JPH02186256A - 流通セル中の金電極における表面酸化物触媒陽極検出におけるバックグラウンドシグナルの自動棄却によるパルスド電量検出 - Google Patents

Abstract

(57)【要約】本公報は電子出願前の出願データであるた
め要約のデータは記録されません。

Description

【発明の詳細な説明】 米国政府は米国科学財団、契約ＣＨＥ　−８３１２０３
２、を通じてアイオワ州立大学とともに本発明に対する
権利を有する。

発明の背景 貴金属電極、主にＡｕおよびｐｔにおける電気触媒反応
に基く脂肪族化合物の直接電気化学検出に関しで強い関
心が生じた。電気化学検出は液体およびイオンクロマト
グラフィーにおける検出の広く容認された手段である。

電気化学検出器は電位を流通セル中の作用電極に適用す
ることにより作動する。そのような検出器は、典型的に
は作用電極、参照電極および対向電極を含む３電極セル
を用いる。その方法は検出操作並びに電極表面の陽極洗
浄および陰極再活性化を組込む多段階電位波形の使用に
頼る。典型的な電位波形は第１Ａ図に示される。陽掘検
出は期間ｔｓの終りにおける１６．７ｍｓ期間の間の電
流サンプリングで電位Ｅｌで生ずる１次いで電位は電極
表面の酸化洗浄のためのＥ２（期間ｔ２）、次いでＥｌ
および（または）Ｅ２で形成された表面酸化物の陰極溶
解による再活性化のためのＥ３　（期間ｔ３）へ進めら
れる。アナライト（ａｎａｌｙｔｅ）の吸着もまたＥ、
において、長いｔｓの間に起こることができ、電極表面
におけるアナライトの濃度は再びバルク溶液の値に確立
される（Ｃ’　＝Ｃ”　）。現在パルスト電流検出（Ｐ
ＡＤ）として知られるこの方法の分析適用はアルコール
、ポリアルコールおよび炭水化物（還元性および非還元
性）（１〜６）：アミンおよびアミノ酸（第一級および
第二級）（７）；アミノグリコシド（８）；並びに多く
の硫黄化合物（硫酸エステル、スルホン酸およびスルホ
ンを除く）（９〜１１）に対して実証された。

最近、パルスト電量検出（ＰＣＤ）が記載された（１２
）。ＰＡＤとＰＣＤとの間の重要な差異はファラデーシ
グナルの測定に関する機器のプロトコルである。ＰＡＤ
において電極電流が１６．７ｍｓ　（すなわち１／６０
Ｈ，−１）の時間間隔にわたり平均され、ＰＣＤにおい
て電流測定応答が連続１６、７　ｍ５ｆｉＪｊ間の積分
数にわたり電子的に積分される（１２）。ＰＣＤは固有
的に大きいシグナル強度のためおよび６０Ｈ，相関ノイ
ズシグナル、電子機器化における主形態のノズル、が積
分期間にわたり零に保たれるのでより大きいシグナル対
ノズル比（Ｓ／Ｎ）を有する。

種々の勾配？′８乱法を用いる一層複雑な液体クロマト
グラフ技術の出現で、勾配期間にわたる感度および検出
能力の高い値を持続でき、またバ・７クグラウンドシグ
ナル中の付随変動を自動的に拒否できる検出器の開発が
必要である。脂肪族化合物に対して伝統的に使用された
検出器は、それらが・イオン強度における変化により影
響されるのでｐ＋＋勾配液体クロマトグラフィー（ＬＣ
）に使用できない。測光検出は広範囲のπ結合のない脂
肪族化合物に対する固有的に低い感度のため、および移
動相の屈折率における変化に伴なう基線ドリフトのため
に悩まされる。屈折率検出は濃度勾配により強く影響さ
れ、移動相組成における小変化に対して観察される基線
シフトさえアナライトシグナルを圧到することができる
。

ＰＡＤ　（１〜１０）およびＰＣＤ、（１２）の方法は
液体クロマトグラフィー（ＬＣ＞に関連して多くの脂肪
族有機化合物の検出のために導入された。しかし、わず
かのｐＨ変化に耐えるどの技術の能力さえ検出電位およ
び選ばれる電極材料に強く依存する。実際に、フローイ
ンジエクシジン（Ｆ　Ｉ）系中のｐｔ電極におけるＰ　
Ａ、　Ｄがカセイアルカリ媒質中のｐＨ変化の測定に対
して示唆された（１３）。溶液ｐｉ＋の変化に対するＰ
ＡＤおよびＰＣＤにおける基線の感度は、陽極検出反応
が貴金属電極上の表面酸化物の同時形成により触媒され
るのでΔＵおよびｐｔにおけるアミンおよび硫黄化合物
に対して最大である（７．９．１０）。

発明の概要 本発明の目的は改良されたパルスト電Ｈ＆出法を捉供す
ることである。節単に記載すると、本発明によるパルス
ト電量検出法は液体クロマトグラフ環境中で電極表面の
陽極洗浄および陰極再活性化を用いる検出の電気化学的
方法における使用が意図される。

１つの好ましい態様においてその方法は、周期的波形が
電極表面を酸化物のない状態で存在させるように第１時
間朋間ｔｄの間第１初期電位値（Ｅｌ　）を有する周期
的電位変化を有する多段階電位波形を発生させる段階、
電位値を、表面酸化物の形成が溶性および（または）吸
着アナライトの同時電気触媒酸化反応で生ずるように時
間期間ｔ５の間第２の一層高い値（Ｅ＋’）に進める段
階、およびＥ　ｌ　　’への電位変化の間に形成された
全酸化物が前記電極表面から陰極的に取り除かれる保持
時間期間ｔｓの間電位値を前記第１（１！！Ｅｌに戻す
段階を含む。

本発明の他の目的および特徴は以下の詳細な説明から図
面に関連して考察すると明らかになろう。

図面の簡単な説明 第１図　電位−時間波形 （Ａ）ＰＡＤ　（Ｂ〜Ｄ）ＰＳ−ＰＣＤ第２図　０．２
５　Ｍ　　Ｎ　Ｈａ　Ｎ　０３（ｐＨ５，１）中のＡｕ
　　ＲＤＥにおけるチオ尿素に対する電流−電位応答。

濃度（ｍＭ）　　：　　（Ａ＞　０．０．　　（Ｂ）　
０．１０゜（Ｃ）　　０．３０．　　　（Ｄ）０．５０
第３図　０．２５Ｍ　　ＮＨ４ＮＯｚ　　（ｐＨ５，１
）中のＡｕ　　ＲＤＥにおけるチオ尿素に対する電流−
電位および電荷−電位応答。

