JPH0245820B2 - - Google Patents
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- Publication number
- JPH0245820B2 JPH0245820B2 JP57069177A JP6917782A JPH0245820B2 JP H0245820 B2 JPH0245820 B2 JP H0245820B2 JP 57069177 A JP57069177 A JP 57069177A JP 6917782 A JP6917782 A JP 6917782A JP H0245820 B2 JPH0245820 B2 JP H0245820B2
- Authority
- JP
- Japan
- Prior art keywords
- concentration
- red blood
- chemical solution
- flow rate
- blood cell
- Prior art date
- Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
- Expired - Lifetime
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-
- G—PHYSICS
- G01—MEASURING; TESTING
- G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
- G01N33/00—Investigating or analysing materials by specific methods not covered by groups G01N1/00 - G01N31/00
- G01N33/48—Biological material, e.g. blood, urine; Haemocytometers
- G01N33/483—Physical analysis of biological material
- G01N33/487—Physical analysis of biological material of liquid biological material
- G01N33/49—Blood
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- Health & Medical Sciences (AREA)
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- Engineering & Computer Science (AREA)
- Biomedical Technology (AREA)
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- Hematology (AREA)
- Physics & Mathematics (AREA)
- Food Science & Technology (AREA)
- Molecular Biology (AREA)
- Urology & Nephrology (AREA)
- Ecology (AREA)
- Biophysics (AREA)
- Medicinal Chemistry (AREA)
- Analytical Chemistry (AREA)
- Biochemistry (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- General Physics & Mathematics (AREA)
- Immunology (AREA)
- Pathology (AREA)
- Investigating Or Analysing Biological Materials (AREA)
Description
【発明の詳細な説明】
本発明は、従来の赤血球抵抗試験方法におい
て、その操作を簡易自動化する方法に関するもの
である。
て、その操作を簡易自動化する方法に関するもの
である。
赤血球の抵抗は、血液と異なる浸透圧溶液に対
する抵抗と血液毒に対する抵抗とに分けられ、前
者の検査には低張食塩水、後者にはサポニンが用
いられている。特に前者は、血液疾患の診断、肝
胆道疾患観察等に重要な意義があることが知られ
ている。
する抵抗と血液毒に対する抵抗とに分けられ、前
者の検査には低張食塩水、後者にはサポニンが用
いられている。特に前者は、血液疾患の診断、肝
胆道疾患観察等に重要な意義があることが知られ
ている。
従来、低浸透圧に対する赤血球抵抗試験は、リ
ビエール（Ribie｀re）法、パーパート（Parpart）
法が用いられている。これらの方法は、予め濃度
の異なる食塩液または、PH7.4の緩衝液加食塩液
系列を作り、この中に血液または、赤血球懸濁液
を加え、溶血の程度を漏出ヘモグロビン濃度から
