JPH02237996A

JPH02237996A - 抗ウイルス医薬組成物

Info

Publication number: JPH02237996A
Application number: JP1220158A
Authority: JP
Inventors: Patrick T Prendergast; パトリック　ティー．プレンダーガスト
Original assignee: Individual
Current assignee: Individual
Priority date: 1988-08-25
Filing date: 1989-08-25
Publication date: 1990-09-20
Anticipated expiration: 2016-12-10
Also published as: KR900002786A; US5681831A; DK418489A; AU636574B2; IE882585L; FI893948L; IL91415A0; JP3237836B2; FI893948A0; FI893948A7; OA09427A; IL91415A; AU4025689A; CA1339854C; EP0355825A3; DK418489D0; ZA896450B; EP0355825A2

Abstract

(57)【要約】本公報は電子出願前の出願データであるた
め要約のデータは記録されません。

Description

【発明の詳細な説明】発明の分野本発明は、ウイルスおよびプリオン（蛋白性の感染性粒
子）、たとえばＣＭＶ　，ヘルペス・シンプレツクス、
ヘパチチスＢ１スカビー・クロイツフエルトーヤコプ病
（　８ｃａｐｉｅ　Ｃｒｅｕｔｚｆａｌｄｔ−Ｊａｋｏ
ｂＤｉｓθａｓｓ）ｉｃ対する治療方法Ｋ関する。特に
、本発明は、ある株のレ｝＋−ウイルス感染を受けてい
る人間および動物の、そしてヒト免疫不全ウイルス（　
ＨＩＶ　）　Ｋ関係するレトロビールスＫよる感染を受
けている人間の医薬治療の方法、およびそのような感染
を受けうる人間の予防的医薬処置の方法に関する。更に
詳しくは、本発明は、治療される人間のたとえばモノサ
イト／マクロファージおよびＴリンホサイトのような、
血球中のＨＩＶウイルスの水準を減少させるための治療
Ｋ関する。本発明はさらＫ、そのような治療方法Ｋおい
て使用される化合物および医薬の調合物Ｋ関する。

発明の背景ＨｒＶとして知られているレトロウイルスの種族Ｋよる
ヒト感染は、感染された人の健康Ｋ有害であると信じら
れている。ＨＩＶ種族に属すると現在信じられているウ
イルスの例は、リンホアデノパシーアソシエイテツド・
ウイルス（　ＬＶＡ　）およびヒトＴ−リンホトロビツ
ク・ウイルスＩ型（ＨＴＬＶ−１）である。お互いＫ別
個κ発見されたＬＡＶとＨＴＬＶ　−　１とは、同じウ
イルスであることが今や知られておシ、セしてＨＩＶ　
−　１として示されている。人間から人間へのそのよう
なウイルスの伝達の様式については多く知られている〔
デ、ナチュラル、ヒストリー　オプ、ＨＩ■、インフエ
クション、イン、ア、コホート、オゾ、ホモセクシュア
ル、アンド、パイセクシュアル、メン（　ＴＨＥＮＡＴ
ＵＲＡＬ　　ＨＩＳＴＯＲＹ　　ＯＦ　　ＨＩＶ　　Ｉ
ＮＦｇＣＴＩＯＮ　　ＩＮ　　Ａ　ＣＯＨＯＲｒＯＦ　
ＨＯＭＯ８ＥＸＵＡＬ　ＡＮＤ　ＢＩ８ＥＸＵＡＬ　Ｍ
ＥＮ　）　：ア、デケイド、オプ、フォロー　アップ（
　Ａ　ＤＥＣＡＤＥ　ＯＦＦＯＬＬＯＷ　ｔｒｐ　）。

ヘツソル（　Ｎａｎｃｙ　Ａ．　Ｈｅｓａｏｌ　）、ル
サ７オード（　Ｇ．　Ｗ．　Ｒｕｔｈｅｒｆｏｒｄ　）
、リフソン（　Ａ．Ｒ．Ｌｉｆａｏｎ　）、オマレイ（
　Ｐ．Ｍ．　Ｏ’Ｍａｌｌｅｙ　）、デプト、オプ、パ
ブリック、ヘルス（　Ｄｅｐｔ．　ｏｒＰｕｂｌｉｃ　
Ｈｅａｌｔｈ　）、サンフランシスコ、カリフォルニア
〕けれども、ウイルスとそれらが存在している宿主細胞
との間の特定の相互反応Ｋ関しては現在論争がある。一
般Ｋ，ＨＩＶＫよシ感染された人間は、ウイルスに対す
る抗体を発現し、そして同じ点Ｋおいて人間の免疫系は
損傷され、そして疾病からの身体の防御Ｋおいて効力を
有しなくなる。この状態は後天性免疫不全症候群または
エイズ（　ＡＩＤＳ　）として知られるよう罠なってい
る。

従って、彼または彼女の身体の免疫不全の故Ｋ１エイズ
患者は１群の日和見感染、たとえばカボジ肉腫およびニ
ューモシステイスの１つもしくはそれ以上Ｋよシ征服さ
れる。

マクロファージ／モノサイト感染は、Ｈ工ｖ感染の進行
Ｋおける、エイズ患者Ｋ生じることが知られている脳損
傷の開始Ｋおける、そしてＴ４リンホサイトの終局の深
い涸渇Ｋよ夛証拠づけられる如く免疫系の衰退の誘発Ｋ
おける因子であるといり証拠がある。抗一ＨＩＶ　ｐ２
４抗体を使用して、モノサイド／マクロファージはＨＩ
Ｖで感染されうろことが実証されている。個々の供血者
からの細胸の７０％までが感染している〔クロウ（　Ｃ
ｒｏｗｅ　）等、エイズ、リサーチ、アンｒ，ヒューマ
ン、レトロバイラセズ（　ＡＩＤＳ　Ｒｅｓｅａｒｃｈ
　ａｎｄ　ＨｕｍａｎＲｅｔｒｏｖｉｒｕｓｅｓ　）　
３、ｎｏ．２、（１９８７）１３５）。

ニコルソン（　Ｎｉｃｈｏｉｓｏｎ　）等は、たとえば
アメリカヤッデボウ（　ｐｏｋａｗｅｅｄ　）分裂誘発
因子誘導抗体合成および溶性抗原Ｋ対する増殖性応答の
如きモノサイト依存性であるで細胞検定において観察さ
れる異常を説明するためＫ，生存τ細胞中における内因
性欠乏よ〕はむしろ（またはそれに加えて）モノサイト
機能ＫおけるＨＩＶ　−　１　／　ＬＡＶ一誘導効果を
提案した。それらＴ細胞検定は、Ｔ細胞部分集合（　ｓ
ｕｂｓｅｔ　）として検定したときでさえも異常と、先
ＫＱ告されている〔デ、ジャーナル、オプ、イミュノロ
ゾ−（　Ｊｏｕｒｎａｌ　ｏｆ　Ｉｍｍｕｎｏｌｏｇｙ
）、１６７、Ａ１、（１　９８６）３２３）。

異物（たとえば、ウィルス）が身体内Ｋ入ったとき生じ
る第１の出来事の１つは、単核ファゴサイトによるその
摂取であることはよく確定しているので、それら細胞が
ＨＩＶの主要標的となることが想定される。ガートナー
（　ｏａｒｔｎ６ｒ　）等は、ＨＴＬＶ　−　１　／　
ＬＡＹ感染マクロ７アージＫよるウイルス産生が高度Ｋ
そして長く生存し、それら細胞はウイルス伝幡および持
続に役割を発揮しうろことを示した。彼等は、マクロフ
ァージＫおけるｎＴＬｖ　−　ｌ　／　ＬＡＶ　１１１
！！は、彼等が評価した情況Ｋおいて完全Ｋ産生的であ
ることを実証した〔サイエンス（Ｓｃｉｅｎｃｅ　）２
３３（　１　９８６）２１　５）。

サックジン（　８ａｌａｈｕｄｄｉｎ　）等は、インビ
トロ肺マクロファージがＨＴＬＶ　−　１で感染されえ
、そしてこのレトロウイルスのフイトパシック効果を受
け易くないようであることを観察し、これは組織マクロ
ファージがインビトロでＨＴＬＶ　−　１の強力な保持
体として考慮されなければならないことを示唆する〔ブ
ラツド（　Ｂｌｏｏｄ　）　６　８、Ａ１、（１　９８
６）２８１　）。

ホー（　ＨＯ　Ｄ．Ｄ．　）等は、正常血液一由来モノ
サイト／マクロファージがＨＴＬＶ　−　１　１ｃよシ
イン♂トロ感染を受けやすいことを見出した。加えて、
ＨＴＬＶ　−　１は、このウイルスで感染された患者の
モノサイト／マクロファージから回収された。従って、
ＨＴＬＶ　−　１感染モノサイト／マクロファージは、
ビスナ・ウイルス（　ｖｔｓｎａ　ｖｉｒｕｓ　）およ
びヤギ関節炎脳炎ウイルス（　ｃａｐｒｉｎｅ　ａｒｔ
ｈｒｉｔｉｓｅｎｃｅｐｈａｌｉｔｉｓ　ｖｉｒｕｓ　
）を含む他のレンチウイルスＫついて示された如く、標
的器官へのウイルスの伝幡のための担体として、そして
ウイルス存続のための保持体として役立ちうると仮定さ
れた〔ジエー・クリンｅインベスト（　．ｒ．　Ｃｌｉ
ｎ．Ｉｎｖｅｓｔ．　）　７　７、（１　９８）１　７
１　２）。

すべての感染し九ＨＩＶを完全Ｋ殺すことができ、ある
いはその複製を完全Ｋ阻害する（そして同時Ｋ受容しう
る毒性プロファイルを有する）抗ウイルス剤が明らかＫ
望まれているけれども、情況はそのような薬剤が現在Ｋ
おいては入手しえないということである。

？ィルスの複製を阻害する抗ウイスル剤は、１９６０年
代中頃から知られている〔プロスペクツ、フォア、ザ、
プリペンション、アンｒ，セラビー　オデ、イン７エク
ションズ、クイズ、デ、ヒューマン、イミュノデフイシ
エンシイ、バイラス（　ＰＲＯ８ＰＥＣＴＳ　ＦＯＲ　
ＴＨＥ　ＰＭｖＥＮＴＩＯＮ　ＡＪＪＤＴＨＥＲＡＰＹ
　ＯＦ’　ＩＮＦＥＣ’ｌ’ＩＯＮＳ　ＷＩＴＨ　ＴＨ
Ｅ　ＨＵＭ雇ＩＭＭＵＮＯＤＥＦＩＣＩＥＮＣＹ　ＶＩ
ＲＵＳ　）、マーカス、ポーグ（　Ｍａｒｋｕｓ　Ｖｏ
ｇｔ）、ヒルシュ（　Ｍａｒｔｉｎ　Ｓ．ＨｉｒｓＣｈ
　）　％　インフエクシャス、デジース、ユニット（　
工ｎｆｅｃｔｉｏｕｓ　Ｄｉｓｅａａｓ　Ｕｎｉｔ　）
、マサチュセット、ジエネラル、ホスピタル（Ｍａｓｓ
ａｃｈｕｓｅ　ｔ　ｔａＧｅｎｅｒａｌ　Ｈｏｓｐｉｔ
ａｌ　）　、ハーバード、メディカル、スクール（　Ｈ
ａｒｖａｒｄ　Ｍｅｄｉｃａｌ　Ｓｃｈｏｏｌ　）、ボ
ストン〕。数百もしくはそれ以上のそれら薬剤が知られ
ているが、アジドチミジン（　ＡＺＴ　，ジドプゾン）
がエイズを担う人々のウイルスに対する治療のためＫ米
国の７エデラル、ドラッグ、アドミニストレーション（
　Ｆｅｄｅｒａｌ　Ｄｒｕｇ　Ａｄｍｉｎｉａｔｒａｊ
ｉ■Ｈ）から認可を受けた唯一の医薬である。エイズ患
者の治療ＫおけるＡＺＴの使用は、多くの欠点を有して
いる。ＡＺ’ｒは非常Ｋ高価である。ＡＺＴでの治療は
それで処置される人間Ｋ副作用をしばしば生じ、そして
副作用はしばしばそれでの治療を完全Ｋ停止しなければ
ならないほど重篤である〔デベロプメント、オデ、ＨＩ
Ｖ−バリアンツ、クイズ、ハイアレジスタンス、アデイ
ンス｝、ＡＺＴ，アンダトリートメント、クイズ、ＡＺ
Ｔ　（ＤＥＶＥＬＯＰＭＥＮＴＯＦ　　ＨＩＶ　　−　
　ＶＡＲＩＡＮＴ８　　ＷＩＴＨ　　ＨＩＧＨＥＲ　　
ＲＥＳＩＳＴＡＮＣＥＡＧＡＩＮＳＴ　ＡＺＴ　ＵＮＤ
ＥＲ　ＴＲＥＡＴＭＦ：ＮＴ　ＷＩＴＨ　ＡＺＴ　）、
チ７　マーマ７　（　Ｆ．．　Ｚｉｍｍｅｒｍａｎｎ　
）、ビーサート（Ｌ．Ｂｉｅｓａｒｔ　）、７オンプリ
ーゼン（　Ｈ　ｖｏｎ　Ｂｒｉｅｓｅｎ）、クリニクム
、デル、ウニペルシタート（Ｋｌｉｎｉｋｕｍｄｅｒ　
Ｕｎｉｖｅｒａｉｚａｔ　）、フランクフルト、ＦＲＧ
．　’Ｉ。

