JPH0283351A - 新規α‐グルコシダーゼ阻害物質ベナノマイシンＣ及びその製造法 - Google Patents
新規α‐グルコシダーゼ阻害物質ベナノマイシンＣ及びその製造法Info
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- JPH0283351A JPH0283351A JP63232185A JP23218588A JPH0283351A JP H0283351 A JPH0283351 A JP H0283351A JP 63232185 A JP63232185 A JP 63232185A JP 23218588 A JP23218588 A JP 23218588A JP H0283351 A JPH0283351 A JP H0283351A
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- Y02P—CLIMATE CHANGE MITIGATION TECHNOLOGIES IN THE PRODUCTION OR PROCESSING OF GOODS
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- Y02P20/50—Improvements relating to the production of bulk chemicals
- Y02P20/52—Improvements relating to the production of bulk chemicals using catalysts, e.g. selective catalysts
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- Preparation Of Compounds By Using Micro-Organisms (AREA)
- Organic Low-Molecular-Weight Compounds And Preparation Thereof (AREA)
- Agricultural Chemicals And Associated Chemicals (AREA)
Abstract
(57)【要約】本公報は電子出願前の出願データであるた
め要約のデータは記録されません。
め要約のデータは記録されません。
Description
【発明の詳細な説明】
（産業上の利用分野）
本発明は、新規なα−グルコシダーゼ阻害物質であるベ
ナノマイシンＣ（Ｂｅｎａｎｏｍｉｃｉｎ Ｃ）、なら
びにその製造法に関する。
ナノマイシンＣ（Ｂｅｎａｎｏｍｉｃｉｎ Ｃ）、なら
びにその製造法に関する。
（従来の技術）
本発明によるα−グルコシダーゼ阻害物質ベナノマイシ
ンＣと構造上の特徴が類似する化合物として、ベナノマ
イシンＡおよびＢ（特願昭６２−２７７．６９２号）、
デキシロシルベナノマイシンＢ（特願昭６２−３２７．
１６３）、５Ｆ−２４４６［Ｔａｋｅｄａ ら：ｒＪ、
ＡｎｔｉｂｉｏｔｉｃｓＪ ４１． ４１７−４
２４． １９８８コ、 ＫＳ−６１９−１［１４ａｔｓ
ｕｄａら： ｒＪ、 ＡｎｔｉｂｉｏｔｉｃｓＪ ４０
．１１０４−１１１４（１９８７）］、Ｇ−２Ｎおよび
Ｇ−２Ａ ［Ｇｅｒｂｅｒ ら：ｒＣａｎａｄ、Ｊ。
ンＣと構造上の特徴が類似する化合物として、ベナノマ
イシンＡおよびＢ（特願昭６２−２７７．６９２号）、
デキシロシルベナノマイシンＢ（特願昭６２−３２７．
１６３）、５Ｆ−２４４６［Ｔａｋｅｄａ ら：ｒＪ、
ＡｎｔｉｂｉｏｔｉｃｓＪ ４１． ４１７−４
２４． １９８８コ、 ＫＳ−６１９−１［１４ａｔｓ
ｕｄａら： ｒＪ、 ＡｎｔｉｂｉｏｔｉｃｓＪ ４０
．１１０４−１１１４（１９８７）］、Ｇ−２Ｎおよび
Ｇ−２Ａ ［Ｇｅｒｂｅｒ ら：ｒＣａｎａｄ、Ｊ。
Ｃｈｅｍ、Ｊ ６２．２８１８−２８２１（１９８４）
コなどが知られている。しかしベナノマイシンＣはこれ
らの物質とは理化学的および生物学的性状が異なり、明
確に区別される。本発明者らによって発見されたベナノ
マイシンＡおよびＢ、およびデキシロシルベナノマイシ
ンＢは有効な抗かび活性を示すが、本発明のベナノマイ
シンＣは弱い抗かび活性しか示さない。
コなどが知られている。しかしベナノマイシンＣはこれ
らの物質とは理化学的および生物学的性状が異なり、明
確に区別される。本発明者らによって発見されたベナノ
マイシンＡおよびＢ、およびデキシロシルベナノマイシ
ンＢは有効な抗かび活性を示すが、本発明のベナノマイ
シンＣは弱い抗かび活性しか示さない。
（発明が解決しようとする課題）
従来、微生物が生産する種々の酵素阻害物質が知られて
いるが、抗肥満剤として有用な α−グルコシダーゼ阻
害物質はそれ程多く見出されていないため、この医療分
野においては新規なα−グルコシダーゼ阻害物質の出現
が常に要望されている。
いるが、抗肥満剤として有用な α−グルコシダーゼ阻
害物質はそれ程多く見出されていないため、この医療分
野においては新規なα−グルコシダーゼ阻害物質の出現
が常に要望されている。
本発明の目的は、新規なα−グルコシダーゼ阻害物質で
あるベナノマイシンＣならびにその製造法を提供するこ
とにある。
あるベナノマイシンＣならびにその製造法を提供するこ
とにある。
（課題を解決するための手段）
第１の本発明の要旨とするところは、前記の式（１）で
表わされる新規α−グルコシダーゼ阻害物質ベナノマイ
シンＣおよびその塩にある。
表わされる新規α−グルコシダーゼ阻害物質ベナノマイ
シンＣおよびその塩にある。
１、 ベナノマイシンＣの理化学的性状を列記すると、
次の通りである。
次の通りである。
（１）色および形状： 赤褐色粉末
（２）分 子 式： Ｃ２，Ｈ２，Ｎｏ工２（３）マス
スペクトル（ＦＤ−ＭＳ）： ｍ／ｚ ５７９（Ｍ”）
（４）融 点： ＞２２０℃ （５）比旋光度：［αコ♂２＝測定不可能（ｃ Ｏ，０
５，ＤＭＳＯ）（６）紫外部及び可視部吸収スペクトル
λ。ａｘ ｎｊＥｅ入） ［ＭｅＯ）ＩＩ： ２０５（６２５）、 ２３０（ｓｈ
、 ４９０）、 ２８４（３８０）。
スペクトル（ＦＤ−ＭＳ）： ｍ／ｚ ５７９（Ｍ”）
（４）融 点： ＞２２０℃ （５）比旋光度：［αコ♂２＝測定不可能（ｃ Ｏ，０
５，ＤＭＳＯ）（６）紫外部及び可視部吸収スペクトル
λ。ａｘ ｎｊＥｅ入） ［ＭｅＯ）ＩＩ： ２０５（６２５）、 ２３０（ｓｈ
、 ４９０）、 ２８４（３８０）。
３００（ｓｈ、 ３００）、 ４８０（１５０）［０，
ＩＮ ＨＣＩ−ＭｅＯＨ］： ２０８（５３６）、 ２
３５（４８７）、 ２８７（３９１）。
ＩＮ ＨＣＩ−ＭｅＯＨ］： ２０８（５３６）、 ２
３５（４８７）、 ２８７（３９１）。
