JPH02215711A - プロテインキナーゼ阻害剤としての、ｎ‐メチル‐スフィンゴシン誘導体及びその立体異性体 - Google Patents

Abstract

(57)【要約】本公報は電子出願前の出願データであるた
め要約のデータは記録されません。

Description

【発明の詳細な説明】 発明の分野 本発明はプロテインキナ−ゼの阻害剤に関し、詳しくは
Ｎ−メチル−スフィンゴシンがプロテインキナ−ゼに対
する強い阻害剤であることを示す発明者による最近の発
見に関する。「Ｎ−メチル−スフィンゴシン」はＤ−ま
たはＬ−／あるいはエリトロ−またはトレオー配位を表
わし、Ｎ、Ｎ’−ジメチル−スフィンゴシンまたはＮ−
モノメチルスフィンゴシンを意味する。これらの化合物
は腫瘍細胞に対して有効な増殖阻害剤として使用する可
能性を有している。

発明の背景 スフィンゴシンおよびスフィンゴイドはＣ−キナーゼお
よびＥＧＦレセプターが関与するチロシンキナーゼの阻
害剤として知られている。〔ハヌーンおよびべ／Ｌ／　
（Ｈａｎｎｕｎ　ａｎｄ　Ｂｅ１ｌ）、サイエンス（Ｓ
ｃｉｅｎｃｅ）、２３５．６７０〜６７４、ｌ　９８７
；ハヌーン（Ｈａｎｎｕｎ）ほか、ＪＢＣ，２６１，１
２６０４〜１２６０９．１９８６；クロイタ−（Ｋｒｅ
ｕｔｔｅｒ）　　ほか、ＪＢＣ，２６２，１６３２〜１
６３７．１９８７”ｌ。しかし、これらの研究において
、使用されたスフィンゴシンは市販品〔シグマ拳ケミカ
ル社（Ｓｉｇｍａ　Ｃｈｅ＋ｎ１ｃａｌ　Ｃｏｍｐａｎ
ｙ）　）であった。市販のスフィンゴシンはスフィンゴ
ミエリンまたはセレブロシドのメタツリシスにより製造
されるので、その過程において副生じた種々の不純物、
例えば３−０．５−０メチルスフインゴシンおよびＮ−
メチルスフィンゴシンが含有されている。

さらに、スフィンゴシンの栓構造、すなわちＤ−エリト
ロ配置が一部Ｄ−）レオ配置に変換されることがある。

従って、市販スフィンゴシン中に存在するこれらの構造
の不均一性のため、スフィンゴシンがＣ−キナーゼおよ
びＥＧＦレセプターキナーゼに対する重要な阻害剤であ
ると指摘している主張は不明瞭なま＼である。

しかし、スフィンゴシンおよびスフィンゴイド塩基が強
力な増殖修飾活性を有していてかつ細胞増殖の調節に対
してこれらの化合物、を適用していくことが可能である
ことから、この領域の研究は現在も盛んに行なわれてい
る。

従って、種々の細胞に対して、これらの化合物が実際に
細胞成長制御に於て、強い効果を有しているということ
を、構造の正確なスフィンゴシンおよびスフィンゴシン
塩基またはその誘導体を用いて確立するということは非
常に望ましいことである。

発明の概要 本発明の一つの目的は、立体選択的なルートを経て合成
された立体配位の明らかなスフィンゴシンおよびスフィ
ンゴイド塩基並びに（または）それらの誘導体の増殖修
飾活性に関する情報を提供することである。

本発明のさらにもう一つの目的は広範囲の細胞に対して
強い増殖阻害活性を有するこれらの化合物の誘導体の試
験管内適用を提供することである。

本発明の前記の目的はＮ−メチル−Ｄ−工ＩＪ　）ロー
スフィンゲニンまたはＮ−メチル−Ｌ−エリトロ−スフ
ィンゲニンを共存させてプロテインキナ−ゼ活性の阻害
度を測定することにより達成された。