知るものである。ヘモグロビン濃度は遠沈上清を
目視判定または、光電光度計を用いて測定する。
これらの方法において測定精度を上げるために
は、多数の濃度の異なる液を作成する必要がある
ため操作が煩雑であり、多数の検体の処理にも煩
らわしいものがあつた。
ビエール（Ribie｀re）法、パーパート（Parpart）
法が用いられている。これらの方法は、予め濃度
の異なる食塩液または、PH7.4の緩衝液加食塩液
系列を作り、この中に血液または、赤血球懸濁液
を加え、溶血の程度を漏出ヘモグロビン濃度から
知るものである。ヘモグロビン濃度は遠沈上清を
目視判定または、光電光度計を用いて測定する。
これらの方法において測定精度を上げるために
は、多数の濃度の異なる液を作成する必要がある
ため操作が煩雑であり、多数の検体の処理にも煩
らわしいものがあつた。
これに対し、CPC（coil planet centrifuge）と
呼ばれる、半自動的な赤血球抵抗測定機が開発さ
れ既に実用化されている。これは濃度勾配を有す
る食塩液を充填したコイル内に血液を注入し、
CPCによつて赤血球を高濃度部から低濃度部へ
移動させ、溶血の結果漏出したヘモグロビン量を
光電光度計を用いて測定するものである。しかし
この方法は、コイル内に濃度勾配を作る操作、
CPCによる遠心操作、光電光度計による測定操
作等の段階があり、しかもコイル内の濃度勾配を
長時間維持することが難しく、濃度勾配を測定す
る方法もない等の欠点がある。
呼ばれる、半自動的な赤血球抵抗測定機が開発さ
れ既に実用化されている。これは濃度勾配を有す
る食塩液を充填したコイル内に血液を注入し、
CPCによつて赤血球を高濃度部から低濃度部へ
移動させ、溶血の結果漏出したヘモグロビン量を
光電光度計を用いて測定するものである。しかし
この方法は、コイル内に濃度勾配を作る操作、
CPCによる遠心操作、光電光度計による測定操
作等の段階があり、しかもコイル内の濃度勾配を
長時間維持することが難しく、濃度勾配を測定す
る方法もない等の欠点がある。
本発明者らは、上述の欠点に鑑みて鋭意検討し
た結果、従来溶血し、漏血したヘモグロビンと未
溶血赤血球が混在する場合、遠心操作により赤血
球を分離除去しないと測定精度が保たれなかつた
が、赤血球中のカリウムイオン濃度が血漿中では
30倍（一部の動物を除く）もの高濃度であること
に着目し、溶血指標を従来から用いられている、
ヘモグロビンでは無くカリウムイオンとすれば、
容易に赤血球の抵抗試験が実施できることを突き
とめた。
た結果、従来溶血し、漏血したヘモグロビンと未
溶血赤血球が混在する場合、遠心操作により赤血
球を分離除去しないと測定精度が保たれなかつた
が、赤血球中のカリウムイオン濃度が血漿中では
30倍（一部の動物を除く）もの高濃度であること
に着目し、溶血指標を従来から用いられている、
ヘモグロビンでは無くカリウムイオンとすれば、
容易に赤血球の抵抗試験が実施できることを突き
とめた。
したがつて本発明の目的は、薬液濃度を連続的
に変化させた液に赤血球を接触させ、その溶血の
程度を、漏出するカリウムイオンの濃度を電極に
よつて測定することにより、赤血球の抵抗試験方
法を提供することにある。
に変化させた液に赤血球を接触させ、その溶血の
程度を、漏出するカリウムイオンの濃度を電極に
よつて測定することにより、赤血球の抵抗試験方
法を提供することにある。
この目的を達成するため、本発明による赤血球
抵抗試験方法においては、薬液濃度を連続的に変
化させ、この薬液に赤血球を接触させることによ
り溶血させ漏出するカリウムイオンの濃度変化を
薬液濃度変化との関連において電極を用いて測定
することを特徴とする。
抵抗試験方法においては、薬液濃度を連続的に変
化させ、この薬液に赤血球を接触させることによ
り溶血させ漏出するカリウムイオンの濃度変化を
薬液濃度変化との関連において電極を用いて測定
することを特徴とする。
さらに、前記の赤血球抵抗試験方法において、
高濃度薬液を流量可変ポンプ、低濃度薬液を流量
可変ポンプにより、それぞれ同一のチユーブまた
は混合槽内に、合計で一定流量となるように送り
込むことにより連続的に濃度を変化させた薬液
に、血液または赤血球懸濁液を一定流量で送り込
み、漏出したカリウムイオンの濃度をカリウムイ
オン電極を用いて測定すれば好適である。
高濃度薬液を流量可変ポンプ、低濃度薬液を流量
可変ポンプにより、それぞれ同一のチユーブまた
は混合槽内に、合計で一定流量となるように送り
込むことにより連続的に濃度を変化させた薬液
に、血液または赤血球懸濁液を一定流量で送り込
み、漏出したカリウムイオンの濃度をカリウムイ
オン電極を用いて測定すれば好適である。
本発明によれば、連続的に薬液濃度を変化させ
ることにより、今まで数段階の操作を必要として
いた操作が一工程で可能となり、血液試料に触れ
る機会がなくなり、汚染されることが無いために
肝炎等の感染が防止できる。
ることにより、今まで数段階の操作を必要として
いた操作が一工程で可能となり、血液試料に触れ
る機会がなくなり、汚染されることが無いために