３００（ｓｈ、 ３５０）、 ４７６（１６２）［０，
ＩＮ ＮａＯＨ−ＭｅＯｌ（］： ２１４（１２５２）
、 ２４５（ｓｈ、 ５００）。
ＩＮ ＮａＯＨ−ＭｅＯｌ（］： ２１４（１２５２）
、 ２４５（ｓｈ、 ５００）。
２９０（ｓｈ、２６５）、 ３２０（ｓｈ、 ２１８）
、 ５０３（１８２）（７）赤外部吸収スペクトル （ＫＢｒ ｍ−１）： ３２２０．２９２０．、１７１
５．１６０５．１４８０．１４４５゜１３９０、１３５
０．１２ｇ０．１２５０．１２００．１１６０゜１１４
０、１０６５．１０３０． ９９０． ９６０． ９１
５゜８６０、 ８４０． ７７０ （８） Ｊｌ−ＮＭｌｔスヘクト）Ｌ／ （４００Ｍｌ
（ｚ、 ＤＭＳＯ−ｄＧ、４０℃）δ（ｐｐｍ）： １
．３６（３Ｈ，ｄ）、 ２．３４（３ｔ（、ｓ）、
３．９３（６Ｈ，ｓ）。
、 ５０３（１８２）（７）赤外部吸収スペクトル （ＫＢｒ ｍ−１）： ３２２０．２９２０．、１７１
５．１６０５．１４８０．１４４５゜１３９０、１３５
０．１２ｇ０．１２５０．１２００．１１６０゜１１４
０、１０６５．１０３０． ９９０． ９６０． ９１
５゜８６０、 ８４０． ７７０ （８） Ｊｌ−ＮＭｌｔスヘクト）Ｌ／ （４００Ｍｌ
（ｚ、 ＤＭＳＯ−ｄＧ、４０℃）δ（ｐｐｍ）： １
．３６（３Ｈ，ｄ）、 ２．３４（３ｔ（、ｓ）、
３．９３（６Ｈ，ｓ）。
４．４４（ＩＨ，ｄｑ）、 ４．５４（ＬＨ，ｄ）、
５．０６（ＬＨ，ｄ）。
５．０６（ＬＨ，ｄ）。
６．８３（ＩＩ（、ｂｒ ｓ）、６．８９（ＬＨ，ｄ）
、 ７．２６（ｌｔｌ、 ｄ）。
、 ７．２６（ｌｔｌ、 ｄ）。
８．４８（ＬＨ，ｄ）、 ８．６３（］、）（、ｂｒ
）、１３．２５（ＩＨ，ｓ）。
）、１３．２５（ＩＨ，ｓ）。
１４．６７（ＩＨ，ｂｒ）
（９） ”Ｃ−ＮＭＲスペクト＃（１００ＭＨｚ、ＤＭ
ＳＯ−ｄｓ、４０’Ｃ：）δ（ｐｐｍ）： １８７．９
ｓ、 １８５．２ ｓ、 １７４．Ｏｓ、 １６７．
１ ｓ。
ＳＯ−ｄｓ、４０’Ｃ：）δ（ｐｐｍ）： １８７．９
ｓ、 １８５．２ ｓ、 １７４．Ｏｓ、 １６７．
１ ｓ。
１６５．３ ｓ、 １６４．５ ｓ、 １５５．３ ｓ
、 １５３．６ ｓ。
、 １５３．６ ｓ。
１５１．８ ｓ、 １４４．１ ｓ、 １３９，６ ｓ
、 １３７．２ ｓ。
、 １３７．２ ｓ。
１３３．６ ｓ、 １３０．８ ｓ、 １２７．７ ｓ
、 １２３．７ ｄ。
、 １２３．７ ｄ。
１２１．７ ｓ、 １１５．３ ｓ、 １１５．３ ｓ
、 １１０．９ ｓ。
、 １１０．９ ｓ。
１０７．３ ｄ、 １０６．３ ｄ、 ７１．１ ｄ
、 ６３．７ ｄ。
、 ６３．７ ｄ。
６２．５ｑ、 ５６．２ｑ、 ４７．７ｄ、 １
８．７ｑ。
８．７ｑ。
１６．９ ｑ
（１０）溶解性：メタノール、クロロホルム、酢酸エチ
ル、アセトンに僅かに溶け、 ジメチルスルホキシド、ジメチル ホルムアミド、アルカリ水に溶け、 水に溶けない。
ル、アセトンに僅かに溶け、 ジメチルスルホキシド、ジメチル ホルムアミド、アルカリ水に溶け、 水に溶けない。
（１１）塩基性、酸性、中性の区別：酸性物質ベナノマ
イシンＣの塩としては、金属塩、特にすＩ・リウム塩の
如きアルカリ金属塩、カルシウム塩の如きアルカリ土類
金属塩があり、更に後記の如きアミンとの塩、等がある
。
イシンＣの塩としては、金属塩、特にすＩ・リウム塩の
如きアルカリ金属塩、カルシウム塩の如きアルカリ土類
金属塩があり、更に後記の如きアミンとの塩、等がある
。
２、 ベナノマイシンＣのα−グルコシダーゼ阻害活性
後記の試験例−１により測定したベナノマイシンＣのα
−グルコシダーゼに対する５０％阻害濃度（ＩＣ，。）
は、６０ μｇ／ｍｆｌであった。
−グルコシダーゼに対する５０％阻害濃度（ＩＣ，。）
は、６０ μｇ／ｍｆｌであった。
試験例１
基質としてｐ−ニトロフェニル−α−Ｄ−グルコピラノ
シドを用いたα−グルコシダーゼ（酵母、タイプ■、シ
グマ社製、米国）に対する阻害活性は、下記の測定法に
より求めた。α−グルコシダーゼを０．１ｍｇ／ｍｕ含
有する１００ｍＭリン酸緩衝液（ｐＨ６，８）４μＱ、
０．７ｍＭ ｐ−二１−ロフェニルーα−Ｄ−グルコピ
ラノシドの同緩衝溶液９５μＱおよびベナノマイシンＣ
のジメチルスルホキシド溶液１μＱを混合し、３７℃で
１５分間反応させた後１Ｍ炭酸ナトリウム水溶液１ｍＱ
を加えて反応を停止させた。その後、反応液の４０５ｎ
ｍに於ける吸光度を測定して阻害率を求めた。また、５
０％阻害ａ度はベナノマイシンＣの濃度を変えて測定し
た阻害率より算出した。
シドを用いたα−グルコシダーゼ（酵母、タイプ■、シ
グマ社製、米国）に対する阻害活性は、下記の測定法に
より求めた。α−グルコシダーゼを０．１ｍｇ／ｍｕ含
有する１００ｍＭリン酸緩衝液（ｐＨ６，８）４μＱ、
０．７ｍＭ ｐ−二１−ロフェニルーα−Ｄ−グルコピ
ラノシドの同緩衝溶液９５μＱおよびベナノマイシンＣ
のジメチルスルホキシド溶液１μＱを混合し、３７℃で
１５分間反応させた後１Ｍ炭酸ナトリウム水溶液１ｍＱ
を加えて反応を停止させた。その後、反応液の４０５ｎ
ｍに於ける吸光度を測定して阻害率を求めた。また、５
０％阻害ａ度はベナノマイシンＣの濃度を変えて測定し
た阻害率より算出した。
３、 ベナノマイシンＣの抗かび活性
本発明によるベナノマイシンＣの各種かびに対する最小
発育阻止濃度を第１表に示した。
発育阻止濃度を第１表に示した。
第１表
第２の本発明の要旨とするところは、放線菌に属するベ
ナノマイシンＣ生産菌を培養し、その培養物からベナノ
マイシンＣを採取するベナノマイシンＣの製造法にある
。
ナノマイシンＣ生産菌を培養し、その培養物からベナノ
マイシンＣを採取するベナノマイシンＣの製造法にある
。
ベナノマイシンＣ生産菌の一例としては、下記に記載す
る放線菌阿旧９３−１６Ｆ４株がある。
る放線菌阿旧９３−１６Ｆ４株がある。
（イ）生産菌阿旧９３−１６Ｆ４株の菌学的性状この生
産菌は昭和５９年３月、微生物化学研究所において当研
究所構内の土壌より分離された放線菌（Ａｃｔｉｎｏｍ
ｙｃｅｔｅ）で、 ＭＨ１９３−１６Ｆ４の菌株番号が
付された。この菌株の菌学的性質は次の通りである。
産菌は昭和５９年３月、微生物化学研究所において当研
究所構内の土壌より分離された放線菌（Ａｃｔｉｎｏｍ
ｙｃｅｔｅ）で、 ＭＨ１９３−１６Ｆ４の菌株番号が
付された。この菌株の菌学的性質は次の通りである。
［１１ＷＬＵＬ
阿旧９３−１６Ｆ４株は、顕微鏡下で分枝した基中菌糸
より気菌糸を形成する。基中菌糸の分断は認められない
６気菌糸の着生はｌ５Ｐ−培地２、ｌ５Ｐ−培地３で見
られる程度であり、胞子形成はｌ５Ｐ−培地３で通常２
７℃で培養後１８日目体より観察される。気菌糸には輪
生技、らせん形成及び胞子のう形成は認められず、気菌
糸にほぼ垂直に短い胞子柄を生じ、その先端に通常３−