溶液：　　（Ａ、Ｃ）ブランク、 （Ｂ、Ｄ）１００μＭチオ尿素。

曲線：　　（Ａ、Ｂ）電流対電位（ｉ　−Ｅ）（Ｃ，Ｄ
）電荷対電位（ｑ　−Ｅ） 第４図　０．２５Ｍ−ＮＨ，Ｎｏ、（ｐＨ５，１）中の
ＰＳ−ＰＣＤおよびＰＡＤに対する鎮静時間およびドリ
フトの比較 波形：　　（ＰＳ−ＰＣＤ）ＷＦ−３ （ＰＡ、Ｄ）ＷＦ−１゜ 第５図　０．２５Ｍ−ＮＨ４ＮＯ：ｌ　　（ｐ［Ｉ５．
１）中のＰＳ−ＰＣＤおよびＰＡＤに対する検出ピーク
および基線オフセットの比較 注入：　０．２５Ｍ−ＮＨ，ＮＯ３中の１００μＭチオ
尿素ｌＯＯμ！ 波形：　　（ＰＳ−ＰＣＤ）ＷＦ−３゜（ＰＣＤ）ＷＦ
−２゜ （ＰＡＤ）ＷＦ−１゜ 第６図　０．２５Ｍ−ＮＨ，ＮＯｊ　　（ｐＨ５，１）
中のＰＡＤによるチオ尿素の検出に対するポストピーク
ドリップの実証 注入：　０．２５Ｍ−ＮＨ４ＮＯｚ中の１００μＭ千オ
尿素 波形：ＷＦ−１ 第７図　溶液ρ１１に対するＡｕ　　Ｉ？ＤＥにおける
チオ尿素に対する電流−電位曲線 を８液　：　　（Ａ）　　０．２　５Ｍ−ＮＨ４Ｎ０ｓ
（ｐＨ５，１） （Ｂ　）　０．２０　Ｍ−ＮａＯＨ（ｐｔｌ約１３）曲
線：　　（Ａ、Ｃ）空気飽和、 （Ｂ、Ｄ）Ｎｚ飽和、 （Ａ、Ｂ）ブランク、 （Ｃ，Ｄ）　０．２０ 個Ｈチオ尿素 第８図　ＰＳ−ＰＣＤおよびＰＡＤによるＮ　Ｈ４Ｎ　
Ｏ３中のチオ尿素の検出に対する３、８から５．１への
９Ｎ変化（矢印により示す）による基線シフトの比較 注入７０．２５Ｍ−ＮＨ，ＮＯｊ中の１００μＭチオ尿
素 波形：　　（ＰＳ−ＰＣＤ）ＷＦ−３゜（ＰＡＤ）ＷＦ
−１ 第９図　０．２０　Ｍ　　ＮａＯＨ（ｐＨ約１３）中の
ＡｕＲＤＥにおけるグルコースに対する応答 ン容液：　　（Ａ、Ｃ）フ゛ランク （Ｂ、Ｄ）１．０ｍＭグルコース 曲線：　　（Ａ、Ｂ）電流対電位（ｉ　−Ｅ）（Ｃ，Ｄ
）電荷対電位（ｑ−Ｅ） 第１０図　第１図の波形を有するＰＳ−ＰＣＤによるグ
ルコースおよびチオ尿素に対す るフローインジェクションビークの比 較 溶液：　　（Ａｌ、＾２）　０．２０　Ｍ−ＮａＯＨ中
の０．２０ｍＭグルコース （Ｂ１．．８２）Ｏ１２０Ｍ−ＮａＯＨ中の０．１Ｏｎ
＋Ｍチオ尿素 波形：　　（ＡＩ）ＷＦ−４゜ （Ａ、２）ＷＦ−５゜ （Ｂ１）ＷＦ−４゜ （Ｂ２）ＷＦ−５ 第１１図　アミノ酸の複合混合物のｐＨ参照を用いる勾
配液体クロマトグラフ分離および Ｐ八り 第１２図　ＰＳ−ＰＣＤを用いたことを除いて第１１図
に類似する図 第１３図　改良クロマトグラフィーによる第１２図に類
似する図 第１４図　第１２図および第１３図の分離法に関連して
用いた電流波形 第１５図　アミノ酸分離のための溶媒系を例示する表を
示す。

図面の簡単な説明 パルスト波形中の検出電位を電流積分の間に周期的に変
化させるＰＣＤの改良形態が次に記載される。周期的電
位変化は電位スイープ （ｐｏｔｅｎｔｉａｌ−ｓｗｅｅｐ）または電位ステッ
プ（ｐｏｔｅｎｔｉａｌ−ｓｔｅｐ）機能またはそれら
の組合せによることができ、略語ＰＳ−ＰＣＤがこの技
術に適用される。ＰＳ−ＰＣＤに対する最大の意義が酸
化物触媒反応に基く陽極検出に期待され、この技術がｐ
Ｈ勾配溶離を用いるＬＣ法における基線ドリフトを事実
上棄却できると結論された。勾配溶離の理論はよく知ら
れ、例えばスナイダーはか（Ｓｎｙｄｅｒ　ａｎｄ　Ｋ
ｉｒｋｌａｎｄ）により「インジェクション・ト・モダ
ン・リキッド・クロマトグラフィー　（Ｉｎｔｒｏｄｕ
ｃｔｉｏｎ　ｔｏ　Ｍｏｄｅｒｎ　Ｌｉｑｕｉｄ　Ｃｈ
ｒｏｍａｔｏｇ−ｒａｐｂｙＮ　、　　２版、ジョン・
ワイリ・アンド・サンズ社（Ｊｏｈｎ　Ｗｉｌｅｙ　Ｌ
　５ｏｎｓ、　Ｉｎｃ１）＋　　（１９７９）、ρｐ６
６３〜７１５中に記載され、その詳細が参照される。

ＰＳ−ＰＣＤに対する典型的な電位波形は第１Ｂおよび
ＩＣ図に、また比較のためにＰＡＤおよびＰＣＤに対す
る普通の波形が第１Ａ図に示される。ＰＳ−ＰＣＤにお
いてＥ、の初期値は電極表面が酸化物のない状態で存在
するように選ばれる。

ｔよの遅れ時間後に検出電位を迅速電位スイープ（第１
Ｂ図）または電位ステップ（第１Ｃ図）により値Ｅｌ　
　’にｔｓの時間間隔の間道める。

Ｅｌ　　’の値は表面酸化物の形成を溶性および（また
は）吸着アナライトの同時電気触媒反応で生ずるように
選ばれる。次いで検出電位が、Ｅ、Ｊへの電位変化の間
に形成された全酸化物が電極表面から陰極的に取り除か
れる保持期間ｔｋＯ間初期値Ｅ１に戻される。検出期間
の全時間は１、＝１４＋１．＋１ｈである。積分器（ア
ナログまたはデジタル）は期間ｔｄの間に活性化され、
期間ｔ１中活性に保たれる。積分器からの出力シグナル
は期間ｔｈの終りにサンプリングされ、値または比例値
が記録装置に供給される。その後、Ｅ２およびＥ、への
正および負パルスを適用することができ、それらはそれ
ぞれ陽極洗浄および陰極再活性化を達成する。積分器は
期間ｔｓの終りに次の波形サイクルの開始直前に再び零
にセットされる。

