JPH03103200A - 回転失調症の遺伝的診断 - Google Patents
回転失調症の遺伝的診断Info
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Abstract
(57)【要約】本公報は電子出願前の出願データであるた
め要約のデータは記録されません。
め要約のデータは記録されません。
Description
本発明は、遺伝的連鎖の分析において組換えＤＮＡ法を
用いる、回転失調症（ｔｏｒｓｉｏｎ ｄｙｓｔｏｎｉ
ａ）の検出試験、特に発症前の試験に関する。
用いる、回転失調症（ｔｏｒｓｉｏｎ ｄｙｓｔｏｎｉ
ａ）の検出試験、特に発症前の試験に関する。
回転失調症は、異常姿勢、あるいは歪んだ運動および反
復運動を引き起こすことが多い持続的な筋肉収縮を特徴
とする未知病因の運動障害である［Ｆａｈｎ， Ｓ．
， Ｉｎ Ｍｏｖｅｍｅｎｔ Ｄｉｓｏｒｄｅｒｓ ２
． Ｃ． Ｄ． Ｍａｒｓｄｅｎ＋ａｎｄ Ｓ． Ｆａ
ｈｎ， ｅｄｓ． （Ｂｏｓｔｏｎ：Ｂｕｔｔｅｒｗｏ
ｒｔｈｓ）， ｐｐ． ３３２３５８（１９８７）］．
顕著な失調症を示す患者の約６６％は１次的（特発性）
なものであり、その残りは、ＧＭ２ガングリオシドーシ
ス、ハレルフォルデン症候群、バーキンソン病気、ハン
チントン病およびリバー病などの他の神経障害の２次症
状として発生するか［Ｎｏｖｏｔｎｙ，Ｅ．Ｊ． ｅｔ
ａｌ．，Ｎｅｕｒｏｌ． ３６： １０５３−１０６
０（１９８６）］、または薬物治療もしくは脳損傷、特
に脳幹神経節の領域における損傷の結果である。 特発性回転失調症（ＩＴＤ）の病気頻度は未知であり、
そして恐らくは過小評価されているが、これはこの病気
の発現が不定であり、罹患患者の一部が医学的な手当を
受けないからである。米国では約１００，０００例の失
調症が存在し、その約半分が遺伝性のものであると考え
られている。病気頻度は総人口のおよそｌ．／１６０，
０００と見られており［Ｚｅｍａｎ，Ｗ． ｅｔ ａｌ
．，Ｐｓｙｃｈｉａｔｒｉｃ Ｎｅｕｒｏｌｏｇｉａ
Ｎｅｕｒｏｃｈｉｒｕｒｇｉａ ７７−１２１（１９６
７）コ、中東部ヨーロ，パユダヤ人ではそれより頻度が
高＜ｌ／１５，０００〜１／２３．０００と見られテイ
る［２ｉ１ｂｅｒ，Ｎ． ｅｔ ａＩ．，Ｊ．Ｍｅｄ
．Ｇｅｎｅｔ． ２１ ： １３−２０（１９８４）
；Ｅｌｄｒｉｄｇｅ，Ｒ．，Ｎｅｕｒｏｌ． ２０
： １−７８（１９７０）コ。 遺伝性失調症の別の臨床的サブタイプが、発症の年齢、
失調症の種類、および薬物への応答性を基に総人口中で
示されていた［Ｓｅｇａｗａ，Ｍ． ｅｔ ａｌ．，Ａ
ｄｖ． Ｎｅｕｒｏｌ． １４ ： ２１５−２３３（
１９７６） ； Ｌａｎｃｅ， Ｊ． １１． ，＾ｎ
ｎａｌ． Ｎｅｕｒｏｌ． ２ ： ２８５−２９３（
１９７７） ； Ｑｕｉｎｎ， Ｎ． Ｐ． ｅｔａｌ
． ， Ａｄｖ． Ｎｅｕｒｏｌ． ５０ ： ３９１
−４０１（１９８ｇ） ； Ｋｕｒｌａｎ， Ｒ，ｅｔ
ａｌ．，Ａｄｖ．Ｎｅｕｒｏｌ． ５０ ： ３８５
−３８９（１９８８） ； Ｎｙｇａａｒｄ，Ｔ．Ｇ．
ｅｔ ａｌ．，Ａｄｖ．Ｎｅｕｒｏｌ． ５０： ３
７７−３８４（１９８ｇ）； Ｆｏｒｓｇｒｅｎ．Ｌ．
ｅｔ ａｌ．，Ａｄｖ．Ｎｅｕｒｏｌ． ５０ ：
８３−９２（１９８８）］。ほとんど全ての家族性の形
態は、Ｘ一連結したフィリピン人形態であることを除い
て、減少した浸透度を有する遺伝形質の常染色体の優性
モードに従うようである［Ｌｅｅ，Ｌ．Ｖ． ｅｔ ａ
ｌ．，Ａｄｖ．Ｎｅｕｒｏｂ． １４ ： １３７−１
５１（１９７６） ； Ｆａｈｎ，Ｓ． ｅｔ ａｌ．
，Ａｎｎ．Ｎｅｕｒｏｌ． ２４ ： １７９（１９８
８）コ。ユダヤ人ならびに非ユダヤ人の一部においては
、この集団の初期発症の症例は年齢９才のときに集中し
、より全身的に関係するまで進行する傾向にあるが、一
方、後期発症の症例は年齢およそ４８才のときに集中し
、より限定された領域の徴候を示す傾向にある［Ｆａｈ
ｎ．Ｓ．，Ｃｌｉｎｉｃａｌ Ｎｅｕｒｏｐｈａｒｍ．
９（Ｓｕｐｐｌ． ２） ： Ｓ３７−Ｓ４８（１９
８６）］。しかし、発症年齢および臨床的な発現度は、
恐らくは全ての個体が同一の欠損遺伝子を有している家
族内で顕著に変わり得る。最近の研究は、３１％の浸透
度のユダヤ人集団における遺伝形質の常染色体優性モー
ドを支持しているが［Ｂｒｅｓｓｍａｎ，Ｓ．Ｂ． ｅ
ｔ ａｌ．，Ａｄｖ．Ｎｅｕｒｏｌ． ５０ ： ４５
−５６（１９８８ｂ） ； Ｚｉｌｂｅｒ，Ｎ． ｅｔ
ａｌ．， Ｊ．Ｍｅｄ．Ｇｅｎｅｔ． ２１ ： １
３−２０（１９８４）］、初期の研究は一部の家族にお
ける遺伝形質の常染色体劣性モードを示唆していた［Ｅ
ｌｄｒｉｄｇｅ， Ｒ． ． Ｎｅｕｒｏｌ． ２０
： ｌ−７８（１９７Ｇ）］。 ユダヤ人集団における失調症は、この明らかに優性なア
レルの推定の高頻度（１／１．０．０００）［Ｚｉｌｂ
ｅｒ，Ｎ． ｅｔ ａｌ．，Ｊ．Ｍｅｄ．Ｇｅｎｅｔ．
２１ ： Ｈ−２０（１９８４）］ ；担体の状態を
遮蔽するアレルの低浸透度；およびさらに重篤な疾病の
進行と関係している通常は早期の発症年齢［Ｆａｈｎ，
ｓ． ＋ Ｃｌ ｉｎｉｃａｌ Ｎｅｕｒｏｐｈａｒ
ｓ． ９（Ｓｕｐｐｌ． ２） ： ３３７−３４８（
１９８６）］にゆえに、特に重要な医学上の問題である
。本発明において調べた非ユダヤ人家族を含む、ユダヤ
人および非ユダヤ人集団における失調症の間の臨床的特
徴および発症年齢の類似性［Ｂｕｒｋｅ，Ｒ．Ｅ． ｅ
ｔ ａｌ．，Ｍｏｖｅｍｅｎｔ Ｄｉｓｏｒｄｅｒｓ
ｌ ： １６３−１７８（１９８６） ； Ｂｒｉｎ，
Ｍ．Ｆ． ｅｔａｌ．，Ｎｅｕｒｏｌ． ３７ ： １
３７（１９８７） ； Ｂｕｒｋｅ，Ｒ．Ｅ． ｅｔ
ａｌ．，Ｎｅｕｒｏｌ． ＋ （１９８９） ： ］は
、同一の遺伝子が関与している可能性を示唆するもので
ある。 遺伝性失調症の分子病因は、限定された数の神経化学お
よび神経病理学的研究だけが死亡した患者の脳試料で行
われ、これらの患者が遺伝および非遺伝型の両型の失調
症の範囲に入るので、理解するのが困難であった。脳幹
神経節における多数の別タイプの損傷が失調症を引き起
こし得るという事実は、不随意の運動を制御しているこ
とが知られているこの脳領域が関与していることを示す
ものである［Ｃａｌｎｅ， Ｄ． Ｂ． ｅｔ ａｌ．
．＾ｄｖ． Ｎｅｕｒｏｌ． ５０ ：９−３３（１
９８ｇ） ； Ｍａｒｓｄｅｎ， Ｃ． Ｄ． ｅｔ
ａｌ． ， Ｂｒａｉｎ １０８ ： ４６１−４８３
（１９８５）］。さらに、２４にわたる別の遺伝的状態
が２次的な失調症を現し得る［Ｆａｈｎ， Ｓ． ．
Ｉｎ Ｍｏｖｅｍｅｎｔ Ｄｉｓｏｒｄｅｒｓ ２
＋Ｃ．Ｄ．Ｍａｒｓｄｅｎ，ａｎｄ Ｓ．Ｆａｈｎ，ｅ
ｄｓ． （Ｂｏｓｔｏｎ ： ＢｕＬｔｅｒｗｏｒｔｈ
ｓ），ｐＰ． ３３２−３５８（１９８７）］。 また、これらの発見は、ブローオピオメラノコルチン（
ｐｒｏ−ｏｐｉｏｍｅｌａｎｏｃｏｒｔｉｎ）のＮ一末
端を青斑に［ Ｊａｃｑｕｅｔ， Ｙ． Ｆ． ｅｔ
ａｌ． ， Ｓｃｉｅｎｃｅ ２１８ ： １７５−１
７７（１９８２）］、またはノルエビネフリンを線条、
赤核、アカムベン（ａｃｃｕｍｂｅｎ）もしくは視床に
［ｄｅ Ｙｅｂｅｎｅｓ，Ｊ．Ｇ． ｅｔ ａｌ．，Ｎ
ｅｕｒｏｌ． ３８（Ｓｕｐｐｌ． ｌ） ： ２０７
（１９８８）］、定位注射することによってラットにお
いて失調症を明瞭かつ特異的に誘導しうろことを示唆す
るものである。最近になって、神経細線維のもつれを含
む別個の神経病理学的変化が２９才のユダヤ人男性の脳
に観察された［Ｈｅｄｒｅｅｎ， Ｊ． Ｃ． ｅｔ
ｍｌ． ， Ａｄｖ．Ｎｅｕｒｏｌ． ５０ ： １２
３−１３０（１９ｇｇ）］ ；以前の研究では遺伝性失
調症の２つの症例で異常は観察されなかった［Ｚｅｍａ
ｎ，Ｗ．，Ｎｅｕｒｏｌ． ２０（Ｐａｒｔ ＩＩ）：
７９−８８（１９７０）］。 ヒトにおいて失調症を誘導することができる薬物処置に
は、Ｌ−ＤＯＰＡ，Ｄ−２受容体アンタゴニストおよび
抗痙彎薬が含まれる［Ｆａｈｎ， Ｓ． ＋ Ｉｎ Ｍ
ｏｖ（Ｂｏｓｔｏｎ ： Ｂｕｔｔｅｒｗｏｒｔｈｓ
），ｐｐ．３３２−３５８（１９８７）コ。 部の患者においては薬物治療は症状を緩和することがで
きるが、ほとんどの形態の失調症では一致した「最善の
」治療法は存在しない。一部の患者で有用であることが
わかった薬物には、抗コリン作勤薬、ペンゾジアゼピン
およびカルバマゼビンが含まれる。特異的な薬理療法に
応答する２つの可能性ある病因的および遺伝的に別形態
の遺伝性失調症は、レボドパで治療することがきる失調
症一パーキンソン症候群コンプレックス［Ｎｙｇａａｒ
ｄ， Ｔ．Ｇ． ｅｔ ａｌ．，Ａｄｖ．Ｎｅｕｒｏｌ
． ５０ ： ３７７−３８４（１９８ｇ）］、および
アルコールによって軽減することができるミオクローヌ
スー失調症［Ｑｕｉｎｎ，Ｎ．Ｐ． ｅｔ ａｌ．，Ａ
ｄｖ．Ｎｅｕｒｏｌ． ５０ ： ３９１−４０１（１
９ｇｇ）］である。 ＤＮＡの多形性を用いる連鎖分析は、適当な家系の資料
が人手できるときには、ヒト集団において遺伝性の疾病
を引き起こす遺伝子の染色体位置を見つけるための強力
な手段を与える。この分析における最近の進歩には、ゲ
ノム全体に散在する可変数の直列反復（ＶＮＴＲ）配列
によって付与される高多形性のマーカー［Ｎａｋａｍｕ
ｒａ，Ｙ． ｅｔ ａｌ．，Ｓｃｉｅｎｃｅ ２３５
： １６１６−１６２２（１９８７） ； Ｊｅｆｒｒ
ｅｙｓ， Ａ． Ｊ． ｅｔａｌ． ， Ｎａｔｕｒｅ
３１４ ： ６７−７３（１９８５）］、および＜１
０センチモルガン（ｃＭ）間隔でほとんど完全なヒトゲ
ノムにわたる既知の組換え間隔で隔てられている多数の
マーカー配列［Ｄｏｎｉｓ−Ｋｅｌｌｅｒ，Ｈ． ｅｔ
ａｌ．，Ｃｅｌｌ５１ ： ３１９−３３７（１９８
７） ； Ｔｈｉｔｅ， Ｒ． ｅｔ ａｌ． ， Ｎ
ａｔｕｒｅ ３１３ ： ｌｏｔ−１０５（１９８５）
］が含まれる。この方法を用いて、遺伝性の神経疾病を
引き起こす２０以上の遺伝子の染色体位置が確立された
（ＨＨＭＩ、ヒト遺伝子マッピングライブラリーを参照
）。削除突然変異が存在する疾病のうちの２つ、網膜芽
腫およびデュジエーヌ筋ジストロフィーについて、この
位置情報は原因遺伝子（両者とも、これまで記載された
ことのないタンパク質をコードしている）の発見に導い
た［Ｌｅｅ，Ｗ−Ｈ． ｅｔ ａｌ．，Ｎａｔｕｒｅ
３２９ ： ６４２−６４５（１９ｇ？） ； Ｈｏｆ
ｆｍａｎ， Ｅ． Ｐ． ｅｔ ａｌ． ， Ｃｅｌｌ
５１ ： ９１９−９２８（１９８７）コ。 回転失調症を引き起こす遺伝子（群）の染色体位置はこ
れまで同定されていなかった。タンパク質および制限フ
ラグメント長の多形性（ＲＦＬＰ）マーカーを用いる、
多数のアメリカインディアン家系および仏国、英国の非
ユダヤ系家族における研究が、Ｊｏｈｎｓｏｎ等によっ
て初めて記載され［Ａｒｃｈ． Ｎｅｕｒｏｌ． ７
： ３０１−３Ｈ（１９６２）］、候補遺伝子ブローオ
ビメラノコルチンおよびグルタミン酸デカルボキシラー
ゼ［Ｂｒｅａｋｅｆｉｅｌｄ，Ｘ．Ｏ． ｅｔ ａｌ．
，Ｊ．Ｎｅｕｒｏｇｅｎｅｔ． ３： １５９−１７５
（１９８６）］、ならびに染色体ｌｉｐ，１３ｑおよび
２１ｑの大きな領域［Ｋｒａｍｅｒ， Ｐ． Ｌ．ｅｔ
ａｌ．．Ｇｅｎｅｔ． Ｅｐｉｄｅｍｉｏｌ． ４
： ３７７−３８６（１９８７）］を含む、ゲノムの常
染色体補体の約２０％を除外し（１９８８）］。この家
族はある形態の失調症を示し、これは浸透性の、減少し
た遺伝形質の常染色体優性モードに一致していた。この
家族の失調症の臨床的な症候群および発症年齢は、優性
遺伝形質に一致する家系のユダヤおよび非ユダヤ家族に
ついて記載されているものに類似している［Ｂｕｒｋｅ
， Ｒ， Ｅ．Ｂｒｉｎ，Ｍ．Ｆ． ｅｔ ａｌ．，
Ｎｅｕｒｏｌ． ３７ ： １３７（１９８７）
； Ｂｕｒｋｅ，Ｒ．Ｅ． ｅｔ ａｌ．，Ｎｅｕ
ｒｏｌ．＋（１９８９）］。
復運動を引き起こすことが多い持続的な筋肉収縮を特徴
とする未知病因の運動障害である［Ｆａｈｎ， Ｓ．
， Ｉｎ Ｍｏｖｅｍｅｎｔ Ｄｉｓｏｒｄｅｒｓ ２
． Ｃ． Ｄ． Ｍａｒｓｄｅｎ＋ａｎｄ Ｓ． Ｆａ
ｈｎ， ｅｄｓ． （Ｂｏｓｔｏｎ：Ｂｕｔｔｅｒｗｏ
ｒｔｈｓ）， ｐｐ． ３３２３５８（１９８７）］．
顕著な失調症を示す患者の約６６％は１次的（特発性）
なものであり、その残りは、ＧＭ２ガングリオシドーシ
ス、ハレルフォルデン症候群、バーキンソン病気、ハン
チントン病およびリバー病などの他の神経障害の２次症
状として発生するか［Ｎｏｖｏｔｎｙ，Ｅ．Ｊ． ｅｔ
ａｌ．，Ｎｅｕｒｏｌ． ３６： １０５３−１０６
０（１９８６）］、または薬物治療もしくは脳損傷、特
に脳幹神経節の領域における損傷の結果である。 特発性回転失調症（ＩＴＤ）の病気頻度は未知であり、
そして恐らくは過小評価されているが、これはこの病気
の発現が不定であり、罹患患者の一部が医学的な手当を
受けないからである。米国では約１００，０００例の失
調症が存在し、その約半分が遺伝性のものであると考え
られている。病気頻度は総人口のおよそｌ．／１６０，
０００と見られており［Ｚｅｍａｎ，Ｗ． ｅｔ ａｌ
．，Ｐｓｙｃｈｉａｔｒｉｃ Ｎｅｕｒｏｌｏｇｉａ
Ｎｅｕｒｏｃｈｉｒｕｒｇｉａ ７７−１２１（１９６
７）コ、中東部ヨーロ，パユダヤ人ではそれより頻度が
高＜ｌ／１５，０００〜１／２３．０００と見られテイ
る［２ｉ１ｂｅｒ，Ｎ． ｅｔ ａＩ．，Ｊ．Ｍｅｄ
．Ｇｅｎｅｔ． ２１ ： １３−２０（１９８４）
；Ｅｌｄｒｉｄｇｅ，Ｒ．，Ｎｅｕｒｏｌ． ２０
： １−７８（１９７０）コ。 遺伝性失調症の別の臨床的サブタイプが、発症の年齢、
失調症の種類、および薬物への応答性を基に総人口中で
示されていた［Ｓｅｇａｗａ，Ｍ． ｅｔ ａｌ．，Ａ
ｄｖ． Ｎｅｕｒｏｌ． １４ ： ２１５−２３３（
１９７６） ； Ｌａｎｃｅ， Ｊ． １１． ，＾ｎ
ｎａｌ． Ｎｅｕｒｏｌ． ２ ： ２８５−２９３（
１９７７） ； Ｑｕｉｎｎ， Ｎ． Ｐ． ｅｔａｌ
． ， Ａｄｖ． Ｎｅｕｒｏｌ． ５０ ： ３９１
−４０１（１９８ｇ） ； Ｋｕｒｌａｎ， Ｒ，ｅｔ
ａｌ．，Ａｄｖ．Ｎｅｕｒｏｌ． ５０ ： ３８５
−３８９（１９８８） ； Ｎｙｇａａｒｄ，Ｔ．Ｇ．
ｅｔ ａｌ．，Ａｄｖ．Ｎｅｕｒｏｌ． ５０： ３
７７−３８４（１９８ｇ）； Ｆｏｒｓｇｒｅｎ．Ｌ．
ｅｔ ａｌ．，Ａｄｖ．Ｎｅｕｒｏｌ． ５０ ：
８３−９２（１９８８）］。ほとんど全ての家族性の形
態は、Ｘ一連結したフィリピン人形態であることを除い
て、減少した浸透度を有する遺伝形質の常染色体の優性
モードに従うようである［Ｌｅｅ，Ｌ．Ｖ． ｅｔ ａ
ｌ．，Ａｄｖ．Ｎｅｕｒｏｂ． １４ ： １３７−１
５１（１９７６） ； Ｆａｈｎ，Ｓ． ｅｔ ａｌ．
