JPH029869A - 新規化合物 - Google Patents

Abstract

(57)【要約】本公報は電子出願前の出願データであるた
め要約のデータは記録されません。

Description

【発明の詳細な説明】 本発明は、１群の新規なグルタミン酸、酸エステルおよ
び塩、それを製造するための方法および中間体、それを
含有する医薬組成物、ならびにその医療および農業での
使用に関する。

本発明者らのヨーロッパ特許出願第２６８３７７号には
、式 （式中　Ｒ１は水素、Ｃ１〜、アルキル、アセチルまた
はホルミルであり　Ｒ２訃よびＲ３は同種または異種で
あって水素まだはＣエル４アルキルであり、Ｒ４はＮＲ
Ｉ　ｌＲ１２であり、Ｒ１１、Ｒ１２、Ｒ５およびＲ６
は同種または異種であって水素、０１〜．アルキルまた
はＣ工〜、２アシルであシ、Ｒ）、Ｒ８、Ｒ９およびＲ
１０は同種または異種であって水素、−・口、０１〜。

ハロアルキル、Ｃエル４アルキルオｘｏ：ｃエル４アル
コキシであり、ｎは２．６．４またば５であり、ｍは０
または１〜乙の整数である）で示される構造的明瞭な１
群の新規置換グルタミン酸およびグルメミン酸エステル
まだはそ几らの塩が記載されている。

これらの化合物は、規律のない増殖および未分化細胞の
増殖を阻止できる抗新生物を有することが明らかにされ
ている。

このＥＰＡ　２６８３７７号は、本発明の優先日には未
公告であった。

本発明者らは、さらに別の１群のグルタミン酸が、同様
に上述の抗新生物活性を有することを発見した。この活
性は、以下に説明する細胞培養ヒト乳腺腺癌細胞に対す
る細胞毒性試験によって明らかにされた。

本発明はしだがって、式（［） （式中、ＲＬは水素であり　Ｒ２およびＲ３は同種また
は異種で、それぞれ水素または０１〜４アルキルであＱ
、Ｒ４ばＮＲ１ｌ　Ｒ１２であシ、Ｒ５、Ｒ６、Ｒ１１
およびＲ１２はそれぞれ水素であシ；ｍはＯであシ；ｎ
は６であってＲ７、Ｒ”　、Ｒ９訃よびＨ１０のひとつ
はクロロ、フルオロ、メチルもしくはメトキシであり、
残シは水素であるか、またはｎは４であってＲ７、Ｒａ
　、Ｒ９およびＲｌｏはそれぞれ水素である）で示され
る化合物およびその医薬的に許容される塩を提供する。

Ｒ２およびＲ３がＣ□〜４アルキルの場合の例にはメチ
ルおよびエチルが包含される。しかしながら、Ｒ２およ
びＲ３はいずれも水素であることが好ましい。

本発明の化合物は式（１）に星印で示した不斉炭素原子
を有し、したがって光学異性体として存在することがで
きる。このような異性体すべて、個々の異性体も混合物
も本発明の範囲内に包含されるが、Ｌ−光学異性体が好
ましい。

とくに本発明は、 Ｎ−Ｃ４−（６−＜２．４−シアミノ−１，６−シヒド
ロー６−オキソー５−ピリミジニル）プロピルアミノ）
−２−フルオロベンゾイル〕−（６）−グルタミン酸 Ｎ　−Ｃ４−（３−（’　２　、４−ジアミノ−１，６
−シヒドロー６−オキンー５−ピリミジニル）プロピル
アミノ）−３−フルオロベンゾイル〕−（ト）−グルタ
ミン酸 Ｎ−［４−（３−（２，４−ジアミノ−１，６−シヒド
ロー６−オキンー５−ピリミジニル）プロピルアミン）
−３−メチルベンゾイル）　−（Ｌ）−グルタミン酸 ｗ−Ｃ４−（５−（２，４−ジアミノ−１，６−シヒド
ロー６−オキンー５−ピリミジニル）プロピルアミン）
−３−（メトキシ）ベンゾイル〕−（Ｌ）−グルタミン
酸 Ｎ−（４−（３−（２，４−ジアミノ−１，６ジヒドロ
ー６−オキンー５−ビニミゾニル）プロざルアミノ）−
２−クロロベンゾイル）　−（Ｌ）−グルタミン酸、お
よび Ｎ−［４−４（，４−（’２．４−ジアミノー１゜６−
シヒドロー６−オキソー５−ピリミゾニル）ブチル〕ア
ミン〕ベンゾイル〕−ＣＬ）−りにタミン酸 から選ばれる化合物を提供する。

以下に例示する化合物中、好ましい化合物は例２の化合
物を包含する。

本発明の化合物の塩には、ピリミジル残基金置換する２
個の末端アミノ基のいずれかまたはフェニレンと−（Ｃ
Ｈ２）ｎ−残基の間の鎖内に存在するアミノ基から誘導
される酸付加塩およびＲ２とＲ３の一方まだは両者が水
素および陽イオンである場合に式（１）の化合物から誘
導される陰イオン種からなる塩が包含される。いずれの
型の塩でも、抗新生物活性は先に定義した本発明の化合
物から誘導される残基に存在し、他の成分の本質はそれ
ほど重要ではない。しかし、治療または予防の目的では
塩成分は医薬的に許容されるものであることが患者に対
して好ましい。医薬的に許容される酸付加塩の例には、
鉱酸たとえば塩酸、臭化水素酸、リン酸、メタリン酸、
硝酸および硫酸、ならびに有機酸たとえば酒石酸、酢酸
、クエン酸、リンゴ酸、乳酸、フマール酸、安息香酸、
グリコール酸、グルコン酸、コハク酸およびアリールス
ルホン酸りとえばｐ−）ルエンスルホン酸から誘導され
る塩が包含ぜれる。式（ｒ）においてＲ２およびＲ３の
一方または両者が水素および陽イオンである化合物から
誘導される陰イオン種からなる塩の例には、アンモニウ
ム塩、アルカリ金属塩たとえばナトリウムおよびカリウ
ム塩、アルカリ土類金属塩たとえばマグネシウムおよび
カルシウム塩、ならびに有機塩基で形成される塩、たと
えばモノ−ジーまたはトリー（低級アルキル）または（
低級アルカノール）アミンたとえばトリエタノールアミ
ンおよびジエチルアミンエチルアミンから誘導されるア
ミン塩、異項環アミンたとえばざベリジン、ピリジン、
ピペラジンおよびモルホリンとの塩がある。医薬的に許
容される塩も許容されない塩も、本発明の化合物の単離
および／または精製に際し有用性を有し、医薬的に許容
されない塩は本技術分野においてよく知られている技術
によって医薬的に許容される塩に変換できるので有用で
ある。

本発明はまた、先に定義した式（１）の化合物またはそ
の塩を製造するにあたり、式（ＩＩ）（式中、Ｒ１、Ｒ
２、Ｒ３、Ｒ）　Ｒ１１ｌ　、Ｒ９およびＲｌｏならび
にユお２びｍは式（１）において定義したとおシであシ
、基Ｒ５、Ｒ６、Ｒ１１およびＲ１２のひとつはＣ１〜
１２アシルであシ、他の基Ｒ５、Ｒ６、ＨＬ　Ｌおよび
Ｒ１２は同種または異種で、水素またはＣエル１□アシ
ルである）で示される化合物を脱アシル化し、生成した
式（１）の化合物のＲ２およびＲ３の一方または両者を
ついで所望よ〕別のＲ２および／−！たはＲ３に変換し
、所望によシ塩を形成させることを特徴とする方法を提
供する。Ｒ５、Ｒ６、Ｒ１１およびＲ１２がＣ１〜１２
アシルである場合にはカルボキシル性０１〜１２アシル
であることが好ましい。Ｒ５、Ｒ１６Ｒ１１およびＲ１
２がＣユ〜、２アシルである場合には、同種または異種
であって０１〜．２カルボキシル性アシル、トくにＣ１
〜６アルカノイル、とくにアセチルであることが好まし
い。

式（ｆｌ）の化合物の脱アシル化は慣用方法によって実
施できる。Ｒ５、Ｒ６、Ｒ１↓およびＲ１２がＣ１〜、
２アシルであって、とくに同種または異種のＣ□〜６ア
ルカメイルの好ましい場合には、脱アシル化は、アルコ
ール性溶媒たとえばエタノールまたは生成した式（Ｉ）
の化合物の酸化を防止するために少量の２−メルカプト
エタノールを含有するエタノール中、水酸化ナトリウム
のような塩基の存在下、加熱して実施するのが好ましい
。式（Ｉｔ）の化合物においてＲ２ＤよびＲ３の一方ま
たは両者がＣよ〜４アルキルである場合には、脱アシル
化に好ましい条件は脱エステル化も導くことが考えられ
る。このような場合、脱アシル化の生成物は、弐（１）
においてＲ２およびＲ３０両者が水素の化合物である。

したがって、式（１）においてＲ２およびＲ３の一方ま
だは両者がＣエル４アルキルである化合物を製造するた
めＫは、得られた式（１）においてＲ２およびＲ３の両
者が水素である化合物を以下に述べるようにしてエステ
ル化する。

生成した式（［）の化合物のＲ２および／またはＲ３の
他のＲ２および／またはＲ３への任意の変換の例には、
慣用のエステル化試薬および条件、たとえば酸の存在下
に０１〜．アルカノールを用いる水素のＣ１〜、アルキ
ルへの任意の変換が包含される。

これは、式（１）においてＲ２およびＲ３の一方また両
者が０１〜．アルキルである化合物を製造するときで上
述のように化合物が脱エステル化を受けた場合に実行す
るのに有用な任意の変換法である。Ｃのような場合には
、所望のエステルは今述べたようにして遊離酸から製造
できる。

式（１）の化合物の塩の任意の形成は常法によって実施
できる。

式（「）の化合物は、式（１） （式中　Ｒ５、Ｒ５、Ｒ１１およびｎは先に定義したと
おシである）で示される化合物と、式＜Ｗ）（式中、Ｒ
１、Ｒ２、Ｒ３、Ｒ７、Ｒ８、ＢＱおよびＲＩＯは先に
定義したとおシである）で示される化合物との混合物を
還元することによって製造することができる。

式（［）と（Ｖｌ）の化合物の混合物の還元は、慣用の
還元アルキル化反応に従って実施することができる。し
かしながら、この還元は、酸の存在下溶媒中で、たとえ
ば溶媒としても機能する酢酸中で、水素化シアノホウ素
ナトリウムによって行うことが好ましい。

式（ｆｆ）においてｎが６である化合物は、好ましさは
やや劣るが、式（ＩＶ） ることか好ましい。還元は脱水剤たとえばモルキュラー
シーブの存在下に行うことも好ましい。

式（ＩＮ）および（ｆｆ）の化合物は、式（Ｖ）（ｆ’
／） （式中　Ｒ５およびＲ１１は先に定義したとおシである
）で示される化合物と前述の式（ＶＩ）の化合物との混
合物を還元することくよっても製造できる。

化合物（ＩＶ）と（Ｖｌ）の化合物の混合物の還元は式
（Ｉ［）と（ＶＩ）の化合物の混合物の還元の場合と同
様に、酸たとえば酢酸の存在下に水素化シアノホウ素ナ
トリウムを用いて還元を行うことができる。

しかしながら、式（ＶＩ）と（ＩＶ）の化合物の混合物
の還元の場合には、酢酸を溶媒としても用いることなく
、たとえばメタノールまたはメタノールと２−メトキシ
エタノールの混合物を溶媒として用い（Ｖ） （式中　Ｒ１１、Ｒ５、Ｒ６およびｎは先に定義したと
おシであ！、、Ｒ１３は００〜．アルキルたとえばエチ
ルである）で示される化合物の加水分解によっても製造
できる。

式（匠）の化合物の製造の場合例は、加水分解は、溶媒
たとえばジクロロメタンまたはアセトン中、酸たとえば
シュウ酸または４−トルエンスルホン酸の存在下に行う
ことができる。さらに、式（１１）においてｎが６であ
る化合物では、加水分解は単に水中、室温またはわずか
に高い温度で実施できる。

式（ＩＶ）の化合物を製造する場合には、式（Ｖ）にお
いてｎが６である化合物を加水分解する。これは単に沸
騰水またはほぼ沸騰した水の中で達成できる。

式（Ｖ）の化合物は、式（■） （Ｖｆｆ） （式中、ＲＬ　′３およびｎは先に定義したとおりであ
る）で示される化合物をアシル化することによって製造
できる。

式（■）の化合物のアシル化は常法によシ、たとえば、
ピリジンのような塩基の存在下に酸無水物を用いて行う
ことができる。

式（■）の化合物は、式（■） Ｃｏ　２Ｒ１’ ＣＨ（ＣＨ２）ｎ−ＩＣＨ（ＯＲ”）　２Ｎ （■） （式中、Ｒ１３およびｎは先に定義したとおりでちシ、
Ｒ１４は０１〜４アルキルたとえばエチルである）で示
される化合物とグアニジンを反応させることによって製
造できる。

式（■）の化合物とグアニジンの間の反応は常法により
、たとえば、エタノールのような溶媒中、ナトリウムメ
トキシドのような塩基の存在下、加熱下に行われる。

式（Ｖｌ）の化合物は、式（■） ｏ２Ｒ１４ ＣＨ２ Ｎ （［） （式中、′Ｒ１４は先に定義したとお）である）で示さ
れる化合物と、式（Ｘ） Ｌ−（ｃＨ２）Ｑ−１ｃｎ（ｏｕ１３）２（Ｘ） （式中、Ｒ１３とｎは先に定義したとおシであり、Ｌは
離脱基たとえばクロロ、ブロモ、ヨードまたはトシルオ
キシである）で示される化合物との反応によって製造で
きる。

