JPH02200697A - リゾガングリオシド誘導体 - Google Patents

Abstract

(57)【要約】本公報は電子出願前の出願データであるた
め要約のデータは記録されません。

Description

【発明の詳細な説明】 【産業上の利用分野】

本発明は新規なりゾガングリオシト誘導体、さらに詳し
くは、アシル基か１またはそれ以上の極性基で置換され
た脂肪族酸から導かれるものである新規Ｎ−アシル、リ
ゾガングリオシドに関する。

【従来の技術】

リゾガングリオシドとは、セラミド基の脱ア／ル化によ
ってカングリオシトから得られ、スフィンゴシン残基だ
けを保持している誘導体を意味する。通常、ガングリオ
シドは以下の式を有する種々の単一の化学物質の混合物
である： これらの分子は、オリゴ糖部分（通常、それぞれのＪｒ
ングリオシドについて化学的に十分定義されている）、
シアリン酸部分く即ち、１またはそれ以上のシアリン酸
からなる）、およびセラミド部分を含有腰通常これら３
つの部分は別のシアリン酸と別のセラミド残基の混合物
によって構成されている。 シアリン酸は下式で示されるノイラミン酸のアシル誘導
体である： ０Ｈ ［式中、アミノ基は酢酸またはグリコール酸でアシル化
されており、ヒドロキシ基もそのような酸でエステル化
されていることもある］。 セラミド基は以下の２つの式のいずれかに対応するＮ−
アシルスフィンゴシンである ［式中、ｎは６〜１８であり、アシル基は炭素原子数１
６〜２２の飽和もしくは不飽和脂肪酸から、または対応
するヒドロキシ酸から誘導されたものである］。 既述のように、ガングリオシドにおいてはシアノン酸と
セラミド残基は上記式で示される基の混合物であり、こ
のことは文献記載の精製されたガングリオシドにも当て
はまる。通常、ガングリオシドに存在するシアリン酸の
数は１〜５に変化する。シアリン酸残基は、２位のヒド
ロキシとオリゴ糖のヒドロキシとで形成されたケトシト
結合によってオリゴ糖に結合している。いくつかのシア
リン酸が互いに結合するときには、それらの分子結合体
は、２つのシアリン酸分子の２位および８位のヒドロキ
シ基の間で形成されるケトシト結合によって生じる。ガ
ングリオシドの、および以前に記載されているようにし
て精製したガングリオシドのシアリン酸は、種々の化学
的に単一な酸、例えばＮ−アセチルノイラミン酸および
Ｎ−グリコリルノイラミン酸（前者が主である）の、並
びにおそら（は１またはそれ以上のそれらのＯ−アシル
誘導体、例えば８−０−アシル誘導体の混合物である。 オリゴ糖は、最大５個の単糖またはその誘導体とアシル
アミノ基、特にヘキソースおよびそれらの上記の型の誘
導体からなる。しかし、少なくとも１個のグルコースま
たはガラクトース分子がオリゴ糠中に常に存在し、上記
糖のアシルアミノ誘導体として最も多い残基はＮ−アセ
チルグルコサミンおよびＮ−アセチルガラクトサミンで
ある。 上に定義したリゾガングリオシドは、セラミドの窒素に
おける酵素による脱アシル化によって得ることができる
。脱アシル化が例えばアルカリ加水分解のように化学的
に行われるときには、その他のエステル化されたアシル
アミノまたはヒドロキシ基が脱アシル化される（例えば
、特にノイラミン酸の窒素上に存在するアシル、または
その程度は比較的少ないがこの酸のヒドロキシ基土に存
在していることもあるアシル酸）。 既述のように、ガングリオシドのノイラミン酸の窒素上
に存在するアシル基は酢酸から、およびその程度はかな
り少ないであろうがグリコール酸から導かれる。選択的
な再アシル化（例えば、スフィンゴシンのアミノ基を一
時的に保護した後の）によって、酵素による脱アシル化
によって得られるリゾガングリオシドの型の産物が得ら
れる（ノイラミン酸の窒素上にアセチル基が独占的に存
在していることだけが、そしてこの酸のヒドロキシ基を
アシル化している基が存在していないこともあることが
異なっている）。また、この群の脱アシル誘導体は、新
規なＮ−アシル−リゾガングリオシドを製造するための
基質としても有用であり、本明細書では「リゾガングリ
オシド」なる語句は、酵素による脱アシル化の産物およ
び上記方法の化学的脱アシル化によって得られる産物の
両方を意味するように用いる。 本発明の化合物はガングリオシドの半合成類似体であり
、スフィンゴシン部分における１個のよく分かっている
Ｎ−アシル基の存在により、および天然生成物のものと
は極めて異質な酸によって異なっている。天然のガング
リオシドの中で、加水分解されたときにヒドロキシ基に
よって置換された高級脂肪族酸（従って、本発明に係る
基のような極性基）を生成する産物が見い出されたが、
対応する産物はこれまで単離されておらず、またこれま
で記載されておらず、上記の化合物は新規である。 また本発明には、新規Ｎ−アシル−リゾガングリオシド
のシアリン酸カルボキシ基の官能基誘導体、即ちエステ
ル類およびアミド類、およびガングリオシドの既知の誘
導体、類似体、オリコ糖のヒドロキシ基とシアリン酸カ
ルボキシ基の間のラクトン結合を有する内部エステル、
並びにガングリオシドのヒドロキシ基の過アシル化誘導
体が含まれる（Ｎ−アシル−リゾガングリオシドそれ自
体およびそれらの上記官能基誘導体の両方の）。

【発明が解決しようとする課題】

本発明の主な目的は、 （ａ）アシル基が、 （１）塩素、臭素および弗素。 （ｉｉ）遊離のヒドロキシ基、または有機酸もしくは無
機酸でエステル化されたヒドロキシ基；（ｖｉｉｉ）エ
ーテル化されたヒドロキシ基；（稈）低級脂肪族または
アリール脂肪族アルコールから導かれるケト、ケタール
およびアセタール基 （マ）低級アルキルまたはアラルキル基で置換されてい
ることもあるケトキシム、アルドキシムまたはヒドラゾ
ン基； ；（ｖｉ）遊離のメルカプト基、または低級脂肪族もし
くはアリール脂肪族酸でエステル化されたか、または低
級脂肪族もしくはアリール脂肪族アルコールでエーテル
化されたメルカプト基： （ｖｉ）遊離の、またはエステル化されたカルボキシ基
； ；（ｖｉｉ）遊離のスルホン基、または低級脂肪族もし
くはアリール脂肪族アルコールでエステル化されたスル
ホン基。 （ＩＩ）低級アルキルもしくはアラルキル基または低級
アルドキシムで置換されたスルファミド酸またはスルフ
ァミド基； ；（ｘ）低級アルキルまたはアラルキル基から導かれる
スルホンまたはスルホキシド基 （！１）ニトリル基； ；（ｖｉｉｉ）遊離の、または置換されたアミノ基、お
よびこれらアミノ基の４級アンモニウム誘導体； からなる群から選ばれる１またはそれ以上の極性基で置
換された炭素原子数２〜２４の脂肪族酸から導かれるＮ
−アシル−リゾガングリオシド、並びに （ｂ）該Ｎ−アシル−リゾガングリオシドのシアリン酸
カルボキシ基のエステルおよび／またはアミド、該Ｎ−
アシル−リゾガングリオシドのその内部エステル、該Ｎ
−アシル−リゾガングリオシドの過アシル化誘導体酸基
を有する該Ｎ−アシル−リゾガングリオシドの金属塩も
しくは有機塩基との塩、該Ｎ−アシル−リゾガングリオ
シドの酸付加塩、および対応する該Ｎ−アシル−リゾガ
ングリオシドの混合物の誘導体を提供することである。 また、本発明は、■またはそれ以上の上記リゾガングリ
オシドの誘導体またはそれらの混合物またはそれぞれの
塩を含有する医薬調製物、並びにそれらの治療用使用お
よびそれらの製造方法をも提供するものである。 リゾガングリオシドのアシル化は既知であり、Ｎ−アシ
ル誘導体類は既に調製されており、これらは本発明のも
のに類似している［特に、シュバルツマンら（Ｇｕｎｔ
ｈｅｒ　Ｓｃｈｗａｒｚｍａｎｎ　ａｎｄ　Ｋｏｎｒａ
ｄ　５ａｎｄｈｏｆｆ、　Ｍｅｔｈｏｄｓ　ｉｎ　Ｅｎ
ｚｙｍｏｌｏｇｙ、　Ｖｏｌ、１３ｇ、　ｐｐ、３１９
−３４１．　（１９８７）））の刊行物「リゾガングリ
オシド：合成およびラベルされたガングリオシドの調製
における使用」を参照コ。これらは、適切にラベルされ
たアシル基を用い、細胞膜に及ぼすガングリオシドの作
用に関する生化学的研究において使用された。この刊行
物に記載されているＮ−アシル−リゾガングリオシドは
本質的には、非脂肪族酸からまたは本発明のものとは異
なる基で置換された脂肪族酸から導かれている。しかし
これらのりゾガングリオンド（しかし、本発明の誘導体
とは異なり、よく知られたスフィンゴシン鎖を有してい
る）の製造方法の１つにおいて、スフィンゴシンが用い
られ、その３位のヒドロキ７基がベンゾイル基によって
、および２位のアミノ窒素かジクロロ酢酸由来のアシル
基によって保護されている。 この反応物質は、ガングリオシドＧＭ、のオリゴ糖−シ
アリン酸部分由来の残基との縮合によって、スフィンゴ
シン残基の」１記位置でヘンゾイル化されたＮ−ジクロ
ロアセチルリゾガングリオシドＧＭ１からなる中間生成
物になる。例えば実施例３に記載されている本発明のジ
クロロアセチルリゾＧＭ、はこの合成法で製造されてお
らず、上記のベンゾイル基およびジクロロ酢酸基の両方
は後の段階で同時に除かれている。 また、同様のヘンジイルおよびジクロロ酢酸基のそれぞ
れで保護されている誘導体かりゾＧＭ。 ガングリオシドの製造に関する刊行物（シュバルッマン
ら）に記載されているか、この場合もリンＧＭｌジクロ
ロアセチルは製造されていない。

