JPH0283394A - Ｓ−アデノシル−ｌ−ホモシステインの精製法 - Google Patents
Ｓ−アデノシル−ｌ−ホモシステインの精製法Info
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- JPH0283394A JPH0283394A JP23553388A JP23553388A JPH0283394A JP H0283394 A JPH0283394 A JP H0283394A JP 23553388 A JP23553388 A JP 23553388A JP 23553388 A JP23553388 A JP 23553388A JP H0283394 A JPH0283394 A JP H0283394A
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Abstract
(57)【要約】本公報は電子出願前の出願データであるた
め要約のデータは記録されません。
め要約のデータは記録されません。
Description
【発明の詳細な説明】
本発明はＳ−アデノシル−Ｌ−ホモシステイン（以下、
ＳＡＨと略称する）の精製法に関し、さらに詳しくは、
夾雑物を含む粗ＳＡＨ含有液より高純度のＳＡＨを効率
よく単離精製する方法に関する。
ＳＡＨと略称する）の精製法に関し、さらに詳しくは、
夾雑物を含む粗ＳＡＨ含有液より高純度のＳＡＨを効率
よく単離精製する方法に関する。
ＳＡＨは、生体内においてＳ−アデノシル−Ｌ−メチオ
ニン（以下、ＳＡＭと略称する）が関与するメチル基供
与反応で生じる重要な生理活性物質である。而して近時
かかるＳＡＨに鎮静剤、睡眠誘発剤などとしての効果が
見出されており、その大量生産が期待されている。
ニン（以下、ＳＡＭと略称する）が関与するメチル基供
与反応で生じる重要な生理活性物質である。而して近時
かかるＳＡＨに鎮静剤、睡眠誘発剤などとしての効果が
見出されており、その大量生産が期待されている。
ＳＡＨの精製法としては、■粗ＳＡＨ含有液にリンタン
グステン酸を加えてＳＡＨを沈澱させる方法（Ｍｅｔｈ
ｏｄｓ ｉｎ ＥＮＺＹＭＯＬＯＧＹ ６，５７３．１
９６３）、■強酸性陽イオン交換樹脂にＳＡＨを吸着さ
せた後、硫酸で溶出させ、溶出液にリンタングステン酸
を加えてＳＡＨを沈澱させる方法（Ｊ、Ｎｕｔ、ｒ。
グステン酸を加えてＳＡＨを沈澱させる方法（Ｍｅｔｈ
ｏｄｓ ｉｎ ＥＮＺＹＭＯＬＯＧＹ ６，５７３．１
９６３）、■強酸性陽イオン交換樹脂にＳＡＨを吸着さ
せた後、硫酸で溶出させ、溶出液にリンタングステン酸
を加えてＳＡＨを沈澱させる方法（Ｊ、Ｎｕｔ、ｒ。
Ｓｃｉ、Ｖｉｔａｍｉｎｏｌ、、 ２３．７３．１９７
７）、■活性炭にＳＡＨを吸着させた後、エタノール／
水／濃アンモニア水（５０：５０：１）で溶出させ、溶
出液を減圧上濃縮して濃縮物のｐＨを＃酸で７に調節し
た後、ＳＡＨを０℃で品出させる方法（特公昭４５−３
７５３６号）などが知られている。
７）、■活性炭にＳＡＨを吸着させた後、エタノール／
水／濃アンモニア水（５０：５０：１）で溶出させ、溶
出液を減圧上濃縮して濃縮物のｐＨを＃酸で７に調節し
た後、ＳＡＨを０℃で品出させる方法（特公昭４５−３
７５３６号）などが知られている。
しかしながら、■の方法は沈澱したＳＡＨの純度が低く
、さらに複雑な再結晶工程が必要であり、一方、■及び
■の方法ではＳＡＨの回収率が低く、またＳＡＨと着色
成分等の夾雑物との分離が不完全で医薬として使用しう