式（■）と（Ｘ）の化合物の間の反応は常法によ虱たと
えば、エタノールのような溶媒中、ナトリウムメトキシ
ドのような塩基の存在下に行うことができる。

式（■）、（■）カよび（Ｘ）の化合物は市販品を入手
できるか、またはその化合物について報告されている方
法を実施することによりもしくは構造的に類似する化合
物の製法として報告されている方法と類似の方法を実施
することによって得ることができる。

本発明の化合物または塩は、その化合物のまま投与する
こともできるが、医薬組成物の形で提供することが好ま
しい。したがって、本発明はさらに、先に定義したよう
な本発明の化合物またはその医薬的に許容される塩、お
よび医薬的に許容される担体からなる医療用の医薬組成
物を提供する。

医薬組成物には所望により、本発明の化合物または塩と
組合せて使用して有用な他の治療剤、たとえば本発明の
化合物または塩の抗新生物活性を増強させることができ
るジヒドロ葉酸レダクターゼ阻害剤を含有させることも
できる。本明細曹において担体に関連して用いらｎる「
医薬的に許容される」の表現は、処方中に使用される本
発明の化合物または塩および含有させてもよい他の任意
の治療剤と適合性を示し、また受給者に有害でないとい
う意味で用いられる。担体自体は、本発明の化合物また
は塩および含有させてもよい他の任意の治療剤の医薬組
成物としての処方を可能にする、製薬技術分野で慣用さ
れる１種または２種以上の賦形剤から構成される。

本発明の医薬組成物には、経口、非経口（皮下、皮肉、
筋肉内および静脈内を含む）および経直腸投与に適した
組成物が包含されるが、最も適当な経路は多分、たとえ
ば受給者の状態訃よび特性に依存する。組成物は単位用
量剤型として提供するのが便利であり、これは裏薬技術
分野でよく知られている任意の方法で製造できる。すべ
ての方法は、活性成分、すなわち本発明の化合物または
塩を、担体と配合させる工程を包含する。一般に、組成
物は活性成分を液体担体もしくけ微粉化固体担体または
両者と均一かつ緊密に配合し、ついで必要に応じて配合
混合物を所望の組成物に成型することによって行われる
。

経口投与に適した本発明の医薬組成物は、それぞれ既定
量の活性成分を含むカプセル、カシュー錠剤もしくはロ
ーゼンジのような不連続単位として、粉末もしくは顆粒
として、シロップ、エリキシールもしくは水薬、油中水
型液体エマルションもしくは水中油型液体エマルジョン
のような水性液体もしくは非水性液体中の溶液もしくは
懸濁液として提供することができる。組成物はまだ、丸
薬、砥削まだはペーストとすることもできる。

一般に、錠剤が経口投与に適した最も便利な医薬組成物
である。錠剤は、活性成分を医薬的に許容される担体と
ともに圧縮または成型して製造できる。圧縮錠は、流動
剤型たとえば粉末または顆粒の活性成分を、たとえば結
合剤、不活性希釈剤、滑沢剤、崩壊剤および／または界
面活性剤と混合して適当な機械で打錠する。成型＠は、
粉末にした活性成分の混合物を不活性液体希釈剤で湿潤
させて適当な機械で成型する。錠剤はコーティングもし
くは割線を施してもよく、また活性成分の徐放もしくは
制御された放出が行われるように処方するＣともできる
。

非経口投与に適当な本発明の医薬組成物には水性または
非水性滅菌注射液が包含され、これにはたとえば、抗酸
化剤、緩衝剤、静菌剤および受給者の血液と組成物を等
張にする溶液を含有させることができる。また水性また
は水性滅菌懸濁液が包含され、これにはたとえば、懸濁
剤または増粘剤を含有させることができる。組成物は、
１回用量または多回用量用容器、たとえば密閉アンプル
およびバイアルに入れて提供することができるし、また
使用直前に滅菌液体担体たとえば注射用水を加えるだけ
でよい凍結乾燥状態で保存することもできる。用時調展
用注射液および懸濁液は、滅菌した前述のような粉末、
顆粒２よび錠剤から製造できる。

経直腸投与に適した本発明の医薬組成物はたとえばココ
ア脂およびポリエチレングリコールを含有する学則とし
て提供することができる。

前述のように、式（１）の化合物および塩は抗新生物活
性を有する。これは後述するように、ヒト乳腺腺癌細胞
培養細胞毒性試験において明らかにされた。本発明の多
くの代茂的な化合物が、この試験において、特定の細胞
系に対し活性を示している。したがって、本発明の化合
物は新生物の生育を阻止できることが確立された。すな
わち、本発明の化合物および塩は、医療に、とぐに新生
物の生育ことに哺乳動物のリンパ球性白血病および悪性
固体腫瘍の治療に有用である。したがって、本発明はさ
らに、動物たとえば哺乳類動物に本発明の化合物または
塩の治療有効量を投与することからなる動物の悪性腫瘍
および白血病の治療方法を提供する。また一方、医療と
くに白血病や悪性腫瘍のような新生物の生育の治療に使
用するための本発明の化合物または塩を提供する。

本発明はまた、式（Ｉ）の化合物またはその塩の、新生
物生育の治療用医薬を製造するための使用をも提供する
。

本発明の化合物または塩による治療を必要とする動物は
通常、補乳動物たとえばヒトである。

治療を要する新生物生育の特定の例としては、リンパ球
性白血病および悪性腫瘍がある。

前述のように、本発明の化合物および塩の抗新生物活性
は、ジヒドロ葉酸レダクターゼ阻害剤たとえば２，４−
ジアミノ−６−Ｃ２，５−ジメトキシベンジル）−５−
メチルピリドＣ２，５−ｄ〕ビビリシン塩酸塩によって
増強される。したがって、本発明の化合物および塩とと
もに、新生物生育の治療にはジヒドロ葉酸レダクターゼ
阻害剤を使用するのが有利である。

本発明の化合物または塩を動物に投与する経路は、経口
でも非経口（皮下、皮肉、筋肉内、静脈内または経直腸
を含む）でもよい。化合物まだは塩が、前述のような好
ましい医薬組成物の形で提供される場合、実際に使用さ
れる組成物はもちろん、医師または獣医師によって選ば
れる投与経路に依存する。たとえば経口経与が好ましい
場合にば、使用される医薬組成物はこの経路に適した組
成物とすることが好ましい。

本発明の化合物または塩の治療有効量は、たとえば動物
の年齢および体重、治療を要する正確な状態およびその
重症度、組成物の性質、殻与経路を含む多数の因子に依
存し、最終的には担当の医師または獣医師の選択によっ
て決定される。しかしながら、新生物生育とくにリンパ
球性白血病または悪性腫瘍の治療における本発明の化合
物の有効量は一般に受給者（浦乳動物）の体重１ｋｇあ
たり１日に０．５〜６００■の範囲、さらに通常では１
日て７．０〜２００　ｍ９／ｋｌ？の範囲である。すな
わち、７０ｋｇの成熟哨乳動物の場合、実際の１日量は
通常４９０〜１４，０００ｍ９であシ、ｃのｉｔを１日
１回で、通常はａ１日用量が同じ量になるように分版用
量を何回か（たとえば２回、６回−４回、５回または６
回）に投与する。本発明の塩の有効量は、化合物自体の
有効量の比率から決定できる。

本発明の化合物による新生物生育の治療に際しては、動
物に常に解毒剤または毒性軽減剤を投与する必要がある
。このような薬剤の特定の例としてはロイコボリン、ヒ
ボキサンチンおよび５−アミノイミダゾール−４−力／
ｌ−ｌ−ホキシアミドリボヌクレオチドＡＩ　ＣＡＲ）
があるが、ロイコボリンが最も好ましい。

本発明の化合物はまた、マイコプラズマ５ｐｉｒｏ−ｐ
ｌａθｍａ　ｃｉｔｒｉに感染した柑橘類植物の治療ま
たはその感染予防に有用である。この場合、化合物は、
この技術分野においてよく知られている方法、たとえば
スプレー　散布、土壊への添加または植物への注入によ
って植物に適用することができる。

本発明の化合物はまた、自分自身で葉酸を合成すること
ができず予め生成された葉酸を必要とする以下の例およ
び生物学的データは、本発明を例示するものであって、
いかなる意味においても本発明の限定を意図するもので
はない。

酸エチルエステルの製造 １００ｖＬｌの無水アルコールにナトリウムメトキシド
１６．２　ｇ（０，３０モル）を加え、この溶液を攪拌
しなからシアノ酢酸エチルエステル１６０　ｍｌ（１７
０ｇ、１．５０モル）を加えた。この溶液を真空中４０
°Ｃで回転蒸発させ、残留した白色の固体を乾燥ジメチ
ルホルムアミド２００―に溶解した。この溶液に５３−
（５０ｇ、０．５０モル）の６−クロロプロピオンアル
デヒドジエチルアセタールと結晶ヨー化ナトリウムを加
え、この溶液を電磁攪拌器で攪拌し、湿気から保護して
蒸気浴上で５時間加熱した。赤褐色の溶液を冷却し、氷
水６００ｄ中に注ぎ、ジエチルエーテルＣ６Ｘ２００Ｔ
ＩＬｌ）で抽出した。有機相を水（５Ｘ５０ｒＬｔ）、
食塩水（５０ｍｊ）で洗浄し、硫酸マグネシウム上で乾
燥した。溶液を濾過し、真空中で回転蒸発させ、残留物
を蒸発させると、沸点９０〜１０８°Ｃ（０−０５ｍＨ
ｇ　）の澄明な液体４１．３ｇ（５７％）が得られた。

これは次工程に使用するのに十分純粋であった。分留す
ると沸点１０６〜１０８°Ｃ（０，０２５ｍＺＨｇ　）
の澄明な液体が主留分として得られた；　ＮＭＲ（ＣＤ
（δ３）δ１．２０（ｔ。

２　Ｈ、ＣＨ（ＯＣＨ２ＣＨ３）２）、　Ｃ５１（ｔ、
　　５Ｈ。

”０２ＣＨ２ＣＨ３）　、１−９０　（ｍ　−２Ｈ、Ｃ
Ｈ２ＣＨＣＮ）　、６．６゜（ｍ、　　５　Ｈ，ＣＨ（
ＯＣＨ２ＣＨ３）２＋ＣＨＣＮ）　、４．２４　　（（
１。

２Ｈ，Ｃｏ。ＣＨ２）　、４．５１　　＜　　ｔ　、　
　Ｉ　Ｈ、ｃｎ（ｏｃＨ２）ＣＨ３）：ＩＲ（液膜）２
２６５．１７５０．１４５０Ｃｎ１−１４００ｄの無水
エタノール中、ナトリウムメトキシド２２．０　ｇ（４
０７ミリモル）の溶液にグアニジン塩酸塩１８．２　ｇ
（１９１ミリモル）と２−シアノ−５，５−ジェトキシ
ペンタン酸エチルエステル４６．０ｇ（１８９ミリモル
）を加えた。混合物を攪拌しながら２．５時間還流し、
室温で一夜攪拌し、ついで酢酸１５ｄで中和した。塩を
濾去し、エタノール１００ｒｎｌで洗浄した。濾液と洗
液を合し、真空中で回転蒸発させると灰色の固体が得ら
れ、これを酢酸エチルで温浸し、冷却した。

固体を集め酢酸エチルで洗浄した。酢酸ナトリウムを含
むこの物質を１Ｎ水酸化ナトリウム１５０ｄＫ溶解し、
ついで酢酸１０ゴを攪拌下に加えて一５〜乙の酸性にし
た。生成した沈殿を集め５０ゴの冷水で洗浄しく生成部
は水に一部溶解する）、乾燥した。収量２９．０７９（
６０％）、融点１７８〜１８１°Ｃ一部を酢酸エチル−
エタノールから再結晶すると、分析用サンプルが得られ
た：融点１７７〜１７８℃、ＴＬＣ（Ｃ６Ｈ６：　Ｅｂ
ｏＶ５：１）。

ＮＭＲ（ＤＭＳＯ−δ６）δ１．１１　（ｔ　、　　６
　Ｈ，ＣＨ３）　、１．５６（ｍ、　２Ｈ，ＣＨ２ＣＨ
２ＣＨ）　、２．１９　（ｔ、　　２　Ｈ９ＣＨ２０Ｈ
２ＣＨ）　、５．２〜５．７　（ｍ、　　４　Ｈ，２ｘ
ｏｃａ２）、４．４５　（ｔ、　　Ｉ　Ｈ，Ｈ）、（Ｓ
、　Ｈ，ＮＨ２）、５．９８　（Ｓ、　　２Ｈ，ＮＨ２
）、９．８４　（ａ、　　１　Ｈ。