ＰＳ−ＰＣＤにおけるバックグラウンド棄却（ｒｅｊｅ
ｃｔ　１ｏｎ）はＥ、からＥ、／への電位変化の間の表
面酸化物形成に対する陽極電荷（ｑａ、。８）がＥ１′
からＥｌへの電位変化による酸化物還元に対する陰極電
荷（ｑｃ、。Ｘ）により自動的に相殺されるので達成さ
れる。バックグラウンド棄却はＱ　Ｃｒ。Ｘ＝　　ｑａ
＋。８であれば正確である。アナライト検出に対する感
度は、プロセスが不可逆であれば、すなわち陰極シグナ
ルがＥ、／における陽極検出反応の生成物のＥＩＩ、方
ける還元に対して得られないならば最大である。値Ｅ、
／は溶性および吸収アナライトの酸化反応の程度を最大
にするように選ばれる。しかし、Ｅ、／は０２の発生に
よる有意な陽極溶媒分解を生ずるほど大きい正であるべ
きではない。

第１Ｂ右よびＩＣ図中のＰＳ−ＰＣＤ波形に対するＥ１
′＄よびｔｓの値は、電極の完全な酸化洗浄を与えるほ
ど十分大きいことができ、その後の酸化洗浄のためのＥ
２への次段階が必要とされないことができる。生ずる波
形は第１Ｄ図に示される。利点には一層高い波形周波数
が含まれる。

実験の部 化Ｙ１益 溶液は試薬用化学薬品〔フィッシャー・サイエンティフ
ィック　（Ｆｉｓｈｅｒ　５ｃｉｅｎｔｉｆｉｃ、　Ｆ
ａｉｒ　Ｌａｗｎ＋ＮＪ））および精製水〔ナノピュア
（Ｎ　Ａ　Ｎ　０ｐｕｒｅ　）　ｎ　％バーンルステン
ド社（ＢａｒｎＩｓｔｅｄ　Ｃｏ、。

Ｂｏｓｔｏｎ、　　Ｍ　Ａ　）　）から調製した。ポル
タンメトリー実験中に記載された場合を除いて溶解ｏ２
を純Ｎ２によるパージにより除去した。

且−ｎ−化 データはすべてボテンシジスタット（ＰＡＲｌ　７４Ａ
、、ＥＧ＆Ｇプリンストン・アプライド・リサーチ社（
Ｅ　Ｃ＆　Ｇ　Ｐｒ１ｎｃｅｔｏｎ　ＡｐｐｌｉｅｄＲ
ｅｓｅａｒｃｈ　Ｃｏｒｐｏｒａｔｉｏｎ、　Ｐｒ１ｎ
ｃｅｔｏｎ、ＮＪ）　）でコンピューター制御（ヒユー
レット・パラカード（Ｉｌｅｗｌｅｔｔ　Ｐａｃｋａｒ
ｄ、　Ｐａ１ｏ　Ａｌｔｏ、　　ＣＡ）　）　Ｆに得た
（５．１２）。波形の限定、並びにすべての他のタイミ
ングおよびスイッチング操作はソフトウェア制御下にあ
った。フローインジェクション（Ｆ１）系は螺動ポンプ
（ミニパルス（Ｍｉｎｉｐｕｌｓ）ＨＦ２、ギルソン・
メディカル・エレクトロニックス（Ｇｉｌｓｏｎ　Ｍｅ
ｄｉｃａｌε１ｅｃｔｒｏｎｉｃｓ、　Ｍｉｄｄｌｅｔ
ｏｎ。

Ｗ１）およびテフロ、ン連結配管に基いた。注入した試
料容積は１００μｌであり、流量は０．５−公刊であっ
た。電気化学流通セルはＡｕ電極（約０．００５ｃａｆ
）を有する［薄層ｊ設計〔ダイオネックス・コーポレー
ション（Ｄｉｏｎｅｘ　Ｃｏｒｐｏｒａｔ−ｉｏｎ　、
　５ｕｎｎｙｖａｌｅ、　ＣＡ）　］であった。飽和カ
ロメル参照電極（ＳＣＥ）を製造業者供給Ａｇ／ＡｇＣ
１’電極（ＳＳＣＥ）の代わりに用いた。ポルタンメト
リーはＭＳＲ回転装置〔バイン・インストルメント社（
Ｐｉｎｅ　Ｉｎｓｔｒｕｍｅｎｔ　　Ｃｏ、、　Ｇｒｏ
ｖｅ　　Ｃ１ｔｙ。

ＰＡ）］中のＡｕ回転ディスク電極（ＲＤＥ。

０、００５０ｃａ１）で行なった。

操作 Ａｕ　　ＲＤＥにおけるポルタンメトリーは、２０ＩＴ
ｌｖステツプをモデル１７４Ａに適用して約４，８Ｖ・
分′″１の走査速度をシミュレートした階段波形を用い
て行なった。電極電流は各ステップに対する時間期間の
最後の１６．７ｍｓの間に測定した。電荷−電位（ｑ−
Ｅ）プロットは電極電流の連続アナログ積分により階段
走査の間に得られた。

ＰＳ−ＰＣＤに対する第１Ｂ図の波形中のＥｉからＥ、
／への電位スイープは遅れ時間ｔｄの終りに始まる３０
ｍＶステップを用いる階段波形によりシミュレートした
。第１ＣおよびＩＤ図中の波形に対する検出応答は硫黄
化合物に対して第１Ｂ図中のそれに近似的に等しいと認
められた。従って、第１Ｄ図中の波形を用いてこ５に示
したＰＳ−ＰＣＤデータの大部分を得た。第１Ｂ〜ＩＤ
図中に示される波形に対して積分器は期間ｔｓの初めに
活性化した。ＰＡＤにおける電極電流並びにＰＣＤおよ
びＰＳ−ＰＣＤにおける累積電荷のサンプリングは検出
期間ｔ１の終りにおける１６．７ｒａｓｅｃ期間の間に
行なった。示したデータを得るために用いた波形の説明
は表■中に与えられる。

結果ふよび論議 電流積分による段階ポルタンメトリー 硫黄化合物は表面酸化物の同時陽極形成による強い制御
下にある貴金属電極における陽極挙動を示す（９，１０
）。この応答はチオ尿素濃度の関数として、０．２５Ｍ
−ＮＨ，ＮＯ３（ｐＨ５，１）中、９００回転・分−′
１で回転する＾ｕＲＤＥにおいて得られた階段ポルタン
メトリーにより得られた第２図中に示されるｉ−Ｅプロ
ット（曲線Ｂ−Ｄ）により表わされる。比較のためチオ
尿素の存在なく得た残りのｉ−Ｅプロットが示される（
曲線Δ）。