７個、稀に２個の胞子の連鎖がみられる。なお胞子鎖が
ループ状を呈することもある。個々の胞子は円柱状（０
，８Ｘ１．０−１．２μｍ）〜球状（０，８−１２μｍ
）を示し、胞子表面は平滑である。
より気菌糸を形成する。基中菌糸の分断は認められない
６気菌糸の着生はｌ５Ｐ−培地２、ｌ５Ｐ−培地３で見
られる程度であり、胞子形成はｌ５Ｐ−培地３で通常２
７℃で培養後１８日目体より観察される。気菌糸には輪
生技、らせん形成及び胞子のう形成は認められず、気菌
糸にほぼ垂直に短い胞子柄を生じ、その先端に通常３−
７個、稀に２個の胞子の連鎖がみられる。なお胞子鎖が
ループ状を呈することもある。個々の胞子は円柱状（０
，８Ｘ１．０−１．２μｍ）〜球状（０，８−１２μｍ
）を示し、胞子表面は平滑である。
［２］各種培地における生育状態
色の記載について［コ内に示す標準は、コンテイナー・
コーポレーション・オブ・アメリカのカラー伊ハーモニ
ー・マニュアル（ＣｏｎｔａｉｎｅｒＣｏｒｐｏｒａｔ
ｉｏｎ ｏｆ ＡｍｅｒｉｃａのＣｏ１ｏｒ Ｈａｒｍ
ｏｎｙＭａｎｕａｌ）を用いた。
コーポレーション・オブ・アメリカのカラー伊ハーモニ
ー・マニュアル（ＣｏｎｔａｉｎｅｒＣｏｒｐｏｒａｔ
ｉｏｎ ｏｆ ＡｍｅｒｉｃａのＣｏ１ｏｒ Ｈａｒｍ
ｏｎｙＭａｎｕａｌ）を用いた。
（１）シュクロース・硝酸塩寒天培地（２７°Ｃ培養）
発育は無色、気菌糸は着生せず、溶解性色素も認められ
ない。ビタミンＢ群補強培地では発育は無色〜ピンク灰
［５ｅｃ、 Ｄｕｓｔｙ Ｐｅａｃｈ］、気菌糸は着生
せず、溶解性色素はわずかに赤色をおびる程度である。
発育は無色、気菌糸は着生せず、溶解性色素も認められ
ない。ビタミンＢ群補強培地では発育は無色〜ピンク灰
［５ｅｃ、 Ｄｕｓｔｙ Ｐｅａｃｈ］、気菌糸は着生
せず、溶解性色素はわずかに赤色をおびる程度である。
（２）グルコース・アスパラギン寒天培地（２７℃培養
） 発育は無色、気菌糸は着生せず、溶解性色素も認められ
ない。ビタミンＢ群補強培地では１発育は無色〜うすピ
ンク［４ｇｃ、 Ｎｕｄｅ Ｔａｎ１、気菌糸は着生せ
ず、１解性色素は赤味をおびる。
） 発育は無色、気菌糸は着生せず、溶解性色素も認められ
ない。ビタミンＢ群補強培地では１発育は無色〜うすピ
ンク［４ｇｃ、 Ｎｕｄｅ Ｔａｎ１、気菌糸は着生せ
ず、１解性色素は赤味をおびる。
（３）グリセリン・アスパラギン寒天培地（ｌ５Ｐ−培
地５．２７℃培養） 発育は無色、気菌糸は着生せず、溶解性色素も認められ
ない。ビタミンＢ群補強培地では、灰味赤紫［８ｇ、
Ｒｏｓｅ Ｍａｕｖｅ］〜にぶ赤紫［８ｅ、 Ｒｏｓｅ
Ｗｉｎｅ］の発育上に、わずかにうつすらと白の気菌糸
を着生し、にぶ赤紫・［８ｐｃ、 Ｃｒａｎｂｅｒｒｙ
］の溶解性色素を生産する。
地５．２７℃培養） 発育は無色、気菌糸は着生せず、溶解性色素も認められ
ない。ビタミンＢ群補強培地では、灰味赤紫［８ｇ、
Ｒｏｓｅ Ｍａｕｖｅ］〜にぶ赤紫［８ｅ、 Ｒｏｓｅ
Ｗｉｎｅ］の発育上に、わずかにうつすらと白の気菌糸
を着生し、にぶ赤紫・［８ｐｃ、 Ｃｒａｎｂｅｒｒｙ
］の溶解性色素を生産する。
（４）スターチ・無機塩寒天培地（ＩＳＰ−培地４．２
７℃培養） 発育は無色、気菌糸は着生せず、溶解性色素も認められ
ない。ビタミンＢ群補強培地では、溶解性色素がわずか
に赤味をおびる。
７℃培養） 発育は無色、気菌糸は着生せず、溶解性色素も認められ
ない。ビタミンＢ群補強培地では、溶解性色素がわずか
に赤味をおびる。
（５）チロシン寒天培地（ＩＳＰ−培地７，２７℃培養
）発育は無色〜うす黄茶［３ｉｃ、 Ｌｔ Ａｍｂｃｒ
コ、気菌糸は着生せず、溶解性色素も認められない。ビ
タミンＢ群補強培地では、発育は無色〜灰味赤紫、気菌
糸は着生せず、溶解性色素はわずかに赤味をおびる。
）発育は無色〜うす黄茶［３ｉｃ、 Ｌｔ Ａｍｂｃｒ
コ、気菌糸は着生せず、溶解性色素も認められない。ビ
タミンＢ群補強培地では、発育は無色〜灰味赤紫、気菌
糸は着生せず、溶解性色素はわずかに赤味をおびる。
（６）栄養寒天培地（２７℃培養）
発育はうす黄［２ｇｃ、 Ｂａｍｂｏｏ］、気菌糸は着
生せず、溶解性色素も認められない。ビタミンＢ群補強
培地の場合も同様の性状を示した。
生せず、溶解性色素も認められない。ビタミンＢ群補強
培地の場合も同様の性状を示した。
（７）イースト・麦芽寒天培地（ｌ５Ｐ−培地２，２７
℃培養） うす黄［２ｅｃ、 Ｂ１５ｃｕｉｔ］〜暗い赤［７ｐｉ
、 Ｄｋ Ｗｉｎｅ一７Ｔｐｇ、 Ｄｋ Ｒｅｄ］〜灰
味赤［７ｐｇｔ Ｗｉｎｅ］の発育上に、培養後１４日
目体より灰白の気菌糸を着生する。
℃培養） うす黄［２ｅｃ、 Ｂ１５ｃｕｉｔ］〜暗い赤［７ｐｉ
、 Ｄｋ Ｗｉｎｅ一７Ｔｐｇ、 Ｄｋ Ｒｅｄ］〜灰
味赤［７ｐｇｔ Ｗｉｎｅ］の発育上に、培養後１４日
目体より灰白の気菌糸を着生する。
にぶ赤［６よｐｅ、 Ｔｏｍａｔｏ Ｒｅｄｌの溶解性
色素は、培養初期に発育の周辺のみにみられるが、次第
に拡散する。発育の色素、溶解性色素ともにＨＣＩでだ
いだいに変色し、ＮａＯＨでは変化はみられない。ビタ
ミンＢ群補強培地でも同様の性状である。
色素は、培養初期に発育の周辺のみにみられるが、次第
に拡散する。発育の色素、溶解性色素ともにＨＣＩでだ
いだいに変色し、ＮａＯＨでは変化はみられない。ビタ
ミンＢ群補強培地でも同様の性状である。
（８）オートミール寒天培地（ＩＳＰ−培地３．２７℃
培養） うすピンク［４ｇｃ、 Ｎｕｄｅ Ｔａｎ１〜灰味赤［
６ｅ。
培養） うすピンク［４ｇｃ、 Ｎｕｄｅ Ｔａｎ１〜灰味赤［
６ｅ。
Ｃｅｄａｒコ〜暗い赤［７ｐｅ、 Ｃｈｅｒｒｙ Ｗｉ
ｎｅコ〜紫味灰［８ｉｇ、 Ｍａｕｖｅ Ｇｒａｙコの
発育上に、培養後ｌＯ日目体よりうつすらと灰白［３ｃ
ｂ、 ５ａｎｄ］の気菌糸を着生する。溶解性色素は赤
味をおびる程度である。発育の色、溶解性色素ともにＨ
ＣＩでだいだいに変色し、ＮａＯＨでは変化はみられな
い。ビタミンＢ群補強培地でも同様の性状を示した。
ｎｅコ〜紫味灰［８ｉｇ、 Ｍａｕｖｅ Ｇｒａｙコの
発育上に、培養後ｌＯ日目体よりうつすらと灰白［３ｃ
ｂ、 ５ａｎｄ］の気菌糸を着生する。溶解性色素は赤
味をおびる程度である。発育の色、溶解性色素ともにＨ
ＣＩでだいだいに変色し、ＮａＯＨでは変化はみられな
い。ビタミンＢ群補強培地でも同様の性状を示した。
（９）グリセリン・硝酸塩寒天培地（２７℃培養）発育
は無色、気菌糸は着生せず、溶解性色素も認められない
。ビタミンＢ群補強培地でも同様の性状である。
は無色、気菌糸は着生せず、溶解性色素も認められない
。ビタミンＢ群補強培地でも同様の性状である。
（１０）スターチ寒天培地（２７℃培養）発育は無色、
気菌糸は着生せず、溶解性色素も認められない。ビタミ
ンＢ群補強培地では１発育は無色、気菌糸は着生せず、