るような高純度のＳＡＨが得られないという欠点を有し
ていた。
、さらに複雑な再結晶工程が必要であり、一方、■及び
■の方法ではＳＡＨの回収率が低く、またＳＡＨと着色
成分等の夾雑物との分離が不完全で医薬として使用しう
るような高純度のＳＡＨが得られないという欠点を有し
ていた。
そこで本発明者らは従来技術におけるこれらの欠点を改
良すべく鋭意検討を進めた結果、粗ＳＡＨ含有液からＳ
ＡＨを単離精製するにあたり、弱酸性陽イオン交換樹脂
による処理と多孔性合成樹脂吸着剤による処理とを組み
合わせることがきわめて効果的であることを見出し、本
発明を完成した。
良すべく鋭意検討を進めた結果、粗ＳＡＨ含有液からＳ
ＡＨを単離精製するにあたり、弱酸性陽イオン交換樹脂
による処理と多孔性合成樹脂吸着剤による処理とを組み
合わせることがきわめて効果的であることを見出し、本
発明を完成した。
すなわち本発明の目的は、高純度のＳＡＨを効率よく単
離精製する方法を提供することにあり、かかる本発明の
目的は、粗Ｓ Ａ Ｈ含有液を（ａ）弱酸性陽イオン交
換樹脂と（ｂ）多孔性合成樹脂吸着剤による処理工程を
任意の順序でそれぞれ一度以上結合した精製工程に供給
し、精製することによって達成される。
離精製する方法を提供することにあり、かかる本発明の
目的は、粗Ｓ Ａ Ｈ含有液を（ａ）弱酸性陽イオン交
換樹脂と（ｂ）多孔性合成樹脂吸着剤による処理工程を
任意の順序でそれぞれ一度以上結合した精製工程に供給
し、精製することによって達成される。
本発明において用いられる粗ＳＡＨ含有液の製造法は特
に限定されるものではなく、例えばアデノシンとホモシ
スティンよりＳＡＨを合成する能力を有する微生物の菌
体の存在下にアデノシンとホモシスティンを水性媒体中
で接触させて反応せしめ、ＳＡＨを製造する方法（特開
昭５９−１４６５９５号）、ＳＡＭから酵素的に脱メチ
ル化して製造する方法（Ｊ、Ｂｉｏｌ、Ｃｈｅｍ、、
２４０．２５１２．１９６５） 、 あるいはＳＡ
Ｍから化学的に脱メチル化して製造する方法（特公昭４
５−３７５３６号）などが例示される。
に限定されるものではなく、例えばアデノシンとホモシ
スティンよりＳＡＨを合成する能力を有する微生物の菌
体の存在下にアデノシンとホモシスティンを水性媒体中
で接触させて反応せしめ、ＳＡＨを製造する方法（特開
昭５９−１４６５９５号）、ＳＡＭから酵素的に脱メチ
ル化して製造する方法（Ｊ、Ｂｉｏｌ、Ｃｈｅｍ、、
２４０．２５１２．１９６５） 、 あるいはＳＡ
Ｍから化学的に脱メチル化して製造する方法（特公昭４
５−３７５３６号）などが例示される。
本発明においては、かかる粗ＳＡＨ含有液を処理するに
際して（ａ）弱酸性陽イオン交換樹脂による処理と（ｂ
）多孔性合成樹脂吸着剤による処理とを任意の組み合わ
せにおいてそれぞれ一度以上行うことが必須の要件であ
る。
際して（ａ）弱酸性陽イオン交換樹脂による処理と（ｂ
）多孔性合成樹脂吸着剤による処理とを任意の組み合わ
せにおいてそれぞれ一度以上行うことが必須の要件であ
る。
ここで、前記（ａ）の処理は次のようにして行われる。
すなわち、粗ＳＡＨ含有液のｐＨを通常３．５〜８、好
ましくは５〜７に調整する。この際、粗ＳＡＨ含有液の
ＰＨが上記の範囲以外にあるとＳＡＨがイオン交換樹脂
に保持吸着され難くなる。ｐＨの調整法は特に限定され
るものではないが、水に離溶性または不溶性の沈澱を形
成する酸、アルカリの組み合わせを用いるか、あるいは
陰イオン交換樹脂（ＯＲ−型）を用いる方法が好ましい
。