チオ尿素の表面触媒陽極検出は範囲約０．６〜１．３Ｖ
中の正電位スイープの間に表面酸化物の形成と同時に生
ずると認められる。０□０発生による陽極溶媒分解はｐ
Ｈ５，１でＥ〉約１．３Ｖに対してＡｕ電極において生
ずる。チオ尿素に対する陽極シグナルは酸化物形成の速
度が零になる１、５ｖから負スイープで零に低下する。

明らかにチオ尿素は表面酸化物の同時形成でのみ反応性
であり、酸化物被覆へｕ電極はチオ尿素の以後の陽極酸
化に対して不活性である。陽極電位スイープの間に形成
された表面酸化物は次の負スイープで陰極的に還元され
、ｐ）１５．１で範囲０．５〜０．２Ｖ中に陰極ピーク
を生ずる。ＦＩまたはＬＣ系中のｐ）１５．１における
チオ尿素に適用したＰＡＤおよびＰＣＤに対する最適検
出電位（第１Ａ図中のＥｔ）は第２図のｉ　−Ｅプロッ
ト中の陽極シグナルに対するピーク値の出現に基づいて
範囲約１．０〜１．２Ｖ中にある。しかし、これらの検
出電位の値に対し、大きい同時バックグラウンドシグナ
ルが表面酸化物の形成の結果としてＰＡＤおよびＰＣＤ
において得られる。

ＰＳ−ＰＣＤの概念は第３図中の電荷−電位（ｑ−Ｅ）
プロット　（曲線ＣおよびＤ）によりＡｕＲＤＣにおけ
る遅い三角形階段電位スイープ（４，８Ｖ・分−１）に
対して実証される。階段ポルタンメトリーにより得られ
た同時ｉ　−Ｅデータ（曲線ＡおよびＢ）もまた理解の
助けに示される。

回転速度は１６００回転・分−であった。チオ尿素不在
に対する残りのＱ−Ｅプロット・（曲線Ｃ）において速
やかな電荷蓄積は酸化物形成が正スイープ上の約０．７
Ｖで始まるときに生じ、蓄積電荷は表面酸化物が陰極的
に溶解される負スイープ上の約０．５Ｖで始まり約零に
戻る。チオ尿素の存在下において（曲線Ｄ）、周期的電
位スイープの完了後に積分器上に残る正味電荷はチオ尿
素の陽極反応からの寄与に相当する。

益盈王乳化■速度 ＰＳ−ＰＣＤに対する電位波形（第１Ｂ〜１．　Ｄ図）
はＰＡＤおよびＰＣＤにおいて通常認められる酸化物形
成からの大きいバックグラウンドシグナルの事実上の棄
却を生ずることができるサンプリング法を組込む、Ｅ、
からＦ！、ｌ′への正電位変化間に蓄積された酸化物形
成からの陽極電荷（ｑ、、。Ｘ）はＥｌ　′からＥｌへ
の電位の戻りに対する酸化物の陰極溶解からのはソ′等
しいがしかし逆の電荷（ｑｃ、。Ｘ）により相殺される
。

平衡化の速度および基線のドリフトが第４図中に、ＦＩ
系中のＡｕ電極におけるＰＳ−ＰＣ，ＤおよびＰＡＤに
対して比較される。Ａｕ電極は各応答曲線を記録する前
に研磨（０，５μｍアルミナ）した。

ＰＡＤに対する零電流は第４図のスケールをはずれる。

ＰＡＤにおける激しい基線ドリフトが１０分より長く続
くことがみられる。これは酸化物形成および溶解の反復
サイクルにより生ずる表面再現に基づく検出プロセス間
の真の電極面積の漸増に起因する。ＰＳ−ＰＣＤにおい
て基線棄却のため、電極表面積の変化から明らかな結果
が事実上存在しない。通常ＰＳ−ＰＣＤに対して基線は
、第４図中に実証されるように、新研磨電極に適用され
た波形約５〜１０サイクル内でその「零」値に達するこ
とが認められる。さらに、数時間の期間にわたるこの値
の偏位はバックグラウンドシグナル上に示される高周波
数ノイズの大きさより小さいかまたは等しい。ＰＳ−Ｐ
ＣＤに対する平衡化速度および基線ドリフトの大きさは
電極の状態、すなわち電極が「十分使用された」か新た
に研磨されたかに事実上無関係である。ＰＡＤ、ＰＣＤ
またはＰＳ−ＰＣＤにおいて使用された電極を研磨する
ことは必要でない。電極は何か月もの運転後に表面再現
のために外観が非常に「変色」することができるが、し
かしそれらの応答は減成されない。

Ｅｌ系におけるＰＳ−ＰＣＤ、ＰＣＤおよびＰ　Ａ　Ｄ
　ニより得られた０、　２５　Ｍ　　Ｎ　Ｈａ　Ｎ　Ｏ
ｘ（ｐ）１５．１）中のチオ尿素に対する検出ピークの
比較が第５図中に示される。ストリップチャートのフル
スケール電流感度は各検出法に対してピーク振れが等し
いように副整した。これは図中のＳ／Ｎ因子の直接視覚
比較を可能にする。基線応答の大きさは正味ピーク応答
のパーセントとして図中に示される。例えばＰＳ−ＰＣ
Ｄに対する基線シグナルは１００μＭチオ尿素の注入に
対するピーク高さの約２０％にすぎず、一方ＰＡＤに対
する基線シグナルははン”１５０％のピーク高さである
。

小さい未補償基線オフセットが３つの理由のためにＰＳ
−ＰＣＤ中に残存する：電子装置の使用可能増幅器中の
電位および電流オフセット：全表面酸化物の完全な陰極
除去が可能でないＥｌの第２適用に対する非常に短かい
期間（すなわち期間ｔｈ）；並びに電極材料、電極電位
（第１Ｂ図中のＥｌおよびＥ１′〉の選択、および（ま
たは）ｑｃ、。８≠−ｑ６．。やである溶液状態。

検出の限界および分析校正 硫黄化合物のＰＳ−ＰＣＤに対する検出限界は、第５図
から評価され・るそれぞれのＳ／Ｎ値の観察から予想さ
れるように、ＰＡＤおよびＰＣＤより優れている。Ｐ　
Ｓ　−Ｐ　ＣＤ　（Ｓ　／　Ｎ　＝　３　）によるチオ
尿素に対する検出限界（ＬＯＤ＞はフローインジェクシ
ョンにより波形ＷＦ−３（表■参照）に対し約２μＭで
あると決定され、それは１００μ！試料中の１５ｎｇ　
（０，５ｐｐｍ　）に相当する。

ＰＡＤ（波形ＷＦ−１＞に対するＬＯＤは１５μＭ（１
１０ｎｇ、　１．　ｉｐｐｍ　）であり、ＰＣＤ　（波
形’ｖ’ｉ’　Ｆ　−２＞に対するＬＯＤは６　μＭ　
（４５ｎｇ。