溶解性色素はわずかに赤味をおびる程度である。
気菌糸は着生せず、溶解性色素も認められない。ビタミ
ンＢ群補強培地では１発育は無色、気菌糸は着生せず、
溶解性色素はわずかに赤味をおびる程度である。
（１１）リンゴ酸石灰寒天培地（２７℃培養）発育は無
色、気菌糸は着生せず、溶解性色素はわずかに赤味をお
びる程度である。ビタミンＢ群補強培地では、発育は無
色、気菌糸は着生せず、溶解性色素も認められない。
色、気菌糸は着生せず、溶解性色素はわずかに赤味をお
びる程度である。ビタミンＢ群補強培地では、発育は無
色、気菌糸は着生せず、溶解性色素も認められない。
（１２）セルロース（ろ紙片添加合成液、２７℃培養）
生育は認められない。
生育は認められない。
（１３）ゼラチン穿刺培養
１５％単純ゼラチン培地（２０’Ｃ培養）、グルコース
・ペプトン・ゼラチン培地（２７°Ｃ培養）ともに生育
が貧弱で、発育は無色、気菌糸は着生せず、溶解性色素
も認められない。
・ペプトン・ゼラチン培地（２７°Ｃ培養）ともに生育
が貧弱で、発育は無色、気菌糸は着生せず、溶解性色素
も認められない。
（１４）脱脂牛乳（３７℃培養）
生育は極めて貧弱であり、発育は無色、気菌糸は着生せ
ず、溶解性色素も認められない。
ず、溶解性色素も認められない。
［３］１里煎並１
（１）生育温度範囲
スターチ・イースト寒天（可溶性でんぷん１．０％、イ
ースト・エキス０．２％、紐寒天３．０％、ｐＨ７，０
）を用い、２０℃、２４℃、２７℃、３０℃、３７℃、
５０℃の各温度で試験の結果、５０℃を除いてそのいず
れの温度でも生育したが、最適生育温度は２７℃〜３７
℃付近と思われる。
ースト・エキス０．２％、紐寒天３．０％、ｐＨ７，０
）を用い、２０℃、２４℃、２７℃、３０℃、３７℃、
５０℃の各温度で試験の結果、５０℃を除いてそのいず
れの温度でも生育したが、最適生育温度は２７℃〜３７
℃付近と思われる。
（２）ゼラチンの液化（１５％単純ゼラチン培地、２０
℃培養；グルコース・ペプトン・ゼラチン培地、２７℃
培養） 単純ゼラチン培地、グルコース・ペプトン・ゼラチン培
地ともに培養後３カ月間観察したが、液化を認めなかっ
た。
℃培養；グルコース・ペプトン・ゼラチン培地、２７℃
培養） 単純ゼラチン培地、グルコース・ペプトン・ゼラチン培
地ともに培養後３カ月間観察したが、液化を認めなかっ
た。
（３）スターチの加水分解（スターチ・無機塩寒天培地
およびスターチ寒天培地、いずれも２７℃培養） スターチ・無機塩寒天培地、スターチ寒天培地ともに氷
解性は認められない。
およびスターチ寒天培地、いずれも２７℃培養） スターチ・無機塩寒天培地、スターチ寒天培地ともに氷
解性は認められない。
（４）脱脂牛乳の凝固・ペプトン化（脱脂牛乳、３７℃
培養） 生育が貧弱であり、培養後３カ月間の観察では凝固・ペ
プトン化ともに認められなかった。
培養） 生育が貧弱であり、培養後３カ月間の観察では凝固・ペ
プトン化ともに認められなかった。
（５）メラニン様色素の生成（トリプトン・イースト・
ブロス、ｌ５Ｐ−培養１；ペプトン・イースト・鉄寒天
、 ｌ５Ｐ−培地６；チロシン寒天、ｌ５Ｐ−培地７；
いずれも２７℃培養）いずれの培地でも陰性であった。
ブロス、ｌ５Ｐ−培養１；ペプトン・イースト・鉄寒天
、 ｌ５Ｐ−培地６；チロシン寒天、ｌ５Ｐ−培地７；
いずれも２７℃培養）いずれの培地でも陰性であった。
（６）炭素源の利用性（プリドハム・ゴトリーブ寒天培
地、ｌ５Ｐ−培地９．２７℃培養）グルコース、Ｌ−ア
ラビノース、Ｄ−キシロース、Ｄ−フラクトース、シュ
クロース、ラムノース、ラフィノース、Ｄ−マンニトー
ルを利用して発育し、イノシトールを利用しない。
地、ｌ５Ｐ−培地９．２７℃培養）グルコース、Ｌ−ア
ラビノース、Ｄ−キシロース、Ｄ−フラクトース、シュ
クロース、ラムノース、ラフィノース、Ｄ−マンニトー
ルを利用して発育し、イノシトールを利用しない。
（７）リンゴ酸石灰の溶解（リンゴ酸石灰寒天、２７℃
培養） 陰性である。
培養） 陰性である。
（８）硝酸塩の還元反応（０，１％硝酸カリウム含有ペ
プトン水、ｌ５Ｐ−培地８，２７℃培養）陽性である。
プトン水、ｌ５Ｐ−培地８，２７℃培養）陽性である。
（９）セルロースの分解（ろ紙片添加合成塩、２７℃培
養） 生育しない。
養） 生育しない。
以上の性状を要約すると、ＭＨ１９３−ｌ６Ｐ４株は気
菌糸の主軸にほぼ垂直に、３−７個（稀に２個）の胞子
からなる胞子連鎖を形成し、輪生技、らせん形成および
胞子のう形成はｗＡ察されない。また、基中菌糸の分断
はみられない。胞子表面は平滑である。ｌ５Ｐ−培地２
．ｌ５Ｐ−培地３の２種の培地で灰味赤〜暗い赤の発育
上に灰白の気菌糸をうつすらと形成する。なお、斜面培
地（イースト・エキス０．２％、可溶性でんぷん１．０
％、紐寒天３．０％、ｐＨ７，０）に継代すると、わず
かなピンクの気菌糸を着生することがある。また、ｌ５
Ｐ−培地２でにぶ赤の溶解性色素を産生ずる。その他種
々の培地では発育は無色、気菌糸は着生せず、溶解性色
素もほとんど認められない。しかし、培地にビタミンＢ
群を添加することにより発育が良好となり、発育が赤く
なる培地がある。発育の色および溶解性色素ともにＨＣ
Ｉで赤からだいだいに変色し、 ＮａＯＨでは変化はみ
られない。メラニン様色素の生成および蛋白分解力、ス
ターチの氷解性はいずれも陰性であり、硝酸塩の還元反
応は陽性である。また、ビタミンＢ群補強培地で生育が
良好となる場合があり、ビタミン要求性をもつことが考
えられる。
菌糸の主軸にほぼ垂直に、３−７個（稀に２個）の胞子
からなる胞子連鎖を形成し、輪生技、らせん形成および
胞子のう形成はｗＡ察されない。また、基中菌糸の分断
はみられない。胞子表面は平滑である。ｌ５Ｐ−培地２
．ｌ５Ｐ−培地３の２種の培地で灰味赤〜暗い赤の発育
上に灰白の気菌糸をうつすらと形成する。なお、斜面培
地（イースト・エキス０．２％、可溶性でんぷん１．０
％、紐寒天３．０％、ｐＨ７，０）に継代すると、わず
かなピンクの気菌糸を着生することがある。また、ｌ５
Ｐ−培地２でにぶ赤の溶解性色素を産生ずる。その他種
々の培地では発育は無色、気菌糸は着生せず、溶解性色
素もほとんど認められない。しかし、培地にビタミンＢ
群を添加することにより発育が良好となり、発育が赤く
なる培地がある。発育の色および溶解性色素ともにＨＣ
Ｉで赤からだいだいに変色し、 ＮａＯＨでは変化はみ
られない。メラニン様色素の生成および蛋白分解力、ス
ターチの氷解性はいずれも陰性であり、硝酸塩の還元反
応は陽性である。また、ビタミンＢ群補強培地で生育が
良好となる場合があり、ビタミン要求性をもつことが考
えられる。
ところで河旧９３−１６Ｆ４株は菌体成分として全菌体
中にメソ・ジアミノピメリン酸、および糖成分としてグ