本発明はまたヒトおよび動物の細胞の増殖を阻害する薬
剤であって、（１）Ｎ−メチル−Ｄ−エリトロ−スフィ
ンゲニン、Ｎ−メチル−Ｌ−エリトロ−スフィンゲニン
およびそれらの薬剤学的に許容される塩からなる群から
選ばれる１種またはそれ以上の増殖阻害剤の細胞増殖阻
害量；および（２）薬剤学的に許容される担体、希釈剤
または賦形剤、を含む薬剤を提供することである。

本発明はさらに、生体内でヒトおよび動物の細胞の増殖
を阻害する方法であって、前記細胞をＮ−メチル−〇−
二ソリドロースフィンゲニンＮ−メチル−Ｌ−エリトロ
−スフィンゲニンおよびそれらの薬剤学的に許容される
塩からなる群から選ばれる１種またはそれ以上の増殖阻
害剤の細胞増殖阻害量に接触させることを含む方法を提
供する。

プロテインキナ−ゼ活性の阻害剤および細胞増殖阻害剤
として最も好ましい物質はＮ−メチル−Ｄ−工’Ｊ）ロ
ースフィンゲニンでアル。

プロテインキナ−ゼとしてはＣ−キナーゼ、ＥＧＦキナ
ーゼまたはＳＲＣ＠瘍遺伝子キナーゼが好ましい。

発明の詳細な説明 スフィンゴシンが、Ｃ−キナーゼ、ＥＧＦレセプタキナ
ーゼおよび５ＲＣ１ｌｉ瘍遺伝子キナーゼなどのプロテ
インキナ−ゼに対し阻害活性を有することを示すため、
本発明者は、第１図に示されるように精密化学合成によ
って得られたＤ−およびＬ−エリトローオヨびトレオー
スフィンゴシン並びにそれらのＮ−ジメチル誘導体を用
いてこれらの化合物のプロテインキナ−ゼ阻害活性を評
価した。

立体化学の明らかなスフィンゴシンおよびそれらの誘導
体についてＡ４１３細胞（ヒト表皮癌細胞）から得られ
たＣ−キナーゼ活性に対する効果の比較を第２図右よび
第３図並びに表■および表■に示した（実施例２参照）
。

次の結論を得ることができる： （１）　　Ｄ−エリトロおよびＬ−エリトロ−スフィン
ゲニンは同程度弱い阻害活性を示した。

（２）　　Ｎ−メチル−〇−二ソリドロースフィンゲニ
ンみがＣ−キナーゼに対して強い阻害活性を示した。Ｎ
−メチル−Ｌ−エリトロ−スフィンゲニンはそれより弱
い阻害活性を示し、それでもなお遊離アミノ基を有する
非置換スフィンゲニンよりは強い阻害活性を示した。

（３）　　Ｎ−メチル−Ｄ−エリトロ−スフィンゲニン
の阻害活性はＮ−アセチル−ＧＭ、　、Ｎ−グリコリル
−ＧＭ、　、詣よびＧ　Ｄ、、等のガングリオシドより
高かったが、しかし、最も強い活性を有する阻害ガング
リオシドＧＴ、、とは同程度の阻害活性を示した。

（４）　このことから、Ｎ−メチル−Ｄ−エリトロ−ス
フィンゲニンおよびＮ−メチル−Ｌ−エリトロ−スフィ
ンゲニンはＥＧＦレセプターキナーゼに対して類似の活
性を示すことが、予期される。

本発明者はまた、Ｎ−メチル−スフィンゴシンが不純物
として含まれている市販の〔シグマ・ケミカル社（Ｓｉ
ｇｍａ　Ｃｈｅｍｉｃａｌ　Ｃｏ、）　のスフィンゴシ
ンがＳＲＣ腫瘍遺伝子キナーゼ活性を阻害することを認
めた。しかし、ＳＲＣ腫瘍遺伝子キナーゼ活性は合成り
（＋）エリトロスフインゲンまたはＬ　（−）エリトロ
スフィンゲニンにより阻害されなかった。その後、本発
明者はキナーゼ活性の阻害に関与したのはＮ−メチル−
スフィンゴシンであったことを確Ｓ忍した。

本発明者によるこれらの発見の結果、本発明はＮ−メチ
ル−Ｄ−エリトロ−スフィンゲニンまたはＮ−メチル−
Ｌ−エリトロ−スフィンゲニンを含むプロテインキナ−
ゼ活性の阻害剤を提供する。