０、４４ｐｐｍ　）であった。この「ホームビルト」機
器は市販〔ダイオネックス社（Ｄｉｏｎｅｘ　Ｃｏｒｐ
））を用いて達成できるより劣ることが注意される。従
って、こ５に与えられたＬＯＤの値は単に３検出法の相
互比較のためであって、最新機器から期待されるＬＯＤ
の値の指標ではないと考えるべきである。

Ａｕ　　ＲＤＥにおける階段ポルタンメトリーにより得
られた電流−電位曲線は第２図中にチオ尿素濃度の関数
として示した。明らかに表面酸化物の陰極溶解に対して
認められた見掛はピークシグナル（ｑｃ、。のがチオ尿
素濃度の増加につれて低下する。これは酸化物形成の速
度が吸着硫黄および（または）チオ尿素の存在により実
質的に抑制され、その結果表面酸化物の一層少ないｌが
正電位スイープの間に生成されるので生ずると結論され
る。この事実はフローインジェクションまたはクロマト
グラフィー系に対するＰＡＤまたはＰＣＤの適用に対し
て得られたｉ−ｔプロットの解釈に重大な影響を有する
ことができる。検出ピークに相応する真の基線は検出ピ
ークの直前または直後に観測された基線の補作により正
しく評価されない。この影響の証拠は１００μＭチオ尿
素の注入に対して第６図に示されるポストピークデイツ
プの出現である。これはより少ない表面酸化物が吸着チ
オ尿素の存在下で形成されるだけでなく、また有限量の
時間（すなわち、数波形サイクル）が検出器セルを通る
試料ポラスの通過後の電極表面の完全洗浄および再活性
化に必要であることを実証する。ＰＳ−ＰＣＤに対して
Ｅ　ＩからＥ、／への変化の結果として形成された酸化
物が次にＩＥ　％からＥ　ｌへ戻る電位変化後に陰極的
に溶解されるので表面酸化物被覆における重大な変化が
なく、この周期的プロセスに対する正味積分シグナルが
ｑ□、。えの変化に無関係に事実上零に保たれる。

Ｐ−咳不Ｊ邦か果 ＰＳ−ＰＣＤにおける最低基線を達成するために、Ｅｌ
　は電極が酸化物を含まず、溶解０□が検出されない値
に相当することが必要である。

１６００回転・分−１におけるＡｕＲＤＥで得られた段
階ポルタムグラムが、０．２５Ｍ−ＮＩＩ４ＮＯ。

（ｐ＋１５．１　）中のチオ尿素に対して第７Ａ図に、
および０．２０　Ｍ　−ＮａＯＨ（ｐｉｔ約１３）に対
して第７Ｂ図に示される。５．１から１３へのｐＨの変
化の結果、Ａｕ電極における酸化物取り除きに対するピ
ーク電位は約０．４０　Ｖ付近に負にシフトするが、０
２還元に対する半波電位は単に約０．１５　Ｖ付近にシ
フトする。従ってｐＨの高い値に対しＰＳＰＣＤ波形（
第１Ｂ〜ＩＤ図）中のＥ、に対する値を、全表面酸化物
が陰極的に溶解されるがしかし溶解された０□が検出さ
れないように位置させることが不可能になる。ＰＨ１３
における値−〇、１５Ｖは限界的に成功するだけであり
、溶解０２を含むアルカリ性溶液中のＡｕ電極に対する
ＰＳＰＣＤの適用はｐｌ（〈約１３に限定される。

Ｅ、からＥ、Ｊへの電位変化の範囲を表面酸化物形成に
対するポルタンメトリー領域の大部分に広がるように選
ぶこともまた重要であるが、しかしＰ　Ｉ′は０２の有
意な発生が始まる値を越えるべきではない。第７図中の
ｉ−Ｅ曲線から陽極０□発生の開始が５から１３へのｐ
Ｈの変化に対して約０．４０　Ｖ付近に負にシフトする
ことが認められる。明らかにｐＨ１３で波形中の電位の
すべての値の調整なく満足に適用するｐＨ５における良
好なＰＳ−ＰＣＤに対する波形を設計することは不可能
である。

ＰＳ−ＰＣＤおよびＰＡＤにより得られたチオ尿素に対
するピークが、第８図中に矢印によって示されるように
、３．８から５．１へ担体溶液中のｐＨステップを有す
るフローインジェクション検定について比較される。各
実験に対する記録装置セツティングを、ピーク偏位が２
検出法に対して近似的に等しいように調整した。ＰＳ−
ＰＣＤに対する基線応答における変化は非常に小さいが
、ＰＡＤに対する基線シフトは非常に激しい。どの方法
による千オ尿素検出の感度も溶液ｐＨの変化でわずかの
変動を示す。またＳ／ＮがＰＳ−ＰＣＤに対して優れて
いることが容易に明らかである。

尖水上立役也の考察 単糖および二塘はアルカリ性溶液中で篩電極における近
物質輸送制限ピーク形状応答を示す（５）。

９００回転・分−１におけるＡｕで得られた第９図中の
ポルタンメトリー曲線中の正電位スイープに対して示さ
れるように、グルコースに対する陽極ピークは実質量の
表面酸化物が形成されない電位領域で得られる（曲線Ａ
とＢとの比較）。グルコースに対するポルタンメトリー
ピーク応答が事実上物質輸送制御であっても、ＰＡＤま
たはＰＣＤにおける洗浄および活性化パルスの利益のな
い定電位における検出は不満足である。定電位における
検出に対して、炭水化物に対する陽極応答はＡｕ電極に
おいて着実に減衰する。表面活性の損失は検出反応の吸
着生成物の蓄積の結果であると結論される。Ｐｔ電極に
おける同様の観測がＰＡＤの開発に対する最初の動機を
生じた。第９図中の曲線Ｂ（正スイープ）により示され
るように、炭水化物の酸化が約０．２■における酸化物
形成の発生と同時に止む。炭水化物の存在下の酸化物形
成波（０，２５〜０．５Ｖ）に重なるピークシグナルが
吸着炭水化物物質の酸化物触媒酸化脱離に相当する。

炭水化物に対するＰＳ−ＰＣＤの基礎は遅い三角形階段
スイープ（４゜８Ｖ・分−１）で得られた第９図中のグ
ルコースに対するＱ−Ｅプロット（曲線ＣおよびＤ）に
より示される。

高アルカリ性条件下の炭水化物に対して溶解０□の同時
検出なく全検出ピークを包含するＥｔおよびＥ１′の値
を選ぶことができない。この観測と、それに加えて酸化
物が検出電位で形成されないので最小バックグラウンド
電流がＰＡＤおよびＰＣＤによる炭水化物の測定中に観
測される知識が、ｐＨ＞約１１の溶液におけるＰＣＤに
比較してＰＳ−ＰＣＤによる炭水化物に対する検出能力
の有意な改良でありそうにないとの結論を生ずる。