ルコース、リボース、マジュロースを含み。
中にメソ・ジアミノピメリン酸、および糖成分としてグ
ルコース、リボース、マジュロースを含み。
リシバリエら （Ｌｅｃｈｅｖａｌｉｅｒ ｅｔ ａｌ
、 ｒＩｎｔｅｒｎａｔｉｏｎａｌＪｏｕｒｎａｌ ｏ
ｆ Ｓｙｓｔｅｍａｔｉｃ Ｂａｃｔｅｒｉｏｌｏｇｙ
Ｊ ２０巻、４３５頁、 １９７０）の提唱する細胞壁
の主要構成成分のタイプＩＩＩＢを示した。またリン脂
質のタイプはＰＩＶ型（ホスファチジル・エタノールア
ミンおよび未知のグルコサミン含有リン脂質を含み、ホ
スファチジル・グリセロールを含まない）、メナキノン
の組成はＭＫ−９（Ｈ，）を主成分とし、 ＭＫ−９（
Ｈ，）、 ＭＫ−９（Ｈ４）、ＭＫ−９（Ｈ２）、ＭＫ
−９（Ｈ□。）、ＤＮＡのＧＣ含量は７１．５％であっ
た。なお、菌体のガスクロマトグラフィーによる分析の
結果、イソ分枝脂肪酸（ｉ−１６：０）、アンチイソ分
枝脂肪酸（ａ−１７：Ｏ）、１０メチル脂肪酸（１０Ｍ
ｅ−１７：Ｏ）を特徴的に含むことがわかった。
、 ｒＩｎｔｅｒｎａｔｉｏｎａｌＪｏｕｒｎａｌ ｏ
ｆ Ｓｙｓｔｅｍａｔｉｃ Ｂａｃｔｅｒｉｏｌｏｇｙ
Ｊ ２０巻、４３５頁、 １９７０）の提唱する細胞壁
の主要構成成分のタイプＩＩＩＢを示した。またリン脂
質のタイプはＰＩＶ型（ホスファチジル・エタノールア
ミンおよび未知のグルコサミン含有リン脂質を含み、ホ
スファチジル・グリセロールを含まない）、メナキノン
の組成はＭＫ−９（Ｈ，）を主成分とし、 ＭＫ−９（
Ｈ，）、 ＭＫ−９（Ｈ４）、ＭＫ−９（Ｈ２）、ＭＫ
−９（Ｈ□。）、ＤＮＡのＧＣ含量は７１．５％であっ
た。なお、菌体のガスクロマトグラフィーによる分析の
結果、イソ分枝脂肪酸（ｉ−１６：０）、アンチイソ分
枝脂肪酸（ａ−１７：Ｏ）、１０メチル脂肪酸（１０Ｍ
ｅ−１７：Ｏ）を特徴的に含むことがわかった。
既知の放線菌で胞子連鎖を有し、細胞壁タイプｎｌＢを
示すものは、アクチノマジュラ（Ａｃｔｉｎｏｍａｄｕ
ｒａ）、ミクロビスポラ（Ｍｉｃｒｏｂｉｓｐｏｒａ）
、ミクロテトラスポラ（Ｍｉｃｒｏｔｅｔｒａｓｐｏｒ
ａ）の３属である。ＭＨ９３−ｌ６Ｐ４株と上記の ３
属の特徴を第２表に示した。メナキノンの＊印は主成分
として含まれることを示す。
示すものは、アクチノマジュラ（Ａｃｔｉｎｏｍａｄｕ
ｒａ）、ミクロビスポラ（Ｍｉｃｒｏｂｉｓｐｏｒａ）
、ミクロテトラスポラ（Ｍｉｃｒｏｔｅｔｒａｓｐｏｒ
ａ）の３属である。ＭＨ９３−ｌ６Ｐ４株と上記の ３
属の特徴を第２表に示した。メナキノンの＊印は主成分
として含まれることを示す。
引用文献
１）放線菌の同定実験法９日本放線菌研究会編。
１９８５年
２） Ｊ、Ｐｏ５ｃｈｎｅｒら： ｒＤＮＡ−ＤＮＡ
Ｒｅａｓｓｏｃｉａｔｉｏｎ ａｎｄＣｈｅｍｏｔａｘ
ｏｎｏｍｉｃ ５ｔｕｄｉｅｓ ｏｎ Ａｃｔｉｎｏｍ
ａｄｕｒａ。
Ｒｅａｓｓｏｃｉａｔｉｏｎ ａｎｄＣｈｅｍｏｔａｘ
ｏｎｏｍｉｃ ５ｔｕｄｉｅｓ ｏｎ Ａｃｔｉｎｏｍ
ａｄｕｒａ。
Ｍｉｃｒｏｂｉｓｐｏｒａ 、Ｍｉｃｒｏｔｅｔｒａｓ
ｐｏｒａ ｒＭｉｃｒｏｐｏｌｙｓｐｏｒａ ａｎｄ
Ｎｏｃａｒｄｉｏｐｓｉｓ。
ｐｏｒａ ｒＭｉｃｒｏｐｏｌｙｓｐｏｒａ ａｎｄ
Ｎｏｃａｒｄｉｏｐｓｉｓ。
Ｓｙｓｔｅｍａｔｉｃ ａｎｄ Ａｐｐｌｉｅｄ Ｍｉ
ｃｒｏｂｉｏｌｏｇｙＪ ６巻。
ｃｒｏｂｉｏｌｏｇｙＪ ６巻。
２４６−２７０頁、 １９８５年
３） Ａ、Ｆｉｓｃｈｅｒら： ｒＭｏｌｅｃｕｌａｒ
−ｇｅｎｅｔｉｃ ａｎｄＣｈｅｍｏｔａｘｏｎｏｍｉ
ｃ ５ｔｕｄｉｅｓ ｏｎ Ａｃｔｉｎｏｍａｄ
ｕｒａａｎｄ Ｎｏｃａｒｄｉｏｐｓｉｓ、Ｊｏｕｒｎ
ａｌ ｏｆ ＧｅｎｅｒａｌＭｉｃｒｏｂｉｏｌｏｇｙ
Ｊ １２９巻、 ３４３３−３４４６頁、 １９８３年
４） Ｔｈｉｅｍａｎｎら： ｒＡ Ｎｅｗ Ｇｅｎｕ
ｓ ｏｆ ｔｈｅＡｃｔｉｎｏｍｙｃｅｔａｌｅｓ：
Ｍｉｃｒｏｔｅｔｒａｓｐｏｒａｇｅｎ、ｎｏｖ、。
−ｇｅｎｅｔｉｃ ａｎｄＣｈｅｍｏｔａｘｏｎｏｍｉ
ｃ ５ｔｕｄｉｅｓ ｏｎ Ａｃｔｉｎｏｍａｄ
ｕｒａａｎｄ Ｎｏｃａｒｄｉｏｐｓｉｓ、Ｊｏｕｒｎ
ａｌ ｏｆ ＧｅｎｅｒａｌＭｉｃｒｏｂｉｏｌｏｇｙ
Ｊ １２９巻、 ３４３３−３４４６頁、 １９８３年
４） Ｔｈｉｅｍａｎｎら： ｒＡ Ｎｅｗ Ｇｅｎｕ
ｓ ｏｆ ｔｈｅＡｃｔｉｎｏｍｙｃｅｔａｌｅｓ：
Ｍｉｃｒｏｔｅｔｒａｓｐｏｒａｇｅｎ、ｎｏｖ、。
Ｊｏｕｒｎａｌ ｏｆ Ｇｅｎｅｒａｌ Ｍｉｃｒｏｂ
ｉｏｌｏｇｙＪ ５０巻、２９５−３０３頁、 １９６
８年 ５）野々村ら：土壌中における放線菌の分布（第１１報
） ＡｃｔｉｎｏＩＩＩａｄｕｒａ Ｌａｃｈｅｖａｌ
ｉｅｒ ｅｔ ａｌ、属の数新種、「発酵工学会誌」４
９巻、 ９０４−９１２頁、 １９７１年２表に示され
るように１Ｍ旧９３−１６Ｆ４株がすんなりと該当する
属は見当たらない。これらの属は極めて微妙に変遷して
おり、バージイズ・マニュアル（Ｂｅｒｇｅｙ’ｓ Ｍ
ａｎｕａｌ ｏｆ ＤｅｔｅｒｍｉｎａｔｉｖｅＢａｃ
ｔｅｒｉｏｌｏｇｙ）の成板にどのように掲載されるか
が期待されている。ただしアクチノマジュラ属には多く
の種が記載されており、性状にも広い幅があるが、その
中のアクチノマジュラ・スパジックス（Ａｃｔｉｎｏｍ
ａｄｕｒａ ５ｐａｄｉｘ）とは形態、菌体の脂肪酸組
成およびメナキノン組成にかなりの類似点が見いだされ
る（前記１）、３）、５）の文献）。今後。
ｉｏｌｏｇｙＪ ５０巻、２９５−３０３頁、 １９６
８年 ５）野々村ら：土壌中における放線菌の分布（第１１報
） ＡｃｔｉｎｏＩＩＩａｄｕｒａ Ｌａｃｈｅｖａｌ
ｉｅｒ ｅｔ ａｌ、属の数新種、「発酵工学会誌」４
９巻、 ９０４−９１２頁、 １９７１年２表に示され
るように１Ｍ旧９３−１６Ｆ４株がすんなりと該当する
属は見当たらない。これらの属は極めて微妙に変遷して
おり、バージイズ・マニュアル（Ｂｅｒｇｅｙ’ｓ Ｍ
ａｎｕａｌ ｏｆ ＤｅｔｅｒｍｉｎａｔｉｖｅＢａｃ
ｔｅｒｉｏｌｏｇｙ）の成板にどのように掲載されるか
が期待されている。ただしアクチノマジュラ属には多く
の種が記載されており、性状にも広い幅があるが、その
中のアクチノマジュラ・スパジックス（Ａｃｔｉｎｏｍ
ａｄｕｒａ ５ｐａｄｉｘ）とは形態、菌体の脂肪酸組
成およびメナキノン組成にかなりの類似点が見いだされ
る（前記１）、３）、５）の文献）。今後。
ＭＨ１９３−１６Ｆ４株とアクチノマジュラ・スパジッ
クスとの比較実験を最初に行う予定である。なお、 Ｍ
Ｈ１９３−１６Ｆ４株を工業技術院微生物工業技術研究
所に寄託申請し、昭和６２年８月２１日に微工研菌寄第
９５２９号として受託された。
クスとの比較実験を最初に行う予定である。なお、 Ｍ
Ｈ１９３−１６Ｆ４株を工業技術院微生物工業技術研究