プロテインキナ−ゼの阻害剤として好ましくはＮ−メチ
ル−Ｄ−エリトロースフィンゲニンであり、キナーゼと
して好ましくはＣ−キナーゼ、ＥＧＦレセプターキナー
ゼまたはＳＲＣ腫瘍遺伝子キナーゼである。

Ｎ−メチル−Ｄ−エリトロ−スフィンゲニンおよびＮ−
メチル−Ｌ−エリトロ−スフィンゲニンは、ホルムアル
デヒドおよび水素化ホウ素ナトリウムの存在下、それぞ
れＤ（＋）エリトロ−スフィンゲニンおよびＬ　（−）
エリトロ−スフィンゲニンの還元メチル化を含む公知方
法により製造できる〔ミーンズおよびフィーネイ　（Ｍ
ｅａｎｓ　ａｎｄｆｅｅｎｅｙ）　、バイオケミストリ
ー（Ｂｉｏｃｈｅｍｉｓｔｒｙ）ユ、２１９２．１９６
８；タンパク質の化学修飾−（Ｃｈｅｍｉｃａｌ　Ｍｏ
ｄｉｆｉｃａｔｉｏｎ　　ｏｆ　Ｐｒｏｔｅｉｎｅｓ）
　、ホルデン拳デイ社（）Ｉｏ！ｄｅｎ　−Ｄａｙ、　
　Ｉｎｃ、、　Ｓａｎ　ｆｒａｎｃｉｓｃｏ）、　ｐ、
　　２１７．１９７１〕。生成したＮ、　　Ｎ−ジメチ
ル−スフィンゴシン誘導体とＮ−メチルスフィンゴシン
誘導体は薄層クロマトグラフィーにより分離することが
できる。Ｄ（＋）エリトロ−スフィンゲニンおよびＬ　
（−）エリトロ−スフィンゲニンはまた公知方法により
製造することができる〔コイヶ（Ｋｏ　ｉｋｅ、　Ｋ、
　）　ほか、カーボハイドレート・リサーチ（Ｃａｒｂ
ｏｈｙｄｒａｔｅ　Ｒｅ５ｅａｒｃｈ）。

１５８．１１３〜１２３．１９８６；コイケ（Ｋｏｉｋ
ｅ、　Ｋ）　　ほか、Ｄ−グルコースからのセラミドの
効率的合成、グリココンジュゲート・ジャーナル（Ｇｌ
ｙｃｏｃｏｎｊｕｇａｔｅ　　Ｊａｕｒｎａｌ）、■、
１０７〜１０９．１９８４）。Ｎ−メチル誘導体の構造
はＮＭＲおよびＦＡＢマスの測定により確認できる。

試験管内（ｉｎ　ｖｉｔｒｏ）または生体内（ｉｎ　ｖ
ｉｔｒｏ）でプロテインキナ−ゼ活性の阻害に適する濃
度は例えば第２図および表■に示されるｉｎ　ｖｉｔｒ
ｏデータ（実施例２参照）から容易に決定され得る。

また、本発明によるＮ−メチル−Ｄ−エリトロ−スフィ
ンゲニンおよびＮ−メチル−Ｌ−エリトロ−スフィンゲ
ニンのプロテインキナ−ゼ活性に対する阻害効果の発見
の結果、本発明はヒトおよび動物の細胞の増殖を阻害す
る薬剤であって、（１）Ｎ−メチル−Ｄ−エリトロース
フィンゲニン、Ｎ−メチル−し−二すトロースフィンゲ
ニンオヨヒそれらの薬剤学的に許容される塩からなる群
から選ばれる１種またはそれ以上の増殖阻害剤の細胞増
殖阻害量；並びに（２）薬剤学的に許容される担体、希
釈剤または賦形剤を含む薬剤を提供する。

同様に、本発明はまた、生体内でヒトおよび動物の細胞
の増殖を阻害する方法であって、前記細１１ｍヲＮ−メ
チルーＤ−エリトロ−スフィンゲニン、Ｎ−メチル−Ｌ
−エリトロ−スフィンゲニンおよびその薬剤学的に許容
される塩からなる群から選ばれる１種またはそれ以上の
増殖阻害剤の細胞増殖阻害量に接触させることを含む方
法を提供する。