ＨＮＣ（０）） （ｃ）３−（２−アセチルアミノ−４−ジアセチルアミ
ノ−１，６−シヒドロー６−オキソー５−３−（２，４
−ジアミノ−１，６−ジヒドロ−６−オキンー５−ピリ
ミジニル）プロピオンアルデヒドジエチルアセタール７
．２０　ｇ（２８，１モル）、乾燥ビリシン３Ｑ＋＋ｔ
／および新た（蒸留した無水酢酸６０ゴの混合物を攪拌
しなから油浴上９０°Ｃに６時間加熱し、ついで室温で
一夜攪拌した。１５分以内にジアセチルおよびトリアセ
チルピリミジノンが生成し、その混合物として溶解した
が、標記化合物のみを得るためには長い反応が必要であ
った。溶液を真空中で回転蒸発させると油状物が得られ
た。酢酸エチルを加えて蒸発させる操作を数回、固体が
得られるまで反復した。固体をシクロヘキサンに分散さ
せて回収した。収！　８．８８　ｇ（８２％）、融点１
２６〜１６７°Ｃ（ＴＬＣ上１スポット）。一部をシク
ロヘキサン−酢酸エチル力ら再結晶すると分析用サンプ
ルが得られた。融点１６８〜１６９°Ｃ；　ＴＬＣ（Ｃ
６Ｈ，５／ＥｔＯＨ，’５：　１　）、吊Ｇ（ＤＭＳＯ
−ｄ、）δ１．０８　（ｔ　、　　６　Ｈ，２ｃＨ２ｃ
Ｈ３）　１．６６（ｍ、　　２ＨＩ　　ＣＨ２ＣＨ２Ｃ
Ｈ）、２．１３　（ｓ、　　５　ＨＩ　ＡＣ）、２．２
７　（’ａ、６Ｈ，２ＡＣ）、２．２　（２Ｈ、ＣＨ２
ＣＨ２Ｏ（。

アセチルシグナル上に重複）、３．２〜３．７（ｍ。

４Ｈ，２ＸＯＣＨ２）、４．４２　　（ｔ、　　１）（
、ＣＨ）、１１．８７　（ｂｒ　日、　２　Ｈ，ｋＣＮ
ＨオよびＨＮｃ（０））。

元素分析”　１７Ｈ２６Ｎ４０６として計算値二〇５３
．４　；　Ｈ６，８５，Ｎ　１４．６．分析値二Ｃ’　
５．５．７゜Ｈ６，８７，Ｎ　１４．６ 式（１）の化合物を経由する経路： 方法に６−（２−アセチルアミノ−４−ジアセチルアミ
ノ−１，６−ジヒＰロー６−オキソ−５−ピリミジニル
）ｆｏざオンアルデヒドジエチルアセタール（１，ｏ　
Ｏｇ、２．６ミリモル）を蒸留水（３０ｍｌ）に溶解し
、この溶液を室温で１８時間攪拌した。この溶液をエチ
ルエーテル（５Ｘ５０プ）とクロロホルム（５Ｘ５０ｍ
７）で抽出した。

クロロホルム抽出液を合し、水（２５＋＋＋Ｊ）、食塩
水（２５Ｔｒｔｌ　＞で洗浄し、乾燥しくＭｇ５Ｏ４）
　、真空中で回転蒸発させた。残留物をクロロホルム／
シクロヘキサンから再結晶すると、分析的に純粋な６−
（２−アセチルアミノ−４−シアセチルアミノ−１，６
−シヒドロー６−オキソー５−ピリミジニル）７ｏロピ
オンアルデヒド１／４水和物、融点１６４〜１６８℃、
０．２００　ｇ（理論量の２５％）が得られた。

元素分析：　Ｃ３１Ｈ１６Ｎ４０５・１／４Ｈ２０（分
子量３１２．８０５　）として計算値：　Ｃ４９，９、
Ｈ５，３２、Ｎ　１７−’；”、分析値ｃ　４９．８．
　Ｈ５，３０゜Ｎ　１７．６　）。

方法２：５−Ｃ２−アセチルアミノ−４−ジアセチルア
ミノ−１，６−ジヒドロ−６−オキンー５−ピリミジニ
ル）プロピオンアルデヒドジエチルアセタール（５０，
０ｇ、７８．５ミリモル）の蒸留水（’６０Ｏｆｆ１７
）溶液を５６°Ｃで６゜５時間攪拌し、真空中４５℃で
回転蒸発させた。残留物をジクロロメタン（７５０ゴ）
に溶解し、食塩水（５１ＭＡりで洗浄し、乾燥しくＭｇ
５Ｏ，）　、真空中で回転蒸発させると乾燥固体が得ら
れた。アセトンから再結晶して、６−（２−アセチルア
ミノ−４−ジアセチルアミノ）−１，６−シヒドロー６
−オキンー５−ピリミジニル）プロピオンアルデヒド、
融点１６４〜１６８°Ｃ１１６，２５ｇ（理論量の６７
％）が得られ、これは方法１によって製造されたものと
同定された。

例２：Ｎ−〔４−（３−（２，４−ジアミノ−１゜６−
シヒドロー６−オキソー５−ピリミジニル）プロピルア
ミノ）−２−フルオロベンゾイル〕−（Ｌ）−グルタメ
ートの製造 （ａ）　　２−フルオロ−４−二トロ安息香酸（６，２
６１，６６，８ミリモル）、（Ｌ）−グルタミン酸ジー
ｔｅｒｔブチ／Ｌ、１ステル塩酸塩（１０，０ｇ、６６
．８ミリモル）および１−ヒドロキシベンゾトリアゾー
ル（４，５７ｇ、６６．８ミリモル）を乾燥ジメチルホ
ルムアミド（１’５０ｍ７）に溶解し、この溶液を窒素
気相下に攪拌しながら、トリエチルアミン（３，４２ｇ
、４．７１プ、６６．８ミリモル）を−度に加えた。１
５分後ｉ、ｉ、６−ジシクロへキシルカルボジイミド（
７，６７ｇ、６７．２ミリモル）を少量ずつ１分で加え
た。反応混合物を２０時間後に濾過し、固体をジクロロ
メタン（ＩＸ５０ｍ７りですすいだ。濾液を回転蒸発さ
せ、得られたこはく色の残留物をジクロロメタンと飽和
重炭酸塩溶液（各２００ｄ）に分配した。有機相を飽和
重炭酸塩、５％クエン酸および食塩水（各１　Ｘ’２０
０ｄ）で順次洗浄した。ついで有機相を乾燥しくＭｇ５
Ｏ，）、濾過し、回転蒸発させ、乾燥すると（高真空下
）、油状の黄色固体（１１，９ｇ、８６％）が得られ、
ｔｌｃ（シリカ、２：１ヘキセン／酢酸エステル、Ｒｆ
＝０．５）上で１個の主要スポットを示した。生成物を
フラッシュクロマトグラフィー法で精製すると淡緑色の
ゴム状物が得られた：収量９．７ｇＣ６７％）　ｚ　１
Ｈ−ＮＭＲ（ＣＤＣｌ２）δ１．４２＜　８．９Ｈ）、
　１．５０　（Ｅｌ　、９）（）　；２．０２〜２．４
１（ｍ、４Ｈ）、４．７２（ｍ、１Ｈ）＋　　７．４４
　（ｂｒ　ｂ。

ＩＨ）　、８−０〜８．６（ｍ、　５Ｈ）　；ＴＪＶ（
ＭｅＯＨ）　２６０ｏｍｍａｘ　（１１０００）、２２
５ｍ１ｎ（４７１ｏ）。

２１５ｓｈ（７６８０）；マススペクトル（ＣＩ）ｍ／
ｅ４２７　（２４％）、５７１　（２０）、３１５（１
００）元素分析’　Ｃ２ｏＨ２ｙＦＮ２０ｙ（Ｍｒ　４
２６−４４　）として計算値：　ｃ　５６．５５．　Ｈ
６，５Ｂ　、　Ｈ６，５７，分析値：　Ｃ５６，３９，
Ｈ６，４０，Ｈ６，５７テルの裏造 Ｎ−（４−ニトロ−２−フルオロペンソイル）−（Ｌ）
−グルタミン酸（３，６ｇ、８．４ミリモル）の９５％
エタノール（１００な／）溶液を１０％０％パラジウム
　０．２５　ｇ）と混合し、Ｐａｒｒ装置に入れた。こ
の混合物を水素気相下に２時間振盪した。反応混合物を
濾過し、回転蒸発させ、乾燥すると、白色の固体、Ｎ−
（４−アミノ−２−フルオロベンゾイル）　−（Ｌ）−
グルタミン酸ジーｔｅｒ　ｔ−ブチルエステル、３．０
ｇ（９１％）が得られた。

融点９１〜９５°Ｃ：ＩＨ−ＮＭＲ（ＣＤＣ１３）δ１
．４１　（日。

９Ｈ）、１．４８Ｃ日、９Ｈ）、２．０〜２．４　（ｍ
、４Ｈ）。

２．８　（ｂｒ　ｓ、　２Ｈ）、　４．７１　（ｍ、　
　ＩＨ）、　６−．５４（ｄ、ＩＨ）、６−４８（ｄ、
１Ｈ）、７．１７　（ｑ＋　ＩＨ）。

７、δ６　（ｔ、　１　Ｈ）　；Ｕｖ（ｍｅｏａ）　２
８０　ｎｍ　ｍａｗ（１６８００）、２３８ｍ１ｎ（２
７６０）、２１２ｓｈ（１２１００）；マススペクトル
（ＣＩ）　ｍ／ｅ　６９７（２１％）、３４１（１５）
、２８５（１００）元素分析：　Ｃ２ｏＨ２９ＦＮ２０
５（Ｍｒ　５９６．４５　）として計算値：　ｃ　６０
．５９．　Ｈ７，３７，Ｈ７，０７，分析値：　Ｃ６０
，６３，Ｈ７，４７，Ｈ６，９９Ｎ−（４−７ミ／−２
−フルオロベンソイル）（Ｌ）−グルタミン酸ジーｔｅ
ｒｔ−ブチルエステル（１，２９＆、５．２４ミリモル
）と６−（２−アセチルアミノ−４−ジアセチルアミノ
−１，６−シヒドロー６−オキノー５−ピリミジニル）
プロぎオンアルデヒ）；’（１，００ｇ、６．２４ミリ
モル）の両者を無水エタノール（２５ｆｆｌｊ）中窒素
気相下に攪拌しながら、氷酢酸（１，５−）を１分間で
滴加した。溶液が生成したのち（１時間）、活性化６Ａ
モルキュラーシーブ（５プ）を加えた。５時間攪拌した
のち、水素化シアノホウ素ナトリウム（０，２０ｇ、６
．２４モル）を−度に加えた。反応混合物を１８時間後
に濾過し、固体をエタノール（２Ｘ　１　［１１ｄ）で
すすいだ。？Ｓ液を回転蒸発させると褐色の残留物が得
られ、これを酢酸エチルと水（各５０　ｍｌ　）に分配
した。有機相を洗浄しくｌＸ１００ｒｎ１１：１水／食
塩水）、乾燥しくＭｇ５Ｏ４）　、ｄ遇すると透明の褐
色谷液が得られ、ｔ、ｚｃ　（シリカ、５％メタノール
酢酸エチル、Ｒｆ＝０．５）で１個の主スポットを示し
た。この溶液をシリカケ９ル（２０ｇ）上に回転蒸発さ
せてフラッシュクロマトグラフィー法で生成物を溶出さ
せると白色の固体が得られた。収量１．２８ｇ（５７％
）、融点〉１２０°Ｃ（徐々に分解）、ＩＨ−ＮＭＲ（
ＤＭ８０−ｄ　６）δ１．６６および１．６９（２１１
１，１８Ｈ）、１．６２　（ｍ、　２Ｈ）、　１．８〜
２．４　（ｍ、　６Ｈ）、　２．０９　（１１１，６Ｈ
）、　２．１９　（ｅ。

６Ｈ）、２２−９８（，２Ｈ）、４−６１　（ｍ、ＩＨ
）。

６．２５　（ｄ、Ｊｏ”’＝１５Ｈｚ、１Ｈ）、　　６
．３８（ｄ、ＪＪ”＝９Ｈｚ、Ｉ　Ｈ）、　６．６６　
（ｂｒ　ｍ、　１Ｈ）、　７．４４　（ｔ。

ＪＯＨ，ＨおよびＪｍ””　＝　９　Ｈｚ　、　Ｉ　Ｈ
）、７．６８　（ｔ。

１　Ｈ）、　　１　１〜１２　（Ｖｂｒ　　８．　１　
Ｈ）；　ＴＪＶ（ＭｅＯＨ）２９９ｎｍ　ｍａｘ　　（
１１９００）、２５８ｍ１ｎ　（３２５０）；マススペ
クトル（ＦＡＢ）ｍ／ｅ　６８９　（２５％）、４６０
（１００）、３８８（５６）、２７７（４０）元素分析
：　ＣＣ５３Ｈ４５ＦＮ６０　・Ｈ２０（Ｍｒ　７０６
−７７　）として計算値：　Ｃ５６，０８，Ｈ６，７０
，Ｎ　１１．８９゜分析値：　Ｃ５６，１５，Ｈ６，５
７，Ｎ１１．５９Ｎ−（４−（（５−（２−（アセチル
アミン）＝４−（シアセチルアミノ−１，６−ジヒドロ
−６＝オキソー５−ピリミジニル）プロピル）アミノ）
−２−フルオロベンゾイル）　−（Ｌ）　−グルタミン
酸ジーもｅｒ　ｔ−ブチルエステル＜　０．７０　ｇ、
１．０ミリモル）を新たに蒸留したトリフルオロ酢酸（
１０ｍｌ）に溶解し、この溶液を窒素気相下に１．５時
間攪拌した。この溶ｉを回転蒸発させ、乾燥すると（高
真空）、淡黄色の残留物が得られた。これを１、ＯＮ水
酸ナトリウム（２０Ｍ）と混合し、窒素気相下５５°Ｃ
で１８時間攪拌した。反応混合物を冷却しぐ氷浴）、氷
酢酸を滴加して中和し、ついで６Ｎ塩酸を滴加して−を
２．５に調整した。冷却したまま２時間攪拌し、生成し
た沈殿を濾過したつ湿った濾塊をジメチルホルムアミド
／水力Ｓら再結晶するとクリーム状の固体が得られた。