所に寄託申請し、昭和６２年８月２１日に微工研菌寄第
９５２９号として受託された。
（０） ＭＨ１９３−１６Ｆ４株の培養法放線菌に属す
るベナノマイシンＣ生産菌を、通常の微生物が利用し得
る栄養源含有培地に接種して好気的条件下に発育させる
ことによって、主に培養液中にベナノマイシンＣを生産
蓄積させ、更に培養物、特に培養液から目的物を分離す
る。用いる培地中の栄養源としては、放線菌の栄養源と
して用いられる公知のものが使用できる。例えば市販さ
れている大豆粉、ニスサンミート、ペプトン、肉エキス
、コーン・ステイープ・リカー、綿実粉、落花生粉、乾
燥酵母、酵母エキス、ＮＺアミン、カゼイン、硝酸ナト
リウム、硫酸アンモニウム、硝酸アンモニウムなどの窒
素源、およびグリセリン、しよ糖、でん粉、グルコース
、ガラクトース、マルトース、デキストリン、乳糖、糖
みつ、大豆油、脂肪、アミノ酸などの炭素源、および食
塩、燐酸塩、炭酸カルシウム、硫酸マグネシウム、塩化
コバルト、塩化マンガンなどの無機塩を使用できる。そ
の他必要に応じて微量の金属塩、消泡剤として肋、植、
鉱物油などを添加することができる。これらのものは生
産菌が利用し、ベナノマイシンＣの生産に役立つもので
あれば良く、公知の放線菌の培養材料はすべて用いるこ
とができる。
るベナノマイシンＣ生産菌を、通常の微生物が利用し得
る栄養源含有培地に接種して好気的条件下に発育させる
ことによって、主に培養液中にベナノマイシンＣを生産
蓄積させ、更に培養物、特に培養液から目的物を分離す
る。用いる培地中の栄養源としては、放線菌の栄養源と
して用いられる公知のものが使用できる。例えば市販さ
れている大豆粉、ニスサンミート、ペプトン、肉エキス
、コーン・ステイープ・リカー、綿実粉、落花生粉、乾
燥酵母、酵母エキス、ＮＺアミン、カゼイン、硝酸ナト
リウム、硫酸アンモニウム、硝酸アンモニウムなどの窒
素源、およびグリセリン、しよ糖、でん粉、グルコース
、ガラクトース、マルトース、デキストリン、乳糖、糖
みつ、大豆油、脂肪、アミノ酸などの炭素源、および食
塩、燐酸塩、炭酸カルシウム、硫酸マグネシウム、塩化
コバルト、塩化マンガンなどの無機塩を使用できる。そ
の他必要に応じて微量の金属塩、消泡剤として肋、植、
鉱物油などを添加することができる。これらのものは生
産菌が利用し、ベナノマイシンＣの生産に役立つもので
あれば良く、公知の放線菌の培養材料はすべて用いるこ
とができる。
ベナノマイシンＣの大量生産には液体培養が好ましく、
培養温度は生産菌が発育しベナノマイシンＣを生産する
範囲で適用でき、通常２０−４０℃、好ましくは２５−
３７℃である。培養は以上述べた条件をベナノマイシン
Ｃ生産菌の性質に応じて適宜選択して行うことができる
。
培養温度は生産菌が発育しベナノマイシンＣを生産する
範囲で適用でき、通常２０−４０℃、好ましくは２５−
３７℃である。培養は以上述べた条件をベナノマイシン
Ｃ生産菌の性質に応じて適宜選択して行うことができる
。
（ハ）ベナノマイシンＣの
本発明によって得られるベナノマイシンＣの培養物から
の採取に当たっては、その性状を利用した通常の分離手
段、例えば、溶剤抽出法、イオン交換樹脂法、吸着また
は分配カラムクロマト法、ゲルろ適法、透析法、沈澱法
等を単独でまたは適宜組み合わせて抽出精製することが
できる。例えば、ベナノマイシンＣは、培養菌体中から
はアセトン−水またはメタノール−水で抽出される。培
養液中に蓄積されたベナノマイシンＣは、合成吸着剤で
あるダイヤイオンＨＰ−２０（三菱化成社製）等に吸着
される。また、水と混ざらない有機溶剤、例えば、ブタ
ノール、酢酸エチル等で抽出すればベナノマイシンＣは
有機溶剤層に抽出される。
の採取に当たっては、その性状を利用した通常の分離手
段、例えば、溶剤抽出法、イオン交換樹脂法、吸着また
は分配カラムクロマト法、ゲルろ適法、透析法、沈澱法
等を単独でまたは適宜組み合わせて抽出精製することが
できる。例えば、ベナノマイシンＣは、培養菌体中から
はアセトン−水またはメタノール−水で抽出される。培
養液中に蓄積されたベナノマイシンＣは、合成吸着剤で
あるダイヤイオンＨＰ−２０（三菱化成社製）等に吸着
される。また、水と混ざらない有機溶剤、例えば、ブタ
ノール、酢酸エチル等で抽出すればベナノマイシンＣは
有機溶剤層に抽出される。
ベナノマイシンＣをさらに精製するには、シリカゲル（
ワコーゲルＣ−３００、和光純薬工業社製等）、アルミ
ナ等の吸着剤やセファデックスＬＨ−２０（ファルマシ
ア社製）等を用いるクロマトグラフィーを行うとよい。
ワコーゲルＣ−３００、和光純薬工業社製等）、アルミ
ナ等の吸着剤やセファデックスＬＨ−２０（ファルマシ
ア社製）等を用いるクロマトグラフィーを行うとよい。
このようにして培養物中に生産されたベナノマイシンＣ
は遊離の形、すなわちベナノマイシンＣそれ自体として
分離することができ、またベナノマイシンＣを含有する
溶液またはその濃縮液を塩基、すなわち例えば水酸化ナ
トリウム、水酸化カノウム等のアルカリ金属化合物、水
酸化カルシウム、水散化マグネシウム等のアルカリ土類
金属化合物、アンモニウム塩等のような無機塩基、エタ
ノールアミン、トリエチルアミン、ジシクロヘキシルア
ミン等の有機塩基により、各工程の操作中例えば抽出、
分離または精製の各工程の操作中に処理した場合、ベナ
ノマイシンＣは対応するその塩類の形に変化し、分離さ
れる。また別にこのようにして製造されたベナノマイシ
ンＣの塩類は、常法により遊離の形、ベナノマイシンＣ
それ自体に変化させることができる。さらに遊離の形で
得られたベナノマイシンＣを前記塩基により常法で対応
するその塩類に変化させてもよい。従ってベナノマイシ
ンＣと同様に前記のようなその塩類も、この発明の範囲
内に包含されるものとする。
は遊離の形、すなわちベナノマイシンＣそれ自体として
分離することができ、またベナノマイシンＣを含有する
溶液またはその濃縮液を塩基、すなわち例えば水酸化ナ
トリウム、水酸化カノウム等のアルカリ金属化合物、水
酸化カルシウム、水散化マグネシウム等のアルカリ土類
金属化合物、アンモニウム塩等のような無機塩基、エタ
ノールアミン、トリエチルアミン、ジシクロヘキシルア
ミン等の有機塩基により、各工程の操作中例えば抽出、
分離または精製の各工程の操作中に処理した場合、ベナ
ノマイシンＣは対応するその塩類の形に変化し、分離さ
れる。また別にこのようにして製造されたベナノマイシ
ンＣの塩類は、常法により遊離の形、ベナノマイシンＣ
それ自体に変化させることができる。さらに遊離の形で
得られたベナノマイシンＣを前記塩基により常法で対応
するその塩類に変化させてもよい。従ってベナノマイシ
ンＣと同様に前記のようなその塩類も、この発明の範囲
内に包含されるものとする。