ましくは５〜７に調整する。この際、粗ＳＡＨ含有液の
ＰＨが上記の範囲以外にあるとＳＡＨがイオン交換樹脂
に保持吸着され難くなる。ｐＨの調整法は特に限定され
るものではないが、水に離溶性または不溶性の沈澱を形
成する酸、アルカリの組み合わせを用いるか、あるいは
陰イオン交換樹脂（ＯＲ−型）を用いる方法が好ましい
。
次いで、粗ＳＡＨ含有液を弱酸性陽イオン交換樹脂に接
触させ陽電荷をもったＳＡＨを選択的に吸着させるとと
もに、中性及び陰電荷をもった夾雑物を除去する。
触させ陽電荷をもったＳＡＨを選択的に吸着させるとと
もに、中性及び陰電荷をもった夾雑物を除去する。
用いられる弱酸性陽イオン交換樹脂はイオン交換基とし
てカルボン酸基を有するものであればよく、具体的な例
としてはアンバーライトＩＲＣ−５０、ＩＲＣ−８４（
ローム・アンド・ハース社製）、ダイヤイオンＷＫ２０
（三菱化成社製）などが挙げられる。この際、樹脂は「
形、Ｎａ”形、ＮＨ４” 形のいずれでもよいが、好ま
しくはＨ＋形を用いる。
てカルボン酸基を有するものであればよく、具体的な例
としてはアンバーライトＩＲＣ−５０、ＩＲＣ−８４（
ローム・アンド・ハース社製）、ダイヤイオンＷＫ２０
（三菱化成社製）などが挙げられる。この際、樹脂は「
形、Ｎａ”形、ＮＨ４” 形のいずれでもよいが、好ま
しくはＨ＋形を用いる。
また接触法はバッチ法、カラム法のいずれでもよいが、
操作性、不純物除去の容易さの点でカラム法がより好ま
しい。
操作性、不純物除去の容易さの点でカラム法がより好ま
しい。
次いでイオン交換樹脂に吸着されたＳＡＨは通常ｐＨ３
，０以下、好ましくは０．２〜２．０の無機酸または有
機酸の水溶液で分別溶出することによって分離される。
，０以下、好ましくは０．２〜２．０の無機酸または有
機酸の水溶液で分別溶出することによって分離される。
用いられる酸は特に限定されるものではなく、例えば塩
酸、硫酸、リン酸、＃酸、Ｐ−トルエンスルホン酸など
が例示される。また必要に応じて、ＳＡＨの分別溶出に
先立って水または希薄な酸水溶液（例えばＰＨ３，５以
上）で洗浄することにより微量存在する不純物を除去す
ることもできる。
酸、硫酸、リン酸、＃酸、Ｐ−トルエンスルホン酸など
が例示される。また必要に応じて、ＳＡＨの分別溶出に
先立って水または希薄な酸水溶液（例えばＰＨ３，５以
上）で洗浄することにより微量存在する不純物を除去す
ることもできる。
一方、前記（ｂ）の処理は次のようにしておこなわれる
。すなわち、粗ＳＡＨ含有液のｐＨを必要に応じて、好
ましくは中性付近に調整した後、多孔性合成樹脂吸着剤
と接触させる。この際、ｐＨの調整法や吸着剤との接触
法は前記（ａ）と同様の方法を用いることができる。か
かる吸着剤との接触により色素が選択的に吸着される。
。すなわち、粗ＳＡＨ含有液のｐＨを必要に応じて、好
ましくは中性付近に調整した後、多孔性合成樹脂吸着剤
と接触させる。この際、ｐＨの調整法や吸着剤との接触
法は前記（ａ）と同様の方法を用いることができる。か
かる吸着剤との接触により色素が選択的に吸着される。
また本発明で用いられる多孔性合成樹脂吸着剤は水不溶
性で巨大網状構造を有するものであり、その具体例とし
てスチレン−ジビニルベンゼン共重合体を母核とする非
極性型吸着剤、例えばアンバーライトＸＡＤ−２，ＸＡ
Ｄ−４（ローム・アンド・ハース社製）、ダイヤイオン
ＨＰ−１０，ＨＰ−２０，ＨＰ−３０，ＨＰ−４０，Ｈ
Ｐ−５０（三菱化成社製）、セパビーズＳ Ｐ −２０
６，Ｓ Ｐ −２０７（三菱化成社製）などや、アクリ