ＡＺＴでのエイズ患者の治療の長期間有効性は、ＡＺＴ
治療が感染した人間の身体からライルスの離脱を生じな
いと信じられているけれども、なお未知である。ＨＩＶ
のＡＺＴ一抵抗株がＡＺＴで治療されたエイズ患者中に
発現するという証拠がある（Ｆ．Ｚｉｍｍｅｒｍａｎお
よびＬ．　Ｂｉｅａｅｒｔ　）。

従って、ウイルス復製のための宿主として働くモノサイ
ト／マクロファージおよびＴ４リンホサイト、２ンデル
ハン佛セル（　Ｌａｎｇａｒｈａｎ　Ｃｅｌｌ　）のよ
うな、ウイルスが存在している場合、すべての細胞型Ｋ
おいてＨＩＶに対し作用する、新しくよシ安価で、毒性
が低くセしてよ夛効果的な治療の必要性がある。それら
の新しい療法は、好ましくは抵抗性株の促進を阻害する
ようＫウイルス非特異性であろう。

本発明の特定の態様に対する更なる背景として、以後Ｋ
示す式！ａを有する化合物Ｎ６−（Δ２−インペンテニ
ル）アデノシン（　ＩＰＡ　）が、癌の治療を含む臨床
試験Ｋおいて先Ｋ使用されてきた〔サイトカイニンズ、
アズ、ケモセラビューティツク、エイジエンツ（　ＣＹ
ＴＣ）ＫＩＮＩＮ８　Ａｓ　Ｃｌ詣ＯＴＨＥＲｋＰＥＵ
Ｔ　Ｉ　ＣＡＧＥＮＴ８　）、アナールス、オブ、デ、
ニューヨーク、アカデミー　オブ、サイエンス（　Ａｎ
ｎａｌｓ　ｏｆｔｈｅ　Ｎｅｗ　Ｙｏｒｋ　Ａｃａｄｅ
ｍｙ　ｏｆ　８ｃｉｅｎｃｅ　）、２５、２２５〜２３
４、ミットルマン（　Ｍｉｔｔｌａｍａｎ，ＡｒｎＯｌ
ｄ　）等（１９７５））。ＩＰＡは天然κ生成する化合
物である。たとえば、それはある種のｔ−　ＲＮＡｓ中
のアンチコドンー隣接ヌクレオシｒであることが示され
た（　Ｎ６−　（Δ２−イソペンテニル）アデノシン：
デ、レイユレートリー　エ７エクツ、オゾ、ア、サイト
カイニン、アンｒ１モデ７アイド、ヌクレオサイド、フ
ロム、ｔ−ＲＮＡ，オン、ヒューマン、リンホ？｛テｘ
（Ｎ’−（Δ２）一ＩＳＯＰＥＮＴ］ｌｅＹＬ　　）　
　ＡＤｇＮＯ８ＩＮＥ　　：　　ＴＩ｛Ｅ　　ＲＥＧＵ
Ｌ入’Ｉ’ＯＲＹＥＦＦＥｃＴｓ　　ＯＦ　　Ａ　　Ｃ
ＹＴＯＫＩＮＩＮ　　ＡＮＤ　ＭＯＤＩＦＩＥＤＮＵＣ
ＩＪＯＳＩＤＥ　ＦＲＯＭ　ｔ−　ＲＮＡ　ＯＮ　ＨＵ
ＭＡＮ　ＬＹＭＰＨＯＣＹＴＥ８％ビオキミカ、工、ビ
オフイジカ、アクタ（　ＢｉｏｃｈｉｍｉＣａ　ｅｔ　
Ｂｉｏｐｈｙｓｉｃａ　Ａｃｔａ　）　，　２　８　１
　：４８８　〜５００、ガロ（　Ｇａｌｌｏ，　Ｒｏｂ
ｅｒｔ　Ｃ．）等（１９７２））。ＩＰＡはヒト白血病
ミエロプラストの生長を阻害し、ある濃度においてフィ
トヘムアグルテニン（　ＰＨＡ　）　Ｋよシ促進される
培養リンホ夛イトの生長を阻害し、そして低濃度におい
てＰＨＡ　Ｋよ）促進される培養リンホサイトの生長を
阻害する（　Ｇａｌｌｏ等）サイトカイニン性質を有す
ることが示されている（　Ｍｉｔｔｌａｍａｎ等）。さ
らＫＩＰＡは、ヒ｝Ｋ対する臨床実ＩｉＩ．Ｋおいて化
学療法剤として使用されてきた（　Ｍｉｔｔｌｅｍａｎ
等）。

式１ｑ＝Ｉｔ（以後Ｋ示す）の他の化合物がまた知られ
てお）、そして次の文献中に見出すことができる：Ｉｑ　バローズ（　Ｗ．Ｊ．Ｂｕｒｒｏｗａ　）、アー
ムストロ７グ（　Ｄ．Ｊ．　Ａｒｍａｔｒｏｎｇ）、ス
クーグ（　Ｆ．８ｋｏｏｇ）、ヘヒト（　８．Ｍ．Ｈｅ
ｃｈｔ　）、ボイル（　Ｊ．Ｔ．Ａ．Ｂｏｙｌａ）、レ
オナルド（　Ｎ．Ｊ．　Ｌｅｏｎａｒｄ　）およびオコ
ロビツチ（　Ｊ．　ＯＣｃｏｌｏｗｉｔｚ　）、サイエ
ンス（　Ｓｃｉｅｎｃｅχ１６１、（１９６８）、６９
１。

Ｗ．Ｊ．　Ｂｕｒｒｏｗｓ　、Ｄ．Ｊ．　Ａｒｍｓｔｒ
ｏｎｇ　％Ｆ．　Ｓｋｏｏｇ　，８．Ｍ．　Ｈｅｃｈｔ
　，　Ｊ．Ｔ．Ａ．　Ｂｏｙｌｅ，　Ｎ．Ｊ．　Ｌｅｏ
ｎａｒｄおよびＪ．　ＯｃｃＯ１ｏｗｉｔｚ　，パイオ
ケミストリ−（　Ｂｉｏｃｈｅｍｉａｔｒｙ　）、８、
（　１　９　６　９　）　３０７１。

！ｒ　ショウ（　Ｇ．　Ｓｈａｗ　）、スモールクツド
（　Ｂ．Ｍ．　Ｓｍａｌｌｗｏｏｄ　）およびウィルソ
ン（　Ｄ．Ｖ．Ｗｉｌａｏｎ　）、ジエー、ケム、ソス
（　Ｊ．　Ｃｈｅｍ．８ｏｃ．　）、ｃ，（１９６６）
９２１。

Ｉ８ヘヒト（　Ｓ．Ｍ．　Ｈａｃｈｔ　）、ガｏ　（　
Ｇａｌｌｏ　）等中の文献２９。ビオキム、工、ビオフ
イジカ、アクタ（　Ｂｉｏｃｈｉｍ　ａｔ　Ｂｉｏｐｈ
ｙａｉｃａ　Ａｃｔａ　）、２８１、（１９７２）４８
Ｂ．ｌｔＩｓＫ同じ。

発明の要約本発明は、任意のウイルス感染Ｋ対する治療的または予
防的処置の方法を提供する。更Ｋ１本発明はＨＩＶで感
染された生体の治療を提供する。本発明のある種の実施
態様は、未処理検体に関しＩ｛ＩＶ水準を減少させるた
めＫ血液検体を処理する方法を提供する。

更に、本発明は、ＨＩＶウイルスデノムＫよ，？、潜在
的または顕在的に感染された細旭の形態または機能の変
化を防止するための処置を提供する。

その１例は、表皮ランデルハン細胞中のタクト遺伝子生
成物（　ｔａｔ　ｇｅｎｅ　ｐｒｏｄｕｃｔ　）の発現
を阻害し、かくしてＨＩＶで感染された患者において生
成する表皮形態異常および腫瘍を阻害しまたは退縮を生
じさせるＩＰＡの能力である。

本発明は、一般式１の化合物の使用の方法な提供する。

Ｒ，は λ１式中二Ｒ１はＨｔたはＣＨ３Ｓであシ、そして、Ｒ４はであシ、そして、ＸよおよびＸ２は個々κＨ１メチル、エチル、ヒドロキ
シ、ハロデンおよびカルボキシルから選択され、あるい
は、Ｒ４はであ夛、そして、Ｒ５はＣＨ３またはＣｔであル、Ｒ６はＣＨ３、ＣＩ｛２０Ｈまたはｃｔであシ、そして
、Ｒ７はＨｔたはＢｒであシ、あるいは、Ｒ１はＨであ
シ、そしてであシ、または、Ｒ４はであり、または、Ｒ，はＣＮＨ−Ｒ８であ〕、そして、Ｒ８はＮａ−（Δ２−イソペンテニル）アテ゛ノシンｌｂ：　
Ｒ１−　Ｈ，　Ｒ２ｍ　ＯＨ，　Ｒ３馬モノホスフエー
ト、そして、し上であ夛、または、Ｒ８は（ＣＨ２）７ｃＨｓであシ；そして、Ｒ２はＯＨ
であシ、そして、Ｒ３はＯＨ，モノホスフエート、ジホスフエートｔたは
トリホスフエートであ夛、または、Ｒ２およびＲ３は結
合して３’，５’−サイクリックモノホスフエート誘導
体を形成し、あるいは、上記のいずれかの生理学的Ｋ受
容しうる塩。

以下Ｋ列挙するのは、本発明Ｋ従う好ましい化合物１ａ
＝ｌｔのそれぞれの化学基である●ｌａ　：　Ｒ１−　
Ｈ　％Ｒ２　−　ＯＨ　，　Ｒ３　−　ＯＨそしてＮ６
−　（Δ２−インペンテニル）アデノシンー５′一モノ
ホス７エートｌｃ：　ｉｑ，　−　Ｈ　，　Ｒ２およびＲ３は結合し
て３’，５’−サイクリックモノホス７エート誘導体を
形成する、Ｎ６−（Δ２−イソペンテニル）アデノシンー３１，ｓ
ｌ−サイクリックモノホス７エートＩｄ：Ｒよ廊Ｈ　ｓ
　Ｒ２−ＯＨｓ　Ｒ３繻ＯＨ　，そして、Ｒ４綱ＣＨ，
Ｃ，Ｈ，、べ冫ジルアデノシン、ｌｅ：　Ｒ１　＝　Ｈ２、Ｒ，　鑓ＯＨ　，Ｒ，−モノ
ホスフエート、そして、Ｒ，　”　ＣＨ２Ｃ，Ｈ６Ｎ６−ペンジルアデノシン−５′−モノホスフエートＩｆ：　ＲエーＨ１Ｒ２およびＲ３は結合して３／　，
　５／　−サイクリック七ノホスフエート誘導体を形成
し、そして、Ｒ４陶ＣＨ２Ｃ，Ｈ６Ｎ６−ペンジルアデノシン−３７，５／−サイクリック
モノホス７エート１ｇ：Ｒ１−Ｈ％Ｒ２　＝　ＯＨ％Ｒ３ｍ　ＯＨ　，Ｎ
６−７ル７リルアデノシン−５′−モノホス７エート１ｉ：Ｒ，−Ｈ％　Ｒ２およびＲ３は結合して３’，５
’−サイクリックモノホスフエート誘導体を形成し、Ｎ６−７ルフリルアデノシン−３’，５’−サイクリッ
クモノホスフエート？ｊ：Ｒ■＝ａＨ，Ｒ２−ＯＨ，Ｒ３ヰＯＨ，そして、
フル７リルアデノシンＩｈ：Ｒエ＝ｌ＝Ｈ　ｓ　Ｒ２　””　ＯＨｓ　Ｒ＄驕
モノホス７エート、そして、Ｎ　−　（ｆ　ＩＪンー６−イルカルパモイル）一〇−
クロロアニリンリポヌクレオシドｌｋ：　Ｒｌ寓Ｈ，Ｒ，−ＯＨ％Ｒ３　Ｂモノホスフエ
ート、そして、Ｃ１Ｎ−　（７’リン−６−イルカルバモイル）一〇一クロ
ロアニリンリがヌクレオシド−５′−モノホス７エートＩｌｌ：　
Ｒよ−Ｈ，Ｒ２＝ＩＯＲ％Ｒ，　−　ＱＨ　，そして、
Ｉｎ：　Ｒｌ−Ｈ，　Ｒ２　−　ＯＨＭ　Ｒ３　−　Ｏ
Ｈ，そして、Ｒ４ＩｌｌｌＩＯ風ＣＮＨ（ＣＨ２）１０Ｈ３Ｎ　−　（　フＩＪンー６−４ルカルバモイル）一ｎ−
オクチルアミンリポヌクレオシド１ｏ：　Ｒ１−　Ｈ　，　Ｒ２　−　０１１　，　　Ｒ
３−モノホスフエート、そして、Ｒ４　越ＯｎＣＮＨ（ＣＨ，），ＣＨ，Ｒ６−アタマンチルアデノシンＩｍ：　Ｒ４　−　Ｈ１Ｒ２　ｍ　ＯＲ，　Ｒ３　譚モ
ノホスフエート、そして、Ｒ４　一Ｒ６−アダマンチルアデノシン−５７−モノホスフエー
トＮ一（プリン−６−イルカルバモイル）一ｎーオクチル
アミンリポヌクレオシド−５′−モノホスフエートＩｐ：　Ｒ
１−　Ｈ％Ｒ２およびＲ３は結合して３／　，　ｓ／．
サイクリックモノホスフエート誘導体を形成し、そしてＲ４ＩｌｌＩＯＵＣＮＨ（ＯＨ２），ＣＨ３Ｎ−（プ！Ｊンー６−イルカルパモイル）−ｎ一オクチ
ルアミンリポヌクレオシド−３’，５’−サイクリック七ノホス
フエートエｑ：　Ｒ，　−　ＣＨ３Ｓ　，　ＲＱ　−　ＯＲ，　
Ｒ３　−　ＯＨ，そして、アデノシンＩｔ：　Ｒ１”−　Ｈ，　Ｒ２−”　ＯＨ，　Ｒ，　−
”　ＯＨ，そして、Ｎ６−（Δ２−インペンテニル）−
２−メチルチオアデノシンＩｒ：　ｕ１−Ｈ％Ｒ２　−　ＯＨ，　　Ｒ３　−　Ｏ
Ｈ，そして、Ｎ’−　（　４−ヒドロキシ−３−メチル
ート２ン乙−２−プテニル）アデノシンＩｓ　：　Ｒ４　−　Ｈ　，　　Ｒ２　−　ＯＨ　，　
　Ｒ３　−　ＯＨ３、そして、Ｎ’−　（　３−クロロ
ートランス−２−プテニル）Ｎ６−　（　３−クロロー
２−２−プテニル）アデノシン。