該薬物および方法の両方に対し、Ｎ−メチル−〇−千グ
リドロースフィンゲニン好ましい。

Ｎ−メチル−Ｄ−エリトロ−スフィンゲニンおよびＮ−
メチル−Ｌ−エリトロ−スフィンゲニンの適当な薬剤学
的に許容される塩は当業者により容易に決定されること
ができる。

ヒトおよび動物の細胞の増殖を阻害する前記薬剤および
方法は殊に哺乳動物の細胞の治療、殊に腫瘍増殖を防ぎ
または遅らせるためおよび腫瘍の転移を防ぎまたは遅ら
せるために悪性または非悪性腫瘍細胞に適用できる。そ
れらはまた殊にＩＬ−２依存性Ｔ細胞増殖の阻害に適用
できる。このような結果から自己免疫疾患の治療にこれ
らの物質が有用であると期待できる。

本発明の薬剤に対するそれぞれの医療用途に応じて適当
な薬剤学的に許容できる担体、希釈剤または賦形剤等を
用いることも可能である。

本発明の薬剤の投与方法は個々の医療用途に応じて、当
業者により容易に決定することができる。

本発明の薬剤の適当な用量は個々の医療適用並びに被験
者の体重および性などに依存し、崩業者により例えば試
験管内データを補作することにより容易に決定すること
ができる。

実施例 本発明は次に特定の実施例について説明されるが、しか
し本発明はそれだけに限定されるものではない。

特に表示がなければパーセント、比などはすべて重量に
よる。

実施例１ スフィンゴシン誘導体の合成 り　（＋）　エリトロ−スフィンゲニン、Ｌ　（−）エ
リトロスフィンゲニン、Ｌ　（−）　　トレオースフィ
ンゲニン右ヨヒＬ　（−）　　）レオースフィンガニン
は、文献記載の方法で合成〔コイヶ（Ｋｏｉｋｅ、　Ｋ
、　）ほか、カーボハイドレート・リサーチ（Ｃａｒｂ
ｏｈｙｄｒａｔｅＲｅｓｅａｒｃｈ）、　１５８．１１
３〜１２３．１９８６；コイケ０（ｏｉｋｅ、　Ｋ）　
　ほか、Ｄ−グルコースからのセラミドの効率的合成、
グリココンジルゲート・ジャーナル（Ｇｌｙｃｏｃｏｎ
ｊｕｇａｔｅ　Ｊａｕｒｎａｌ）　　　１．１０７〜１
０９．１９８４）。Ｎ−メチル誘導体はホルムアルデヒ
ドおよび水素化ホウ素ナトリウムの存在下のエリトロ−
スフィンゲニンの還元メチル化により製造した〔ミーン
ズ・アンド・フィーネイ　（Ｍｅａｎｓ　＆　Ｆｅｅｎ
ｅｙ）　、バイオケミストリー（Ｂｉｏｃｈｅｍｉｓｔ
ｒｙ八７．２１９２．１９６へ；タンパク質の化学修飾
（Ｃｈｅｍｉｃａｌ　Ｍｏｄｉｆｉｃａｔｉｏｎ　ｏｆ
　ＰＰｒｏｔｅｉｎ）、ホルデｙ−デイ社（Ｈｏｌｄｅ
ｎ−Ｄａｙ、　ＩｎｃｌＳａｎ　Ｆｒａｎｓｉｓｃｏ）
、ｐ、２１７．１９７１）。

粗スフィンゴシンは、最初チールフェルダー・アンド・
クレンク（Ｔｉｅｒｆｅｌｄｅｒ　ａｎｄ　Ｋｌｅｎｋ
）〔セレブロシドおよびホスファチドの化学（ＤｉｅＣ
ｈｅｍ’ｉｅ　ｄｅ　Ｃｅｒｅｂｒｏｓｉｄａ　ａｎｄ
　Ｐｈｏｓｐｈａｔｉｄｅ）、スプンジャー・フェルラ
ーク（Ｓｐｒｉｎｇｅｒ　Ｖｅｒｌａｇ。