ル酸エステル及び／またはメタクリル酸エステルの重合
体またはこれらの単量体とスチレン、ジビニルベンゼン
などのごとき非極性単量体との共重合体を母核とする中
間極性型吸着剤、例えばアンバーライトＸＡＤ−７、Ｘ
ＡＤ−８（ローム・アンド・ハース社製）、ダイヤイオ
ンＨＰ−２ＭＧ（三菱化成社製）などがあげられる。こ
れらは所望により適宜併用することができる。
性で巨大網状構造を有するものであり、その具体例とし
てスチレン−ジビニルベンゼン共重合体を母核とする非
極性型吸着剤、例えばアンバーライトＸＡＤ−２，ＸＡ
Ｄ−４（ローム・アンド・ハース社製）、ダイヤイオン
ＨＰ−１０，ＨＰ−２０，ＨＰ−３０，ＨＰ−４０，Ｈ
Ｐ−５０（三菱化成社製）、セパビーズＳ Ｐ −２０
６，Ｓ Ｐ −２０７（三菱化成社製）などや、アクリ
ル酸エステル及び／またはメタクリル酸エステルの重合
体またはこれらの単量体とスチレン、ジビニルベンゼン
などのごとき非極性単量体との共重合体を母核とする中
間極性型吸着剤、例えばアンバーライトＸＡＤ−７、Ｘ
ＡＤ−８（ローム・アンド・ハース社製）、ダイヤイオ
ンＨＰ−２ＭＧ（三菱化成社製）などがあげられる。こ
れらは所望により適宜併用することができる。
本発明においては、かかる（ａ＞、 （ｂ）の処理がそ
れぞれ一度以上実施される。処理のＩＩＩＩ序は適宜組
み合せればよく、その具体例として■（ａ）→（ｂ）、
■（ｂ）→（ａ）、■（ａ）→（ｂ）→（ａ）、■（ｂ
）→（ａ）→（ｂ）などが挙げられ、さらに必要に応じ
て前記（ａ）、（ｂ）の処理工程を付加することができ
る。しかし、処理工程が増すにつれて工程が複雑化し経
済性が低下するので、通常は前記４種の組み合せが選択
される。
れぞれ一度以上実施される。処理のＩＩＩＩ序は適宜組
み合せればよく、その具体例として■（ａ）→（ｂ）、
■（ｂ）→（ａ）、■（ａ）→（ｂ）→（ａ）、■（ｂ
）→（ａ）→（ｂ）などが挙げられ、さらに必要に応じ
て前記（ａ）、（ｂ）の処理工程を付加することができ
る。しかし、処理工程が増すにつれて工程が複雑化し経
済性が低下するので、通常は前記４種の組み合せが選択
される。
本発明においては、かかる精製工程から溶出するＳＡＨ
溶出画分を減圧濃縮或いは逆浸透膜を用いる方法等で濃
縮した後、低温下に静置してＳＡＨを品出させる。しか
る後、濾過或いは遠心分離によりＳＡＨを回収し、凍結
乾燥或いはスプレー乾燥、風乾等の方法で水分を除去す
ることによりＳＡＨの結晶粉末を得ることができる。ま
た、必要に応じてＳＡＨ結晶を熱水に再溶解した後低温
下で再結晶せしめることでさらにＳＡＨの純度を高める
ことができる。
溶出画分を減圧濃縮或いは逆浸透膜を用いる方法等で濃
縮した後、低温下に静置してＳＡＨを品出させる。しか
る後、濾過或いは遠心分離によりＳＡＨを回収し、凍結
乾燥或いはスプレー乾燥、風乾等の方法で水分を除去す
ることによりＳＡＨの結晶粉末を得ることができる。ま
た、必要に応じてＳＡＨ結晶を熱水に再溶解した後低温
下で再結晶せしめることでさらにＳＡＨの純度を高める
ことができる。
また本発明で用いる弱酸性イオン交換樹脂はＳＡＨを溶
出した段階でＨ°型に再生されているので特別の再生処
理は必ずしも必要でなく、水洗するだけで繰り返し使用
することができる。さらに合成吸着剤の再生は、例えば
５０％メタノール水溶液で洗浄したのち水洗を施すだけ
で容易に実施することができる。
出した段階でＨ°型に再生されているので特別の再生処
理は必ずしも必要でなく、水洗するだけで繰り返し使用