肝炎等の感染が防止できる。
以下本発明の実施例を図に従つて説明する。
第１図は、本発明における赤血球抵抗試験方法
の実施例の系統を具体的に示したものである。第
１図において、流量可変ポンプ１，２にはそれぞ
れ高濃度薬液１ａ、低濃度薬液（または蒸留水）
２ａが充填されている。薬液は、高濃度側流路
３、低濃度側流路４から流れ混合管５で均一に混
ぜられる。サンプル注入器１０により血液１０ａ
が微量連続注入され、反応部６において混合、溶
血反応が起こる。溶血の結果漏出したカリウムイ
オンは、電極２０，２１により測定される。電極
は、カリウム電極２１、リフアレンス電極２０か
ら成る。測定の終了した液は、廃液管７を通り、
廃液ボトル８に廃棄される。
の実施例の系統を具体的に示したものである。第
１図において、流量可変ポンプ１，２にはそれぞ
れ高濃度薬液１ａ、低濃度薬液（または蒸留水）
２ａが充填されている。薬液は、高濃度側流路
３、低濃度側流路４から流れ混合管５で均一に混
ぜられる。サンプル注入器１０により血液１０ａ
が微量連続注入され、反応部６において混合、溶
血反応が起こる。溶血の結果漏出したカリウムイ
オンは、電極２０，２１により測定される。電極
は、カリウム電極２１、リフアレンス電極２０か
ら成る。測定の終了した液は、廃液管７を通り、
廃液ボトル８に廃棄される。
電極校正時には、ポンプ３０，３１によつてカ
リウム標準液３０ａ，３１ａが電極に送られる。
リウム標準液３０ａ，３１ａが電極に送られる。
電磁弁Ａ〜Ｅは、測定、校正等の各モードの必
要に応じて開閉し、各液の流路を制御する。
要に応じて開閉し、各液の流路を制御する。
溶血反応において電極による測定の精度を保つ
ため反応部６及び、電極２０，２１等は、恒温槽
４０内に保持される。
ため反応部６及び、電極２０，２１等は、恒温槽
４０内に保持される。
次に上記構成よりなる本装置の操作手順につい
て説明する。
て説明する。
(1) 測定操作
まずポンプ１に高濃度薬液、ポンプ２に低濃
度薬液、サンプル注入器１０に血液（または赤
血球懸濁液）を充填する。次にポンプ１を一定
速度で作動させながらサンプル注入器１０によ
り血液を微量連続注入する。この状態では溶血
反応は起こらず、カリウム電極２１で測定され
るカリウム濃度は、血液の血漿部分が高濃度薬
液１ａで希釈された濃度であり、ほとんど０に
近い一定値を示す。このとき電磁弁Ａ，Ｃは開
き、Ｂ，Ｄ，Ｅは閉じた状態にある。次に、電
磁弁Ｂを開き、ポンプ２により低濃度薬液（ま
たは蒸留水）の注入を開始するが、血球と接触
させる薬液濃度を連続的に変化させるため、ポ
ンプ２の流量を順次増加させていくに従つて、
ポンプ１の流量を減らし常に合計が一定流量に
なる様にコントロールされる。薬液濃度が減少
していくにつれ浸透圧が下がり、ついには赤血
球の一部はその浸透圧に抗しきれず溶血が始ま
り赤血球ののカリウムイオンが漏出してくるの
で電極にて検知されるカリウムイオンも増加し
てくる。さらに薬液濃度が下がり、全ての赤血
球がその浸透圧に抗しきれず、完全溶血が起こ
る。この状態において漏出するカリウムイオン
濃度は最大となり、電極による測定値も最大値
を示す。以上の過程において、ポンプ１，２の
作動工程、薬液濃度、カリウムイオン濃度の対
応から赤血球抵抗を知り得る。
度薬液、サンプル注入器１０に血液（または赤
血球懸濁液）を充填する。次にポンプ１を一定
速度で作動させながらサンプル注入器１０によ
り血液を微量連続注入する。この状態では溶血
反応は起こらず、カリウム電極２１で測定され
るカリウム濃度は、血液の血漿部分が高濃度薬
液１ａで希釈された濃度であり、ほとんど０に
近い一定値を示す。このとき電磁弁Ａ，Ｃは開
き、Ｂ，Ｄ，Ｅは閉じた状態にある。次に、電
磁弁Ｂを開き、ポンプ２により低濃度薬液（ま
たは蒸留水）の注入を開始するが、血球と接触
させる薬液濃度を連続的に変化させるため、ポ
ンプ２の流量を順次増加させていくに従つて、
ポンプ１の流量を減らし常に合計が一定流量に
なる様にコントロールされる。薬液濃度が減少
していくにつれ浸透圧が下がり、ついには赤血
球の一部はその浸透圧に抗しきれず溶血が始ま
り赤血球ののカリウムイオンが漏出してくるの
で電極にて検知されるカリウムイオンも増加し
てくる。さらに薬液濃度が下がり、全ての赤血
球がその浸透圧に抗しきれず、完全溶血が起こ
る。この状態において漏出するカリウムイオン
濃度は最大となり、電極による測定値も最大値
を示す。以上の過程において、ポンプ１，２の
作動工程、薬液濃度、カリウムイオン濃度の対
応から赤血球抵抗を知り得る。
(2) 電極校正操作
電極校正操作は、１検体毎に行なう必要は無
く、装置使用開始時および数検体毎に行なう。
く、装置使用開始時および数検体毎に行なう。
まず、電磁弁Ｄを開きポンプ３０により低濃
度カリウム標準液３０ａを流し低濃度部の電極
校正を行なう。次に電磁弁Ｄを閉じ、電磁弁Ｅ
を開き、ポンプ３１により高濃度カリウム標準
液３１ａを流し高濃度部の電極校正を行なう。