さらに、炭水化物に対する感度はｐＨ＜Ｉｆに対して速
やかに低下する。

波形の比較 ＰＳ−ＰＣＤに対する波形の最適化、例えば第１Ｂ図対
第１ＣまたはＩＤ図の選択は関心のアナライトにより影
響される。検出が表面酸化物の形成により抑制されるア
ナライト、例えば炭水化物（第９Ａおよび９Ｂ図参照）
に対し、第１ＣおよびＩＤ図に示される波形はＥｌから
Ｅ　ｌ　’への電位の階段的変化が速やかで多くの酸化
物の形成を生じ、分析応答が止むので適当でないと思わ
れる（第９図参照）。表面酸化物の形成により触媒され
る機構により検出される吸着アナライト、例えば硫黄化
合物、はどの波形によってもよく検出されると予想され
る。第１ＢおよびＩＤ図中の波形を比較した結果が第１
０図中に０．２　Ｍ　−ＮａＯＨ中のグルコース（ＡＩ
、Ａ２）およびチオ尿素（Ｂｌ、Ｂ２）の検出に対して
示される。比較のために全検出期間は２波形において同
一であった（１０００ｓｓ）、基線シグナルに対する数
値（μＣ）が括弧内に示される。グルコースは予想され
たように第１Ｄ図に比べて第１Ｂ図中の波形に対して実
質的に高い感度を示す。チオ尿素は、同様に予想された
ようにｉ（Ｄの感度で検出される。チオ尿素の場合のよ
うに、アミノ酸もまた第１１〜１３図に関連して記載す
るように、表面酸化物の形成により触媒されるプロセス
により検出される。

第１１図はＰＳ−ＰＣＤによる検出で勾配溶離に対する
ダイオネフクス（Ｄｉｏｎｅχ）装置を用いる１７アミ
ノ酸（図の次頁に示したピークアイデンティティ−）に
対するクロマトグラムを含む。クロマトグラフカラムは
グイオネックス（Ｄｉｏｎｅｗ）Ａ　Ｓ−８であった。

基線の大きいシフトは勾配溶離が使用される、すなわち
移動相の組成がｆ’ｊＪ離プロセスの間に変化させられ
る、ときのアミノ酸のＰＡＤまたはＰＣ］＊出に対して
典型的である。

若干の検出ピークがシフトする基線中に失なわれること
が明らかであることが注意される。、この特定クロマト
グラムは参照としてｐＨ電極を用いて得られた。ＳＣＥ
参照を用いれば基線シフトは一層激しかったであろう。

第１２図はＰＳ−ＰＣＤをｐＨ参照で検出に用いたこと
を除いて第１１図の正確な条件下に得られたクロマトグ
ラムを含む。本発明の大きな意義が勾配溶離を用いると
きの基線の安定性であることが非常に明らかである。

第１３図は勾配溶離条件をわずかに変えてＰＳ−ＰＣＤ
およびｐＨ参照で得られたクロマトグラムを含む。異な
る条件が２０個のアミノ酸の分離を可能にした。再び基
線は著しく安定である。

第１４図は第１２および１３図のＰＳ−ＰＣＤ分離法に
対する電位波系を示し、第１５図はアミノ酸分離に対す
る溶媒系を例示する表を示す。

結論 へｕ電極におけるＰＳ−ＰＣＤに対する波形の設計が酸
化物触媒検出法に対する基線シグナルの事実上の排除を
生ずることができ、その技術は限定ｐＨ範囲にわたるｐ
Ｈ勾配溶離を用いる液体クロマトグラフ分離に対しｐＨ
参照と関連して推奨される。

本発明による技術が液体クロマトグラフ環境中のアナラ
イトの電気化学検出に対することを明らかに理解すべき
である。

Ａｕ作用電極を用いたＰＳ−ＰＣＤの使用が記載された
が、しかしこの技術は、酸化物層を形成し次により陰極
性の電位で取除くことができる他の電極物質例えばＰｔ
ｓ　Ｒｕ、　Ｒｈ、　Ｐｄ、　Ｐｂなどで等しく良好に
動作する。

一般に、この技術は不可逆プロセスに重ねられまたは同
時に起こる不可逆電気化学プロセスの測定に適用できる
。表面酸化物の形成の間を表面酸化物触媒反応の測定が
ＰＳ−ＰＣＤ技術のたシーつの例である。

ＰＳ−ＰＣＤ技術はアミノ酸、炭水化物および硫黄化合
物のような化合物の検定に適用できると思われる。ＰＳ
−７ＰＣＤ技術はアルコール、ポリアルコール、アミン
、アルカノールアミン、単糖、二糖、オリゴ糖、グリコ
ペプチド、糖タンパク質、チオカルボニド（ｔｈｉｏｃ
ａｒｂｏｎｉｄｅｓ）　、チオホスフェート　（Ｔｈｅ
ｏｐｈｏｓｐｔ＋ａｔｅ）および無機硫黄の検出に適用
できる。

記載したように、本発明のＰＳ−ＰＣＤ法は液体クロマ
トグラフィー、殊に高速液体クロマトグラフィー（ＨＰ
ＬＣ）により分離された液体試料中の多化学成分の検出
に適用できる。液体試料は通常展開剤として電解質を含
む溶離剤と混合され、クロマトグラフィーに通される。

カラムの充填物は典型的にはゲルあるいは粒状形態のイ
オン交換または逆相充填剤を含む。その技術は十分に開
発されている。例えばシンプソン（Ｃ，Ｆ、　Ｓｉｍｐ
ｓｏｎ）、テクニックス・オブ・リキッド・クロマトグ
ラフィー　（Ｔｅｃｈｎｉｑｕｅｓ　ｏｆ　Ｌｉｑｕｉ
ｄ　Ｃｈｒｏｍａｔｏｑｒａｐｈｙ）、１９８３、ノッ
クス（Ｊ、　ＨｌＫｎｏｘ）、ハイ・パフォーマンス・
リキッド・クロマトグラフィー（Ｉｌｉｇｈ　Ｐｅｒｆ
ｏｒｍａｎｃｅ　Ｌｉｑｕｔｄ　Ｃｈｒｏｍａｔｏｇｒ
ａｐｈｙ　）、１９８１およびポルカー（Ｋ、、　Ｐｏ
１ｋａｒ）ほか、リキッド・クロマトグラフィー・イン
・クリニカル・アナリシス（Ｌｉｑｕｉｄ　Ｃｈｒｏｍ
ａｔｏｇｒａｐｈｙ　ｉｎ　Ｃ１１ｎｉｃａｌＡｎａｌ
ｙｓｉｓ　）、１９８１参照。