本発明はまた、式Ｉの化合物の種族の代謝物を使用する
。好ましい代謝物は、次のものを包含する：Ｎ６−（Δ２−イソペンテニル）アテニン；６−Ｎ−　
（３−メチル−３−ヒドロキシプチルアミノ）ゾリン；アデニン；ヒポキサンチン；尿酸；および、メチル化キサンチン。

式！を有する化合物の種族のある種の化合物は、我々の
インビトロスクリーニングにおいて、従来知られていな
かった抗ウィルス剤としての価値ある医薬性質を有する
ことが見出された。

たとえば、化合物Ｉａ，ＩＰＡは、後記のインぎトロ実
験を通して、モノサイト／マクロファージ細胞中および
Ｔ４リンホサイト中１そしてまたランデルハン細胞中に
おけるＨＩＶ　−　１の複製を、細施それら自体に無毒
性である水準において阻害することが見出された。

ＩＰＡが、ＩＰＡで処理されていない感染されたマクロ
ファージ細胞Ｋ関して、ＩＰＡで処理されたＨＩＶ一感
染マクロ７アージ細胞Ｋおいて、ＨＩＶの水準を減少さ
せることを示す研究が行われた。毒性研究が非感染細胞
（τおよびＢリンホサイト、ならびＫモノサイト）を使
用して行われ、それはそのような細胞がＨＩＶ一感染マ
クロファージ細胞中のＨＩＶの水準を減少させる水準Ｋ
おける、ＩＰＡＫ対するイン♂トロ暴ｊｌＩＩＣ耐えり
ることを示した。

ＩＰＡが、ＩＰＡで処理されていないＨＩＶ一感染の同
ａｌＬＪｔ［ｌＫ関し、ＨＩＶ一感染Ｈ９、８１−６６
−４５およびモノサイト／マクロファージ細胞中のＨＩ
Ｖのインビトロ水準を減少させることを示す研究が行わ
れた。

ヒト白血球生存能力κ対するＩＰＡのインビトロ効果を
示すための実験を行った。

ＩＰＡが、インビトロ実験Ｋおいて、ヒマラヤ・タール
（　Ｈｉｍａｌａｙａｎ　Ｔａｈｒ　）卵巣細胞中のヤ
ギ関節炎脳炎ウイルス（　ＣＡＥＶ　）の水準を減少さ
せることを指示する研究を行った。

ＩＰＡがヒトフィプロプラストのＭ４１３セルライン中
のヘルペスーシンプレツクス１型（　Ｈ８Ｖ　−１）の
インピトロ水準を示す研究を行った。

ＩＰＡがインピトロＫおいて、細胞中のサイトメガロウ
イルスの水準を減少させることを示す研究を行った。

ＩＰＡがイン♂トロにおいて、Ｐ　３ＨＲ１中のエゾス
ターンーバール（　Ｅｐａｔｅｒｎ　−　Ｂａｒｒ　）
ウィルス（　ＥＢＶ　）の水準を減少させることを示す
研究を行った● 本発明に従い使用される化合物は、ＨＩＶに対する処置
として、小腸内、非経口、局所、経口、直腸内、鼻内ま
九は膣内経路を包含する任意の適当な経路により投与さ
れる。非経口経路は、皮下、筋肉内、靜詠内および舌下
投与を包含する。局所経路は、バツカルおよび舌下投与
を包含する。好ましい投与経路は靜詠経路であるが、式
１１ｋ有する化合物の最口投与は、第２の好ましい経路
である。

本発明は更に、ＨＩＶに対する処置くおける使用のため
の、調合物、そして特に医薬調合物の製造Ｋｂける式Ｉ
の任意の化合物の使用金提供する。

本発明はまた、医薬調合物それら自体を提供する。

本発明は更に、血流中における式ｒ化合物の半減期を延
長するために、たとえばベントスタチンのようなアデノ
シンジアミナーゼインヒビターと組合せた式Ｉの任意の
化合物の使用を提供する。

本発明に従い製造される医薬製剤は、ゼラチンカプセル
、錠剤形、糖衣錠、シロップ、懸濁液、局所クリーム、
坐剤、注射液中に、あるいは使用直前調製用のシロップ
、Ｒ濁液、局所クリーム、坐剤または注射液の製造のた
めのキット中に含有された式Ｔの化合物を包含する。ま
た、式Ｉの化合物は、血流中におけるその緩徐な放出を
促進する複合処方（　ｃｏｍｐｏｓｉｔｅｓ　）、たと
えばシリコンデスク、ボリマーぎース中に包含されうる
。

本発明に従い製造される医薬製剤は、通常の賦形剤、即
ち化合物と損傷的に反応し々い医薬的に受容しうる有機
または無機の担体物質との混合における式■の化合物の
使用を包含する。適当な医薬的に受容しうる担体は、水
、塩溶液、アルコール類、アラぎアゴム、植物油、ゼラ
チン、炭水化物、ステアリン酸マグネシウム、タルク、
ケイ酸、粘稠パラフィン、脂肪酸モノーおよびジーグリ
セライド等を包含するが、それらに限られない。

製造方法は、医薬製剤の滅！！Ｉを包含しつる。化合物
は、化合物と損傷的に反応しない補助剤、たとえば滑沢
剤、防腐剤、安定剤、浸透圧に影響する塩類等と混合し
うる。

式１ａの化合物は、もしも光から保護され、そして−７
５℃で貯蔵されるならば、殆んど無期限に乾燥貯麓しう
る。ＩＰＡは光感受性であり、そして固体形、あるいは
水性またはエタノール性溶液における場合、室温で損傷
する。ＩＰＡの分解率は、遮光容器中、室温において、
１ケ月当り約３％であることが、実験で認められた。

本発明の範囲内の処置方法はまた、式■の化合物の生理
的に受容しうる堪、たとえば、壇酸、硫酸、リン醗塩の
ような無機酸、およびｐ−｝ルエンスルホン酸、メタン
スルホン酸等のような有機硫酸、および酢酸、シュウ酸
、コハク酸、酒石酸、クエン歳、リンデ酸、マレイン酸
等のような有機カルざン酸に由来するものを包含する。

１｛ＩＶに対する処置Ｋｂいて有効である弐■を有する
任意の１つもしくはそれ以上の用量は、使用する特定の
化合物または化合物の組合せ、投与の様式、および処置
される生物体を包含する多くの因子に依存する。所与の
宿主のための、各々が式■により限定される種類に属す
る特定化合物または化合物の組合せの用量は、通常の考
慮を使用し、たとえば、主題化合物と公知薬剤との特異
活性の通常の比較により、即ち適当な薬理学的プロトコ
ールにより決定しうる。更に、特定基準の有効性は、処
置される生物体の血液検体中のＨＩＶの存在を時間を追
って追跡することにより監視しつる。

ＨＩ’／抗原の検出の丸めのキットが商業的に入手しう
る。ＨＩＶ　−　ｉの抗原を検出するために、そのよう
なキットの１つが、本発明の例１ａＶＣ記載する如く使
用され念。式■の化合物の投与により、患者の血清中の
検出しうるｐ２４抗原の水準の約２ケ月間にわたる減少
を生じることが可能である。

感染の水準の進行のよりよい測定は、感染されたマクロ
ファージ数のパーセントである。式■の化合物での処置
の過糧で血液または肺のいずれかから得られたモノサイ
ト／マクロファージ細胞は、治療の進行につれて回復可
能ＨＩＶ抗原の減少を示す。

本発明の１態様、式■を有する化合物からなる医薬調合
物は、１日当り１単位量から１Ｑ単位量まで、そして好
ましくは１日当り１単位量から４単位ｔまでの割合で投
与される。この用量は１２週までの期間与えられ、そし
てある場合には患者の１生涯与えることができ、あるい
は患者の医薬要求に依存し、より低い頻度の間隔で与え
うる。

本発明の１態様においては、単位量は、式！を有する化
合物からなる調合物０．０１から５００ｎ９まで全包含
する。

本発明の１態様においては、医薬調合物は、化合物が徐
放形であるとき、１日当り単位量１回、あるいは化合物
がその天然形であるとき、１日当り８単位量まで、経口
投与される。別途にまたは付加的に、医薬調合物は、体
重１　ｋｌ？当り０．３　ｍ９から８０呼までの範囲に
おいて式■を有する化合物を包含する単位量において静
脈内投与される。

本発明の１態機においては、式夏を有する化合物からな
る医薬調合物は、経皮パツチの使用により投与される。

本発明の１態様においては、式■を有する化合物からな
る医薬調合物は、小腸からの吸収を改善するために、乳
化または半乳化調合物を使用して投与される。そのよう
な乳剤は、ココナツ油の誘導体、たとえばミグリオール
（　Ｍｉｇｌｙｏｌ　）　８　１　２を使用して調合し
うる。

本発明の特定の悪様においては、ウイルス感染を治療す
る方法はまた、化合物デヒｒロエビアンドロステロンお
よび（ｔ九は）その同族体からなる医薬調合物で患者を
同時に治療することを包含する。別途に、医薬調合物は
、式■の任意の化合物、デヒＶロエピアンｒロステロン
および（または）その同族体、またはエチオコラノロン
の組合せにおける治療の方法を包含する。

本発明の他の態様においては、本発明の方法は、骨髄に
よるＴ一細胞の産生を高めるために、公知の免疫系デー
スターまたは免疫系モジュレーターで患者を治療する過
糧を包含する。患者は、式■を有する化合物からなる医
薬調合物の投与に先立ち免疫系デースターで治療される
。他の場合Ｋおいては、患者は、骨髄によるで一細胞の
産生の水準（感染により減少している）が安定しまたは
増加し始めるまで、免疫系ブースターで治療される。

特に、免疫系ブースターは、Ｔ−４細胞の水準が安定化
しま九は増加し始めるまで投与される。

本発明の他の態様においては、方法は、式！を有する化
合物からなる医薬調合物が投与されながら、患者をそれ
に先立ちまたは同時にの両方で、免疫系デースターで治
療する過穆を包含する。

第１図は、検定におけるＩＰＡの濃度に対する１分間当
りのカウントのグラフである。

第２図は、検定におけるＩＰＡの濃度に対する増殖能力
の増加または減少パーセントのグラフである。

第３図は、検定におけるＩＰＡの濃度に対する１分間当
りのカウントのグラフである。

第４図は、検定におけるＩＰＡの濃度に対するＴおよび
Ｂ　１３ンホサイト増殖の増加ｔ７’？は減少のパーセ
ントのグラフである。

第５図は、検定におけるＩＰＡの濃度に対するＭ’ＬＣ
反応性の増加ま九は減少のパーセントのグラフである。

第６図は、検定におけるＺＰＡ　Ｏ濃度に対する１分間
当りのカウントのグラフである。

第７図は、検定におけるＩＰＡの濃度に対する１分間当
りのカウントのグラフである。

第８図は、検定におけるＩＰＡの濃度に対するでおよび
Ｂ　ＩＪンホサイト機能の増加または減少のパーセント
のグラフである。

第９図および第１０図は、検定にかけるＡＺ’Ｉ”の濃
度に対するＴリンホサイト増殖のグラフである。

第１１図および第１２図は、検定におけるｄｄｅ’の濃
度に対するＴリンホサイト機能のグラフである。

第１３図は、Ｈ９細胞のインげトロＨＩＶ感染に対する
ＩＰＡの効果のグラフである。

第１４図は、｝ＩＩ’７哩生に対するＩＰＡの効果のグ
ラフである。

第１５図は、検定におけるＩＰＡの濃度に対するウイル
ス復製の阻害のグラフである。

第１６図および第１７図は、検定におけるＩＰＡの濃度
に対する細砲毒性およびウィルス阻害のグラフである。

第１８図は、検定におけるＮ６−アダマンチルアデノシ
ンの濃度に対するヒトでおよびＢリンホサイト機能のグ
ラフである。

第１９図は、検定におけるＮ６−ペンジルアデノシンの
濃度に対するヒトＴｂよびＢリンホサイト機能のグラフ
である。

第２０図は、検定におけるＮ６−フルフリルアデノシン
の濃度に対するヒトＴおよびＢリンホサイト機能のグラ
フである。

第２１図は、検定にかけるＮ６−７ルフリルアデノシン
の濃度に対するヒトＴおよびＢリンホサイト機能のグラ
フである。

第２２図は、検定にかけるＮ６−ペンジルアデノシンの
濃度に対するヒトＴおよびＢリンホサイト機能のグラフ
である。

第２３図は、検定におけるＮ６−アダマンチルアデノシ
ンの濃度く対するヒトＴおよびＢリンホサイト機能のグ
ラフである。

例感染し念マクロファージ中のＨＩ／Ｖ　−　１の水準の
減少におけるＩＰＡの有効性を決定するために試験を行
った。試験はまた、非感染Ｔ　Ｉ７ンホサイト、Ｂリン
ホサイトおよびモノサイトに対するＩＰＡの毒性効果を
決定するために行つ念。