【課題を解決するための手段】

本発明の新規Ｎ−アシル誘導体の製造の基礎物質となる
リゾガングリオシドは、天然産物から、特にを椎動物の
中枢または末梢神経系の組織から抽出しうるカングリオ
シ！・の脱アシル化によって得られるが、副腎髄質、赤
血球、肺臓またはその他の器官からも得られる。それら
は、精製されたガングリオシド、例えば文献に記載され
ているようなもの、それらの糖部分に関して単一の構造
まで追跡したものなとてあってもよいし、またガングリ
オシドの混合物であってもよい。本発明の新規誘導体の
出発物質として用いるのに最も重要なガングリオシドと
しては、例えばオリゴ糖か最大４個のヘキソース残基か
らなり、この糖部分が化学的に単一であるものか挙げら
れる。このヘキソースはＮ〜ルアセチルグルコサミンよ
びＮ−アセチルガラクＩ・サミンからなる群から選ばれ
るのか好ましい（ガングリオンドグループＡ）。このグ
ループに属する一Ｊノングリオントは、例えばを椎動物
の脳から抽出されるもの［例えば、論文「神経系のカン
グリオシドＪ（”Ｇｌｙｃｏｌｉｐｉｄ　Ｍｅｔｈｏｄ
ｏｌｏｇｙＬＩＯＹ（ｌ　　Ａ、、　　Ｗｉｔｔｉｎｇ
　　Ｆｄ、、　　Ａｍｅｒｉｃａｎ　　Ｏｉｌ　　Ｃｈ
ｅｍｉｓｔｓＳｏｃｉｅｔｙ、　Ｃｈａｍｐａｉｇｎ、
　　ｌｉｔ、　　１８７−２１４　（１９７６乃に記載
されているようなもの；特に第１表を参照］、例えばガ
ングリオシドＧ　Ｍ４、ＧＭｌ、Ｇ　Ｍ　２、Ｇ４Ｇ　
］ｃＮ　Ａ　ｃ、　Ｇ　Ｄ２、ＧＤｌ、１−ＧａＩＮＡ
ＣｌＧ、ｒ、ｃｌＧＱｌＧ　Ｔ　ｌ　％および特に、オ
リゴ糖部分が少なくとも１個のグルコースまたはガラク
ト−ス残基と１個のＮ−アセチルグルコサミンまたはＮ
−アセチルガラクトサミンを含有しているものであり、
とりわけ以下のもの（ガングリオシドグループ）が挙げ
られる 庄旦 Ｇａ１（１”３）ＧａｌＮ　Ａ　Ｃ（１−＋４）Ｇｇｌ
（１→４）Ｇ　１ｃ（１→Ｉ）Ｃｅｒ↑ ＮＡＮＡ Ｇ　Ｄ　＋　ａ ＮＡＮＡ ＮＡＮＡ Ｇ、、。 Ｇ　ａｌ（１→３）　Ｇ　ａｌ　Ｎ　Ａ　Ｃ（］→４）
　Ｇ　ａｌ　（］→４）　Ｇ　ｌｃ（］−＋１）　Ｃｅ
ｒ↑ ＮＡＮＡ ↑ ２゜ ＮＡＮＡ Ｔ１ｂ ＮＡＮＡ ［ここで、Ｇｌｃはグルコース、Ｇａ１ＮＡＣはＮアセ
チルガラクトサミン、Ｇａｌはカラクトース、Ｃｅｒは
セラミド、ＮＡＮＡはＮ−アセチルノイラミン酸を表す
］。 上記式で示されるガングリオシドの構造（実質的に本発
明の誘導体に対するものと同じである）、並びに特に、
糖部分、シアリン酸およびセラミドの間の結合の性質を
さらに説明するために、１個のシアリン酸（Ｎ−アセチ
ルノイラミン酸またはＮ−グリコリルノイラミン酸で示
す）を含有する「純粋な」カングリオシトＧＭ、の完全
な式を以下に示す ［式中、ＹはＨまたはＯＨである］。 （以下、余白） また、セラミド残基を対応の「人工の」セラミド（その
Ｎ−アシル基は、極性基で置換された上記の脂肪族酸の
１つから導かれている）で置き換えることにより、木質
的に同一の式が本発明に係るガングリオンＦ　Ｇ　Ｍ　
、の誘導体に当てはまる。 さらに本発明に含まれるのは、新規Ｎ−アシルリゾガン
グリオシドの混合物であり、特に、ガングリオシド混合
物から導かれるもの、例えば刊行物に記載されている「
全」抽出物または種々の分画などの種々動物組織からの
抽出物中に存在しているものから導かれるものである。 これらの抽出物および分画は、」１記の刊行物、または
次の刊行物「脂質−結合のシアリン酸を含有している物
質の抽出および分析」［上記刊行物、１５９−１８６頁
（１９７６）］、および「神経系のガングリオシド」（
同刊行物、１８７−２１４頁）、および西独−特許Ｎｏ
、２５４９６８０などに記載されている。そのような混
合物においては、ガングリオシド混合物のＮ−アシル部
分は上記７′シル基のいずれかで置換されている。 これらの誘導体は、ガングリオシド混合物の脱アノル化
とそれに続く再ア／ル化について後述するような本発明
の方法に従って得ることもできる（Ｊングリオシドのノ
アリン酸部分中の他の脱ア／ル化された基の再アシル化
の後に行うこともある）。 出発物質として用いられる最も重要なガングリオシド混
合物は、神経系から、特に脳から得られるガングリオシ
ド抽出物であり、先に記したカンクリオシドＧ　Ｍ　１
、　Ｇ　ｎ　１ａ　ｓ　Ｃｙ　Ｄ　ｌ　ｂおよびＧＴ、
、を含有している。 ガングリオシドが神経系で重要な役割を果たしているこ
とは既に知られており、また最近、カングリ・オ／１・
か末梢神経系の病変および中枢神経系の疾病の治療に有
用であることか示された［］ΔｅｔａＰｓｙｃｂｉａｔ
、５ｃａｎｄ、　５５．　１０２　（＋９７７）　；　
Ｅｕｒ、Ｍｅｄｉｃｏｐｌ＋ｙｓ、　１３．　］　（１
９７７）；Ｒｉｃ、Ｓｃｉ、Ｅｄｕｃ、Ｐｅｒｍ、５ｕ
ｐｐ１．９゜］１５　（１９７８）　；　Ａｄｖ、Ｅｘ
ｐ、Ｂｉｏｌ、　７Ｌ　２７５　（１９７６）　；　Ｅ
ｌｅｃｔｒｏｍｙｏｇｒ、Ｃｌ１ｎ、Ｎｅｕｒｏｐｈｙ
ｓｉｏｌ、　１９，３５３　（１９７９）Ｍｉｎｅｒｖ
ａ　Ｍｅｄｉｃａ　６９．３２７７　（＋９７８）　；
　Ｍｉｎｅｒｖａ　ＳＬｏｍａｔ、　２７．１７７　（
１９７８）　；’Ｍｃｄ、ｄｅｌ　Ｌａｖｏｒｏ　６８
．２９６（１９７７）　；　Ｂｒａｉｎ　Ｒｅｓ、　１
９７．２３６　（１９８０）］。 ガングリオシドの治癒作用は、特に、神経細胞の成長現
象を刺激すること、および神経刺激伝達に関与する脱酵
素、例えば酵素（Ｎ　ａ”、　Ｋ　’）Ａ　Ｔ　Ｐアー
セを活性化することにあると考えられている［Ｂｒａｉ
ｎ　Ｒｃｓ、　１９７．２３８　（１９８０）　；　Ｊ
、ｏｆ　Ｎｅｕｒｏｃｈｅｍ。 ３７、３５０　（１９８１）］。ガングリオシドで刺激
されたニューロンの成長は、病変神経組織の機能的な回
復を促進する。 神経系の疾病を治療するにあたり、ガングリオノドより
効果の大きい化合物を見い出そうとする研究がなされて
いた。そのような研究により、５例えばガングリオシド
の内部エステル（サツカリド部分の１またはそれ以上の
ヒドロキシ基がシアリン酸の１またはそれ以上のカルボ
キシ基によってエステル化されて同じ数のラクトン環を
形成している：分子内反応）が、ニューロン成長促進に
おいて、および神経刺激伝達に関与している脱酵素、例
えば酵素（Ｎａ’、、に’）ＡＴＰアーゼを活性化する
点において、ガングリオシド自体より活性が強いことか
見い出された［例えば、米国特許Ｎｏ、４．４７６、１
１９（１９８４年１０月９日）、Ｎ　ｏ、　４．５９３
．０９１（１９８６年６月３日）およびＮ　ｏ、　４．
７１６．２２３（１９８７年１２月２９日）を参照］。 また、改善されたニューロン成長活性および神経刺激伝
達は、ガングリオシドの「外部」エステル、即ちシアリ
ン酸のカルボキシ官能基と、脂肪族、アリール脂肪族、
脂環式または複素環式系列の種々アルコール類とのエス
テルでも観察された。 さらに、ガングリオシドのアミド類、並びにアミド類お
よびエステル類のおよび単純なガングリオシドの過アシ
ル化誘導体類も同し性質を有している。米国特許Ｎｏ、
　４．７１３．３７４（１９８７年１２月１５日）に記
載されているこれら誘導体類のすべては、本発明の新規
Ｎ−アシル誘導体類の出発物質とみなされる。 新規ガングリオシド誘導体類は興味ある薬理学的性質、
さらに正確には、正常な神経伝達機能が不均衡であるあ
る種の条件下でネガティブであり、そして望ましくない
プロティン−キナーゼＣの活性化を阻害する作用を有し
ている。活性化はグルタミン酸および／またはアスパラ
ギン酸などの興奮性アミノ酸の濃度の増大によって誘発
され、これらの酸は上記の異常な条件のもとてニューロ
ン細胞に直接の毒性作用を有している。ガングリオシド
自体またはスフィンゴシンなどの他のプロティン−キナ
ーゼＣ阻害物質とは区別される本発明産物の大きな利点
の１つは、上記の神経毒性作用に抵抗し、そしてそれを
妨げる能力にある。 本発明の産物が、カルシウムアンタゴニストおよびグル
タメート受容体アンタゴニスト（特に、ＮＭＤＡ）とは
異なり、異常な状態の存在下でだけ作用し、従って神経
毒性を制限し、ニューロンの形成性を維持し、それによ
って損傷を受けた生理学的機能のより早い回復を可能に
することは強調されるべきである。 上述の新規Ｎ−アシルリゾガングリオンドの薬理学的性
質は、Ｎ−ジクロロアセチルリゾＧＭ。 およびＮ−モノクロロアセチルリゾＧＭ、で行った以下
の実験によって示すことができる。 Ｎ−アシル−リゾガングリオシドの作用皮質および大脳
のラット　ニューロンの一次培養物において、興奮性の
アミノ酸（ＥＡΔ）はプロティンキナーゼＣ（ＰＫＣ）
の活性化および転移を調節し、細胞の死を誘導する。特
に、これらの細胞培養物にグルタメートを添加すると、
グルタメートそれ自体によって誘導され、おそらくはＣ
ａ”の影響によって引き起こされる損傷を誘導し、それ
に続いてＰＫＣの転移およびその後の活性化を誘導する
。 最近になって、バッカリーノら［Ｖａｃｃａｒｉｎｏ　
ｅｔａｌ、、　Ｐｒｏｃ、Ｎａｔｌ、Ａｃａｄ、Ｓｃｉ
、ＵＳＡ　８４．８７０７−８７１１　（１９８７）］
、ハンナンら［１ｌａｎｎｕｎ　Ｙ、Ａ、　ｅｔ　ａｌ
、　　Ｊ、Ｂｉｏｌ。 Ｃｈｅｍ、　　２６１．　１２６０４−１２６０９　（
１９８６）］、メリルら［Ｍｅｒｒｉｌｌ　Ａ、Ｈ，ｅ
ｔ　ａｌ、、　Ｊ、Ｂｉｏｌ、Ｃｈｅｍ、　２６１．１
２６１０−１２６１５　（１９８６）］、ウウイツクら
［Ｗｉｌｓｏｎ　Ｅ、　ｅｔ　ａｌＪ、Ｔ３ｉｏ１．Ｃ
ｈｅｍ、　２６１．１２６１６−１２８２３　（１９８
６）］、ハンナンら［Ｈａｎｎｕｎ　Ｙ、Ａ、　ｅｔ　
ａｌ、、　５ｃｉｅｎｃｅ　２３５．６７０−６７３　
（１９８７）］は、大脳顆粒細胞をカングリオシト（ト
リシアロシル−Ｎ−テＩ・ラグリコシルセラミドＧＴ、
ｈまたはモノシアロシル−Ｎ−テトラグリコジルセラミ
ド−ＧＭ、）に暴露すると、グルタメートによって誘導
されるＰＫＣの転移および活性化が阻害されることを報
告した。これらのガングリオシドは、その高いアフィニ
ティー認識部位により、および［’Ｈ］ＰＤＢｕ結合に
よってグルタメートの相互作用を妨げる。さらに、これ
らのガングリオシドはグルタメート誘導の細胞損傷から
の保護を与える。 以下の既述は、新規ガングリオシド誘導体Ｎジクロロア
セチルリゾＧＭ、およびＮ−モノクロロアセチルリゾＧ
Ｍ、を用いて行った研究をガングリオシドの分画（ＧＭ
、およびＧＴ、ｂ）と比較して示すものである。特に、
大脳顆粒細胞の一次培養物におけるＰＫＣの転移、並び
にインビボおよびインビトロにおけるグルタメート誘導
の神経毒性に及ぼす本発明の誘導体の作用を調べた。 原料および方法 インビトロでの研究 ｌａ　　細胞培養物 ８日齢のスフブラーグードウレイ（Ｓｐｒａｇｕｅ　Ｄ
ａｗｌｃｙ）ラット（Ｚｉｖｉｃ　Ｍｉｌｌｅｒ）由来
の大脳顆粒細胞の一次培養物を用いた［ガロら（Ｇａｌ
ｌｏ　Ｖ、　ｅｔ　ａｌ、、　Ｐｒｏｃ。 Ｎａｔｌ、Ａｃａｄ、Ｓｃｉ、ＵＳＡ　７９．７９１９
−７９２３　（１９Ｂ２））］。これらの培養物は、〉
９０％の顆粒細胞、〈５％のＧＡＢＡ性のニューロン、
および〈５％のダリア細胞を含有している［バラカリ−
７ら（Ｖａｃｃａｒｉｎ。 Ｆ、Ｍ、　　ｅｔ　　ａｌ、、　　Ｊ、Ｎｅｕｒｏｓｃ
ｉ、　　７．　６５−７６　　（１９８７））コ。 培養の８日および９日目に細胞を実験に用いた。 Ｉｂ、培養物に加えた物質（方法およびパラメーター） 培養の８日および９日目に濃度７〜１１００ＩＩで次の
物質を加えた二Ｎ−ジクロロアセチルリゾＧＭ、、Ｎ−
モノクロロアセチルリゾＧＭ、、ＧＴ、ｂ、ＧＭ、　０
さらに具体的に言うと、単層の顆粒細胞を、ロック（Ｌ
ｏｃｋｅ）溶液（１ｒｔｒ（１）中、３７℃で１２０分
間（または、０〜１２０分の間で変化する時間）、上記
化合物とブレインキュベートした。ガングリオシドおよ
び誘導体は予め溶解し、次いで必要ならメタノール：水
／９５：５で希釈した。溶液の一部をＮ、気流中で乾燥
し、最終濃度に達するまで適切な量のロック溶液で集め
た。 １ｃ　グルタメート誘導の神経毒性 グルタメートの神経毒性作用を種々の実験条件で評価し
た。 ・グルタメートに暴露する前の物質のインキュベート時
間（０〜１２０分間）の影響：無傷の細胞を、Ｎ−ジク
ロロアセチルリゾＧＭ、ＳＮ−モノクロロアセチルリゾ
ＧＭ、（７μＭ）およびＧＴ、ｂ（６０μＭ）と３７℃
でブレインキュベートした。 洗浄して過剰の化合物を除去した後、Ｍｇ■の非存在下
、室温で１５分間、細胞をグルタメート（５０μＭ）と
ともにインキュベートし、次いで細胞を３回以上洗浄し
、培地に替えた。生存している細胞を組織化学的方法で
２４時間後に、またはアイオダイド−フルオレセインジ
アセテート染色（生存細胞には緑の蛍光を、非生存細胞
には赤の蛍光を与える）の後に評価した。 ・ガングリオシド誘導体またはガングリオシド自体によ
る前処理とグルタメートへの暴露の間の＝４０ 時間的間隔の影響：無傷の顆粒細胞をＮ−ジクロロアセ
チルリゾＧＭ、（７μＭ）、ＧＴ、ｂおよびＧＭ、（１
００μＭ）とともに３７°Ｃで２時間ブレインキュベー
トした。過剰の化合物を洗浄によって除去し、様々な時
間的間隔（１，２，４，６，１２，１８，２４および４
８時間）を置いた後、Ｍ　ｇ　Ｒ”の非存在下で１５分
間、細胞をグルタメート（５０μＭ）に暴露した。 ・グルタメートとガングリオシドの同時処理の作用：無
傷の顆粒細胞を、グルタメート（５０ｕＭ）およびガン
グリオシドＮ−ジクロロアセチルリゾＧＭ、（７μＭ）
、ＧＴ、、およびＧＭ、（１００μＭ）で処理した（１
５および３５分間）。第１の実験（１５分分間時処理）
においては、過剰の化合物を洗浄によって除去し、次い
で生存細胞を既述の方法に従って評価した。第２の実験
（３０分分間時処理）においては、ガングリオシドへの
暴露のさらに３５分間、同時処理を延長した。 ・グルタメートへの断続的な暴露に続くＮ−ジクロロア
セチルリゾＧＭ、の作用：顆粒細胞を断続的にグルタメ
ートに暴露し、Ｍｇ″″の非存在下で２０分間、Ｎ−ジ
クロロアセチルリゾＧＭ、（７μＭ）で処理した。過剰
の生成物は洗浄して除去した。 ・内生のグルタメート−誘導の神経毒性からの保護に及
ぼす細胞無酸素（Ｎｔ室中）に続くＮ−ジクロロアセチ
ルリゾＧＭ、の作用。細胞の生存性を２４時間後に比色
定量法で評価した（ＭＴＴは生存細胞だけを染色する）
。 チル結合の評価 ［３Ｈ］−ホルボールエステルの結合の作用を２種類の
別タイプの実験条件下で評価した：・グルタメート（５
０μＭ）、ガングリオシドおよび誘導体Ｎ−ジクロロア
セチルリゾＧＭ、（７μＭ）、ＧＴＩｂおよびＧＭ、（
１００μＭ）で１５分分間時処理。 ・グルタメート（５０μＭ）、およびＮ−ジクロロアセ
チルリゾＧＭ、（７μＭ）、ＧＴ、ｂおよびＧＭ、（１
００μＭ）で３０分分間時処理し、続いてカングリオシ
トに３５分間さらに暴露する。 同時処理の後、細胞を洗浄し、Ｍ　ｇ　２　”の存在下
で［３Ｈ］−ＰＤＢｕ結合を評価した。顆粒細胞を直径
３５ｓａのディスク」二で増殖させ、次いで洗浄し、０
．１％の脂肪族酸不含のウシ血清アルブミン［ング？　
（Ｓｉｇｍａ）］中、４−Ｂ−［３＋−＋ｉミーホルボ
ール１．１３−ジブチレー１−　　［３Ｈ］−Ｔ’（Ｂ
ｔｏ）、［］２．５Ｃｉ／ｉモル：　　］Ｃ１＝３７Ｇ
Ｉ３ｑ；ニュー・イングランド・ヌクレアー（Ｎｅｗ　
Ｅｎｇｌａｎｄ’　Ｎｕｃｌｅａｒ）］を含有するロッ
ク溶液とともにインキュベートした。１０分以内に平衡
に達することが予備実験によって示されたので、細胞を
２２°Ｃで１５分間、［’Ｈ］　−Ｐ　（Ｂ　ｔｏ）、
とともにインキュベートした。 結合は１時間以上にわたって一定であった。インキュベ
ートの後、細胞を冷ロック溶液で３回’６’ｅ、ｆｈし
、０．１．ＭのＮａＯＨで浮遊させた。浮遊液の一部を
タンパク質の測定に用いた［ロウリーら（１，。 ｗｒｙ　Ｏ，ｔｌ、　ｅｔ　ａｌ、、　Ｊ、Ｂｉｏｌ、
Ｃｈｅｍ、　１９３．２５６−２７５　（］９５１））
］。非特異的な結合を２１１Ｍのホルボール１２−テト
ラゾカッニー１・　１３−アセテート（ｐ’ｒＡ）の存
在下で評価した。 ２ａ　細ｊ征ｑ啼蓑 ！８０継代のマウス神経芽腫細胞（Ｎ、Ａ）を１ｏ、ｏ
ｏｏ細胞／ウェルの濃度てウェル（ＣＯ８ＴＡＲ−２４
）に入れた。翌日、培地をＩ）Ｍ　Ｅ　Ｍ−１−Ｐ／Ｇ
　＋　１０％ＦＣ８（３５０Ｍｇ）で置換した。 すべての化合物をＮ、気流中で乾燥したクロロポルム　
メタノール（２：ｌ）に溶解し、ＤＭＥＭモＩ）／Ｇ　
−１−］、　Ｏ％ＦＣ３に再懸濁した。軸索の数を２４
時間後に調べた。 インビボでの研究 手ア沙ｐ史（遡 ７日齢および体重が約１３９の新生ラットに、２５ｎモ
ルのＮ　Ｍ　Ｉ）　Ａをｉ、　Ｃ，Ｖｌｌ：射した。こ
れらの条件下では、興奮毒素は注射された脳半球の２８
重量％の減少および５３６％の致死率を誘導した。 化合物の投り：注射方法および観察したパラメーター ＮＭＤＡ注射の１時間前および直後に、２００Ｍモル／
動物の用０１、Ｓ、Ｃて、ラノ１〜をＮ−ジクロロアセ
チルリゾＧＭ、およびＮ−モノクロロアセチルリゾＧＭ
、で処理した。化合物はＰＢＳに溶解した。Ｎ−ジクロ
ロアセデルリゾＧＭ、およびＮ−モノクロロアセチルリ
ゾＧ　Ｍ　、　誘導体は、硫酸マグネシウム、ＭＫ−８
０１（ＮＭＤＡ受容体の非競合性アゴニスｌ−）［マク
トナルドら（Ｇ、　ＭｃＤｏｎｄａｌｄ　　ｅｔ　　ａ
ｌ、　　Ｅｕｒ　　Ｊ、Ｐｈａｒｍａｃｏｌ、　　＋４
０　１５３−１５７（１９８７））］、および酸キヌレ
ニコ（ａｃｉｄｏ　Ｋｉｎｕｒｅｎｉｃｏ）［アンシネ
（Ｐ、Ａｎｄｉｎａ、　　Ｎｃｕｒｏｓｃｉｃｎｃｅ　
Ｌｅｔｔｅｒｓ９０、２０８−２１２　（ｔ９ｇ８））
］（脳の損傷を減少させることかできる）との比較にお
いて試験した。ＮＭＤＡ注射の５日後に致死率をｉｔｔ
＋＋定した。 結果 これらの実験により、インビトロ゛Ｃの大脳顆粒細胞に
おいて以下のことがわかった ・Ｎ−ジクロロアセチル　リソＧＭ、（ＬＩＧΔ２０）
、およびＧＴ、、で２時間前処理するとグルタメート誘
導の神経毒性かはとんと完全に妨げられる（第１図）。 Ｎ−ジクロロアセチル　リゾＧＭ（７μＭ）によって得
られる保護は、５分間のブレインキュベートの後に既に
明らかであるが、一方、ＧＴ、、、（６０μＭ）の場合
は、６０分間のインキュへ−１・の後にだけその程度は
比較的低いが有意であることに注意す・＼きである。ま
た、Ｎ−ジクロロアセチルリソＧＭ、によって得られる
最大の作用は、ＧＴ、、、の濃度に比べて１／８以下の
濃度（７ａＭｖｓ６０μＭ）を必要とするたけであるこ
とに注意することも重要である。 ・グルタメ−１・誘導の神経毒性に及はすＸ−ジクロロ
アセチルリソＧＭ、の保護作用は、培地を除去した後の
少なくとも２４時間持続するが、方、ＧＴ；ｈのそれは
４時間の持続であり（第２図）、ＧＭ、のそれは１時間
以上持続しない（ＧＭ、＜ＧＴ　Ｉ＋、くＮ−ジクロロ
アセチルリゾＧＭ、）。 ・グルタメートとＮ−ジクロロアセチル　リゾＧＭ、で
同時処理（１５分間）すると、グルクメー１・の神経毒
性作用から細胞を保護するのに有効であるか、一方、Ｇ
　Ｔ、ｂとＧＭ、の処理はそうではない（第３図）。同
時に、Ｎ−７クロロアセチルリゾＧＭ、とグルタメート
で同時処理すると、３０分後の最大活性で、グルタメー
トによって誘導されるＰＫ’Ｃ転移を阻害する（第４図
）。また有効なのは、神経毒性作用からの保護、および
Ｐ　Ｋ　Ｃ転移の阻害の両方における、３５分間の同時
処理（第５図）とそれに続（ガングリオンドとの延長し
たインキ−ベート時間である。これらの実験条件では、
Ｎ−ジクロロアセチルリゾＧＭ、で得られる値はＧＭ、
およびＧＴ、ｈで得られる値に匹敵する。Ｎ−ジクロロ
アセチル　リゾＧＭ、の作用が極めて低い用量で得られ
るので、これがなおＧＭおよびＧＴＩｂよりも優れてい
るとみなしうることに注意することも重要である（７μ
Ｍ　ｖｓ　ＬＯＯμＭ）。 ・また、Ｎ−ジクロロアセチルリゾＧＭ、による後処理
（２０分間）も、断続的に投与されたグルタメートによ
って誘導される神経毒性作用の逆転に活性である（第６
図）。 ・Ｎ−ジクロロアセチルリゾＧＭ、およヒＮモノクロロ
アセチルリゾＧＭ、（Ｌ　Ｉ　ＧＡ　２１　）は、無酸
素条件において内生グルタメート誘導の神経毒性から保
護するのに活性である（第７図）。 ・Ｎ−モノクロロアセチルリゾＧＭ、は、Ｎジクロロア
セチルリゾＧＭ、の薬理学的特徴に匹敵する特徴を示す
（１０μＭの範囲での保護）。 インビボてＮ−ジクロロアセチルリゾＧＭ、およびＮ−
モノクロロアセチルリゾＧＭ、は、虚血によって導かれ
る損傷に匹敵する損傷を生成するＮＭＤＡのｌｃｖ注射
の後の致死から保護することができる。Ｎ−ジクロロア
セチルリゾＧＭ、およびＮ−モノクロロアセチルリソＧ
Ｍ、の作用は、Ｍｇ２゛によって、またはキヌレン酸に
よって得られる作用に匹敵する（第３表）。 ＝４７ 箪土青　Ｎ２Ａ細胞における軸索生成活性軸索を有する
　３ｉ１　Ｔｄｒ 細胞の形態学　（４８時間） （２４時間）％　　ｎ・３ 対照　　　　　　　　＜５　　　４０２７１±３５８４
（ｎ・６）対照＋ＤＭＳＯ＜５　　　’　　　ｎｄＧＭ
ｌ、　　　　ｌｘｌ、０”ａＡ　　７０−８０　　４０
８３４±１８８５ＬＩＧＡ　　２１１ｘｌＯ−’Ｍ　　
８０−９０　　１１２５６ｉ１５９４５ｘｌＯ−５Ｍ　
　８０−９０　　３６０１６±５０３０５Ｘ］Ｏ−”Ｍ
　　　＜５’　　　４３０３５±４８７ＬＩＧＡ　　　
　２２　１ＸＩＯ−’Ｍ　　　　＜５　　　　　　　　
　　ｎｄＬＩＧＡ　　２１　　＝　　Ｎ〜モノクｌＩＵ
γセチルリゾＧＭＬＩＧＡ　　２２　　＝　　Ｎ’　−
モノクロＩアセチルリゾＧＭＶ皆　Ｎ２無酸素（顆粒細
胞） ＴＴ （４８時間） ｎ・３ ０、２８４±０．０１（ｎ４） ｄ （１，２５９：ｔｏ　００７ ０１５８±０．０１ ０２４３±０００８ ０３２４土００１ ｄ （Ｊ、（１００μｌＡ、　　６０分）　　　　　　　　
　　　　　　　　　　　Ｑ、、＋６０１（１，０１，［
ｌ（１，１，［］％）Ｎ−ジク