することができる。さらに合成吸着剤の再生は、例えば
５０％メタノール水溶液で洗浄したのち水洗を施すだけ
で容易に実施することができる。
かくして本発明によれば、再生の容易な処理手段によっ
て簡単な操作できわめて高純度のＳＡＨを効率よく取得
することができる。
て簡単な操作できわめて高純度のＳＡＨを効率よく取得
することができる。
以下に実施例を挙げて本発明をさらに具体的に説明する
。
。
なお、実施例におけるＳＡＨの定量は高速液体クロマト
グラフィー（日本分光製、ＴＲＩＲＯＴＡＲ−Ｖ型、カ
ラム： Ｃｏｓｍｏｃｉ１５Ｃ１８，Ｄｅｔｅｃｊｅｒ
：ＵＶ２６０ｎｍ ）を用いて行った。
グラフィー（日本分光製、ＴＲＩＲＯＴＡＲ−Ｖ型、カ
ラム： Ｃｏｓｍｏｃｉ１５Ｃ１８，Ｄｅｔｅｃｊｅｒ
：ＵＶ２６０ｎｍ ）を用いて行った。
実施例 １
グルコースＩｇ／ｄＲ、ペプトン１．５ｇ／ｃｌＲ１酵
母エキス０．３ｇ八２、Ｋ２ＨＰＯＡ０．３ｇ／ｄＱ、
ＮａＣ１０，２ｇ／ｄＲ１ＭｇＳＯ４・７ｔ（２００，
０２ｇ／ＪＲ１寒天２ｇ／ｄ９．からなる寒天斜面培地
（ｐ１１７．０）で２８℃、２４時間培養したシュード
モナス・プチダＩＦＯ１２９９６又はアルカリゲネス・
フェカリスＩＦ０１２６９９の１白金耳を、グルコース
Ｉｇ／ｃｌＲ、ペプトン１．５ｇ／ｄＱ、酵母エキス０
．３ｇ／ｃｌＱ、に２ＨＰＯ４０，３ｇ／ｃＢ！、Ｎａ
Ｃ１０，２ｇ／ｄＲ１ＭｇＳＯ＋ ・７１１２００．０
２ｇ／ｄΩからなり、ｐＨ７，０に調整、加熱滅菌した
液体培地５００ｍＲに植菌し、２８℃で４０時間振盪培
養を行った。遠心分離にて集菌し、０，１Ｍリン酸カリ
ウムバッファ（ＰＨ８，０）で洗浄した後、再び遠心分
離を行うことにより温潤菌体を得た。次いでシュードモ
ナス・プチダＩＦＯ１２９９６の湿潤菌体３ｇ及びアル
カリゲネス・フェカリスＩＦＯ１２６９９の湿潤菌体１
旺をアデノシン１０ｍＭ、 ＤＬ−ホモシステイン２
０ｍＭ、 リン酸カリウムバッファ（ｐＨ８，０）１
００ｍＭからなる基質溶液１００ｍ１ｌｌに懸濁し、３
７℃で７時間振盪して反応させた。次いで１００℃１０
分間加熱した後、蒸留水を加えて約３００ｍＱとし、遠
心分離により菌体残渣を除去してＳＡＭ １．２０ｇを
含むＳＡＨ含有液３００ｍＱ（ｐＨ７，５）を得た。
母エキス０．３ｇ八２、Ｋ２ＨＰＯＡ０．３ｇ／ｄＱ、
ＮａＣ１０，２ｇ／ｄＲ１ＭｇＳＯ４・７ｔ（２００，
０２ｇ／ＪＲ１寒天２ｇ／ｄ９．からなる寒天斜面培地
（ｐ１１７．０）で２８℃、２４時間培養したシュード
モナス・プチダＩＦＯ１２９９６又はアルカリゲネス・
フェカリスＩＦ０１２６９９の１白金耳を、グルコース
Ｉｇ／ｃｌＲ、ペプトン１．５ｇ／ｄＱ、酵母エキス０
．３ｇ／ｃｌＱ、に２ＨＰＯ４０，３ｇ／ｃＢ！、Ｎａ
Ｃ１０，２ｇ／ｄＲ１ＭｇＳＯ＋ ・７１１２００．０
２ｇ／ｄΩからなり、ｐＨ７，０に調整、加熱滅菌した
液体培地５００ｍＲに植菌し、２８℃で４０時間振盪培
養を行った。遠心分離にて集菌し、０，１Ｍリン酸カリ
ウムバッファ（ＰＨ８，０）で洗浄した後、再び遠心分
離を行うことにより温潤菌体を得た。次いでシュードモ
ナス・プチダＩＦＯ１２９９６の湿潤菌体３ｇ及びアル
カリゲネス・フェカリスＩＦＯ１２６９９の湿潤菌体１
旺をアデノシン１０ｍＭ、 ＤＬ−ホモシステイン２
０ｍＭ、 リン酸カリウムバッファ（ｐＨ８，０）１
００ｍＭからなる基質溶液１００ｍ１ｌｌに懸濁し、３
７℃で７時間振盪して反応させた。次いで１００℃１０
分間加熱した後、蒸留水を加えて約３００ｍＱとし、遠