，Ａｎｎ．Ｎｅｕｒｏｌ． ２４ ： １７９（１９８
８）コ。ユダヤ人ならびに非ユダヤ人の一部においては
、この集団の初期発症の症例は年齢９才のときに集中し
、より全身的に関係するまで進行する傾向にあるが、一
方、後期発症の症例は年齢およそ４８才のときに集中し
、より限定された領域の徴候を示す傾向にある［Ｆａｈ
ｎ．Ｓ．，Ｃｌｉｎｉｃａｌ Ｎｅｕｒｏｐｈａｒｍ．
９（Ｓｕｐｐｌ． ２） ： Ｓ３７−Ｓ４８（１９
８６）］。しかし、発症年齢および臨床的な発現度は、
恐らくは全ての個体が同一の欠損遺伝子を有している家
族内で顕著に変わり得る。最近の研究は、３１％の浸透
度のユダヤ人集団における遺伝形質の常染色体優性モー
ドを支持しているが［Ｂｒｅｓｓｍａｎ，Ｓ．Ｂ． ｅ
ｔ ａｌ．，Ａｄｖ．Ｎｅｕｒｏｌ． ５０ ： ４５
−５６（１９８８ｂ） ； Ｚｉｌｂｅｒ，Ｎ． ｅｔ
ａｌ．， Ｊ．Ｍｅｄ．Ｇｅｎｅｔ． ２１ ： １
３−２０（１９８４）］、初期の研究は一部の家族にお
ける遺伝形質の常染色体劣性モードを示唆していた［Ｅ
ｌｄｒｉｄｇｅ， Ｒ． ． Ｎｅｕｒｏｌ． ２０
： ｌ−７８（１９７Ｇ）］。 ユダヤ人集団における失調症は、この明らかに優性なア
レルの推定の高頻度（１／１．０．０００）［Ｚｉｌｂ
ｅｒ，Ｎ． ｅｔ ａｌ．，Ｊ．Ｍｅｄ．Ｇｅｎｅｔ．
２１ ： Ｈ−２０（１９８４）］ ；担体の状態を
遮蔽するアレルの低浸透度；およびさらに重篤な疾病の
進行と関係している通常は早期の発症年齢［Ｆａｈｎ，
ｓ． ＋ Ｃｌ ｉｎｉｃａｌ Ｎｅｕｒｏｐｈａｒ
ｓ． ９（Ｓｕｐｐｌ． ２） ： ３３７−３４８（
１９８６）］にゆえに、特に重要な医学上の問題である
。本発明において調べた非ユダヤ人家族を含む、ユダヤ
人および非ユダヤ人集団における失調症の間の臨床的特
徴および発症年齢の類似性［Ｂｕｒｋｅ，Ｒ．Ｅ． ｅ
ｔ ａｌ．，Ｍｏｖｅｍｅｎｔ Ｄｉｓｏｒｄｅｒｓ
ｌ ： １６３−１７８（１９８６） ； Ｂｒｉｎ，
Ｍ．Ｆ． ｅｔａｌ．，Ｎｅｕｒｏｌ． ３７ ： １
３７（１９８７） ； Ｂｕｒｋｅ，Ｒ．Ｅ． ｅｔ
ａｌ．，Ｎｅｕｒｏｌ． ＋ （１９８９） ： ］は
、同一の遺伝子が関与している可能性を示唆するもので
ある。 遺伝性失調症の分子病因は、限定された数の神経化学お
よび神経病理学的研究だけが死亡した患者の脳試料で行
われ、これらの患者が遺伝および非遺伝型の両型の失調
症の範囲に入るので、理解するのが困難であった。脳幹
神経節における多数の別タイプの損傷が失調症を引き起
こし得るという事実は、不随意の運動を制御しているこ
とが知られているこの脳領域が関与していることを示す
ものである［Ｃａｌｎｅ， Ｄ． Ｂ． ｅｔ ａｌ．
．＾ｄｖ． Ｎｅｕｒｏｌ． ５０ ：９−３３（１
９８ｇ） ； Ｍａｒｓｄｅｎ， Ｃ． Ｄ． ｅｔ
ａｌ． ， Ｂｒａｉｎ １０８ ： ４６１−４８３
（１９８５）］。さらに、２４にわたる別の遺伝的状態
が２次的な失調症を現し得る［Ｆａｈｎ， Ｓ． ．
Ｉｎ Ｍｏｖｅｍｅｎｔ Ｄｉｓｏｒｄｅｒｓ ２
＋Ｃ．Ｄ．Ｍａｒｓｄｅｎ，ａｎｄ Ｓ．Ｆａｈｎ，ｅ
ｄｓ． （Ｂｏｓｔｏｎ ： ＢｕＬｔｅｒｗｏｒｔｈ
ｓ），ｐＰ． ３３２−３５８（１９８７）］。 また、これらの発見は、ブローオピオメラノコルチン（
ｐｒｏ−ｏｐｉｏｍｅｌａｎｏｃｏｒｔｉｎ）のＮ一末
端を青斑に［ Ｊａｃｑｕｅｔ， Ｙ． Ｆ． ｅｔ
ａｌ． ， Ｓｃｉｅｎｃｅ ２１８ ： １７５−１
７７（１９８２）］、またはノルエビネフリンを線条、
赤核、アカムベン（ａｃｃｕｍｂｅｎ）もしくは視床に
［ｄｅ Ｙｅｂｅｎｅｓ，Ｊ．Ｇ． ｅｔ ａｌ．，Ｎ
ｅｕｒｏｌ． ３８（Ｓｕｐｐｌ． ｌ） ： ２０７
（１９８８）］、定位注射することによってラットにお
いて失調症を明瞭かつ特異的に誘導しうろことを示唆す
るものである。最近になって、神経細線維のもつれを含
む別個の神経病理学的変化が２９才のユダヤ人男性の脳
に観察された［Ｈｅｄｒｅｅｎ， Ｊ． Ｃ． ｅｔ
ｍｌ． ， Ａｄｖ．Ｎｅｕｒｏｌ． ５０ ： １２
３−１３０（１９ｇｇ）］ ；以前の研究では遺伝性失
調症の２つの症例で異常は観察されなかった［Ｚｅｍａ
ｎ，Ｗ．，Ｎｅｕｒｏｌ． ２０（Ｐａｒｔ ＩＩ）：
７９−８８（１９７０）］。 ヒトにおいて失調症を誘導することができる薬物処置に
は、Ｌ−ＤＯＰＡ，Ｄ−２受容体アンタゴニストおよび
抗痙彎薬が含まれる［Ｆａｈｎ， Ｓ． ＋ Ｉｎ Ｍ
ｏｖ（Ｂｏｓｔｏｎ ： Ｂｕｔｔｅｒｗｏｒｔｈｓ
），ｐｐ．３３２−３５８（１９８７）コ。 部の患者においては薬物治療は症状を緩和することがで
きるが、ほとんどの形態の失調症では一致した「最善の
」治療法は存在しない。一部の患者で有用であることが
わかった薬物には、抗コリン作勤薬、ペンゾジアゼピン
およびカルバマゼビンが含まれる。特異的な薬理療法に
応答する２つの可能性ある病因的および遺伝的に別形態
の遺伝性失調症は、レボドパで治療することがきる失調
症一パーキンソン症候群コンプレックス［Ｎｙｇａａｒ
ｄ， Ｔ．Ｇ． ｅｔ ａｌ．，Ａｄｖ．Ｎｅｕｒｏｌ
． ５０ ： ３７７−３８４（１９８ｇ）］、および
アルコールによって軽減することができるミオクローヌ
スー失調症［Ｑｕｉｎｎ，Ｎ．Ｐ． ｅｔ ａｌ．，Ａ
ｄｖ．Ｎｅｕｒｏｌ． ５０ ： ３９１−４０１（１
９ｇｇ）］である。 ＤＮＡの多形性を用いる連鎖分析は、適当な家系の資料
が人手できるときには、ヒト集団において遺伝性の疾病
を引き起こす遺伝子の染色体位置を見つけるための強力
な手段を与える。この分析における最近の進歩には、ゲ
ノム全体に散在する可変数の直列反復（ＶＮＴＲ）配列
によって付与される高多形性のマーカー［Ｎａｋａｍｕ
ｒａ，Ｙ． ｅｔ ａｌ．，Ｓｃｉｅｎｃｅ ２３５
： １６１６−１６２２（１９８７） ； Ｊｅｆｒｒ
ｅｙｓ， Ａ． Ｊ． ｅｔａｌ． ， Ｎａｔｕｒｅ
３１４ ： ６７−７３（１９８５）］、および＜１
０センチモルガン（ｃＭ）間隔でほとんど完全なヒトゲ
ノムにわたる既知の組換え間隔で隔てられている多数の
マーカー配列［Ｄｏｎｉｓ−Ｋｅｌｌｅｒ，Ｈ． ｅｔ
ａｌ．，Ｃｅｌｌ５１ ： ３１９−３３７（１９８
７） ； Ｔｈｉｔｅ， Ｒ． ｅｔ ａｌ． ， Ｎ
ａｔｕｒｅ ３１３ ： ｌｏｔ−１０５（１９８５）
］が含まれる。この方法を用いて、遺伝性の神経疾病を
引き起こす２０以上の遺伝子の染色体位置が確立された
（ＨＨＭＩ、ヒト遺伝子マッピングライブラリーを参照
）。削除突然変異が存在する疾病のうちの２つ、網膜芽
腫およびデュジエーヌ筋ジストロフィーについて、この
位置情報は原因遺伝子（両者とも、これまで記載された
ことのないタンパク質をコードしている）の発見に導い
た［Ｌｅｅ，Ｗ−Ｈ． ｅｔ ａｌ．，Ｎａｔｕｒｅ
３２９ ： ６４２−６４５（１９ｇ？） ； Ｈｏｆ
ｆｍａｎ， Ｅ． Ｐ． ｅｔ ａｌ． ， Ｃｅｌｌ
５１ ： ９１９−９２８（１９８７）コ。 回転失調症を引き起こす遺伝子（群）の染色体位置はこ
れまで同定されていなかった。タンパク質および制限フ
ラグメント長の多形性（ＲＦＬＰ）マーカーを用いる、
多数のアメリカインディアン家系および仏国、英国の非
ユダヤ系家族における研究が、Ｊｏｈｎｓｏｎ等によっ
て初めて記載され［Ａｒｃｈ． Ｎｅｕｒｏｌ． ７
： ３０１−３Ｈ（１９６２）］、候補遺伝子ブローオ
ビメラノコルチンおよびグルタミン酸デカルボキシラー
ゼ［Ｂｒｅａｋｅｆｉｅｌｄ，Ｘ．Ｏ． ｅｔ ａｌ．
，Ｊ．Ｎｅｕｒｏｇｅｎｅｔ． ３： １５９−１７５
（１９８６）］、ならびに染色体ｌｉｐ，１３ｑおよび
２１ｑの大きな領域［Ｋｒａｍｅｒ， Ｐ． Ｌ．ｅｔ
ａｌ．．Ｇｅｎｅｔ． Ｅｐｉｄｅｍｉｏｌ． ４
： ３７７−３８６（１９８７）］を含む、ゲノムの常
染色体補体の約２０％を除外し（１９８８）］。この家
族はある形態の失調症を示し、これは浸透性の、減少し
た遺伝形質の常染色体優性モードに一致していた。この
家族の失調症の臨床的な症候群および発症年齢は、優性
遺伝形質に一致する家系のユダヤおよび非ユダヤ家族に
ついて記載されているものに類似している［Ｂｕｒｋｅ
， Ｒ， Ｅ．Ｂｒｉｎ，Ｍ．Ｆ． ｅｔ ａｌ．，
Ｎｅｕｒｏｌ． ３７ ： １３７（１９８７）
； Ｂｕｒｋｅ，Ｒ．Ｅ． ｅｔ ａｌ．，Ｎｅｕ
ｒｏｌ．＋（１９８９）］。
失調症の分子病因の研究は、失調症を起こし得る多数の
遺伝的および環境的因子によって、ならびに罹患個体由
来の脳での神経病理学および神経化学的研究の不足によ
って混乱していた。ある遺伝的形態の失調症の関連マー
カーの発見は、遺伝性失調症の基礎となっている異なる
遺伝子の数を解くのに有用であろう。これらのマーカー
を用いて結局は一部の罹患家族の遺伝子カウンセリング
を行うことができる。最も重要なことは、失調症遺伝子
を含有するゲノム領域を描写することか、結局はこの遺
伝子およびそのコードされているタンパク質の発見およ
び特徴付けのための手段を与えるであろうということで
ある。また、関連マーカーの発見は、初期発症のユダヤ
型［Ｅｌｄｒｉｄｇｅ， Ｒ． ＋？ｌｅｕｒｏｌ．
２０ ： １−７８（１９７０）］、後期発症のスウェ
ーデン型［Ｆｏｒｓｇｒｅｎ，Ｌ． ｅｔ ａｌ．，Ａ
ｄｖ．Ｎｅｕｒｏｌ． ５０ ： ８３９２（１９８ｇ
）］、パーキンソン症候群の特徴を有するドーパ応答型
［Ｎｙｇａａｒｄ，Ｔ．Ｇ． ｅｔ ａｌ．，Ａｄｖ．
Ｎｅｕｒｏｌ．５０ ： ３７７−３１１１４（１９８
ｇ）］、発作型［Ｂｒｅｓｓｍａｎ， Ｓ． Ｂ． ｅ
ｔａｌ． ， Ａｄｖ． Ｎｅｕｒｏｌ． ５０ ：
４０３−４１３（１９８８ａ）コ、ミオクローヌスー
失調症［Ｑｕｉｎｎ，Ｎ．Ｐ． ｅｔ ａｌ．，Ａｄｖ
．Ｎｅｕｒｏｌ．５０ ： ３９１−４０１（１９８８
） ； Ｋｕｒｌａｎ， Ｒ． ｅｔ ａｌ． ，
Ａｄｖ． Ｎｅｕｒｏｌ． ５０ ： ：｛８５−３８
９（１９８１ｉｉ）］、および日周期性変動の失調症［
Ｓｅｇａｗａ，Ｍ． ｅｔ ａｌ．＋Ａｄｖ．Ｎｅｕｒ
ｏｌ． １４ ： ２１５−２３３（１９７６）］を含
む、他の形態の遺伝性失調症においてこの染色体領域の
遺伝子（群）の役割を調べることを可能にするであろう
。
遺伝的および環境的因子によって、ならびに罹患個体由
来の脳での神経病理学および神経化学的研究の不足によ
って混乱していた。ある遺伝的形態の失調症の関連マー
カーの発見は、遺伝性失調症の基礎となっている異なる
遺伝子の数を解くのに有用であろう。これらのマーカー
を用いて結局は一部の罹患家族の遺伝子カウンセリング
を行うことができる。最も重要なことは、失調症遺伝子
を含有するゲノム領域を描写することか、結局はこの遺
伝子およびそのコードされているタンパク質の発見およ
び特徴付けのための手段を与えるであろうということで
ある。また、関連マーカーの発見は、初期発症のユダヤ
型［Ｅｌｄｒｉｄｇｅ， Ｒ． ＋？ｌｅｕｒｏｌ．
２０ ： １−７８（１９７０）］、後期発症のスウェ
ーデン型［Ｆｏｒｓｇｒｅｎ，Ｌ． ｅｔ ａｌ．，Ａ
ｄｖ．Ｎｅｕｒｏｌ． ５０ ： ８３９２（１９８ｇ
）］、パーキンソン症候群の特徴を有するドーパ応答型
［Ｎｙｇａａｒｄ，Ｔ．Ｇ． ｅｔ ａｌ．，Ａｄｖ．
Ｎｅｕｒｏｌ．５０ ： ３７７−３１１１４（１９８
ｇ）］、発作型［Ｂｒｅｓｓｍａｎ， Ｓ． Ｂ． ｅ
ｔａｌ． ， Ａｄｖ． Ｎｅｕｒｏｌ． ５０ ：
４０３−４１３（１９８８ａ）コ、ミオクローヌスー
失調症［Ｑｕｉｎｎ，Ｎ．Ｐ． ｅｔ ａｌ．，Ａｄｖ
．Ｎｅｕｒｏｌ．５０ ： ３９１−４０１（１９８８
） ； Ｋｕｒｌａｎ， Ｒ． ｅｔ ａｌ． ，
Ａｄｖ． Ｎｅｕｒｏｌ． ５０ ： ：｛８５−３８
９（１９８１ｉｉ）］、および日周期性変動の失調症［
Ｓｅｇａｗａ，Ｍ． ｅｔ ａｌ．＋Ａｄｖ．Ｎｅｕｒ
ｏｌ． １４ ： ２１５−２３３（１９７６）］を含
む、他の形態の遺伝性失調症においてこの染色体領域の
遺伝子（群）の役割を調べることを可能にするであろう
。
本発明は、染色体９ｑ上の特発性回転失調症、ＩＴＤＩ
の原因を為す遺伝子座の連鎖分析の結果に基づくもので
ある。この遺伝子座は、構成員が遺伝的に回転失調症の
発現に感受性である大きな家系の回転失調症遺伝子に密
接な遺伝的連鎖を示す。 本データから、本形態の失調症の回転失調症遺伝子座は
ヒト染色体９ｑ，具体的には９ｑ３２〜ｑ３４の間にあ
ることが推論された。 これらの研究により、初めて、回転失調症に関連したＤ
ＮＡの多形性についてヒト染色体９ｑを分析することか
らなる、少なくとも１つの形態の回転失調症の存在を検
出するための一般的な方法が得られることになった。 種々のあらゆる制限フラグメント長の多形性（ＲＦＬＰ
）を用いることができる。 特に、回転失調症に関連したｌつのＤＮＡ多形性または
２もしくはそれ以上の多形性の組合せの遺伝を、表現型
のａｌｌ定が可能な家系構或員の組合せにおいて調べる
ことによって本試験を行う。本試験を用いて出生前に胎
児をスクリーニングすることができ、また、発症前にあ
る対象をその家族史による危険についてスクリーニング
することができる。 また、本発明は検定を行うのに有用な産物、例えばＤＮ
Ａプローブ（ラベルされているか、または未ラベル）、
キットなどにも及ぶものである。 図面の説明 第１図は、失調症の家系の系図を示すものである。点を
付した個体の全ては、コロンビア大学のディストニア・
クリニカル・リサーチ・センター（Ｄｙｓｔｏｎｉａ
Ｃｌｉｎｉｃａｌ Ｒｅｓｅａｒｃｈ Ｃｅｎｔｅｒ）
で厳格な神経学的調査を受けた。最高齢の男性は病歴に
基づくと罹患していたものと考えられた［Ｊｏｈｎｓｏ
ｎ， Ｗ．ｅｔ ａｌ． ， Ａｒｃｈ． Ｎｅｕｒｏ
ｌ． ７ ＋ ３０１−３１３（１９６２）］。白のま
まの記号は未罹患および罹患しているかもしれない者；
黒く塗り潰した記号は罹患している者；半分塗り潰した
記号は恐らくは罹患している者を示す。ゲルソリン（ｇ
ｅｌｓｏｌｉｎ ； Ｇ Ｓ Ｎ ）遺伝子座における
個体のアレルの状態を記号の下に数字で示す。 第２図は、ｑａｔ−３４領域における連鎖距離および物
理的な割当を示すヒト９染色体地図である。地図上の距
離は性の平均値の組換え割合で示している。尺度は遺伝
子距離（モルガン）である。 Ｌａｔｈｒｏｐ等［Ｌａｔｈｒｏｐ，Ｍ． ｅｔ ａｌ
．，Ｇｅｎｏｍｉｃｓ ３ ： ３６１３６６（１９８
８）］のものに修飾を加えた。 第３図は、［ＴＤ１および９ｑマーカーの多点分析の結
果を示すものである。固定したマーカー地図の種々の地
図位置において、失調症について計算したｌｏｄ値をま
とめる位置地図である。マーカーの遺伝子距離は第２図
のものと同一である。 定義 多数の技術的な用語および表現が本明細書あるいは特許
請求の範囲において用いられている。その一律性を確実
なものにし、不明確さを避けるために、以下に定義を記
載する。 「連鎖遺伝子」：「連鎖」している遺伝子とは、同一の