収ｉｏ、２６ｇ（５７％）、融点１９５〜２００℃；１
Ｈ−ＮＭＲ（Ｄ’ＭＢＯ−δ６　）δ１．５５　（ｍ、
　２Ｈ）　、　１．８〜２．１　（ｍ　、　２Ｈ）　、
　２．１〜２．３（ｍ、４Ｈ）、２．９８（ｍ、２Ｈ）
、４．５６＜ｍ、ＩＨ）　　、５．７５（ｂｒ　　ｅ、
２Ｈ）　　、５．９２（ｂｒ　　ｅ、２Ｈ）　　。

６−２７　（ｄ　ｘｄ　、　ＪｏＥＩＦ＝１５　Ｈｚ　
、　Ｊｍ”Ｈ＝２Ｈｚ、　ＩＨ）。

Ｈ，Ｈ ６，６９（ｄｘｄ、Ｊｏ　　＝９Ｈｚ、Ｊ’ｍ”’＝２
Ｈｚ、ＩＨ）＋６．５６　（ｂｒ　ｍ、　ＩＨ）　、　
７．４６　（ｔ　、　Ｊ’ｏ”’およびＪｍ”Ｈ＝９Ｈ
ｚ、、　ＩＨ−）　、　７．６８　（ｔ　、　ＩＨ）、
　９−８　（’／ｂｒ　ｅ　、　ＩＨ）　、　１２−４
　（ｖｂｒ　ｓ、２Ｈ）　；ＵＶ　（０，ｌＮＮａ０Ｈ
）　２９５ｎｍ　ｍａＸ　（２１４００）、　２８８ｍ
１ｎ（２０９００）、２７４ｍａｘ（２４４００）、２
４４ｍ１ｎ（８６２０）　、　２２０　ｍａｘ　（２０
４００）元素分析：　Ｃ１９Ｈ２３ＦＮ６０６・０．７
　Ｎ２０・６Ｃ３Ｈ７ＮＯ（Ｍｒ４８４−９６）として
分析値ｃ　４９．２９　、　Ｎ５．５１゜Ｎ１８．２０
．分析値：　Ｃ４９，２４，Ｎ５．１．　Ｎ１８．０９
例３：Ｎ−（４−（３−（２，４−ジアミノ−６−フル
オロ−４−二トロ安息香酸（６，００，９，３２，４ミ
リモル）、Ｌ−グルタミン酸ジエチルエステル塩酸塩（
７，７７ｇ、６２．４ミリモル）および１−ヒＰロキシ
ベンゾトリアソ−１（４，３ｓ　ｇ。

３２．４ミリモル）を乾燥ジメチルホルムアミｒ（１５
１］Ｌ／）にとり、この溶液全窒素気相下で攪拌しなが
らトリエチルアミン（４，５２ゴ、３．２８．９゜３２
．４　ミＩＪモル）を１分間で滴加した。反応混合物に
、１，６−ジシクロへキシルカルボジイミげ（７，３６
，９，３５，７ミリモル）を１分間で少量ずつ加えた。

２０時間後に反応混合物を濾過し、固体をジクロロメタ
ン（１Ｘ５０１１Ｌｌ？）ですすいだ。

濾液を回転蒸発させると（高真空）、こはく色の残留物
が得られ、これをジクロロメタンと飽和重炭酸塩溶液（
各２００１１１／）の間に分配した。有機相を飽和重炭
酸塩溶液、５％クエン酸および食塩水（それぞれ各ｌＸ
２００Ｍ！７）で洗浄した。ついで有機相を乾燥しくＭ
ｇ５ｏ４）、濾過し、回転蒸発させ、乾燥（高真空）す
ると、黄色の固体（７，６１，６６％）が得られ、ｔｌ
ａ上で１個の主スポットを示した（シリカ、２：１ヘキ
サン／酢酸ｘチル、Ｒｆ＝　０．３　）。生成物をフラ
ッシュクロマトグラフィー法（同−溶媒系）で精製する
と、淡黄色の固体が得られた。収量５．７９　（４８％
）；融点７８〜８０°Ｃ；　ＩＨ−ＮＭＲ（ＣＤＣｌ５
）δ１．２５および１．３１（２を重複＋　　６Ｈ）７
　２．２〜２．３（ｍ、　　２Ｈ）＋　　２−５〜２．
６（ｍｌ　　２Ｈ）、　　４．１４および４．２５　（
２ｑ重複＋　　４　”　）＋　　４．７１　（ｍ。

Ｉ　ＨＬ　　７．５８　（ｂｒ　ａ、　　１　Ｈ）＋　
　７．７〜Ｂ−２（ｍ　、　　３　Ｈ）　；　Ｕ　Ｖ　
（ＭｅＯＨ）　２５３　ｎｍ　ｍａｘ（８０ＤＯ）５　
２３２ｍ１ｎ（５８９０）；マススペクトル（ＣＩ　）
　ｍ／ｅろ７１（１００％）、３２５元素分析’　Ｃ１
６Ｈ１９ＦＮ２０ｙ　（Ｍｒ　３７０．３３　）とシテ
計算値：Ｃ５１，８９，Ｎ５．１７ｔ　　ｘ７．５６を
分析値：Ｃ５１，９８，Ｎ５．２０．Ｎ７．５５Ｎ−（
４−ニトロ−３−フルオロベンゾイル）−（Ｌ）−グル
タミン酸ジエチルエステル（５，３Ｌ１４ミリモル）の
９５％エタノール（１５０ゴ）溶液を１０％パラジウム
黒（０，４，９）と混合し、Ｐａｒｒ装置上装置−た。

混合物を水素気相下に１．５時間振盪した。反応混合物
を濾過し、回転蒸発させ、乾燥するとクリーム状の固体
が得られた。収量４．７　Ｆ　（９８％）、融点９２〜
９７°Ｃ；ＩＨ−ＮＭＲ（ＣＤＣ１３）δ１．２２およ
び１．２９（２を重複＋　　６Ｈ）ｊ　　ｊ、６（ｂｚ
、２Ｈ）、２．１〜２．５（ｍ、　　４Ｈ）、　　４−
１０および４．２２　（２ｑ重複、４Ｈ）７　４．７４
（ｍｌ　　ＩＨ）ｊ　　６．７５（ｔ。

Ｉ　Ｈ）　、６−８４　（ｄｐ　　Ｉ　Ｈ）　、７．４
〜７−５　（ｍ。

２Ｈ）；ＵＶ（Ｍｅｎｕ）２８１　　ｎｍｍａｘ（１２
００口）。

２３６ｍ１ｎ（１４８［］Ｌ　　２１０ｓｈ（１０６０
０）；マススペクト＃　（ＣＩ　）　ｍ／θ３４１　（
１０口％）。

元素分析：　Ｃ１６Ｈ２１ＦＮ２０５　（Ｍｒ　３４０
．３５　）として、計算値：ｃ５６．４６．Ｈ６，２２
，Ｈ８，２３゜分析値：Ｃ５６，４３，Ｈ６，２７，Ｈ
８，１７トへ４−アミノ−６−フルオロベンゾイル）−
（Ｌ）−グルタミン酸ジエチルエステル（２，２１ｇ、
６．４９ミリモル）および３−（２−アセチルアミノ−
４−ジアセチルアミノ−１，６−ジヒＶロー６−オキソ
−５−ピリミジニル）プロピオンアルデヒド（２，００
、！ｉ’、　　６．４９ミリモル）の両者を無水エタノ
ール（５０１１７）中窒素気相下に攪拌しながら、氷酢
酸（３１Ｌｇ）ｔ−１分間で滴加した。溶液が得られた
のち（１時間）、活性化６ｘモルキュラーシーブ（１０
１ｄ）を加え、攪拌を５時間続けた。反応混合物を冷却
しく水浴）、水素化シアノホウ素ナトリウム（４０８■
、６．４９　ミＩＪモル）を−度に加えた。冷時０．５
時間攪拌したのち、浴を除いた。反応混合物の温度を室
温まで上昇させ、１６時間攪拌した。反応混合物を濾過
し、固体をエタノール（１００ゴ）ですすいだ。濾液を
回転蒸発させ、得られた褐色の残留物を酢酸エチルと水
（各１０１００ｌの間に分配した。有機相を分離し、洗
浄しくｌＸ１００ｍ１：１水／食塩水）、乾燥しく　Ｍ
ｇ５Ｏ４）、濾過シ、小容量（２０ｍ）に回転蒸発させ
る。溶液ヲリカデル（１７５ｇ）上クロマトグラフィー
に付し、酢酸エチル（４５０ｄ）で洗浄し、ついで生成
物を５％メタノールを添加して溶出した。類似の分画を
回転蒸発によって合し、乾燥すると白色の固体が得られ
た。収量２．６６　Ｆ　（６５％）、融点７６〜８４°
Ｃ（分解）　；　ｌＨ−ＩＪＭＲ（ＤＭＳＯ−δ６）δ
１．１５および１．１６（２を重複、６Ｈ）、１．６４
（ｍｊ　　　２Ｈ）ｔ　　　２．００　　（ｍ、　　　
２Ｅ［）＋　　　２．１　１　　（８゜３ＥＩ）ｊ’　
２．２０（ｓ、６Ｈ）１　２．２７Ｃｍ９２Ｈ）＋２．
４０（ｔ、２Ｈ）ｔ　　３．１０（ｍ、２Ｈ）、３．９
〜４−１（２ｑ重複、４Ｈ）ｔ　　４．３５（ｍ、１　
Ｈ）。

６．１０　（ｍ、　１　Ｈ）、　６．６６　（ｔ、　Ｊ
ｏＨ”’オヨヒＪｍ”Ｈ−９Ｈｚ、　　Ｉ　Ｈ）ｔ　　
７−５〜７−６　（ｍｔ　　２　Ｈ）＋８．３５（ｄ、
　　１　　Ｈ）、　　１　１．９（ｖｂｒｄ、　　１１
　　；Ｕ　Ｖ　（ＭａＯＨ）　２９９　ｎｍ　ｍａｗ　
（２８０００）　ｒ２５７ｍｉｎ（７５００）；マスス
ペクトル（ＦＡＢ　）ｍ／ｅ　６３３　（２３％）、　
４３０（１００）、　　３８８元素分析：　Ｃｚ、Ｈｓ
ｙＦＮ＋ｓＯｓ＋　（Ｍｒ　６３２．６４　）として計
算値：Ｃ５５，０６１Ｈ５，９０，Ｎ１３．２８゜分析
値：Ｃ５４，９９，Ｈ５゜９３．Ｎ１３．２２Ｎ−Ｃ４
−（３−（２−アセチルアミノ−４−ジアセチルアミノ
−１，６−シヒドロー６−オキンー５−ピリミジニル）
プロピルアミン）−３−フルオロベンゾイル）−（Ｌ）
−グルタミン酸ジエチルエステル（５００ｑ、０．７９
０ミリモル）の１．ＯＮ水酸化ナトリウム（５０３１７
）溶液を、窒素気相下、５５°Ｃで１８時間攪拌した。

室温に冷却したのち、反応混合物に氷酢酸を徐々に滴加
してｐ）Ｉｔ−４，０に調整すると、白色の固体が沈殿
した。

スラリーを１時間冷却しく水浴）、ついで固体全濾過し
、速やかにエチルエーテル（Ｉ　Ｘｌ　５１ｄ）ですす
ぎ、乾燥すると白色の固体が得られた（６７６〜、〉１
００％）。その一部（２００１ｎ９）をジメチルホルム
アミｒ／水から再結晶すると分析用サンプルが白色固体
として得られた。収量１１９ｒＩ９（回収車６０％）；
融点〉１７５°Ｃ（除徐に分解）　；　１ｍ−ＮＭＲ（
ＤＭＳＯ−δ６）δ１．５６　（ｍ。

２　ＨＬ　　１．８〜２．１　（ｍ、　　２　Ｈ）？　
　２．１〜２．４（ｍＩ　　４ａＬ　　３−［］７（ｍ
Ｉ　　２Ｈ）＃　　４−３４−３４（Ｈ）＃　　５−７
８（ｓｔ　　２ＨＬ　　５−９３　（８，２ａ）。

６．２４　ＣｂｒＢｙ　Ｉ　ＨＬ　６−７０　（ｔ、　
、Ｔｏ”Ｈオよびｙｍ”Ｈ−９Ｈｚ、　１　Ｈ）、　　
７．５５および７．５６（２ａｍ複、　　Ｊｏ””＝　
１２　Ｈｚ。

ＪｏＨ”’−９Ｈｚ、　　２Ｈ）、　　８．２３（ｄ、
　　Ｉ　Ｈ）９９．８（ｖｂｒｓ、Ｉ　Ｈ）、１２．３
（ｖ’ｂｒｓ、２”）；ＵＶ（０，Ｉ　　ＮＮａｏＨ）
２９５ｎｍｍａｘ（１９８００）ｔ２８７　ｍｉｎ　（
１９２００）　＋　　２７３　ｍａｘ（２３２００）、
　　２４２ｍ１ｎ（８１２０）。

２２０　ｍａｘ　（１８８００） 元素分析：Ｃ工。Ｈ２３１ＦＮ６０．・０−４　Ｈ２Ｏ
・０．３　Ｃ３Ｈ７Ｎ。

（Ｍｒ　４７９．５６　）として計算値：ｃ４９．８４
゜Ｈ５，４４，Ｎ　１８．４０ｊ分析値：Ｃ’５０．０
４ｔＥ５．３８．　　Ｎ　１　８．２５ Ｎ−（３−メチル−４−二トロベンソイル）−（Ｌ）−
グルタミン酸ジエチルエステル（Ｃｏ５ｕｌｉｃｈ、　
Ｄ、Ｂ、ら：　Ｊ、　Ａｍ、　Ｃｈｅｍ、　Ｓｏａ、。

