JPH0279969A - 細胞障害性ｔ細胞誘導及び活性化の方法 - Google Patents
細胞障害性ｔ細胞誘導及び活性化の方法Info
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- JPH0279969A JPH0279969A JP63232529A JP23252988A JPH0279969A JP H0279969 A JPH0279969 A JP H0279969A JP 63232529 A JP63232529 A JP 63232529A JP 23252988 A JP23252988 A JP 23252988A JP H0279969 A JPH0279969 A JP H0279969A
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Abstract
(57)【要約】本公報は電子出願前の出願データであるた
め要約のデータは記録されません。
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Description
【発明の詳細な説明】
〔産業上の利用分野〕
本発明は、ヒト自己癌細胞特異的細胞障害性Ｔ細胞（以
下ＣＴＬと略称することもある）の誘導方法において、
無血清培地を用いることを特徴とする細胞障害性Ｔ細胞
の誘導及び活性化の方法に関する。ＣＴＬは、 ＣＴＬ
療法として生体内に投与することによシ、癌およびＨＴ
ＬＶ−１１１等ウィルス性疾患等の治療への利用に有用
である。
下ＣＴＬと略称することもある）の誘導方法において、
無血清培地を用いることを特徴とする細胞障害性Ｔ細胞
の誘導及び活性化の方法に関する。ＣＴＬは、 ＣＴＬ
療法として生体内に投与することによシ、癌およびＨＴ
ＬＶ−１１１等ウィルス性疾患等の治療への利用に有用
である。
細胞障害性Ｔ細胞は、癌細胞もしくはウィルス感作細胞
をその抗原リセプターによシ特異的に認識し、障害する
ことは周知の事実であシ、本ＣＴＬの生体内での癌もし
くはウィルスに対する生体防御機構における重要性は明
白である。
をその抗原リセプターによシ特異的に認識し、障害する
ことは周知の事実であシ、本ＣＴＬの生体内での癌もし
くはウィルスに対する生体防御機構における重要性は明
白である。
ところで近年、正常人もしくは癌患者よシ得た末梢血リ
ンパ球をｉｎ ｖｉｔｒｏにてインターロイキメ２（以
下ＩＬ−２と略する。）と培養することにより、癌細胞
に対し障害性を示す細胞群を誘導できることが明らかと
なシ、これらの細胞を生体内に戻すことによシ癌治療を
行なおうとするいわゆるＬＡＫ療法が試みられている。
ンパ球をｉｎ ｖｉｔｒｏにてインターロイキメ２（以
下ＩＬ−２と略する。）と培養することにより、癌細胞
に対し障害性を示す細胞群を誘導できることが明らかと
なシ、これらの細胞を生体内に戻すことによシ癌治療を
行なおうとするいわゆるＬＡＫ療法が試みられている。
しかしながら本療法で誘導されるＬＡＫ細胞は、個々の
癌細胞に対し特異性を持たず、また生体内に投与した場
合、担癌組織への効率の良い集積は認められない。それ
ゆえ治療効果の発現にはＬＡＫ細胞の大量投与及び、そ
れに併なうＩＬ−２の同時投与を必要とし、これら操作
に起因する重篤な副作用もしばしば認められ、満足な治
療法として確立するに主１４っていない。
癌細胞に対し特異性を持たず、また生体内に投与した場
合、担癌組織への効率の良い集積は認められない。それ
ゆえ治療効果の発現にはＬＡＫ細胞の大量投与及び、そ
れに併なうＩＬ−２の同時投与を必要とし、これら操作
に起因する重篤な副作用もしばしば認められ、満足な治
療法として確立するに主１４っていない。
本発明者らは、すてにＬＡＫ療法に代わるべきより治療
効果の著しい新らしい免疫療法であるＣＴＬ療法を確立
した。（藤本ら； １９８７年日本癌学会総会記事Ｐ
３１１ ＃藤本ら；１９８７年日本免疫学会総会・学術
集会記録、第１７巻、Ｐ５３９）ＣＴＬ療法とは、生体
内のサブレッサーナ細胞を抗癌剤で非活性化した後、患
者よシ末梢血すンパ球を採取し、マイトマシンＣなどに
より分裂・増殖能を抑えた自己癌細胞とともに、３〜４
日間培養後Ｉ Ｌ−２を添加し、更に３〜４日間培養し
増殖・活性化させたｅＴＬを生体内投与することによシ
癌を治療しようとする方法である。本方法にょシ活性化
