JPH0248863B2 - - Google Patents

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JPH0248863B2
JPH0248863B2 JP55031736A JP3173680A JPH0248863B2 JP H0248863 B2 JPH0248863 B2 JP H0248863B2 JP 55031736 A JP55031736 A JP 55031736A JP 3173680 A JP3173680 A JP 3173680A JP H0248863 B2 JPH0248863 B2 JP H0248863B2
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filler
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Fuoogeru Peetaa
Peetaa Buraun Hansu
Berugaa Deiitaa
Uerunaa Uorufugangu
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    • G01N31/22—Investigating or analysing non-biological materials by the use of the chemical methods specified in the subgroup; Apparatus specially adapted for such methods using chemical indicators
    • G—PHYSICS
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    • G01N33/48—Biological material, e.g. blood, urine; Haemocytometers
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    • G01N33/52—Use of compounds or compositions for colorimetric, spectrophotometric or fluorometric investigation, e.g. use of reagent paper and including single- and multilayer analytical elements
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Description

【発明の詳細な説明】
試験片を用いる液体成分の検出は、重要になつ
ている。試験片は、多くの場合簡単で安価で迅速
な検出法を提供する。試験片は、尿診断学におい
て定性検出法及び半定量検出法として普及してい
る。特殊な試験片は、医療診断で血液成分及び血
清成分の検出のために使用することもできる。更
にその際、試験片は、飲料、飲料水、廃水及び工
業的に生じる他の液体の検査のためにも屡々使用
される。 従来、試験片上での、殊に液体の高分子成分及
び粒子成分に対する検出法の定量評価に関する困
難は、殆んど吸収性支持体として専ら紙を使用す
ることにあつた。例えば、タルクビスト
（Tallqvist）による血中のヘモグロビンの測定法
が挙げられる。定量試験に必要であるような層
厚、構造及び組成についての均質性は、紙では達
成するのが困難である。定量試験に紙を使用する
場合、屡々試験物質の正確な配量が必要である欠
点が判明している。 西ドイツ国特許第1598153号明細書による皮膜
の使用は低分子物質の定量測定に関する大きな進
歩をもたらした。この皮膜は、その性質上それぞ
れの分析法に適合しうる。これは、検査物質の正
確な配量を必要とせず、一様に尿、血漿、血清又
は血液と反応作用する。短い作用時間後、過剰の
試験物質は簡単に拭き取られる。この皮膜は、そ
の小さな孔径に基づき、検査すべき溶液の分散又
は懸濁成分、例えば血液の赤血球の溶けた低分子
成分からの分離を可能にする。 この皮膜は、性質を改善するために助剤、例え
ば拡散反射率を高めるための白堊又は二酸化チタ
ンのような顔料僅少量を含有していてもよい。 しかしながら、この皮膜は、細胞成分又は高分
子成分、例えば酵素を測定すべき場合には使用す
ることができない。この種の物質は、測定可能な
反応を起こすのに充分な程度に皮膜中に侵入しな
いか、あるいは全く侵入しない。この理由からこ
の皮膜原理では、例えばヘモグロビン、脂肪蛋白
質中のコレステリン又は酵素の検出に有用な試験
を得ることはできない。 ところで、全く意外なことに、水不溶性皮膜を
形成させる皮膜形成物質の水性分散液中に、有機
又は無機の不溶性微細粒子の形の固体を添加する
際に、吸収性の“開放”皮膜が得られることが判
明した。この固体自体は“反応”しないので、そ
の組成は厳密でなく、例えばセルロース、珪藻
土、珪酸ゲル、沈降石膏、炭酸カルシウム、カオ
リン、ポリアミド、ガラス等といつたものを使用