１９５６．７５：４６７５）（１１，０，９，３０，０
ミリモル）の９５％エタノール（２５Ｑｍｊ）溶液を１
０％パラジウム黒（０，８，９）と混合し、Ｐａｒｒ装
置上装置−た。混合物を水素気相下に２時間振盪した。

反応混合物を濾過し、回転蒸発させ、乾燥するとベージ
ュ色の固体が得られた。収量１０．１　ｇ（１００％）
；融点７９〜８２°Ｃ；ＩＨ−ＮＭＲ（ＤＭＳＯ−δ６
）δ１．１５および１．１６（２を重複１　６Ｈ）＋　
　２．００（ｍ、２Ｈ）＋　　２．０６（ｓｊ３１１２
．３９（ｔｊ　２１３４．０３および４．０６　（２ｑ
重複、４Ｈ）、４．３３（ｍ、１１ｊ５．４０（８ｊ　
　２１５　６．５６（ａｊ　　Ｊｏｘ３Ｈｚ。

Ｉ　Ｈ）ｔ　　７．４７（ａ、　　：ｒｏ　＋＝＊３Ｈ
ｚ、　　Ｉ　Ｈ）。

７．５０（８，１Ｈ）、８．１６（ｄ、１Ｈ）；Ｕｖ（
ＭｅＯＨ）　２８４　ｎｍ　ｍａｘ（１７０００）　。

２４１　ｍｉｎ　（３０２０）　；マススペクトル（（
Ｊ　）　ｍ／ｓ　３７７　（４４％）、１３４（Ｉ　Ｄ
Ｏ）元素分析：　ＣｘｙＨ２４ＮｚＯ５（Ｍｒ　３３６
．３８　）として計算値：　Ｃ６０，７０，ＥＩ７．１
９．Ｎ８．３３．分析値：Ｃ６０，７６、Ｈ７，２３，
Ｎ８．３１−メチルベンゾイル］−（Ｌ）−グルタミン
酸ジエチルエステル Ｎ−（４−アミノ−３−メチルベンゾイル）−（、Ｌ　
）−グルタミン酸ジエチルエステル（２，１８ｇ、６．
４９ミリモル）および６−（２−アセチルアミノ−４−
ジアセチルアミノ−１，６−ジヒＶロー６−オキソ−５
−ピリミジニル）プロピオンアルデヒド（２，００，９
，６，４９ミリモル）の両者を無水エタノール（５０ｍ
ｊ）中窒素気相下に攪拌しながら、氷酢酸（３Ｍ）を１
時間で滴加した。溶液が生成したのち（１時間）、活性
化６八モルキュラーシープ（１０ｄ）を加え、攪拌を５
時間続げた。反応混合物を冷却しく水冷）、水素化シア
ノホウ素ナトリウムＣ４０ＢＷ、６．４９ミリモル）を
−度に加えた。冷却下に０．５時間攪拌したのち浴を除
き、反応混合物を放置して温度を室温まで上昇させた。

１６時間後に固体を濾過し、エタノール（１００１ｄ）
ですすいだ。ｍ液を回転蒸発させ、残留物を酢酸エチル
と水（各１００ｍ／）の間に分配した。有機相を分離し
、洗浄しくｌＸ１００ｍ１：１水／食塩水）、乾燥しく
　ＭｇＳＯ４）、濾過し、小容量（１５ｄ）に回転蒸発
させた。溶液をシリカゲル（１７５，１上クロマトグラ
フイーに付し、酢酸エチル（４５０１ｍ）で洗浄し、つ
いで５％メタノール添加で生成物を溶出した。類似の分
画を回転蒸発によって合し、乾燥すると、透明な半固体
が得られた。収量１．４５．！ｉ’（３６％）；ＩＨ−
ＭＮＲ（ＤＭＳＯ−ｃＬ６　）δ１．１５および１．１
６（２を重複。

６Ｈ）１　１．６（５（ｍＦ　　２１ｊ　　２．００（
ｍｔ　２Ｈ）ｐ２．０８（８，３Ｈ）、２．１１　（ａ
、３Ｈ）ｊ２．１９（８，６１，２，２９（ｍｊ　　２
ＨＬ２．３９（ｔｊ　　２Ｈ）７　３．１１　（ｍ、　
　２Ｈ）、　　３．９〜４−１（２ｑ重複ｖ　　４　Ｈ
）ｙ　　４”３３　（ｍｔ　　１　Ｈ）ｔ５．４６（ｍ
、１　Ｈ）、６．４７（ａ、Ｊｏ＝３Ｈｚ。

１　Ｈ）、７．５３（８，Ｉ　Ｈ）ｊ　　７．５７（ｄ
。

Ｊｏ＝８Ｈｚ、　　１　ＨＬ　　８−２０　（ｄｔ　　
１　ＨＬｌｉ　、８（ｖ　’ｂｒ　ｓ　、　　Ｉ　Ｈ）
　；　Ｕ　Ｖ　（ＭｅＯｌｌｌ　）　３０１Ｈｍｍａｘ
（３１０００１＋　　２５８ｍ１ｎ（６０５０）；マス
スペクトル（ＦＡＢ　）　Ｉ１１／１３６２８　（８％
）。

４２６（１００）、３８４（９５） 元素分析：　Ｃ３ｏＨ４ｏＮ６０９・０．３　Ｈ２０・
０．５　Ｃ４ＨＢＯ２（Ｍｒ６７８．１４）として計算
値：Ｃ５６，６８゜Ｈ６，６３，Ｎ　１２．３９．分析
値：Ｃ’５６．６１．Ｈ６，７０，Ｎ　１　２．４６ Ｎ−［４−（３−（２−アセチルアミノ−４−ジアセチ
ルアミノ−１，６−ジヒＶロー６−オキソ−５−ピリミ
ジニル）プロピルアミン）−３−メチルベンゾイル）−
（Ｌ）−グルタミン酸ジエチルエステル（０，７ＯＬ　
１．１モル）の１．ＯＮ水酸化ナトリウム（、２０１Ｌ
ｔ）中溶液を窒素気相下５５°Ｃで１８時間攪拌した。

反応混合物全冷却しく水浴）、６．ＯＮ塩酸を徐々に滴
加してｐＨｋ２．５に調整した。冷却しながら２時間攪
拌したのち、生成した沈１ｉｉを濾過した。湿った濾塊
のジメチルホルムアミ）Ｆ／水からの再結晶の試みは失
敗したので、溶液を回転蒸発させて澄明な油状物とした
。

油状物をｐＨ２，１のＨＣ’ｌ水溶液（２０ゴ）と混合
し、５分間超音波処理するとクリーム状の固体が得られ
た。これを濾過し、乾燥すると生成物が得られた。収量
０．１２．９　（２４％）；融点１８１°Ｃ（発泡）　
；　’Ｈ−ＮＭＲ（ＤＭＳＯ−δ６）δ１．５８　（ｍ
、　２Ｈ）１１．８〜２．１　　（−＋　　２Ｈ）、　
　２．１２（ｓ、　　３Ｈ）＋２−２〜２−４　　（”
　ｌ　　４　Ｈ）　ｊ　　３１口　ｓ（ｍ＋　　２Ｈ）
）４．３４（ｍ、１Ｅｔ）＋　　５．７３（ｂｒｓ、２
Ｈ）１５．９４　（ｂｒ　８．　２ＨＬ　　６．５２　
（ｄ、　Ｊｏ＝９Ｈｚ。

１Ｈ）、７．５３（ｉｌ！重複、１Ｈ）、７．５７（ｄ
重複、Ｊｏ＝ｊＱＨｚ、ｌＥ）、８．０６（（Ｌ、ＩＨ
）。

１Ｑ、０（ｖｂｒｓ、１　Ｈ）、１２．２（ｖｂｒｓ。

２　Ｈ；　Ｕ　Ｖ　（Ｑ、１Ｎ　Ｎａ０Ｊ（）　２９６
　ｎｍ　ｍａｗ（１８０００）、２８６ｍ１ｎ（１７５
００）。

２７４ｍａｘ（１９９００）、２４７ｍ１ｎ（５８９０
）。

２１５　ｍａｘ　（２１０００） 元素分析：　Ｃ２０Ｈ２６Ｎ６０６・Ｈ２０’０．２　
Ｃ５Ｈ７ＮＯ（Ｍｒ４７９．１０　）として計算値二〇
５１．６４゜Ｈ６，１９，Ｎ　１８．１３＋　分析値：
ｃ５１．６３．Ｈ６，０７，ｙ　１８．０７ 例５：Ｎ−〔４−（３−（２，４−ジアミノ−３−メト
キシ−４−ニトロ安息香酸（１０，０＆、５０．７ミリ
モル）、（Ｌ）−グルタミン酸ジエチルエステル塩酸塩
（１２，２Ｌ　５０．７ミリモル）および１−ヒドロキ
シベンゾトリアゾール（６，８５！９．５０．７ミリモ
ル）の乾燥ジメチルホルムアミｌ’（２５０ｍ）溶液を
望素下に攪拌しながら、トリエチルアミン（５，１３ｇ
、７．０７Ｍ、５０．７　ミ！Ｊモル）を１分間で滴加
した。１５分後に１，６−ジシクロへキシルカルボジイ
ミド（１１゜５ｇ、５５．８ミリモル）を少量ずつ２分
間で加えた。１８時間後に反応混合物を濾過し、固体全
ジクロロメタン（２×５０ｄ）ですすいだ。

濾液を回転蒸発させ、得られたこはく色の残留物をジク
ロロメタン（３００１１Ｌｇ）に溶解した。有機相を飽
和重炭酸塩、５％クエン酸、および１：１食塩水／水（
各ｌＸ３００ｍ／）で順次洗浄した。

ついで有機相を乾燥しくＭｇ５Ｏ４）、濾過すると橙褐
色の溶液が得られ、ｔＩＣ上１個の主スポットを示した
（シリカ、２：１ヘキサン／酢酸エチル、Ｒｆ＝　０．
２　）。この溶液をシリカゾルカラム（５００，９，予
めジクロロメタンで湿潤）上に注ぎ、ジクロロメタン（
５００ｄ）で洗浄した。生成物を１０％および１５％酢
酸エチル添加勾配溶出液を用いて溶出した（各８Ｘ２５
０ｍ分画）。

類似の分画全回転蒸発によって合し、乾燥すると（高真
空）澄明な黄色油状物が得られた。収量１１．５，９（
５９％）　；　’Ｈ−ＮＭＲ（ＤＭＳＯ−δ６）δ１．
１５および１．１８（２を重複９　６ｇ）、　　１．９
〜２．２　（ｍｌ　　２　Ｈ）、　　２．４５　（ｔ　
ＤＭＥ＋Ｏにより不鮮明、　　２Ｈ）、　　３．９８（
８，３Ｅ［）、　　３．９〜４．２（２Ｑ重複、４Ｈ）
、４．４６口ｍ、１Ｈ）。

７．５８（ａｘａ、　　ＪＯ＝８Ｈ２，Ｊｍ＝２Ｈ２，
１Ｈ）。

７．７１　（ｄｔ　　Ｊｍ＝２Ｈｚ、　　Ｉ　Ｈ）＋　
　７．９７（ｃＬ＋ｙｏ　＝８　Ｈｚ　ｒ　　Ｉ　　Ｈ
）　＋　　９１口　０（ｄｔ　　１　　”　　）　　Ｊ
　　ａ　ｖ（ＭｅＯＨ）３２７　ｎｍｍａｘ（２９４０
Ｌ　　２９５ｍ１ｎ（２０９０）、　　　２５７　　日
ｈ　　（６６４０）、　　２３５ｓｈ（９１４０）、２
０３ｍａｘ（２９７００）；マススペクトル（ＣＩ　）
　ｍ／ｅ　３８３　（１００％　）元素分析：　Ｃ１７
Ｈ２２Ｎ２０Ｂ　（Ｍｒ　３８２−３７　）として計算
値：ｃ５３．４０＋　　Ｈ５，８０，Ｈ７，３３１分析
値：Ｃ５３，２９，Ｈ５，８５，Ｈ７，２９Ｎ−（３−
メトキシ−４−ニトロベンゾイル）−（Ｌ）−グルタミ
ン酸ジエチルエステル（１１，０ｇ、　　２８．８ミリ
モル）の９５％エタノール（２０３ｍ）溶液を１０５パ
ラジウム黒（０，８，９）と混合し、Ｐａｒｒ装置上に
置いた。この混合物を窒素気相下に１時間振盪した。反
応混合物を濾過し、回転蒸発させ、乾燥すると澄明粘稠
な油状物が得られ、これを長時間放置すると白蝋状に硬
化した。収量９．９５．９　（９５％）；ｌＨ−ＮＭＲ
（ＤＭＳＯ−δ６）δ１．１５および１．１７　（２を
重複、　　６Ｈ）、　　１．８〜２．２（ｍ、　　２Ｈ
）、　　２．４０（ｔｌ　　２Ｈ）＋　　３”７９（ｓ
＋　　３Ｈ）、　　４．０〜４．２（２ｑ重複、４Ｈ）
＋　　４．３６（ｍ、ＩＨ）１５．２９（ｂｒｓｙ　　
２Ｈ）、　　６．６０（δ、　　Ｊｏ　＝　３　Ｈｚ　
。

