びカルス様組
織から植物体へ再生する方法に関する。

〔従来の技術〕

イリス属植物は、その根茎部に高級天然精油の一種であ
るオリス油を蓄積する、重要な香料植物である。

従来、イリス属植物は畑地で栽培され、その繁殖は地下
茎による栄養繁殖に頼っていた。しかし、畑地栽培によ
るイリス属植物の繁殖方法は、天候、土質等の自然環境
の影響を受けやすく、その繁殖は不安定であった。又、
ウィルスにおかされることも避けられず、健全な植物体
の生育が困難であった。

近年、組織培養技術によるイリス属植物の繁殖も報告さ
れている（Ｈａｒｔ　５ｃｉｅｎｃｅ　、　１０巻第５
号、１９７５年）。しかし、その和文でカルス化に成功
したのはイリス属植物の花部を用いた場合だけであり、
その他の部位（例えば根茎部、幼葉部）ではカルス化が
起きなかった。又、花部切片から得られたカルスを継代
培養した場合に、そのカルスから植物体への再生を安定
して実施できる継代培養の期間についても不明である。

以上のように、前記和文に記載の技術は、切片を採取す
ることのできる時期が制限されている点、及び植物体へ
の再生可能な継代培養期間が不明である点で、安定的な
大量繁殖方法としては不適切であった。

〔発明が解決しようとする課題］ 従って、自然環境の影響を受けることなく、ウィルスフ
リーのイリス属植物の安定した大量繁殖を実現するため
に、カルス誘導用切片の採取時間に制限が−なく、しか
も継代培養を長期間行ってもカルスから植物体への再生
を安定に実施することのできるイリス属植物の組織培養
方法の開発が望まれでいた。

〔課題を解決するための手段〕

本発明者は、驚くべきことに、カルス誘導用切片として
イリス属植物の葉のつけ根部分を用い、そしてこれをオ
ーキシン類含有培地に置床するとカルスが誘導され、し
かもこのカルスをオーキシン類含有培地で継代培養する
と植物体への再生能を長期間維持させることができ、更
に、そのカルスを特定の再生培地に移植することによっ
て植物体へ再生することができることを見出した。

従って、第一の本発明方法は、イリス属植物の葉のつけ
根部分の切片をオーキシン類含有固体培地上に置床する
ことを特徴とする、イリス属植物のカルス様組織の誘導
方法に関する。

第二の本発明方法は、イリス属植物のカルス様組織をオ
ーキシン類含有培地で継代培養することを特徴とする、
イリス属植物のカルス様組織の継代培養方法に関する。

第三の本発明方法は、植物ホルモンを含まない培地、サ
イトカイニン類含有培地、ジベレリン類含有培地、サイ
トカイニン類とオーキシン類とを含有する培地、及びジ
ベレリン類とオーキシン類とを含有する培地から成る群
から選んだ植物体再生培地に、イリス属植物のカルス様
組織を移植することを特徴とする、イリス属植物におけ
るカルス様組織から植物体への再生方法に関する。

以下、本発明をより詳細に説明する。

第一の本発明方法においては、香料植物切片として、イ
リス属植物の葉のつけ根部分を用いる。

これを通常の方法で滅菌した後、オーキシン類及び場合
によりサイトカイニン類を添加した植物組織培養用固形
培地上に置床してカルス様組織を誘導する。植物組織培
養用固形培地としては、ムラシゲとスクーグ（Ｍｕｒａ
ｓｈｉｇｅ　＆　Ｓｋｏｏｇ）培地を始め、リンスマイ
ヤーとスクーグ（Ｌｉｎｓｍａｉｅｒ　＆　Ｓｋｏｏｇ
Ｈ以下ＬＳと略す）、ホワイト（Ｗｈｉｔｅ）、ガンボ
ルグ（Ｇａｎｂｏｒｇ）、−１−ｙチ（Ｎ　ｉ　ｔｓｃ
ｈ）、ヘラ−（Ｈｅｌｌｅｒ）、シェンクとヒルデブラ
ンドＣ５ｃｈｅｎｋ　＆　１ｌｉｌｄｅｂｒａｎｔ）、
−’−７チとエッチ（Ｎｉｔｓｃｈ　＆　Ｎ１ｔｓｃｈ
）、コーレンバッハとシュミット（Ｋｏｈｌｅｎｂａｃ
ｈ　＆　Ｓｃｈｍｉｄｔ）などのいずれの培地を用いて
もよい。カルス８Ｗｒ　Ｎのためには光を照射する必要
はない。

温度は、一般には１５°Ｃ〜３０°Ｃの範囲、好ましく
は２０°Ｃ〜３０°Ｃ１更に好ましくは２５°Ｃ〜２７
°Ｃである。又、オーキシン類としては、２゜４−ジク
ロロフェノキシ酢酸（以下、２．４−Ｄと略す）、α−
ナフタレン酢酸、インドール−３酢酸、インドール−３
−酪酸（以下、ＩＢＡと略す）、２．４．５−）ジクロ
ロフェノキシ酢酸などのいずれを添加しても良い。サイ
トカイニン類としてはゼアチン、６−ベンジルアデニン
、カイネチン（以下、ＫＴと略す）、リボシルゼアチン
、イソペンテニルアデニンなどのいずれを添加しても良
い。オーキシン類としては２．４−Ｄが好ましく、サイ
トカイニン類としてはＫＴが好ましい。添加するオーキ
シン類の濃度は一般には０、１　ｔａｒ／ｒｔｆｌ　〜
１０　ｕｇ／ｍｌの範囲であり、好ましくは０．５μｇ
　／　ｍｌ〜２μｇ　／　ｍｌである。オーキシン類の
濃度が０．１μｇ　／　ｍ１未満だと、カルスが誘導さ
れる確率は極端に低下する。オーキシン類の濃度が１０
Ｉ！ｇ／ｄを超えてもカルスの誘導率が低下する。