染色体上の互いの測定可能な距離内に遺伝子座を有する
ものである。 「連鎖分析ｊ：連鎖分析は、特定の疾病状態が遺伝「マ
ーカー」の遺伝子座においてアレルとともに同時分離す
る頻度を測定し、それによって、障害を引き起こす遺伝
子がマーカーに近接しているか否かを決定する手段を与
える。連鎖分析の基本的な考え方は、２つの遺伝子が特
定の染色体上で互いに近接しているほど、減数分裂の間
にそれらの間の交差（組換え現象）が起こるのが減少す
るであろうと言うものである。 「組換え」：遺伝子の遺伝子座の間の交差による連鎖遺
伝子の新しい組合せの生成。 「地図単位」：ある染色体上の２つの遺伝子座の間の距
離の単位であり、それらの間の組換えの頻度（％）に基
づいており、ｌ地図単位は１センチモルガン（ｃＭ）ま
たは１％組換えに等しい。 「遺伝マーカー」：遺伝マーカーは家族および集団の研
究に用いられる特徴であり、それは、遺伝的に決定され
ており、正確に分類することができ、単純かつ明確な遺
伝形質パターンを有しており、そして遺伝の多形性とし
て分類することを可能にするに十分な共通の遺伝的変化
を有するものである。 １組換え頻度」：組換え頻度は２つの遺伝子座の間の平
均の組換え量の尺度であり、作成する連鎖地図中の２つ
の遺伝子座の間の相対距離の尺度として用いることがで
きる。 ｒｌｏｄ値法Ｊ ： ｒｌｏｄＪなる用語は「確率の対
数」の短縮形である。ｌｏｄ値法はＭｏｒｔｏｎ［Ｍｏ
ｒｔｏｎ． Ｎ． Ｅ． ，発されたものであり、連鎖
の相が未知であることもあるところで（即ち、遺伝子が
同一または別の染色体にあるか否かがわかっていないと
きに）、ヒトにおける連鎖を測定する方法である。この
方法はＥｌｓｔｏｎ等［ＥＩｓｔｏｎ ｅｔ ａｌ．，
Ｈｕｍ．Ｈｅｒｅｄ． ２１ ： ５２３−５４２（
１９７１）］によって拡張され、Ｏｔｔ［Ｏｔｔ， Ｊ
．， ＡｎａＩｙｓｉｓ ｏｆ Ｈｕｍａｎ Ｇｅｎｅ
ｔｉｃ Ｌｉｎｋａｇｅ．Ｔｈｅ Ｊｏｈｎｓ ｆｌｏ
ｐｋｉｎｓ Ｕｎｉｖｅｒｓｉｔｙ Ｐｒｅｓｓ，Ｂａ
ｌｔｉｍｏｒｅ，１９７６］によってコンピュータープ
ログラムＬＩＰＥＤに組ミ入れられた。その原理は、一
連の理論的組換え頻度を設定し、そしてそれぞれの理論
値に対して、連鎖がない可能性と比較して、組換え割合
に基づく特定の家系の相対確率２を計算することである
。 理論的組換え頻度０＝０．０であれば完全な連鎖が存在
する。θ−０．５０であれば連鎖が存在しない。Ｚ（θ
）＝ｌｏｇ＋ｏ［（θ＝０．０１の家族の可能性など）
／（θ＝０．５０の家族の可能性）］。この比を対数で
表す。ｌｏｄ値３（連鎖の側への１０００：１の可能性
に等しい）を独断ではあるが連鎖の証明として受入れ、
−２の値または−１であっても連鎖を認めないものと解
した。 ｒｐＪ：（１）染色体の短アームがｒｐＪアームである
（仏語の”ｐｅＬｉｔ”由来）。（２）集団遺伝学にお
いてｐは、ある対のより共通するアレルの頻度を示すの
に用いることも多い。 ｒｑＪ：（＋）染色体の長アームがｒｑＪアームである
。（２）集団遺伝学においてｑは、ある対のめったにな
いアレルの頻度を示すのに用いることも多い。 「家系」 ：家系は、記号を用いてチャート上で家族か
らの遺伝データを分類する速記法である。 例えば、通常は男性は四角で、女性は円で、そして性が
特定されていない人はダイヤで表す。記号に重ねたスラ
ノシュは死亡した人を意味する。黒く塗り潰した記号は
問題の疾病に罹患している人を意味する。部分的に塗り
潰した記号は常染色体劣性疾病にペテロ接合性である人
を意味する。中に数を記した記号はその性の子供の数を
示す。 「ヘテロ接合体およびホモ接合体」；１対の相同染色体
上のある遺伝子座に２つの別のアレルを有し、その１つ
が正常なアレルである個体は該遺伝子座にとってヘテロ
接合体である。１対の相同染色体上のある遺伝子座に２
つの同一のアレルを有する個体は該遺伝子座にとってホ
モ接合体である。 「多形性」 ；２またはそれ以上の遺伝的に決定された
別の遺伝子型の集団中での出現。独断ではあるが、めっ
たにないアレルが少なくとも０．０１の頻度を有してお
り、従ってヘテロ接合体頻度が少なくとも０，０２であ
るときには、その遺伝子座は多形性であるとみなされる
。 「制限フラグメント長の多形性（ＲＦＬＰ）Ｊ：ＲＦＬ
Ｐは、特異的な制限酵素による消化によって生成したＤ
ＮＡフラグメントの長さの差異に基づいて検出すること
ができるＤＮＡ配列中の多形性である。 「浸透性」：ある遺伝子型の発現頻度がその浸透性であ
る。発現頻度が１００％より低いときには、この特徴を
、浸透性の減少を示す、あるいは浸透性を欠くと言う。 異常な表現型を特徴的に生成する遺伝子型を有している
が表現型としては正常な個体においては、その特徴は非
浸透性であると言われる。 詳細な説明 最も広くは、本発明は、回転失調症に関連したＤＮＡ多
形性についてヒト染色体９ｑを分析することによって、
回転失調症の遺伝子の存在を検出することからなる［Ｏ
ｚｅｌｉｕｓ，Ｌ．，ｅｔ ａｌ．＋ ＮｅｕｒｏｎＭ
ａｙ １９，１９８９を参照］。 目的の多形性と回転失調症遺伝子の間の遺伝的連鎖また
は関連を調べるために、研究対象の家族の類縁関係の組
合せを分析することが必要である。 この組合せは、多形性の存在に関連した回転失調症の表
現型の測定が可能なように遺ぶ。即ち、いくつかの個体
を試験するのが好ましい。これらには、罹患していない
両親、罹患している両親、罹患している兄第・姉妹、罹
患していない兄第・姉妹、ならびにもっと遠いその他の
者が含まれる。 理想的には、未罹患の両親、罹患の両親および罹患の兄
第・姉妹を利用すべきである。罹患の両親が死亡してい
るときであっても、回転失調症遺伝子による多形性の明
白な分離を他の構成員で証明することができるときには
満足な結果を得ることができる。 ＲＦＬＰの使用は、多形性検出の１つの好ましい態様で
あるにすぎない。ＲＦＬＰの存在を検出するための現在
での最も普通の方法は、ある酵素を用いて制限分析を行
い、所望のプローブを用いてサザーン・ハイプリダイゼ
ーション法を行い、そしてあるＲＦＬＰまたはＲＦＬＰ
群を同定することである。連鎖分析および遺伝試験にお
いてＲＦＬＰを用いることは当分野で周知である［例え
ば、Ｇｕｓｅｌｌａ，Ｕ．Ｓ． ４．６６６４２ｇ、お
よびＤｏｎｉｓ−Ｋｅｌ ｌｅｒ， ＩＩ． ｅＬ ａ
ｌ． ， Ｃｅｌｌ ５１ ： ３１９−３３７（１９
８７）を参照］。 ＲＦＬＰを用いる分析のためには、対象を含む被験個体
の全てから遺伝物質の試料を得ることが必要である。遺
伝物質の供給源として血液試料を用いるのが好ましく、
リンパ球ＤＮＡが分析される。所望により、遺伝試験の
前にリンパ球からＤＮＡを抽出してもよい。ＲＦＬＰの
検出のために、試料中のＤＮＡをある制限エンドヌクレ
アーゼで哨化する。別法によれば、いくつかの消化物を
得ることもできる。必要なら、ＲＦＬＰ分析に先立って
ＤＮＡを増幅してもよい。消化物を得、これを例えばア
ガロースゲル電気泳動などの常法によって分離した後、
ＲＦＬＰ配列をコードしているＤＮＡフラグメントで分
離したバンドをプローブする。制限酵素とブローブの最
適の組合せが存在することもある。例えば、後記のＭＩ
Ｄ ＧＳＮブローブでは、ＳｔｕＩなどの制限酵素を利
用することができる。このＭＩＤ ＧＳＮプローブはこ
れまでＧＭＩと呼ばれていたものであり、その構築およ
び配列は公知である［Ｋｗｉａｔｋｏｔｖｓｋｉ． Ｄ
． Ｊ． ｅｔａｌ． ， Ｎａｔｕｒｅ ３２３ ：
４５５−４５８（１９８６）］。検出のために、■を
越える多形性（即ち、ｌを越えるブローブ）を用いるの
が好ましい。感度を有意に増加させるために、回転失調
症遺伝子の両側の別の多形性を検出するのが理想的であ
る。後記のように、使用することが可能な別のブローブ
には、例えばＤ９Ｓ１０およびＡＳＳが含まれる。プロ
ーブがＤＮＡプローブであることは必要ではない。例え
ば、ＲＮＡブローブを用いることができる。 最終的にはＲＦＬＰの使用は核酸分子に沿うＤＮＡ制限
部位中の多形性に依存するので、多形性を検出し得るあ
らゆる方法を用いることができる。 直接の配列決定と組み合せた染色体９ｑの所望の領域の
増幅、または放射ラベル、蛍光ラベルもしくは酔素ラベ
ルによる染色体９ｑ上の多形性の位置決定などの方法も
用いることができる。 分析しようとする遺伝試料が限定された量で存在してい
るときには、そのような試料中の核酸を始めに増幅して
、後に行うＲＦＬＰまたは配列決定分析などの分析のシ
グナルを増強してもよい。 あらゆるＤＮＡ増幅法、例えばポリメラーゼ連鎖反応［
Ｍｕｌｌｉｓ，Ｋ．ｅｔ ａｌ．，Ｃｏｌｄ Ｓｐｒｉ
ｎｇ Ｉｌａｒｂｏｒ Ｓｙｍｐ．Ｑｕａｎｔ． Ｂｉ
ｏｌ． ５１ ： ２６３−２７３（１９８６） ；
Ｅｒｌｉｃｈ， ｔｌ． ｅｔ ａｌ．，ＢＰ ５０，
４２４ ； ＥＰ ２５８，０１？， ＢＰ ２３７，
３６２ ； Ｍｕｌｌｉｓ，Ｍ．，ＥＰ ２０１，１８
４； Ｍｕｌｌｉｓ，Ｋ．ｅｔ ａｌ．，Ｕ．Ｓ． ４
，６８３，２０２；およびＬｏｈ ｅｔ ａｌ．，Ｓｃ
ｉｅｎｃｅ ２４３ ： ２１７−２２２１を用いてＤ
ＮＡを増幅することができる。Ｌｉ等（ＬｉｅＬ ａｌ
．，Ｎａｔｕｒｅ ３３５ ： ４１４−４１７（１９
８８）］はポリメラーゼ連鎖反応を用いて、１個の精子
由来の２つの遺伝子座を遺伝子分析が可能なレベルまで
同時増幅することを報告した。Ｌｉ等の方法の利点は、
１個の個体から多数の部分的産物を試験することができ
、物理的に極めて近接している遺伝マーカー間の組換え
頻度の測定を可能にすることである。 また、Ｑβ−レプリカーゼおよびプローブとして増幅可
能なＲＮＡ配列を用いてＤＮＡおよび／またはＲＮＡを
増幅することもできる［Ｃｈｕ， Ｂ． Ｃ． Ｆ．ｅ
ｔ ａｌ．，Ｎｕｃｌ．Ａｃｉｄｓ Ｒｅｓ． １４：
５５９１−５６０３（１９８６）］。 ポリヌクレオチドブローブはＲ Ｎ ＡまたはＤＮＡで
あってよいが、ＤＮＡが好ましく、放躬ラベル、酵素ラ
ベル、蛍光ラベル、ビオチンーアビジンラベルなどを用
いる通常のラベル法によってラベルすることができ、こ
れらがハイブリダイゼーション後の検出を可能にする［
例えば、Ｌｅａｒｙ， Ｊ． Ｊ．ｅｔ ａｌ． ．
Ｐｒｏｃ． Ｎａｔｌ． Ａｃａｄ． Ｓｃｉ． ＵＳ
Ａ ８０ ： ４０４５（１９８３）を参照］。 対象の家系の罹患および非罹患個体のＲＦＬＰまたはＲ
ＦＬＰ群を、被験対象のＲＦＬＰまたはＲＦＬＰ群と比
較することにより、対象中の回転失調症遺伝子の存在ま
たは非存在が迅速に調べられる。この結果は、対象中の
回転失調症遺伝子の存在の司能性として表現するのが最
も良い。 後記では特にＭＩＤ ＧＳＮブローブ［Ｋｗｉａｔｋｏ
ｗｓｋｉ， Ｄ． Ｊ． ｅｔ ａｌ． ， ＡＩＩｌ
． Ｊ． Ｈｕｍ． Ｇｅｎｅｔ． ４２ ： ５６５
−５７２（１９８８）］を用いているが、ブローブに有
用な他の遺伝子配列を容易に得ることができる。例えば
、回転失調症遺伝子に関連した別の新規ＤＮＡフラグメ
ントを生戊させる方法は次のようである。 第ｌの方法は、染色体９の適当な領域にマッピングする
ヒト（ゲノムまたはｃＤＮＡクローンのいずれか）ＤＮ
Ａフラグメントのランダムに選択した断片を試験するこ
とである。このようなマノピングは以下の３つの方法で
行うことができる：（ａ）体細胞ハイブリッドのパネル
からのＤＮＡへのハイブリダイゼーション； （ｂ）分裂中期染色体展開へのその場でのノ＼イブリダ
イゼーション；または （ｃ）ＧＳＮ．Ｄ９Ｓ １０，Ｄ９Ｓ２６、ＡＢＯ，ま
たは既にその領域にマッピングされたあらゆる他のマー
カーへの遺伝的連鎖。 方法（ａ）および（ｂ）についでは、新しいフラグメン
トは多形性である必要はないが、（Ｃ）については、始
めに無関係の個体の新しい部位におけるゲノムＤＮＡの
制限パターンを比較することによって多形性が同定され
なければならない。方法（ａ）または（ｂ）においては
、マッピングされたフラグメントはヒトＤＮＡ中の多形
性を検出することが示されなければならない。次いで、
新しい遺伝マッピングである多形性を、本出願でｂよう
に家族の研究における回転失調症の連鎖について試験す
ることができる。 別のＤＮＡブローブを得るための第２の、より効率的な
方法は、組換えＤＮＡライブラリ一体細胞ハイブリッド
系統を調製することである。ここで、染色体９または特
に９ｑまたはその断片は、細胞中に存在する唯一のヒト
染色体であるか、またはいくつかの中の１つである（他
の染色体の全ては、別の種、通常はマウス、ハムスター
またはラットからのものである）。次いで、ヒｌ−ＤＮ
Ａを含む組換えクローンを、種一特異的な反復配列への
ハイブリダイゼーションによって同定する。 ハイブリッド細胞が染色体９だけを含有しているときに
は、ヒトＤＮＡを含有しているクローンは染色体９由来
のＤＮＡを含有しているにちがいない。他のヒト物質が
ハイブリッド中に存在しているときには、さらに、前記
に概略したマッピング法の１つにかけなければならない
。 染色体９由来のＤＮＡクローンを得る第３の方法は、蛍
光活性化ソーターで選別しておいた分裂中期染色体から
単離したヒトＤＮＡ由来のライブラリーを作戊すること
である［ｌｌｕｍａｎ Ｇｅｎｅｔｉｃ Ｄｉｓｅａｓ
ｅｓ． Ａ Ｐｒａｃｔｉｃａｌ Ａｐｐｒｏａｃｈ，
Ｋ． Ｅ． Ｄａｖｉｅｓ， ＩＲＬ Ｐｒｅｓｓ，
Ｗａｓｈｉｎｇｔｏｎ， Ｄ． Ｃ． ， １９８６
］。この方法は、９５％またはそれ以上の純度の精製さ
れた染色体を与えることもある。 回転失調症領域から新しいＤＮＡプローブを得る最後の
方法は、その領域に既にマッピングされたあらゆるプロ
ーブを用いて、ゲノムライブラリーから隣接のＤＮＡ重
複断片を「釣り上げる」ことである（通常、「染色体歩
行」と呼ばれる）。この場合、染色体９にマッピングさ
れる１次プローブは多形性である必要はない。 上に概略した全ての場合において、ブローブは、それが
回転失調症を試験するのに有用であるためには、多形性
を検出することが最終的にわかっていなければならない
。この多形性は、回転失調症または家族研究の他の有用
なマーカーに関連していること、または既存のマーカー
にすぐ隣接していることがわかっていなければならない
。 特定の多形性プローブは、それが関連のＤＮＡ領域また
は遺伝子座中の多形性を同定することができるものであ
る限り、どんな所望の配列の長さのものであってもよい
。ＤＮＡもしくはＲＮＡフラグメントだけであってもよ
いし、もつと長い遺伝子配列もしくはフラグメントで存
在していてもよいし、また、ブラスミドもしくはその他
の適当な媒体であってもよい。ラベル化およびノ１イプ
リダイゼーション条件は、上記のように当業者が容易に
決定することができる。通常、そ、のストリンジェンシ
ーは、種内の固有配列ＤＮＡに標準的なものである。核
酸ハイプリダイゼーション法の詳細は、Ｎｕｃｌｅｉｃ