Ｂｅｒｌｉｎ）　、１９３２）に記載された方法にした
がいセロプロシトのメタツリシスにより調製した。

Ｎニメチルスフィンゴシン誘導体はＮＭＲ分光法および
高速原子衝撃質量分光測定により確認した。

実施例２ スフィンゴシンおよびスフィンゴシン誘導体によＡ４３
１細胞は１０％ウシ胎児血清（ＦＣ３）を添加したＤＭ
Ｅとハム（Ｈａｍ）のＦ−１２１：１　（重量比）の混
合培地中で培養した。５０から１５０ｍｍ直径のシャー
レから採取した細胞をクロイタ−（Ｋｒｅｕｔｔｅｒ）
　ほか（ＪＢＣ，２６２，１６３３〜１６３７．１９８
７）の方法によりＣ−キナーゼの部分精製するために調
製した。よりわかりやすく記載すると、細胞をラバーポ
リスマンにより掻き取り、２０ｍＭトリス−ＨＣｌ　（
ｐＨ７，５）　、２ｍＭ−ＥＤＴＡ、０．５ｍＭ−ＥＧ
ＴＡ、０．１５Ｕ／ｍｊ！アプロチニンおよび０．２５
　Ｍスクロースの５０−中に懸濁させ、ホモジナイザー
（Ｄｏｕｎｃｅ）　Ｃ４０ｍｌサイズ、ホイート７（Ｗ
ｈｅａｔｏｎ）　　）中で４℃で５０回操作して均一化
した。均一化した細胞を１００，０００ｘｇで６０分間
超遠心した。

上清を２０ｍＭ）リス− ＨＣｌ！　（ｐＨ７，５）　、２ｍＭ−Ｅ’ＤＴＡおよ
び０．５ｍＭ−ＥＧＴＡ（緩衝液Ｂ）で平衡させたＤＥ
５２カラム上で精製し、この緩衝液で十分に洗浄した。

Ｃ−キナーゼ活性画分は０．１　Ｍ　　ＮａＣｉを含む
緩衝液Ｂで溶出した。この両分中の活性は２００〜５０
０ｐｍｏｌ　　Ｐ／ｍｉｎ　７ｍｇタンパク、質であっ
た。

Ａ−キナーゼおよび他のキナーゼを含まない画分は分割
し、−８０℃で保存した。

スフィンコシンおよびスフィンゴシン誘導体のＣ−キナ
ーゼに対する阻害効果の測定 ベルおよびハヌーン（Ｂｅｌｌ　ａｎｄ　Ｈａｎｎｕｎ
　　（サイエンス（Ｓｃｉｅｎｃｅ）、２３５．６７０
〜６７４．１９８７：Ｉにより記載されたように混合ミ
セル系中で得られた結果は非常に変動しやすいのでクロ
イ９−　（Ｋｒｅｔｔｅｒ）ほかＣＪ　ＢＣ，：ｊｊ）
１１２６０５９７９〜５９８６．１９８５）が採用して
いる標準リポソーム法を多少変更し、スフィンゴシンお
よびスフィンゴシン誘導体（非グリコジル化およびグリ
コシル化）の効果をこれらの条件下で検討した。

コニカルチューブ〔内容１．５　ｍｌ、、サーステット
（Ｓａｒｓｔｅｄｔ）　）中でホスファチジルセリン（
５μｇ／チューブ）および１，２−ジオレイン（０，０
５μｇ／チニーブ）を適当量のスフィンゴシン、その誘
導体またはスルファチドとともにまたはそれらなく、有
機溶媒（エタノールまたはクロロホルム−メタノール）
中に加え、混合物をＮ２流下に蒸発させた。脂質混合物
を２ＱｒｎＭ）’ＪスーＨＣｊ７（ｐＨ７，５）　３０
μβ中で３０分間音波処理した。

チューブ中のリポソームに２５ｍＭ）リス−ＨＣβ（ｐ
Ｈ７，５）　、１０ｍＭ　　ＭｇＣｊ２２．４００！ｊ
Ｍ−ＥＤＴＡ、５０μＭ−ＥＧＴＡ、５００μＭ−Ｃａ
Ｃｊ’２．２０　Ｏ１１ｇ７ｍｌヒストン（Ｈｉｓｔｏ
ｎ）　　Ｉ［［−８および２０μＭガンマー［”Ｐｌ　
−ＡＴＰ（２Ｘ　１０’ｃｐｍ）からなる反応混合物を
補足した；最終容積は９０μβであった。