さらに、ＰＳ−ＰＣＤ法はフローインジェクション分析
（ＦＩＡ１）における検出の方法として有用である。そ
のような系はスケゲス（Ｓｋｅｇｇｓ）、アメリカン・
ジャーナル・オブ・クリニカル・バソロジー（Ａｍｅｒ
、　Ｊ、　Ｃｌ１ｎ、　Ｐａｔｈ１）　、２８．３１１
〜３２２（１，９５７）並びに米国特許第４．０１３，
４１．３号、第４，０２２，５７５号、第４，１７７．
６７７号、第４，２２４，０３３号、第４．．２２７，
９７３号、第４，３１４，８２４号、第４．３１５，７
５４号、第４，３５２，７８０号、第４．３９９．１０
２号、第４，３９９，２２５号および第４，５０４，４
４．３号中に記載されている。そのような系においてこ
れらの試料は、例えば液体クロマトグラフィーにおいて
、分離されるよりはむしろ連続液体担体流中で検出器に
適用される。この技術は前記液体クロマトグラフ系との
比較で限定されて適用される。

従って本発明の範囲は、単に特許請求の範囲に関連して
解釈されるべきである。

表 ■ 電位−時間波形の説明 ｘ ＝−１，００ ＝５００ 参照文献 （１）　　ヒユーズほか（Ｈｕｇｈｅｓ、　Ｓ、、　Ｊ
ｏｈｎｓｏｎ、　Ｄ、　Ｃ，）、アナリチ力・シミ力・
アクタ（Ａｎａｌ、　Ｃｈｉｍ＾ｃｔａ　）、１９８１
．１３２．１１（２）　　ヒユーズはか（Ｈｕｇｈｅｓ
、　Ｓ、、　Ｊｏｈｎｓｏｎ、　Ｄ、　Ｃ，）、アナリ
チ力・シミ力・アクタ（Ａｎａｌ、　Ｉ：’ｈｉｍＡｃ
ｔａ　）、１９８３．１４９、ｌ （３〕ニドワードほか（Ｅｄｗａｒｄｓ、　Ｐ、、　）
Ｉａａｋ、　Ｋ１）、アメリカン・ラボラトリ−（Ａｍ
ｅｒ、Ｌａｂ、　　）　　、１９８３．４月、７８ （４）ロックリンはか（ｆｉｏｃｋｌｉｎ、　Ｒ，Ｄ、
、　Ｐｏｈｌ。

Ｃ，Ａ、　）　、ジャーナル・オブ・リキッド・クロマ
トグラフ１′　−（Ｊ、　　Ｌｉｑ、　　Ｃｈｒｏｍａ
ｔｏｇｒ、　　）。

１９８３．６　（９）、１５７７ （５）ノイバーガーほか（ＮｅｕｌＪｕｒｇｅｒ、　Ｇ
、　Ｇ、。

Ｊｏｈｎｓｏｎ、　０．　Ｃ，）、アナリティカル・ケ
ミストリー（Ａｎａｌ、　　Ｃｈｅｍ１）、ｌ９８７．
５９．１５０（６）ノイバーガーほか（Ｎｅｕｂｕｒｇ
ｅｒ、　Ｇ、　Ｇ、。

Ｊｏｈｎｓｏｎ、　０．　Ｃ，）、アナリティカル・ケ
ミストリー（Ａｎａｌ、　　Ｃｈｅ＋ｎ１）、１９８７
．５９．２０３（７）ボルタほか（Ｐｏｌｔａ、　Ｊ、
　Ａ、、　Ｊｏｈｒ＋５ｏｒｉ、　Ｄ、Ｃ，）、ジャー
ナル・オブ・リキッド・クロマトグラフィー（Ｊ、Ｌｉ
ｑ、　Ｃｈｒｏｍａｔｏｇｒ、　）、　ｌ　９　ｇ　３
．６、（８）ボルタほか（Ｐｏｌｔａ、　Ｊ、　Ａ、、
　Ｊｏｈｎｓｏｎ、　Ｄ、Ｃ，。

Ｍｅｒｋｅｌ　Ｋ、　Ｂ１）　、ジャーナル・オブ・り
ＣＩ７トグラフイー（Ｊ、Ｃｈｒｏｍａｔｏｇｒ、　）
、　　ｌ　９８５．３２４．４０７ （９）　　ボルタほか（Ｐｏｌｔａ、、　Ｊ、　２．、
　Ｊｏｈｎｓｏｎ、　　Ｄ、Ｃ，）、ジャーナル・オブ
・エレクトロアナリティ力ルケミストリ−（Ｊ、　Ｅｌ
ｅｃｔｒｏａｎａｌ　　Ｃｈｅｍ、　）。

１９８６．２０９．１５９ ０１　　ボルタほか（Ｐｏｌｔａ、　Ｔ、　ｌ、、　Ｌ
ｕｅｃｋｅ、　Ｇ、　Ｐ、。

Ｊｏｈｎｓｏｎ、　Ｄ、Ｃ，）　、ジャーナル・オブー
エレクトロアナリティカル・ケミストリー （Ｊ、　Ｅｉｌｅｃｔｒｏａｎａｌ、　Ｃｈｅ＋ｎ１）
、　　ｌ　９８６．２０９、ＱＤ　　トーマ：ｘ、ほか
（Ｔｈｏｒｎａ、ｓ、　Ｍ、　Ｂ、、　５ｔｕｒｒｏｃ
ｋ。

Ｐ、ε１）、ジャーナル・オブ・クロマトグラフ４−　
（Ｊ、Ｃｈｒｏｍａｔｏｇｒ、　）、１９８６．３５７
゜０３　　ノイバーガーほか（Ｎｅｕｂｕｒｇｅｒ＋　
Ｇ、　Ｇ、ｔＪｏｈｎｓｏｎ、口、Ｃ８）、アナリチ力
・シミ力・アクタ（Ａｎａｌ、　Ｃｈｉｓ’、＾ｃＬａ
　）、１９８７．１９２、Ｑｍ　　ボルタほか（Ｐｏｌ
Ｌａ、　Ｊ、　Ａ、　Ｙｅｏ＋　１．　ｔｆ、。

Ｊｏｈｎｓｏｎ、　Ｄ、　Ｃ，）、アナリテイカル・ケ
ミストリー（Ａｎａｌ、　Ｃｈｅｆｆｌ１）　、１９８
７．５７．５６３Ｑ４）　　ミード（Ｍｅａｄ　、　Ｄ
、　Ａ１）　、Ｍ、　Ｓ、論文、アイオワ州立大学（Ｉ
ｏｗａ　　５ｔａｔｅ　　Ｕｎｉｖｅｒｓｉｔｙ＋Ａｌ
１１ｅｓ　　ＩＡ、　）、１９８８゜