されたＣＴＬは個々の癌細胞を特異的に認識し障害性を
発揮する。それゆえ生体内に投与した場合担癌組織に効
率よく集積することが明らかとなっている。また治療効
果の発現においても、ＬＡＫ細胞に比し少量のＣＴＬ細
胞の投与で十分であシ、ＬＡＫ療法でしばしば行なわれ
るＩＬ−２の同時大量投与の必要もない。従って、 Ｌ
ＡＫ療法で見られるような重篤な副作用は本療法におい
ては認められない。更には、本療法が末期癌患者の転移
巣の退縮に対しても効果のあることも明らかにした。
効果の著しい新らしい免疫療法であるＣＴＬ療法を確立
した。（藤本ら； １９８７年日本癌学会総会記事Ｐ
３１１ ＃藤本ら；１９８７年日本免疫学会総会・学術
集会記録、第１７巻、Ｐ５３９）ＣＴＬ療法とは、生体
内のサブレッサーナ細胞を抗癌剤で非活性化した後、患
者よシ末梢血すンパ球を採取し、マイトマシンＣなどに
より分裂・増殖能を抑えた自己癌細胞とともに、３〜４
日間培養後Ｉ Ｌ−２を添加し、更に３〜４日間培養し
増殖・活性化させたｅＴＬを生体内投与することによシ
癌を治療しようとする方法である。本方法にょシ活性化
されたＣＴＬは個々の癌細胞を特異的に認識し障害性を
発揮する。それゆえ生体内に投与した場合担癌組織に効
率よく集積することが明らかとなっている。また治療効
果の発現においても、ＬＡＫ細胞に比し少量のＣＴＬ細
胞の投与で十分であシ、ＬＡＫ療法でしばしば行なわれ
るＩＬ−２の同時大量投与の必要もない。従って、 Ｌ
ＡＫ療法で見られるような重篤な副作用は本療法におい
ては認められない。更には、本療法が末期癌患者の転移
巣の退縮に対しても効果のあることも明らかにした。
（藤本ら； １９８８年第６回ヒト細胞研究会大会抄録
集、Ｐ１２４） 従来、ヒト癌患者より、ヒト自己癌細胞特異的細胞障害
性Ｔ細胞を誘導及び活性化する場合、ダルベツコ改変■
ｙ（以下ＤＭＥＭと略す。）に、５％ヒ）Ａｎ血清もし
くは、５％贋帯血血清を添加する必要があった。しかし
ながら血清によシ、比較的効率よ＜ ＣＴＬを誘導可能
なものや、逆に抑制的に働きＣＴＬ誘導が不可能なもの
等、血清間でのロフト差が大きく、またこの品質の違い
が何に起因するのかも不明である。また仮にＣＴＬ誘導
に効率的な血清が得られたとしても、同一ロットの血清
の供給量は、極めて制限があシ、再現性よく効率的なＣ
ＴＬの誘導及び活性化が困難であった。またヒト由来血
清を使用する限シ、ウィルス等病原性物質混入の危険性
を否定しえず、本方法によシ誘導・活性化したＣＴＬを
ＣＴＬ療法に用いようとした場合問題が山積している。
集、Ｐ１２４） 従来、ヒト癌患者より、ヒト自己癌細胞特異的細胞障害
性Ｔ細胞を誘導及び活性化する場合、ダルベツコ改変■
ｙ（以下ＤＭＥＭと略す。）に、５％ヒ）Ａｎ血清もし
くは、５％贋帯血血清を添加する必要があった。しかし
ながら血清によシ、比較的効率よ＜ ＣＴＬを誘導可能
なものや、逆に抑制的に働きＣＴＬ誘導が不可能なもの
等、血清間でのロフト差が大きく、またこの品質の違い
が何に起因するのかも不明である。また仮にＣＴＬ誘導
に効率的な血清が得られたとしても、同一ロットの血清
の供給量は、極めて制限があシ、再現性よく効率的なＣ
ＴＬの誘導及び活性化が困難であった。またヒト由来血
清を使用する限シ、ウィルス等病原性物質混入の危険性
を否定しえず、本方法によシ誘導・活性化したＣＴＬを
ＣＴＬ療法に用いようとした場合問題が山積している。
本発明の目的はＣＴＬ療法を行なうにあたって安定した
かつ高活性のＣＴＬ誘導が可能で、しかもウィルス等病
原性物質の懸念のないＣＴＬ 縛導方法の提供である。
かつ高活性のＣＴＬ誘導が可能で、しかもウィルス等病
原性物質の懸念のないＣＴＬ 縛導方法の提供である。
本発明者は以上のような課題を踏まえ、鋭意検討した結
果、 ＣＴＬ誘導用に用いる培地としては、実質的に血
清を含まない、ＲＰＭＩ １６４０培地、ハムＦ−１２
培地、 ＤＭＥＭ培地などの培地を単独または、混合し
た培地又は、これらの改変培地等を基礎培地とし、イン
シュリン・トランスフェリン・ステロイドホルモンなど
の各種増殖因子や、エタノ−の誘導及び活性化に適して
いることを見い出し本発明を完成するに至った。本発明
に用いる無血清培地は、上述した成分以外に、糖・アミ
ノ酸・ビタミン・重金属・声緩衝剤等を基本的に含む、
またインシュリンはヒト及びウシ、ブタよシ結晶化され