反応は前記のように調製したＣ−キナーゼ画分１０μｎ
（１〜２μｇのタンパク質を含む）の添加により開始さ
せ、反応混合物を３０℃で１０分間インキニベートした
。反応を２５％ＴＣＡ　ｌ−と１ｍＭ−ＡＴＰ溶液（ｐ
Ｈ７，５）中の１％Ｂ５Ａ２００μβの添加により終ら
せた。沈殿を遠心分離し、２５％ＴＣＡ１ｍｌ’で２回
洗浄し、０．１％デオキシコール酸塩を含むｌＮ−Ｎａ
ＯＨ中に多少加熱（８０℃、１０分間）して溶解し、シ
ンチレーションカウンター中で計数した。ホスファチジ
ルセリン、１，２−ジオレインまたはＣａ’＋のない値
を対照として用いた。スフィンゴシンおよびスフィンゴ
シン劇導体の効果は第２図および第３図に示され、表１
および表■中に要約されている。

表　　■ スフィンゴシンおよび種々のスフィンゴシンセ　　ラ ミ　　ド 阻害なし スフィンゴシン（Ｄ−エリ ト　ロ、　Ｓｉｇｍａ ＳＭ） スフィンゴシン スフィンゴシン スフィンゲニン スフィンゲニン （０−エリトロ） （し−エリトロ） （Ｌ−トレオ） （し−トレオ） Ｏ Ｎ−アセチルスフィンゴシン 阻害なし ラクトシルスフィンゴシン ＧＭ、　　（Ｎ−アセチル） ＧＭ３　　（Ｎ−グリコリル） ＧＤ、。

ＧＴ、。

阻害なし 表１および表■中に示されるデータ並びに第２図および
第３図中の結果から次の結論が得られた。

（１〕Ｄ−エリトロおよびＬ−エリトロ−スフィンゲニ
ンは同程度の弱い阻害活性を示した。

（２）　　Ｎ−メチル−Ｄ−エリトロ−スフィンゲニン
はＣ−キナーゼに対して著しく強い阻害活性を示した。

Ｎ−メチル−Ｌ−エリトロ−スフィンゲニンの阻害活性
は弱いが、それでもなお遊離アミ７基を存する非置換ス
フィンゲニンより強い阻害活性を有していた。

（３）　　Ｎ　−メチル−Ｄ−エリトロ−スフィンゲニ
ンの阻害活性はＮ−アセチル−ＧＭ、　、Ｎ−グリコリ
ルＧ　Ｍ　３およびＧＤ、、ガングリオシドより高く最
も強い阻害活性を有するガングリオシドＧＴ、ｔ、と同
程度であった。

本発明について詳細に、およびその具体的態様に関して
記載してきたが、その精神および範囲から逸脱すること
なく種々の変更および改変をすることができることは当
業者に明らかであろう。

【図面の簡単な説明】

第１図はスフィンゴシンおよび種々のスフィンゴシン誘
導体の構造を示す。 第２図はスフィンゴシンおよび種々のスフィンゴシン誘
導体のＣ−キナーゼの活性に対する阻害効果を示すグラ
フである。横軸はスフィンゴシン、スフィンゴシン誘導
体またはスルファチドの濃度をμＭで示す。縦軸はＣ−
キナーゼの相対活性（％）を示す。開用：Ｎ−メチルー
Ｄ−エリトロースフィンゲニン（Ｎ−Ｍｅ−Ｄ−エリト
ロ）；開田：Ｎ−メチルーＬ−エリトロースフィンゲニ
ン（Ｎ−Ｍｅ−Ｌ−エリトロ）：閉四角；Ｌ−エリトロ
スフィゲニン（Ｌ−エリトロ）；開四角：Ｄ−エリトロ
−スフィンゲニン　（Ｄ−エリトロ）；開三角：スルフ
ァチド。 第３図はガングリオシドおよびスルファチドのＣ−キナ
ーゼの活性に対する阻害効果を示すグラフである。横軸
はガングリオシドまたはスルファチドの濃度をμＭで示
す。縦軸はＣ−キナーゼの相対活性（％）を示す。開用
：　Ｇ　Ｔ　＋ｂ　；開田：ＧＭ３　；開三角；スルフ
ィチド。糖脂質はスベンナーホルム（Ｓｖｅｎｎｅｒｈ
ｏｌｍ）の体系〔ヌベンナーホルム（Ｓｖｅｎｎｅｒｈ
ｏｌｍ、　Ｌ、）、ジャーナル・才ブ・ニュウロケミス
トリー（Ｊ、Ｎｅｕｒｏｃｈｅｍ、）、１０．６１３〜
６２３．１９６３］による略号で表わした。 第２図 μＭ