以後の例中に記載する実験を行い、それはインピト口で
ＨＩＶ　−　Ｉ一感染マクロファージ細胞中のＨＩＶ　
−　Ｉの水準の減少におけるＩＰＡの有効性を示す。行
つ九実験はまた、感染したマクロファージ細胞中のＨＩ
Ｖ　−　Ｉの水準の減少にかけるＡｚＴ卦よびジデオキ
シシチジン（　ｄｄｅ　）の相対有効性を示す。さらに
、ヒトＴおよびＢリンホサイト、ならびにモノサイトが
、インビトロでＩＰＡに高い耐性を有することを示す実
験を行った。

一般に、ウイルス抗原の濃度を減少させるＩＰ．Ａの能
力を試験するための実験において、工ＰＡは先ず滅菌塩
水中の１０ミリモル（　ｍＭ　）貯蔵溶液に作られる。

これは、１ｍＭから１μＶ−１での終濃度にして使用さ
れる。ＩＰＡ＃ｉ水に容易には溶けず、そして光感受性
であるので、それは、若干の場合ＶＣ＃ｉ、生長培地中
に直＃　２　ｍＭで溶かし、そしてこれを所望濃度の溶
液を作るために使用し念。

実験１　ａ　（ａ）　：マクロファージ細胞、ＨＩＶ　
−　Ｉ　、抗体検定１列当りウエル６個を有するマイクロタイタープレート
のウエルに、ロイコパック（　ｌｅｕｋｏｐａｋ　）か
ら得九単核細胞を直接インキユペートすることにより、
新たなマクロファージ培養物を得た。非粘着細胞の除去
の後、各列の粘着マクロファージ＠、Ｈｚｖ−　ＩＯ１
　０倍段階希釈で、ウィルスの摂取を高めるためにボリ
デレンを使用して減染させた。１から２時間後に、ウィ
ルス媒質を除去し、そして新たな正常生長媒質で置換し
た。各列の新たな媒質は、表１　ａ　（ａ）の左欄κ示
すように、特定濃度のＡＺＴ　，ジデオキンシチジン（
ｄｄｃ）、ま之は化合物１ａを含有した。第１列のウェ
ルは対照であり、そしてそれＫＦ１３種の医薬のどれも
含有していない新たな媒質を加えた。媒質水準は、残留
ウィルス接種物を除去するために完全な液体取換えを少
くとも１回行って、ウィルスの複製が生じるようκ、２
がら４週間維持した。ついで、各ウエルの内容を、存在
するＨＩＶ　ｐ　２４抗原の水準につき、商業的に入手
しうる抗原捕獲キットヲ使用し、検体中に存在するｐ２
４の１　０−’　＃ｍほどの少量を検出しうる放射免疫
検定を用いて試験した。

上記方法は二重操作で行つ九。

結果は次の如く解釈された：たとえば、２／２は両操作
の対応ウエルの両方がａｘｖ−ｒｐ２４につき陽性であ
ったことを意味し．、他方０／２はどちらのウエルも陽
性でなかつ念こと全意味する。

力価は最終欄の次の与えられ；１／２ウエルが陽性であ
る場合、対数尺度で計算し念とき２つの希釈の間の半分
である中間値が力価として与えられた。３μＭ　ＩＰＡ
は１／１０，０００の希釈において両ウエルで陽性であ
り、そして１／１００，０００において両ウェル共陽性
でなかった。従って、１０４と１０５の間の半対数間隔
は、１０４゜５渣たけ３　０，０　０　０である。

３つの実験の間に、モノサイト／マクロファージ培養物
は、使用したＩＰＡのすべての濃度において健康である
らしかったけれども、大きい粘着性マクロファージ細胞
への小さい未成熟モノサイトの分化は、ＩＰＡの存在に
おいて生じないことが観察された。

実験！ａ（ｂｌ：Ｈ９細胞、ＨＩＶ　−　１、抗体検定
感染したＨ９細胞を使用して、実験１ａ（ａ）と同様な
方法で行い、Ｈ９細胞はパ・−マネントヒ｝Ｔ一セルラ
インである。結果を表Ｉａ（ｂ）に示す。

表１ｂ（ｂ）医薬ナシ濃度力　価　　　パーセント阻害Ｉ　　Ｘ　１０’ ＩＰＡＩＰＡＩＰＡＩＰＡＩＰＡＩＰＡＩＰＡｄｄｅ１０００　μＭ　　　　　　く１０３００μＭ　　　　　〈１０１００　μＭ　　　　　　　　１０３０μＭ　　　　ＩＸ１０” １０μＭ　　　　ＩＸ１０３５　ｐＭ　　　　１　Ｘ　　１０３１　　μＭ　　　　ＩＸ　１０’ １００μＭ　　　　　　　　１０＞９９．９＞９９．９９９．９９９．９実Ｍ’ｊｌ　Ｉ　ａ　（ｂＪ　：　Ｈ　９細胞、ＦＩＩ
Ｖ　−　ｒ、抗体検定パーマネントヒトＴ−セルライン
である感染したＨ９細胞を使用し、実験Ｉ　ａ　（ａｌ
と同様な方法で行った。結果を表ｒ　ａ　（ｂ）（１）
に示す。

表１　ａ　（ｂｌ（１）ＩＰＡＩＰＡＩＰＡＩＰＡＩＰＡＩＰＡＩＰＡ〈１０＜１０ ×１０２ ×　１０３ ×１０３ ×１０４＞９９．９，Ｍ　９　．　９９９．９ｄｄｅ１００μＭ９９．９それら実験を繰返し、そして結果を表Ｉ　ａ　（ｂｌ（
ｍｌに示す。

表１　ａ　（ｂ）（Ｉ）ＩＰＡＩＰＡＩＰＡＩＰＡＩＰＡＩＰＡＩＰＡ人ＺＴ　　　　１００　　μＭＡＺＴ　　　　　１０　　ａＭ＜１０＜１０＜１０＜１０３　Ｘ　１０” Ｉ　　Ｘ　１０４ｉ　　Ｘ　　１０４＜１０〈１０＞９９．９〉９９．９＞９９．９＞９９．９＞９９．９＞９９．９ｄｄＣ　　　１００　μＭ　　　　　　　＜１０　　　
　　　＞９９．９ｄｄ（１’　　　　　１０　　μＭ　
　　　　　　＜１０　　　　　　＞９９．９実験Ｔ　ａ
　（ｃ）　：ヒマラヤタール卵巣細胞、Ｃ’ＡＥＶ　，
抗体ヤイＫ白質脳炎および関節炎を生起させるヤザ関節炎脳
炎ウイルス（　ＣＡＥＶ　）、レント（　ｌｅｎｔ　）
ウイルス関連Ｈ工Ｖ　−　Ｉに暴露したヒマラヤタール
卵巣細胞を使用し、実験１ａ（ａ）と同様彦方法で行つ
た。ウイルスの存在を決定するために，　ＣＡｌｌｅＶ
ｐ２８を検出する放射免疫検定を使用した。結果を表Ｉ
ａ（ｃ）に示す。

実験１　ａ　（ｄ）　　ヒト細胞生存性に対するＩＰＡ
％ＡｚＴおよびｄｄｅの効果ヒト末梢血液単核細胞を各Ｓ＃度のＩＰＡおよびアチド
チミジン（　ＡＺ’ｒ　）の存在において、３７℃で１
８時間インキユペートシ、その時間の後、細胞の生存性
を、トリパンデルーの存在において細胞の視覚計数によ
り決定した。結果を表Ｔ　ａ　（ｄＨｌ）に示す。無毒
性が、ＡＺ’ｒにつき、０．１μばから６ｍＭまでの間
の濃度で観察された。６　ｍＭ　ＩＰＡの存在において
細胞生存性に僅かな減少があったが、０．１μＭから３
　ｍＭまでの濃度を使用して毒性は観察されなかった。

表１ａ（ｄ）（１）６０００　　　　　　５．８　　　　　９５　　　　　
２４　　　　　７５３０００　　　　　　３．０　　　
　　８Ｂ　　　　　２２　　　　　９２１０００　　　
　　　２．２　　　　１００　　　　　２８　　　　　
８２３００　　　　　　２．４　　　　　９２　　　　
　２２　　　　　７９３　　　　　　２．０　　　　　
１００　　　　　２６　　　　　８７１　　　　　　１
８　　　　　９０　　　　　２．８　　　　１０００．
３　　　　２０　　　　　９１　　　　　１．８　　　
　　８２０．１　　　３４　　　１００　　　　２．４
　　　　８６対照　　　５２　　　　９４　　　　２．
６　　　　８７他のセルラインに対するＩＰＡ，　ＡＺ
’ｒ．およびｄｄＣの毒性効果を決定するために、実験
をまた行った。

結果を表１　ａ　（ａｌ（ｍ＋からＩ　ａ　（ｄｉ（ｖ
）　ｔ　テに示す。

２ロットのＩＰＡ　（検体１および検体２）を試験した
。４ケ月Ｋわたる検体１の試験は、化合物に変化がなか
つ北ことを示した。

表ｒ　　ａ　（ｄｉ（１）セルライン：Ｈ９、０日間連続暴露ＡＺＴＡｚＴＡＺＴｄｄＣｄｄＣｄｄＣ検体１ＸＰＡＩＰＡＩＰＡＩＰＡＩＰＡＩＰＡＩＰＡ検休２ＩＰＡＩＰＡＩＩＰ入ｆＰＡＺＰＡＩＰＡＩＰＡ対照表１ａ（ｄｌｆｌ切セルライン八ＺＴＡ７，ＴＡＺＴｄｄＣｄｄＣｄｄＣＩＰＡ工ＰＡＩＰ入ＩＰＡＩＰＡＩＰＡＩＰＡＩＰＡＩＰＡＩＰＡＩＰＡＩＰＡＩ？人工ＰＡ表１　ａ　（ｄｌｌｌｌｌセルライン：Ｈ９、慢性的に感染させたＨＩＶ，４日間
連続的暴露ＡＺＴＡＺＴＡＺ’Ｉ’ ｄｄｃｄｄＣｄｄＣ’ 検体１ＩＰＡＩＰＡＩＰＡＩＰＡＩＰＡＩＰＡＩＰＡ検体２ＩＰＡＩＰＡＩＰ人ＩＰ人ＩＰ人ＥＰＡＩＰ人表１ａ（司（Ｖ）ＡＺＴＡＺＴＡＺＴ（１ｄＣｄａＣｄｄｅＩＰＡ，古いＩＰＡ，古いＩ１’Ａ．古いＩＰＡ，古いＩＰＡ，古いｒＰＡ，古いＩＰＡ．古いＩＰＡ，新しいＩＰＡ，新しいＩＰＡ　新しいｒｐＡ．ｔｆｒシいＩＰＡ，新しいＩＰＡ新しいＩＰ人　新しい対照ルへ？＋＋÷ モＨ十＋＋÷ ＋Ｈ十モＨ十＋＋十Ｆ＋÷ ＋＋什 ■ ■ ＋＋＋＋奸什升奸科Ｈ千Ｈ千軒← 升奸 ←什？＋十＋＋÷＋に＋＋セに＋÷七に＋＋＋に＋＋＋モ什什什 ■ 刊十 −Ｈ＋＋什 → 什 ■ ■ 奸什什什＋十＋モＨ十モＨ十刊＋ ÷Ｈ＋ ÷Ｈ＋十＋＋＋｝＋＋÷ 十＋＋＋÷モｔ＋＋＋＋に＋＋÷ 十＋÷ ＋÷ｔ｛＋＋÷÷ 十＋＋ｔ ÷Ｈ十＋Ｈ十十＋＋÷ ÷Ｈ十七Ｈ＋＋＋＋＋＋に＋＋＋４−Ｈ＋モＨ十十十＋＋＋＋÷ ＋÷｛十＋÷ 十十÷÷ ＋÷÷ｔ＋＋ｔに＋＋｝＋刊十 ÷Ｈ十モＨ＋刊→ ÷Ｈ＋＋＋＋＋什奸刊十刊十＋＋＋＋ ÷Ｈ十モＨ十＋に＋＋刊＋刊＋ −ｌ＋｝−１− モＨ十 −Ｈ＋＋ ÷Ｈ十脚注：モノサイト／マクロファージ細胞はウエルに緊密
に粘着しているので、それらは染色および計数のために
トリプシン処理しえない。我々はまたウエル中で直接染
料摂取を有効に観察しえず、そこで上記になされた観察
は細胞、そしてまた細胞数の明らかな健康の定性的指示
を示す。

それにもかかわらず、それらモノサイト／マクロファー
ジ細胞が、念とえは、Ｔセルラインに比しＩＰＡの毒性
効果に対しかなり大きく抵抗性であるらしいことｔ″認
めるのは重要である。ＣＡＥＶ試験に使用したタール細
胞はまた、ＩＰＡに対し比較的抵抗性であるので、最も
急速に生長する細胞は、最も傷害を受けやすいちしい。