Ａｃｉｄ Ｉｌｙｂｒｉｄｉｚａｔｉｏｎ， Ｂ．Ｄ
．Ｈａｍｅｓｅｔ ａｌ． ， ｅｄｓ． ＋ ＩＲＬ
Ｐｒｅｓｓ， Ｗａｓｈｉｎｇｔｏｎ， Ｄ． Ｃ．
， １９８５に記載されている。 回転失調症の検出のためのブローブは、上記のようにＤ
ＮＡまたはＲＮＡであってよく、例えば、０１ｉｇｏｎ
ｕｃｌｅｏｔｉｄｅ Ｓｙｎｔｈｅｓｉｓ，Ａ Ｐｒａ
ｃｔｉｃａｌ Ａｐｐｒｏａｃｈ， Ｍ． Ｊ． Ｇａ
ｉｔ， ｅｄ． ， ＩＲＬ Ｐｒｅｓｓ， Ｗａｓｈ
ｉｎｇｔｏｎ， Ｄ． Ｃ． ， １９８４に記載され
ているように、化学的に、または酵素的に合戊すること
ができる。また、当業者には既知の方法を用いてプロー
ブを得、プラスミドヘの挿入によって複製してもよい［
Ｍａｎｉａｔｉｓ．Ｔ．ｅｔａｌ．，Ｍｏｌｅｃｕｌａ
ｒ Ｃｌｏｎｉｎｇ（Ａ Ｌａｂｏｒａｔｏｒｙ Ｍａ
ｎｕａｌ），Ｃｏｌｄ Ｓｐｒｉｎｇ Ｈａｒｂｏｒ
Ｌａｂｏｒａｔｏｒｙ， １９８２］。 多形性がｍＲＮＡなどの遺伝子産物中に見い出されると
きには、ブローブを用いて、特にアンチセンスＲＮＡプ
ローブを用いて、その多形性ｍＲＮＡの存在を直接検定
することもできる。 本試験は出生前に、または若年もしくは戊大の個体では
発症前に行うことができる。 本方法は、診断に用いることができるキットの調製に利
用するのが容易である。そのようなキットは、１または
それ以上の密閉された容器を入れるように区分されたキ
ャリアーからなり、第１の容器にはある多形性の暗号配
列を含有するＤＮＡ、例えばＲＦＬＰなどが入っている
。第２の容器には、第２のＲＦＬＰなどをコードしてい
る別セットの配列が入っている。他の容器には、ラベル
されたブローブの位置決定に有用な試薬、例えば酵素基
質などが入っている。さらにその他の容器には、制限酵
素、緩衝液などが入っている。 以上で本発明を一般的に説明したが、以下の具体的な実
施例を参照することにより本発明をさらに理解すること
ができる。これら実施例は説明のためだけに挙げたもの
であって、特に記さなければ本発明を限定するものでは
ない。 実施例１ 失調症の家族の神経学的評価調査を行った家
族は１６５人の構戊員からなっていた。この連鎖調査の
ために、それぞれ７３および７４人の構成員について血
液試料を分析し、神経学的試験を行った（第１図）。 失調症の臨床的な発現は変化することがあり、試験者等
は失調症を導き出し、そして他の運動障害から区別しよ
うとした［Ｆａｈｎ， Ｓ， ， Ｎｅｕｒｏｌ． Ｃ
Ｉｉｎ．２ ： ５４１−５５４（１９８４）］。この
調査の目的および性質は全ての家族構成員に説明した。 この家族の全ての協力構成員は同意をし、次いで失調症
の評価に経験のある゛神経学者によって完全な現地での
神経学的試験を行い、血液試料を採取した。３人の個体
以外はビデオテープにとり、その記録をディストニア・
クリニカル・リサーチ・センター（Ｄｙｓｔｏｎｉａ
Ｃｌｉｎｉｃａｌ Ｒｅｓｅａｒｃｈ Ｃｅｎｔｅｒ）
において４人の神経学者によって分析した。このビデオ
テープ試験は、じっとして、両手をひざにおよび広げて
座っている対象；立っている対象；および歩いている対
象を示していた。患者が話すのを聞いて話す能力を分析
した。腕は、対象に指一鼻の移動を行わせ、それぞれの
手で書かせ、そして指と手の速い反復運動を行わせるこ
とによって評価した。脚および足は、対象に類似の速い
反復運動を行わせることによって、および対象が歩いて
いるときの脚および足を観察することによって評価した
。 それぞれの対象を、明白な失調症、高可能性の失調症、
低可能性の失調症、非失調症または評価不能に分類した
。明白な失調症なる表示は、他の可能性ある基本の神経
学的症状によるものではない、ねじれ運動または姿勢な
どの失調症の明瞭な特徴が観察されたときに行った。高
可能性の失調庫なる表示は、失調症を強く示唆する観察
が得られたときに行った；その例には、対象の異常運動
の自覚、手または足の時折のねじれ、および手書きによ
る腕筋肉または足移動による脚筋肉のねじれを伴わない
緊張が含まれる。低可能性の失調症なる表示は、試験は
異常ではあるが失調症とは診断されないときに行った；
例えば、足踏みが不器用または書くときにペンの握りが
窮屈すぎるときに行った。評価不能なる表示は、対象が
、失調症の存在を不明瞭にするか、または失調症の原因
である別の症状を有しているときに行った。その例は、
神経学的症状（例えば、パーキンソン病、発作、ポリオ
、頭部損傷、脳炎など）、整形外科的症状（例えば、五
十肩、重篤な慢性関節リウマチなど）、または出生前も
しくは周産期損傷の病歴の存在である。 ビデオテーブの見直しによって確認することなく明白な
失調症という評価を与えた対象はいなかった。本人を調
べた５人の家族構戊員のだれもが明白な失調症とは評価
されなかった（しかし、ビデオテープ試験なし）。これ
ら５人の対象のうち、１人は別の試験で別個に２人の試
験官によって高可能性の失調症と評価され（最後の分析
に高可能性の失調症として残した）、１人は発作および
慢性関節リウマチの存在のゆえに評価不能とされ、３人
は失調症を有さないと評価された。同様に、Ｊｏｈｎｓ
ｏｎ等［Ｊｏｈｎｓｏｎ，Ｗ． ｅｔ ａｌ．＋＾ｒ
ｃｈ． Ｎｅｕｒｏｌ． ７ ：３０１−３１３（１
９６２）］によって失調症を有するとみなされた家族構
成員（もはや生きていない）も高可能性の失調症として
挙げた。 発症年齢は、本調査または以前の調査［Ｊｏｈｎｓｏｎ
＋Ｌ ｅｔ ａｌ．，Ａｒｃｈ．Ｎｅｕｒｏｌ． ７：
３０１−３１３（１９６２）］において、患者または
その関係者が気付いた失調症運動の最初の発生として決
定した。病歴は臨床研究者の現在のチームによる個人的
な面談によって確認した。 この家族の家系を第ｌ図に示す。ビデオテーブの見直し
で失調症の厳格な基準［Ｆａｈｎ， Ｓ． ． Ｎｅｕ
ｒｏｌ．りユｎ． ！ ： ５４１−５５４（１９８４
）］を満たしている個体だけを、本連鎖分析に対して、
罹患しているものとみなした。これには１４の個体が含
まれるが、これらは、頭蓋構造、手足および胴体に影響
する失調症の徴候を有し、４〜４３才の発症を有し、平
均年齢１４．４±３．１および中央値１０，Ｏである。 平均の発症年齢を越えている明白な失調症を有する個体
だけを考慮に入れて、見掛けの浸透度は７５％である。 ある程度の失調症の特徴を有していた３人の個体（１人
は高可能性の罹患および２人は低可能性の罹患）のそれ
ぞれは罹患子孫を設けた。 実施例２ ＴＴＤＩ失調症遺伝子座による連鎖分析 ＤＮＡプロープおよびラベル化 常法を用い、ランダムオリゴヌクレオチドプライム化に
よってＤＮＡブローブを［” Ｐ ］ｄＡ ＴＰ（３０
００Ｃｉ／ｘモル；＾ｍｅｒｈｓａｍ）でラベルした［
Ｆｅｉｎｂｅｒｇ＋Ａ．Ｐ． ｅｔ ａｌ．，Ａｎａｌ
．Ｂｉｏｃｈｅｍ． Ｈ７ ： ２６６２６７（１９
８４）］。ゲル精製した挿入フラグメントをブローブＭ
ＩＤ，ＡＳＳＧ２、ＡＳＳＧ３およびｐＥＤＺｌ９．３
に用いた。一部では、ゲ／ムＤＮＡとのハイブリダイゼ
ーションの前に、ヒト胎盤ＤＮＡをラベル化プローブに
ハイブリダイズさせて反復配列を飽和した。 ９ｑ上の次の多形性マーカープローブを用いた：アルギ
ニノスクシネート シンテターゼ遺伝子座（ＡＳＳ）の
ためのＡＳＳＧ２およびＡＳＳＧ３（ＳｐｈｌおよびＰ
ｓｔ Ｉ ） ［ｑ３ ４−ｑｔｅｒにマツピングす
る； Ｂｅａｕｄｅｔ，Ａ．Ｌ． ｅｔ ａｌ．， Ｃ
ｅｌｌ ３０ ： ２８７−２９３（１９ｇ２） ；
Ｎｏｒｔｈｒｕｐ ｅｔ ａｌ．，作或中の原稿］；そ
れぞれランダムＶＮＴＲ遺伝子座Ｄ９Ｓ１０およびＤ９
Ｓｌ７のためのｐＭＣＴ １ ３ ６（Ｐｓｔｌ）およ
びｐＥＫＺ ２ ９．３（Ｔａｑｌ）［連鎖マッピング
によりＱ ３ ４ ： Ｋｕｍｌｉｎ−４ｏ１ｆｆ，Ｅ
． ａｔ ａｌ．，Ｎｕｃｌｅｉｃ Ａｃｉｄｓ Ｒｅ
ｓ． １５ ： １０６１０（１９８７） ； Ｃａ
ｒｌｓｏｎ， Ｍ． ｅｔ ａｌ． ， Ｎｕｃｌ．
Ａｃｉｄｓ Ｒｅｓ． １５ ： １０６１３（１９
８７） ； Ｌａｔｈｒｏｐ， Ｍ． ｅｔａｌ． ，
Ｇｅｎｏｍｉｃｓ ３ ： ３６１−３６６（１９８
ｇ）］ ；連鎖マッピングによるランダム遺伝子座Ｄ９
Ｓ２６（ｑ３１３４）のためのＣ Ｒ Ｉ −Ｌ ６
５ ９ （Ｔ ａｑ Ｉ ）［Ｄｏｎｉｓ−Ｋｅｌｌｅ
ｒ，Ｈ． ｅｔ ａｌ．，Ｃｅｌｌ ５１ ： ３１９
−３３７（１９８７）］ ：ゲルソリン遺伝子座（ＧＳ
Ｎ）のためのＭＩＤ（Ｓｔｕｌ）［ｑ３ １ −３ ４
； Ｋｗｉａｔｋｏｖｓｋｉ，Ｄ． Ｊ． ｅｔ ａ
ｌ．，Ａｍ． Ｊ．Ｈｕｍ．Ｇｅｎｅｔ． ４２ ：
５６５−５７２（１９８ｇ） ； Ｋｗｉａｔｋｏｗｓ
ｋｉ ｅｔａｌ． ， Ｎｕｃｌｅｉｃ Ａｃｉｄｓ
Ｒｅｓｅａｒｃｈ． （１９８９）］。ＡＳＳおよびＧ
ＳＮを除く全ての遺伝子座のＲ Ｆ Ｌ Ｐ．ならびに
全ての遺伝子座の地図位置への照合はｔｌｕｍａｎ Ｇ
ｅｎｅ Ｍ３ｐｐｉｎｇ（Ｈ Ｇ Ｍ） ：巻９ （１
９８ｇ）および９．５ （１９８９）， Ｓ．Ｋａｒｇ
ｅｒ ＡＧ，Ｂａｓｌｅ，Ｓｗｉｔｚｅｒｌａｎｄ（Ｃ
ｙｔｏｇｅｎｅｔｉｃ ａｎｄ Ｃｅｌｌ Ｇｅｎｅｔ
ｉｃｓの一部として出版）に挙げられている。 ＲＦＬＰ分析 公知のようにして［Ｇｕｓｅｌｌａ＋Ｊ． ｅｔ ａｌ
．，Ｎａｔｌ．八Ｃａｄ． Ｓｃｉ． ＵＳＡ ６ ：
５２３９−５２４３（１９７９） ； Ｂｒｅａｋｅ
ｒｉｅｌｄ， Ｘ．０． ｅｔ ａｌ．，Ｊ．Ｎｅｕｒ
ｏｇｅｎｅｔ． ３： １５９−１７５（１９８６）］
、リンパ芽球系統［＾ｎｄｅｒｓｏｎ，Ｍ．Ａ． ｅｔ
ａｔ．， Ｉｎ Ｖｉｔｒｏ２９ ： ８５６−８５
８（１９８４）コまたは全血液からＤＮＡを抽出した。 ＤＮＡ試料（５０μｇ）を製造元の指示に従って制限酵
素で完全に消化した。常法に従って、０，８％アガロー
スゲル、７０〜９０Ｖで１６時間、電気泳動を行った。 Ｓｏｕｔｈｅｒｎ ［Ｓｏｕｔｈｅｒｎ， Ｅ． ，Ｍ
ｅｔｈ． Ｅｎｚｙｍｏｌ． ６８ ： １５２−１７
６（１９７９）］の方法によって、ＤＮＡフラグメント
をＧｅｎｅｔｒａｎ（Ｐｌａｓｃｏ）にプロットした。 サケ精子ＤＮＡを含有する６ｘＳＳＯ，， ｌ ｘＤ
ｅｎｈａｒｔ’ｓ， ０．３％ＳＤＳ中、６５°Ｃでフ
ィルターをプレハイブリダイズおよびハイブリダイズさ
せ．ＳＳＣの濃度を０．５ｘに減少させて６５℃で洗浄
し、公知のようにＸ一線フィルムに暴露した［Ｂｒｅａ
ｋｅｆｉｅｌｄ，Ｘ．Ｏ． ｅｔ ａｌ．，Ｊ，Ｎｅｕ
ｒｏｇｅｎｅｔ． ３： １５９−１７５（１９８６）
］。 ２点連鎖分析 これまで、全２２常染色体を示すタンパク質マーカーお
よびｌ５の血液グループおよび２４０を越える多形性マ
ーカープローブがこの家族において評価されていた［Ｂ
ｒｅａｋｅｆｉｅｌｄ＋Ｘ．Ｏ． ｅｔ ａｌ．＋Ｊ．
Ｎｅｕｒｏｇｅｎｅｔ． ３： １５９−１７５（１９
８６） ； Ｋｒａｍｅｒ，Ｐ．Ｌ． ｅｔａｌ． ，
Ａｄｖ． Ｎｅｕｒｏｌ． ５０ ： ５７−６６（
１９８ｇ）］。ヒトー倍体ゲノムの大きさを３３００ｃ
Ｍと仮定すると、２点連鎖分析に基づき、約６０％のヒ
トゲノムが失調症遺伝子を含有しているとして除外され
た。これらマーカーへの近接からの疾病遺伝子の排除を
、一２またはそれ以下のＩｏｄ値（ｌｏｇ＋ｏ確率比）
によって確かめた。本明細書ではこの失調症遺伝子を、
特発性回転失調症の原因であることがわかった最初の遺
伝子座であることからＩＴＤＩと呼ぶ。 失凋症−マーカーの比較のための２点連鎖分析を、発症
年齢の補正を加えたＦＯＲＴＲＡＮコンピュータープロ
グラムＬＩＰＥＤバージョン３ ［１１ｏｄｇｅ， Ｓ
．を用いて行った。希薄な遺伝子（頻度０．０１％）の
常染色体の優生遺伝を失調症について仮定した。 「／ングル」法［Ｄａｖｉｅ， Ａ． Ｍ． ， Ａｎ
ｎａｌｓ Ｉｌｕｍ． Ｇｅｎｅｔ．４２ ： ５０７
−５１２（１９７９）］を用いて最大浸透度について０
．７５の概算値を得た。全員一致で、かつ明確に失調症
を有しているとみなされた個体だけを明白な罹患と表し
た。臨床的徴候が「低可能性」または「高可能性」の失
調症である個体は、この連鎖分析では「不明」とみなし
た。その他の全ては罹患していないとみなした。 ２点分析における年齢補正のパ゛ラメーターは、この家
族からの経験的な発症年齢データに基づいている［Ｂｒ
ｅａｋｅ４ｉ・ｅｌｄ，Ｘ．Ｏ． ｅｔ ａｌ．，Ｊ．
Ｎｅｕｒｏｇｅｎｅｔ．ａ ： １５９−１７５（１９
８６）］。具体的には、年齢５才と３５才の間の浸透度
はそれぞれ０．０から０．７５まで直線で増加した。５
才前の浸透度はＯ．Ｏとし、３５才後のそれは一定の０
．７５とした。 マーカーがｌｏｄ値＞＋０．０６を与えたゲノムのいく
つかの領域（９ｑ上のＡＢＯ遺伝子座を含む）を次の研
究の重点に置いた。９ｑ上の多数のＤＮＡマーカーブロ
ーブ（第ｌ表に示したものを含む）を、ＩＴＤＩ遺伝子
座を用いる２点分析によって評価した。最も高いＬｏｄ
値は、ゲルソリン（ＧＳＮ）遺伝子座のｃＤＮＡブロー
ブ（このヒト染色体の転座を含む体細胞ハイブリッドを
用いて９ｑ３２ｑ３４上のＡＢＬに動原体マッピングす
る）で得られた［Ｋｗｉａｔｋｏｗｓｋｉ，Ｄ．Ｊ．
ｅｔ ａｌ．， Ａｎ．Ｊ．Ｈｕｍ．（ｉｅｎｅｔ．
４２ ： ５６５−５７２（１９８ｇ）］。このｒＴＤ
ｌおよびＧＳＮ遺伝子座は、Ｚ＝３．５１の０．０のθ
の最大見込み値で、連鎖の有意な証拠を示した。この概
算に対するｌｌｏｄ単位の間隔は約０−１８ＣＭである
。実際のところ、ＧＳＮとＩＴＤＩの間の純組換えは６
７の減数分裂では全く観察されなかった（ただし、その
大部分は情報が十分ではない）。 情報が十分である、この失調症遺伝子座およびこの領域
の他の９ｑマーカーによる２点連鎖分析の結果を第ｌ表
に示す。これらにはＤ９Ｓ２６、ＡＢＯ，ＡＳＳおよび
Ｄ９Ｓ１０が含まれ、その全ては正のｌｏｄ値を与えた
（Ａ Ｂ Ｌ遺伝子座のマーカーはこの家族では情報が
十分ではない）。連鎖のネガティブな証拠か、Ｄ９Ｓ１
０の１２ｃＭ遠位にあるＤ９Ｓ１７で得られた。浸透度
の概算値を変えることによる連鎖結果に及ぼす効果を調
べるために、０．５０および０．９０の浸透度概算値を
用いて第１表の６つの９ｑマーカーを再分析した。２点
分析に関しては、浸透度＝０．７５で得られた結果に比
べ、Ｉｏｄ値の顕著な差異は見られなかった。最犬の相
違はＧＳＮ遺伝子座で見られた。具体的に言うと、浸透
度＝０．９０を用いて得たＩｏｄ値は全てのθ値にわた
って約０．２０増加した。それにもかかわらず、最低の
浸透度概算値を用いても、ＧＳＮとＩＴＤＩの連鎖の有
意な証拠が得られた（θ，ａＫ−０ ． ０でＺ．，．
．＝３．ｌＯ）。 箸よｆｉｌＴＤｌ（特発性回転失調症１）および染色体
９ｑ上のマーカーの２点法による連鎖分析の結果記号０
．００１ ０．０５ Ｄ９Ｓ２６ −０．６９ ＋ｏ．ｇｇＧＳＮ