心分離により菌体残渣を除去してＳＡＭ １．２０ｇを
含むＳＡＨ含有液３００ｍＱ（ｐＨ７，５）を得た。
このＳＡＷ含有液を弱酸性陽イオン交換樹脂アンバーラ
イトＩＲＣ−５０（Ｈ＋型）（ローム・アンド・ハース
社製） １００ｍＱを詰めたカラムに通しＳＡＨを保
持吸着させた。カラムを０．００２Ｎ＃Ｍ ４００ｍ１
で洗浄した後、０．ＩＮ硫酸でＳＡＨを分別溶出させＳ
Ａ、Ｈ溶出画分１１０艷を得た。このＳＡＨ溶出画分に
水酸化バリウムを加えてＰＨ７，０に調整し、生じた硫
酸バリウムの沈澱を吸引濾過により除去した後スチレン
−ジビニルベンゼン系合成樹脂吸着剤セパビーズ５Ｐ−
２０６（三菱化成社製） ２ｇを添加し、３０分間撹拌
しながら接触せしめた。次いで吸引濾過により合成樹脂
吸着剤を除去し濾過液を全容４〇−になるまで減圧濃縮
した後、５℃に２４時間放置してＳＡＨを晶出させ、こ
れを吸引濾過により回収し凍結乾燥して白色のＳＡＨ粉
末１．０９ｇを得た。
イトＩＲＣ−５０（Ｈ＋型）（ローム・アンド・ハース
社製） １００ｍＱを詰めたカラムに通しＳＡＨを保
持吸着させた。カラムを０．００２Ｎ＃Ｍ ４００ｍ１
で洗浄した後、０．ＩＮ硫酸でＳＡＨを分別溶出させＳ
Ａ、Ｈ溶出画分１１０艷を得た。このＳＡＨ溶出画分に
水酸化バリウムを加えてＰＨ７，０に調整し、生じた硫
酸バリウムの沈澱を吸引濾過により除去した後スチレン
−ジビニルベンゼン系合成樹脂吸着剤セパビーズ５Ｐ−
２０６（三菱化成社製） ２ｇを添加し、３０分間撹拌
しながら接触せしめた。次いで吸引濾過により合成樹脂
吸着剤を除去し濾過液を全容４〇−になるまで減圧濃縮
した後、５℃に２４時間放置してＳＡＨを晶出させ、こ
れを吸引濾過により回収し凍結乾燥して白色のＳＡＨ粉
末１．０９ｇを得た。
ＳＡＨの回収率及び純度を第１表に示した。
実施例 ２
実施例１と同様にしてＳＡＨ１，１５ｇを含むＳＡＨ含
有液３１５艷を得た。このＳＡＨ含有液を弱酸性陽イオ
ン交換樹脂アンバーライトＩＲＣ−８４（Ｈ＋型、ロー
ム・アンド・ハース社製） １００−を詰めたカラム
に通しＳＡＨを保持吸着させた。カラムを０．００２Ｎ
酢酸４００−で洗浄した後、 ０．ＩＮ塩酸でＳＡＨを
分別溶出させＳＡＨ溶出画分１３０−を得た。このＳＡ
Ｈ溶出画分を弱塩基性陰イオン交換樹脂アンバーライト
ＩＲＡ−４５（ＯＨ−型）でｐＨ６，８に調整後、スチ
レン−ジビニルベンゼン系合成樹脂吸着剤ダイヤイオン
ＨＰ−２０（三菱化成社製）５〇−を詰めたカラムに通
し、ＳＡＨを吸着させることなく通過させた。ＳＡＨを
含む両分を集め減圧濃縮で液量を４０−とし、５℃に２
４時間放置してＳＡＨを品出させ、これを吸引濾過によ
り回収し、凍結乾燥して白色のＳＡＨ粉末１．０４ｇを
得た。ＳＡＨの回収率及び純度を第１表に示した。
有液３１５艷を得た。このＳＡＨ含有液を弱酸性陽イオ
ン交換樹脂アンバーライトＩＲＣ−８４（Ｈ＋型、ロー
ム・アンド・ハース社製） １００−を詰めたカラム
に通しＳＡＨを保持吸着させた。カラムを０．００２Ｎ
酢酸４００−で洗浄した後、 ０．ＩＮ塩酸でＳＡＨを
分別溶出させＳＡＨ溶出画分１３０−を得た。このＳＡ
Ｈ溶出画分を弱塩基性陰イオン交換樹脂アンバーライト
ＩＲＡ−４５（ＯＨ−型）でｐＨ６，８に調整後、スチ
レン−ジビニルベンゼン系合成樹脂吸着剤ダイヤイオン
ＨＰ−２０（三菱化成社製）５〇−を詰めたカラムに通
し、ＳＡＨを吸着させることなく通過させた。ＳＡＨを
含む両分を集め減圧濃縮で液量を４０−とし、５℃に２
４時間放置してＳＡＨを品出させ、これを吸引濾過によ