１　　Ｈ）＋　　７−６〜７−４　（ｍ）　　２Ｈ）＋
　　８．２５　（ｄ＋１　　Ｈ）；　　ＵＶ　（ＭｅＯ
Ｈ）３０１　　ｎｍｍａｘ（１７８００）。

２　８　０　　日ｈ　　（１５７００）、　　　２　６
　６　　ｍ１ｎ（１２６０口）。

２　６３ｍａｘ（１３２００）、　　　２５６ｓｈ（１
２５０口）。

２４５ｍ１ｎ（８６３０）、　　２０４ｍａｘ（４０９
００）；マススペクトル（ＣＩ　）　ｍ／ｅ　３５３　
（５６％）。

元素分析：ＣエフＨ２４Ｎ２０６・０．Ｉ　Ｈ２０−ｏ
、）　Ｃ２Ｈ６０（ｎｒ３６８−０１）として計算値：
Ｃ５７，４４゜Ｈ７，１２，Ｈ７，６１，分析値：ｃ５
７．２２゜Ｈ６，９５，Ｎ　７．８３ ジエチルエステルの製造 Ｎ−（４−アミノ−３−メトキシベンゾイル）−（Ｌ）
−グルタミン酸ジエチルエステル（３，５２ｇ、９．９
９ミリモル）および３−（２−アセチルアミノ−４−ジ
アセチルアミノ−１，６−ジヒげ一−６−オキソー５−
ピリミジニル）プロピオンアルデヒド（３，０８，９，
９，９９ミリモル）の両者を無水エタノール（１００１
１ｕ）中窒素気相下に攪拌しながら、氷酢酸（６ゴ）を
１分間で滴加した。溶液が生成後（０，５時間〕、活性
化６Ａモルキュラーシープ（２０ｄ）を加え、攪拌を２
時間続けた。反応混合物を冷却しく水冷）、水素化シア
ノホウ素ナトリウム（６２８〜、９．９ミリモル）全−
度に加えた。冷却しながら０．５時間混合したのち、浴
を除去し、反応混合物を放置して温度を室温まで上昇さ
せた。１６時間後に反応混合物を濾過し、固体をエタノ
ール（１００，ｄ）ですすいだ。濾液を回転蒸発させ、
乾燥させ、得られたクリーム様泡状物を酢酸エチル（１
０口ｄ）Ｋ溶解した。有機相を洗浄しく２Ｘ１［］Ｏｄ
１：１食塩水／水〕、シリカカラムラム（１７５，Ｆ。

予め酢酸エチルで湿潤させる）上に注いだ。カラムを酢
酸エチル（４００１ｄ）で洗浄し、ついで生成物を５％
メタノール添加により溶出した。類似の分画を回転蒸発
によって合し、乾燥すると白色の固体が得られた。収量
２．０７　ｇ（３２％）、融点７６〜８４℃（発泡）　
；　ＬＨ−ＮＭＲ（ＤＭＳＯ−δ６）δ１．１５および
１．１７（２を重複、６Ｈ）。

１．６５（ｔ）ｒｍｊ　　２１１　１．９〜２．３（ｂ
ｒｍ。

４Ｈ）、　　２．１２　（８ｊ　　３Ｈ）、　　２．２
０　（ｓ、　６［）１２．４０（ｔ、２Ｈ）、３．Ｉ　
Ｑ（ｂｒｍ、２Ｈ）１３．８０　（８，３Ｈ）、　　４
．０〜４．２　（２ｑ重複。

４Ｈ）、４．３９（ｍ、１Ｈ）、５．４６（ｂｒｔ。

Ｉ　Ｈ）＋　　６．４７　（ｃｔ、　　Ｊｏ＝８Ｈｚ、
　　１　ＨＣ７，２９（ａ、　　Ｊｍ−２Ｈ２，１Ｈ）
＋　　７．４２（ａＸｄｆｆＪｏ−８Ｈｚ、Ｊｍ−２Ｈ
ｚ、１Ｈ）、ｓ、２ａ（ａ。

１Ｈ）、１１．９（ｖｂｒｓ、２Ｈ）；ＵＶ（ＭｅＯＨ
）３０６　ｎｍ　ｍａｘ　（２５８００）　、　　２５
８　ｍ１ｎ（３９４０）、２２７ｓｈ（１７８００Ｌ２
０５　ｍａｗ　（６２４００）　；マススペクトル（Ｆ
ＡＢ　）　ｍ／ｅ　６４５．６　（６２％）、４４２．
５（８１）、　　４００．１　　（１００）元素分析：
　Ｃ３０Ｈ４ＯＮ６０１０　（Ｍｒ　６４４．６８　）
として計算値：Ｃ５５，８９，Ｈ６，２５，Ｎｌ　３．
０４゜分析値：　Ｃ５５，７３，Ｈ（５，３３，Ｎ１２
．９４Ｎ−［：　４−（３−（２−７セチルアミノー４
−ジアセチルアミノ−１，６−ジヒーロー６−オキソー
５−ピリミジニル）ブロールアミノ）−３−メトキシベ
ンゾイル：）−（Ｌ）−グルタミン酸ジエチルエステル
（１，００、！ｉ’、　１．５５ミリモル）の１、ＯＮ
水酸化ナトリウム（２５，１／）中溶液を窒素気相下、
５５°Ｃで１８時間攪拌した。反応混合物を冷却しく水
浴）、６Ｎ塩酸を徐々に滴加して−を２．５に調整した
。冷却したまま０．５時間攪拌したのち、生成した沈殿
を濾過し、ｐＨ２，１の塩酸水溶液（２Ｘ２５１１１７
）ですすぎ、乾燥すると白色の固体が得られた。収！５
９６〜（８３％）、融点１６５〜１８４°Ｃ（徐々に分
解）；ｌＨ−ＮＭＲ（ＤＭＳＯ−ｄ、）　δ１．５＜Ｓ
（ｍ、　　２１．　１．８〜２．２（ｂｒｍｊ　　２Ｈ
）５　２．２〜２．４（ｍｌ　　４Ｈ）１３．０７（ｍ
ｔ　　２Ｈ）、　　３．８１　　Ｃａｌ　　３Ｈ）Ｎ４
．３７（ｍ、Ｉ　Ｈ）、５．６（ｂｒｓ、Ｉ　Ｈ）。

５．７４（ｓ、　　’２Ｈ）ｔ　　５．９３（Ｅｌ、２
Ｈ）Ｎ６−４９　（ｄ　ｓ　　Ｊｏ−８Ｈｚ　ｔ　　１
　Ｈ）　ｐ　　７．２９　（ｄｔ：Ｊｍ−２Ｈｚｔ　　
Ｉ　　Ｈ）ｙ　　７．４１　　（ａｘａ。

：ｒｏ−８Ｈｚ、　　Ｊｍ＝　２Ｈｚ　　　１　Ｈ）、
　　８−１　５　（ｄ。

Ｉ　Ｈ）＋　　９．８（ｖｂｒｓ、　　１　Ｈ）＋　　
１　２．３（ｖｂｒ８、　２Ｈ）；　　ＵＶ　（Ｑ、１
　ＮＮａＯＨ）３Ｑ６ｎｍｍａｘ（１５１００）、２８
７ｍ１ｎ（１１７００）。

２７３ｍａｘ（１５２００）、　　２５０ｍ１ｎ（６５
００）。

２１　５　ｍａｘ　（２５８００） 元素分析：　Ｃ２ｏＥ２ｅＭａＯｔ”０−７　Ｈ２０（
Ｍｒ　４７５．０７）として計算値：　ｃ　５０．５６
ｔ　　Ｅ［５，８１、Ｎ１７．６９゜分析値：ｃ５０．
５８．　　Ｈ５，８５，Ｎ１７．６３＝（Ｌ）−グルタ
ミン酸の製造 ＝（Ｌ）−グルタミン酸ジエチルエステルの製造２−ク
ロロ−４−二トロ安息香酸（１０，０，Ｃ４９，６ミリ
モル）、（Ｌ）−グルタミン酸ジエチルエステル塩酸塩
（１１，９Ｌ　４９．６ミリモル〕および１−ヒげロキ
シベンゾトリアゾール・（６，７，９，４９，６ミリモ
ル）の乾燥ジメチルホルムアミ）’（２５０ｄ）溶液を
窒素気相下で攪拌しながら、トリエチルアミン（５，０
２、ｌｉ’、６．９２尼、４９．６　ミ！Ｊモル）全１
時間で滴加した。１５分後に、１，６−シシクロヘキシ
ルカルボキシイミド（１１，３，９，５４，６ミルモル
）を少量ずつ１分間で加えた。反応混合物を１８時間後
に濾過し、固体ｔジクロロメタン（２Ｘ５０１１７）で
洗浄した。

濾液を回転蒸発させると（高真空）、こはく色の残査が
得られ、これをジクロロメタン（３００ｍ）に溶解した
。有機相を飽和重炭酸塩溶液、５％クエン酸、および食
塩水（各１Ｘ３００ｄ）で順次洗浄した。有機相を次に
乾燥しくＭｇ５０４）、ａ過し、シリカゾルカラム（５
０口ｇ、予めジクロロメタンで湿潤させる）上に注いだ
。カラムをジクロロメタン（５００１ｄ）で洗浄し、つ
いで１０％および１５％酢酸エチル添加勾配で生成物を
溶出した（各８Ｘ２５０１Ｌｔ分画）。類似の分画を回
転源させ、乾燥すると白色の固体が得られた。収量９．
８　、！ｉ’　（５１％）；融点９５〜９６°Ｑ；ＩＨ
−ＮＭＲ（ＤＭＳＯ−ｄ、）δ１．１７および１．２１
（２を重複。

６Ｈ）７　１．８〜２．２（Ｉｔ　　２１Ｆ　　２．４
６（ｔＤＭＥ　Ｏにより不鮮明、２Ｈ）、４．０〜４．
２　（２ｑ重複５　４Ｈ）ｊ　　４．４６Ｃｍ、１　Ｈ
）、７．６８（ｄ。

ＪＯ−８Ｈ２，１Ｈ）、　　８．２５　（ａｘａ、　　
：ｒｏ＝８Ｈ２，Ｊｍ−２Ｈ２，１Ｈ）、　　８．３４
（ｄｒＪｍ−２Ｈｚ、　　ｉ　Ｈ）、９−１４（ｄｒ　
　Ｉ　Ｈ）　；ｎｖ（ＭｅＯＨ）　２６０　ｎｍ　ｍａ
ｘ　（９９３０）　ｐ２３６ｍｉｎ（６１８０）、　　
２［）５ｍａｘ（２５６０口）；マススペクトル（ＣＩ
　）ψ３８７（１００％）。

３４１　（４０）、１８４（２１） 元素分析：　Ｃ１６Ｈ１９ＣＩＮ２０７　（Ｍｒ　３８
６．７８　）として計算値：Ｃ！４９．６８．Ｈ４，９
５，Ｎ７．２４゜Ｃ’１９．１７．分析値：Ｃ４９，７
Ｌ　　Ｈ４，９８゜Ｎ　　７．２３．　　Ｃ１９，２３ Ｎ−（４−ニトロ−２−クロロベンゾイル）−（Ｌ）−
グルタミン酸（４，００，９，１０，３ミリモル）の氷
酢酸（２００尼）溶液を窒素気相下に攪拌しながら、亜
鉛末（１０，０，９）　’に一度に加えた。

１．５時間後に反応混合物を濾過し、固体を氷酢酸（２
Ｘ２５ＴＬｔ）で洗浄した。濾液全回転蒸発させると（
高真空）、澄明な黄色残留物が得られ、これをジクロロ
メタン（２００ｍ）に溶解した。有機相を飽和重炭酸塩
溶液（１ｘ２００ｍ／）で洗浄し、乾燥しくＭｇ５０４
）、濾過し、回転蒸発させ、乾燥すると黄色油状物が得
られ（３，６９，９゜１００％）＼ｔｌｃ上１個の主ス
ポットヲ示した（シリカ、４：１ジクロロメタン／酢酸
エチル、ｎｆ＝　０．３　）。生成物をフラッシュクロ
マトグラフィー法によって精製すると淡黄色の塊状物が
得られた。収量３．１２　ｇ（８５％　）　；　’Ｈ−
ＮＭＲ（ＤＭＳＯ−δ６）δ１．１６および１．１８（
２を重複。

６Ｈ）、　　１．８２〜２−１　　（ｂｒｍ、　　２Ｈ
）、　　２−４１（ｔ、２Ｈ）、４．Ｇ〜４．１（重複
、４Ｈ）。

４．３３（ｍ、　　ＩＨ）＋　　５．７２（ｂｒ８１　
２Ｈ）１６．４８（ｄＸｄ、　　Ｊｏ−８Ｈｚ、　　１
Ｈ）、　　８．３５（ｄ−、ｉ　　Ｈ）　　；　　Ｕ　
Ｖ　（ＭｅＯＨ）　２７０　ｎｍ　ｍａｘ（１２６００
）、　　２３８ｍ１ｎ（４５００）。

２０８ｍａ！（２８８００）；マススペクトル（ＣＩ）
ｍ／ｅ　３５７　（２２％Ｌ　　１５４（１０［１）元
素分析：　Ｃ１６Ｈ２１ＣＩＮ２０５　（Ｍｒ　３５６
−８０　）として計算値：ｃ５３．８６．Ｈ５，９３，
Ｈ７，８５゜Ｃ１９，９４，分析値：ｃ５３．９３．　
　ｕ５．９５．　　Ｈ７，８５，Ｃ１１０，０３ Ｎ−（４−アミノ−２−クロロベンゾイル）＝（Ｌ　）
−クルタミン酸ジエチルエステル（２，８４１゜７．９
６モル）と３−（２−アセチルアミノ−４−ジアセチル
アミノ−１，６−ジヒＶロー６−オキソ−５−２リミジ
ニル）プロビオンアルデヒＶ（２，７０Ｆ、８．フロミ
リモル）の両者を無水エタノール（１００７ｄ）中窒素
気相下に攪拌しながら、氷酢酸（６７ｊＬＪ）’ｅ１分
間で滴加した。溶液が生成したのち（０，５時間）、活
性化６八モルキュラーシーブ（２０１ｒＬｌ）を加え、
攪拌を３時間続けた。