【用アセチルリゾａｔ（
５μＭ、　１０分）　　　　　　　　０．１６３．！：
０．０１２（ｉｉ２％）（Ｎ２室）に置き、次いで元の
培地に戻した。２／Ｉ時間後にＭ”ＦＴと反応させた。 通常、無酸素はＭ　ｇ　２“の非存在下で行った。 用量　　　致死数　　致死率 処　理　　　　　　　ｎモル　ｍｇ／ｋｇ（致死数／　
（処理故に食塩水ｉｃｖ　＋　Ｐｉ３Ｓ　ｓｃ ＮＭＤＡ　ｉｃｖ　＋　ＰＢＳ　ｓｃ ＮＭＤＡ　＋　ＡＧＦ、ｓｃ ＮＭＤＡ　”ＡＧＦ２ｓｃ ＮＭＤＡ　＋　ＡＧＰｐ　ｓｃ １／３２　　　　１＋ ２２／４］　　　　５３．６ ２ｆ１０　　２５　　　　３／１．７　　　１．７．６
１．０ｍ２５．、．０／９　　　　０ １５　　　１．８５　　０／８　　　　　ＯＮＭＩ）Ａ
ｉｃｖ→ＬＩＧＡ２０ｓｃ２００２８］／８１２．５Ｍ
ＭＤＡｉｃｖ＋ＬＩＧＡ　　２１ｓｃ　　２００　　２
１　　　　０／８　　　　　ＯＮＭＤ八　ｉｃｖ　　＋
　　ＭＫ　　８０１　　ｉ、ｐ、　　　　　　　７５　
　　　　２　　　　　　　６／１６　　　　　　３７１
、ＩＯＡ　　２０　　＝　　Ｎ−ジクロアセチルリゾＧ
Ｍ。 １、、ＩＧＡ　　２］　　＝　　Ｎ−モノクロロアセチ
ルリゾＧＭＮＭＩ）Ａ注射（２５ｎモル、ｉ、　Ｃ，Ｖ
、　）の１時間前、および注射直後に、表に示した用デ
および経路で、動物（７日齢、体重」３９）を処理した
。致死数は処理の５日後まて調へた。 毒性の強さ １．ウサギの血液における溶血 方法：化合物の溶液１００μρを、新鮮なウサギの血液
ＩＪＩρ（血液１２酎あたリヘバリンナトリウＡ３００
ＵＳＰユニット）中、室温で５分間インキュベートした
。遠心分離（３０００ｒｐｍ、３分間）後、希釈した血
漿を分光測光（波長−５４５ｎｍ）によって測定した。 溶血活性は、スフィンゴシン誘発溶血の割合（％）で表
される。 結果二Ｎ−アシルリゾ誘導体は、ＩＪＩＭの濃度までウ
サギ血液において溶血を誘発しなかった。 ２、神経毒性 大脳顆粒細胞の一次培養液中でＧＭ、のＮ−アシルリゾ
誘導体の神経毒性を試験した。 ２４時間後および化合物との２時間のインキュベートの
後にＦＤＡ−ＰＩ染色を行った。 結果：試験したＮ−アシルリゾ誘導体は、活性濃度の少
な（とも２倍の濃度で神経毒性を生じた。 この薬理学的性質の故に、本発明のＮ−アシル−リゾガ
ングリオシド誘導体は、以下の疾病工大脳虚血、低血糖
症および低酸素症のような代謝性脳障害、毒物由来の脳
障害、外傷、老化、癲瘤、パーキンソン病およびハンテ
イングトン舞踏病のような神経退化性障害、精神障害に
おける薬物として用いることができる。 エステル、内部エステル、アミドおよび過アシル化物の
ような、本発明のＮ−アシル−リゾガングリオシド類の
誘導体の全ては、ガングリオシドに対応する誘導体に関
してこれまでに記載されている方法と同じ方法によって
得ることができる。 本発明は、特にこれら誘導体の混合物、例えば、本発明
のＮ−アシル−リゾガングリオシドの混合物から得られ
るものあるいはガングリオシドの混合物から得られるも
のをも含んでいる。 新規なＮ−アシル−リゾガングリオシド誘導体における
エステル基は、特に、脂肪族アルコールから、詳しくは
最大１２個、特に６個までの炭素原子を有する脂肪族ア
ルコールから誘導されるか、１〜３個の低級アルキル基
（Ｃ７〜４）（例えばメチル基）によっ°Ｃ置換されて
いることもある唯一のベンゼン環および脂肪族鎖に最大
４個の炭素原子を有するアリール脂肪族（ａｒａｌｉｐ
ｈａｔｉｃ）アルコールから誘導されるか、唯一の脂環
式の環および最大１４個の炭素原子を有する脂環式もし
くは脂肪族脂環式アルコールから誘導されるか、または
最大１２個、特に６個までの炭素原子およびＮ、Ｏおよ
びＳからなる群から選択される異項原子を含有する唯一
の複素環式の環を有する複素環式アルコールから誘導さ
れる。 本発明のＮ−アシル−リゾガングリオシド誘導体におけ
るカルボキシ官能基のアミド基は、好ましくは最大１２
個の炭素原子を有するあらゆる級のアミンからまたはア
ンモニアから誘導される。 上記アルコール類およびアミン類は、非置換であるか、
または、特にヒドロキシノ店、アミノ基、アルキル部分
に最大４個の炭素原子を有するアルコキシル基、カルボ
キシ基、アルキル部分に最大４個の炭素原子を有するカ
ルバアルコキシ基、アルキル部分に最大４個の炭素原子
を有するアルキルアミノ残基もしくはジアルキルアミノ
残基からなる群から選択される官能基によって置換され
ていてもよく、飽和または不飽和、特に二重結合を１つ
だけ有している不飽和であってもよい。 本発明のＮ−アシル−リゾガングリオシド類のカルボキ
シ官能基をエステル化するアルコール類は、１価または
多価であってよく、特に２価である。 脂肪族アルコールとしては、特に、メチルアルコール、
エチルアルコール、フロビルアルコール、イソプロピル
アルコール、ｎ−ブチルアルコール、イソブチルアルコ
ール、ｔｅｔｔ−ブチルアルコールのような最大６個の
炭素原子を有する低級アルコール、オヨヒエチレングリ
コール、プロピレングリコールのような２価のアルコー
ルが挙げられる。 アリール脂肪族アルコールとしては、特に、ベンジルア
ルコールおよびフェネチルアルコールのような唯一のベ
ンゼン残基を有するアルコールが挙げられ、脂環式アル
コールとしては、好ましくは、シクロヘキシルアルコー
ル（シクロヘキサノール）、テルペンアルコール（例え
ば、メンタノール、カルボメンソール）、またはテルピ
ネオール、テルピネノールもしくはピペリトールのよう
な唯一・の脂環式の環を有するものが挙げられる。複素
環式アルコールとしては、特に、テトラヒドロフラノー
ルまたはテトラヒドロビラノールが挙げられる。 Ｎ−アシル−リゾガングリオシド類のカルボキシ基をエ
ステル化するためには、例えば最大４個の炭素原子を有
する、例えばアミン官能基によって置換された脂肪族ア
ルコール（例えばアミノアルコール）、特に、ジアルキ
ル（０１〜４）−アミノ基を有するアミノアルコール（
例えば、ジエチルアミノエタノール）を使用することも
できる。 本発明化合物のカルボキシアミド官能基は、アンモニア
（この場合のアミドは非置換アミド−ＣＯＮＨ，である
）、または１級もしくは２級アミン、特に最大１２個の
炭素原子を有するアミンから誘導される。このようなア
ミンは、芳香族、複素環式、脂環式のものであってよい
が、特に脂肪族のものである。本発明の好ましい態様は
、最大１２個の炭素原子を有する脂肪族アミンのカルボ
キシアミド誘導体であり、これらのアミンは、例えば、
メチルアミン、エチルアミン、プロピルアミン、ヘキシ
ルアミン、ジメチルアミン、ジエチルアミン、ジイソプ
ロピルアミン、デヘキシルアミンのような１〜６個の炭
素原子を有するアルキルから誘導されるアルキルアミン
、あるいは３〜６個の炭素原子を有する直鎖もしくは１
〜３個のメチル基によって置換された対応する鎖を有す
るアルキレンから誘導されるアルキレンアミンのような
、開裂（ｏｐｅｎ）、直鎖状もしくは分枝鎖状または環
式のアミンであるか、またはピロリジン、ピペリジン、
アゼピンのような環式であってよい。これらのアミンに
おけるアルキル基またはアルドキシムは、別のへテロ原
子によって、特に窒素原子によって、炭素原子鎖におい
て中断されているか、または置換されていてもよく、こ
の場合、本発明のアミドは、例えば、エチレンジアミン
、トリメチレンジアミン、ピペラジンのようなジアミン
から誘導されており、あるいは、該アルキル基またはア
ルドキシムは、酸素原子もしくは硫黄原子によって中断
されているかまたは置換されていてもよく、この場合、
本発明のアミドは、アミンエタノールもしくはアミノプ
ロパツールのようなアミノアルコールの誘導体であるか
、またはモルホリンもしくはチオモルホリンである。本
発明は、上記グループＡおよびＢのガングリオシド類か
ら誘導された上記Ｎ−アシル−リゾガングリオシドおよ
びその混合物のエステルおよびアミドを提供するもので
ある。 本発明は、本明細書に記載のエステルおよびアミドの糖
部分、シアリン酸およびセラミドのヒドロキシルにおけ
る過アシル化誘導体をも含む。このような誘導体におい
て、アシル基は、脂肪酸、芳香族、アリール脂肪族、脂
環式またはへテロ環式の酸から誘導されてもよく、これ
らは、好ましくは、最大１０個の炭素原子、特に６個の
炭素原子を有する脂肪族の酸、例えばギ酸、酢酸、プロ
ピオン酸、酪酸、吉草酸、カプロン酸、カプリン酸から
誘導される。すなわち、これらは、同数の炭素原子を有
しているが置換されている酸、特に乳酸のようなアルコ
ール酸（ｈｙｄｒｏｘｙ　ａｃｉｄ）、グリシンのよう
なアミノ酸、またはコハク酸、マロン酸もしくはマレイ
ン酸のような二塩基酸から誘導されてもよい。 芳香族酸としては、唯一のベンゼン環を有スるもの（特
に、安息香酸）、およびｐ−アミノ安息香酸、サリチル
酸もしくはフタル酸のようなメチル、ヒドロキシ、アミ
ノまたはカルボキシ基を有するその誘導体が挙げられる
。 本発明は、遊離カルボキシ官能基を有するＮアシルリゾ
ガングリオシド類および上記混合物の過アシル化誘導体
を提供するものでもある。これらの誘導体に関しては、
本明細書に挙げた酸から誘導されるアシル化誘導体が特
に重要である。 新規な誘導体のうち重要なものは、エステル化したか、
アミドに転換したか、ヒドロキシ基を過アシル化したガ
ングリオシド類からなり、そのエステル基は、飽和して
いるか、非置換またはヒドロキシ基、最大４個の炭素原
子を有するアルコキシ基、アミン基、アルキル部分に最
大４個の炭素原子を有するアルキルアミノ基もしくはジ
アルキルアミノ基、カルボキシ基、またはアルキル部分
に最大４個の炭素原子を有するカルノ・ルコキシ基て置
換されている、最大６個の炭素原子を有する脂肪族アル
コール；多くて１つの二重結合を宜する、対応するアル
コール：非置換または１〜３個のメチル基によって置換
されている唯一のベンゼン環を有するアリール脂肪族ア
ルコール；非置換または１〜３個のメチルＪλによって
置換されているシクロへ牛サン環を有し、脂肪族部分に
最大４個の炭素原子を有する環式脂肪族または脂肪環式
脂肪族アルコール、またはテトラヒドロフラノールもし
くはテトラヒドロビラノールから誘導され、そのアミド
基は、アンモニア、またはアルキル部分に最大６個の炭
素原子を有し、アルキレン部分に／１〜８個の炭素原子
を有するアルギルアミン、ジアルキルアミンもしくはア
ルキレン”アミンから誘導され、そのアルキルもしくは
アルドキシムは、窒素原子、酸素原子および硫黄原子か
らなる群から選択されるヘテロ原子によって炭素原子を
中断されていてもよく（ｖ素原子か存在する場合はアミ
ノ基−Ｎ　Ｈは最大４個の炭素原子を有するアルキルに
よって置換されており）、および／またはアミノ基、ア
ルキル部分に最大４個の炭素原子を有するアルキルアミ
ノ基もしくはジアルキルアミンｈ（、ヒドロキシ基もし
くはアルキル部分に最大４個の炭素原子を有するアルコ
キン基、最大３個のメチル基によって置換され、脂肪族
部分に最大４個の炭素原子を有していてもよいヘンセン
環を１つだけ有しているアリール脂肪族アミン；からな
る群から構成される装置換されていてもよく、そのヒド
ロキシル基をエステル化するアシル基は、最大６個の炭
素原子を有する飽和または不飽和脂肪酸から誘導され、
ヒト゛ロキシ基、アミン基およびカルボキシ基からなる
群から選択される官能基またはその塩によって置換され
ていてもよい。 本発明の新規な化合物の特徴である」１記Ｎ−アシル基
は、２〜２４個の炭素原子を有する脂肪酸から誘導され
る。この酸は、多塩基性であってよいが、唯一のカルボ
キシ官能基を有する最初の蓋要なものである。これらは
、直鎖状が好ましい。 分枝鎖を有する基において、側鎖は、好ましくは、最大
４個の炭素原子を有する低級７′ルキルてあり、特にメ
チル基である。了シル、特に分枝鎖をイイするア／ルは
、好ましくは、最大１２個の炭素原子を有し、特に６個
の炭素原子を有する。アシル２．ｔは、好ましくは飽和
しているが、二重結合を、好ましくは１〜２個有してい
てもよい。 Ｎ−アシル基を構成する上記極性基は、好ましくは１〜
３個であり、互いに同一であるかもしくは相異していて
よい。好ましくは、α位で置換されているアシル基を有
する化合物、特に炭素原子の含有率が高いものおよび／
または不飽和のものである。 上記極性基は、ヒドロキシ基またはアミノ基のような遊
離官能基、またはエステル、エーテル、ケタール等のよ
うな官能的な１透導体である。例えば、ヒト゛ロキシ基
のエステルは、脂肪族、芳香族、アリール脂肪族、脂環
式またはへテロ環式の酸から誘導されていてよい。この
ようなエステル基は、第一に治療学的に許容される酸か
ら誘導される：脂肪族酸は、好ましくは、酢酸、プロピ
オン酸、酪酸、もしくは吉草酸（例えばイソ吉草酸）、
またはこれらの置換誘導体、例えば、アルコール酸（例
えば、グリコール酸、α−またはβ−オキシ酪酸、乳酸
）、アミノ酸（例えば、グリシン、アラニン、バリン、
フェニルグリノンのような中性アミノ酸）、または置換
されていてもよい二塩基酸（例エバマロン酸、コハク酸
、マレイン酸、リンコ酸）であり、芳香族酸は、例えば
安息香酸、または１〜３個の低級アルキル基、低級ヒド
ロキシもしくはアルコキシ基、あるいは塩素原子、フッ
素原子または臭素原子のようなハロゲン原子によって置
換されているその誘導体である。 アリール脂肪族酸としては、」〕記のように置換されて
いてもよいフェニル酢酸またはフェニルフロピオン酸の
ようなベンゼン環を１つだけ有するものが挙げられる。 脂環式酸は、例えば、ヘキサンカルホン酸またはヘキサ
ンカルホン酸のような５または６個の炭素原子の環を有
するものが好マシい。ヘテロ環式の酸としては、ニコチ
ン酸、イソニコチン酸またはα−ピロリジンカルボン酸
のような、ピリジンまたはピペリジンの誘導体の如きヘ
テロ環を１つだけ有するものか挙げられる。 エーテル化ヒドロキシ基は、エステル化されたシアリン
酸に関して−に連したアルコールから誘導してよい。最
大４個の炭素原子を有する脂肪族酸、または脂肪族部分
に最大４個の炭素原子を有し、上記のような置換されて
いてもよいヘンセンＪ、（を有するアリール脂肪族アル
コールでエーテル化した基が好ましい。 置換アミノ基は、シアリン酸のアミド乱に関して上述し
たアミンから誘導されるものであってもよい。好ましく
は、最大４個の炭素１皇子を有するアルキル基、または
脂肪族部分に最大４個の炭素原子を有し、上述のように
置換しＣいてもよいヘンゼン基を有するアラルキル基て
置換されているアミン基が挙げられる。置換アミノ基は
、例えば、エステル化したヒト四キン基に関して記述し
た酸のうち１つ、特に最大４個の炭素原子を有する脂肪
酸でア／ル化されたアミン基であってもよい。 本発明の上記定義において「低級」と記載され、ケトン
、アルテヒド、アルＩ・キシム、メルカプト、スルポニ
ノク、スルファミド、スルホンおよびスルホキシドの置
換に関するヒドロカルビル脂肪族基またはアリール脂肪
族基は、最大８個、好ましくは１〜４個の炭素原子を有
する基であり、ヒドラゾン基は、このようなヒドロカル
ビル基から誘導される基であるか、フェニルヒドラゾン
基である。 本発明のＮ−アシル基の極性置換基のようなエステル化
カルボキシ基は、ガングリオシド誘導体のシフ′リン酸
基のエステルに関して上述したものであってよいが、こ
れらは、好ましくは、最大８個の炭素原子、特に４個の
炭素原子を有する脂肪族のアルコールから誘導される。 Ｎ−−アシル基を誘導する」−記の数の炭素原子を有す
る低級飽和酸としては、ハロゲン化物、特に塩化物また
はフッ化物、特に２位て二塩化されているものか挙げら
れる。例えは、ジクロロ酢酸、！・ジクロロ酢酸、およ
びそのフッ素化類似体または臭素化類似体；２，２−ジ
クロロプロピオン酸、２３−ジクロロプロピオン酸、２
．２．：３−１−ジクロロプロピオン酸、２．２−シク
ロローｎ　−酪酸、２．２−ジクロロ吉草酸、２−クロ
ロイソ吉草酸、２Ｉ３−ジクロロ吉草酸、ペンタフルオ
ロフロピオン酸、３．３−ジクロロ吉草酸、３−りロワ
２．２−７メチルプロピオン酸、クロローンフルオロ酢
酸、２，２−ジクロロカプロン酸、２モノクロロプロピ
オン酸、２−モノクロローｎ−酪酸、２−モノクロロ吉
草酸、２−モノクロロカプロン酸、およびこれらの酸の
フッ素化類似体または臭素化類似体；２−クロロパルミ
チン酸、２クロロステアリン酸、２−クロロオレイン酸
、２クロロラウリンＬ　２−クロロベヘンＱＬ　４クロ
ロフエノキ７酢酸、２−ヒドロキシフロピオン酸（乳酸
）、３−ヒドロキシプロピオン酸、２ヒドロキ／醋酸、
２−ヒドロキシ吉草酸、３−ヒドロキシ吉草酸、２，３
−ンヒトロキン酪酸、および２，３−ジヒドロキシ吉草
酸または最大４個の炭素原子を有する低級脂肪族アルコ
ールによるこれらのエーテル、または、最大４個の炭素
原子を有する低級脂肪族酸、または上記芳香族、了り−
ル脂肪族、脂環式、またはへテロ環式の酸のうちの１つ
によるこれらのヒドロキシ基のエステルメトキシ酢酸、
１２−ヒトロキ／ステアリン酸、２−（４−ヒドロキシ
フェノキシ）プロピオン酸、２−ヒドロキシイソカプロ
ン酸、２−ヒドロキシイソ酪酸、４−フルオロフェノキ
シ酢酸、エトキシ酢酸、ピルビン酸、アセト酢酸、レブ
リン酸および最大４個の炭素原子を有する低級脂肪族ア
ルコールによるこれらのケタール、および／または、メ
ルカプト酢酸、２−メルカプトプロピオン酸、２−メル
カプト酪酸、２−メルカプト吉草酸のようなオキシムも
しくは最大４個の炭素原子を有するアルキル基による置
換オキシム、および最大４個の炭素原子を有する低級脂
肪族１価のアルコールによるこれらのエーテル、または
最大４個の炭素原子を有する低級脂肪酸によるこれらの
エステル、２−メルカプ１へラウリン酸、オレイン酸お
よびパルミチン酸、および上記のタイプのこれらのエス
テルもしくはエーテル；マロン酸、グルタル酸、モノメ
チルグルタル酸、３−ヒドロキシ−３メチルグルタル酸
、マレイン酸、リンゴ酸、コハク酸、フマル酸、アゼラ
イン酸、および最大４個の炭素原子を有する脂肪族アル
コールによるこれらのエステル、スルホ酪酸、２〜スル
ホプロピオン酸、２−スルホ酪酸、２−スルホ吉草酸、
および最大４個の炭素原子を有する脂肪族アルコールに
よるこれらのエステルが挙げられ、スルホン基によって
置換された酸としては、２−スルホラウリン酸、２−ス
ルホオレイン酸、２−スルホパルミチン酸、２−スルホ
ステアリン酸、およびこれらの上記タイプのエステル；
ならびに対応するスルファミドまたは最大４個の炭素原
子を有する低級アルキル基あるいは４もしくは５個の炭
素原子を有するアルドキシムによって置換されているス
ルファミド；アルキルが最大４個の炭素原子を有するア
ルキルスルホキシドまたはアルキルスルホン基によって
２位で置換されている酢酸、プロピオン酸、酪酸、吉草
酸ニジアン酢酸、２−シアノプロピオン酸、２−シアン
酪酸、２−シアン吉草酸、アミノ酢酸、２−アミノプロ
ピオン酸、２アミノ酪酸、３−アミノ酪酸、４−アミノ
酪酸、２−アミノ吉草酸、４−アミノ吉草酸、および最
大４個の炭素原子を有する、アミン水素原子を置換する
、■または２つのアルキル、または４もしくは５個の炭
素原子を有するアルドキシムによるその誘導体、または
１〜４個の炭素原子を有する脂肪酸あるいは上記芳香族
、脂環式もしくはヘテロ環式酸のうち１つを有する低級
脂肪酸でアシル化されたアミン基による誘導体、最大４
個の炭素原子を有するアルキルから誘導される４級アミ
ノ基の４級アンモニウム塩の基；エチオニン、ジメチル
グリシン、３−ジエチルアミノプロピオン酸、カルニチ
ン、システィン酸が挙げられる。 遊離のカルボキシ官能基を有する本発明の新規Ｎ−アシ
ル−リゾガングリオシド化合物の金属または有機塩基の
塩を製造することもでき、これらも本発明の一部をなし
ている。 二塩基性の酸とのエステルまたは過アシル化アミドなど
の遊離の酸官能基を有する本発明の他の誘導体の金属ま
たは有機塩基の塩を製造することもできる。また、本発
明の一部をなしているのは、塩基性官能基（例えば、遊
離のアミノ官能基）を含有しているガングリオシド誘導
体（例えば、アミノアルコール類とのエステル）の酸付
加塩である。 金属または有機塩基の塩の中で特に挙げられるのは、治
療に用いることができる塩であり、例えばアルカリ金属
またはアルカリ土類金属（カリウム、ナトリウム、アン
モニウム、力Ｊレシウム、マグネシウムなど）の塩、ま
たは土類金属（アルミニウムなど）の塩、並びに、例え
ば脂肪族、芳香族または複素環式の１級、２級または３
級アミンなどの有機塩基（メチルアミン、エチルアミン
、プロピルアミン、ピペリジン、モルホリン、エフェド
リン、フルフリルアミン、コリン、エチレンジアミン、
アミンエタノールなど）の塩である。 本発明のガングリオシド誘導体の酸付加塩を与えること
ができる酸の中で、特に挙げておくべき酸は、水素酸（
塩酸、臭化水素酸なと）、リン酸、硫酸、最大炭素原子
数７の低級脂肪族酸（ギ酸、酢酸またはプロピオン酢酸
など）、コハク酸またはマレイン酸である。ピクリン酸
のような治療学的に有用ではない酸または塩基を新規ガ
ングリオシド誘導体の精製に用いることができ、これら
も本発明の一部をなしている。 遊離型およびそれらの塩型の誘導体は極めて近い関係に
あるので、本発明の説明では、これら２つの型について
は区別せずに説明する（そうではないことを明示しない
とき、またはその意味するところがこの可能性を排除す
るものでないとき）。 本発明の新規Ｎ−アシル−リゾガングリオシドまたはそ
れらの官能基誘導体の中で、特に挙げておくべきものは
、上述の置換された酸のいずれかから導かれるアシルを
有し、かつ基本のガングリオシドとして、ＧＭ、、ｃｘ
３、Ｇ　Ｄ　ｌ　ａ　％　Ｇ　Ｄ　Ｉ　ｂ、Ｇ　Ｔ　ｌ
　ｂからなる群から選ばれるガングリオシドを有するも
の、それらのシアリン酸エステル（エチル、プロピル、
イソプロピル、ｎ−ブチル、イソブチル、ｔｅｒｔ−７
’チル、ベンジル、アリル、エトキシカルボニルメチル
、シクロヘキシルアルコールから導かれる）、それらの
シアリン酸アミドおよびアミド（メチルアミン、エチル
アミン、プロピルアミン、ジメチルアミン、ジエチルア
ミン、ピロリジン、ピペリジン、ピペラジン、モルホリ
ン、チオモルホリンから導かれる）、それらのパーアン