サイトカイニン類を添加するとカルス化が促進される。

サイトカイニン類の濃度は一般には０．０１ｐｇ／　ｍ
１〜１鱈／　ｍｌの範囲であり好ましくは０．０１屑／
ｍ２〜０．５硝／　ｍｌである。

第二の本発明方法では、イリス属植物のカルス、好まし
くは前記の第一の本発明方法で誘導されたカルス様組織
を、カルス様組織を誘導させた条件と同じ条件で月に１
回程度の間隔で継代培養する。

下記の実施例で示すとおり、本発明方法によって継代培
養されているカルス様組織は、１８ケ月後であっても植
物体への再生能を維持している。従って必要に応じて、
カルス様組織から植物体への再生を行うことができる。

第三の本発明方法では、イリス属植物のカルス（例えば
、前記の第一の本発明方法又は第二の本発明方法によっ
て得られたカルス様組織）から植物体を再生することが
できる。植物体への再生は、カルス様Ｍｉ職を植物ホル
モン無添加の通常の固形培地（植物組織培養用固形培地
として前記したもの）に移植して実施することもできる
が、好ましくは植物ホルモンとしてサイトカイニン類０
．１〜１０μｇ／１ｒｄｌ好ましくは０．１〜１．０鱈
／ｄを含む培地、又はジベレリン１０．１〜５０μｇ　
／　ｍｌ好ましくは０．１〜１０μｇ　／　ｍｌを含む
培地、或いはサイトカイニンｉｏ、１〜１０μｇ／　ｒ
ｒｄｌとそのサイトカイニン類の１　／１０量のオーキ
シン類とを含む培地、又はジベレリンｌ１ｊ（０，１〜
５０ｔｎｒ／ｍｌとそのジベレリン類の１／１０量〜１
　／１００量のオーキシン類とを含む通常の固形培地（
植物組織培養用固形培地として前記したもの）に移植す
ると、根及び葉を同時に発生した植物体を再生する。ジ
ベレリン類としては、例えばジベレリンＡ８、ジベレリ
ンＡ２、ジベレリンＡ３（以下、ＧＡ３と略す）などの
いずれを添加してもよい。再生した植物体は植物ホルモ
ン無添加の培地で培養を行い、馴化させた後、畑地に移
植する。

〔実施例〕

次に実施例によって本発明を具体的に説明する。

ただし、本発明は以下の態様に限られるものではない。

遺Ｊ引性上 イリス・バリダ（穐朋上四〇、）の根茎の葉のつけ根部
分を切りとり、水洗後に１　ｃｍ立方に細分し、７０％
エタノールに数分間浸漬した。水洗後、５％次亜塩素酸
ナトリウム液に２０分間浸漬し、水洗後更に１〜２　ｍ
ｍの厚さに細分した。再度１％次亜塩素酸ナトリウム液
に１０分間浸漬した後に、更に２ｍ四方に細分し、２　
、４−Ｄ　１．０μｇ／Ｉｄ、及びＫ　Ｔ　０．１　ｔ
ｎｒ／　ｍｌを含むＬＳ固形培地上に置床した。２６°
Ｃにて暗所で培養したところ約１ケ月後にカルス様組織
が出現した。得られた培養物を同条件で約１ケ月に１回
の間隔で植え継ぐことにより、継代培養を行った。この
培養物の継代培養を６ケ月間続けた後に、表１に示した
各種植物ホルモンを含むＬＳ培地に移植したところ、約
１〜２ケ月後に根及び葉を発生し植物体を再生した。そ
の再生頻度を表１に示す。ＫＴｌ、Ｏｎ／ｍｌ及びＩＢ
Ａｏ、１μｇ　／　ｍｌを含む培地で植物体が最もよく
再生した。再生した植物体を畑地に移植したところ、健
全な植物体として順調に生育を続けた。

実Ｊｌｄ達え イリス・バリダ（Ｉｒｉｓ　卯月ｊ鎖）及びイリス・フ
ローレンチナ（通ｆｌｏｒｅｎｔｉｎａ）の根茎の葉の
つけ根部分より実施例１に示した方法により、カルス様
組織を誘導した。この培養物を継代１８ケ月後にＫＴｌ
、Ｏｎ／Ｉｎ１及びＩ　Ｂ　Ａ　０．１　ｐｇ／１ｔｄ
ｌを含むＬＳ培地に置床したところ、約１〜２ケ月後に
根及び葉を発生し植物体を再生した。再生した植物体は
畑地に移植したところ、健全な植物体として順調に生育
を続けた。

〔発明の効果〕

本発明方法によれば、天候、土質等の自然環境の影響を
うけることなく、安定的にイリス属植物を増殖すること
ができ、しかも無菌的に増殖させるため、ウィルスフリ
ーの健全な植物を増殖させることができる。

Claims (1)

1. 【特許請求の範囲】 １、イリス属植物の葉のつけ根部分の切片をオーキシン
   類含有固体培地上に置床することを特徴とする、イリス
   属植物のカルス様組織の誘導方法。 ２、イリス属植物のカルス様組織をオーキシン類含有固
   体培地で継代培養することを特徴とする、イリス属植物
   のカルス様組織の継代培養方法。 ３、植物ホルモンを含まない培地、サイトカイニン類含
   有培地、ジベレリン類含有培地、サイトカイニン類とオ
   ーキシン類とを含有する培地、及びジベレリン類とオー
   キシン類とを含有する培地から成る群から選んだ植物体
   再生培地に、イリス属植物のカルス様組織を移植するこ
   とを特徴とする、イリス属植物におけるカルス様組織か
   ら植物体への再生方法。