以下に本発明のベナノマイシンＣの製造について実施例
を示すが、ベナノマイシンＣの性状が本発明によって明
らかにされたので、それらの性状にもとずきベナノマイ
シンＣの製造法を種々考案することができる。従って本
発明は実施例に限定されるものではなく、実施例の修飾
手段は勿論。
を示すが、ベナノマイシンＣの性状が本発明によって明
らかにされたので、それらの性状にもとずきベナノマイ
シンＣの製造法を種々考案することができる。従って本
発明は実施例に限定されるものではなく、実施例の修飾
手段は勿論。
本発明によって明らかにされたベナノマイシンＣの性状
にもとずいて公知の手段を施してベナノマイシンＣを生
産、濃縮、抽出、精製する方法をすべて包括する。
にもとずいて公知の手段を施してベナノマイシンＣを生
産、濃縮、抽出、精製する方法をすべて包括する。
尖１涯よ
寒天斜面培地に培養した放線菌に属する阿旧９３−１６
Ｆ４株（微工研菌寄第９５２９号）をスターチ１．０％
、大豆粉３．０％、ＫＭ７２０．０１％、アデカノール
０．０１％を含む液体培地（５００ｍＱ容坂ロフラスコ
中８０ｍＱ、。
Ｆ４株（微工研菌寄第９５２９号）をスターチ１．０％
、大豆粉３．０％、ＫＭ７２０．０１％、アデカノール
０．０１％を含む液体培地（５００ｍＱ容坂ロフラスコ
中８０ｍＱ、。
殺菌前ｐＨ７，０）に接種し、２８℃で３日間振盪培養
（１３５ｒｐｍ） して第１種培養を得た。この種培養
各３−を上記と同様の培地に接種し、同様の条件で３日
間振盪培養して第２種培養を得た。この種培養２Ｌを１
２０℃で１５分間殺菌した上記組成の培地５０Ｌを含む
１００Ｌ容培養槽に接種し、２８℃で２日間、通気量５
０Ｌ／分、２００ｒｐ＋ａで通気攪拌培養して第３種培
養を得た。予め１２５℃で３０分間殺菌したグリセリン
２．０％、ニスサンミート１．５％、 Ｋ、ＨＰＯ４０
，０２５％。
（１３５ｒｐｍ） して第１種培養を得た。この種培養
各３−を上記と同様の培地に接種し、同様の条件で３日
間振盪培養して第２種培養を得た。この種培養２Ｌを１
２０℃で１５分間殺菌した上記組成の培地５０Ｌを含む
１００Ｌ容培養槽に接種し、２８℃で２日間、通気量５
０Ｌ／分、２００ｒｐ＋ａで通気攪拌培養して第３種培
養を得た。予め１２５℃で３０分間殺菌したグリセリン
２．０％、ニスサンミート１．５％、 Ｋ、ＨＰＯ４０
，０２５％。
ＫＨ，ＰＯ４０，１１２５％、ＣｏＣ１，・６Ｈ，ＯＯ
，０００５％、ＫＭ ７２０．０３％、アデカノール０
．０１％（殺菌前ｐＨ６，２）からなる３００Ｌの生産
培地を含む５７０Ｌ容培養槽に前記第３種培養１２Ｌを
接種し、２８℃で７日間、培養初期２４時間の通気量１
５０Ｌ／分、２４時間以降３００Ｌ／分、３００ｒｐｍ
で通気攪拌培養した。培養終了後、濾過助剤として珪藻
土を加えて濾過し、濾液２５ＯＬ（ｐＨ６，０）を得た
。
，０００５％、ＫＭ ７２０．０３％、アデカノール０
．０１％（殺菌前ｐＨ６，２）からなる３００Ｌの生産
培地を含む５７０Ｌ容培養槽に前記第３種培養１２Ｌを
接種し、２８℃で７日間、培養初期２４時間の通気量１
５０Ｌ／分、２４時間以降３００Ｌ／分、３００ｒｐｍ
で通気攪拌培養した。培養終了後、濾過助剤として珪藻
土を加えて濾過し、濾液２５ＯＬ（ｐＨ６，０）を得た
。
この培養濾液中の活性物質はダイヤイオンＨＰ−２０（
１５Ｌ）に吸着させ、水（１００Ｌ）および５０％メタ
ノール（４５Ｌ）で洗浄後、７０％メタノール（４５Ｌ
）、次いでメタノール（９０Ｌ）で溶出して第１分画（
５３Ｌ）、第２分画（３８Ｌ）および第３分画（２７Ｌ
）を得た。ベナノマイシンＡを含む第１分画を減圧上濃
縮して３Ｌとし、ＩＮ塩酸を用いてｐＨ３，５に調整す
ると赤色沈澱が得られた。この沈澱を濾取し、減圧上乾
燥すると、主としてベナノマイシンＡを含む褐色粗粉末
（１５２ｇ）が得られた。この粗粉末（＋ ５０ｇ）を
ジメチルホルムアミド（６００＋ｎＲ）に溶解し、デシ
ケータ−中で室温３日間水蒸気を飽和させると、結晶性
沈澱が析出した。この沈澱を濾取し、減圧上乾燥すると
ベナノマイシンＡ・ジメチルホルムアミド・ツルベート
（２９ｇ）が得られた。第２分画も第１分画と同様に処
理し、ベナノマイシンＡ・ジメチルホルムアミド・ツル
ベート（１４ｇ）を得た。
１５Ｌ）に吸着させ、水（１００Ｌ）および５０％メタ
ノール（４５Ｌ）で洗浄後、７０％メタノール（４５Ｌ
）、次いでメタノール（９０Ｌ）で溶出して第１分画（
５３Ｌ）、第２分画（３８Ｌ）および第３分画（２７Ｌ
）を得た。ベナノマイシンＡを含む第１分画を減圧上濃
縮して３Ｌとし、ＩＮ塩酸を用いてｐＨ３，５に調整す
ると赤色沈澱が得られた。この沈澱を濾取し、減圧上乾
燥すると、主としてベナノマイシンＡを含む褐色粗粉末
（１５２ｇ）が得られた。この粗粉末（＋ ５０ｇ）を
ジメチルホルムアミド（６００＋ｎＲ）に溶解し、デシ
ケータ−中で室温３日間水蒸気を飽和させると、結晶性
沈澱が析出した。この沈澱を濾取し、減圧上乾燥すると
ベナノマイシンＡ・ジメチルホルムアミド・ツルベート
（２９ｇ）が得られた。第２分画も第１分画と同様に処
理し、ベナノマイシンＡ・ジメチルホルムアミド・ツル
ベート（１４ｇ）を得た。
第１分画より得られたベナノマイシンＡ・ジメチルホル
ムアミド・ツルベート（１ｇ）をジメチルスルホキシド
（５＋＋Ｑ）に溶解し、メタノール（３００ｍＱ）中に
攪拌上滴下して、さらに１０分間攪拌すると赤褐色沈澱
が析出した。この沈澱を濾取し、減圧下５０℃で２日間
乾燥して純粋なベナノマイシンＡの赤褐色粉末（９３５
ｍｇ）を得た。
ムアミド・ツルベート（１ｇ）をジメチルスルホキシド
（５＋＋Ｑ）に溶解し、メタノール（３００ｍＱ）中に
攪拌上滴下して、さらに１０分間攪拌すると赤褐色沈澱
が析出した。この沈澱を濾取し、減圧下５０℃で２日間
乾燥して純粋なベナノマイシンＡの赤褐色粉末（９３５
ｍｇ）を得た。
第３分画を減圧上濃縮して１．５Ｌとし、ＩＮ塩酸を用
いてｐｌ＋ ３．５に調整すると赤色沈澱が得られた。
いてｐｌ＋ ３．５に調整すると赤色沈澱が得られた。
この沈澱を濾取し、減圧上乾燥するとベナノマイシンＢ
およびＣを含む褐色粗粉末（９９ｇ ）が得られた。こ
の粗粉末（１ｇ）をジメチルホルムアミド（１０ｍＱ）
に加温（４０’Ｃ）溶解し、ジメチルホルムアミドで充
填したセファデックスＬＨ−２０（比）のカラムにかけ
、ジメチルホルムアミドで展開した。活性物質を含む分
画Ｎα６４−７２（１分画６＋Ｊ）を集め、減圧上濃縮
乾固するとベナノマイシンＢ・ジメチルホルムアミド・
ツルベートおよびベナノマイシンＣ・ジメチルホルムア
ミド・ツルベートを含む褐色粗粉末（６５７ｍｇ）が得
られた。この粗粉末をメタノール（１００＋ｎＲ）に溶
解し、ＩＮ塩酸（１ｍｆｌ）を加えた後、減圧上濃縮乾
固した。得られた褐色粗粉末をジメチルスルホキシド（