Claims (17)

【特許請求の範囲】
1. （１）Ｎ−メチル−Ｄ−エリトロ−スフィンゲニンまた
   はＮ−メチル−Ｌ−エリトロ−スフィンゲニンを含むプ
   ロテインキナ−ゼ活性の阻害剤。
2. （２）Ｎ−メチル−Ｄ−エリトロ−スフィンゲニンを含
   む請求項（１）記載の阻害剤。
3. （３）プロテインキナ−ゼがＣ−キナーゼ、ＥＧＦ−レ
   セプタ−キナーゼおよびＳＲＣ腫瘍遺伝子キナーゼから
   なる群から選ばれる、請求項（１）または（２）記載の
   阻害剤。
4. （４）ヒトおよび動物の細胞の増殖を阻害する薬剤であ
   って、 （ｉ）Ｎ−メチル−Ｄ−エリトロースフィンゲニン、は
   Ｎ−メチル−Ｌ−エリトロースフィンゲニンおよびそれ
   らの薬剤学的に許容される塩からなる群から選ばれる１
   種またはそれ以上の増殖阻害剤の細胞増殖阻害量、並び
   に （ｉｉ）薬剤学的に許容される担体、希釈剤または賦形
   剤、 を含む薬剤。
5. （５）１種またはそれ以上の増殖阻害剤がＮ−メチル−
   Ｄ−エリトロースフィンゲニンまたはその薬剤学的に許
   容される塩を含む、請求項（４）記載の薬剤。
6. （６）細胞が哺乳動物細胞である、請求項（４）または
   （５）記載の薬剤。
7. （７）細胞が悪性または非悪性腫瘍細胞である、請求項
   （４）または（５）記載の薬剤。
8. （８）薬剤の腫瘍増殖を防ぐまたは遅らせる、請求項（
   ４）または（５）記載の薬剤。
9. （９）薬剤が腫瘍の転移を防ぎまたは遅らせる、請求項
   （４）または（５）記載の薬剤。
10. （１０）薬剤がＩＬ−２依存性Ｔ細胞増殖の阻害により
    自己免疫疾患を治療する、請求項（４）または（５）記
    載の薬剤。
11. （１１）生体内でヒトおよび動物の細胞の増殖を阻害す
    る方法であって、前記細胞をＮ−メチル−Ｄ−エリトロ
    ースフィンゲニン、Ｎ−メチル−Ｌ−エリトロースフィ
    ンゲニンおよびそれらの薬剤学的に許容される塩からな
    る群から選ばれる１種またはそれ以上の増殖阻害剤の細
    胞増殖阻害量に接触させることを含む方法。
12. （１２）１種またはそれ以上の増殖阻害剤がＮ−メチル
    −Ｄ−エリトロースフィンゲニンまたはその薬剤学的に
    許容される塩を含む、請求項（１１）記載の方法。
13. （１３）細胞が哺乳動物細胞である、請求項（１１）ま
    たは（１２）記載の方法。
14. （１４）細胞が悪性または非悪性腫瘍細胞である、請求
    項（１１）または（１２）記載の方法。
15. （１５）方法が腫瘍増殖を防ぎまたは遅らせる、請求項
    （１１）または（１２）記載の方法。
16. （１６）方法が腫瘍の転移を防ぎまたは遅らせる、請求
    項（１１）または（１２）記載の方法。
17. （１７）方法がＩＬ−２依存性Ｔ細胞増殖の阻害により
    自己免疫疾患を治療する、請求項（１１）または（１２
    ）記載の方法。