なお電極校正時には、電磁弁Ａ，Ｂ，Ｃは閉じ
た状態にある。
度カリウム標準液３０ａを流し低濃度部の電極
校正を行なう。次に電磁弁Ｄを閉じ、電磁弁Ｅ
を開き、ポンプ３１により高濃度カリウム標準
液３１ａを流し高濃度部の電極校正を行なう。
なお電極校正時には、電磁弁Ａ，Ｂ，Ｃは閉じ
た状態にある。
以上の説明から明らかな様に本発明において
は、溶血した赤血球と未溶血赤血球が混在する系
においてカリウムイオン濃度を測定することによ
り溶血量が測定可能であり、遠心分離等の操作を
省くことができ自動化が可能となる。また、薬液
濃度の計算、必要があれば浸透圧計による液の浸
透圧のチエツクも可能であり精度管理ができる。
さらに測定血液との接触の機会が減り、感染の恐
れも少なくなる。
は、溶血した赤血球と未溶血赤血球が混在する系
においてカリウムイオン濃度を測定することによ
り溶血量が測定可能であり、遠心分離等の操作を
省くことができ自動化が可能となる。また、薬液
濃度の計算、必要があれば浸透圧計による液の浸
透圧のチエツクも可能であり精度管理ができる。
さらに測定血液との接触の機会が減り、感染の恐
れも少なくなる。
第１図は本発明の系統の具体的実施例を示す説
明図である。 １，２……薬液ポンプ、１０……サンプル注入
器、２１……カリウム電極、３０，３１……電極
校正用ポンプ、４０……恒温槽。
明図である。 １，２……薬液ポンプ、１０……サンプル注入
器、２１……カリウム電極、３０，３１……電極
校正用ポンプ、４０……恒温槽。
Claims (1)
- 【特許請求の範囲】 １ 薬液濃度を連続的に変化させ、この薬液に赤
血球を接触させることにより溶血させ漏出するカ
リウムイオンの濃度変化を薬液濃度変化との関連
において電極を用いて測定することを特徴とする
赤血球抵抗試験方法。 ２ 高濃度薬液を流量可変ポンプ、低濃度薬液を
流量可変ポンプにより、それぞれ同一のチユーブ
または混合槽内に、合計で一定流量となるよに送
り込むことにより連続的に濃度を変化させた薬液
に、血液または赤血球懸濁液を一定流量で送り込
み、漏出したカリウムイオンの濃度をカリウムイ
オン電極を用いて測定することを特徴とする赤血
球抵抗試験装置。
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP57069177A JPS58186040A (ja) | 1982-04-24 | 1982-04-24 | 赤血球抵抗試験方法および試験装置 |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP57069177A JPS58186040A (ja) | 1982-04-24 | 1982-04-24 | 赤血球抵抗試験方法および試験装置 |
Publications (2)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| JPS58186040A JPS58186040A (ja) | 1983-10-29 |
| JPH0245820B2 true JPH0245820B2 (ja) | 1990-10-11 |
Family
ID=13395172
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| JP57069177A Granted JPS58186040A (ja) | 1982-04-24 | 1982-04-24 | 赤血球抵抗試験方法および試験装置 |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| JP (1) | JPS58186040A (ja) |
Families Citing this family (1)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| RU2717313C1 (ru) * | 2019-10-07 | 2020-03-20 | Федеральное государственное бюджетное образовательное учреждение высшего образования "Ижевская государственная медицинская академия" Министерства здравоохранения Российской Федерации | Способ определения резистентности эритроцитов |
-
1982
- 1982-04-24 JP JP57069177A patent/JPS58186040A/ja active Granted
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
| JPS58186040A (ja) | 1983-10-29 |
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