＋３．５０ ＋３．２６ＡＳＳ 十０．１７
＋０．３５ＡＢＯｂ−０、４４ ＋ｔ．ｏｇ Ｄ９ＳｌＯ ＋０．７３ ＋２、１８Ｄ９Ｓ１７
−６．６４ −３、６０再分析した。 ０．１０ ０，２０ ０．３０ ＋１．０５ ＋０．９９ ＋０．７１＋２．９９
＋２．３６ ＋１．６１＋０．４１ ＋０．
３７ ＋０．２３＋ｌ．ｌ９ ＋ｌ．Ｑ３ ＋０
．６６＋２、２０ ＋１．８５ ＋１．２６２．１
２ −０．８０ −０．２６０，４０ θ ＋ｏ．ａｔ ０．１３ ＋０．７４ ０．００ ＋０．０７ ０．１２ ＋０．２３ ０．ｌＱ ＋Ｑ ５２ ０．０８ −０．０６ ０．５０ Ｚ ｌ．０６ ３．５１ ０．４１ ｌ．１９ ２．２２ ０．００ 多点分析 多点分析は、コンピューター・バッ’ｒ−シＬＩＮＫＡ
ＧＥバージョン４．７からのＬＩＮＫＭＡＰプログラム
を用い、干渉がないものと仮定して行った［Ｌａｔｈｒ
ｏｐ，Ｇ．Ｍ． ｅｔ ａｌ．，Ａｍ．Ｊ．ｌｌｕｍ．
Ｇｅｎｅｔ． ４２：４９８−５０５（１９８ｇ）］。 この分析に取り入れた段階的な年齢補正は、２点分析で
用いた補正よりも技術的に一層正確である；しかじ、実
際には差異は無視できる。 この家族においては、罹患個体の約５０％が初期青年期
（１２〜１４才）に発症し、約７５％が中期２０に発症
していた。この分布を説明するため、浸透度が５才の０
．０から３５才の０．７５まで増加する６つの障害クラ
スを定義し、その後の浸透度は０．７５で一定のままと
した。干渉は仮定しなかった。 失調症遺伝子座ならびに９ｑ上の３つの情報性の遺伝子
座Ｄ９Ｓ２６、ＡＢＯおよびＤ９ＳＩＯを用いて多点分
析を行った。これら３つの遺伝子座はいくつかの理由に
より４点分折に選んだ：即ち、（１）これらの遺伝子座
およびＩＴＤＩによる２点分析の結果が、統計学的に有
意なものではないが、連鎖について示唆的な証拠を与え
た；（２）これらのマーカーが、ＧＳＮ遺伝子座が明ら
かに存在している領域を包含するある間隔にまたがって
いる［Ｋｗｉａｔｋｏｗｓｋｉ，Ｄ．Ｊ． ｅｔ ａｌ
．， Ａｍ．Ｊ．ｌＩｕｍ．Ｇｅｎｅｔ． ４２ ：
５６５−５７２（１９８ｇ）コ；および、（３）これら
遺伝子座の間の距離の信頼できる概算値が、Ｃｅｎｔｒ
ｅｄ’ Ｅｔｕｄｅ ｄｅ ＰｏｌｙｍｏｒｐｈｉｓＩ
ＩＩＨｕｍａｉｎ（Ｃ Ｅ Ｐ Ｈ ）参考家系から入
手可能である（ただし、ＧＳＮおよびＡＳＳ遺伝子座を
含む９ｑ連鎖地図はいまだに入手不可能である）。ＡＢ
Ｏ，Ｄ９Ｓ２６およびＤ９Ｓ１０の遺伝地図距離は、Ｃ
ＥＰＨを構威している４０の家系から得られた。Ｄ９Ｓ
１０とＡＢＯの間の距離は、このデータをＣＥＰＨデー
タベースから得ることができないので、Ｌａｔｈｒｏｐ
等［Ｌａｔｈｒｏｐ， Ｇ． Ｍ． ｅｔ ａｌ． ，
Ａｍ， Ｊ． Ｈｕｍ． Ｇｅｎｅｔ． ４２ ：
４９８−５０５（１９８ｇ）］から取った。最大の見込
みオーダーおよびθ概算値は、ＭＡＰＭＡＫＥＲプログ
ラム［バージョンｌ． Ｏ ； Ｌａｎｄｅｒ，Ｅ．Ｓ
． ｅｔ ａｌ．，Ｇｅｎｏｍｉｃｓ １ ： １７４
１８１（１９８７）］を用いて測定した。 多点分析の結果を第２図に図式化して示す。第１図に示
した予備的な連鎖地図に基づくと、ＩＴＤ１遺伝子座は
ＡＢＯに動原体性であるようである。統計学的に有意な
ｌｏｄ値は得られなかったが、疾病遺伝子座の最も可能
性の高い位置はＡＢＯから約９．５ｃＭである（Ｚ＝２
．４６）。即ち、この多点連結の結果は、ＧＳＮとＩＴ
ＤＩ遺伝子座の間の密接な連鎖を示唆する２点の結果と
一致している。 ＧＳＮ遺伝子座は９ｑ上のＡＢＬ遺伝子座の近くにある
ことか知られているが、この領域中のその正確な地図位
置はいまだＣＥＰＨ参考家系を用いて確立されていなか
った。本発明で調査した家族において入手可能なデータ
に基づき、Ｄ９３２６、ＡＢＯおよびＭＣＴｌ３６と比
較の上で、ＧＳＨのおよその地図位置を得た。この試料
に基づくと、ＧＳＮの最も可能性の高い位置はＤ９３２
６から約７ｃＭの遠位である（Ｄ９Ｓ２６−ＡＢＯで区
画される領域内のどこかに存在するＧＳＨの確率は１０
”＋１より大きい）。次いで、このＧＳＮの仮の位置を
用いて、Ｄ９Ｓ２６、ＧＳＮ，ＡＢＯおよびＭＣＴｌ３
６による［ＴＤ１の５点連鎖分析を行った。ＩＴＤＩの
最も可能性の高い位置はＧＳＮ遺伝子座それ自体である
（θ一０．０でＺ＝３．５７）； Ｌかし、有意なｌｏ
ｄ値（＞３．０）がＧＳＮの近位３．５ｃＭおよびＧＳ
Ｎの遠位１５ｃＭの間隔内に得られた。即ち、ＧＳＮ遺
伝子座がこの１８ｃＭ領域内のどこにあろうとも、この
多点の結果は、この領域中のＤ９Ｓ２６とＡＢＯの間の
ＩＴＤＩ遺伝子の位置を強く支持する。 この連鎖の研究は、非ユダヤ系家族の特発性回転失調症
（ＩＴＤＩ）への感受性を引き起こす遺伝子を、ゲルソ
リンをコードしている遺伝子の１８ｃＭ内にその位置を
定める（θ−０．０、Ｚ＝３．５Ｌ１１ｏｄ単位間隔０
−１８ｃＭ）。このｌｏｄ値は、これら２つの遺伝子座
の連鎖が１０３：ｌより大きい確率であることに対応し
ている。多点分析は、ＧＳＮとＩＴＤ１の両方がＤ９Ｓ
２６とＡＢＯの間にあることを示唆する。この領域にお
ける別の９ｑブロープの生成および評価は、この家族に
おける失調症遺伝子座付近の密接に境界を接しているマ
ーカーの明確化を可能にするであろう。 ９ｑ領域の２つの遺伝子を、失調症の特徴およびこの領
域にマッピングする遺伝子の最近の知見に基づいて、Ｉ
ＴＤ１遺伝子の候補遺伝子座とみなすことができる。発
生的な組織化に影響を及ぼすタンパク質が、非特異的で
あっても、失調症の基礎を為す神経回路に微妙な変化を
もたらすこともあると考えられる。このカテゴリーにお
いて、ゲルソリン（ＧＥＬ）は、脳を含む噛乳動物組織
で広範に発現される、Ｃａ”およびポリホスホイノシチ
ドー調節され、多機能性の、アクチンー結合性のタンパ
ク質である［Ｋｗｉａｔｋｏｗｓｋｉ，Ｄ．Ｊ． ｅｔ
ａｔ ＪＢｉｏｌ． ＣｈｅＩＩ１． ２６３ ：
８２３９−８２４３（１９８８）］。細胞移動中のア
クチンフィラメント構築を調節するものと考えられてお
り［Ｍａｔｓｕｄａｉｒａ，Ｐ． ｅｔ ａｌ．，Ｃｅ
ｌｌ ５４ ： １３９−１４０（１９８ｇ） ： Ｙ
ｉｎ， Ｈ． Ｌ． ， ＢｉｏＥｓｓａｙｓ ７ ：
１７６−１７９（１９８８）］、ニューロン成長円錐
体の運動活性に関与しているようである［Ｆｏｒｓｃｈ
ｅｒ，Ｐ． ｅｔ ａｌ．，Ｊ．Ｃｅｌｌ影旦Ｌ輿：
１５０５−１５１６（１９８ｇ）］。別の候補は、脳幹
神経節へのカテコールアミン作動性およびコリン作動性
入力の間のバランスを維持するのに関与しているタンパ
ク質である；ドバミンをノルエピ不フリンに変換する酵
素であるドパミン−β−ヒドロ−ｔ− ’ｉ５−セ（Ｄ
Ｂ Ｈ）の遺伝子も９ｑ３４Ｍ域に７ツピングする［
Ｌａｍｏｕｒｏｕｘ，Ａ． ｅｔ ａｌ．，ＥＭＢＯ
Ｊ． ６４ ３９３１−３９３７（１９８７） ：
Ｃｒａｉｇ，Ｓ． Ｐ． ｅｔ ａｌ．，Ｃｅｌｌ Ｇ
ｅｎｅｔ． ４８ ： ４８−５０（１９８ｇ） ；
Ｗｉｌｓｏｎ， Ａ． Ｆ． ｅｔ ａｌ． ， Ａｍ
Ｊ．Ｈｕｍ．Ｇｅｎｅｔ． ４２： １６０−１６６
（１９ｇｇ）］。 いくつかの系統の証拠がＤＢＨの欠損が失調症に関与し
ていることに反証する。血清ＤＢＨを欠いている個体は
重篤な起立性低血圧に苦しんでいるが、失調症を示さな
い［Ｖｅｌｄ，Ａ．Ｊ．Ｍ． ｅｔ ａｌ、，Ｌａｎｃ
ｅｔ １８３−１８７（１９８７） ； Ｒｏｂｅｒｔ
ｓｏｎ， Ｄ． ｅｔ ａｌ． ， Ｎ． Ｅｎｇｌ．
Ｊ． Ｍｅｄ． ３１４ ： １４９４−１４９７（
１９８６）コ。本家族構成員を含む失調症患者の血清に
、正常なまたは高レベルのＤＢＨが報告されていた［Ｚ
ｉｅｇｌｅｒ，Ｍ．Ｇ． ｅＬａｌ、， Ａｄｖ． Ｎ
ｅｕｒｏｌ． １４ ： ３０７−３１５（１９７６）
； Ｗｏｏｔｅｎ， Ｇ．Ｆ． ｅｔ ａｌ．，Ｎ．
Ｅｎｇｌ．Ｊ．Ｍｅｄ． ２８８： ２８４−２８７（
１９７３）］。 さらに、この疾病における遺伝形質の優生モードは、酵
素活性の欠如によって引き起こされるものに反証を与え
るであろう。 ＤＢＨの欠損というよりもむしろ、ＤＢＨ遺伝子座にお
ける、またはその近くの突然変異によるＤＢＨの異常に
高い発現が関与している可能性の方が高い。特発性の非
ユダヤ失調症の３例において、ノルエピネフリン量の増
加が上部および下部脳斡のいくつかの領域で観察された
［｝Ｉｏｒｎｙｋｉｅｗｉｚｃ，Ｏ． ｅｔ ａｔ．
， Ｉｎ Ａｄｖａｎｃｅｓ ｉｎ Ｎｅｕｒｏｌｏｇ
ｙ（Ｄｙｓｔｏｎｉａ ２）５Ｑ ： Ｓ． Ｆａｈｎ
， Ｃ． Ｄ． Ｍａｒｓｄｅｎ， ａｎｄ Ｄ． Ｂ
． Ｃａｌｎｅ， ｅｄｓ． （Ｎｅｗ Ｙｏｒｋ ：
Ｒａｖｅｎ Ｐｒｅｓｓ）， Ｐｆ）． １５７−１
６５（１９８ｇ） ；Ｊａｎｋｏｖｉｃ，Ｊ． ｅｔ
ａｌ．，Ｎ．Ｅｎｇ．Ｊ．Ｍｅｄ． ３１６：
２７８−２７９（１９８７）］。さらに、遺伝的に失調
症であるラットおよびマウスは青斑に高いノルエピネフ
リンを示し、実験動物の神経生理学的研究によると、失
調症におけるこの脳領域でのノルエピネフリンニューロ
ンの活動過剰が関係している［Ｌｏｒｄｅｎ， Ｊ．
Ｆ．ｅｔ ａｌ ， Ａｄｖ． Ｎｅｕｒｏｌ． ５０
： ２７７−２９７（１９８ｇ） ； Ｄｕｃｈｅｎ
，Ｌ． Ｗ． ， Ａｄｖ． Ｎｅｕｒｏｌ． １４
： ３５３−３６５（１９７６） ； Ａｄａｍｓ，
Ｌ．Ｍ． ｅｔ ａｌ． ， Ａｄｖ． Ｎｅｕｒｏｌ
． ５０ ＋ ３１３−３３３（１９８ｇ）］。従っ
て、失調症の治療は、患者に有効量の抗ノルエピネフリ
ン薬または他のアドレナリン作動の遮断剤、例えばβ一
遮断薬、モノアミンオキシダーセ阻害薬、アセチルコリ
ンエステラーゼ阻害薬、および神経弛緩剤、特にフェノ
チアジン、ブチロフェノン、フェノキシベンザミン、フ
ェントラミン、トラゾリン、プラゾシン、クロニジン、
α−メチルトハ、グアネタジン、およびレセルピンを投
与スることによって行うことができる。 以上に本発明を詳しく記載したが、本発明の思想または
範囲あるいはそのあらゆる態様から逸脱することなく、
広範かつ等価な条件、パラメーターなどの範囲内で本発
明を実施することができることは当業者の認めるところ
であろう。
の原因を為す遺伝子座の連鎖分析の結果に基づくもので
ある。この遺伝子座は、構成員が遺伝的に回転失調症の
発現に感受性である大きな家系の回転失調症遺伝子に密
接な遺伝的連鎖を示す。 本データから、本形態の失調症の回転失調症遺伝子座は
ヒト染色体９ｑ，具体的には９ｑ３２〜ｑ３４の間にあ
ることが推論された。 これらの研究により、初めて、回転失調症に関連したＤ
ＮＡの多形性についてヒト染色体９ｑを分析することか
らなる、少なくとも１つの形態の回転失調症の存在を検
出するための一般的な方法が得られることになった。 種々のあらゆる制限フラグメント長の多形性（ＲＦＬＰ
）を用いることができる。 特に、回転失調症に関連したｌつのＤＮＡ多形性または
２もしくはそれ以上の多形性の組合せの遺伝を、表現型
のａｌｌ定が可能な家系構或員の組合せにおいて調べる
ことによって本試験を行う。本試験を用いて出生前に胎
児をスクリーニングすることができ、また、発症前にあ
る対象をその家族史による危険についてスクリーニング
することができる。 また、本発明は検定を行うのに有用な産物、例えばＤＮ
Ａプローブ（ラベルされているか、または未ラベル）、
キットなどにも及ぶものである。 図面の説明 第１図は、失調症の家系の系図を示すものである。点を
付した個体の全ては、コロンビア大学のディストニア・
クリニカル・リサーチ・センター（Ｄｙｓｔｏｎｉａ
Ｃｌｉｎｉｃａｌ Ｒｅｓｅａｒｃｈ Ｃｅｎｔｅｒ）
で厳格な神経学的調査を受けた。最高齢の男性は病歴に
基づくと罹患していたものと考えられた［Ｊｏｈｎｓｏ
ｎ， Ｗ．ｅｔ ａｌ． ， Ａｒｃｈ． Ｎｅｕｒｏ
ｌ． ７ ＋ ３０１−３１３（１９６２）］。白のま
まの記号は未罹患および罹患しているかもしれない者；
黒く塗り潰した記号は罹患している者；半分塗り潰した
記号は恐らくは罹患している者を示す。ゲルソリン（ｇ
ｅｌｓｏｌｉｎ ； Ｇ Ｓ Ｎ ）遺伝子座における
個体のアレルの状態を記号の下に数字で示す。 第２図は、ｑａｔ−３４領域における連鎖距離および物
理的な割当を示すヒト９染色体地図である。地図上の距
離は性の平均値の組換え割合で示している。尺度は遺伝
子距離（モルガン）である。 Ｌａｔｈｒｏｐ等［Ｌａｔｈｒｏｐ，Ｍ． ｅｔ ａｌ
．，Ｇｅｎｏｍｉｃｓ ３ ： ３６１３６６（１９８
８）］のものに修飾を加えた。 第３図は、［ＴＤ１および９ｑマーカーの多点分析の結
果を示すものである。固定したマーカー地図の種々の地
図位置において、失調症について計算したｌｏｄ値をま
とめる位置地図である。マーカーの遺伝子距離は第２図
のものと同一である。 定義 多数の技術的な用語および表現が本明細書あるいは特許
請求の範囲において用いられている。その一律性を確実
なものにし、不明確さを避けるために、以下に定義を記
載する。 「連鎖遺伝子」：「連鎖」している遺伝子とは、同一の
染色体上の互いの測定可能な距離内に遺伝子座を有する
ものである。 「連鎖分析ｊ：連鎖分析は、特定の疾病状態が遺伝「マ
ーカー」の遺伝子座においてアレルとともに同時分離す
る頻度を測定し、それによって、障害を引き起こす遺伝
子がマーカーに近接しているか否かを決定する手段を与
える。連鎖分析の基本的な考え方は、２つの遺伝子が特
定の染色体上で互いに近接しているほど、減数分裂の間
にそれらの間の交差（組換え現象）が起こるのが減少す
るであろうと言うものである。 「組換え」：遺伝子の遺伝子座の間の交差による連鎖遺
伝子の新しい組合せの生成。 「地図単位」：ある染色体上の２つの遺伝子座の間の距
離の単位であり、それらの間の組換えの頻度（％）に基
づいており、ｌ地図単位は１センチモルガン（ｃＭ）ま
たは１％組換えに等しい。 「遺伝マーカー」：遺伝マーカーは家族および集団の研
究に用いられる特徴であり、それは、遺伝的に決定され
ており、正確に分類することができ、単純かつ明確な遺
伝形質パターンを有しており、そして遺伝の多形性とし
て分類することを可能にするに十分な共通の遺伝的変化
を有するものである。 １組換え頻度」：組換え頻度は２つの遺伝子座の間の平
均の組換え量の尺度であり、作成する連鎖地図中の２つ
の遺伝子座の間の相対距離の尺度として用いることがで
きる。 ｒｌｏｄ値法Ｊ ： ｒｌｏｄＪなる用語は「確率の対
数」の短縮形である。ｌｏｄ値法はＭｏｒｔｏｎ［Ｍｏ
ｒｔｏｎ． Ｎ． Ｅ． ，発されたものであり、連鎖
の相が未知であることもあるところで（即ち、遺伝子が
同一または別の染色体にあるか否かがわかっていないと
きに）、ヒトにおける連鎖を測定する方法である。この
方法はＥｌｓｔｏｎ等［ＥＩｓｔｏｎ ｅｔ ａｌ．，
Ｈｕｍ．Ｈｅｒｅｄ． ２１ ： ５２３−５４２（