することができる。これらの物質（以下“填料”
と記載）対皮膜形成剤の比率は、20：１〜１：
１、有利に５：１〜２：１であることができる。
この比率は、使用される填料及び皮膜形成剤なら
びに設けられる使用目的に依る。填料の量が増加
し、かつ使用材料の比表面積が高くなるに伴ない
この皮膜は吸収性になる。 皮膜開放剤の含有量が一定の限度を越えると、
皮膜は機械的に不安定になる。少なすぎる填料を
皮膜に添加すると、皮膜は高分子成分又は細胞成
分に対して不透過性になる。例えば、ポリアミド
又は沈降石膏を填料として、かつポリプロピオン
酸ビニルの水性分散液を皮膜形成剤として使用す
る場合、填料対皮膜形成剤の比率は有利に５：１
〜２：１であるべきである。これに反して、珪藻
土を使用する場合にはこの比率は有利に２：１〜
１：１であるべきである。 適当な皮膜形成剤は、有利に有機プラステツ
ク、例えばポリビニルエステル、ポリフエニルア
セタール、ポリアクリルエステル、ポリメタクリ
ル酸、ポリアクリルアミド、ポリアミド、ポリス
チロール、ブタジエンとスチロールとの共重合体
又はマレイン酸エステルと酢酸ビニルとの共重合
体であるが、しかしまた有利に水性分散液の形の
他の皮膜形成性天然有機重合体及び合成有機重合
体ならびにその混合物を使用することもできる。 この分散液又は溶剤は、基体上に塗布して均一
層にすることができ、これは乾燥後に耐水性皮膜
を生じる。 吸水性紙に比べた特別な利点は、このような皮
膜を簡単で一様に、かつ再現可能に作ることがで
きることにある。この皮膜は、支持体としての基
体と一緒に使用することができるか又は検出反応
のために、基体から引きはがし、例えば他の支持
体上に施こすことができる。被覆皮膜用の支持体
は、有利にプラスチツク―シートである。しかし
ながら、使用目的に応じて、他のシート紙、プラ
スチツク板、ガラス、金属等も支持体として使用
することができる。 検出反応に必要な試薬は、通例直接分散液中に
添加される。有利であるなら、形成された皮膜を
分散液で含浸することもできる。また、填料を試
薬で予備含浸することも可能である。この方法
は、例えば特定の成分を分散液に加え、別の成分
を皮膜上に後含浸することを組合せることもでき
る。これによつて、成分の一定の空間的分離を達
成することができ、このことはより安定化させる
か又はより反応性の試験をもたらしうる。処方成
分を互いに分離するもう１つの可能性は、それら
を異なる被覆物質上に分配し、これらを最適順序
で次々に塗布して多層系を生じさせることであ
る。 必要な場合には、濃稠化剤、乳化剤、分散剤、
二酸化チタンのような顔料、可塑剤、湿潤剤等を
添加することができる。 分散剤、乳化剤及び濃稠化剤は、分散液の製造
及び安定化に使用される。填料と同じであつても
よい例えば二酸化チタンのような顔料は、皮膜の
できるだけ僅かな透明度及び高めた拡散反射率に
寄与する皮膜の拡散反射性を改善する。このこと
は、殊にこうして得られる診断学的試験皮膜を反
射光度測定法で評価すべき場合に有利である。皮
膜塗布物質及び皮膜の性質は、可塑剤で最適にす
ることができる。例えば、この物質の安定度、粘
度、塗布すべき基体に対する付着度等が改善され
る。試料による皮膜のより良好な濡れを得るため
に、湿潤剤を使用する。この湿潤剤は、同様に反
応を促進するか又は処方を安定化するか又は反応
色を明るくし、コントラストに富ませることもで
きる。 前記皮膜は、有利に高分子成分及び粒子成分の
検出を開発したが、これは勿論低分子化合物の検
出及び測定にも好適である。西ドイツ国特許第
1598153号明細書に記載の皮膜と比べて、この皮
膜は、被検溶液をより激しくより迅速に吸収し、
それによつて強力な反応を示すという利点を有す
る。ここに記載の皮膜は、体液特に尿、血液、血
清及び唾液の成分の検出に使用されるが、適当な
変法では他の水性液体例えば飲料水、廃水中、場
合によつては皮膜が不溶である有機溶剤中でも使
用することができる。 本発明の目的物は、液体の粒子成分、高分子成
分及び低分子成分を検出するための診断被膜であ
る。 この重要な利点は、最も好適な皮膜形成剤、填
料等を選択することによつて、必要な試薬を吸収
する皮膜を所定の使用目的に合うように調節する
ことができることにある。もう１つの重要な利点
は、皮膜が試料物質を自ら配量するので、正確な
試料の配量を省略することができることである。
過剰量は、一定の作用時間後に簡単に拭き取られ
る。 本発明による診断材を次の若干の実施例につき
説明する。 例 １ 血清中のコレステリンを検出するための試薬皮
膜を製造するために、次の組成の分散液を調製す
る； セルロース ５ｇ ポリプロピオン酸ビニル分散液（水中で50
％） ３ｇ メチルヒドロキシプロピル―セルロース
0.042ｇ 二酸化チタン粉末 ２ｇ コレステリンエステラーゼ 1200U コレステリンオキシダーゼ 800U ペルオキシダーゼ 26000U 没食子酸 0.0032ｇ アセトン0.74ml中の３，3′，５，5′―テトラ
メチルベンジジン0.2ｇとジオクチルナトリ