たものを用いること、そしてトランスフェリン及びアル
ブミンはヒト由来のものを用いることが望ましいが、ヒ
トリコンビナントインシュリン・ヒトリコンビナントト
ランスフェリン曝ヒトリコンビナントアルブミンを用い
れば更に好ましい。
果、 ＣＴＬ誘導用に用いる培地としては、実質的に血
清を含まない、ＲＰＭＩ １６４０培地、ハムＦ−１２
培地、 ＤＭＥＭ培地などの培地を単独または、混合し
た培地又は、これらの改変培地等を基礎培地とし、イン
シュリン・トランスフェリン・ステロイドホルモンなど
の各種増殖因子や、エタノ−の誘導及び活性化に適して
いることを見い出し本発明を完成するに至った。本発明
に用いる無血清培地は、上述した成分以外に、糖・アミ
ノ酸・ビタミン・重金属・声緩衝剤等を基本的に含む、
またインシュリンはヒト及びウシ、ブタよシ結晶化され
たものを用いること、そしてトランスフェリン及びアル
ブミンはヒト由来のものを用いることが望ましいが、ヒ
トリコンビナントインシュリン・ヒトリコンビナントト
ランスフェリン曝ヒトリコンビナントアルブミンを用い
れば更に好ましい。
しかしながら本発明に用いる無血清培地成分は上述のも
のに限定するものではない。本発明における無血清培地
とは、具体的には、味の素株式会社製のＡＳＦ −１０
４やＨＢ１０４ 、ＫＣ２０，００゜ＳＦＭ −１０１
、ＣＯ８ＭＥＤＩＵＭ −００１などが吾げられる。
のに限定するものではない。本発明における無血清培地
とは、具体的には、味の素株式会社製のＡＳＦ −１０
４やＨＢ１０４ 、ＫＣ２０，００゜ＳＦＭ −１０１
、ＣＯ８ＭＥＤＩＵＭ −００１などが吾げられる。
本発明による無血清培地を用いヒト癌細胞特異的ＣＴＬ
の誘導及び活性化方法は、通常の浮遊細胞培養用の容器
または装置を用いればよい。
の誘導及び活性化方法は、通常の浮遊細胞培養用の容器
または装置を用いればよい。
患者末梢血よシ分離したリンパ球と、マイトマイシンＣ
等で前処理し、分裂・増殖能を抑えた自己癌細胞とを、
それぞれ３〜５ Ｘ １０’個／ｄ、１〜５ Ｘ １０
’個１ａｔの細胞密度にて、上記無血清培地中に加え、
３７℃、５％ＣＯ２下２〜４日間培養する。更にその後
培地中にヒトリコンビナントＩＬ−２を、２５〜７５
ｎｌ／ｍｌとなるように加え更に２〜４日間培養するこ
とによって効率的な自己癌細胞特異的なＣＴＬの誘導及
び活性化が可能である。上記培養に、自己癌細胞の代わ
りに少なくもＨＬＡ型の一部が一致した同種癌細胞をイ
Ｖわシに加えてもよい。また培養開始時に免疫賦活剤、
具体的には０Ｋ４３２．ノルカデイア、ペスタチン等を
適量加えてもよい。
等で前処理し、分裂・増殖能を抑えた自己癌細胞とを、
それぞれ３〜５ Ｘ １０’個／ｄ、１〜５ Ｘ １０
’個１ａｔの細胞密度にて、上記無血清培地中に加え、
３７℃、５％ＣＯ２下２〜４日間培養する。更にその後
培地中にヒトリコンビナントＩＬ−２を、２５〜７５
ｎｌ／ｍｌとなるように加え更に２〜４日間培養するこ
とによって効率的な自己癌細胞特異的なＣＴＬの誘導及
び活性化が可能である。上記培養に、自己癌細胞の代わ
りに少なくもＨＬＡ型の一部が一致した同種癌細胞をイ
Ｖわシに加えてもよい。また培養開始時に免疫賦活剤、
具体的には０Ｋ４３２．ノルカデイア、ペスタチン等を
適量加えてもよい。
自己癌細胞に対するＣＴＬが誘導されたか否かを検定す
る方法としては、常法のクロミウム放出法を用いればよ
い。すなわち、クロミウム５１にて標識した自己癌細胞
ｌＸｌ０個に対し、２０倍。
る方法としては、常法のクロミウム放出法を用いればよ
い。すなわち、クロミウム５１にて標識した自己癌細胞
ｌＸｌ０個に対し、２０倍。
４０倍もしくは８０倍量のＣＴＬを加え、３７℃、７チ
ＣＯ２下、１６時間混合培養した後の上滑中に放出され
るクロミウム５１量をガンマカウンターにて測定するこ
とにより検定することができる。
ＣＯ２下、１６時間混合培養した後の上滑中に放出され
るクロミウム５１量をガンマカウンターにて測定するこ
とにより検定することができる。
本発明のＣＴＬ誘導及び活性化の方法を用いて、癌患者
末梢血リンパ球よシ、自己癌細胞特異的なＣＴＬを誘導
すると、従来の血清培地を用いる方法によりＣＴＬを誘
導した場合に比し、約１０倍もの強い活性を持つＣＴＬ
を再現性よく得ることができる。また、無血清培地を用
いるため、血清によるロフト差、供給量の制限、及びウ