１９７１）］によって拡張され、Ｏｔｔ［Ｏｔｔ， Ｊ
．， ＡｎａＩｙｓｉｓ ｏｆ Ｈｕｍａｎ Ｇｅｎｅ
ｔｉｃ Ｌｉｎｋａｇｅ．Ｔｈｅ Ｊｏｈｎｓ ｆｌｏ
ｐｋｉｎｓ Ｕｎｉｖｅｒｓｉｔｙ Ｐｒｅｓｓ，Ｂａ
ｌｔｉｍｏｒｅ，１９７６］によってコンピュータープ
ログラムＬＩＰＥＤに組ミ入れられた。その原理は、一
連の理論的組換え頻度を設定し、そしてそれぞれの理論
値に対して、連鎖がない可能性と比較して、組換え割合
に基づく特定の家系の相対確率２を計算することである
。 理論的組換え頻度０＝０．０であれば完全な連鎖が存在
する。θ−０．５０であれば連鎖が存在しない。Ｚ（θ
）＝ｌｏｇ＋ｏ［（θ＝０．０１の家族の可能性など）
／（θ＝０．５０の家族の可能性）］。この比を対数で
表す。ｌｏｄ値３（連鎖の側への１０００：１の可能性
に等しい）を独断ではあるが連鎖の証明として受入れ、
−２の値または−１であっても連鎖を認めないものと解
した。 ｒｐＪ：（１）染色体の短アームがｒｐＪアームである
（仏語の”ｐｅＬｉｔ”由来）。（２）集団遺伝学にお
いてｐは、ある対のより共通するアレルの頻度を示すの
に用いることも多い。 ｒｑＪ：（＋）染色体の長アームがｒｑＪアームである
。（２）集団遺伝学においてｑは、ある対のめったにな
いアレルの頻度を示すのに用いることも多い。 「家系」 ：家系は、記号を用いてチャート上で家族か
らの遺伝データを分類する速記法である。 例えば、通常は男性は四角で、女性は円で、そして性が
特定されていない人はダイヤで表す。記号に重ねたスラ
ノシュは死亡した人を意味する。黒く塗り潰した記号は
問題の疾病に罹患している人を意味する。部分的に塗り
潰した記号は常染色体劣性疾病にペテロ接合性である人
を意味する。中に数を記した記号はその性の子供の数を
示す。 「ヘテロ接合体およびホモ接合体」；１対の相同染色体
上のある遺伝子座に２つの別のアレルを有し、その１つ
が正常なアレルである個体は該遺伝子座にとってヘテロ
接合体である。１対の相同染色体上のある遺伝子座に２
つの同一のアレルを有する個体は該遺伝子座にとってホ
モ接合体である。 「多形性」 ；２またはそれ以上の遺伝的に決定された
別の遺伝子型の集団中での出現。独断ではあるが、めっ
たにないアレルが少なくとも０．０１の頻度を有してお
り、従ってヘテロ接合体頻度が少なくとも０，０２であ
るときには、その遺伝子座は多形性であるとみなされる
。 「制限フラグメント長の多形性（ＲＦＬＰ）Ｊ：ＲＦＬ
Ｐは、特異的な制限酵素による消化によって生成したＤ
ＮＡフラグメントの長さの差異に基づいて検出すること
ができるＤＮＡ配列中の多形性である。 「浸透性」：ある遺伝子型の発現頻度がその浸透性であ
る。発現頻度が１００％より低いときには、この特徴を
、浸透性の減少を示す、あるいは浸透性を欠くと言う。 異常な表現型を特徴的に生成する遺伝子型を有している
が表現型としては正常な個体においては、その特徴は非
浸透性であると言われる。 詳細な説明 最も広くは、本発明は、回転失調症に関連したＤＮＡ多
形性についてヒト染色体９ｑを分析することによって、
回転失調症の遺伝子の存在を検出することからなる［Ｏ
ｚｅｌｉｕｓ，Ｌ．，ｅｔ ａｌ．＋ ＮｅｕｒｏｎＭ
ａｙ １９，１９８９を参照］。 目的の多形性と回転失調症遺伝子の間の遺伝的連鎖また
は関連を調べるために、研究対象の家族の類縁関係の組
合せを分析することが必要である。 この組合せは、多形性の存在に関連した回転失調症の表
現型の測定が可能なように遺ぶ。即ち、いくつかの個体
を試験するのが好ましい。これらには、罹患していない
両親、罹患している両親、罹患している兄第・姉妹、罹
患していない兄第・姉妹、ならびにもっと遠いその他の
者が含まれる。 理想的には、未罹患の両親、罹患の両親および罹患の兄
第・姉妹を利用すべきである。罹患の両親が死亡してい
るときであっても、回転失調症遺伝子による多形性の明
白な分離を他の構成員で証明することができるときには
満足な結果を得ることができる。 ＲＦＬＰの使用は、多形性検出の１つの好ましい態様で
あるにすぎない。ＲＦＬＰの存在を検出するための現在
での最も普通の方法は、ある酵素を用いて制限分析を行
い、所望のプローブを用いてサザーン・ハイプリダイゼ
ーション法を行い、そしてあるＲＦＬＰまたはＲＦＬＰ
群を同定することである。連鎖分析および遺伝試験にお
いてＲＦＬＰを用いることは当分野で周知である［例え
ば、Ｇｕｓｅｌｌａ，Ｕ．Ｓ． ４．６６６４２ｇ、お
よびＤｏｎｉｓ−Ｋｅｌ ｌｅｒ， ＩＩ． ｅＬ ａ
ｌ． ， Ｃｅｌｌ ５１ ： ３１９−３３７（１９
８７）を参照］。 ＲＦＬＰを用いる分析のためには、対象を含む被験個体
の全てから遺伝物質の試料を得ることが必要である。遺
伝物質の供給源として血液試料を用いるのが好ましく、
リンパ球ＤＮＡが分析される。所望により、遺伝試験の
前にリンパ球からＤＮＡを抽出してもよい。ＲＦＬＰの
検出のために、試料中のＤＮＡをある制限エンドヌクレ
アーゼで哨化する。別法によれば、いくつかの消化物を
得ることもできる。必要なら、ＲＦＬＰ分析に先立って
ＤＮＡを増幅してもよい。消化物を得、これを例えばア
ガロースゲル電気泳動などの常法によって分離した後、
ＲＦＬＰ配列をコードしているＤＮＡフラグメントで分
離したバンドをプローブする。制限酵素とブローブの最
適の組合せが存在することもある。例えば、後記のＭＩ
Ｄ ＧＳＮブローブでは、ＳｔｕＩなどの制限酵素を利
用することができる。このＭＩＤ ＧＳＮプローブはこ
れまでＧＭＩと呼ばれていたものであり、その構築およ
び配列は公知である［Ｋｗｉａｔｋｏｔｖｓｋｉ． Ｄ
． Ｊ． ｅｔａｌ． ， Ｎａｔｕｒｅ ３２３ ：
４５５−４５８（１９８６）］。検出のために、■を
越える多形性（即ち、ｌを越えるブローブ）を用いるの
が好ましい。感度を有意に増加させるために、回転失調
症遺伝子の両側の別の多形性を検出するのが理想的であ
る。後記のように、使用することが可能な別のブローブ
には、例えばＤ９Ｓ１０およびＡＳＳが含まれる。プロ
ーブがＤＮＡプローブであることは必要ではない。例え
ば、ＲＮＡブローブを用いることができる。 最終的にはＲＦＬＰの使用は核酸分子に沿うＤＮＡ制限
部位中の多形性に依存するので、多形性を検出し得るあ
らゆる方法を用いることができる。 直接の配列決定と組み合せた染色体９ｑの所望の領域の
増幅、または放射ラベル、蛍光ラベルもしくは酔素ラベ
ルによる染色体９ｑ上の多形性の位置決定などの方法も
用いることができる。 分析しようとする遺伝試料が限定された量で存在してい
るときには、そのような試料中の核酸を始めに増幅して
、後に行うＲＦＬＰまたは配列決定分析などの分析のシ
グナルを増強してもよい。 あらゆるＤＮＡ増幅法、例えばポリメラーゼ連鎖反応［
Ｍｕｌｌｉｓ，Ｋ．ｅｔ ａｌ．，Ｃｏｌｄ Ｓｐｒｉ
ｎｇ Ｉｌａｒｂｏｒ Ｓｙｍｐ．Ｑｕａｎｔ． Ｂｉ
ｏｌ． ５１ ： ２６３−２７３（１９８６） ；
Ｅｒｌｉｃｈ， ｔｌ． ｅｔ ａｌ．，ＢＰ ５０，
４２４ ； ＥＰ ２５８，０１？， ＢＰ ２３７，
３６２ ； Ｍｕｌｌｉｓ，Ｍ．，ＥＰ ２０１，１８
４； Ｍｕｌｌｉｓ，Ｋ．ｅｔ ａｌ．，Ｕ．Ｓ． ４
，６８３，２０２；およびＬｏｈ ｅｔ ａｌ．，Ｓｃ
ｉｅｎｃｅ ２４３ ： ２１７−２２２１を用いてＤ
ＮＡを増幅することができる。Ｌｉ等（ＬｉｅＬ ａｌ
．，Ｎａｔｕｒｅ ３３５ ： ４１４−４１７（１９
８８）］はポリメラーゼ連鎖反応を用いて、１個の精子
由来の２つの遺伝子座を遺伝子分析が可能なレベルまで
同時増幅することを報告した。Ｌｉ等の方法の利点は、
１個の個体から多数の部分的産物を試験することができ
、物理的に極めて近接している遺伝マーカー間の組換え
頻度の測定を可能にすることである。 また、Ｑβ−レプリカーゼおよびプローブとして増幅可
能なＲＮＡ配列を用いてＤＮＡおよび／またはＲＮＡを
増幅することもできる［Ｃｈｕ， Ｂ． Ｃ． Ｆ．ｅ
ｔ ａｌ．，Ｎｕｃｌ．Ａｃｉｄｓ Ｒｅｓ． １４：
５５９１−５６０３（１９８６）］。 ポリヌクレオチドブローブはＲ Ｎ ＡまたはＤＮＡで
あってよいが、ＤＮＡが好ましく、放躬ラベル、酵素ラ
ベル、蛍光ラベル、ビオチンーアビジンラベルなどを用
いる通常のラベル法によってラベルすることができ、こ
れらがハイブリダイゼーション後の検出を可能にする［
例えば、Ｌｅａｒｙ， Ｊ． Ｊ．ｅｔ ａｌ． ．
Ｐｒｏｃ． Ｎａｔｌ． Ａｃａｄ． Ｓｃｉ． ＵＳ
Ａ ８０ ： ４０４５（１９８３）を参照］。 対象の家系の罹患および非罹患個体のＲＦＬＰまたはＲ
ＦＬＰ群を、被験対象のＲＦＬＰまたはＲＦＬＰ群と比
較することにより、対象中の回転失調症遺伝子の存在ま
たは非存在が迅速に調べられる。この結果は、対象中の
回転失調症遺伝子の存在の司能性として表現するのが最
も良い。 後記では特にＭＩＤ ＧＳＮブローブ［Ｋｗｉａｔｋｏ
ｗｓｋｉ， Ｄ． Ｊ． ｅｔ ａｌ． ， ＡＩＩｌ
． Ｊ． Ｈｕｍ． Ｇｅｎｅｔ． ４２ ： ５６５
−５７２（１９８８）］を用いているが、ブローブに有
用な他の遺伝子配列を容易に得ることができる。例えば
、回転失調症遺伝子に関連した別の新規ＤＮＡフラグメ
ントを生戊させる方法は次のようである。 第ｌの方法は、染色体９の適当な領域にマッピングする
ヒト（ゲノムまたはｃＤＮＡクローンのいずれか）ＤＮ
Ａフラグメントのランダムに選択した断片を試験するこ
とである。このようなマノピングは以下の３つの方法で
行うことができる：（ａ）体細胞ハイブリッドのパネル
からのＤＮＡへのハイブリダイゼーション； （ｂ）分裂中期染色体展開へのその場でのノ＼イブリダ
イゼーション；または （ｃ）ＧＳＮ．Ｄ９Ｓ １０，Ｄ９Ｓ２６、ＡＢＯ，ま
たは既にその領域にマッピングされたあらゆる他のマー
カーへの遺伝的連鎖。 方法（ａ）および（ｂ）についでは、新しいフラグメン
トは多形性である必要はないが、（Ｃ）については、始
めに無関係の個体の新しい部位におけるゲノムＤＮＡの
制限パターンを比較することによって多形性が同定され
なければならない。方法（ａ）または（ｂ）においては
、マッピングされたフラグメントはヒトＤＮＡ中の多形
性を検出することが示されなければならない。次いで、
新しい遺伝マッピングである多形性を、本出願でｂよう
に家族の研究における回転失調症の連鎖について試験す
ることができる。 別のＤＮＡブローブを得るための第２の、より効率的な
方法は、組換えＤＮＡライブラリ一体細胞ハイブリッド
系統を調製することである。ここで、染色体９または特
に９ｑまたはその断片は、細胞中に存在する唯一のヒト
染色体であるか、またはいくつかの中の１つである（他
の染色体の全ては、別の種、通常はマウス、ハムスター
またはラットからのものである）。次いで、ヒｌ−ＤＮ
Ａを含む組換えクローンを、種一特異的な反復配列への
ハイブリダイゼーションによって同定する。 ハイブリッド細胞が染色体９だけを含有しているときに
は、ヒトＤＮＡを含有しているクローンは染色体９由来
のＤＮＡを含有しているにちがいない。他のヒト物質が
ハイブリッド中に存在しているときには、さらに、前記
に概略したマッピング法の１つにかけなければならない
。 染色体９由来のＤＮＡクローンを得る第３の方法は、蛍
光活性化ソーターで選別しておいた分裂中期染色体から
単離したヒトＤＮＡ由来のライブラリーを作戊すること
である［ｌｌｕｍａｎ Ｇｅｎｅｔｉｃ Ｄｉｓｅａｓ
ｅｓ． Ａ Ｐｒａｃｔｉｃａｌ Ａｐｐｒｏａｃｈ，
Ｋ． Ｅ． Ｄａｖｉｅｓ， ＩＲＬ Ｐｒｅｓｓ，
Ｗａｓｈｉｎｇｔｏｎ， Ｄ． Ｃ． ， １９８６
］。この方法は、９５％またはそれ以上の純度の精製さ
れた染色体を与えることもある。 回転失調症領域から新しいＤＮＡプローブを得る最後の
方法は、その領域に既にマッピングされたあらゆるプロ
ーブを用いて、ゲノムライブラリーから隣接のＤＮＡ重
複断片を「釣り上げる」ことである（通常、「染色体歩
行」と呼ばれる）。この場合、染色体９にマッピングさ
れる１次プローブは多形性である必要はない。 上に概略した全ての場合において、ブローブは、それが
回転失調症を試験するのに有用であるためには、多形性
を検出することが最終的にわかっていなければならない
。この多形性は、回転失調症または家族研究の他の有用
なマーカーに関連していること、または既存のマーカー
にすぐ隣接していることがわかっていなければならない
。 特定の多形性プローブは、それが関連のＤＮＡ領域また
は遺伝子座中の多形性を同定することができるものであ
る限り、どんな所望の配列の長さのものであってもよい
。ＤＮＡもしくはＲＮＡフラグメントだけであってもよ
いし、もつと長い遺伝子配列もしくはフラグメントで存
在していてもよいし、また、ブラスミドもしくはその他
の適当な媒体であってもよい。ラベル化およびノ１イプ
リダイゼーション条件は、上記のように当業者が容易に
決定することができる。通常、そ、のストリンジェンシ
ーは、種内の固有配列ＤＮＡに標準的なものである。核
酸ハイプリダイゼーション法の詳細は、Ｎｕｃｌｅｉｃ
Ａｃｉｄ Ｉｌｙｂｒｉｄｉｚａｔｉｏｎ， Ｂ．Ｄ
．Ｈａｍｅｓｅｔ ａｌ． ， ｅｄｓ． ＋ ＩＲＬ
Ｐｒｅｓｓ， Ｗａｓｈｉｎｇｔｏｎ， Ｄ． Ｃ．
， １９８５に記載されている。 回転失調症の検出のためのブローブは、上記のようにＤ
ＮＡまたはＲＮＡであってよく、例えば、０１ｉｇｏｎ
ｕｃｌｅｏｔｉｄｅ Ｓｙｎｔｈｅｓｉｓ，Ａ Ｐｒａ
ｃｔｉｃａｌ Ａｐｐｒｏａｃｈ， Ｍ． Ｊ． Ｇａ
ｉｔ， ｅｄ． ， ＩＲＬ Ｐｒｅｓｓ， Ｗａｓｈ
ｉｎｇｔｏｎ， Ｄ． Ｃ． ， １９８４に記載され
ているように、化学的に、または酵素的に合戊すること
ができる。また、当業者には既知の方法を用いてプロー
ブを得、プラスミドヘの挿入によって複製してもよい［
Ｍａｎｉａｔｉｓ．Ｔ．ｅｔａｌ．，Ｍｏｌｅｃｕｌａ
ｒ Ｃｌｏｎｉｎｇ（Ａ Ｌａｂｏｒａｔｏｒｙ Ｍａ
ｎｕａｌ），Ｃｏｌｄ Ｓｐｒｉｎｇ Ｈａｒｂｏｒ
Ｌａｂｏｒａｔｏｒｙ， １９８２］。 多形性がｍＲＮＡなどの遺伝子産物中に見い出されると
きには、ブローブを用いて、特にアンチセンスＲＮＡプ
ローブを用いて、その多形性ｍＲＮＡの存在を直接検定
することもできる。 本試験は出生前に、または若年もしくは戊大の個体では
発症前に行うことができる。 本方法は、診断に用いることができるキットの調製に利
用するのが容易である。そのようなキットは、１または
それ以上の密閉された容器を入れるように区分されたキ
ャリアーからなり、第１の容器にはある多形性の暗号配
列を含有するＤＮＡ、例えばＲＦＬＰなどが入っている
。第２の容器には、第２のＲＦＬＰなどをコードしてい
る別セットの配列が入っている。他の容器には、ラベル
されたブローブの位置決定に有用な試薬、例えば酵素基
質などが入っている。さらにその他の容器には、制限酵