実験１ａ（θ｝：ヒトＴおよびＢ　ＩＪンホサイト機能
に対する医薬の効果正常なヒ｝ＴおよびＢリンホサイト機能に対する化合物
１ａの効果を決定する友めに、試験を行った。

正常なヒト供血者からのＴおよびＢリンホサイトを、各
種用量水準の指示した化合物と３０分間インキエペート
した。リンホサイトを、デンタマイシンおよびフイトヘ
ムアグルチニン（　ＰＨＡ　）　（　’！’細胞分裂誘
発因子）、アメリカヤマ：ＩＩ♂ウ分裂誘発因子（　Ｐ
ＷＭ　）　（　Ｂ細胞誘発因子）および同種異系単核細
胞（混合した白血球培養物；　Ｕｔ，Ｃ　）中で、三重
複製ウエル中に、あるいは上記添加物を含有する媒質中
に加えた。リンパ球幼若化（　ｌｙｍｐｈｏｃｙｔｅｂ
ｌａｓｔｏｇｅｎ６ｓｉｓ）検定を以下に詳細に記述す
る。

各種検定の結果は、チャートＴ　ａ　（ｅ）ｍ　〜Ｉ　
ａ　（ｅ）（ｘＯ（第１〜１２図）に要約する。高めら
れた細胞の胚発生は、細胞活性の刺激を示すものと解釈
された。

データーは、三重複製の平均として示す。結果は、チャ
ートＩ　ａ　（ｓｌ（１）オよびＩ　ａ　（ｅＨｌｌ　
（　ｍ　１および２図）に示す。チャートＩ　ａ　［ｅ
Ｈｌｌ　（第１図）は、１分間当りの総力ウン｝　（　
ＣＰＩ，（　）　（分裂誘発因子含有ウエル中の平均ｃ
ｐＭ）としてデータを示し、そしてチャートＴ　ａ　（
ｅｌ（１）　（第２図）は、ＩＰＡなしの細胞培養物と
比較して、ＩＰＡが加えられた細胞培養物の増Ｗｉ能力
における増加または減少係〔憾ｆｆｉ化−　Ｃ　ＩＰＡ
を有するウエルのａＣ”ＰＭ　／媒質を存するウエルの
総ｃｐｕ　）　ｘ　１　０　０　）を示す。増殖に対す
る両方のＴ　ＩＪンホサイトの能力の減少は、１００μ
Ｍもしくはそれ以上の濃度のＩＰＡｔ−細胞培養物に加
えたときく得られ九。実験において、３０μＭ濃度の工
ＰＡで、２５チのＴリンホサイトの増殖活性。Ｔおよび
Ｂリンホサイト増随における効果なしまたは増加は、０
．１〜１０μＭ濃度のＩＰＡを細胞培養物に加えたとき
に観察された。

第２の実験は、より狭い用債水準範囲のＩＰＡを細胞培
養物に加えて行い、そしてＴおよびＢ　ＩＪンホサイト
増［を測定した（チャー｝　１　ａ　（ｅ）（ｆｉｌｌ
およびＩ　ａ　（ｅｌ　（ｌｖ）　−　　第６および．
４図）。Ｔリンホサイト増殖の昭めうる減少は、３０か
ら１０μＭまでの範囲内のＩＰＡの用量水準で観察され
なかった。

約３０〜５０％のＢ　ＩＪンホサイトの減少が３０〜ｌ
　Ｑ　ｍＶ．濃度水準の間で観察された。実験間で観察
されたばらつきの程度は、それら試験において共通であ
る。〔ラスター（　Ｌｕ５ｔｅｒ　）　等。デベロプメ
ント、オデ、ア、テステイング、バッテリーツー　アセ
ス、ケミカルーインジュースト、イミュノ・トキシシテ
イ（　Ｄｅｖａｌｏｐｍａｎｔ　ｏｆ　ａ　Ｔｅｓｔｉ
ｎｇＢａｔｔｅｒｙ　ｔｏ　Ａｓｓｅｓｓ　Ｃｈａｍｉ
ｃａｌ−Ｉｎｄｕｃｅｄ　Ｉｍｍｕｎｏｔｏ−ｘｉｃｉ
ｔｙ　）　：ナショナル、トキシコロジー　プログラム
ズ、がイドラインズ、フォア、イミュノトキシシテイ、
エバリュエション、イン、マイス（　Ｎａｔｉｏｎａｌ
　Ｔｏｘｉｃｏｌｏｇｙ　Ｐｒｏｇｒａｍｓ　Ｇｕｉｄ
ｅｌｉｎｅｓｆｏｒ　Ｉｍｍｕｎｏｔｏｘｉｒｉｔｙ　
Ｅｖａｌｕａｔｉｏｎ　ｉｎ　Ｍｉｃｅ　）　）。

混合白血球培養物（　ｍｃ　）反応は、ヒト組織相容性
抗原ヲ認識し、そして免疫的に反応するヒト単核細胞の
能力を評価するために使用しつる（抗原に対する第１久
免疫応答を載せる細胞の能力の測定）。１組のヒト単核
細胞の培讐物ヲ、リンホサイト胚発生検定にける無関係
供血者からの単核細胞と反応させ、そして第１組の細胞
の増殖を定量した。結果を、チャートＩ　ａ　（ｅ）　
ＭおよびＴ　ａ　［ｅｌ（ｖＯ　（第５および６図）に
示す。また、分裂誘発因子でのリンホサイト，胚発生に
おける如（、ＭＬＣを３つの複製で行い、そして平均値
を得た。ＭＥ，Ｃ反応性の僅か々増加が、１００μＭの
ＩＰＡ　’ｉ培養物に加えたときに見られた。ＭＬＣ反
応性に対する効果は、１０μＶのＩＰ人では見られず、
そして１ａＣ反応性の５０係減少が１μＭ濃度で得られ
た。

ＴｂよびＢ　Ｕンホサイト機能に対するＩＰＡの０無効
“用号水準をより厳密に観察するために、より近接した
用量水準間隔でリンパ球幼若化検定操作する実験を行っ
た。この実験で、広い用量水準の比較効果（１０００〜
１μＶのＡＺ’ｒかよびｄｄｅをま念、Ｔ卦よびＢリン
ホサイト機能につき評価した）。結果を、チャートＴ　
ａ　（ｅ）　（ｖｌｏ　〜Ｉ　ａ　（ｅ）　（ｘｉＤ（
＠７〜１２図）に示す。また、ＴおよびＢＩＪンホサイ
ト機能の減少が、ＩＰＡで１０００μＶから１０μＶの
範囲の用量水準において得られた。ＴおよびＢ　ＩＪン
ホサイト機能における約２５優減少が！１０〜３５μＭ
濃度のＩＰＡで見られた（チヤ−１・Ｔ　ａ　（ｅｌ（
ｖｌｌ）ｂよびＩ　ａ　（ｅｌ　（Ｖ’Ｋ）−第７およ
び８図）。

増加したＴおよびＢリンホサイト応答が１０μＶ用量水
準において観察された。

τリンホ伊イト増殖の紹めうる減少は，　ＡＺＴの１０
０〜１μＭ濃度において得られなかった（チヤー｝　１
　ａ　（ｅｌ　（ｌｘ）　ｉ−よびＴ　ａ　（ｅｌ（ｘ
）　−　第９および１０図）：約２５係減少カ、Ｔ１１
ａＤＶＣ対ｔ，　１　０００μＭ用量水準のＡＺ’ｒで
見られた。すべての用量水準、１　００　０　〜１　μ
ＭＫｂｔｎて、ＡＺ’ｒ　ＶｉＢリンホサイト増殖の（
５０〜９０憾）減少を生じた。

Ｔ　Ｕンホサイト機能の１０〜２５チ減少が、ｄｄｅの
広範囲（１００〜１μＭ）の用量水準で見られた。ＡＺ
ＴＶｃｉ？ける如く、Ｂリンホサイト増殖応答のより大
きな減少が、ｄｄｅで観察された。

１０００μＭ濃度Ｋおいて、８０から８５％までの減少
が見られ、そして２０〜３５俤減少が１μＭ用奇水準の
ｄｄｅ’で得られ之（チャー｝　Ｔ　ａ　（ｘｌ）およ
びＩ　ａ　ｔｅｌ　（ｘわ一第１１および１２図）。

実験！　ａ　（ｆｌ　：ヒトモノサイト機能に対する医
薬の効果各ヒト供血者からのモノサイトを、３つの異った用債水
準の化合物１ａと、三ｆｆｉｆｆ！！ＩＫおいて、３０
分ｎ１インキユペートした。それら細胞をアがロースに
加え、そして細胞を含有するアがロースの液滴を小室に
加えた。単核細胞の高められた転移を誘導するために、
化学走性剤を加えた。詳細な検定方法を以下に記載する
。

お互いの６０俤以内の三重複製の細胞転移型が、一般に
受容された。結果を表Ｉ　ａ　（ｆ）（１１に示す。

表１　ａ　（ｆＨｌ）媒質０．６０．１媒質 −　２９係 −　２２慢 −　３７＄ −　１５多 −　２係＋１４彊 −　７６チー５１　　％一６１　　チ −７１　　幅 −６５ｃ６ −　４５慢一　１６％一　１２チ十一増加一一減少１００〜１０００μＶ濃度のＩＰＡを使用して、自発転
移に対するモノサイトの能力の２２〜３７係減少があつ
九。３０μＭ濃度のＩＰＡで、自発転移のより少ない１
５％減少があった。高められた自発転移が、０．１〜０
．３μＭのＩＰＡ　Ｉ−使用して観察された。

３〜３０μＷＯ！＆初に観察された遷移水準を取囲むＩ
ＰＡ（０１１度を使用して、ＩＰＡの効果を研究した。

結果を表１ａ（ｆ）（１）に示す。

表Ｉ　ａ　（ｆｌ（１）６３００　　　　　　　　−　３１　　％６８４６　　
　　　　　　−　　２５チ７９５２　　　　　　　　−
　　１２チ−３４−慢十一増加一一減少表１　ａ　（ｆ）ｍおよびＩａ（ｆ）（鳳）から知り５
るようＫ１ＩＰ人の存在において、細胞の自発転移の減
少の程度は、２組の実験の間で若干興っている。たとえ
ば、１５’ｌ減少が３０μＭ　ＩＰＡ　（表Ｉ　ａ　（
ｆｌ（１）　）における細胞の転移で観察され、そして
３４幅減少が表１　ａ　（ｆ）（１）中に示される。こ
の大きさのばらつきは、この型の検定では普通である（
Ｌｕａｔａｒ等、前掲）。

ＡＺＴおよびｄ（ＩＣの相対効果を、また研究した。

結果ｌｔ表ｒ　ａ　（ｆｌ（ａｌｌに示す。

表１　ａ　（ｆＨｌｌｌ）ＩＰＡ％ＡＺ’Ｉ’　ｋよびｄｄＣ’での処置に引続く
機能（自発転移）に対するヒトモノサイトの比較能力 −４１　　チー　３６慢 −　４９係 −　　５１　　％ −　５２俤十一増加一一減少１）単核細胞を、全血から、合成分離媒質を使用して、
差動遠心分離により分離し、あるいは冷凍貯蔵製剤から
解凍した。細胞全洗滌し、そして媒質（　ＲＰＭＩ　−
　１　６　４　０、Ｌ−グルタミン２ｍＭ，ヘルペスパ
ツファ−２５ｍＭ，ｒンタマイシン５０μ９／ＩＬＩ，
ヒトＡＢ血清一熱不活性化（５６０、３００）２０幅）
中κ再懸濁する。

２）生存細胞数を決定する。

３）細胞濃度を、媒質中２　Ｘ　１　０’／ｔｊに調節
する。

４）細胞ｓ濁液を、９６−ウエル平底プレートのウエル
にｓＯ−１’部分（　２　Ｘ　１　０５細胞）で加える
。

５）選択し几分裂誘発因子および（ま九Ｆｉ）抗原（媒
質中、血清なし）を、ウエル中の細胞κ、また０．１１
部分で加える。

６）培養物を、加湿５　％　ｃｏ，雰囲気中、３７℃に
おいて、６〜７日間（分裂誘発因子または抗原κ依存ス
る）インキユベートする。

７）培讐終了の６から８時間前に、０．０５ＮＬｌ（１
μｃｉ）の３Ｈ　’ｒｄＲ比活性６−７　ｃｉ　／　ｍ
ｕ　（　２　０　μｃｉ／ｄ貯蔵物）を、各ウエルに加
える。

８）培養終了時に、多数検体採取器を使用して、細胞を
シンチレーション一等級がラス繊維紙片上κ採取する。

９）採取し九培養物のがラス繊維紙からの穿孔デスクヲ
、各々シンチレーションバイアルに入れ、それについて
トルエン基礎シンチレーションカクテル５１を加える。

１０）パイアルを液体シンチレーションカウンターで計
数し、そこで合体した３Ｈ　ＴｄＲが決定される。

結果の計算総ＣＰＭ一分裂誘発因子／抗原培養物のｘｃｐｕ−媒質
培！物のＸ　ＣＰＭプレコールグラジェント分離を使用するモノサイトの単
離１）６ｄホスフエート緩衝化塩水（　ＰＢ８　）　２　
Ｘをプレコール７１に加える。

２）混合物をｊ５ｔｚｌ容ポリカーボネート遠心分離管
（ソルバール（　８ｏｒｖａｌｌ　）　”　０　３　２
　４　３、１８Ｘ１００ｍ，ｐｔ．”００７７０　　５
０／＆ックス、Ｗ／カツプ）に加える。