レート（パープロピオニレート、パーブチリレート、パ
ーマレイニレート、パーアンレート、パーアンレート）
、および上記のシアリン酸エステルおよびアミドのパー
アシレート類似体である。 さらに挙げておくべきものは、上に挙げた酸でＮ−アシ
ル化された、ガングリオシドＧ　Ｍｌ、Ｇｎｌ’ａｓＧ
　Ｄｌｂｓ　ＧＴＩｂから導かれるＮ−アシル−リゾガ
ングリオシドを主として含有しているＮ−アシル−リゾ
ガングリオシドの混合物、並びに、単一のガングリオシ
ドの誘導体について上に挙げたものと同じ官能基誘導体
であり、とりわけ以下に挙げるＮアシルリゾガングリオ
シド並びにそれらのエステルおよびアミドおよびパーア
シレート類似体であるニジクロロアセチルリゾＧＭ；、
クロロアセチルリゾＧ、、、、３−クロロピバロイルリ
ゾＣＭ１％　ヒドロキシアセチルリゾＧ、Ｉ１１トリフ
ルオロアセチルリゾＧ、、、　　トリクロロアセチルリ
ゾＧ、、、）リブロモアセチルリゾＧ　Ｍ　Ｉ　％メル
カプトアセチルリゾＧ　Ｍ　Ｉ　％マレイルリゾＧ、、
、’１２−ヒドロキシステアロイルリゾＧＭ０．２−ヒ
ドロキシイソブチロイルリゾＧ　Ｎ　ｌ　ｓフルオロア
セチルリゾＧＭ１％ジフルオロアセチルリゾＧＨＩ−３
−アミノプロピオニル９７０Ｍ１％シアノアセチルリゾ
Ｇ、、、３−ジエチルアミノプロピオニルリゾＧ　Ｍ　
Ｉ　％アミノアセチルリゾＧＭＩ。 本発明の新規リゾガングリオシド誘導体は既知の方法に
よって製造することもできる。適切な酵素を用いてガン
グリオシドのスフィンゴシン窒素ノドころで選択的に脱
アシル化して、他のアシル基（特に、ノイラミン酸のア
ミン基のアシル基）を無傷のまま保持するリゾガングリ
オシド直接得ることもできる。次いで、既知の方法によ
るアシル化によってＮ〜Ｎアシルリゾガングリオシド得
ることができる。別法では、ガングリオシドを化学的に
脱アシル化して、、デ−Ｎ−アセチルリゾガングリオシ
ド、即ちスフィンゴシンとノイラミン酸のアミノ基が脱
アシル化され、そしておそらくは既述のよう゛にヒドロ
キシ基がエステル化された化合物を得ることができる。 これらの生成物を既述のように既知の方法でアシル化し
て、デ−Ｎ−アセチル−Ｎ−アシル−リゾガングリオシ
ドを得ることができ、次いでノイラミン酸のアミノ基が
アセチル化される。 この変法は、スフィンゴシンのアミノ基の中間段階での
一時的な保護（例えば、ホスファチジルコリンとの疎水
性の相互作用によって、または保護基によるアシル化に
よって行うことができる）、それに続くノイラミン酸の
窒素のアセチル化とおそらくはスフィンゴシン窒素の脱
保護、および最後に上記の第１の場合のようなスフィン
ゴシン窒素のＮ−アシル化によって行われる（後記の工
程図を参照）。このすべての操作を上記のガングリオシ
ド混合物にも行いうることは勿論のことである。 所望であるなら、Ｎ−アシル−リゾガングリオシドにお
いて、シアリン酸のカルボキシ基またはこの酸のヒドロ
キシ基を官能基で変換すること、例えばカルボキシをエ
ステルもしくはアミドに、またはヒドロキシを酸によっ
てエステル化された基に変換することができる（過アシ
ル化）。一方では、これら官能基の変換の前、同時、ま
たは後に、セラミド残基のアシル基に存在する極性基を
官能基またはそれ以外の基によって変換すること、例え
ばヒドロキシ基をエステル化すること、アミノ基をアル
キル化すること、またはカルボニル基を０アルキルヒド
ロキシアミンと反応させることも可能である。 従って、本発明の方法は、リゾガングリオシドまたは、
デ−Ｎ−アセチルリゾガングリオシドまたはこれら化合
物の混合物を、所望によりアシル化する成分中の官能基
を一時的に保護した後に、（１）塩素、臭素および弗素
； （ｉｉ　）遊離のヒト、ロキン基、または有機酸もしく
は無機酸でエステル化されたヒドロキシ基；（ｉｖ）エ
ーテル化されたヒドロキシ基。 （■）低級脂肪族またはアリール脂肪族アルコールから
導かれるケト、ケタールおよびアセタール基； （１）低級アルキルまたはアラルキル基で置換されてい
ることもあるケｊ・キシム、アルド牛シムまたはヒドラ
ゾン基 ；（ｖｉ）遊離のメルカプト基、または低級脂肪族もし
くはアリール脂肪族酸でエステル化されたか、または低
級脂肪族もしくはアリール脂肪族アルコールでエーテル
化されたメルカプト基； ；（ｖｉｉ）遊離の、またはエステル化されたカルボキ
シ基。 （Ｉｉ）遊離のスルホン基、または低級脂肪族もしくハ
アリール脂肪族アルコールでエステル化されたスルホン
基： （ｆｆ）低級アルキルもしくはアラルキル基または低級
アルドキシムで置換されたスルファミド基またはスルフ
ァミド基； （＋）低級アルキルまたはアラルキル基から導かれるス
ルホキンドまたはスルホン基； （ｉｉ）ニトリル基； （Ｉｉ）遊離の、または置換されたアミノ基、およびこ
れらアミン基の４級アンモニウム誘導体： からなる群から選ばれる１またはそれ以上の極性基で置
換された炭素原子数２〜２４の脂肪族酸てアシル化する
ことからなる。 また、本発明の方法は、得られたデ−Ｎ−アセチル−Ｎ
−アシル−リゾガングリオシドまたはこの型の化合物の
混合物をアセチル化し、そして所望により、得られたＮ
−アシル−リゾガングリオシドまたはこの型の化合物の
混合物をエステルまたはアミドに、または内部エステル
に、またはヒドロキシの過アシル化に変換し、モして／
または所望により、Ｎ−アシル基を置換している極性基
を互いに変換し、そして所望により、得られた生成物を
適当な塩に変換することからなる。 上記方法のＮ−アシル化は常法によって、例えば出発物
質をアシル化試薬と、特に酸の反応性誘導体（その残基
が導入される）と反応させることによって行うことがで
きる。即ち、酸の反応性誘導体としてハロゲン化物また
は無水物を用いることができ、ピリジンまたはコリジン
などの３級塩基の存在下でアシル化を行うのが好ましい
。 反応は、無水条件下、室温もしくは加熱下で、またはシ
ョツテン−バウマン法に従い水性条件下、無機塩基の存
在下で好都合に行うことかできる。 ある場合には、反応性誘導体として酸のエステルを用い
ることもできる。アシル化において、ペプチドの化学で
用いられているような活性化カルボキシ誘導体が関与し
ている方法、例えば混合無水物またはカルボジイミドも
しくはイソオキサゾール塩の誘導体によって得られる誘
導体を用いる方法も使用可能である。 多数の製造方法の中で最も適しているものを以下に挙げ
る （１）酸のアジドとリゾガングリオシド誘導体の反応； （２）酸とＮ、　Ｎ’−カルホニルジイミダゾールから
得られる酸のアシルイミダゾールとリゾガングリオシド
誘導体の反応・ （３）酸およびトリフルオロ酢酸の混合無水物とリゾガ
ングリオシド誘導体の反応： （４）酸の塩化物とリゾガングリオシド誘導体の反応； （５）カルボジイミド（例えば、ジシクロへキシルカル
ボジイミド）の存在下、および所望により】−ヒドロキ
シベンゾトリアゾールなどの物質の存在下での、酸とリ
ゾガングリオシド誘導体の反応 （６）加熱による酸とリゾガングリオシド誘導体の反応
； （７）高温での、酸のメチルエステルとリゾガングリオ
シド誘導体の反応； （８）パラニトロフェノールとのエステルナトの酸のフ
ェノールエステルとリゾガングリオシド誘導体の反応； （９）酸の塩とヨウ化１−メチル−２−クロロピリジン
の間の交換によって導がれるエステルまたは類似産物と
りゾガングリオント誘導体の反応。 工程図 ガングリオシド ガングリオシド リゾガングリオシド Ｇ 遊離ヒドロキシ基もしくはメルカプト基もしくはカルボ
キシ基、または１級もしくは２級アミノ基を有する酸か
ら誘導された生成物の調製の場合、好ましくはペプチド
化学において用いられるこれらの保護方法を用いて、ア
シル化反応の間、このような基を保護するのが好ましい
。勿論、フタロイル基またはベンジルオキシカルボニル
基のような保護基は、反応の終わりに除去し易く、アミ
ノ基の保護を促進するのに役立つ。したがって、例えば
、γ−アミノ酪酸を含有する誘導体の製造において、ま
ず、この酸の誘導体を製造し、アミノ基をフタロイル基
と結合し、リゾガングリオシド誘導体によるアシル化の
後、ヒドラジン分解ニよってフタロイル基を除去する。 ベンジルオキシカルボニル基は、水素化分解によって除
去することができ、この残基は、ヒドロキシ基の保護に
も役立つ。カルボキシ基は、例えばペプチド化学におい
て用いられるアルコール類によるエステル化によって保
護することができる。 既述のように、セラミトチアシラーゼと呼ばれる酵素を
用いて、窒素上で酵素的に脱アシル化することによって
ガングリオシド類から出発リンガングリオシド類を得る
ことができる。この方法は、例えば、Ｊ、Ｂｉｏｃｈｅ
ｍ、　１０３、ｌ　（１９８８）に開示されている。出
発物質として用いることもできる、デ−Ｎアセチルリゾ
ガングリオシド類は、アルカリ加水分解剤、例えばテト
ラアルキルアンモニウムの水酸化物、水素化カリウムお
よび他のものによってガングリオシド類から得ることか
できる［Ｂｉｏｃｈｅｍｉｓｔｒｙ　２４．５２５、（
１９８５）　；　Ｊ、　Ｂｉｏｌ、　Ｃｈｅｍ、　２５
５．７６５７、（１９８０）　；　Ｂｉｏｌ、　Ｃｈｅ
ｍ、　Ｈｏｐｐｅ　５ｅｙｌｅｒ　３６７．２４１（１
９８６）　；　Ｃａｒｂｏｈｙｄｒ、Ｒｅｓ、　１７９
．３９３　（１９８８）　；　Ｂｉｏｃｈ。 Ｂｉｏｐｈ、Ｒｅｓ、Ｃｏｍｍ、　１４７．１２７　（
１９８７）、参照］。 上述の製造方法の変形例における出発物質でもある、デ
−Ｎ−アセチルリゾガングリオシド類は、別法での出発
物質を製造するための、ずなわち、リゾガングリオシド
類を製造するための出発物質をも構成する。本明細書中
に記載の工程図かられかるように、この転換は、工程図
の工程（３）および（４）に従って行うことかできる。 方法（３）の反応（ａ）および（ｂ）ならびに方法（４
）の反応（ａ）、（ｂ）および（Ｃ）は既に知られてい
る。強酸性の試薬を用いる方法または強アルカリもしく
は酸条件下で行う方法のような基本的なカングリオシト
構造を変える効果を有する方法、または糖部分のヒドロ
キシ基の望ましくないアルキル化に導く方法を除いて、
既に知られている方法に従って、」１記方法に従って得
られる新規なＮ−アシルリゾガングリオシド類のカルボ
キシまたはヒドロキシ誘導体を製造することができる。 Ｎ−アシルガングリオシド類のカルボキシ基のエステル
化ま・たはアミドへの転換は、例えば、ガングリオシド
類に関する米国特許第４．７１３．３７４号（発行日：
１９８７年１２月１５（ヨ）の記載に従って行うことが
できる。新規な誘導体の内部エステルの形成は、例えば
、米国特許第４．５９．３．０９１号および欧州特許第
００７２７２２号の記載のように、ガングリオシドの内
部エステルの製造と同様に行ってもよい。 これらの内部エステルは、ヒドロキシ糖頌を有するシア
リン酸カルボキシ基のラクトン化によって形成される化
合物を含むだけではなく、例えば、シアリン酸カルボキ
シル基とンアリン酸ヒドロキシル基との間で形成される
ラクトン環を含む化合物をも包含する。これらの後者は
次に糖部分と結合し、別のラクトン構造も可能となる。 内部エステルの形成に関する上記特許の製造法は、無水
条件下、非水有機溶媒中、ラクトン化剤でガングリオシ
ドを処理することからなる。適切な有機溶媒としては、
ジメチルスルホキシド、ジメチルホルムアミド、スルホ
ラン、テトラヒドロフラン、ジメトキシエタン、ピリジ
ンまたはこれらの溶媒の混合物が挙げられる。適切なラ
クトン化剤としては、シンクロへキシルカルボジイミド
、ベンジルイソプロピルカルボジイミド、ペンシルエチ
ルカルボジイミト、２−クロロ−１＝メチルピリジン塩
、エトキンアセチレンおよびウッドワード試薬（Ｎ−エ
チル−５−フェニルイソキサゾール−３′スルホネート
）のような有機溶媒に可溶性のカルボ／イミド類か挙げ
られる。比較的古い方法には、カングリオシトと酢酸ま
たはトリクロロ酢酸との間の、または水もしくは水性媒
質に可溶性のカルボジイミドを用いる反応が含まれる。 これら全ての方法は、新規なＮ−アシル−リゾガングリ
オシド類の内部エステルの製造に用いることができる。 カルボキシ基の「外部」エステル化、ずなわぢ、上記の
一連のアルコール類によるエステル化に関して、例えば
、ダウエックス（Ｄｏｗｅｘ）　５０のような樹脂の如
きイオン交換体の存在下、Ｎ−アシル−リゾガングリオ
シド類と所望のアルコールとを反応させることかできる
が、その収率は内部エステルの同時形成および非常に長
い反応時間によって制限される。別のエステル化方法は
、タウエ・ノクスー５０Ｗｘ８（Ｈ型１００〜２００メ
ツシｉ）のような樹脂にアルコールを通し、同じアルコ
ールに溶解した溶離液を、対応するジアゾアルカンで処
理することからなる。 別の好ましいエステル類の製造法は、リゾガングリオシ
ド誘導体の金属塩をエーテル化剤で処理することからな
る。アルカリ金属塩、アルカリ土類金 属 ル化剤としては、文献に挙げられたもの、特に種々の無
機酸または有機スルホン酸（水素酸など）のエステル、
すなわち、ヨウ化メチルまたはヨウ化エチルなどのハロ
ゲン化ヒドロカルビル、または中性のスルフニー・トも
しくはヒドロカルビル酸、スルファイト、カーホイート
、シリケート、ホスファイトまたはヒドロカルビルスル
ホネート（ベンゾスルホネートもしくはｐ＝トルオスル
ホネートなとを用いることができる。反応は、適切な溶
媒、例えば、アルコール、好まし《は誘導されるアルキ
ル基に対応するアルコール中で行うことができ、ジオキ
サンまたはジメチルスルホキシドのようなエーテル、ケ
トンの如き非極性溶媒中でも行うことができる。 １つの特に好ましいエステル化方法は、所望のアルコー
ルとその対応するアルコール中物でリゾガングリオシド
誘導体の内部エステルを処理することからなる。反応は
、アルコールの沸点に対応する温度で行われるが、より
低い温度で行うこともでき、その場合は、反応時間がよ
り長（なる。 本発明のリゾガングリオシド誘導体のアミドは、既知の
方法によって製造することができ、特に、以下の方法、
すなわち、 ａ）アンモニアまたはアミンとＮ−アシル−リゾガング
リオシド誘導体の内部エステルとの反応ｂ）アンモニア
またはアミンとＮ〜ルアシル、リゾガングリオシド導体
のカルボキシエステル類との反応 Ｃ）アンモニアまたはアミンと活性化カルボキシ基を有
するＮ−アシル−リゾガングリオシド誘導体との反応 によって製造することができる。 反応ａ）は、溶媒の存在または非存在下で、アミドを生
成することかできるアンモニアまたはアミンによるガン
グリオノド内部エステルの直接処理によって行うことか
できる。この反応は、例えば−５〜＋１０°Ｃのように
かなり低温でも行うことができるが、好ましくは、例え
ば３０〜１２０°Ｃのように室温またはそれ以上で行う
。溶媒としては、ケトン類、芳香族炭化水素、ジメチル
ホルムアミド、ジメチルスルホキシド、ジオキサンまた
はテトラヒドロフランを用いることができる。 反応ｂ）も、好ましくはａ）について記載した条件下で
行われるであろう。 本発明に記載のエステル類と同様に別のエステル類、例
えばフェノール類とのエステル類を用いることもできる
。 方法Ｃ）による反応におけるノＪルホキシ基の活性化に
対しては、ペプチド化学において知られている方法を用
いるべきであり、これにより、ガン例えばナトリウム塩
を形成している場合、まず、ダウエックス型イオン交換
体または別の酸性イオン交換体によって塩を処理するの
が望ましい。例エバ、１−ヒドロキシヘンシトリアゾー
ルの存在下、カルボジイミド類、例えばシンクロへキシ
ルカルボジイミド、ペンジルイソプロピルカルポジ８フ イミドまたはベンジルエチルカルボジイミドの存在下ま
たはＮ、Ｎ”−カルボニルジイミダゾールの存在下で縮
合方法を用いることができる。 糖またはシアリン酸部分のカルボキシ基および所望によ
るセラミド残甚のアシル化は、既知の方法、例えば、好
ましくはピリジンまたはコリジンのような３級塩基の存
在下、アシル化に用いることができる酸のハロゲン化物
または無水物によるアシル化によって行うことができる
。このようにして、上記過アシル化誘導体が得られる。 本発明の方法の定義に従って、、デ−Ｎ−アセチルリゾ
ガングリオシドをアシル化し、アシル化後にノイラミン
酸のアセチルアミノ基を再生することもできる。このよ
うなアセ、チル化も、既知の方法で行うことができる。 この場合、比較的穏やかな方法がＮ−アシル化に選択さ
れ、ノイラミン酸のヒドロキシ基は変化しないまま残さ
れる。スフィンゴシン窒素におけるアシル化反応の後に
行われるこ、の基のアセチル化は、特に、無水酢酸の使
用による激しい方法を用いて行うことができる。 本方法に従って得られた化合物において、所望により、
Ｎ−アシル基に存在する官能基を互いに転換することが
できる。例えば、穏やかな試薬および条件を用いて、シ
アリン酸基のようなヒドロキシ基をそのままにし、選択
的にその他のヒドロキシ基をアシル化することができる
。ヒドロキシ基またはメルカプト基をエーテル化、アミ
ノ基をアルキル化、またはアミン基をアシル化すること
ができる。また、塩を形成しうる基奇有する、上記方法
に従って得ることができる全ての化合物において、この
ような基を、既知の方法で塩化することができる。 本発明は、いずれかの段階で製造工程を中断したり、ま
たは中間化合物を用いて開始し、残りの段階を行ったり
、または出発生成物をその反応系で生成させたりする、
新規誘導体の製造方法の変法をも含むものである。 本発明の別の目的は、活性物質として１またはそれ以上
の新規なＮ−アシル−リゾガングリオシド誘導体および
特に既述の誘導体を含む医薬調製物を提供することであ
る。この医薬調製物は、経口的、直腸的、非経口的、局
所的または経皮的に使用するために調製してよい。した
がって、これらは、固体または半固体、例えば火剤、錠
剤、ゼラチンカプセル、カプセル、小側、ゼラチン軟カ
プセルの形態である。非経口的使用に関しては、筋肉内
、皮下または経皮投与用の形態または輸液もしくは静脈
内注射に適している形態を用いることができ、したがっ
て、これらは、１またはそれ以上の医薬的に許容される
賦形剤または希釈剤と混合することができ、上記使用に
適しており、生理的液と適合し得る容量オスモル濃度で
ある活性化合物の溶液または凍結乾燥粉末の形態であり
得る。 局所的使用に関しては、これらの製剤は、例えば算用ス
プレィのようなスプレィ形態、局所用クリームもしくは
軟膏または経皮投与用のパンソウコラであってよい。 本発明の調製物は、ヒトおよび動物の両者に投与するの
に適している。これら本発明の調製物は、溶液、スプレ
ィ、軟膏およびクリームの場合には好ましくは活性化合
物０．０１％〜１０ｆｆｉ量％、固体製剤の場合には活
性化合物１％〜ｌｏｏ重量％、好ましくは５％〜５０重
量％を含有する。投与量は、個々の必要性、目的とする
効果、および選択した投与経路に依存するであろう。 ヒトへの新規Ｎ−アシル−リゾガングリオシドの注射（
皮下もしくは筋肉内経路）または経皮もしくは経口経路
によって投与するための日用量は、体重１２ｇ当たり活
性物質０．０５ｏ〜５＋９の間を変化する。 下記実施例３〜１６および１８〜３２は本発明の新規誘
導体の製造を示し、実施例３３〜３４は医薬調製物を示
すものである。実施例１．２および１７には本発明の製
造方法に必要な出発物質の製造を示す。 実施例１．、デ−Ｎ−アセチルリゾＧＭ。 ３ＮのＫＯＨ（２００叶）にＧＭ、（１０ｇ）を溶解し
、９０’Ｃて７２時間、加水分解反応させた。次いで、
溶液を冷却し、塩酸でｐＨ６，５に調整した。 ４°Ｃて１８時間静置し、次いで、沈澱した脂肪酸＝９
１ を濾過によって除去した。水に対して透析し、５００ｊ
１１２に濃縮し、アセトン５Ｑ中で沈澱させた。 生成物を乾燥し、次いで、溶離液としてクロロホルム／
メタノール１５ＮのＮ１（３（５５：　４５１０）の混
合物を用いて、高分解能のシリカゲルクロマトグラフィ
ーにかけた。生成物を含有する分画を乾燥し、次いで、
水に再溶解した。００１ＮのＮａＯＨでｐＨ１０に調整
し、透析し、１００１９／ｘＱに濃縮し、５容量倍のア
セトン中で沈澱させた。、デ−Ｎ−アセチルリゾＧＭ、
の収量：５゜７９（理論値の７０％）。 溶媒としてクロロホルム／メタノール１５ＮのＮＨ，（
５５：　４５　：　１０）を用い、シリカケルクロマト
グラフィーにかけて、生成物がＲｆ＝０．０５（ＣＭ、
＝０．３５）を有する単一の化合物であることがわかっ
た。 実施例２：リゾＧＭ。 ３ＮのＫＯＨ（２００ｘＱ）にＧＭ、（１ｏ９．６．３
７３ＩＭ）を溶解し、９０’Ｃで７２時間、加水分解反
応させた。次いで、溶液を冷却し、塩酸でｐＨ６゜５に
調整した。４°Ｃで１８時間静置し、次いで、沈澱した
脂肪酸を濾過によって除去した。水に対して透析し、５
００酎に濃縮し、アセトン５Ｑ中で沈澱させた。 、デ−Ｎ−アセチルリゾガングリオシド類および、デ−
Ｎ−アセチルガングリオシド類（２０％）を含有する生
成物を真空乾燥し、次いで、ジメチルホルムアミド１０
０荒σに再溶解した。これに、テトラヒドロフラン２０
叶に溶解した９−フルオレニルメチルオキシカルボニル
−Ｎ−ヒドロキシスクンンイミド２．１５９（６，３７
３ＩＭ）をゆっくり添加し、室温で１時間反応させた。 最後に、無水酢酸３仄ρ（３１，８５ｉＭ）およびトリ
エチルアミン０９Ｗ＋２（６３，７βＭ）を添加した。 ３０分後にピペリジン１２．５ｍｆ２を添加し、保護基
を除去した。室温で１８時間反応させ、アセトン２ρ中
で沈澱さゼ、乾燥した。このようにして得られた物質を
Ｎ　ａｇｃ　Ｏ３（Ｉ　Ｍ）に溶解し、６０℃に１時間
維持した。透析し、１００１９／ｙ−（ｌに濃縮し、５
容量倍のアセトン中で沈澱させた。 リゾＧＭ、（７０％）およびデルＮ−アセチルリゾＧＭ
、を含有する生成物を、メタノールで平衡にしたニス・
セファＤ−ス（３、５ｅｐｈａｒｏｓｅ）カラム（Ｔ−
１”型）に通した。メタノールで溶離し、メタノール中
のｌＱｉＭＮＨ，ｃσで溶離して、リゾＧＭ、を得た。 生成物を含有する分画を乾燥し、次いで、水に再溶解し
た。Ｏ，ＯＩＮのＮａＯＨてｐＨ１０に調整し、透析し
、１００　ｍ９／　酎に濃縮し、５容量倍のアセトン中
で沈澱さゼた。得られた生成物：約５９（理論値の６０
％）。 溶媒としてクロロポルム／メタノール１５ＮのＮＨ３（