素、緩衝液などが入っている。 以上で本発明を一般的に説明したが、以下の具体的な実
施例を参照することにより本発明をさらに理解すること
ができる。これら実施例は説明のためだけに挙げたもの
であって、特に記さなければ本発明を限定するものでは
ない。 実施例１ 失調症の家族の神経学的評価調査を行った家
族は１６５人の構戊員からなっていた。この連鎖調査の
ために、それぞれ７３および７４人の構成員について血
液試料を分析し、神経学的試験を行った（第１図）。 失調症の臨床的な発現は変化することがあり、試験者等
は失調症を導き出し、そして他の運動障害から区別しよ
うとした［Ｆａｈｎ， Ｓ， ， Ｎｅｕｒｏｌ． Ｃ
Ｉｉｎ．２ ： ５４１−５５４（１９８４）］。この
調査の目的および性質は全ての家族構成員に説明した。 この家族の全ての協力構成員は同意をし、次いで失調症
の評価に経験のある゛神経学者によって完全な現地での
神経学的試験を行い、血液試料を採取した。３人の個体
以外はビデオテープにとり、その記録をディストニア・
クリニカル・リサーチ・センター（Ｄｙｓｔｏｎｉａ
Ｃｌｉｎｉｃａｌ Ｒｅｓｅａｒｃｈ Ｃｅｎｔｅｒ）
において４人の神経学者によって分析した。このビデオ
テープ試験は、じっとして、両手をひざにおよび広げて
座っている対象；立っている対象；および歩いている対
象を示していた。患者が話すのを聞いて話す能力を分析
した。腕は、対象に指一鼻の移動を行わせ、それぞれの
手で書かせ、そして指と手の速い反復運動を行わせるこ
とによって評価した。脚および足は、対象に類似の速い
反復運動を行わせることによって、および対象が歩いて
いるときの脚および足を観察することによって評価した
。 それぞれの対象を、明白な失調症、高可能性の失調症、
低可能性の失調症、非失調症または評価不能に分類した
。明白な失調症なる表示は、他の可能性ある基本の神経
学的症状によるものではない、ねじれ運動または姿勢な
どの失調症の明瞭な特徴が観察されたときに行った。高
可能性の失調庫なる表示は、失調症を強く示唆する観察
が得られたときに行った；その例には、対象の異常運動
の自覚、手または足の時折のねじれ、および手書きによ
る腕筋肉または足移動による脚筋肉のねじれを伴わない
緊張が含まれる。低可能性の失調症なる表示は、試験は
異常ではあるが失調症とは診断されないときに行った；
例えば、足踏みが不器用または書くときにペンの握りが
窮屈すぎるときに行った。評価不能なる表示は、対象が
、失調症の存在を不明瞭にするか、または失調症の原因
である別の症状を有しているときに行った。その例は、
神経学的症状（例えば、パーキンソン病、発作、ポリオ
、頭部損傷、脳炎など）、整形外科的症状（例えば、五
十肩、重篤な慢性関節リウマチなど）、または出生前も
しくは周産期損傷の病歴の存在である。 ビデオテーブの見直しによって確認することなく明白な
失調症という評価を与えた対象はいなかった。本人を調
べた５人の家族構戊員のだれもが明白な失調症とは評価
されなかった（しかし、ビデオテープ試験なし）。これ
ら５人の対象のうち、１人は別の試験で別個に２人の試
験官によって高可能性の失調症と評価され（最後の分析
に高可能性の失調症として残した）、１人は発作および
慢性関節リウマチの存在のゆえに評価不能とされ、３人
は失調症を有さないと評価された。同様に、Ｊｏｈｎｓ
ｏｎ等［Ｊｏｈｎｓｏｎ，Ｗ． ｅｔ ａｌ．＋＾ｒ
ｃｈ． Ｎｅｕｒｏｌ． ７ ：３０１−３１３（１
９６２）］によって失調症を有するとみなされた家族構
成員（もはや生きていない）も高可能性の失調症として
挙げた。 発症年齢は、本調査または以前の調査［Ｊｏｈｎｓｏｎ
＋Ｌ ｅｔ ａｌ．，Ａｒｃｈ．Ｎｅｕｒｏｌ． ７：
３０１−３１３（１９６２）］において、患者または
その関係者が気付いた失調症運動の最初の発生として決
定した。病歴は臨床研究者の現在のチームによる個人的
な面談によって確認した。 この家族の家系を第ｌ図に示す。ビデオテーブの見直し
で失調症の厳格な基準［Ｆａｈｎ， Ｓ． ． Ｎｅｕ
ｒｏｌ．りユｎ． ！ ： ５４１−５５４（１９８４
）］を満たしている個体だけを、本連鎖分析に対して、
罹患しているものとみなした。これには１４の個体が含
まれるが、これらは、頭蓋構造、手足および胴体に影響
する失調症の徴候を有し、４〜４３才の発症を有し、平
均年齢１４．４±３．１および中央値１０，Ｏである。 平均の発症年齢を越えている明白な失調症を有する個体
だけを考慮に入れて、見掛けの浸透度は７５％である。 ある程度の失調症の特徴を有していた３人の個体（１人
は高可能性の罹患および２人は低可能性の罹患）のそれ
ぞれは罹患子孫を設けた。 実施例２ ＴＴＤＩ失調症遺伝子座による連鎖分析 ＤＮＡプロープおよびラベル化 常法を用い、ランダムオリゴヌクレオチドプライム化に
よってＤＮＡブローブを［” Ｐ ］ｄＡ ＴＰ（３０
００Ｃｉ／ｘモル；＾ｍｅｒｈｓａｍ）でラベルした［
Ｆｅｉｎｂｅｒｇ＋Ａ．Ｐ． ｅｔ ａｌ．，Ａｎａｌ
．Ｂｉｏｃｈｅｍ． Ｈ７ ： ２６６２６７（１９
８４）］。ゲル精製した挿入フラグメントをブローブＭ
ＩＤ，ＡＳＳＧ２、ＡＳＳＧ３およびｐＥＤＺｌ９．３
に用いた。一部では、ゲ／ムＤＮＡとのハイブリダイゼ
ーションの前に、ヒト胎盤ＤＮＡをラベル化プローブに
ハイブリダイズさせて反復配列を飽和した。 ９ｑ上の次の多形性マーカープローブを用いた：アルギ
ニノスクシネート シンテターゼ遺伝子座（ＡＳＳ）の
ためのＡＳＳＧ２およびＡＳＳＧ３（ＳｐｈｌおよびＰ
ｓｔ Ｉ ） ［ｑ３ ４−ｑｔｅｒにマツピングす
る； Ｂｅａｕｄｅｔ，Ａ．Ｌ． ｅｔ ａｌ．， Ｃ
ｅｌｌ ３０ ： ２８７−２９３（１９ｇ２） ；
Ｎｏｒｔｈｒｕｐ ｅｔ ａｌ．，作或中の原稿］；そ
れぞれランダムＶＮＴＲ遺伝子座Ｄ９Ｓ１０およびＤ９
Ｓｌ７のためのｐＭＣＴ １ ３ ６（Ｐｓｔｌ）およ
びｐＥＫＺ ２ ９．３（Ｔａｑｌ）［連鎖マッピング
によりＱ ３ ４ ： Ｋｕｍｌｉｎ−４ｏ１ｆｆ，Ｅ
． ａｔ ａｌ．，Ｎｕｃｌｅｉｃ Ａｃｉｄｓ Ｒｅ
ｓ． １５ ： １０６１０（１９８７） ； Ｃａ
ｒｌｓｏｎ， Ｍ． ｅｔ ａｌ． ， Ｎｕｃｌ．
Ａｃｉｄｓ Ｒｅｓ． １５ ： １０６１３（１９
８７） ； Ｌａｔｈｒｏｐ， Ｍ． ｅｔａｌ． ，
Ｇｅｎｏｍｉｃｓ ３ ： ３６１−３６６（１９８
ｇ）］ ；連鎖マッピングによるランダム遺伝子座Ｄ９
Ｓ２６（ｑ３１３４）のためのＣ Ｒ Ｉ −Ｌ ６
５ ９ （Ｔ ａｑ Ｉ ）［Ｄｏｎｉｓ−Ｋｅｌｌｅ
ｒ，Ｈ． ｅｔ ａｌ．，Ｃｅｌｌ ５１ ： ３１９
−３３７（１９８７）］ ：ゲルソリン遺伝子座（ＧＳ
Ｎ）のためのＭＩＤ（Ｓｔｕｌ）［ｑ３ １ −３ ４
； Ｋｗｉａｔｋｏｖｓｋｉ，Ｄ． Ｊ． ｅｔ ａ
ｌ．，Ａｍ． Ｊ．Ｈｕｍ．Ｇｅｎｅｔ． ４２ ：
５６５−５７２（１９８ｇ） ； Ｋｗｉａｔｋｏｗｓ
ｋｉ ｅｔａｌ． ， Ｎｕｃｌｅｉｃ Ａｃｉｄｓ
Ｒｅｓｅａｒｃｈ． （１９８９）］。ＡＳＳおよびＧ
ＳＮを除く全ての遺伝子座のＲ Ｆ Ｌ Ｐ．ならびに
全ての遺伝子座の地図位置への照合はｔｌｕｍａｎ Ｇ
ｅｎｅ Ｍ３ｐｐｉｎｇ（Ｈ Ｇ Ｍ） ：巻９ （１
９８ｇ）および９．５ （１９８９）， Ｓ．Ｋａｒｇ
ｅｒ ＡＧ，Ｂａｓｌｅ，Ｓｗｉｔｚｅｒｌａｎｄ（Ｃ
ｙｔｏｇｅｎｅｔｉｃ ａｎｄ Ｃｅｌｌ Ｇｅｎｅｔ
ｉｃｓの一部として出版）に挙げられている。 ＲＦＬＰ分析 公知のようにして［Ｇｕｓｅｌｌａ＋Ｊ． ｅｔ ａｌ
．，Ｎａｔｌ．八Ｃａｄ． Ｓｃｉ． ＵＳＡ ６ ：
５２３９−５２４３（１９７９） ； Ｂｒｅａｋｅ
ｒｉｅｌｄ， Ｘ．０． ｅｔ ａｌ．，Ｊ．Ｎｅｕｒ
ｏｇｅｎｅｔ． ３： １５９−１７５（１９８６）］
、リンパ芽球系統［＾ｎｄｅｒｓｏｎ，Ｍ．Ａ． ｅｔ
ａｔ．， Ｉｎ Ｖｉｔｒｏ２９ ： ８５６−８５
８（１９８４）コまたは全血液からＤＮＡを抽出した。 ＤＮＡ試料（５０μｇ）を製造元の指示に従って制限酵
素で完全に消化した。常法に従って、０，８％アガロー
スゲル、７０〜９０Ｖで１６時間、電気泳動を行った。 Ｓｏｕｔｈｅｒｎ ［Ｓｏｕｔｈｅｒｎ， Ｅ． ，Ｍ
ｅｔｈ． Ｅｎｚｙｍｏｌ． ６８ ： １５２−１７
６（１９７９）］の方法によって、ＤＮＡフラグメント
をＧｅｎｅｔｒａｎ（Ｐｌａｓｃｏ）にプロットした。 サケ精子ＤＮＡを含有する６ｘＳＳＯ，， ｌ ｘＤ
ｅｎｈａｒｔ’ｓ， ０．３％ＳＤＳ中、６５°Ｃでフ
ィルターをプレハイブリダイズおよびハイブリダイズさ
せ．ＳＳＣの濃度を０．５ｘに減少させて６５℃で洗浄
し、公知のようにＸ一線フィルムに暴露した［Ｂｒｅａ
ｋｅｆｉｅｌｄ，Ｘ．Ｏ． ｅｔ ａｌ．，Ｊ，Ｎｅｕ
ｒｏｇｅｎｅｔ． ３： １５９−１７５（１９８６）
］。 ２点連鎖分析 これまで、全２２常染色体を示すタンパク質マーカーお
よびｌ５の血液グループおよび２４０を越える多形性マ
ーカープローブがこの家族において評価されていた［Ｂ
ｒｅａｋｅｆｉｅｌｄ＋Ｘ．Ｏ． ｅｔ ａｌ．＋Ｊ．
Ｎｅｕｒｏｇｅｎｅｔ． ３： １５９−１７５（１９
８６） ； Ｋｒａｍｅｒ，Ｐ．Ｌ． ｅｔａｌ． ，
Ａｄｖ． Ｎｅｕｒｏｌ． ５０ ： ５７−６６（
１９８ｇ）］。ヒトー倍体ゲノムの大きさを３３００ｃ
Ｍと仮定すると、２点連鎖分析に基づき、約６０％のヒ
トゲノムが失調症遺伝子を含有しているとして除外され
た。これらマーカーへの近接からの疾病遺伝子の排除を
、一２またはそれ以下のＩｏｄ値（ｌｏｇ＋ｏ確率比）
によって確かめた。本明細書ではこの失調症遺伝子を、
特発性回転失調症の原因であることがわかった最初の遺
伝子座であることからＩＴＤＩと呼ぶ。 失凋症−マーカーの比較のための２点連鎖分析を、発症
年齢の補正を加えたＦＯＲＴＲＡＮコンピュータープロ
グラムＬＩＰＥＤバージョン３ ［１１ｏｄｇｅ， Ｓ
．を用いて行った。希薄な遺伝子（頻度０．０１％）の
常染色体の優生遺伝を失調症について仮定した。 「／ングル」法［Ｄａｖｉｅ， Ａ． Ｍ． ， Ａｎ
ｎａｌｓ Ｉｌｕｍ． Ｇｅｎｅｔ．４２ ： ５０７
−５１２（１９７９）］を用いて最大浸透度について０
．７５の概算値を得た。全員一致で、かつ明確に失調症
を有しているとみなされた個体だけを明白な罹患と表し
た。臨床的徴候が「低可能性」または「高可能性」の失
調症である個体は、この連鎖分析では「不明」とみなし
た。その他の全ては罹患していないとみなした。 ２点分析における年齢補正のパ゛ラメーターは、この家
族からの経験的な発症年齢データに基づいている［Ｂｒ
ｅａｋｅ４ｉ・ｅｌｄ，Ｘ．Ｏ． ｅｔ ａｌ．，Ｊ．
Ｎｅｕｒｏｇｅｎｅｔ．ａ ： １５９−１７５（１９
８６）］。具体的には、年齢５才と３５才の間の浸透度
はそれぞれ０．０から０．７５まで直線で増加した。５
才前の浸透度はＯ．Ｏとし、３５才後のそれは一定の０
．７５とした。 マーカーがｌｏｄ値＞＋０．０６を与えたゲノムのいく
つかの領域（９ｑ上のＡＢＯ遺伝子座を含む）を次の研
究の重点に置いた。９ｑ上の多数のＤＮＡマーカーブロ
ーブ（第ｌ表に示したものを含む）を、ＩＴＤＩ遺伝子
座を用いる２点分析によって評価した。最も高いＬｏｄ
値は、ゲルソリン（ＧＳＮ）遺伝子座のｃＤＮＡブロー
ブ（このヒト染色体の転座を含む体細胞ハイブリッドを
用いて９ｑ３２ｑ３４上のＡＢＬに動原体マッピングす
る）で得られた［Ｋｗｉａｔｋｏｗｓｋｉ，Ｄ．Ｊ．
ｅｔ ａｌ．， Ａｎ．Ｊ．Ｈｕｍ．（ｉｅｎｅｔ．
４２ ： ５６５−５７２（１９８ｇ）］。このｒＴＤ
ｌおよびＧＳＮ遺伝子座は、Ｚ＝３．５１の０．０のθ
の最大見込み値で、連鎖の有意な証拠を示した。この概
算に対するｌｌｏｄ単位の間隔は約０−１８ＣＭである
。実際のところ、ＧＳＮとＩＴＤＩの間の純組換えは６
７の減数分裂では全く観察されなかった（ただし、その
大部分は情報が十分ではない）。 情報が十分である、この失調症遺伝子座およびこの領域
の他の９ｑマーカーによる２点連鎖分析の結果を第ｌ表
に示す。これらにはＤ９Ｓ２６、ＡＢＯ，ＡＳＳおよび
Ｄ９Ｓ１０が含まれ、その全ては正のｌｏｄ値を与えた
（Ａ Ｂ Ｌ遺伝子座のマーカーはこの家族では情報が
十分ではない）。連鎖のネガティブな証拠か、Ｄ９Ｓ１
０の１２ｃＭ遠位にあるＤ９Ｓ１７で得られた。浸透度
の概算値を変えることによる連鎖結果に及ぼす効果を調
べるために、０．５０および０．９０の浸透度概算値を
用いて第１表の６つの９ｑマーカーを再分析した。２点
分析に関しては、浸透度＝０．７５で得られた結果に比
べ、Ｉｏｄ値の顕著な差異は見られなかった。最犬の相
違はＧＳＮ遺伝子座で見られた。具体的に言うと、浸透
度＝０．９０を用いて得たＩｏｄ値は全てのθ値にわた
って約０．２０増加した。それにもかかわらず、最低の
浸透度概算値を用いても、ＧＳＮとＩＴＤＩの連鎖の有
意な証拠が得られた（θ，ａＫ−０ ． ０でＺ．，．
．＝３．ｌＯ）。 箸よｆｉｌＴＤｌ（特発性回転失調症１）および染色体
９ｑ上のマーカーの２点法による連鎖分析の結果記号０
．００１ ０．０５ Ｄ９Ｓ２６ −０．６９ ＋ｏ．ｇｇＧＳＮ
＋３．５０ ＋３．２６ＡＳＳ 十０．１７
＋０．３５ＡＢＯｂ−０、４４ ＋ｔ．ｏｇ Ｄ９ＳｌＯ ＋０．７３ ＋２、１８Ｄ９Ｓ１７
−６．６４ −３、６０再分析した。 ０．１０ ０，２０ ０．３０ ＋１．０５ ＋０．９９ ＋０．７１＋２．９９
＋２．３６ ＋１．６１＋０．４１ ＋０．
３７ ＋０．２３＋ｌ．ｌ９ ＋ｌ．Ｑ３ ＋０
．６６＋２、２０ ＋１．８５ ＋１．２６２．１
２ −０．８０ −０．２６０，４０ θ ＋ｏ．ａｔ ０．１３ ＋０．７４ ０．００ ＋０．０７ ０．１２ ＋０．２３ ０．ｌＱ ＋Ｑ ５２ ０．０８ −０．０６ ０．５０ Ｚ ｌ．０６ ３．５１ ０．４１ ｌ．１９ ２．２２ ０．００ 多点分析 多点分析は、コンピューター・バッ’ｒ−シＬＩＮＫＡ
ＧＥバージョン４．７からのＬＩＮＫＭＡＰプログラム
を用い、干渉がないものと仮定して行った［Ｌａｔｈｒ
ｏｐ，Ｇ．Ｍ． ｅｔ ａｌ．，Ａｍ．Ｊ．ｌｌｕｍ．
Ｇｅｎｅｔ． ４２：４９８−５０５（１９８ｇ）］。 この分析に取り入れた段階的な年齢補正は、２点分析で
用いた補正よりも技術的に一層正確である；しかじ、実
際には差異は無視できる。 この家族においては、罹患個体の約５０％が初期青年期
（１２〜１４才）に発症し、約７５％が中期２０に発症
していた。この分布を説明するため、浸透度が５才の０
．０から３５才の０．７５まで増加する６つの障害クラ
スを定義し、その後の浸透度は０．７５で一定のままと
した。干渉は仮定しなかった。 失調症遺伝子座ならびに９ｑ上の３つの情報性の遺伝子
座Ｄ９Ｓ２６、ＡＢＯおよびＤ９ＳＩＯを用いて多点分
析を行った。これら３つの遺伝子座はいくつかの理由に
より４点分折に選んだ：即ち、（１）これらの遺伝子座
およびＩＴＤＩによる２点分析の結果が、統計学的に有
意なものではないが、連鎖について示唆的な証拠を与え