反応混合物を冷却しく水浴）、水素化シアノホウ素ナト
リウム（５００■、７．９６ミルモル）ヲー度に加えた
。冷却したまま０．５時間攪拌したのち浴を除き、反応
混合物全放置して温度全室温まで上昇させた。１６時間
後に反応混合物を濾過し、固体をエタノール（１１］０
１Ｊ）で洗浄した。濾液を回転蒸発させ乾燥するとクリ
ーム状の泡状物が得られ、これ全酢酸エチル（１００！
Ｉ−ｇ）に溶解した。有機相全１：１食塩水／水（２Ｘ
１００ゴ〕で洗浄し、ついでシリカカラムラム（１７５
，９゜予め酢酸エチルで湿潤させる）上に注いだ。カラ
ム全酢酸エチル（４００ｄ）で洗浄し、生成物全５％メ
タノール添加で溶出した。類似の分画を回転蒸発によっ
て合すると白色の固体が得られた。

収量２．２８　、Ｆ　（４４％）；融点６３〜７２℃（
発泡）　；　ＩＨ−ＮＭＲ（ＤＭＳＯ−δ６）δ１．１
６および１．１８（２を重複、　　６Ｈ）、Ｃ６２（ｍ
、２Ｈ）、１．８〜２．２ＣｂｒｍＴ　　２Ｈ）１　２
．１２（ｓ、　　３Ｈ，ｌ１２．２３（８１６Ｈ）１　
２．２６（ｍ、２Ｈ）＋２．４２（ｔｌ　　２Ｈ）ｔ　
　２．２９Ｃｍｔ　　２Ｈ）７　３．９〜４．２（２ｑ
重複、　　４Ｈ）、　　４．３４（Ｉｎ＋　　１　”）
＋６．２９　（ｂｒ　ｔ、　　Ｉ　Ｈ）、　　６．４〜
６．６　（ｍ、　２Ｈ）。

７．２１　（ｄ、　　、ＴＯ＝８Ｈｚ、　　Ｉ　Ｈ））
　　８．３５（ａ。

１Ｈ）　ｒ　　ｉ　１−９　（ｖ　ｂｒ　ｄ　＋　　２
　Ｈ）　；Ｕ　Ｖ　（Ｍｅ　ＯＨ）２８９　ｎｍ　ｍａ
ｘ　（２６９００）　）　　２５７　ｍ１ｎ（１３４０
０）　、　２０７　ｍａｚ　（４４３００，）　；マス
スペクトル（ＦＡＢ　）　ｍ／ｅ　６４９　（４８％）
。

６１５（２２）、４４６Ｃ１０口）、４１２元素分析：
　Ｃ２９ＨｓｙＣＩＮ６０ｐ　（Ｍｒ　６４０−０９　
）　トして計算値：　Ｃ５３，６６、Ｈ５，７５，Ｎ１
２．９５゜Ｃ１５，４６＋　分析値：ｃ５３．５３．　
　Ｈ５，８０，Ｎ１　２．９１．　　Ｃ１５，４２ Ｎ−［４−（３−（２−アセチルアミノ−４−ジアセチ
ルアミノ−１，６−シヒドロー６−オキンー５−ピリミ
ジニル）プロピルアミノ−２−クロロベンゾイル）−（
Ｌ）−グルタミン酸ジエチルエステル（１，ＤＯ，！９
．１．５４ミリモル）の１．ＯＮ水酸化ナトリウム（２
５ｓＪ）中溶液を窒素気相下５５°Ｃで１８時間攪拌し
た。反応混合物を冷却しく水浴）、６Ｎ塩駿全徐々に滴
加してＦ８全２．５に調整した。冷却しながら１時間攪
拌したのち、生成した沈殿全ｆｌ！過し、ｐＨ２，５の
冷塩酸水溶液（２Ｘ２５ｄ）で洗浄し、乾燥すると白色
の固体が得られた。収１４６７■（６１％）；融点１５
０〜１７８℃（発泡）　；　’Ｈ−ＮＭＲ（ＤＭＳＯ−
Ｎ６）δ１．５５（ｍｌ　　２Ｈ）＋　　１．８〜２．
１　（ｍ、　　２Ｈ）？　　２．１〜２．４（ｍ、４Ｈ
）＋　　２．９７（ｍ、２Ｈ）、４．３２（ｍ、　１　
　ＨＬ　　５−６〜６．６（ｖｂｒｓ、　　１　Ｈ）。

５．８７および６．１２（２ｂｒｓ、　　４１１　６．
５［＋および６．５２　（ａおよびＳ重複、　　２Ｈ）
Ｔ　　７．２３（ｄ、　Ｊｏ＝８Ｈ２，１Ｈ）、　８．
２０　（ｄ、　１　Ｈ）。

１　０．０〜１　２．６（ｖｂｒｓ、　　１　　Ｈ）；
ｔｙｖ（０，Ｉ　　ＮＮａＯＨ）　２７１　　ｎｍ　ｍ
ａｘ　（２３０００）　ｔ　　２４１　　ｍ１ｎ（１０
０００）、　　２７１ｍａｘ（２８０００）元素分析：
　ＣｘｏＨ２ｓＣ１１Ｊ６０６・１−３　Ｎ２０　（Ｍ
ｒ４９０．３０　）として計算値：Ｃ４６，５４，Ｎ５
．２６．　　Ｎ　１７．１４．　　Ｃ１７，２３，分析
値：Ｃ４６，６６、ＥＩ５．１　８．　　Ｎ１　７．０
４．　　Ｃ１７，２８１，１１〜１．１２ｇの８０％鉱
油分散液から窒素気相下へキサンで洗浄して得られた水
素化ナトリウム０．８９２．Ｆ（０，０３７２モル）Ｋ
乾燥ジメチルホルムアミｒ２６ｙＬｔを加えた。この混
合物を攪拌しながら、滴加濾斗全通して４−トシルアミ
ノ安息香酸エチルエステル（Ｂａｋｅｒ、　Ｂ、Ｒ，、
５ａｎｔｉ。

Ｄ、Ｖ、５ｈａｐｉｒｏ、　Ｈ，ｓ、　：　、Ｔ、　Ｐ
ｈａｒｍ、　Ｓｃｉ、　１９６４゜５３：１３１７）１
０．ＯＯ，９（０，０３１３モル）の乾燥ジメチルホル
ムアミド５２１溶液を２１分を要して滴加し、ついで６
ゴのジメチルホルムアミｒで洗浄した。攪拌混合物が室
温まで冷えたら、１．４−ジブロモブタン２７．７４９
　（０，１２８モル）を−度に加えた。攪拌混合物をほ
ぼ８０°ＣＫ保持した浴で４時間４５分加熱し、放置し
て室温まで冷却し、窒素気相下に一夜放置した。混合物
を真空中４０℃で濃縮すると油状物／固体混合物２２．
３７　ｇが得られた。この混合物（酢酸エチル１００ゴ
を加え、不溶の固体を吸引濾過して集めた。濾液ｅ、７
００＆のシリカゾル６０かもなるカラムに適用し、６：
１ヘキサン／酢酸エチルを溶出溶媒として用いるフラッ
シュクロマトグラフィーで精製した。きれいな生成物の
主分画を合し、真空下に＃、縮すると無色の油状物が得
られ、白色の固体に固化した。収量１０．９１．９’　
（７７％）；ＮＭＲ（Ｍｅ２Ｓｏｄ、　）δ１．２９（
ｔ、　　３１．　１．３〜１、ｓ（ｍｔ　　２”Ｌ　　
１．７〜１．９（ｍｌ　　２Ｈ）１２．３７（８，３４
）、３．４７（ｔ、２Ｈ）δ３．６０（ｔ、２Ｈ）９　
４．２９（ｑｊ　　２Ｈ）δ７．２３　（ａ、　　２Ｈ
）、　　７．３〜７．５　（ＡＡ’ＢＢ’ｌ　４Ｈ）。

７．９１（ｄ、２Ｈ） カラムの後流分画からさらに５％の収率が得られた。

無水エタノール１０１７にナトリウム［１，５０６ｇ（
０，０２２［］モル）を窒素気相下に加え、この混合物
を短時間還流して溶液を生成させた。室温に冷却したの
ち、２分間を要してシアノ酢酸エチル２．７４．９　（
０，０２４２モル）七滴加した。混合物を１０分間還流
したのち、室温まで放冷した。ついで４−［：（４−ブ
ロモブチル〕トシルアミノ〕安息香酸エチルエステル５
．００．９　（０，０１１０モル）を６分間を要して添
加し、エタノール１５１ですすいだ。混合物を窒素気相
下に６時間還流し、室温まで放冷し、−夜装置した。氷
酸で中和し、真空下に濃縮して湿潤した固体とし、これ
に水５Ｑｍおよびエーテル５０ゴを添加した。混合物を
分液濾斗中で振盪し、層全分離した。水層を２Ｘ５０ｍ
／のエーテルでさらに洗浄し、エーテル洗液と合して、
硫酸マグネシウム上で３日間乾燥し、濾過し、高真空下
に６０℃で濃縮すると粘稠な桃色の油状物が得られた。

この油状物’ｅ　４００．９のシリカゾル６０上、溶出
溶媒として６：１ヘキサン／酢酸エチルを用いてフラッ
シュクロマトクラフィーに付し精製した。きれいな生成
物を含む分画を合し、真空下に濃縮すると、無色の粘稠
な油状物が得られた。収量２．７６　Ｆ　（５０％）：
ＮＭＲ（Ｍｅ２ＳＯｄ５　）δ１．１９　（ｔ、　　３
Ｈ）、　　１．２９（ｔ、　　３Ｈ）、　　１．３〜１
．５（Ｉｎｌ　　４Ｈ）、　　１．６５〜ｉ、８５（ｍ
、２１，２．３７（ａ、３ａＬ３．５〜３．７（ｍｌ　
　２Ｈ）、　　４．１４（ｔｊ　　ＩＨ）ｊ４．１５（
ｑｔ　　２Ｈ）＋　　４−２９（ｑ＋　　２Ｈ）＋７．
２２（ｄ、　　２Ｈ）、　　７．３〜７．５　（ＡＡ’
ＢＢ’、　　４Ｈ）。

７．９０　（ａ、　　２Ｈ）ｌ　酢酸エチル０．１５モ
ル無水エタノール８属中ナトリウム０．３７７．９（０
，０１６４モル）の溶液に窒素気相下グアニジン塩酸塩
１．０４．Ｆ（０，［］１１０９モルを加え、無水エタ
ノール１ゴですすいだ。混合物を６０分間攪拌し、これ
に４−４：（５−シアノ−６−二トキシー６−オキソヘ
キシル）トシルアミノ〕安息香酸・０．１５酢酸エチル
２．７３　、！ｉ’　（０，００５４６モル）の無水エ
タノール６ｄ中溶液を加え、ついで無水エタノール７ゴ
ですすいだ。混合物を４時間還流し、室温にまで放冷し
、窒素気相下に一夜放置した。反応混合物を吸引濾過し
、濾液全氷酢酸０．９８４　ｇ（０，０１６４モル）で
中和した。この溶液を真空下３０’Ｃで濃縮すると固体
が得られた。