【図面の簡単な説明】

第１図はＰＡＤおよびＰＳ−ＰＣＤの電位−時間波形、
第２図は０．２５Ｍ　　ＮＨａ　ＮＯｘ　　（ｐＨ５，
１）中のＡｕＲＤＥにおけるチオ尿素に対する電流、電
位応答、第３図は０．２５　Ｍ　−Ｎ　Ｈ４Ｎ　Ｏ３（
ｐｔｌ　５．１　）中のＡｕ　　ＲＤＥにおけるチオ尿
素に対する電流−電位および電荷−電位応答、第４図は
０．２５Ｍ　　ＮＨ４ＮＣｈ　　（ｐＨ５，１）中のｐ
ｓＰＣＤおよびＰＡＤに対する鎮静時間およびドリフト
の比較、第５図は０．２５Ｍ−ＮＨ，Ｎ０３（ｐＨ５，
１）中のＰＳ−ＰＣＤおよびＰＡＤに対する検出ピーク
および基線オフセットの比較、第６図は０．２５　Ｍ　
　Ｎ　Ｈ４Ｎ　Ｏｚ　（ｐｔｌ５．１　）中のＰＡＤに
よるチオ尿素の検出に対するポストビークドリップの実
証、第７図は溶液ｐＨに対するＡｕ　　ＲＤＥにおける
チオ尿素に対する電流−電位曲線、第８図はＰＳ−ＰＣ
ＤおよびＰＡＤによるＮ　Ｈａ　Ｎ　Ｏｚ中のチオ尿素
の検出に対する３、８から５．１へのｐＨ変化による基
線シフトの比較、第９図は０．２０　Ｍ−ＮａＯＨ（ｐ
Ｈ約１３）中のＡｕＲＤＥにおけるグルコースに対する
応答、第１０図は第１図の波形を有するＰＳ−ＰＣＤに
よるグルコースおよび千オ尿素に対するフローインジェ
クシタンビークの比較、第１１図はアミノ酸の複合混合
物のｐＨ参照を用いる勾配液体クロマトグラフ分離およ
びＰＡＤ、第１２図はＰＳ−ＰＣＤを用いたことを除い
て第１１図に類似する図、第１３図は改良クロマトグラ
フィーによる第１２図の類似する図、第１４図は第１２
図および第１３図の分離法に関連して用いた電流波形、
第１５図はアミノ酸分離のための溶媒系を例示する表、
をそれぞれ示す図である。 ピアス（ｐｉｅｒｃｅ）タンパク質水解物の陰イオン交
換Ｌ（＞ＰＡＤ 電　極　：　＾Ｕ、ガラス参照 カラム　：　ΔＳ−８ 溶　液　ｚ　表ｍ参照 試　料　：　ピアスタンパク質水解物 各５　Ｘ　ｌ　Ｏ−’Ｍ、ただしシスチンは２、５　Ｘ
　Ｉ　Ｏ−’Ｍ １）アルギニン ２）　リシン ３）トレオニン ４）アラニン ５）グリシン ６）セリン ７）バリン ８）　プロリン ９）イソロイシン ロイシン メチオニン ヒスチジン フェニルアラニン グルタミン酸 アスパラギン酸 シスチン チロシン ＝　　７５０　　ｍｖ ００ｍ５ Ｅ、＝１０００　ｍｖ、　　ｌ００ｍ５Ｅ＋　　−−３
５０ｍｖ、　　Ｉ００＋ｎｓ社 蚤 夛　４　￥　α ｖｌ　　七　灼　２ へ 八 ト、 ト 、＼ べ も 〒−→ １１’＋　　ｃｏ　　匪 唆　　１　　ね 弄　八　へ　を　セ 全　、′Ｘ　　ｆ　　ｆ　　Δ　Ｉｒ１１　　）　　）
　　）　　０トコペトムト＼ヤ゛（ト ｃｘ３Ｆ−Ｅ− 夛　４　笑　琥 ハ ｗ」に；聴コＪＳ 堰 （５）　　←　　ト

Claims (10)

【特許請求の範囲】
1. （１）電位を流通セル中の作用電極に適用するアナライ
   ト検出のための液体クロマトグラフパルスド電量検出法
   であって、 電位スイープまたは電位ステップ機能を有するサイクリ
   ックパルスド電量検出技術を用いて液体クロマトグラフ
   環境中のアナライトを電気化学的に検出する段階を含む
   方法。
2. （２）流通セルが３電極セルであり、電極の１つがｐＨ
   参照電極である、請求項（１）記載の方法。
3. （３）ｐＨ勾配溶離が使用される、請求項（２）記載の
   方法。
4. （４）さらに、 周期的波形が電極表面を酸化物のない状態で存在させる
   ように第１時間期間ｔ＿ｄの間第１初期電位値（Ｅ＿１
   ）を有する周期的電位変化を有する多段階電位波形を発
   生させる段階、 電位値を、表面酸化物の形成が溶性および （または）吸収性アナライトの同時電気触媒酸化反応で
   生ずるように時間期間ｔ＿ｓの間第２の一層高い値（Ｅ
   ＿１′）に進める段階、 Ｅ＿１′への電位変化の間に形成された全酸化物が前記
   電極表面から陰極的に取り除かれる保持時間期間ｔ＿ｈ
   の間電位値を前記第１値Ｅ＿１に戻す段階、を含む、請
   求項（１）記載の方法。
5. （５）電極表面の陽極洗浄および陰極再活性化中に使用
   する液体クロマトグラフパルスド電量検出法であって、 周期的波形が電極表面を酸化物のない状態で存在させる
   ように第１時間期間Ｌ＿ｄの間第１初期電位値（Ｅ＿１
   ）を有する周期的電位変化を有する多段階電位波形を発
   生させる段階、 電位値を、表面酸化物の形成が溶性および （または）吸収性アナライトの同時電気触媒酸化反応で
   生ずるように時間期間ｔ＿ｓの間第２の一層高い値（Ｅ
   ＿１′）に進める段階、 Ｅ＿１′への電位変化の間に形成された全酸化物が前記
   電極表面から陰極的に取り除かれる保持時間期間ｔ＿ｈ
   の間電位値を前記第１値Ｅ＿１に戻す段階、を含む方法
   。
6. （６）周期的電位変化が電位スイープ機能によって進め
   られる、請求項（５）記載の方法。
7. （７）周期的電位変化が電位ステップ機能によって進め
   られる、請求項（５）または（６）記載の方法。
8. （８）さらに、電位値を第１または第２値より高い値Ｅ
   ＿２に時間期間ｔ＿２の間電極表面の酸化洗浄のために
   進める段階を含む、請求項（５）記載の方法。
9. （９）さらに、電位値を第１値より低い値Ｅ＿３に時間
   期間ｔ＿３の間、Ｅ＿１′および（または）Ｅ＿２で形
   成された表面酸化物の陰極溶解による再活性化のために
   低下させる段階を含む、請求項（５）または（８）記載
   の方法。
10. （１０）液体試料溶液中の多化学成分を多数の液体クロ
    マトグラフィー定量分析する方法であって、前記溶液を
    クロマトグラフ分離装置に通して流し、前記成分をそれ
    からの溶出で分離し、前記クロマトグラフ装置からの流
    出液を、電位が作用電極に適用される流通セルに通し、
    電位スイープまたは電位ステップ機能を有するサイクリ
    ックパルスド電量検出技術を用いてセル中の分離された
    化学成分を電気化学的に検出する、ことを含む方法。