り回収し、凍結乾燥して白色のＳＡＨ粉末１．０４ｇを
得た。ＳＡＨの回収率及び純度を第１表に示した。
実施例 ３
実施例１と同様にしてＳＡＨ１，０３ｇを含むＳＡＨ含
有液３００ｄを得た。このＳＡＨ含有液をスチレン−ジ
ビニルベンゼン系合成樹脂吸着剤アンバーライトＸＡＤ
−２（ローム・アンド・ハース社製） １００ｍ９を
詰めたカラムに通し、ＳＡＨを吸着させることなく通過
させた。次いでＳＡＨを含む画分を集め、弱酸性陽イオ
ン交換樹脂アンバー９４５丁ＲＣ−５０（Ｈ”型）（ロ
ーム・アンド・ハース社製） １００＋Ｔ１９を詰め
たカラムに通しＳＡＨを保持吸着させた。カラムを０．
００２Ｎ酢酸４００ｄで洗浄した後、０．ＩＮ硫酸でＳ
ＡＨを分別溶出させＳ Ａ Ｈ溶出画分１２０−を得た
。このＳＡＨ溶出画分に水酸化バリウムを加えてｐｉ（
７，０に調整し、吸引濾過により生じた硫酸バリウムの
沈澱を除いた濾液を全容５０艷になるまで減圧濃縮した
。濃縮液を５°Ｃに２４時間放置してＳＡＨを品出させ
、これを吸引濾過によ り回収し、凍Ｍ乾燥して白色の
ＳＡＨ粉末０．９４ｇを得た。ＳＡＨの回収率及び純度
を第１表に示した。
有液３００ｄを得た。このＳＡＨ含有液をスチレン−ジ
ビニルベンゼン系合成樹脂吸着剤アンバーライトＸＡＤ
−２（ローム・アンド・ハース社製） １００ｍ９を
詰めたカラムに通し、ＳＡＨを吸着させることなく通過
させた。次いでＳＡＨを含む画分を集め、弱酸性陽イオ
ン交換樹脂アンバー９４５丁ＲＣ−５０（Ｈ”型）（ロ
ーム・アンド・ハース社製） １００＋Ｔ１９を詰め
たカラムに通しＳＡＨを保持吸着させた。カラムを０．
００２Ｎ酢酸４００ｄで洗浄した後、０．ＩＮ硫酸でＳ
ＡＨを分別溶出させＳ Ａ Ｈ溶出画分１２０−を得た
。このＳＡＨ溶出画分に水酸化バリウムを加えてｐｉ（
７，０に調整し、吸引濾過により生じた硫酸バリウムの
沈澱を除いた濾液を全容５０艷になるまで減圧濃縮した
。濃縮液を５°Ｃに２４時間放置してＳＡＨを品出させ
、これを吸引濾過によ り回収し、凍Ｍ乾燥して白色の
ＳＡＨ粉末０．９４ｇを得た。ＳＡＨの回収率及び純度
を第１表に示した。
比較例
実施例１と同様にしてＳＡＨ１，１０ｇを含むＳＡＨ含
有液３００ｍＩＱを得た。このＳＡＨ含有液をクロマト
グラフ用活性炭５０ｍ９を詰めたカラムに通してＳＡＨ
を吸着させた。蒸留水２００ｍＱでカラムを洗浄した後
、エタノール／水／濃アンモニア水（６５：３５：２）
の混合溶媒を通してＳＡＨを溶出させ、ＳＡ Ｈ溶出画
分を得た。
有液３００ｍＩＱを得た。このＳＡＨ含有液をクロマト
グラフ用活性炭５０ｍ９を詰めたカラムに通してＳＡＨ
を吸着させた。蒸留水２００ｍＱでカラムを洗浄した後
、エタノール／水／濃アンモニア水（６５：３５：２）
の混合溶媒を通してＳＡＨを溶出させ、ＳＡ Ｈ溶出画
分を得た。
このＳＡＨ溶出画分を２０ｄまで減圧濃縮した後酢酸で
ｐ）１７．０に調整し、０°Ｃに４８時間放置してＳＡ
Ｈを品出させ、これを吸引濾過により回収し、凍結乾燥
してＳＡＨ粉末１．ＯＯｇを得た。ＳＡＨの回収率及び
純度を第１表に示した。
ｐ）１７．０に調整し、０°Ｃに４８時間放置してＳＡ
Ｈを品出させ、これを吸引濾過により回収し、凍結乾燥
してＳＡＨ粉末１．ＯＯｇを得た。ＳＡＨの回収率及び
純度を第１表に示した。
第 １ 表
注１； ＳＡＨ純度：高速液体クロマトグラフィー分析
において２６０ｎｍで検出されるＳＡＨ注２； ＳＡＨ
回収率：粗ＳＡＨ含有液中のＳＡＨ量に対する精製後の
結晶中のＳ Ａ Ｉ−（量の割合を高速液体クロマトグ