これを水５０ｍ１で十分洗浄し、吸引濾過によって集め
、再び２５．２５およびｌＱｍの水で洗浄し、真空下６
０°Ｃで乾燥した。収量２．７６．１ｉ’。フーリエ変
換ＮＭＲ（Ｍθ２Ｓｏｄ（５）および化学イオン化マス
ペクトロスコピーでは、生成物と非環状中間体の混合物
であることを示した。固体サンプル２．４１．Ｆヲ、無
水エタノール１６８反中ナトリウム３．１６１？（０，
１３７モル）を含む溶液に、窒素気相下で添加した。混
合物を加熱還流し、得られた溶液を６時間１５分還流し
た。わずかに濁った溶液を室温まで放冷し、生成した混
合物全窒素気相下に一夜放置した。混合物を短時間加熱
還流し、得られたわずかに濁って因る熱溶液を氷酢酸８
．３０９（０，１３８モル）で中和した。濃厚な混合物
を真空下３５°Ｃで濃縮し、生成した白色固体に水５Ｑ
ｍｊを加えた。次に混合物全攪拌しながら約５〜８ｄの
濃塩酸全知えた。−５，５の混合物全吸引濾過し、集め
た固体を水１５および２０ゴで洗浄し、デシケータ−中
真空下に室温で一夜乾燥した。収量１．９８．９（８４
％）　：ＮＭＲ（Ｍｅ２ＳＯｄ６　）δ１．２〜１．４
（ｍ、４Ｈ）、２．０６（ｔｌ　　２Ｈ）、２．３７（
８１３Ｈ）、３．５４（ｔｊ　　２Ｈ）、５．５８（ｂ
ｒａ、　　２１ｊ　　５−８９（ｂ”ｔ　　２Ｈ）＋７
．１　４（ｄ、　　２Ｈ）、　　７．３〜７．５　（Ａ
Ａ’　ＢＢ’、４　”　）＋７．８＜Ｓ（ｄ、２Ｈ）、
９．７５（１）ｒ）ｌ　酢酸０．１６モル ４−０４−（２，４−ジアミノ−１，６−ジヒげロー６
−オキソ−５−ピリミジニル）ブチル〕トシルアミノ〕
安息香酸・０．１３酢酸１．Ｄｏ、９（０，００２０９
モル）を乾燥ジクロロメタン６ゴおよび乾燥ジメチルホ
ルムアミドと混合し、窒素気相下これに１−ヒドロキシ
ベンズトリアゾール０．４３３．９　（０，００３１３
モル）を加えた。１７分後、この混合物に１，３−ジン
クロヘキ／ルカルボジイミげ０．６４６．９　（０，０
０６１３モル）を加え、ついでさらに６ゴの乾燥ジメチ
ルホルムアミＰおよびさらに６ゴの乾燥ジクロロメタン
を加えた。１時間６分後、この混合物に、グルタミン酸
ジエチルエステル塩酸塩０．７５０９（０，０口３１３
モル）と４−メチルモルホリン０．６３３　ｇ（０，０
口６２６モル）を乾燥ジクロロメタン６ゴと乾燥ジメチ
ルホルムアミド６　ｍｌにとった白濁溶液を加えた。混
合物を窒素気相下に５９時間２０分攪拌し、ついで１，
６−ジシクロへキシル力ルポジイミν０．４３１　、Ｆ
　（０，００２０９モル）を加えた。混合物を１７時間
１５分攪拌し、真空下６６℃で濃縮し、残留物にメタノ
ール２５コを加えた。不溶の白色固体を吸引濾過して集
め、濾液を１７５ｙのシリカゾル６０上、溶出溶媒とし
て８：１酢酸エテル／メタノールを用いてフラッシュク
ロマトグラフィーによって精製した。生成物を含む主分
画を合し、真空下に濃縮すると灰白色の固体が得られた
。収量０．７４．９　（約５０％）：ＮＭＲ（Ｍθ２Ｓ
Ｏｄ６　）　Ｊ　１．１４　（ｔｔ　　３Ｈ）＋　　１
．１７（ｔ、　　３Ｈ）、　　１．２〜１．４（Ｉｎｔ
　　４Ｈ）、　　１．９〜２．２（ｍ、４Ｈ）、２．３
７（ｓ＃　　３Ｈ）＋　　２．４（ｔｔ　　２Ｈ）、３
．５５（ｔｊ　　２Ｈ）？　　４．０３（ｑｔ２Ｈ）＋
　　４．１０　＜、　ｑ、　　２Ｈ）ｊ　　４．４１　
（ｍｔ　１Ｈ））５．５８　（ｂｒ ７．１５（ｄ。

７．８１（ｄ。

９．６８　　（ｂｒ ０６１２モル、 ８＋　　２　Ｈ）　＋　　５．８５　（ｂ　ｒ　ｓ　ｔ
　　２　Ｈ）　ｙ２Ｈ）、７．３〜７．５　（ＡＡ’Ｅ
Ｂ’、　　４Ｈ）。

２Ｈ）、　　８．７５（ｄｔ　　ＩＨ）ｊｓ、１Ｈ）、
ジメチルホルムアミｒ ＣＯＮＨＣＨ残基を含む不純物０．１モルフエノール０
．３１３　ｇ（０，００３３３モル）を酢酸中３１％臭
化水素酸４．７０１ｄにとった溶液を、窒素気相下、Ｎ
−１１４−（（４−（２，４−ジアミノ−１，６−ジヒ
げロー６−オキソ−５−ピリミジニル）ブチル〕トシル
アミノ〕ベンゾイル〕−Ｌ−グルタミン酸ジエチルエス
テル’０．１２ジメチルホルムアミｐ　ｃ　ｏ、ｉモル
の不純物含有）０．７０．９　（約［１，００１０５モ
ル）に加えた。２０分以内に完全な溶液が生成した。１
時間３０分後、この溶液にエーテル３９ｊｌ−加えると
、赤橙色の油状物が生成した。混合物を吸引濾過し、油
状物を、詰った７リツトを刺激しなから５Ｘ１０ｍのエ
ーテルで洗浄し、真空下に２日間乾燥した。生成した固
体／油状物の混合物に１５ｍの１Ｎ水酸化ナトリウムを
加え、混合物を窒素気相下４０°Ｃの浴中で１時間５分
攪拌した。吸引濾過し、濾液全濃塩酸でｐＨ３−５の酸
性とした。沈殿した固体全吸引濾過して集め、５×５１
！Ｌｔの水で洗浄し、真空下に一夜乾燥した。収量０．
２５４，９．このサンプル０．２４４．９に１Ｎ水酸化
ナトリウム１０ゴを加え、溶液を窒素気相下、４０〜４
７°Ｃの浴中で６０分間加熱し、室温に放冷した。少量
の固体を吸引濾過して除き、濾液を濃塩酸で阻６．５の
酸性にした。沈殿した灰色の固体を吸引ａ過によって集
め、水４×５ゴで洗浄し、真空中で一夜乾燥した。収量
０．２１４　ｇ。固体のサンプル０．［］　４０．９を
沸騰９５％エタノール２０１１１７に溶解し、この溶液
ｔ　Ｏ，００５＆のＤａｒＣＯＧ　−６０で処理し、濾
過した。濾液を煮沸して４ゴに濃縮し、室温に放冷し、
１時間放置した。沈殿した淡黄色の固体を吸引濾過し、
２　Ｘ　Ｏ，５ｒＩＬｔの９５％エタノールで洗浄し、
真空下に一夜乾燥した。収量０．０１３５　、ｌｉ’（
約２１％、ＨＰＬＣによる純度９０〜９５％）：ＮＭＲ
（Ｍ８２８０ｄ６　）δ１．２〜１．６　（ｍ、　　４
　ＨＬｌ、８〜２．１　Ｃｍｔ　　２１．　２．１７（
ｔｔ　　２Ｈ）７２．３１　（ｔｔ　　２Ｈ）ｆｆ　　
２．９〜３．１　（ｍ、　　２Ｈ）。

４．２〜４．４（ｍｌ　　Ｉ　Ｈ）、　　５．６３（ｂ
ｒｓ、　２Ｈ）。

ｓ、５７（ｂｒｓｙ　　２Ｈ）、　　６．１９（ｔ、Ｉ
ＨＬ６．５２Ｃｔｌ、２Ｂ）、７．６２（ｄｌ　　２１
１）ｔ８．０４（ｄｔ　　Ｉ　Ｈ）＋　　９．７５（ｂ
ｒｓ、　　ｉ　Ｈ）ｙｌ　２．３５（ｂｒｓ、２Ｈ）ｙ
　　０−３３モルのエタノール、弱い不純物ピーク 胞培養法 細胞およびメジウム：アメリカン・タイプ・カルチャー
φコレクション（ＡＴＣＣ）から入手したＭＣＩＦ　−
７乳腺腺癌を、葉酸源として葉酸の代わりに１３ｍＭロ
イコボリンカルシウム、１０％透析ウシつ仔血清、ペニ
シリン、ストレプトマイシンおよびピルビン酸ナトリウ
ム（１１０μｌ／ＩＬＩ　）　ｔ−補充したＲＰＭ工１
６４０中で生育させる。

細胞毒性検定：パーキンエルマーＰｒｏ／ｐｅｔｔｅ　
ｆ用いて細胞を９６ウエル板に播種する。ウェルあたり
、メジウム１５０μ！中細胞ｉ　ｓ、ｏ　ｏ　ｏ個の割
合でＭＣＩＩ’　−７細胞を播種する。薬剤の添加前に
、培養液を６７°Ｃで２４時間インキュベートする。

化合物を１５０μｌのメジウム中２×濃度で添加し、各
濃度での検定を三重に行った。培養液を、３７°含湿イ
ンキユベ一ター中５％ＣＯ２で７２時間インキュベート
した。細胞の生育の阻害’ｉＭＴＴ染料還元検定を用い
て測定した。

ＭＴＴ染料還元検定ニア２時間対数期培養液から標準曲
線用の細胞希釈液を調製した。希釈系列に９６ウ工ル板
中三重に播種を行い、３７℃で１時間インキュベートし
た。ＭＴＴ（３（４，５−ジメチルチアゾール−２−イ
ル）−２，５−ジフェニルテトラゾリウムプロミド）　
ｉ　ＰＢＳに５■／ｇの濃度で溶解し、６０秒間超音波
処理した。パーキンエルマー　Ｐｒｏ／ｐｅｔｔｅ　ｆ
用−、メジウム２００紅全除去して、標準曲線のウェル
および試験プレートにＭＴＴ　１００μｌを加えた。懸
濁培養液を１００　Ｏｒｐｍで５分間回転させたのち、
ウェルからメジウムを除去した。プレートはプラットホ
ームシェーカー上、６７℃で１時間インキュベートシタ
。このインキュベーションについで、メジウム１００μ
ｌｌｒウエルから除去し、各ウェルにＤＭＳＯ１Ｑ　Ｑ
μｌ全加えた。プレートを約１０秒間超音波処理して、
沈殿したホルマデン染料全可溶化した。各ウェルの吸光
度’ｚ、ＴｉｔθｒｔｅｋＭｕｌｔｉｓｋａｎ　Ｍ　Ｃ
マイクロタイターΦプレート・リーダーを用い、７５０
ｎｍの波長を対照として５７０　ｎｍで測定した。

例２．６．４．５および６の化合物はＭＣＦ　−７細胞
の生育阻害活性を示すことが明らかにされた。

Claims (7)

【特許請求の範囲】
1. （１）式（ I ） ▲数式、化学式、表等があります▼（ I ） （式中、Ｒ＾１は水素であり；Ｒ＾２およびＲ＾３は同
   種または異種で、それぞれ水素またはＣ＿１＿〜＿４ア
   ルキルであり；Ｒ＾４はＮＲ＾１＾１Ｒ＾１＾２であり
   ；Ｒ＾５、Ｒ＾６、Ｒ＾１＾１およびＲ＾１＾２はそれ
   ぞれ水素であり；ｍは０であり；ｎは３であつてＲ＾７
   、Ｒ＾８、Ｒ＾９およびＲ＾１＾０のひとつはクロロ、
   フルオロ、メチルもしくはメトキシであり、残りは水素
   であるか、またはｎは４であつてＲ＾７、Ｒ＾８、Ｒ＾
   ９およびＲ＾１＾０はそれぞれ水素である）で示される
   化合物およびその医薬的に許容される塩。
2. （２）Ｒ＾２とＲ＾３はいずれも水素である特許請求の
   範囲第１項に記載の化合物。
3. （３）Ｎ−〔４−（３−（２，４−ジアミノ−１，６−
   ジヒドロ−６−オキソ−５−ピリミジニル）プロピルア
   ミノ）−２−フルオロベンゾイル〕−（Ｌ）−グルタミ
   ン酸 Ｎ−〔４−（３−（２，４−ジアミノ−１，６−ジヒド
   ロ−６−オキソ−５−ピリミジニル）プロピルアミノ）
   −３−フルオロベンゾイル〕−（Ｌ）−グルタミン酸、 Ｎ−〔４−（３−（２，４−ジアミノ−１，６−ジヒド
   ロ−６−オキソ−５−ピリミジニル）プロピルアミノ）
   −３−メチルベンゾイル〕−（Ｌ）−グルタミン酸、 Ｎ−〔４−（３−（２，４−ジアミノ−１，６−ジヒド
   ロ−６−オキソ−５−ピリミジニル）プロピルアミノ）
   −３−メトキシベンゾイル〕−（Ｌ）−グルタミン酸、 Ｎ−〔４−（３−（２，４−ジアミノ−１，６−ジヒド
   ロ−６−オキソ−５−ピリミジニル）プロピルアミノ）
   −２−クロロベンゾイル〕−（Ｌ−）グルタミン酸、 Ｎ−〔４〔〔４−（２，４−ジアミノ−１，６−ジヒド
   ロ−６−オキソ−５−ピリミジニル）ブチル〕アミノ〕
   ベンゾイル〕−（Ｌ）−グルタミン酸、またはこれらの
   医薬的に許容される塩から選ばれる化合物。
4. （４）特許請求の範囲第１項から第３項までのいずれか
   に記載の化合物またはその医薬的に許容される塩と医薬
   的に許容される担体からなる医薬組成物。
5. （５）癌の治療に使用するための特許請求の範囲第１項
   から第３項までのいずれかに記載の化合物。
6. （６）医薬の製造に使用するための特許請求の範囲第１
   項から第３項までのいずれかに記載の化合物。
7. （７）特許請求の範囲第１項に定義した式（ I ）の化
   合物またはその塩を製造するにあたり、式（II）▲数式
   、化学式、表等があります▼（II） （式中、Ｒ＾１、Ｒ＾２、Ｒ＾３、Ｒ＾７、Ｒ＾８、Ｒ
   ＾９およびＲ＾１＾０ならびにｎおよびｍは式（ I ）
   において定義したとおりであり、基Ｒ＾５、Ｒ＾６、Ｒ
   ＾１＾１およびＲ＾１＾２のひとつはＣ＿１＿〜＿１＿
   ２アシルであり、他の基Ｒ＾５、Ｒ＾６、Ｒ＾１＾１お
   よびＲ＾１＾２は同種または異種で、水素またはＣ＿１
   ＿〜＿１＿２アシルである）で示される化合物を脱アシ
   ル化し、生成した式（ I ）の化合物のＲ＾２およびＲ
   ＾３の一方または両者をついで所望により別のＲ＾２お
   よび／またはＲ＾３に変換し、所望により塩を形成させ
   ることを特徴とする方法。