ィルス等病原性物質混入の危険性等に関わる問題点から
解放される。
末梢血リンパ球よシ、自己癌細胞特異的なＣＴＬを誘導
すると、従来の血清培地を用いる方法によりＣＴＬを誘
導した場合に比し、約１０倍もの強い活性を持つＣＴＬ
を再現性よく得ることができる。また、無血清培地を用
いるため、血清によるロフト差、供給量の制限、及びウ
ィルス等病原性物質混入の危険性等に関わる問題点から
解放される。
以下、本発明を実施例に基ずいて説明する。
〈実施例１〉
表２に示す１％ヒト血清アルブミンを添加したＡＳＦ
−１０４培地もしくは、１チヒト血清アルノミンまたは
５％ヒト血清を加えたＤＭＥＭ培地に、肩上皮細胞肉腫
患者の末梢血よシ得たリンパ球単独もしくは、１００μ
ｇ／ｍｌのマイトマイシンＣで１時間処理し、分裂・増
殖能を抑えた自己の肩上皮細胞肉腫と共に、それぞれ３
Ｘ １０６個／ｍｌ及び３ Ｘ １０４個１ｍｌの細
胞密度となるように、３Ｑｍｌの培地に、加え、ヌンク
社製底面積７５ｃｒ＋＋のＴ型フラスコにて３日間培養
後、ヒトリコンビナントＩＬ−２を５７．１ ｎｉｌ／
ｍｌの濃度となるように添加し、更に３日間培養するこ
とにより、自己肩上皮細胞肉ａ特異的なＣＴＬを誘導し
た。
−１０４培地もしくは、１チヒト血清アルノミンまたは
５％ヒト血清を加えたＤＭＥＭ培地に、肩上皮細胞肉腫
患者の末梢血よシ得たリンパ球単独もしくは、１００μ
ｇ／ｍｌのマイトマイシンＣで１時間処理し、分裂・増
殖能を抑えた自己の肩上皮細胞肉腫と共に、それぞれ３
Ｘ １０６個／ｍｌ及び３ Ｘ １０４個１ｍｌの細
胞密度となるように、３Ｑｍｌの培地に、加え、ヌンク
社製底面積７５ｃｒ＋＋のＴ型フラスコにて３日間培養
後、ヒトリコンビナントＩＬ−２を５７．１ ｎｉｌ／
ｍｌの濃度となるように添加し、更に３日間培養するこ
とにより、自己肩上皮細胞肉ａ特異的なＣＴＬを誘導し
た。
誘導後の自己癌細胞に対する細胞障害活性を、常法どお
シのクロミウム５１放出法によシ検定した。すなわち、
クロミウム５１により標識したＩ Ｘ １０３個の自己
類上皮細胞肉腫細胞に対し、４ Ｘ １０’個もしくは
８ Ｘ １０’個のＣＴＬを加え３７℃、７％ｃｏｚ下
、１６時間混合培養した後の培地中に放出されるクロミ
ウム５１量をガンマカウンターにて測定した。キラー活
性は、ｌＸｌ０例のクロミウム標識した肩上皮細胞肉腫
細胞を、２．５チサポニン溶液で完全に溶解させた際培
地中に放出されるクロミウム５１量を（Ａ）、ｌＸｌ０
個の上記癌細胞単独で、１６時間培養した際に培地中に
放出されるクロミウム５１量を〔Ｂ〕、上記方法にて誘
導したＣＴＬと混合培養した際に培地中に放出されるク
ロミウム５１量をＸとした場合、次の式により計算した
値を示した。キラー活性（％）＝１００Ｘ（Ｘ−ＣＢ）
）／（（：Ａ、１−ＣＢ））−結果を表１に示す。
シのクロミウム５１放出法によシ検定した。すなわち、
クロミウム５１により標識したＩ Ｘ １０３個の自己
類上皮細胞肉腫細胞に対し、４ Ｘ １０’個もしくは
８ Ｘ １０’個のＣＴＬを加え３７℃、７％ｃｏｚ下
、１６時間混合培養した後の培地中に放出されるクロミ
ウム５１量をガンマカウンターにて測定した。キラー活
性は、ｌＸｌ０例のクロミウム標識した肩上皮細胞肉腫
細胞を、２．５チサポニン溶液で完全に溶解させた際培
地中に放出されるクロミウム５１量を（Ａ）、ｌＸｌ０
個の上記癌細胞単独で、１６時間培養した際に培地中に
放出されるクロミウム５１量を〔Ｂ〕、上記方法にて誘
導したＣＴＬと混合培養した際に培地中に放出されるク
ロミウム５１量をＸとした場合、次の式により計算した
値を示した。キラー活性（％）＝１００Ｘ（Ｘ−ＣＢ）
）／（（：Ａ、１−ＣＢ））−結果を表１に示す。
〈実施例２〉
表２に示す１％ヒト血清アルブミンを添加したＡＳＦ
−１０４培地もしくは、１％ヒト血血清アップ０Ｋ４３
２存在下もしくは非存在下にて、骨肉腫患者の末梢血よ
シ得たリンパ球単独もしくは、１００μｇ／ｍｌのマイ
トマイシンＣで１時間前処理し、分裂・増殖能を抑えた
自己の骨肉腫と共に、それぞれ３ Ｘ １０６個／ ｍ
ｌ及び３ Ｘ １０’個／ ｍｌ （Ｄ細胞密度となる
ように３０ｍＡ’の培地に加え、ヌンク社製底面積７５
備２のＴ型フラスコにて、３日間培養後、ヒトリコンビ
ナントＩＬ−２を１，５Ｔ、 Ｉ ｎｐ／ｍｌの濃度と
なるように添加し、更に３日間培養することによシ、自