３）管を２　１，０　０　０　Ｘ　９で４５分間遠心分
離する（ソルバール、ＲＣ２−Ｂ遠心分離Ｗ／Ｅ３．Ｂ
−３４ｒ’一ター　６４固定角、−　１　５．０　０　
０　ｒｐｍＷ／デレークオフ％　０４°０）。プレコー
ルグラジエントは２週間でよい。

４）単核細胞を、全血から、合成分離媒質を使用し、差
動逮心分離により分離する。

５）細胞を基礎塩溶液（　ＢｕＢ　）で洗滌２×する。

６）細胞’ｌｉ　Ｂ８Ｂ　＋　１　０　Ｓ　Ｂ０８　Ｋ
再Ｓ濁し、ツイ’ｌ？混合物を、仔牛血清（　ＢＣ８　
）　５　０〜４０ｍ１Ｊ１ｋ含有する５０１容遠心分離
管に加え、そして４００ｘＩで１０分間遠心分離する。

７）細胞ｔ−ＢＣＢなしの８８８に再懸濁する。

８）生存細胞数を決定する。

９）細胞の濃度を２．０〜２．５　Ｘ　１　０’　／１
１１に調節する。

１０）細胞２１を、プレコールグラジエントの頂上部に
注意深く積層する。管を、デレイクオフで４’ＯＫおい
て、１ｏｏｘ，＠で２０分間遠心分離する。

１１）モノサイト層を滅菌ピペットで採改し、セして５
（１１４容遠心分離管に分注する。死滅細胞は頂上帯中
に存在する。モノサイトは中間グラジエント上約５１に
ある。リンホサイトは中間グラジエント下約５　ｍｌに
ある。５０１容遠心分離管１個中へのモノサイトの６プ
レコールグラジエント管を超える分注はしない。

１２）細胞をＢＣＢなしの８８８で洗滌３×する。

１５）細胞を所望媒質中に再懸濁する。

１４）モノサイトの比率を決定するために、モノサイト
細胞懸濁物にエステラーぜ染色を行う．比率は５０〜８
０＃Ｉの範囲である。

化学走性検定１）アがロース［シーケム（　９ａａｋｅｍ　）　Ｈ　
Ｂ　］　ｈより蒸留Ｈ２０の０．４　１溶液ｔ−製造し
、１ドラムパイアルに分注し、オートクレーデし、そし
て使用するまで４℃で貯蔵する。

２）グルタミン２ｍＭ，ｒンタマイシン５０ｇ／ｖｒｌ
６よび仔牛血清一熱不活性化（５６℃、６０℃）２０係
を含有するメディア（　Ｍｅｄｉａ　）　１　９９　　
２Ｘ中の３Ｘ１０”／ｄ細胞の懸濁液を同量の０．４＊
アがロースと組合せる。

３）５μｔ液膚の細胞／アがｐ−ス混合物を、ステリリ
ン（　８ｔｅｒｉｌｉｎ　）プレート〔サ〜レイ（　８
ｕｒｒθＹ）、英国〕の中心に加える。

４）２μｔ液滴のアがロース／媒質混合物を、細胞／ア
がロース液滴のｊｌｍｌ３〜５ｆｌに加え、そして２μ
ｔ液滴のアがロース／ケモーアトラクタント［Ｎ−＄ル
ミルーＴ，−メｆ−オニルーＬ一ロイシル−Ｔ、−７エ
ニルアラニン１　０−’　Ｍ　（　？　−　Ｍｅｔ　−
Ｌｅｕ　−　Ｐｈｅ　）　Ｅ　’ｋ：細胞／アがロース
液簡の他１１１１３〜５ｍ翼に加える。

５）液滴を固化させ、その後グルタミン２１！ＬＭ，ｒ
ンタマイシン５０μ９／ｌｄおよび仔牛血清１０％を含
有する０．５　ｄのＲＰＭＩ　−　１　６　４　０をウ
エルに加える。カバースリップをついでウエルκかぶせ
る。

６）プレートを５チＣＯ２／加湿空気中、３７℃で約１
８時間インキエベートする。

７）グレートをインキュペーターから取出し、そして細
胞が対照媒質およびケ七アトラクタント液滴にむかって
移動した距離を追跡しそして測定する。

実験１ａ（ｇｌ：Ｍ４１３細胞、ＣＭＶ　，視覚方法４
８ウエルミクロタイタープレート中のＭ４１６組胞（二
倍体ヒトフイデロデラスト細胞の１つの型）の融合性単
層を使用した。それらを，１０％牛胎児血清および５０
μ９／Ｉｄ’ｌ’ンタマイシンを補充し九ダルペツコＭ
ｇＭ　（　ｍｉｎｉｍｕｍ　ｅｓｓｅｎｔｉａｌｍｅｄ
ｉｕｍ　）中で生長させた。

貯蔵サイトメがロウイルス（ＣＭＶ）ｔ−，上記媒質中
、１連の１０倍希釈で希釈し、そして０．１　ｍＭ”ｔ
ｆｔマイクロタイタープレートのウエルに加え、そして
ウイルスを６７℃で９０分間吸収させた。

非吸収ウイルスを吸引により除去し、そして医薬の希釈
物を含有する媒質０．５１を複製ウエルに、ウイルスの
各濃度におＡで加えた。５日間インキユペートした後、
新友な媒質を各ウエルに加え、追加医薬は包含させず、
そしてプレートを翌日、細胞変性効果につき点数評価し
た。ウイルスは、特徴的に拡大し円形化した細脂ヲ、そ
のような細胞を完全に欠い九細胞性背景中で産生ずる。

データーは、特徴的に円形化した細胞金産生する最大希
釈の逆数（“力価“）として表わし、そして実験１　ａ
　（ａｔのそれの如く説明される中間結果で、パーセン
ト阻害は実験力価を対照力価と比較することにより計算
した。結果を表１ａ（ｇ）に要約する。

実験は、それら実験の条件下の非感染細胞の生存性を決
定するために行った。

非感染細胞を各種濃度のＩＰ人に暴露し、そしてそれら
の生存性を、トリパンデルー排除により、対照細胞に関
係して、２４時間後に決定し念。

表１ａ（ｇｌいで、実験１ａ（ｇ）につき記載したと同様の方法に従
って行った。結果を表１ａ（ｈｌに示す。

それら条件下に非感染細胞の生存性を決定するために実
験を行い、そして表１ａ（ωに示す。

表１ａ（ｈ）０　　　　　　３Ｘ１０４１０００μＭ　　　＜１０　　　　　＞９９．９７６０
０μＭ　　　　　＜１０　　　　　　　　　＞９９．９
７１００　ｐＭ　　　　３　８　　１０　　　　　　　
　　　９９．９１０００μＭ６００　μＭ３１００　μＭ３３０　μＭ３ ×１０３＜　１０　　　＞９９．７Ｘ１０　　　　　　９９１０”　　　　　９０ＸＩＯ３　　　　０実験１ａ（ｈ）：Ｍ４１３細胞、Ｈ８Ｖ　−　Ｉ、視覚
方法ヘルペス拳シンプレツクス（ｈｅｒｐｅｓ　ｓｉｍ
ｐｌｅｘ）ウィルス−エ型（　ＨＦ３Ｖ　−　１　）を
使用したこと金除実験１ａ（幻：　ＥＢＶで急性感染さ
れたＰ３ＨＲ　ｌ細胞、螢光抗体法実験は、濃縮Ｐ，ＨＲ　１細胞を使用して行った。ウイ
ルスは、ＥＢＶ’Ｆ’ノムを含有しているが、核抗原（
　ＥＢＮＡ　）を除きＥＢＶ蛋白質を発現しないラジ（
　Ｒａｊｉ　）セルラインのスーパー感染により力価検
定した。感染性ｇＢＶ　ｉＣよるラジ細胞の感染は、細
胞中に感染性〜イルスの力価に比例して早期抗原（ｇＡ
）を鰐導する。ＦＡはモノクロナール抗体を使用して検
出した。

検定は、ラジ細胞をＰ３ＨＲ１ウイルスの段階１０倍希
釈に２時間暴露することにより開始した。過剰のウイル
スは、遠心分離により分離しそして除去し念。各希釈に
おける感染された細胞の１部分を１２ウエルトレイに分
配（０．５１ｊ／ウエル）し、そして所望！＆終媒質濃
度の２倍を含有する媒質０．５１を各ウエルに加えた。

２４および７２時間目に、各ウエルの１部分を洗滌し、
がラススライＶのテｙ　ａ　ｙ　（商標）上掛けウエル
に加え、空気乾燥してそれらｆ！：がラスに付着させ、
ついでアセトンーメタノール（５０：５０）で固定した
。標準螢光抗体法を行って、各時間、ウイルス希釈およ
び医薬濃度における、ウイルスを含有する細胞のパーセ
ントｆ．測定した。

結果を表■八（１）に示す。

それらパーセント値は、各点において、約２００細胞を
計数し、そして抗原陽性の細胞のパーセントを計算する
ことにより得られた。

実験！ａ（１）：Ｍ４１３細胞、Ｈ８Ｖ　−　１、螢光
抗体検定実験は複＆！Ｍ４１３細胞で行い、タイターテツ，ク（
　Ｔｉｔｅｒ−Ｔｅｋ　）スライｒ（４ウエル、がラス
）中で開始し、１日以内に融合性であったものを実験に
使用し念。２４〜４８時間内に、感染での処理に充分で
あることを確認するために、細胞密度をチェックした。

貯ＭＨｓｖ−１ｆｆｉ１０一倍ステップ（１、’ｔ　ｏ
−１ｉ　ｏ−”　　１ｏ−３ｉ　ｏ−’　）で段階希釈
して２ｄの各希釈を提供し：　０．２　／　１．８　ｔ
ｊ希釈で、約１０−１１０−”　　１０−３　　１０−
’１０−５の全希釈を最終的に生成した。ウイルス吸収
を６７℃で９０分間行わせ、その時間の後接種物を取出
し、そしてＩＰＡを表１ａ（ｊ）に指示する濃度で含有
する溶液でｆ換した。スライＦを３日間インキエベート
シ、そして次の抗血清で染色した二１：２０におけるＨ
８ｖ−　１ウイルス・カブシド（　ｃａｐｓｉｄ　）抗
原（　ＶＣＡ　）に対するモノクロナール抗体；対照モ
アズ（　ｍｏｒｅｓ　）　ＩｇＧｔ　１　：　２　０ａ
結果を表Ｔａ（ｊ）に報告する。

表１ａ（ｊ）濃度対数ウイルス希釈対照　（無ＩＰＡ）：ＭＡＢ−ｖｃＡ　　　　　　２．５　　．２　　　　２
　　　　２　　　　０．５正常　マウスＩｇＣ｝０００
００非感染貼Ｂ＝ＶＣＡ　　Ｏ１０００　μＭ　　　　　　Ｏ００００６００μｕ．ｏ
ｏｏｏｏ１００μＭ　　　　　　０００００３０μＭ　　　　　　０００００１０μＭ　　　　　　０　　　　００００３μＭ　　　
　　　０００００１　μＭ　　　　　　Ｏ．２５　　０，２５０。２５　
０，２５　０．２５比較の目的で、アシクログアノシン
（アシクロビル）を使用して、同様の１連の試験を行っ
た。

それらの結果を表Ｔ　ａ　（ｊｂ）に示す。

表１　ａ　（ｊｂ）ヒトフイデロデラスト上で生長させ、そしてアシクロピ
ルに暴露したＨ８Ｖ　−　１の螢光抗体測定表１ａ（ｋ
）凡例：１−１スライｒ当り陽性細胞１０個以下。

２一細胞１０個以上、または十細胞の少さなクラスター６一螢光細胞の大きな巣（　ＦＯＣＩ　）、明らかなｃ
ｐｒｒ　，４一広く拡がった螢光、多数の巣。

実験１ａＤｃ）：Ｍ４１３細胞、ＣＭＶ　，螢光抗体検
定ＶＬｆｉ，Ｂ　ｆ　Ｈ８Ｖ　Ｉｃ置換し、サイトメが
ロウイルス（　ＣＭＶ　）で、実験１ａ（ｊｌに記載し
た方法を行った。

対照（無ＩＰＡ）：ｍＢ−ｖｃＡ　　　　　　４　　　　　３，５　　　３
　　　　　２．５　　　２正常　マウスＩｇＧＯＯＯＯ
０１Ｆ４Ａ染ＭＡＢ−ＶＣ！Ａ　　　０１０００μＭ　　　　　　Ｏ．５　　　０．５　　　０
．２５　　０　　　　０３００μＭ　　　　　　２　　
　　１，５　　　１　　　　０．５　　　０．２５１０
０μＭ　　　　　　２　　　　１．５　　　１　　　　
［１．５　　　［１．５３０μ１，（２２１．５１１１０μ１．（　　　　　　３３３２２３μＭ　　　　　　３．５３３２２実験Ｔａ（１１：８１−６６−４５細胞に感染させたＢ
ＩＴ／　−　１Ｋ対スルＩＰＡノｉ（験８１−６６−４
５セルラインは、ＨＴＬＶ　−　ｊ修飾非産生剤である
。実験１　ａ　（ａ）の方法に従って行った。結果を表
１ａ（１｝κ要約する。