５５：　４５・１０）の混合物を用い、シリカゲルクロ
マトグラフィーにかけて、生成物がＲｆ＝０．１１を有
する単一体であることかわかった。 実施例３．Ｎ−ンクロロアセチルリゾＧＭＯ℃でジメチ
ルホルムアミド／メタノール（１：１）ｌ！にリゾＧＭ
、（実施例２に従って調製した）５００巧（０，３８肩
Ｍ）を溶解し、トリエチルアミン５２８μＲ（３，８１
１１Ｍ）および無水ジクロロ酢酸５７９μｍ２（３，８
＊Ｍ）を添加し、室温で７２時間反応させた。２０容量
倍の酢酸エチルに沈澱させ、濾過し、乾燥した。次いで
、溶離液としてクロロホルム／メタノール／水（６０：
　３５　：　８）を用い、シリカゲルクロマトグラフィ
ーによって、生成物を精製した。 純粋な各分画を再度合わせて、蒸発させ、ＩＮのＮａＣ
Ｏ３で集め、蒸留水に対して透析し、次いで、５１１Ｑ
に濃縮し、アセトン５０１１Ｑに沈澱させた。 得られた生成物：４２３３Ｉ９（理論値の７８，０％）
。 溶媒としてクロロホルム／メタノール１０．２％ＣａＣ
１２−（５０：　４２°１１）の混合液を用い、シリカ
ゲルクロマトグラフィーにかけて、生成物がＲｆ＝０．
３５（ＧＭ、＝０．４３、リゾＧＭ、＝Ｑ。 ２４）を有する単一の化合物であることがわかった。 実施例４：Ｎ−モノクロロアセチルリゾＧＭ。 ジメチルホルムアミド 酎にリゾＧＭ，（実施例２に従って調製した）５０Ｏ　
Ｍｇ（、０　、　３　８　ｘＭ）を溶解し、０°Ｃの温
度で１−リエチルアミン５２８μｍ２（３．８ｉＭ）お
よび無水モノクロロ酢酸６　４　９．７ＪＩ９（３．　
８ＭＭ）を添加し、室温で７２時間反応させた。２０容
量倍の酢酸エチルに沈澱させ、濾過し、乾燥した。 次いで、溶離液としてクロロホルム／メタノール／水（
６０・３５：８）を用い、シリカゲルクロマトグラフィ
ーによって、生成物を精製した。 純粋な分画を再度合わせて、蒸発させ、ＩＮのＮａｔＣ
Ｏｓで集め、蒸留水に対して透析し、次いで、５１１Ｑ
に濃縮し、アセトン５０１！＋１２に沈澱させた。 得られた生成物：３９１＋９（理論値の７４．０％）。 溶媒としてクロロホルム／メタノール１０，２％ＣａＣ
（！−（５０　：　４２　：　１　１）の混合物を用い
、シリカゲルクロマトグラフィーにかけて、生成物がＲ
ｆ＝ｏ．３ｏ（ＧＭ＋＝０．４３、リゾＧＭ．＝０。 ２４）を有する単一の化合物であることがわかった。 実施例５：Ｎ−モノフルオロアセチルリゾＧＭ。 ジメチルホルムアミド２．５ｘＱにリゾＧＭ，（実施例
２に従っ”’Ｃ調製した）５００ｎ（０．３８ｘＭ）を
溶解し、これに、ジメチルホルムアミド２．５ｘＱに溶
解したヨウ化１−メチル−２−クロロピリジン１９４．
２λｇ（０．　７　６灰Ｍ）、フルオロ酢酸ナトリウム
１　９３ｉｙ（３．８ｘＭ）およびトリエチルアミン５
２８頭（３．８＋Ｍ）を添加した。 室温で１８時間反応させ、次いで、水で飽和した酢酸エ
チル５０１１Ｑに沈澱させた。乾燥し、溶離液としてク
ロロホルム／メタノール／水（６０；３５：８）の混合
物を用いて、シリカゲルクロマトグラフィーにかけた。 純粋な分画を再度合わせて、蒸発させ、ＩＮのＮａｚＣ
Ｏｓで集めて、蒸留水に対して透析し、次いで、５ｊｌ
１２に濃縮し、アセＩ・７５０吋に沈澱させた。得られ
た生成物：４８１Ｍｇ（理論値の９２％）。 溶媒としてクロロホルム／メタノール１０．３％ＣａＣ
（２−（５０　：４２　：　１　１）の混合物を用い、
シリカゲルクロマトグラフィーにかけて、生成物がＲｆ
＝０．３３（ＧＭ．＝０．４３、リゾＧＭ．＝０。 ２４）を有する単一の化合物であることがわがっ実施例
６．Ｎ−ジフルオロアセチルリゾＧＭ。 ジメチルホルムアミド２，５靜にリゾＧＭ、（実施例２
に従って調製した）５００即（０，３８ｍＭ）を溶解し
、これに、ジメチルホルムアミド２．５村に溶解したヨ
ウ化１−メチル−２−クロロピリジン１９４．、２Ｒｇ
（０，７６１１１Ｍ）、ジフルオロ酢酸２４３Ａｌ（！
（３，８ＭＭ）およびトリエチルアミン５２８　ｕＱ＜
　３　、８　＊Ｍ）を添加した。 室温で１８時間反応させ、次いで、水で飽和した酢酸エ
チル５０祿に沈澱させた。乾燥し、溶離液としてクロロ
ホルム／メタノール／水（６０゜３５：８）の混合物を
用いて、シリカゲルクロマトグラフィーにかけた。純粋
な分画を再度合わせて、蒸発させ、ＩＮのＮａ、Ｃｏ３
て集めて、蒸留水に対して透析し、次いで、５好に濃縮
し、アセトン５０１１ｒＱに沈澱させた。得られた生成
物・３６５＋９（理論値の８４％）。 溶媒としてクロロホルム／メタノール１０，３％ＣａＣ
（！−（５０：　４２　：　１１）の混合物を用い、シ
リカゲルクロマトグラフィーにかけて、生成物がＲｆ＝
０．３５（ＧＭ、＝０．４３、リゾＧＭ、−０２４）を
有する単一の化合物であることがわかった。 実施例７：Ｎ−メトキンアセチルリゾＧＭ。 ジメチルホルムアミド２．５１ＲＱにリゾＧＭ、（実施
例２に従って調製した）５００ｍｇ（０，３８ｘＭ）を
溶解し、これに、ジメチルホルムアミド２．５πｇに溶
解したヨウ化１−メチル−２−クロロピリジン１９４．
．２屑ｇ（０、７６ｖｔＭ）、メトキシ酢酸２９３μρ
（３，８ｍＭ）およびトリエチルアミン１６１μＱ（１
，１４＊Ｍ）を添加した。 室温で１８時間反応させ、次いで、水で飽和した酢酸エ
チル５０靜に沈澱させた。乾燥し、溶離ｌ夜としてクロ
ロホルム／メタノール／水（６０３５８）の混合物を用
い、シリカゲルクロマトグラフィーにかけた。純粋な分
画を再度合わせて、蒸発させ、ＩＮのＮａ、Ｃｏ３て集
めて、蒸留水に対して透析し、次いで、５πＱに濃縮し
、アセトン５０〃ａに沈澱させた。得られた生成物：３
２５１１９（理論値の７４％）。 溶媒としてクロロホルム／メタノール１０．３％Ｃａ（
４２（５０：　４２　：　１１）の混合物を用い、シリ
カゲルクロマトグラフィーにかけて、生成物がＲｆ＝ｏ
、３６（ＧＭ、＝０．４３、リゾＧＭ、＝０２４）を有
する単一の化合物であることかわかった。 実施例８　：　Ｉｆ−（３−ジエチルアミノプロピオニ
ル）リゾＧＭ。 ジメチルホルムアミド２　５ＢＩＱにリゾＧＭ、（実施
例２に従って調製した）５００ｍ９（０，３８ｍＭ）を
溶解し、これに、室温で、ジメチルホルムアミド２．５
１に溶解したヨウ化１−メチル−２−クロロピリジン１
９４．２１１９（０，７６ｚＭ）、３−ジエチルアミン
プロピオンｎ　３５０　ｉｇ（＋、　、　９　ｚＭ）ｔ
、；よびトリエチルアミン５２８μ（（３，８ｆｆＭ）
を添加した。 室温で１８時間反応させ、次いで、アセトン１００１１
Ｑに沈澱させた。これを濾過し、乾燥した。 次いで、溶離液としてクロロホルム／メタノール／水（
６０：　３５　：　８）の混合物を用い、シリカゲルク
ロマトグラフィーによって、生成物を精製した。純粋な
分画を再度合わせて、蒸発させ、ＩＮのＮａ２ＣＯ３で
集めて、蒸留水に対して透析し、次いで、５πＱに濃縮
し、アセトン５０１１Ｑに沈澱させた。得られた生成物
・４１１＋９（理論値の７５％）。 溶媒としてクロロホルム／メタノール１０３％ＣａＣ１
２−（５０：　４２　：　１１）の混合物を用いて、シ
リカゲルクロマトグラフィーにかけて、生成物がＲｆ＝
０．２２（ＧＭ、＝０．４３、リゾＧＭ、＝Ｑ、２４）
を有する単一の化合物であることがわかった。 実施例９・Ｎ４リフルオロアセチルリゾＧＭ。 ジメチルホルムアミド／メタノール（１：　１）１１１
ρにリゾＧＭ、（実施例２に従って調製した）５００尻
９（０，３８ｍＭ）を溶解し、これに、０℃で、無水ト
リフルオロ酢酸１６１μρ（ｉｉ４βＭ）およびトリエ
チルアミン１６１μＱ（１，１４ＭＭ）を添加し、室温
で７２時間反応させた。２０容量倍の酢酸工チルに沈澱
させ、濾過し、乾燥した。 次に、溶離液としてクロロホルム／メタノール／水（６
０：　３５　：　８）の混合物を用い、シリカゲルクロ
マトグラフィーによって、生成物を精製シた。純粋な分
画を再度合わせて、蒸発させ、ＩＮのＮａ２Ｃ０，３で
集めて、蒸留水に対して透析し、次いで、５１１（に濃
縮し、アセトン５０ｄに沈澱させた。得られた生成物・
２９２ｍｙ（理論値の５５゜０％）。 溶媒としてクロロポルム／メタノール１０．３％ＣａＣ
（！２（５０：　４２　：　Ｉ　Ｌ）の混合物を用いて
、シリカゲルクロマトグラフィーにかけて、生成物がＲ
ｒ＝０．３７（ＧＭ、＝０．４．３、リゾＧＭ、−０２
４）を有する単一の化合物であることがわかった。 実施例１０・Ｎ−トリクロロアセチルリゾＧＭ。 ジメチルホルムアミド／メタノール（１：１．Ｈ顧にリ
ゾＧＭ、（実施例２に従って調製した）５００ｎｇ（０
，３８ｚｚＭ）を溶解し、これに、０６Ｃで、無水トリ
クロロ酢酸３５２屑ｇ（１，１４＊Ｍ）および１−リゾ
チルアミン５２８μ（！（３，８１１Ｍ）を添加し、室
温で７２時間反応させた。２０容量倍の酢酸エチルに沈
澱させ、濾過し、乾燥した。 次に、溶離液としてクロロホルム／メタノール／水（６
０：　３５　：　８）の混合物を用い、シリカゲルクロ
マトグラフィーによって、生成物を精製した。純粋な分
画を再度合わせて、蒸発させ、ＩＮのＮａ２ＣＯ３で集
めて、蒸留水に対して透析し、次いで、５靜に濃縮し、
アセＩ・ン５０ｍｇに沈澱させた。得られた生成物：３
５８ｍｇ（理論値の６５゜０％）。 溶媒としてクロロホルム／メタノール１０．３％ＣａＣ
（！、（５０：　４２　：　１１）の混合物を用いて、
シリカゲルクロマトグラフィーにかけて、生成物がＲｆ
＝０．３７（ＧＭ、＝０．４３、リゾＧＭ、＝Ｑ。 ２４）を有する単一の化合物であることがわかった。 ｌｌＦｆｆｌ例１１　：　Ｎ−シアノアセチルリゾＧＭ
。 ジメチルホルムアミド２．５ｓσにリゾＧＭ、（実施例
２に従って調製した）５００屑９（０，３８ＭＭ）を溶
解し、これに、テトラヒドロフラン２０ｍρに溶解した
ジシクロへキシルカルボジイミド９３９ｆｆ！？（９，
１２ｘＭ）とシアノ酢酸６２０ｙ＋９（７，６ｉＭ）と
を反応させて２時間後に生成したジシクロヘキシル尿素
を濾過することによって使用直前に調製した無水シアノ
酢酸およびトリエチルアミン１０６　ｕ（２（０、７６
ｉＭ）をｏ’ｃで添加した。 撹拌下、Ｏ′Ｃて１８時間、縮合反応を行った。 反応が終了した後、溶液を１１Ｃに濃縮し、アセトン１
０ｍＱに沈澱させ、真空乾燥した。 次に、溶離液としてクロロホルム／メタノール／水（６
０・３５：８）の混合物を用い、／リゾＪゲルクロマト
グラフィーによって、生成物を精製した。純粋な分画を
再度合わせて、蒸発させ、ＩＮのＮ　ａ　ｔ　Ｃ０３で
集めて、蒸留水に対して透析し、次いで、５ｘρに濃縮
し、アセトン５０叶に沈澱させた。得られた生成物：２
７３ＪＩｇ（理論値の５２％）。 溶媒としてクロロホルム／メタノール１０．３％ＣａＣ
ｌ２−（５０：　４２　：　１１）の混合物を用いて、
シリカゲルクロマトグラフィーにかけて、生成物がＲｆ
＝０．４０（ＧＭ、＝０．４３、リゾＧＭ、＝０２４）
を有する単一の化合物であることがわかった。 実施例１２．Ｎ−マレイルリゾＧＭ。 ジメチルホルムアミドＩＥ０．にリゾＧＭ、（実施例２
に従って調製した）５００ｎ（０，３８ｘＭ）を溶解し
、これに、無水マレイン酸３７ｍ９（０，３８ｉＭ）お
よび１−リゾチルアミン５３，６μＱ（０，３８７１Ｍ
）を添加し、室温で７２時間反応させた。２０容量倍の
酢酸エチルに沈澱させ、濾過し、乾燥した。 次に、溶離液としてクロロホルム／メタノール／水（６
０：　３５　：　８）の混合物を用い、シリカゲルクロ
マトグラフィーによって、生成物を精製シた。純粋な分
画を再度合わせて、蒸発させ、ＩＮのＮａ２ＣＯ３で集
めて、蒸留水に対して透析し、次いで、５対に濃縮し、
アセトン２５Ｒ（ｌに沈澱させた。得られた生成物　４
９２ｍ９（理論値の８５％）。 溶媒としてクロロポルム／メタノール１０．３％ＣａＣ
１２−（５０：　４２　：　］　１）の混合物を用い、
シリカゲルクロマトグラフィーにかけて、生成物がＲｆ
＝０．２７（ＧＭ、＝０．４３、リゾＧＭ、＝０２４）
を有する単一の化合物であることがわかった。 実施例１３　：　Ｎ−ヒドロキシアセチルリゾＧＭ。 ジメチルホルムアミド２５靜にリゾＧ　Ｍ　、　（実施
例２に従って調製した）５００Ｍｇ（０，３８ａＭ）を
溶解し、これに、テ）・ラヒドロフラン２０１１Ｉ２に
溶解したジンクロヘキンル力ルホノイミＦ９３９Ｍ９（
９，１２ＭＭ）とグリコール酸］　７３＊ｇ（２，２８
７！Ｍ）とを反応させて２時間後に生成したジシクロヘ
キシル尿素を濾過することによって使用直前に調製した
無水グリコール酸およびｌ・リエチルアミン１０６μｍ
２（１，１４１１Ｍ）をＯ′Ｃで添加した。 撹拌下、０°Ｃで１８時間、縮合反応を行った。 反応か終了した後、溶液を１Ｈに濃縮し、アセトン１０
！１２に沈澱させ、真空乾弄した。 次に、溶離液としてクロロホルム／メタノール／水（６
０・３５：８）の混合物を用い、シリカゲルクロマトグ
ラフィーによって、生成物を精製した。純粋な分画を再
度合わせて、蒸発させ、ＩＮのＮａ、ＧＯ，て集めて、
蒸留水に対して透析し、次いで、５順に濃縮し、アセト
ン５０叶に沈澱させた。得られた生成物：２６１ｍｇ（
理論値の５０％）。 溶媒としてクロロホルム／メタノール１０５３％ＣａＣ
（２−（５０：　４２　：　１１）の混合物を用いて、
シリカゲルクロマトグラフィーにかけて、生成物かＲｆ
＝０．３３（ＧＭ、＝０．４３、リゾＧＭ、−Ｑ。 ２４）を有する単一の化合物であることかわかった。 （以下、余白） 実施例１４：Ｎ−１−リブロモアセチルリゾＧＭ。 ジメチルホルムアミド／メタノール（１：　１）２５順
にリゾＧＭ、（実施例２に従って調製した）５００Ｍｇ
（０，３８ｉＭ）を溶解し、これに、テトラヒドロフラ
ン２０屑Ｑに溶解したジシクロへキシルカルボジイミド
９３９巧（９，１２ｘＭ）とトリブロモ酢酸２．２５９
（７，ｅｌＭ）とを反応させて２時間後に生成したジシ
クロヘキシル尿素を濾過することによって使用直前に調
製した無水トリブロモ酢酸およびトリエチルアミン５２
８μρ（３，８ｘＭ）ｔ（）°Ｃで添加した。 撹拌下、０°Ｃで１８時間、縮合反応を行った。 反応が終了した後、溶液をＩｆｆ（に濃縮し、アセトン
１０１１Ｑに沈澱させ、真空乾燥した。 次に、溶離液としてクロロホルム／メタノール／水（６
０：　３５　：　８）の混合物を用い、シリカケルクロ
マトグラフィーによって、生成物を精製した。純粋な分
画を再度合わせて、蒸発させ、ＩＮのＮａ２ＣＯ３で集
めて、蒸留水に対して透析し、次いで、５順に濃縮し、
アセトン５０Ｊ１ｇに沈澱さぜた。得られた生成物：２
６７ｚｙ（理論値の４４％）。 溶媒としてクロロホルム／メタノール１０３％ＣａＣ＆
２（５０：　４２　：　１１）の混合物を用い、シリカ
ゲルクロマトグラフイーにかけて、生成物かＲｆ＝０．
３７（ＧＭ、−０，４３、リゾＧＭ、＝０゜２４）を有
する単一の化合物であることがわかった。 実施例１．５　：　Ｎ−（１２−ヒドロキシステアロイ
ル）リゾＧＭ。 ジメチルホルムアミド５１１Ｑに、デ−Ｎ−アセチルリ
ゾＧＭ、（実施例１に従って調製した）５００３１１？
（０，３７ｘＭ）を溶解し、これにトリトン（Ｔｒｉｔ
ｏｎ）ＸＩＯｏｌｚｆｆおよびトリエチルアミン１０４
μＱ（０，７５ｍＭ）を添加した。透明溶液が得られる
まで、撹拌した。次いで、これに、無水テトラヒドロフ
ラン１５Ｍ０．に溶解したヒドロキシステアリン酸８７
０ｍｇとアセトン４０１１１１２に入れたジ（Ｎ−スク
ンンイミジル）カーボネート１０．５ｍｙおよびトリエ
チルアミン５５０μ夕とを室温で１８時間反応させるこ
とによって調製した１２−ヒドロキシステアリン酸およ
びＮ−ヒトロキシスク／ンイミドのエステル５９８ｍｇ
（１，５７１Ｍ）を含有すルテｌ−ラヒドロフラン２５
１１ｒＱを添加した。 室温で２４時間反応を行い、最後に溶液を濃縮し、酢酸
エチルで繰り返し沈澱させた。 溶媒としてクロロホルム／メタノール／　水（６０：３
０：６）の混合物を用い、シリカゲルクロマトグラフィ
ーによって、粗生成物を精製した。 次に、このようにして得た中間体、デ−Ｎ１−アセチル
−Ｎ、−（１２−ヒドロキシステアロイル）リゾＧＭ、
を、クロロホルム／メタノール（１：　１）に溶解した
無水酢酸でＮ−アセチル化した（モル比１　：　ｌ　：
　ｌ）。 反応終了後、生成物を乾燥し、クロロホルム／メタノー
ル（１：　１）２ｚＱで集めて、アセトン１゜ｍＱに沈
澱させた。 次に、溶媒としてクロロホルム／メタノール／水（６０
：　３５　：　８）の混合物を用い、シリカゲルクロマ
トグラフィーによって、生成物を精製した。 純粋な分画を再度合わせ、蒸発させ、ＩＮのＮａ２ＣＯ
１で集めて、蒸留水に対して透析し、５ｍρに濃縮し、
アセ］・ン５０ｚｆ２に沈澱させた。Ｎ−（１２、−ヒ
ドロキシステアロイル）リゾＧＭ、の収量−２１７究ｇ
（理論値の３４５％）。 溶媒としてクロロホルム／メタノール１０．３％塩化カ
ルシウム（６０：　３５　：　８）の混合物を用い、シ
リカゲルクロマトグラフィーにかけて、生成物がＲｒ＝
０．３９（、デ−Ｎ−アセチルリゾＧＭ＝０．０５、デ
−Ｎ−アセチルＧＭ１＝０．２０、ＧＭ、＝０．４０）
を有する単一の化合物であることがわかった。 実施！ｌ−１６：　Ｎ−（３−クロロピノ釦イル）リゾ
Ｍ ジメチルホルムアミド／メタノール（１・１）１１にリ
ゾＧＭ、（実施例２に従って調製した）５００ＩＩｇ（
０，３８ＮＭ）を溶解し、これに、室温で、トリエチル
アミン１．　］　６０ｕＱ（７，６ｍＭ＞および塩化３
−クロロピバロイル９９０μＱ（７，６ｍＭ）を添加し
た。 ＩＩ ＋１２ 室温で４時間、縮合反応を行った。反応が終了した後、
水で飽和した酢酸エチル１０叶に沈澱させ、濾過し、真
空乾燥した。 次いで、溶離液としてクロロホルム／メタノール／水（
６０：３５：８）の混合物を用い、シリカゲルクロマト
グラフィーによって、生成物をＭ’Ａした。純粋な分画
を再度合わせて、蒸発させ、ＩＮのＮａ２ＣＯ３で集め
て、蒸留水に対して透析し、次いで、５πρに濃縮し、
アセトン５０靜に沈澱させた。得られた生成物：４０４
ｚ９（理論値の７４％）。 溶媒としてクロロホルム／メタノール１０．３％ＣａＣ
ｆｆ１．（５０：　４２　：　１１）の混合物を用い、
シリカゲルクロマトグラフィーにかけて、生成物がＲｒ
＝０．３３（ＧＭ、＝０．４３、リンＧＭ、＝Ｑ。 ２４）を有する単一の化合物であることがわかった。 実施例１７：ウシ脳組織からの抽出によるガングリオシ
ド混合物（ＧＡ）の調製 動物から取り出したある量のウソ脳皮質をｐ［（６，８
のリン酸緩衝液中でホモジナイズし、次いで、６容量倍
のテトラヒドロフランを添加し、得られた混合物を遠心
分離した。上清をテトラヒドロフランで２回再抽出した
。遠心分離後、非極性物質をエチルエーテルによる分配
によって除去し、水性テトラヒドロフラン相を、５０％
エタノールで平衡化したイオン交換カラムに入れた。水
酸化バリウムおよび４容量倍の水冷エタノールをカラム
からの溶出液に添加した。冷却状態で１８時間後、沈澱
物を集め、次いで、水に溶解した後、塩酸で僅かに酸性
化した。このようにして得た溶液を透析し、凍結乾燥し
た。この時点での収量は、用いた神経組織１ｇあたり粗
ガングリオシド混合物約０．６ｍｇであった。凍結乾燥
粉末を２０容量倍のクロロホルム−メタノール（２＋１
）に分散させた。得られた溶液を濾過して完全に透明に
した後、０．２容量倍の０．８８％塩化カリウム水溶液
を添加することによって分配した。上相を分取し、透析
し、凍結乾燥した。最終収量は、脳組織１？あたり精製
ガングリオシド塩混合物約０．３ｙｎｇてあった。 得られたガングリオシド混合物を、ケイ酸のカラムを用
いて、メタノール−クロロホルムの混合液で溶離して、
上に記したような実質的に純粋なガングリオン１−であ
る種々の部分に分画することができた。平均すると、得
られた組成物は、はぼ、ガングリオシドＧ＋、、、、４
．０％、カングリオシトＧ、、２１％、ガングリオシド
Ｇ′Ｔ１ｔ、１９％およびカングリオシトＧゎ、ｂ１６
％であった。 実施例１８゛リゾガングリオシド混合物のＮジクロロア
セチル誘導体 １）リンガングリオシドの調製 ３ＮのＫＯＨ２００ＩＱにカングリオシト混合物（実施
例１７に従って調製した）１０ｇを溶解し、９０℃で７
２時間、加水分解反応を行った。次いで、溶液を冷却し
、塩酸でｐＨ６，５にした。４°Ｃで１８時間静置し、
次いで、沈澱した脂肪酸をｌ、ム過によって除去した。 水に対して透析し、５００ｔｎＱに濃縮し、アセトン５
ρに再沈澱させた。 、デ−Ｎ−アセチルリソガンクリオシドおよびデＮ−ア
セチルガングリオシド（２０％）を含有する生成物を真
空乾燥し、次いで、ジメチルホルムアミド１００ｉρに
再溶解した。次いで、これに、テトラヒドロフラン２０
ｍｆ２に溶解した９−フルオレニルメチルオキシカルボ
ニル−Ｎ−ヒドロキシスクシンイミド２．１５ｙ（６，
３７ｘＭ）をゆっくりと添加し、全体を室温で１時間反
応させた。最後に、これに、無水酢酸３Ｒσ（３１，８
５ｇＭ）およびトリエチルアミン０９π（！（６３，７
ｘＭ）を添加した。３０分後、ピペリジン１２．Ｆｌｏ
、を添加し、保護基を除去する。室温で１８時間反応さ
せ、アセトン２Ｑに沈澱させ、乾燥した。このようにし
て得た物質をＮａＮａＣ０３（Ｉに溶解し、６０°Ｃに
１時間維持した。透析し、１００　ｍＬｉＩ／ｍＱに濃
縮し、５容量倍のアセトンに沈澱させた。 リゾガングリオシド（７０％）および、デ−Ｎ−アセチ
ルリソガンクリオシドからなる生成物を、メタノールで
平衡化したＳ−セファロース（Ｈ”型）のカラムに通し
た。、デ−Ｎ−アセチルリゾガングリオシドはメタノー
ルで溶出し、リゾカングリオシ１１．５ ドは］ＯｉＭＮＨ４ＣＱのメタノール溶液で溶出した。 生成物を含有する分画を乾燥し、次いで、水に再溶解し
た。Ｎａ０ｌ−１（０，０１Ｎ）でｐＨ１０に調整し、
透析し、１００ｏ／ｘρに濃縮し、５容量倍のアセトン
で沈澱させた。得られた生成物・４７ｇ（理論値の５５
％）。 ２）ジクロロアセチル誘導体の調製 ジメチルホルムアミド／メタノール（１：　１）１ｒｔ
ｔ（ｌに、予め調製したリゾガングリオシド混合物５０
０　ｗｉ＋（０，３１ｍＭ）を溶解し、Ｏ′Ｃの温度で
、トリエチルアミン４３０μ（！（３，１＋Ｍ）および
無水ジクロロ酢酸４７２μｍ２（３，１ｘＭ）を添加し
た。次いで、全体を濾過し、乾燥した。 メタノールで平衡させたＳ−セファロース（Ｈ゛型）カ
ラムによるカラムクロマｉ・グラフィーによってアシル