己骨肉腫特異的なＣＴＬを誘導した。
−１０４培地もしくは、１％ヒト血血清アップ０Ｋ４３
２存在下もしくは非存在下にて、骨肉腫患者の末梢血よ
シ得たリンパ球単独もしくは、１００μｇ／ｍｌのマイ
トマイシンＣで１時間前処理し、分裂・増殖能を抑えた
自己の骨肉腫と共に、それぞれ３ Ｘ １０６個／ ｍ
ｌ及び３ Ｘ １０’個／ ｍｌ （Ｄ細胞密度となる
ように３０ｍＡ’の培地に加え、ヌンク社製底面積７５
備２のＴ型フラスコにて、３日間培養後、ヒトリコンビ
ナントＩＬ−２を１，５Ｔ、 Ｉ ｎｐ／ｍｌの濃度と
なるように添加し、更に３日間培養することによシ、自
己骨肉腫特異的なＣＴＬを誘導した。
誘導後の自己骨肉腫細胞に対する細胞障害活性を、実施
例１と同様に常法どおシの１６時間のクロミウム５１放
出法によシ検定した結果を表３に示す。
例１と同様に常法どおシの１６時間のクロミウム５１放
出法によシ検定した結果を表３に示す。
Claims (2)
- （１）ヒト自己癌細胞特異的細胞障害性Ｔ細胞の誘導方
法において、無血清培地を用いることを特徴とする細胞
障害性Ｔ細胞の誘導及び活性化の方法。 - （２）無血清培地に免疫賦活剤が更に添加されているこ
とを特徴とする請求項１記載の方法。
Priority Applications (2)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP63232529A JPH0279969A (ja) | 1988-09-19 | 1988-09-19 | 細胞障害性ｔ細胞誘導及び活性化の方法 |
| EP89117271A EP0360205A3 (en) | 1988-09-19 | 1989-09-19 | Method for the induction and activation of cytotoxic t cells |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP63232529A JPH0279969A (ja) | 1988-09-19 | 1988-09-19 | 細胞障害性ｔ細胞誘導及び活性化の方法 |
Publications (1)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| JPH0279969A true JPH0279969A (ja) | 1990-03-20 |
Family
ID=16940766
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| JP63232529A Pending JPH0279969A (ja) | 1988-09-19 | 1988-09-19 | 細胞障害性ｔ細胞誘導及び活性化の方法 |
Country Status (2)
| Country | Link |
|---|---|
| EP (1) | EP0360205A3 (ja) |
| JP (1) | JPH0279969A (ja) |
Cited By (1)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| JPH05252942A (ja) * | 1991-05-14 | 1993-10-05 | Boehringer Mannheim Gmbh | 動物起源のタンパク質材料なしで哺乳類細胞を培養するための血清不含の培地および哺乳類細胞を培養する方法 |
Families Citing this family (8)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| US6534055B1 (en) | 1988-11-23 | 2003-03-18 | Genetics Institute, Inc. | Methods for selectively stimulating proliferation of T cells |
| US6905680B2 (en) | 1988-11-23 | 2005-06-14 | Genetics Institute, Inc. | Methods of treating HIV infected subjects |