３ｍ（１）に溶解し、攪拌下クロロホルム（２００ｍＱ
）中に滴下し、さらに２０分間攪拌すると赤褐色沈澱が
析出した。この沈殿を濾取し、減圧上乾燥して純粋なベ
ナノマイシンＢ塩酸塩（５６５ｍｇ）を得た。
およびＣを含む褐色粗粉末（９９ｇ ）が得られた。こ
の粗粉末（１ｇ）をジメチルホルムアミド（１０ｍＱ）
に加温（４０’Ｃ）溶解し、ジメチルホルムアミドで充
填したセファデックスＬＨ−２０（比）のカラムにかけ
、ジメチルホルムアミドで展開した。活性物質を含む分
画Ｎα６４−７２（１分画６＋Ｊ）を集め、減圧上濃縮
乾固するとベナノマイシンＢ・ジメチルホルムアミド・
ツルベートおよびベナノマイシンＣ・ジメチルホルムア
ミド・ツルベートを含む褐色粗粉末（６５７ｍｇ）が得
られた。この粗粉末をメタノール（１００＋ｎＲ）に溶
解し、ＩＮ塩酸（１ｍｆｌ）を加えた後、減圧上濃縮乾
固した。得られた褐色粗粉末をジメチルスルホキシド（
３ｍ（１）に溶解し、攪拌下クロロホルム（２００ｍＱ
）中に滴下し、さらに２０分間攪拌すると赤褐色沈澱が
析出した。この沈殿を濾取し、減圧上乾燥して純粋なベ
ナノマイシンＢ塩酸塩（５６５ｍｇ）を得た。
ろ液は約５ｍＱまで減圧濃縮し、セファデックスＬＨ−
２０（６００ｍＱ）の上部に載せ、メタノールを展開溶
媒とするクロマトグラフィーを行った。ＴＬＣ上で単一
の赤色分画を濃縮乾固すると、ベナノマイシンＣ（３８
，５１１１ｇ）が赤褐色粉末として得られた。
２０（６００ｍＱ）の上部に載せ、メタノールを展開溶
媒とするクロマトグラフィーを行った。ＴＬＣ上で単一
の赤色分画を濃縮乾固すると、ベナノマイシンＣ（３８
，５１１１ｇ）が赤褐色粉末として得られた。
グルコシダーゼに対する５０％阻害濃度は６０μａ／ｍ
ｕであった。
ｕであった。
第１図：ベナノマイシンＣのメタノール中（２０ｇｇ／
耐、実線で示す）、０．ＩＮ塩酸−メタノール中（２０
ｔｔ ｇ／ｍＱ、破線で示す）および０．ＩＮ水酸化ナ
トリウム−メタノール中（２０ｇｇ／ａ＋Ｑ、−点鎖線
で示す）での紫外部および可視部吸収スペクトルを示す
。 第２図：ベナノマイシンＣの臭化カリウム錠での赤外部
吸収スペクトルを示す。 第３図：ベナノマイシンＣの重ジメチルスルホキシド溶
液中での４００Ｍ）Ｉｚ水素核核磁気共鳴スペクトルを
示す。 第４図：ベナノマイシンＣの重ジメチルスルホキシド溶
液中での１００Ｍ）ｌｚ炭素核核磁気共鳴スペクトルを
示す。
耐、実線で示す）、０．ＩＮ塩酸−メタノール中（２０
ｔｔ ｇ／ｍＱ、破線で示す）および０．ＩＮ水酸化ナ
トリウム−メタノール中（２０ｇｇ／ａ＋Ｑ、−点鎖線
で示す）での紫外部および可視部吸収スペクトルを示す
。 第２図：ベナノマイシンＣの臭化カリウム錠での赤外部
吸収スペクトルを示す。 第３図：ベナノマイシンＣの重ジメチルスルホキシド溶
液中での４００Ｍ）Ｉｚ水素核核磁気共鳴スペクトルを
示す。 第４図：ベナノマイシンＣの重ジメチルスルホキシド溶
液中での１００Ｍ）ｌｚ炭素核核磁気共鳴スペクトルを
示す。
Claims (1)
- 【特許請求の範囲】 １、次式 ▲数式、化学式、表等があります▼（ I ） で表わされるα−グルコシダーゼ阻害物質ベナノマイシ
ンＣおよびその塩。 ２、放線菌（Ａｃｔｉｎｏｍｙｃｅｔｅ）に属するベナ
ノマイシンＣ生産菌を培養し、その培養物からベナノマ
イシンＣを採取することを特徴とするベナノマイシンＣ
の製造法。
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP63232185A JPH0283351A (ja) | 1988-09-19 | 1988-09-19 | 新規α‐グルコシダーゼ阻害物質ベナノマイシンＣ及びその製造法 |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP63232185A JPH0283351A (ja) | 1988-09-19 | 1988-09-19 | 新規α‐グルコシダーゼ阻害物質ベナノマイシンＣ及びその製造法 |
Publications (1)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| JPH0283351A true JPH0283351A (ja) | 1990-03-23 |
Family
ID=16935336
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| JP63232185A Pending JPH0283351A (ja) | 1988-09-19 | 1988-09-19 | 新規α‐グルコシダーゼ阻害物質ベナノマイシンＣ及びその製造法 |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| JP (1) | JPH0283351A (ja) |
Cited By (2)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| US5091418A (en) * | 1990-09-28 | 1992-02-25 | Bristol-Myers Squibb Company | Novel alpha-glucosidase inhibitor, pradimicin Q |
| US5217877A (en) * | 1990-09-28 | 1993-06-08 | Bristol-Myers Squibb Company | Process for the preparation of α-glucosidase inhibitor, pradimicin Q |
-
1988
- 1988-09-19 JP JP63232185A patent/JPH0283351A/ja active Pending
Cited By (2)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| US5091418A (en) * | 1990-09-28 | 1992-02-25 | Bristol-Myers Squibb Company | Novel alpha-glucosidase inhibitor, pradimicin Q |
| US5217877A (en) * | 1990-09-28 | 1993-06-08 | Bristol-Myers Squibb Company | Process for the preparation of α-glucosidase inhibitor, pradimicin Q |
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