ウムスルホスクシネート0.17ｇとの溶液 １ml 燐酸二水素カリウム 0.049ｇ 燐酸水素二ナトリウム二水和物 0.167ｇ 蒸 留 水 19.5ml この混合物を、ポリカーボネート・シート上に
層厚300μで塗布し、引続き熱風で乾燥させる。
こうして得られる試薬層は、コレステリン含有血
清でCH濃度に応じて良好に段階のある青色を生
じた。 等分目盛を備える反射光度計（レフロマト
（Reflomat ））を、未使用試験片で目盛線０に、
かつ黒色のシートで目盛線100に調節した後、青
色に相当するコレステリン濃度に対応して次の測
定値を得た： ０mg 目盛線 0 100mg 〃 6 200mg 〃 44 300mg 〃 66 400mg 〃 76 500mg 〃 83 600mg 〃 88 黒色の対照シート 〃 100 例 ２ 尿中の赤血球を検出するための試験に関して差
当り次の混合物からなる皮膜を製造した： ポリプロピオン酸ビニル分散液 （水中で50％） 50ｇ カオリン 60ｇ ジオクチルナトリウムスルホスクシネート
２ｇ 蒸 留 水 140ml この混合物を、層厚400μでポリカーボネート
―シート上に塗布し、引続き熱風で乾燥した。こ
うして得られた皮膜を、下記に示した溶液及び
溶液で含浸し、それぞれ含浸した後に熱風で乾
燥する。 溶液 EDTA・Na2 １ｇ クエン酸三ナトリウム・2H2O 15.7ｇ クエン酸・H2O 3.48ｇ 燐酸トリモルホリド 30.5ｇ ベンゾ―ライトイエロー 0.048ｇ 蒸 留 水 190ml これに、メタノール60ml中に２，５―ジメチル
―２，５―ジヒドロペルオキシヘキサン3.2ｇを
溶かして加える。 溶液 ３，3′，５，5′―テトラメチルベンジジン
0.56ｇ ジオクチルナトリウムスルホスクシネート
1.0ｇ フエナントリジン 1.4ｇ フエニルセミカルバジド 0.06ｇ トルオール 100ml メトキシエタノール 10ml 石油エーテル 90ml こうして得られる皮膜は、赤血液含有の尿で緑
色を生じる。 例 ３ 尿中の亜硝酸塩を検出するために皮膜を次のよ
うにして得た： 下記に示した溶液ａ）中にセルロース10ｇを混
入撹拌し、濾別し、かつ熱風中で乾燥した。 溶液 ａ ３―ヒドロキシ―１，２，３，４―テトラ―
ヒドロベンゾ―〔ｈ〕―キノリン 0.392ｇ スルフアニルアミド 0.344ｇ Ｌ―酒石酸 5.00ｇ メタノールp.A. 200ml こうして含浸したセルロースで次の被覆物質を
作つた： 含浸セルロース 10.00ｇ メチルヒドロキシプロピル―セルロース
0.09ｇ ポリプロピオン酸ビニル分散液（水中で50
％） ５ｇ アセトン中のジオクチルナトリウムスルホス
クシネートの10％溶液 ３ml 蒸 留 水 35ml 層厚400μの物質をポリエステル―シート上に
塗布し、かつ熱風で乾燥させる。この水不溶性皮
膜は、亜硝酸塩含有液体、例えば尿又は工業廃水
で赤色反応を生じた。 例 ４ 血中のヘモグロビンを検出するために、次の混
合物からなる試薬皮膜を製造した： セルロース 20ｇ ポリプオン酸ビニル分散液（水中で50％）
15ｇ ジオクチルナトリウムスルホスクシネート
0.3ｇ 0.5モルPO4緩衝液、PH＝７ 75ml この混合物を、層厚200μでポリエステル―シ
ート上に塗布し、熱風で乾燥させた。 種々のヘモグロビン含有量を有する血液の稀釈
列からそれぞれ１滴を１分間試験片上で反応さ
せ、この液滴を脱脂綿で拭き取つた後、段階のあ
る色を得る。 試験テープに生じた色相を反射光度計（Zeiβ社
のPMQ3）につき540nmで測定し、ヘモグロビン
濃度に応じた次の測定値を得る： HB ｇ／ｌ Ｒ％ 53 46.1 100 38.8 150 31.7 201 25.5 例 ５ この方法の限界を確認するために、例４と類似
の混合物中で填料及び皮膜形成剤を変え、次の性
質を有する皮膜を得た：
【表】 応

Claims (1)

  1. 【特許請求の範囲】 １ 皮膜形成有機プラスチツクの水性分散液から
    得られかつ検出に必要な試薬及び無機又は有機の
    不溶性粒子の形の填料が混合されている耐水性皮
    膜を有する、水性液体、殊に血液、血清又は尿の
    内容物を反射光度計により検出するための試薬皮
    膜において、内容物に対して皮膜を開放させるた
    めに填料量対プラスチツク量の重量比が１：１〜
    20：１の範囲内にあることを特徴とする、水性液
    体の内容物を反射光度計により検出するための試
    薬皮膜。 ２ 填料量対プラスチツク量の重量比が２：１〜
    ５：１である、特許請求の範囲第１項記載の試薬
    皮膜。 ３ 耐水性皮膜が支持体上に固定されている、特
    許請求の範囲第１項記載の試薬皮膜。
JP3173680A 1979-03-15 1980-03-14 Diagnosing material for detecting liquid constituent and method of producing said material Granted JPS55125453A (en)

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