| US7479269B2 (en) | 1988-11-23 | 2009-01-20 | Genetics Institute, Llc | Methods for selectively enriching TH1 and TH2 cells |
| ZA91463B (en) * | 1990-01-25 | 1992-09-30 | Bristol Myers Squibb Co | Method of activating cytolytic activity of lymphocytes using anti-cd28 antibody |
| US5122469A (en) * | 1990-10-03 | 1992-06-16 | Genentech, Inc. | Method for culturing Chinese hamster ovary cells to improve production of recombinant proteins |
| US7175843B2 (en) | 1994-06-03 | 2007-02-13 | Genetics Institute, Llc | Methods for selectively stimulating proliferation of T cells |
| CA2243235C (en) | 1996-01-17 | 2010-08-10 | Imperial College Innovations Limited | Immunotherapy using cytotoxic t lymphocytes (ctl) |
| EP1293205A1 (en) * | 2001-09-18 | 2003-03-19 | G2M Cancer Drugs AG | Valproic acid and derivatives thereof for the combination therapy of human cancers, for the treatment of tumour metastasis and minimal residual disease |
Family Cites Families (2)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| GB2106935B (en) * | 1981-10-01 | 1985-01-30 | Otsuka Pharma Co Ltd | Cancer cell-combatting lymphocytes process for the production thereof and anticancer agents containing said lymphocytes |
| DE3483252D1 (de) * | 1983-12-05 | 1990-10-25 | Asahi Chemical Ind | Verfahren zur induktion von antitumorimmunozyten, verfahren zur herstellung von antitumorimmunozyten und durch das verfahren hergestellte antitumorimmunozyten. |
-
1988
- 1988-09-19 JP JP63232529A patent/JPH0279969A/ja active Pending
-
1989
- 1989-09-19 EP EP89117271A patent/EP0360205A3/en not_active Withdrawn
Cited By (1)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| JPH05252942A (ja) * | 1991-05-14 | 1993-10-05 | Boehringer Mannheim Gmbh | 動物起源のタンパク質材料なしで哺乳類細胞を培養するための血清不含の培地および哺乳類細胞を培養する方法 |
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
| EP0360205A2 (en) | 1990-03-28 |
| EP0360205A3 (en) | 1990-06-06 |
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