表Ｉａ（１）ＡＺ’Ｉ’　１００　，ｕＭ人Ｚ’ｒ　　３０　　μシ＜１０＜１０＞９９．９＞９９．９ｄｄＣ　　ｊ００　μＭａａｃ　　３０　μＭ＜１０〈１０＞９９．９＞９９．９ＩＴ）Ａ　１αＩｊＪＪｖ　　　　　＜１０　　　　　
　＞９９．９ＩＰＡ　３００　　μＭ　　　　　＜１０
　　　　　　＞９９．９ＩＰＡＩ００　　μＭ　　　　
　＜１０　　　　　　＞９９．９ＩＰＡ　　３０　μＭ
　　　　＜１０　　　　　　＞９９．９ＩＰＡ　　１Ｄ
ｔｔＭ　　１　　ｘ　　１０　　　　　　　９０ＩＰＡ
　　　３　μＭＩＸ１０　　　　　　　　０ＩＰＡ　　
　Ｉ　　μＭ　　ＩＸ１０　　　　　　　　０実験１　
ａ　（ｍ）　：　ＩＰＡの安定性試験以下に記載する如
き時間を追ってとったＩＰＡの赤外線スペクトルを、時
間の経過でＩＰＡに生じているかも知れ々い変化を監視
するために使用した。

本化合物は、一般に−１０°Ｃで貯蔵した。新らしイＩ
ＰＡのＦ’ｒ−ＩＲデーターは、表１ａ（ｍ）の第１欄
に示す。同じ化合物の第２のＦＴ−ＩＲスペクトルを、
−１０℃で１１０日間貯蔵した後にとり、そしてデータ
ーは表１ａ（→の第２欄に示す。

本化合物の融点を同時点でとつ几。もとの融点は１２８
〜１３０℃であり、そして１１０日後の第２の融点＃ｉ
１２９〜１３ａ’ａであった。

表１ａ（ｍｌから分るように、本化合物のＩｉ’Ｔ−Ｉ
Ｒスペクトルに殆んど変化はなく、そして本化合物の融
点に著しい変化はなかった。観察された融点は１２６℃
から１３８°Ｃまでの範囲内である文献の融点とよく一
致している。

表１ａ（ｄＩＰＡの検体にツイテ、μＭ　ｉｃ　ｂけるＦ’ｒ−Ｉ
Ｒのピーク波長ＩＰＡｉＣ対する付加インビトロ試験１１ＩＶ　−　１複製に対する医薬ＩＰＡの効果を、急
性〉よび持続的に感染させた細胞で、イン１トロ試飲し
た。培養物上清中のＨＩＶ　−　１の産生は、ＨＩＶｐ
２４の存在により決定した。

方法Ｈ９細胞のインビトロ感染は、先に記載した如くに行っ
た。簡略には，５ＸＩＤ’Ｈ９細胞をＤＥ八Ｅ−デキス
トラン（２５μｇＺｌＩ＆）で２０分間処理した。細胞
をついで、無細胞ＨＩＶ　−　ｉ　（　１Ｘ１Ｑ５ＲＴ
単位）゛１ばて、６７℃において１時間感染させた。細
胞をついで洗滌し、そして各種濃度のＩＰＡの不存在ま
たは存在において１２日間インキュベートＬ７’ｈ．３
〜４日目毎に、媒質を、医薬の適当な濃度を含有する新
たな媒質に取りかえた。感染後の各日に、上清中のＨＩ
Ｖ　−　１の存在を、抗原捕獲試験（　ｔｈｅ　ａｎｔ
ｉｇｅｎ　ｃａｐｔｕｒｅ　ｔｅｓｔ　）　′ｆｃ使用
して、ＨＩＶ−ｉｐ２４を測定することくより監視した
〔デュポン（　ＤｕＰｏｎｔ　）　（商標）、デラウエ
ア〕。

エイズ患者のリンホサイトからのＨＩＶ　−　１　ｍ生
は、先に記載した如くに行った。簡略には・５ｘ１０６
患者リンホサイトを、２０慢ｒＢｓ、５％インターロイ
キン２〔セルラー・プロタクツ（Ｃｅｌ−ｌａｒ　Ｐｒ
ｏｄｕｃｔｓ　）、バッファロー二二一ヨーク〕ｂ　．
１１１．　ヒ各ｓ！１度ノＩＰＡ　？含有ｔルＲＰＭＩ
　１　６　４　０媒質中の５　Ｘ　１　０’　ＰＨＡ一
刺激正常ＰＢＬと共培養した。培養ｔ−４週間継続した
。培養物に、２〜３Ｘ　Ｉ　Ｑ６　ＰＨＡ一刺激正常Ｐ
ＢＬを１週間に２回供給した。培養媒ｉを１週開１ｃ２
回取り出し、そして抗原捕獲試験κよりＨＩＶの存在を
試験し念。培讐媒質は、医薬を含有しまたは含有しない
新たな媒質に、３〜４日間隔で置換した。

ＨＩＶ　−　１で持続的に感染させたＨ９細胞中の｝Ｉ
ＩＶ　−　１の産生に対するＩＰＡの効果を試験するた
めに、５　Ｘ　１　０’　ＦＩＩＶ　−　１一感染Ｈ９
細胞’ｉＩＰＡの不存在または存在においてインキユベ
ートシ念。

４〜５日目毎に、総細胞の２／３を取除き、そして媒質
を取りかえた。医薬を含有しまたは含有しない新たな媒
質を加えて、もとの容量にした。指示された日に、培讐
上清を取り、セしてＲ’！’一活性によりＨＩＶ　−　
１の産生を試験した。上清１ｄ当Ｄ２肌０　０　０　ｃ
ｐｍもしくはそれ以上のｌｒＣＡ不溶放射活性は，ＲＴ
検定において陽性と考えた。

結果Ｈ９細胞、ＴセルラインのインビトロＩＩ’／　−　１
　，感染に対するＩＰＡの効果の試験を行つ九。医薬は
ウイルスの１時間吸収に引続いて加え、そしてインキュ
ベーション期間を通して培養媒質中に＃Ｉ持した。第１
３図κ示される如（、ＩＰＡは、インビトロＨＩＶ　−
　ｉ感染を、用量依存様式で阻害した。

ＨＩＶ　−　ｉ　ｆｉ生の５対数阻害以上カ、用ｔ　３
．７　５　ｌＭもしくはそれ以上で得られた。

３０μＭもしくはそれ以下の濃度ＫｂけるＩＰＡは、生
存ＰＨＡ刺激ＰＢＴ．，の生長に対し培養１０日目まで
顕著な細胞毒性効果を有しなかった（表（｝１）。

ＨＩＶ　−　ｊ血清反応陽性患者のリンホサイトからの
｝｛ＩＶ　−　１産生のＩＰＡ阻害の研究を行った。′
この目的で、エイズ患者および無症候患者からのりンホ
サイトを、ＩＰＡの存在または不存在において、ＰＨＡ
刺激ＰＢｔ，と共培讐した。第１４図に示す結果は、．
ＩＰＡがＨＩＶ　−　１産生を用量依存様式で阻害した
ことを指示している。ＨＩＶ　−　１ｐ　２　４抗原捕
獲検定により決定されるウィルス産生け、ＩＰＡにより
、３−７　５　ａＭもしくはそれ以上の濃度で、完全Ｋ
．遮断した。対照的に、ｒｕｖ−１＃ｉｓ未処理培養物
中で、共培養に引続く７日目に早くも検出された。

Ｉ’ｆＩＶ　−　１の複製和対するＩＰＡの効果″ｋま
九、ＨＩ／Ｖ　−　１で持続的に感染させたＨ９細胞（
１｛９−Ｈｒｖ　−　１　）で試験した。生存細砲数の
測定により判定して、細胞毒性は、３０μＭおよびそれ
以下の濃度でＩＰＡとインキユペートしたＨ　９　−　
１｛ＩＶ　−１で、３０日目まで観察されなかった。

それらの結果は、ＩＰＡが活性な抗ＨＩＶ　−　１剤で
あウ、細胞外ウィルスによるインビトロ感染、そしてま
た血清反応陽性人間のリンホサイトからのａｒｖ　−　
１産生管制圧しうろことを実証する。ＨＩＶ一１一感染
患者からのりンホサイトと正常な分裂誘発因子刺激ＰＢ
ＬとＯ共培養の間に、感染細胞から未感染細胞へのＨＩ
Ｖ　−　１０伝幡が細胞間移転（　ｃｅｌｌ−ｔｏ−ｃ
ｅｌｌ　ｔｒａｎｓｍｉｓｓｉｏｎ　）　Ｋより、そし
てまた細胞外ウイルスを通した感染Ｋより生じることが
最近示されてた。ＡＺＴは細胞外ウイルスによるＨＩＶ
　−　４感染を阻害するが，ａＩｖ−１の細胞間転移に
引続くウイルス生長に対し効果を有していない。ＩＰＡ
が感染患者のリンホサイトからのＨＩＶ−産生を阻害す
る事実は、この医薬が細胞外ウイルスくよる感染１＆：
阻害するばかりでなくまたＨ工Ｖ−１の細胞間転移生じ
るウイルス産生ｆ．１断ずることを指示している。

表０１ＰＢＬ　ＴｈよびＨ９細胞の生長に対するＩＰＡの効果
０　　　　　３．４３．７５　　　３．４７．５　　　　３．５１５　　　　　　３．５３０　　　　　２．７Ｘ　　１０’　　　　　　　２．９Ｘ　１０’　　　　　　　２，９Ｘ　１０’　　　　　　　２．８Ｘ　１０’　　　　　　　２．８Ｘ　１０’　　　　　　　２．７ ×　１０６Ｘ　　ｊＯ’ ×　１０６ ×　１０６ ×１０６チ生存細胞の数は、＠１３図からのＩ｛９ｎＢ胞のインビトロ感染に引続いて、トリパンデルー排除方法によ
り測定した。

＋チ　ェイズ患者Ｏリンホサイトと第１４図からのＰＨ
ｖ一刺激正常ＰＢＬとの共培養に引続く１０日目Ｋ回収
された細胞の数。

表０２｝１ｌＶで持続的く感染されたＨ９細胞からのＨＸＶ産
生に対するＩＰＡの効果０　　　　　　３　Ｘ　１０５　　　　　　１．Ｉ　　
Ｘ　１０’３。７５　　　　２．３　Ｘ　１０５１．２
　Ｘ　１０’７．５　　　　　２．９　Ｘ　１０’　　
　　５．２　Ｘ　１０’１５　　　　　　２．３　Ｘ　
１０’　　　　５．６　Ｘ　１０Ｉｓ結果の要約および
データー操作表１　ａ　（ａ）、ｆ　ａ　（ｂ）、およびＴａ（ｃ）
Ｉ／Ｃ示した選択された結果を、第１５図九作図する。

それらの結果は、ＩＰ人の任意の可能な毒性効果を考慮
しない。

第１図から読んでＩ　Ｃ５ｏおよびＩＣｇ。値を決定す
ることができ、そして表Ａに示す。

％／サイト　　　ＨＩＶ−１　　　　６　／ｊＭ　　　
　１０　μＭ１｛９　　　　　　　　　｝ＩＩＶ−１　
　　　　２ＡＶ　　　　　　３ｔｌＭ第１５図から、Ｉ
ＰＡが３から３０μＭ１そしてそれ以上の範囲内の濃度
でＨＩＶ　−　１およびＣＡＥＶの複製を阻害するよう
であることは明らかである。

適当な毒性データーなしに、各糎医薬濃度において治ｔ
ｆ！係数を計算することは不可能である。にもかかわら
ず、工ＣＳ０はウィルスおよびセルラインに依存して約
２〜６μＭの間であるとみることができ、そして工Ｃ９
。はそれら実験において６〜３０μＭの間である。

実験１　ａ　（ｂ）　（表１ａ（１））（量））おヨび
実験１ａ（Ｉ）（表１　ａ　（ｉ）　）からの結果を、
表１に要約する。

１死滅細胞１を表１　ａ　（ｃｉ）（ｆｉｌ＋およびＴ
　ａ　（ｄ）　（ｖｌ　カら１０日値を使用して取り、
そして治療係数を各医薬濃度について計算した。ＩＰＡ
の結果をまた、第１６および１７図に図表化する。細胞
毒性（破線）は生存細胞パーセントとして計算する。

抗ウイルス有効性の決定に必要とされると同じ時間枠で
採取される毒性データーの有効性は、２つの異ったセル
ラインについての値の決定を許容した。第１６および１
７図は、Ｈ９かよび８１−６６−４５細胞を試験し九と
きの，ＨＩＶ−１複製の阻害のパーセント（対照力価の
パーセントとして）に対するＩＰＡの細胞毒性（対照細
胞生存性のパーセントとして）を作図することにより得
られる曲線を示す。１０日が感染性試験を行うのく必要
な長さの時間であったので、未感染細胞を使用する１０
日間連続暴露で得られ念細胞毒性データーを使用した。

表１ａ（ｄ）（履｝〜Ｉ　ａ　（ｄ）　Ｍから明らかな
ように、毒性は、医薬を細胞に１日間加え、ついで除去
するとき、あるいは細胞を１または４日間だけ暴露する
ときにより低い。インＷ＆暴露時間を模倣することは、
特にもしも代謝物が親化合物に比しより毒性であり、ま
たインげざで容易に明らかとなるがインビト口ではそう
でなか場合には、困難である。

第１６ｉ？よび１７図の解析は、次の如く計算される２
つのセルラインについての阻害値のリスト化を許容する
：Ｈ９細胞　　　８１−１１５６−４５細胞■Ｄ５ｏ″′
ｌｋ＋ＩＣ５０／ＩＤ５０５０　μＶＯ．１２４０　μＶＯ．２０＄　Ｉ　Ｃ，ｏ−　ＨＩ’／　−　ｊの複製を５０％阻
害するＩＰＡの濃度。