化生成物を未反応化合物から分離した。 ジクロロアセチル誘導体をメタノール中に溶出し、乾燥
し、ＩＮのＮ　ａ　ｔ　ＣＯｓで集め、透析し、２．５
ｘ（ｌで濃縮し、アセトン２５順に沈澱させた。得られ
た生成物・３４５ｓ９（理論値の６４％）。 実施例１９μＮ−メＩ・キシアセチルリゾＧＭ。 のメチルエステル Ｎ−メチルピロリドン５靜にＮ−メトキシアセチルリゾ
ＧＭ、・ナトリウム塩（実施例７に従って調製した）５
００１４ｇ（０，３６ｘＭ）を溶解し、これにヨウ化メ
チル４４，５μ（！（０，７２ｘＭ）を添加した。室温
で３時間反応させ、酢酸エチルに沈澱させ、濾過し、真
空乾燥した。 次イで、溶ｍ’ｔ＆としてクロロホルム／メタノール／
水（６０：　３０　：　６）の混合物を用い、シリカゲ
ルクロマトグラフィーによって、生成物を精製した。純
粋な分画を再度合わせて、蒸発させ、クロロホルム／メ
タノール（１：　ｌ）２．５ＲＱに再度溶解し、アセト
ン２５ａＱに沈澱させた。得られた生成物：４５７ｏ（
理論値の７４％）。 溶媒としてクロロホルム／メタノール１０．３％ＣａＣ
ｆ！！（５０：　４２　：　１１）の混合物を用い、シ
リカゲルクロマトグラフィーにかけて、生成物がＲｒ＝
０．４．（Ｎ−メトキシアセチルリゾＧＭ、＝０、３６
）を有する単一の化合物であることかわかった。 実施例２０：Ｎ−メトキシアセチルリゾＧＭの内部エス
テル ４°Ｃで、Ｎ−メチルピロリドン５ｍ１２にＮ−メトキ
シアセチルリゾＧＭ、・ナトリウム塩（実施例７に従っ
て調製した）５００巧（０、３６ｕＭ）を溶解し、トリ
エチルアミン５５μｇ（０，４ｘＭ）およびヨウ化１−
メチル−２−クロロピリジン１００ｚｙ（０，４１１Ｍ
）と反応させた。４時間反応を行い、定量的な収量を得
た。アセトン５０好を加えることによって生成物を沈澱
させ、次に濾過し、クロロホルム／イソプロピル（１二
１）５ｚＣで集め、次いで、アセトン２５叶中て再沈澱
さぜた。得られた生成物：４８：３ｍｇ（理論値の９８
％）。 溶媒とし−Ｃクロロホルム／メタノール１０．３％Ｃａ
Ｃｌ２−（５０：　４２　：　１１）の混合物を用い、
シリカゲルクロマトグラフィーにかけて、生成物がＲｒ
＝０．４３（Ｎ−メトキシアセデルリゾＧＭ。 ＝０．３６）を有する単一の化合物であることがわかっ
た。 実施例２１：Ｎ−メトキシアセチルリゾＧＭ。 の２−ブチルアミド ビワジン５＋１１（にＮ−メトキシアセチルリゾＧＭ。 のメチルエステル５００ｍｇ（０，３６ｆｆ１Ｍ）を溶
解し、これに２−ブチルアミン２．５吋を添加した。室
温で７２時間反応させ、その後、ロータリーエバポレー
ター中で乾燥させ、クロロホルム／メタノール（１：　
１）５ｘｇで集め、アセトン２５１１Ｑに沈澱させ、次
いで濾過し、真空乾燥した。 次に、溶！ｌｔ液としてクロロホルム／メタノール／水
（６０：　２５　：　４）の混合物を用い、シリカゲル
クロマトグラフィーによって、生成物を精製した。純粋
な分画を再度合わせて、集めて、クロロポルム／メタノ
ール（１：　１）２．５ｘρに再溶解シ、アセトン２５
ｍ（に沈澱させた。得られた生成物３７し帽（理論値の
７２％）。 溶媒としてクロロホルム／メタノール１０．３％ＣａＣ
Ｑ−（５０：　４２　：　１１）の混合物を用いて、シ
リカゲルクロマトグラフィーにかけて、生成物かＲｆ＝
０．４８（Ｎ−メトキシアセチルリゾＧＭのメチルエス
テル−０，４）を有する単一の化合物であることがわか
った。 実施例２２　：メトキシアセチルリソＧＭ、のメチルエ
ステルの過アセチル化物 ピリジン５順にＮ−メトキシアセチルリゾＧＭ。 のメチルエステル５００ｍｇ（０，３６ｚＭ）を溶解し
、これに新しく蒸留した無水酢酸２．５１１Ｑを添加し
、混合物を、撹拌下、室温で７２時間維持した。反応が
終了した後、溶液を回転蒸発させ、残留物を氷冷水１０
ＭＩ２と酢酸エチル１０！Ｑ間に分配し、この酢酸エチ
ル液を冷ＨＣＣ（ＬＭ）、水およびＮａＨＣＯ２（ＬＭ
）溶液で洗浄した。有機相を硫酸塩で脱水し、蒸発させ
、クロロメタン／酢酸エチル／イソプロパツール（７０
：３０：４．５）の混合Ｆ’ｌ　’ｉ：用い、シリカゲ
ルクロマトグラフィーによって、残留物を精製した。純
粋な分画を再度合わせて、集めて、エチルエステル５１
１ｇに再溶解し、ｎ−ヘキサン２５酎で沈澱さぜた。得
られた生成物：４５０１ｇ（理論値の６１％）。 ｍｂＸとしてクロロポルム／メタノール／酢酸エチル（
７０・１０：３０）の混合液および酢酸エチル／イソプ
ロパツール（９５：５）を用い、シリカゲルクロマトグ
ラフィーにかけて、生成物か各々、Ｒｆ＝０．４５およ
び０．２６を有する単一体であることがわかった。 膓（：リゾガングリオシド類の混合物のＮ−ジクロロア
セチル誘導体の内部エステル４°Ｃで、リゾガングリオ
シド・ナトリウム塩の混合物のＮ−ジクロロアセチル誘
導体〈実施例１８）５００ｎ（０，２９ｍＭ）をＮ−メ
チルピロリドン５灰ρに溶解し、トリエチルアミン４４
．５ｕ１２（０，３２ｘＭ）およびヨウ化１−メチル−
２−クロロピリジン８２．２１１９（０，３２ｘＭ）と
反応させた。 ４°Ｃで４時間反応を行い、定量的な収量を得た。 アセトン５ｏｚｇを添加して生成物を沈澱させ、濾過し
、ジクロロメタン／イソプロパツール（１：１　）５　
ＭＩ２で集め、次いで、アセトン２５舷中で再沈澱させ
た。得られた生成物：４５７ｍｇ。 赤外線分光分析および薄層クロマトグラフイーによって
内部エステル存在を確認した。 ＫＢｒペレットによって行ったＩ　Ｒ分光分析によって
、１７５０ｃｍ−’に典型的なエステルハンドが示され
た。 クロロホルム／メタノール１０３％ＣａＣＱ２（５０：
４２：１１）を含有する溶媒を用い、シリカゲルクロマ
トグラフィーにかけて、生成物がＲｆ−〇　４３〜０．
６０を有することがわかった。得られた生成物のＲ「は
、出発化合物の混合物のそれ（＜０．３５）よりも高か
った。 したがって、クロマトグラフィーは出発化合物が全く存
在しないことを示した。６００Ｃで１時間、０、ＩＮの
Ｎ　ａ２　ＣＯ３の溶液による処理によって、エステル
結合が加水分解され、最初のカングリオシト誘導体の混
合物か得られた。 害涛町烈−乙久：リゾガングリオシド混合物のＮジクロ
ロアセチル誘導体のメチルエステル実施例２３に従って
調製したリンガングリオシド類の混合物のＮ−ジクロロ
アセチル誘導体の内部エステル混合物５００ｙｇ（０，
３０１！Ｍ）を塩化メチレンおよびメタノール（４，：
１）の無水混合物２０ＩＩＱ、に溶解した。この溶液に
、無水メタノール５靜に溶解したナトリウムメチラ−１
−３２，４ｍ９ｃ。 ６（ＭＭ）を添加し、混合物を２時間還流した。 反応か終了した後、タウエックスＡＧ　５０ｘ８無水樹
脂（Ｉｆ”型）を用いて混合物を中和し、樹脂を濾過に
よって分離し、メタノールで洗浄し、乾燥するまで溶液
を蒸発させた。残留物をメチレン／塩化メタノール（１
：　１）５ｆｆρ中に集め、反応生成物をアセＩ・ン２
５ｍＱ中に注いで沈澱させた。 次いで、溶媒としてクロロホルム／メタノール／水（３
０・６０：８）の混合物を用い、セファッデックスーＤ
ＥＡＥアセテート型Ａ−２５によるクロマトグラフィー
によって、粗生成物を精製した。 中性分画を集め、蒸発させ、水中で透析し、乾燥するま
で再度蒸発させ、残留物をクロロホルム／メタノール（
１：　ｌ）］、　５７１Ｃに溶解し、生成物をアセトン
７５祿て沈澱させた。収ｆｆｉ：４３０ｘｉ＋。 ＫＢｒペレットによって行ったＩＲ分光分析によって、
］　７５０ｃｙｔｔ−’に典型的な内部エステルバンド
が示された。 溶媒トしてクロロポルム／メタノール１０３％ＣａＣ４
，（５０：　４２　：　ｌ　Ｉ）の混合物を用い、シリ
カゲルクロマトグラフィーにかけて、生成物ＭＲｆ＝０
．４０〜０．５４（ガングリオシド誘導体・ナトリウム
塩の混合物のＲｆ＝＜０．３５）を有するリゾガングリ
オシド類のＮ−ジクロロアセチル誘導体のメチルエステ
ル混合物であることがわかった。 Ｎ−アセチルノイラミン酸の測定のためのスベンナーホ
ルム（Ｓｖｅｎｎｅｒｈｏｌｍ）の方法によって、およ
び６０°Ｃで１時間、０．ＩＮのＮ　ａ、、ＣＯｓの溶
液で処理（全てのエステル結合の開裂が生じる）した後
に放出される、メチルアルコールの定量的ヘッド−スペ
ースガスクロマトグラフィーによって得られるアルコキ
シ基およびシアリン基の間の分子比を測定することによ
って完全なエステル交換反応を確認することができた。 実施例２５：リゾガングリオシド混合物のＮジクロロア
セチル誘導体の２−ブチルアミド実施例２３に従って調
製したリゾガングリオシド混合物のＮ−ジクロロアセチ
ル誘導体の内部エステルの混合物５００ｍ９（０，３０
ｘＭ）を無水ピリジン２５叶に溶解した。この溶１１ｆ
ｆｉに２−ブチルアミン１．２５ｆｆρを添加し、混合
物を２５°Ｃで２４時間、無水条件下で撹拌下に維持し
た。 反応か終了した後、蒸発によって溶媒を除去し、残留物
をクロロホルム／メタノール（１：　１）５ｔ１２て集
め、アセトン２５１１Ｑで沈澱させた。 このようにして得られた粗生成物を、２５°Ｃで３０分
間、１％Ｎａ２ｃＯ３１０１１Ｑて処理して残留エステ
ル基を加水分解し、次いで、水で透析し、溶液を真空乾
燥し、溶媒としてクロロホルム／メタノール／水（３０
：　６０　：　８）の混合物を用いて、セファデックス
＝ＤＥＡＥ　Ａ−２５（アセテート型）によるクロマト
グラフィーによって残留物を精製した。 中性の分画を乾燥するまで蒸発させ、透析し、再度蒸発
させ、クロロポルム／メタノール（ｌ：１）５Ｍｇに溶
解し、生成物をアセトン２５ＭＱで沈澱させた。収量　
４２５ｘｙ。 ＩＲスペクトルにはもはや］　７５０ｃｍ−’にの典型
的なエステルハンドは存在しなかった。 溶媒としてクロロポルム／メタノール１０．３％ＣａＣ
（！−（５０：　４２　：　１　］）を用い、レゾルシ
ン試薬を用いて測定したシリカゲルクロマトグラフィー
によって、生成物かＲｆ＝０．４８〜０．７１（ガング
リオシド誘導体・ナトリウム塩の混合物のＲｆ＝＜０．
３５）を有するリゾガングリオシドのＮ−ジクロロアセ
チル誘導体の２−ブチルアミド′の混合物であることか
わかった。 実施例２６：リゾガングリオシ１ζ混合物のＮジクロロ
アセチル誘導体のメチルエステルの過アセチル化誘導体 リゾガングリオシド混合物のＮ−ジクロロアセチル誘導
体のメチルエステル混合物（実施例２４）５００ｍ９（
０，２９ｏＭ）をピリジ７５　ｒｐＱに溶解し、これに
、新しく蒸留した無水酢酸２　、５　ｙ＋Ｑ、を添加し
、混合物を、室温で７２時間、撹拌下に維持した。 反応が終了した後、溶液を回転蒸発させ、残留物を水冷
水１．Ｍと酢酸エチル１ｏＲρとの間で分離し、この酢
酸エチル液を冷ＨＣρ（ＩＭ）、水、およびＮａＨＣＯ
３（ＩＭ）溶液で洗浄した。有機相を硫酸すｉ・リウム
で脱水し、蒸発させ、ジクロロメタン／酢酸エチル／イ
ソプロパツール（７０３０：４５）の混合液を用いるシ
リカゲルクロマトグラフィーによって、生成物を精製し
た。純粋な分画を再度合わせて、集めて、エチルエーテ
ル５ｍ０て再溶解し、ｎ−ヘキサン２５１（に沈澱させ
た。得られた生成物：４８りＦＩｇ。 溶媒としてクロロホルム／メタノール／酢酸工ｆｋ（７
０：　１．Ｏ：　３０）と酢酸エチル／イソプロパツー
ル（９５：　５）ヲ用い、シリカケルクロマトグラフィ
ーにかけて、生成物か各々、Ｒｆ＝０．２３〜０．５４
および０．０１〜０．５２を有することがわかった。 実施例２７　：　Ｎ−（３，３−ジクロロピバロイル）
リゾＧＭ。 リゾＧＭ、５００＋９（０，３８ｚＭ）をジメチルホ】
２フ ルムアミド２．５７ｄに溶解し、これに、ジメチルホル
ムアミｔ’２．５ｘ（！に溶解したヨウ化クロロメチル
ピリジン１９４．２ｏｇ（０，７６ｏＭ）、３，３ジク
ロロピバル酸６５０１１１１？（３，８ｍＭ）およびト
リエチルアミン５２８μｆ２（３，８πＭ）を添加した
。室温で１８時間反応さゼ、次に、酢酸エチル飽和水溶
液５０ＲＱで沈澱させた。生成物を乾燥し、次に、シリ
カゲルクロマトグラフィーにかけて、クロロホルム／メ
タノール／水（６０：　３５　：　８）で溶離して精製
した。純粋な分画を溜め、蒸発させ、次いで、ＩＮのＮ
ａ２ＣＯ３で集め、蒸留水に対して透析し、次に５１１
１Ｃに濃縮し、アセトン５０７＋１２に沈澱させた。得
られた生成物：３６５ｚｇ（理論値の８４％）。 クロロホルム／メタノール１０．３％ＣａＣ１！、（５
０：４２：１１）によって得られる溶媒を用いて、シリ
カゲルクロマトグラフィーにかけ、Ｒｆ＝０゜３６を有
する単一化合物であることがわかった。 実施例２８　：　Ｎ−（）レオニル）−リゾＧＭ。 リゾＧＭ、　５００ｊＩｇ（，０，３８λＭ）をジメチ
ルホルムアミド２．５ｍＱに溶解し、ジメチルホルムア
ミド２．５ｍＱに溶解したヨウ化クロロメチルピリジン
ｌ　９４　、２ｏ（０，７６ｏＭ）、ＦＭＯＣ−トレオ
ニン６４８ｏｇ（１，９，ｖＭ）およびトリエチルアミ
ン５２８μρ（３，８ｒｔＭ）を室温で添加した。室温
で１８時間反応させ、次に、ピペリジン２７ＮＣを添加
して、保護基（ＦＭＯＣ）を除去した。再度、室温で３
時間反応させ、次いで、アセトン１０１００Ｉに沈澱さ
せた。生成物を濾過し、乾燥した。次に、得られた生成
物をシリカゲルクロマトグラフィーにかけて、クロロホ
ルム／メタノール／水（６０３５・８）の混合物で溶離
して精製した。 純粋な分画を溜め、蒸発させ、次いで、ＩＮのＮａ２Ｃ
Ｏ３で集めて、蒸留水に対して透析し、５ｍσに濃縮し
、アセトン５０１１Ｑに沈澱させた。得られた生成物：
３２３ＩＩＩ９（理論値の６０％）。 りｏｏホルム／メタノール１０．３％ＣａＣＱ、＜５０
：４２：１１）からなる溶媒を用いて、シリカゲルクロ
マトグラフィーにかけ、Ｒｆ＝０．２９を有する単一化
合物であることかわかった。 実施例２９：Ｎ−（ジメチルグリシル）−リゾＧＭ。 リゾＧＭ、５００Ｂ（０，３８ｍＭ）を７メチルホルム
アミド２．５ｍｇに溶解し、ジメチルホルムアミド２．
５ＲＱに溶解したヨウ化クロロメチルピリジンＩ　９４
．２１１ｇ（０，７６，ｗＭ）、ジメチルグリジン１９
６所（１，９ｍＭ）およびトリエチルアミン５２８μｆ
！（３，８ｍＭ）を室温で添加した。室温で１８時間反
応さゼ、次いで、アセトン１００ｍＣに沈澱させた。生
成物を濾過し、乾燥した。次いで、得られた生成物をシ
リカゲルクロマＩ・グラフィーにかけ、クロロホルム／
メタノール／水（６０：３５・８）の混合物で溶離して
精製した。 純粋な分画を溜め、蒸発させ、次いで、ＩＮのＮａ、Ｃ
ｏ３で集め、蒸留水に対して透析し、次に、５靜に濃縮
し、アセトン５０Ｍσに沈澱さぜた。得られた生成物：
３０９ｍｇ（理論値の５８％）。 クロロホルム／メタノール１０．３％ＣａＣρ３（５０
：４２：１１）からなる溶媒を用い、シリカケルクロマ
トグラフィーにかけて、Ｒｆ＝Ｏ，Ｉ　１を有する単一
化合物であることがわかった。 実施例３０：Ｎ−（グルタリル）−リゾＧＭ。 リゾＧＭ、５００ｚｇ（０，３８ｍＭ）をジメチルホル
ムアミド／メタノール（１：１）１ｍ（に溶解シ、０°
Ｃでトリエチルアミン１６１μＱ（１，１４ｍＭ）およ
び無水グルタル酸１３０μρ（１，１４ｆｆＭ）を添加
した。室温で７２時間反応させ、２０容量倍の酢酸エチ
ルに沈澱させ、濾過し、乾燥した。 次いで、生成物をシリカケルクロマトグラフィーにかけ
て、クロロホルム／メタノール／水（６０：３５：８）
の混合物で溶離して精製した。 純粋な分画を溜め、蒸発させ、次いで、ＩＮのＮａ２Ｃ
Ｏ３で集め、蒸留水に対して透析し、次いで、５Ｉｌ！
ρに濃縮し、アセトン５０靜に沈澱させた。 得られた生成物：２１７ｏ（理論値の４０．０％）。 クロロホルム／メタノール１０．２％ＣａＣＩＬ（５０
・４２：１１）からなる溶媒を用いて、シリカゲルクロ
マトグラフィーにかけ、Ｒｆ＝ｏ、：３ｏを有する単一
化合物であることがわかった。 実施例３１：Ｎ−（クロロジフルオロアセチル）リゾＧ
Ｍ リゾＧＭ、５００屑ｇ（０，３８ｍＭ）をジメチルホル
ムアミド゛／メタノール（１，１）２．５１１Ｑ、に溶
解し、トリエチルアミン５２８μρ（３，８ｍＭ）およ
び無水クロロジフルオロ酢酸２７７ｍｇ（１，Ｉ　４−
４−７ｌをＯ′Ｃで添加した。室温で７２時間反応させ
、２０容量倍の酢酸エチルに沈澱させ、濾過し、乾燥し
た。 次いで、生成物をシリカゲルクロマトグラフィーにかけ
、クロロホルム／メタノール／水（６０：３５：８）の
混合物で溶離した。 純粋な分画を溜め、蒸発させ、次いで、ＩＮのＮａ２Ｃ
Ｏ３で集め、蒸留水に対して透析し、次いで、５μＱに
濃縮し、アセトン５０靜に沈澱させた。 得られた生成物：３３３ｘｙ（理論値の６２０％）。 りＯＯホルム／メタノール１０２％ＣａＣＬ（５０：４
２：１１）によって形成された溶媒を用いて、シリカゲ
ルクロマトグラフィーにかけ、Ｒｆ−Ｏ，３７を有する
単一化合物であることがわかった。 実施例３２：Ｎ−（イソロイシル）−リゾＧＭリゾＧＭ
、５００即（０，３８ＦＭ）をジメチルホルムアミド２
５叶に溶解し、ジメチルホルムアミド２．５ｆｆｇに溶
解したヨウ化クロロメチルピリジン１９４．２Ｒ９（０
，７６ｏＭ）、ＦＭＯＣ−イソロイシン６７１ｍｇ（１
，９πＭ）およびトリエチルアミン５２８μρ（３，８
ｏＭ）を室温で添加した。室温で１８時間反応させ、次
いで、ピペリジン２ＲＱを添加して、保護基（ＦＭＯＣ
）を除去した。再度、室温で３時間反応させ、アセトン
１００村に沈澱させ、濾過し、乾燥した。次に生成物を
シリカゲルクロマトグラフィーにかけて、クロロホルム
／メタノール／水（６０：　３５　二８）の混合物で溶
離して精製した。 純粋な分画を溜め、蒸発させ、次いで、ＩＮのＮａ２Ｃ
Ｏ３で集め、蒸留水に対して透析し、次いで、５μＱに
濃縮し、アセトン５０１１ｆＱに沈澱さぜた。 得られた生成物　２９８ｍｇ（理論値の５５％）。 クロロホルム／メタノール１０．３％ＣａＣ１２ｔ（５
０：４２：１１）からなる溶媒を用いて、シリカゲルク
ロマトグラフィーにかけ、Ｒｆ＝０．２８を有する単一
化合物であることがわかった。 実施例３３：注射用溶液形態の医薬製剤製剤１：１つの
２ｍρバイアルは以下の成分を含有する 活性物質　　　　　　　　　　　　　５Ｆ／（ｇ塩化ナ
トリウム　　　　　　　　　１６＋ａｇ実施例３．４．
１８のいずれかに記載のカングリオント誘導体からなる
群から活性物質を選択した。 製剤２：１つの２ｍρバイアルは以下の成分を含有する 活性物質　　　　　　　　　　　　５０ｘｇ塩化ナトリ
ウム　　　　　　　　　１６駆９実施例５．６．７のい
ずれかに記載のガングリオシド誘導体からなる群から活
性物質を選択した。 製剤３：１つの４ＲＱフラコンは以下の成分を含有する
： 活性物質 塩化ナトリウム ＋００尻９ ２ｍｇ 実施例９．１０，１４のいずれかに記載のガングリオシ
ド誘導体からなる群から活性物質を選択した。 製剤１．２および３は、既述したいずれかの経路によっ
て動物またはヒトに直接投与することができる。また、
これらの製剤は薬学的に活性な物質をさらに含有するこ
とができる。 実所１舛多」３．２個のフラツフで調製した医薬組成物 本実施例において示す製剤は、２個フラコンで調製され
る。第１のフラツフは、１０重量％〜９０重量％に変化
する量の凍結乾燥した粉末形態の活性物質、およびグリ
シンまたはマンニト−ルのような医薬的に許容される賦
形剤を含む。第２のフラツフは、塩化ナトリウム溶液お
よびクエン酸緩衝液のような溶媒を含む。 ２つのフラツフの内容物を使用直前に混合し、凍結乾燥
した活性物質の粉末を素早く溶解して注射用溶液を得る
。活性物質の凍結乾燥粉末を含むフラツフは、本発明の
好ましい医薬形態である。 システム１ ａ　凍結乾燥した物質を含有する１つの２靜７＜イアル
は以下の成分を含有する 活性物質　　　　　　　　　　　　　５ｘ９グリシン　
　　　　　　　　　　　３０仄９ｂ、溶媒を含有する１
つの２ｍρバイアルは以下の成分を含有する： 塩化ナトリウム　　　　　　　　　　１６即蒸留水によ
るクエン酸緩衝液で２ＲＱに調製実施例１９．２０．２
２のいずれかに記載のガングリオシド誘導体からなる群
から活性物質を選択した。 システム２ ａ、凍結乾燥した物質を含有する１つの３ｆｆｌＣバイ
アルは以下の成分を含有する 活性物質　　　　　　　　　　　　　５ｍＷマンニト−
ル　　　　　　　　　　４０π９ｂ、溶媒を含有する１
つの２１１２バイアルは以下の成分を含有する： 塩化ナトリウム　　　　　　　　　１６ｍｇ蒸留水によ
るクエン酸緩衝液で２Ｒσに調製実施例２３．２４のい
ずれかに記載のガングリオシド誘導体からなる群から活
性物質を選択した。 システム３ ａ、凍結乾燥した物質を含有する１つの３ＭＱバイアル
は以下の成分を含有する： 活性物質　　　　　　　　　　　　５０肩９グリシン　
　　　　　　　　　　　　２５゜ｂ、溶媒を含有する１
つの３叶バイアルは以下の成分を含有する 塩化ナトリウム　　　　　　　　　２４．　ｍｇ蒸留水
によるクエン酸緩衝液で３ＲＱに調製実施例２６に記載
のガングリオシド誘導体からなる群から活性物質を選択
した。 システム４ ａ　凍結乾燥した物質を含有する１つの３ＭＱバイアル
は以下の成分を含有する 活性物質　　　　　　　　　　　　５０１１ｇマンニト
ール　　　　　　　　　　２０ｍｇｂ、溶媒を含有する
１つの３ｉＱバイアルは以下の成分を含有する 塩化ナトリウム　　　　　　　　　２４　ｍｇ蒸留水に
よるクエン酸緩衝液で３祿に調製実施例２６に記載のガ
ングリオシド誘導体からなる群から活性物質を選択した
。 システム５ ａ、凍結乾燥した物質を含有する１つの５１１Ｑフラコ
ンは以下の成分を含有する。 活性物質　　　　　　　　　　　１５０ｘｇグリシン　
　　　　　　　　　　　５０２゜ｂ、溶媒を含有する１
つの４１１１２バイアルは以下の成分を含有する 塩化ナトリウム　　　　　　　　　３２ｘｇ蒸留水によ
るクエン酸緩衝液で４ｍ（ｌに調製実施例２３．２４の
いずれかに記載のガングリオシド誘導体からなる群から
活性物質を選択した。 システム６ ａ、凍結乾燥した物質を含有する１つの５ｍＱフラコン
は以下の成分を含有する・ 活性物質　　　　　　　　　　　］、ＯＯｘｇマンニト
ール　　　　　　　　　　４０ｚ９ｂ、溶媒を含有する
１つの４７１ρバイアルは以下の成分を含有する： 塩化ナトリウム　　　　　　　　　　３２ｘｇ蒸留水に
よるクエン酸緩衝液で４１１Ｑに調製実施例２３．２４
．２６のいずれかに記載のガングリオシド誘導体からな
る群から活性物質を選択した。