ラフィーによる定量値から計算した。
において２６０ｎｍで検出されるＳＡＨ注２； ＳＡＨ
回収率：粗ＳＡＨ含有液中のＳＡＨ量に対する精製後の
結晶中のＳ Ａ Ｉ−（量の割合を高速液体クロマトグ
ラフィーによる定量値から計算した。
この結果より、本発明による方法を用いれば公知の方法
と比べて高純度かつ色素による着色のないＳＡＨが高い
回収率で得られることが明らかである。
と比べて高純度かつ色素による着色のないＳＡＨが高い
回収率で得られることが明らかである。
Claims (1)
- １、粗Ｓ−アデノシル−Ｌ−ホモシステイン含有液を精
製工程に供給してＳ−アデノシル−Ｌ−ホモシステイン
を精製する方法において、前記精製工程が（ａ）弱酸性
陽イオン交換樹脂で処理する工程と（ｂ）多孔性合成樹
脂吸着剤で処理する工程を、それぞれ一度以上、任意の
順序で結合したものであることを特徴とするＳ−アデノ
シル−Ｌ−ホモシステインの精製法。
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP23553388A JPH0283394A (ja) | 1988-09-20 | 1988-09-20 | Ｓ−アデノシル−ｌ−ホモシステインの精製法 |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP23553388A JPH0283394A (ja) | 1988-09-20 | 1988-09-20 | Ｓ−アデノシル−ｌ−ホモシステインの精製法 |
Publications (1)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| JPH0283394A true JPH0283394A (ja) | 1990-03-23 |
Family
ID=16987386
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| JP23553388A Pending JPH0283394A (ja) | 1988-09-20 | 1988-09-20 | Ｓ−アデノシル−ｌ−ホモシステインの精製法 |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| JP (1) | JPH0283394A (ja) |
Cited By (1)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN108410751A (zh) * | 2018-02-05 | 2018-08-17 | 温州大学 | 一种粪产碱杆菌及其在偶氮染料降解脱色中的应用 |
-
1988
- 1988-09-20 JP JP23553388A patent/JPH0283394A/ja active Pending
Cited By (2)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN108410751A (zh) * | 2018-02-05 | 2018-08-17 | 温州大学 | 一种粪产碱杆菌及其在偶氮染料降解脱色中的应用 |
| CN108410751B (zh) * | 2018-02-05 | 2021-01-26 | 温州大学 | 一种粪产碱杆菌及其在偶氮染料降解脱色中的应用 |
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