蒼蒼Ｉ　Ｃｇｏ−　ＨＩＶ　−　１の複Ｉｉｌを９０係
阻害すルＩＰＡの濃度。

畳憂＋ＩＤｓｏ一細胞の５０俤を殺すＩＰＡの濃度。

験８１−６６−４５細胞約５×１０７全含有する溶液約１
００ｆｆｉｊを遠心分離によりペレット化し、３５Ｍ中
に再ａ燭し、そして５Ｉ１１部分に分割した。

７つの５　ｍ１部分のうちの６つを再び遠心分離し、そ
して形成したペレットの各々を、未希釈ウイルスから出
発して１０倍方式で段階希釈し九｝｛ＩＶ　−１の５ｄ
中にａ濁した。ウィルスの段階希釈は、ボリゾレン１０
ｇ／ｌｌｌｊｅ含有する完全媒質を使用して行った。つ
いで細胞を時々振盪しつつ、６７０Ｃで１．５時間イン
キユベートした。部分を再び遠心分離し、そして形成し
たペレットの各ｋを新九な媒質、ＲＰＭＩ　１　６　４
　０およびｉ［ｌ１Ｆ’Ｂ８３５ｄ中にｌ！Ｉｌ！濁し
た。それら貯蔵希釈液をついで、試験される化合物の各
々とで使用し、１ウエル当９０．２　５　ｍｌで２４ウ
エルトレイ上κ分配した。

各ウエルに、下記の如き濃度で製造し念医薬溶液肌２５
ｗｔｌを加えた。貯蔵医薬溶液の製造においては、水溶
性化合物は、１０μＭの溶液を製造するように溶かした
。屯しも必要ならば、化合物を溶かすために、エタノー
ルジメチルスルホキサイド（　ＤＭＯ８　）を使用した
。貯蔵医薬溶液は、下記表に示す如く１０倍濃度方式で
段階的Ｋ希釈した。

医薬の２倍希釈は、ウイルス溶液０．２　５　Ｋｌを戊
κ含有している各ウエルに各溶液０．２　５　ａｌ？を
添加して生じた。

ウイルスにより感染されていない細胞ａ濁液の第７の部
分は、未感染細胞に対する医薬効果を決定するために使
用した。各ウエルが細胞懸濁液０．２５１１７？含有す
るウエルの列の各ウエルに、段階的希釈された細胞懸濁
液０．２　５　１ＲＩを加え比。

各水準にかけるＨＩＩ／　−　ｊの力価は、１０日後に
放射螢光抗体法（　ＲＩＡ　）　１−使用して決定し、
そして各医薬の存在における未感染ｍＩＩ１の生存性を
決定しｔ０上記実験の結果を下記表１ｄ（１）、Ｉｇ（１）、ｌｈ
（１）およびｉｌ（１）に示す。

表Ｉｄ（＋）　　ペンソルアデノシン濃度μＭ　　力価　阻害パーセント　生存性１　　　　
　　１０’　　　　　　０−９０表ｆｇ（１）　　フル
フリルアデノシン＜１０ｌＮｈ（１）　　Ｎ’−７ルフリルアデノシン−５／−
モノホスフエート濃度μＶ力価阻害パーセント生存性＜５０表１１（１）濃度μＭＮ６−アグマンチルアデノクン力価ｉ　ｏｏｏ　　　　　　＜１ｏ阻害パーセント９９．９−９９．９９生存性ヒ｝ＴおよびＢリンホサイト機能Ｋ対する化合物ｆｄ％
　Ｔｇおよび■１同族体、ならびに代謝物の効果を研究
するために、実験１ａ（Ｘ）Ｉｃ略述した方法に従い１
連の実験を行った。結果は、チャー｝　　１　　ｄ（１
）、　Ｉ　　ｄ（１）　、　Ｉｇ（１）　、　Ｉｇ（１
）　、　Ｉ　　１｛１）　、　■１（幻（第１８〜２３
図）に示す。

本発明を好ましい態様に関係して記載し之けれども、特
定的に記載されてｈない付加、改変、置換および削除が
添付の特許請求の範囲に限定した精神および範四から逸
脱することなしになしうるものであることは、この技術
分野におい熟練している者により認識しうるであろう。

【図面の簡単な説明】

第１図は、検定におけるＩＰＡの濃度に対する１分間当
りのカウントのグラフであり：第２図は、検定におけるＩＰＡの濃度に対する増殖能力
の増加または減少パーセントのグラフであり：第３図は、検定におけるＩＰＡの濃度に対する１分間当
りのカウントのグラフであり：第４図は、検定ＫおけるＩＰＡの濃度に対するＴおよび
Ｂリンホサイト増殖の増加または減少のパーセントのグ
ラフであＱ：第５図は、検定におけるＩＰＡの濃匿に対するＭＬＣ反
応性の増ｔＪａま九は減少のパーセントのグラフであり
：第６図は、検定におけるＩＰＡの濃度に対する１分間当
りのカウントのグラフであ９：第７図は、検定におけるＩＰＡの濃度に対する１分間当
りのカウントのグラフであり：第８図は、検定におけるＩＰＡの濃度に対するＴおよび
Ｂ　１ンホサイトの機能の増加または減少のパーセント
のグラフであり；第９図および第１０図は、検定におけるＡＺＴの濃度く
対するＴリンホサイト増殖のグラフであり；第１１図か
よび第１２図は、検定におけるｄｄｅの濃度に対するＴ
リンホサイト機能のグラフであり；第１３図は、ａ９細胞のインげトロＨＩＶ感染に対する
ＩＰＡの効果のグラフであ＃）：第１４図は、ＨＩＶ産
生に対するＩＰＡの効果のグラフであり（　ＰＨ人刺激
正常ＰＢＬで共培讐した患者のリンパ球）；第１５図は、検定におけるＩＰＡの濃度に対するウイル
ス複製の阻害のグラフであり（　Ｈｒｖ　−　１とＣ人
ｇｖの複製、毒性なし）：第１６図および第１７図は、検定におけるＩＰＡの濃度
に対する細胞毒性およびウイルス阻害のグラフテあり（
図１６ａＨＩ’／−１感染８１−（Ｓ６−４５細胞一図
１　７ＦｉＨｒｖ　−　１　ｇ染Ｈ９ｍ胞）　；第１８
図は、検定ＫおけるＮ６−アダマンチルアデノシンの濃
度に対するヒトＴおよびＢリンホサイト機能のグラフで
あり：第１９図は、検定におけるＮ６−ペンジルアデノシンの
濃度に対するヒトＴおよびＢリンホサイト機能のグラフ
であり：第２０囚は、検定におけるＮ６−フルフリルアデノシン
の濃度に対するヒトＴおよびＢリンホサイト機能のグラ
フであり；第２１図は、検定にかけるＮ６−７ルフリルアデノシン
の濃度に対するヒトＴｆ？よびＢリンホサイト攪能のグ
ラフであり：！２２図は、検定におけるＮ６−ペンジルアデノシンの
濃度に対するヒトＴおよびＢリンホサイト機能のグラフ
であり；そして、第２３図は、検定にかけるＮ６−アダマンチルアテノシ
ンの濃度に対するヒトＴおよびＢリンホサイト機能のグ
ラフである。

Claims

【特許請求の範囲】

（１）次式 ▲数式、化学式、表等があります▼ 〔式中、Ｒ＿１はＨまたはＣＨ＿３Ｓであり、そして、Ｒ＿４は ▲数式、化学式、表等があります▼ であり、そして、Ｒ＿５はＣＨ＿３またはＣｌであり、Ｒ＿６はＣＨ＿３、ＣＨ＿２ＯＨまたはＣｌであり、そ
してＲ＿７はＨまたはＢｒであり、あるいは、Ｒ＿１はＨであり、そして、Ｒ＿４は ▲数式、化学式、表等があります▼ であり、そして、Ｘ＿１およびＸ＿２は、個々にＨ、メチル、エチル、ヒ
ドロキシル、ハロゲルおよびカルボキシルから選択され
、あるいは、Ｒ＿４は ▲数式、化学式、表等があります▼ であり、あるいは、Ｒ＿４は ▲数式、化学式、表等があります▼ であり、あるいは、Ｒ＿４はＣＮＨ−Ｒ＾８であり、そして、Ｒ＿８は ▲数式、化学式、表等があります▼ であり、または、Ｒ＿８は（ＣＨ＿２）＿７ＣＨ＿３であり：そして、Ｒ
＿２はＯＨであり、そしてＲ＿３はＯＨ、モノホスフェ
ート、ジホスフェートまたはトリホスフェートであり、
あるいは、Ｒ＿２およびＲ＿３は結合して３′，５′−サイクリツ
クモノホスフェート誘導体を形成する〕を有する群から
選択される化合物からなる、ウィルス感染に対する患者
、動物またはヒトのいずれかの治療のための医薬組成物
。
（２）患者がウィルス感染を受けている、請求項１記載
の医薬組成物。
（３）患者がレトロウイルス感染を受けている、請求項
２記載の医薬組成物。
（４）患者がＨＩＶ感染を受けている、請求項３記載の
医薬組成物。
（５）該化合物がゼラチンカプセル中に含有されている
ことからなる、請求項１記載の医薬組成物。
（６）患者に対する有効量のアデノシンデアミナーゼイ
ンヒビターからなる、請求項１記載の医薬組成物。
（７）患者がヤギ関節炎脳炎ウィルスで感染されている
ヤギである、請求項１記載の医薬組成物。
（８）患者に対する有効量の免疫系ブースターからさら
になる、請求項１記載の医薬組成物。
（９）エイズウィルスで感染されている患者を治療する
ことからなる、請求項２記載の医薬組成物。
（１０）患者がヘルペスウィルスで感染されている、請
求項２記載の医薬組成物。
（１１）動物ウィルスで感染されている患者を治療する
ことからなる、請求項２記載の医薬組成物。
（１２）サイトメガロウィルスで感染されている患者を
治療することからなる、請求項２記載の医薬組成物。
（１３）次式 ▲数式、化学式、表等があります▼ 〔式中、Ｒ＿１はＨであり、Ｒ＿２はＣＨ＿３であり、Ｒ＿３はＣＨ＿３であり、そしてＲ＿４はＨである〕を有する群から選択される化合物か
らなる、ウィルス感染に対する患者、動物またはヒトの
いずれかの治療のための医薬組成物。
（１４）次式 ▲数式、化学式、表等があります▼ 〔式中、Ｒ＿１はＨまたはＣＨ＿３Ｓであり、そしてＲ＿４は ▲数式、化学式、表等があります▼ であり、そして、Ｒ＿３はＯＨまたはモノホスフェート基であり、Ｒ＿６
はＣＨ＿３、ＣＨ＿２ＯＨまたはＣｌであり、そして、
Ｒ＿７はＨまたはＢｒである〕を有する群から選択され
る化合物からなる、ウィルス感染に対する患者、動物ま
たはヒトのいずれかの治療のための医薬組成物。
（１５）０．０１ｍｇから１０００ｍｇの単位用量にお
けることからなる、請求項１４記載の医薬組成物。
（１６）静脈内に、患者体重ｋｇ当り０．０１ｍｇから
８０ｍｇまでの１日単位用量におけることからなる、請
求項１４記載の医薬組成物。
（１７）請求項１に列挙したものから選択される化合物
からなり、治療がまた、化合物の有効量を決定するよう
に、化合物を投与しながらウィルス感染の過程を監視す
るために、患者から採取した血液検体中のウィルス抗原
の量を測定することにより、ウィルス感染の程度を監視
することからなる、ウィルス感染を受けている患者、動
物またはヒトのいずれかの治療のための医薬組成物。
（１８）式：サーフイナルアデノシンを有する抗ウィル
ス化合物。
（１９）次式 ▲数式、化学式、表等があります▼ 〔式中、Ｒ＿１はＨまたはＣＨ＿３Ｓであり、そして、Ｒ＿４は ▲数式、化学式、表等があります▼ であり、そして、Ｒ＿５はＣＨ＿３またはＣｌであり、Ｒ＿６はＣＨ＿３、ＣＨ＿２ＯＨまたはＣｌであり、そ
して、Ｒ＿７はＨまたはＢｒであり、あるいは、Ｒ＿１はＨであり、そして、Ｒ＿４は ▲数式、化学式、表等があります▼ であり、そして、Ｘ＿１およびＸ＿２は、個々にＨ、メチル、エチル、ヒ
ドロキシル、ハロゲンおよびカルボキシルから選択され
、あるいは、Ｒ＿４は ▲数式、化学式、表等があります▼ であり、あるいは、Ｒ＿４は ▲数式、化学式、表等があります▼ であり、あるいは、Ｒ＿４は▲数式、化学式、表等があります▼であり、そ
してＲ＿８は ▲数式、化学式、表等があります▼ であり、または、Ｒ＿６は（ＣＨ＿２）＿７ＣＨ＿３であり：そして、Ｒ
＿２はＯＨであり、そしてＲ＿３はＯＨ、モノホスフェ
ート、ジホスフェートまたはトリホスフェートであり、
または、Ｒ＿２およびＲ＿３は結合して３′，５′−サイクリツ
クモノホスフェート誘導体を形成する〕を有する群から
選択される化合物を含有する腸溶被覆カプセルからなる
物品。
（２０）Ｎ＾６（Δ＾２イソペンテニル）アデニン；６
−Ｎ−（３−メチル−３−ヒドロキシブチルアミノ）プ
リン；アデニン；ヒポキサンチン；尿酸；および、メチル化キサンチンからなる群から選択される化合物からなる、ウィルス感
染に対する患者、動物またはヒトのいずれかの治療のた
めの医薬組成物。