【図面の簡単な説明】

第１図は、グルタメート誘導の神経毒性に対するカング
リオシトの保護作用に及はすプレインキュヘート時間の
影響を示すグラフであり、第２図は、細胞の生存に及ぼ
すグルタメート暴露とカングリオシトによる前処理の間
の時間的間隔の影響を示すグラフであり、 第３図は、細胞の生存に及ぼすグルタメートとガングリ
オシドの同時処理（１５分）の作用を示すグラフであり
、 第４図は、’Ｈ−ＰＤＢｕ結合に及はすグルタメート（
５０ｕＭ）とガングリオシド（１００μＭ）　ＧＭｌ、
ＧＴ１、ｂまたはＬＩＧＡ２０（７μＭ）の同時処理（
１５分）の作用を示すグラフであり、第５図は、細胞生
存および３Ｈ−ＰＤＢｕ結合に及ぼすグルタメートとガ
ングリオシドの同時処理（３５分）と、それに続くガン
グリオシドへの延長暴露（さらに３５分）の作用を示す
グラフであり、第６図は、グルタメート投与後の２０分
間のＬｒＧＡ２０（７μＭ）処理によるグルタメート誘
導の神経毒性の阻害を示すグラフであり、第７図は、細
胞を無酸素状態に置いた後にＧＭ、、ＬＴＧＡ２０また
はＬＩＧＡ２１で処理したときの細胞生存性を示すグラ
フである。 特許比ｍＲ人　　フィディーア・ソシエタ・ベル・アチ
オニ代理　人弁理士青山　葆　はか１名 Ｆ／θ すＯ戸グゝ１しθメート（ｉｉ５会つ Ｆ／θ ○ （分） ＩＧ 傾ド 一憂 婬讃 赳 １ｏ○ 口対照−Ｍ９ 母Ｇｕｔ 冒Ｇｌｕｔ　＋　ＬＩＧＡ　２０ Ｆ／θ 一＄、Ｉｈ：ｉ：　　ＬＫｒ△２０　去・より′２１　
＝ｔｏ／ｈ９■；Ｃら分

Claims (1)

1. 【特許請求の範囲】 １、（ａ）アシル基が、 （ｉ）塩素、臭素および弗素； （ｉｉ）遊離のヒドロキシ基、または有機酸もしくは無
   機酸でエステル化されたヒドロキシ基；（ｉｉｉ）エー
   テル化されたヒドロキシ基；（ｉｖ）低級脂肪族または
   アリール脂肪族アルコールから導かれるケト、ケタール
   およびアセ タール基； （ｖ）低級アルキルまたはアラルキル基で置換されてい
   ることもあるケトキシム、アルドキ シムまたはヒドラゾン基； （ｖｉ）遊離のメルカプト基、または低級脂肪族もしく
   はアリール脂肪族酸でエステル化され たか、または低級脂肪族もしくはアリール 脂肪族アルコールでエーテル化されたメル カプト基； （ｖｉｉ）遊離の、またはエステル化されたカルボキシ
   基； （ｖｉｉｉ）遊離のスルホン基、または低級脂肪族もし
   くはアリール脂肪族アルコールでエステル 化されたスルホン基； （ｉｘ）低級アルキルもしくはアラルキル基または低級
   アルキレン基で置換されたスルファミ ド酸またはスルファミド基； （ｘ）低級アルキルまたはアラルキル基から導かれるス
   ルホンまたはスルホキシド基； （ｘｉ）ニトリル基、 （ｘｉｉ）遊離の、または置換されたアミノ基、および
   これらアミノ基の４級アンモニウム誘導 体； らなる群から選ばれる１またはそれ以上の極性基で置換
   された炭素原子数２〜２４の脂肪族酸から導かれるＮ−
   アシル−リゾガングリオシド、並びに、 （ｂ）該Ｎ−アシル−リゾガングリオシドのシアリン酸
   カルボキシ基のエステルおよび／またはアミド、該Ｎ−
   アシル−リゾガングリオシドの内部エステル、該Ｎ−ア
   シル−リゾガングリオシドの過アシル化誘導体、酸基を
   有する該Ｎ−アシル−リゾガングリオシドの金属塩もし
   くは有機塩基との塩、該Ｎ−アシル−リゾガングリオシ
   ドの酸付加塩、および対応する該Ｎ−アシル−リゾガン
   グリオシドの混合物の誘導体。 ２、アシル基が最大炭素原子数１２の直鎖の酸から導か
   れる請求項１記載のＮ−アシル−リゾガングリオシド。 ３、アシル基が分岐鎖の酸から導かれ、側鎖が最大炭素
   原子数４のアルキルであり、酸の最大炭素原子数が１２
   である請求項１記載のＮ−アシル−リゾガングリオシド
   。 ４、アシル基が１〜３の極性極性で置換されている請求
   項１〜３のいずれかに記載のＮ−アシル−リゾガングリ
   オシド。 ５、極性基が脂肪族、芳香族、アリール脂肪族、脂環式
   または複素環式系列の酸でエステル化されたヒドロキシ
   基であり、治療学的に許容しうるものである請求項１〜
   ４のいずれかに記載のＮ−アシル−リゾガングリオシド
   。 ６、脂肪族酸から導かれるエステル基の最大炭素原子数
   が８である請求項５記載のＮ−アシル−リゾガングリオ
   シド。 ７、芳香族、アリール脂肪族、脂環式または複素環式の
   酸から導かれるエステル基が１個の単一の環式基を有す
   るものである請求項５記載のＮ−アシル−リゾガングリ
   オシド。 ８、極性基が、最大炭素原子数１２の脂肪族系列の、ま
   たは１〜３の低級アルキル基で置換されていることもあ
   る１個の単一のベンゼン環と脂肪族部分の最大炭素原子
   数４を有するアリール脂肪族系列の、または１個の単一
   の脂環式の環と最大炭素原子数１４を有する脂環式もし
   くは脂肪族脂環式系列の、または最大炭素原子数が１２
   であり、Ｎ、ＯおよびＳからなる群から選ばれる１個の
   異項原子を含有する１個の複素環を有する複素環式系列
   のアルコールでエーテル化されたヒドロキシ基である請
   求項１〜４のいずれかに記載のＮ−アシル−リゾガング
   リオシド。 ９、極性基が、ヒドロキシ、アミノ、アルキル部分の最
   大炭素原子数が４であるアルコキシ基、アルキル部分の
   最大炭素原子数が４であるアルキルアミノもしくはジア
   ルキルアミノ基からなる群から選ばれる官能基によって
   置換されたアルコールでエーテル化されたヒドロキシ基
   である請求項８記載のＮ−アシル−リゾガングリオシド
   。 １０、Ｎ−アシル基が、モノ、ジもしくはトリクロロ酸
   から、またはモノ、ジもしくはトリフルオロ酸から導か
   れる請求項１記載のＮ−アシル−リゾガングリオシド。 １１、Ｎ−アシル基が、ジクロロ酢酸、トリクロロ酢酸
   またはそのフルオロもしくはブロモ類似体から導かれる
   請求項１０記載のＮ−アシル−リゾガングリオシド。 １２、Ｎ−アシル基が、モノヒドロキシプロピオン酸、
   モノヒドロキシ酪酸もしくはモノヒドロキシ吉草酸から
   、またはそれらの低級脂肪族アルコールとのエーテルも
   しくはそれらの低級脂肪族酸とのエステルから導かれる
   請求項１記載のＮ−アシル−リゾガングリオシド。 １３、Ｎ−アシル基が、アミノ酢酸、２−アミノプロピ
   オン酸、２−アミノ酪酸、３−アミノ酪酸、２−アミノ
   吉草酸、４−アミノ酪酸および４−アミノ吉草酸からな
   る群から選ばれるモノアミノ酸から導かれる請求項１記
   載のＮ−アシル−リゾガングリオシド。 １４、Ｎ−アシル基が、ピルビン酸、アセト酢酸もしく
   はレブリン酸から、またはそれらの低級脂肪族アルコー
   ルとのケタールもしくはそれらのオキシムもしくは低級
   アルキル基で置換されたオキシムから導かれる請求項１
   記載のＮ−アシル−リゾガングリオシド。 １５、Ｎ−アシル基が、メルカプト酢酸、２−メルカプ
   トプロピオン酸もしくは２−メルカプト吉草酸から、ま
   たはそれらの低級脂肪族一価アルコールとのエーテルか
   ら導かれる請求項１記載のＮ−アシル−リゾガングリオ
   シド。 １６、Ｎ−アシル基が、マロン酸、グルタル酸、マレイ
   ン酸、リンゴ酸、コハク酸、フマル酸、またはそれらの
   低級脂肪族アルコールとのエステルから導かれる請求項
   １記載のＮ−アシル−リゾガングリオシド。 １７、Ｎ−アシル基が、スルホ酢酸、２−スルホプロピ
   オン酸、２−スルホ酪酸もしくは２−スルホ吉草酸、お
   よびそれらの低級脂肪族アルコールとのエステルから導
   かれる請求項１記載のＮ−アシル−リゾガングリオシド
   。 １８、Ｎ−アシル基が、シアノ酢酸、２−シアノプロピ
   オン酸、２−シアノ酪酸または２−シアノ吉草酸から導
   かれる請求項１記載のＮ−アシル−リゾガングリオシド
   。 １９、Ｎ−アシル基が、低級アルキル基から導かれるア
   ルキルスルホキシドまたはアルキルスルホン基によって
   ２位が置換された酢酸、プロピオン酸、酪酸または吉草
   酸から導かれる請求項１記載のＮ−アシル−リゾガング
   リオシド。 ２０、最大炭素原子数１２の脂肪族系列の、または１〜
   ３の低級アルキル基で置換されていることもある１個の
   単一のベンゼン環と脂肪族部分の最大炭素原子数４を有
   するアリール脂肪族系列の、または１個の単一の脂環式
   の環と最大炭素原子数１４を有する脂環式もしくは脂肪
   族脂環式系列の、または最大炭素原子数が１２であり、
   Ｎ、ＯおよびＳからなる群から選ばれる１個の異項原子
   を含有する１個の複素環を有する複素環式系列のアルコ
   ールから導かれる前記請求項のいずれかに記載のＮ−ア
   シル−リゾガングリオシドのシアリン酸カルボキシのエ
   ステル。 ２１、シアリン酸のカルボキシ基と糖のヒドロキシ基の
   ラクトン化によって形成される請求項１〜１９のいずれ
   かに記載のＮ−アシル−リゾガングリオシドの内部エス
   テル。 ２２、シアリン酸のカルボキシ基とシアリン酸のヒドロ
   キシ基の間で形成されたラクトン環を含有する請求項１
   〜１９のいずれかに記載のＮ−アシル−リゾガングリオ
   シドの内部エステル。 ２３、最大炭素原子数６の脂肪族酸から導かれる請求項
   １記載のＮ−アシル−リゾガングリオシドの過アシル化
   誘導体。 ２４、基本のガングリオシドがＧ＿Ｍ＿１、Ｇ＿Ｍ＿３
   、Ｇ＿Ｄ＿１＿ａ、Ｇ＿Ｄ＿１＿ｂおよびＧ＿Ｔ＿１＿
   ｂからなる群から選ばれるものである前記請求項のいず
   れかに記載のＮ−アシル−リゾガングリオシド。 ２５、Ｎ−ジクロロアセチル　リゾＧ＿Ｍ＿１、Ｎ−ク
   ロロアセチルリゾＧ＿Ｍ＿１、 Ｎ−３−クロロピバロイルリゾＧ＿Ｍ＿１、Ｎ−ヒドロ
   キシアセチルリゾＧ＿Ｍ＿１、 Ｎ−トリフルオロアセチルリゾＧ＿Ｍ＿１、Ｎ−トリブ
   ロモアセチルリゾＧ＿Ｍ＿１、 Ｎ−メルカプトアセチルリゾＧ＿Ｍ＿１、 Ｎ−マレイルリゾＧ＿Ｍ＿１、 Ｎ−１２−ヒドロキシステアロイルリゾＧ＿Ｍ＿１、Ｎ
   −２−ヒドロキシブチロイルリゾＧ＿Ｍ＿１、Ｎ−フル
   オロアセチルリゾＧ＿Ｍ＿１、 Ｎ−ジフルオロアセチルリゾＧ＿Ｍ＿１、 Ｎ−３−アミノプロピオニルリゾＧ＿Ｍ＿１、Ｎ−シア
   ノアセチルリゾＧ＿Ｍ＿１、 Ｎ−（３−ジエチルアミノプロピオニル）リゾＧ＿Ｍ＿
   １、Ｎ−アミノアセチルリゾＧ＿Ｍ＿１、 からなる群から選ばれるＮ−アシル−リゾガングリオシ
   ド。 ２６、シアリン酸のカルボキシ基と、エチル、プロピル
   、イソプロピル、ｎ−ブチル、イソブチル、ｔｅｒｔ−
   ブチル、ベンジル、アリル、エトキシカルボニルメチル
   およびシクロヘキシルアルコールからなる群から選ばれ
   るアルコールのエステル化によって得られる請求項２５
   記載の化合物のエステル。 ２７、シアリン酸のカルボキシ基と、メチルアミン、エ
   チルアミン、プロピルアミン、ジメチルアミン、ジエチ
   ルアミン、ピロリジン、ピペリジン、ピペラジン、モル
   ホリンおよびチオモルホリンからなる群から選ばれるア
   ミンのアミド化によって得られる請求項２５記載の化合
   物のアミド。 ２８、請求項２５〜２７のいずれかに記載の化合物のパ
   ーアセチレート、パープロピオニレート、パーブチリレ
   ート、パーマレイニレート、パーマロニレートおよびパ
   ースクシニレート。 ２９、分子中に少なくとも１つの酸官能基を有する前記
   請求項に記載のＮ−アシル−リゾガングリオシドの、ま
   たはそれぞれの混合物の治療学的に許容しうる金属塩。 ３０、請求項２９に記載のＮ−アシル−リゾガングリオ
   シドのナトリウム、カリウム、アンモニウム、カルシウ
   ム、マグネシウム、アルミニウム塩。 ３１、分子中に少なくとも１つの酸官能基を有する前記
   請求項に記載のＮ−アシル−リゾガングリオシドの、ま
   たはそれぞれの混合物の治療学的に許容しうる有機塩基
   塩。 ３２、分子中に少なくとも１つの塩基性官能基を有する
   前記請求項に記載のＮ−アシル−リゾガングリオシドの
   、またはそれぞれの混合物の治療学的に許容しうる酸付
   加塩。 ３３、リゾガングリオシドまたはデ−Ｎ−アセチルリゾ
   ガングリオシドまたはこれら化合物の混合物を、所望に
   よりアシル化する成分中の官能基を一時的に保護した後
   に、 （ｉ）塩素、臭素および弗素； （ｉｉ）遊離のヒドロキシ基、または有機酸もしくは無
   機酸でエステル化されたヒドロキシ基；（ｉｉｉ）エー
   テル化されたヒドロキシ基；（ｉｖ）低級脂肪族または
   アリール脂肪族アルコールから導かれるケト、ケタール
   およびアセ タール基； （ｖ）低級アルキルまたはアラルキル基で置換されてい
   ることもあるケトキシム、アルドキ シムまたはヒドラゾン基； （ｖｉ）遊離のメルカプト基、または低級脂肪族もしく
   はアリール脂肪族酸でエステル化され たか、または低級脂肪族もしくはアリール 脂肪族アルコールでエーテル化されたメル カプト基； （ｖｉｉ）遊離の、またはエステル化されたカルボキシ
   基、 （ｖｉｉｉ）遊離のスルホン基、または低級脂肪族もし
   くはアリール脂肪族アルコールでエステル 化されたスルホン基； （ｉｘ）低級アルキルもしくはアラルキル基または低級
   アルキレン基で置換されたスルファミ ド酸またはスルファミド基； （ｘ）低級アルキルまたはアラルキル基から導かれるス
   ルホンまたはスルホキシド基； （ｘｉ）ニトリル基； （ｘｉｉ）遊離の、または置換されたアミノ基、および
   これらアミノ基の４級アンモニウム誘導 体； からなる群から選ばれる１またはそれ以上の極性基で置
   換された炭素原子数２〜２４の脂肪族酸でアシル化し、 そして所望により、得られた生成物のカルボキシ官能基
   をエステルまたはアミドに変換するか、またはガングリ
   オシド内部エステルを調製するか、または存在している
   ヒドロキシ基を過アシル化し、そして所望により、Ｎ−
   アシル基に存在している極性基をそれらの間で変換し、
   そして所望により、得られた生成物を塩に変換する、 ことを特徴とする請求項１記載のＮ−アシル−リゾガン
   グリオシドおよびその誘導体の製造方法。 ３４、出発物質を酸の反応性官能性誘導体と反応させる
   請求項３３記載の方法。 ３５、以下に挙げる反応群から選ばれる方法を用いる請
   求項３３記載の方法： （１）酸アジドとリゾガングリオシド誘導体の反応； （２）アシルイミダゾールとリゾガングリオシド誘導体
   の反応； （３）酸およびトリフルオロ酢酸の混合無水物とリゾガ
   ングリオシド誘導体の反応； （４）酸の塩化物とリゾガングリオシド誘導体の反応； （５）カルボジイミドの存在下で、および所望により１
   −ヒドロキシベンゾトリアゾールの 存在下での、酸とリゾガングリオシド誘導 体の反応； （６）高温での、酸とリゾガングリオシド誘導体の反応
   ； （７）高温での、酸のメチルエステルとリゾガングリオ
   シド誘導体の反応； （８）高温での、酸のフェノールエステルとリゾガング
   リオシド誘導体の反応； （９）酸の塩とヨウ化１−メチル−２−クロロピリジン
   の間の交換によって導かれるエステ ルまたはその類似産物とリゾガングリオシ ド誘導体の反応。 ３６、ヒドロキシ基、１級もしくは２級アミノ基、また
   は遊離のカルボキシ基を、アシル化反応の間、一時的に
   保護する請求項３３〜３５のいずれかに記載の方法。 ３７、デ−Ｎ−アセチル−リゾガングリオシドを出発物
   質として用いるときには穏やかなアシル化条件を用い、
   変換されていないノイラミン酸のアミノ基をアセチル化
   する請求項３３〜３６のいずれかに記載の方法。 ３８、アセチル化試薬として無水酢酸を用いる請求項３
   ７記載の方法。 ３９、シアリン酸のカルボキシ基をエステル化するか、
   もしくはアミドに変換するか、または得られた化合物の
   内部エステルまたは過アシル化誘導体を製造する請求項
   ３３〜３８のいずれかに記載の方法。 ４０、方法をいずれかの工程で中断するか、または中間
   の工程から始め、次いで残りの工程を行う請求項３３〜
   ３９のいずれかに記載の方法。 ４１、医薬としての請求項１記載の化合物の使用。 ４２、医薬としての請求項２〜３２のいずれかに記載の
   化合物の使用。 ４３、活性成分として請求項１記載の化合物を薬学的に
   許容しうる賦形剤とともに含有している医薬調製物。 ４４、活性成分が請求項２〜３２のいずれかに記載の化
   合物である請求項４３記載の医薬調製物。 ４５、神経系障害の治療のための請求項１記載の化合物
   の治療学的使用。 ４６、請求項２〜３２のいずれかに記載の化合物の１ま
   たはそれ以上を投与する請求項４５記載の治療学的使用
   。 ４７、大脳虚血、低血糖および低酸素などの代謝性の脳
   障害、毒物由来の脳障害、外傷、老化、癲燗、パーキン
   ソン病およびハンテイングトン舞踏病などの神経退化疾
   患、および／または精神障害の治療における請求項４５
   または４６記載の治療学的使用。 ４８、１日あたり、体重１ｋｇに対して０．０５〜５ｍ
   ｇの活性物質を非経口経路で投与する請求項４５〜４７
   のいずれかに記載の治療学的使用。