た；（２）これらのマーカーが、ＧＳＮ遺伝子座が明ら
かに存在している領域を包含するある間隔にまたがって
いる［Ｋｗｉａｔｋｏｗｓｋｉ，Ｄ．Ｊ． ｅｔ ａｌ
．， Ａｍ．Ｊ．ｌＩｕｍ．Ｇｅｎｅｔ． ４２ ：
５６５−５７２（１９８ｇ）コ；および、（３）これら
遺伝子座の間の距離の信頼できる概算値が、Ｃｅｎｔｒ
ｅｄ’ Ｅｔｕｄｅ ｄｅ ＰｏｌｙｍｏｒｐｈｉｓＩ
ＩＩＨｕｍａｉｎ（Ｃ Ｅ Ｐ Ｈ ）参考家系から入
手可能である（ただし、ＧＳＮおよびＡＳＳ遺伝子座を
含む９ｑ連鎖地図はいまだに入手不可能である）。ＡＢ
Ｏ，Ｄ９Ｓ２６およびＤ９Ｓ１０の遺伝地図距離は、Ｃ
ＥＰＨを構威している４０の家系から得られた。Ｄ９Ｓ
１０とＡＢＯの間の距離は、このデータをＣＥＰＨデー
タベースから得ることができないので、Ｌａｔｈｒｏｐ
等［Ｌａｔｈｒｏｐ， Ｇ． Ｍ． ｅｔ ａｌ． ，
Ａｍ， Ｊ． Ｈｕｍ． Ｇｅｎｅｔ． ４２ ：
４９８−５０５（１９８ｇ）］から取った。最大の見込
みオーダーおよびθ概算値は、ＭＡＰＭＡＫＥＲプログ
ラム［バージョンｌ． Ｏ ； Ｌａｎｄｅｒ，Ｅ．Ｓ
． ｅｔ ａｌ．，Ｇｅｎｏｍｉｃｓ １ ： １７４
１８１（１９８７）］を用いて測定した。 多点分析の結果を第２図に図式化して示す。第１図に示
した予備的な連鎖地図に基づくと、ＩＴＤ１遺伝子座は
ＡＢＯに動原体性であるようである。統計学的に有意な
ｌｏｄ値は得られなかったが、疾病遺伝子座の最も可能
性の高い位置はＡＢＯから約９．５ｃＭである（Ｚ＝２
．４６）。即ち、この多点連結の結果は、ＧＳＮとＩＴ
ＤＩ遺伝子座の間の密接な連鎖を示唆する２点の結果と
一致している。 ＧＳＮ遺伝子座は９ｑ上のＡＢＬ遺伝子座の近くにある
ことか知られているが、この領域中のその正確な地図位
置はいまだＣＥＰＨ参考家系を用いて確立されていなか
った。本発明で調査した家族において入手可能なデータ
に基づき、Ｄ９３２６、ＡＢＯおよびＭＣＴｌ３６と比
較の上で、ＧＳＨのおよその地図位置を得た。この試料
に基づくと、ＧＳＮの最も可能性の高い位置はＤ９３２
６から約７ｃＭの遠位である（Ｄ９Ｓ２６−ＡＢＯで区
画される領域内のどこかに存在するＧＳＨの確率は１０
”＋１より大きい）。次いで、このＧＳＮの仮の位置を
用いて、Ｄ９Ｓ２６、ＧＳＮ，ＡＢＯおよびＭＣＴｌ３
６による［ＴＤ１の５点連鎖分析を行った。ＩＴＤＩの
最も可能性の高い位置はＧＳＮ遺伝子座それ自体である
（θ一０．０でＺ＝３．５７）； Ｌかし、有意なｌｏ
ｄ値（＞３．０）がＧＳＮの近位３．５ｃＭおよびＧＳ
Ｎの遠位１５ｃＭの間隔内に得られた。即ち、ＧＳＮ遺
伝子座がこの１８ｃＭ領域内のどこにあろうとも、この
多点の結果は、この領域中のＤ９Ｓ２６とＡＢＯの間の
ＩＴＤＩ遺伝子の位置を強く支持する。 この連鎖の研究は、非ユダヤ系家族の特発性回転失調症
（ＩＴＤＩ）への感受性を引き起こす遺伝子を、ゲルソ
リンをコードしている遺伝子の１８ｃＭ内にその位置を
定める（θ−０．０、Ｚ＝３．５Ｌ１１ｏｄ単位間隔０
−１８ｃＭ）。このｌｏｄ値は、これら２つの遺伝子座
の連鎖が１０３：ｌより大きい確率であることに対応し
ている。多点分析は、ＧＳＮとＩＴＤ１の両方がＤ９Ｓ
２６とＡＢＯの間にあることを示唆する。この領域にお
ける別の９ｑブロープの生成および評価は、この家族に
おける失調症遺伝子座付近の密接に境界を接しているマ
ーカーの明確化を可能にするであろう。 ９ｑ領域の２つの遺伝子を、失調症の特徴およびこの領
域にマッピングする遺伝子の最近の知見に基づいて、Ｉ
ＴＤ１遺伝子の候補遺伝子座とみなすことができる。発
生的な組織化に影響を及ぼすタンパク質が、非特異的で
あっても、失調症の基礎を為す神経回路に微妙な変化を
もたらすこともあると考えられる。このカテゴリーにお
いて、ゲルソリン（ＧＥＬ）は、脳を含む噛乳動物組織
で広範に発現される、Ｃａ”およびポリホスホイノシチ
ドー調節され、多機能性の、アクチンー結合性のタンパ
ク質である［Ｋｗｉａｔｋｏｗｓｋｉ，Ｄ．Ｊ． ｅｔ
ａｔ ＪＢｉｏｌ． ＣｈｅＩＩ１． ２６３ ：
８２３９−８２４３（１９８８）］。細胞移動中のア
クチンフィラメント構築を調節するものと考えられてお
り［Ｍａｔｓｕｄａｉｒａ，Ｐ． ｅｔ ａｌ．，Ｃｅ
ｌｌ ５４ ： １３９−１４０（１９８ｇ） ： Ｙ
ｉｎ， Ｈ． Ｌ． ， ＢｉｏＥｓｓａｙｓ ７ ：
１７６−１７９（１９８８）］、ニューロン成長円錐
体の運動活性に関与しているようである［Ｆｏｒｓｃｈ
ｅｒ，Ｐ． ｅｔ ａｌ．，Ｊ．Ｃｅｌｌ影旦Ｌ輿：
１５０５−１５１６（１９８ｇ）］。別の候補は、脳幹
神経節へのカテコールアミン作動性およびコリン作動性
入力の間のバランスを維持するのに関与しているタンパ
ク質である；ドバミンをノルエピ不フリンに変換する酵
素であるドパミン−β−ヒドロ−ｔ− ’ｉ５−セ（Ｄ
Ｂ Ｈ）の遺伝子も９ｑ３４Ｍ域に７ツピングする［
Ｌａｍｏｕｒｏｕｘ，Ａ． ｅｔ ａｌ．，ＥＭＢＯ
Ｊ． ６４ ３９３１−３９３７（１９８７） ：
Ｃｒａｉｇ，Ｓ． Ｐ． ｅｔ ａｌ．，Ｃｅｌｌ Ｇ
ｅｎｅｔ． ４８ ： ４８−５０（１９８ｇ） ；
Ｗｉｌｓｏｎ， Ａ． Ｆ． ｅｔ ａｌ． ， Ａｍ
Ｊ．Ｈｕｍ．Ｇｅｎｅｔ． ４２： １６０−１６６
（１９ｇｇ）］。 いくつかの系統の証拠がＤＢＨの欠損が失調症に関与し
ていることに反証する。血清ＤＢＨを欠いている個体は
重篤な起立性低血圧に苦しんでいるが、失調症を示さな
い［Ｖｅｌｄ，Ａ．Ｊ．Ｍ． ｅｔ ａｌ、，Ｌａｎｃ
ｅｔ １８３−１８７（１９８７） ； Ｒｏｂｅｒｔ
ｓｏｎ， Ｄ． ｅｔ ａｌ． ， Ｎ． Ｅｎｇｌ．
Ｊ． Ｍｅｄ． ３１４ ： １４９４−１４９７（
１９８６）コ。本家族構成員を含む失調症患者の血清に
、正常なまたは高レベルのＤＢＨが報告されていた［Ｚ
ｉｅｇｌｅｒ，Ｍ．Ｇ． ｅＬａｌ、， Ａｄｖ． Ｎ
ｅｕｒｏｌ． １４ ： ３０７−３１５（１９７６）
； Ｗｏｏｔｅｎ， Ｇ．Ｆ． ｅｔ ａｌ．，Ｎ．
Ｅｎｇｌ．Ｊ．Ｍｅｄ． ２８８： ２８４−２８７（
１９７３）］。 さらに、この疾病における遺伝形質の優生モードは、酵
素活性の欠如によって引き起こされるものに反証を与え
るであろう。 ＤＢＨの欠損というよりもむしろ、ＤＢＨ遺伝子座にお
ける、またはその近くの突然変異によるＤＢＨの異常に
高い発現が関与している可能性の方が高い。特発性の非
ユダヤ失調症の３例において、ノルエピネフリン量の増
加が上部および下部脳斡のいくつかの領域で観察された
［｝Ｉｏｒｎｙｋｉｅｗｉｚｃ，Ｏ． ｅｔ ａｔ．
， Ｉｎ Ａｄｖａｎｃｅｓ ｉｎ Ｎｅｕｒｏｌｏｇ
ｙ（Ｄｙｓｔｏｎｉａ ２）５Ｑ ： Ｓ． Ｆａｈｎ
， Ｃ． Ｄ． Ｍａｒｓｄｅｎ， ａｎｄ Ｄ． Ｂ
． Ｃａｌｎｅ， ｅｄｓ． （Ｎｅｗ Ｙｏｒｋ ：
Ｒａｖｅｎ Ｐｒｅｓｓ）， Ｐｆ）． １５７−１
６５（１９８ｇ） ；Ｊａｎｋｏｖｉｃ，Ｊ． ｅｔ
ａｌ．，Ｎ．Ｅｎｇ．Ｊ．Ｍｅｄ． ３１６：
２７８−２７９（１９８７）］。さらに、遺伝的に失調
症であるラットおよびマウスは青斑に高いノルエピネフ
リンを示し、実験動物の神経生理学的研究によると、失
調症におけるこの脳領域でのノルエピネフリンニューロ
ンの活動過剰が関係している［Ｌｏｒｄｅｎ， Ｊ．
Ｆ．ｅｔ ａｌ ， Ａｄｖ． Ｎｅｕｒｏｌ． ５０
： ２７７−２９７（１９８ｇ） ； Ｄｕｃｈｅｎ
，Ｌ． Ｗ． ， Ａｄｖ． Ｎｅｕｒｏｌ． １４
： ３５３−３６５（１９７６） ； Ａｄａｍｓ，
Ｌ．Ｍ． ｅｔ ａｌ． ， Ａｄｖ． Ｎｅｕｒｏｌ
． ５０ ＋ ３１３−３３３（１９８ｇ）］。従っ
て、失調症の治療は、患者に有効量の抗ノルエピネフリ
ン薬または他のアドレナリン作動の遮断剤、例えばβ一
遮断薬、モノアミンオキシダーセ阻害薬、アセチルコリ
ンエステラーゼ阻害薬、および神経弛緩剤、特にフェノ
チアジン、ブチロフェノン、フェノキシベンザミン、フ
ェントラミン、トラゾリン、プラゾシン、クロニジン、
α−メチルトハ、グアネタジン、およびレセルピンを投
与スることによって行うことができる。 以上に本発明を詳しく記載したが、本発明の思想または
範囲あるいはそのあらゆる態様から逸脱することなく、
広範かつ等価な条件、パラメーターなどの範囲内で本発
明を実施することができることは当業者の認めるところ
であろう。
第１図は、失調症の家系の系図であり、第２図は、ｑ３
１−３４領域における連鎖距離および物理的な割当を示
すヒト９染色体地図の模式図であり、 第３図は、ＩＴＤｌおよび９ｑマーカーの多点分析の結
果を示すグラフである。
１−３４領域における連鎖距離および物理的な割当を示
すヒト９染色体地図の模式図であり、 第３図は、ＩＴＤｌおよび９ｑマーカーの多点分析の結
果を示すグラフである。
Claims (1)
- 【特許請求の範囲】 １、対象中の回転失調症の遺伝子の存在を検出する方法
であって、該対象の核酸を回転失調症に関係した多形性
について分析することを特徴とする方法。 ２、核酸がＤＮＡである請求項１記載の方法。 ３、核酸がＲＮＡである請求項１記載の方法。 ４、対象がヒトである請求項１記載の方法。 ５、ＤＮＡが染色体９またはそのフラグメントを含有す
るものである請求項２記載の方法。 ６、フラグメントが染色体９ｑまたはそのフラグメント
を含有するものである請求項５記載の方法。 ７、９ｑのフラグメントが９ｑ３２−ｑ３４を含有する
ものである請求項６記載の方法。 ８、９ｑのフラグメントがＤ９Ｓ１７およびＤ９Ｓ２６
マーカーの間のＤＮＡを含有するものである請求項６記
載の方法。 ９、多形性が制限フラグメント長の多形性（ＲＦＬＰ）
である請求項２記載の方法。 １０、（ａ）対象からのＤＮＡを制限エンドヌクレアー
ゼ酵素で消化し； （ｂ）該消化によって得られるフラグメントを分離し； （ｃ）このＲＦＬＰを、該ＲＦＬＰにハイブリダイズし
、そしてそれを同定することが可能な配列情報を含有す
るハイブリダイゼーションプローブで検出し、それによ
って制限パターンを得；そして （ｄ）消化物中のＲＦＬＰの存在または非存在を、回転
失調症遺伝子のそれぞれの存在または非存在と関係づけ
る； ことによって分析を行う請求項９記載の方法。 １１、プローブが検出可能なようにラベルされている請
求項１０記載の方法。 １２、２種類の異なる制限エンドヌクレアーゼ酵素を用
いて少なくとも２つの別の消化を行う請求項１０記載の
方法。 １３、数種のプローブを用いて数種のＲＦＬＰを検出す
る請求項１０記載の方法。 １４、対象の制限パターンを、回転失調症とＲＦＬＰの
間の分離を示す家族構成員の、対応する制限パターンと
比較する請求項１０記載の方法。 １５、対象の制限パターンを、回転失調症に罹患してい
ない該対象の両親、回転失調症に罹患している該対象の
両親、および回転失調症に罹患している該対象の兄第・
姉妹の、対応する制限パターンと比較する請求項１４記
載の方法。 １６、プローブが放射ラベルしたＭＩＤである請求項１
０記載の方法。 １７、分離がアガロースゲル電気泳動である請求項１０
記載の方法。 １８、（ａ）対象からの核酸を増幅し； （ｂ）この増幅した核酸を配列決定し； （ｃ）回転失調症遺伝子の存在または非存在を、増幅核
酸の配列と関係づける； ことによって分析を行う請求項１記載の方法。 １９、核酸がＤＮＡである請求項１８記載の方法。 ２０、増幅されるＤＮＡの領域がＤ９Ｓ１７とＤ９Ｓ２
６マーカーの間にある請求項１９記載の方法。 ２１、ＤＮＡがポリメラーゼ連鎖反応によって増幅され
る請求項１９記載の方法。 ２２、核酸がＲＮＡである請求項１８記載の方法。 ２３、ＲＮＡがＱβ−レプリカーゼによって増幅される
請求項２２記載の方法。 ２４、密閉された１またはそれ以上の容器を入れるよう
に区分されたキャリアーを含有し、さらに、ｉ）回転失
調症に関係した多形性の暗号配列を含有するＤＮＡを入
れた第１の容器； ｉｉ）対象の多形性の存在を測定するための検出システ
ム； を含有する、対象の回転失調症を検出するためのキット
。 ２５、失調症の患者に、有効量の抗−ノルエピネフリン
薬またはアドレナリン作動性遮断薬を投与することから
なる失調症の治療方法。 ２６、患者の失調症が遺伝子型によって診断される請求
項２５記載の方法。 ２７、薬物または薬剤が、β−遮断薬、モノアミンオキ
シダーゼ阻害薬、アセチルコリンエステラーゼ阻害薬、
および神経弛緩剤からなる群から選ばれる請求項２５記
載の方法。 ２８、薬物または薬剤が、フェノチアジン、ブチロフェ
ノン、フェノキシベンザミン、フェントラミン、トラゾ
リン、プラゾシン、クロニジン、α−メチルドパ、グア
ネタジン、およびレセルピンからなる群から選ばれる請
求項２７記載の方法。
Applications Claiming Priority (2)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| US35343289A | 1989-05-18 | 1989-05-18 | |
| US353432 | 1989-05-18 |
Publications (1)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| JPH03103200A true JPH03103200A (ja) | 1991-04-30 |
Family
ID=23389079
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| JP2130121A Pending JPH03103200A (ja) | 1989-05-18 | 1990-05-18 | 回転失調症の遺伝的診断 |
Country Status (4)
| Country | Link |
|---|---|
| US (1) | US5407821A (ja) |
| EP (1) | EP0398709A3 (ja) |
| JP (1) | JPH03103200A (ja) |
| CA (1) | CA2016227A1 (ja) |
Cited By (1)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| US7325472B2 (en) | 2003-01-15 | 2008-02-05 | Tokyo Automatic Machinery Works, Ltd. | Film cutting device |
Families Citing this family (11)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
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| US6921814B2 (en) | 1997-06-19 | 2005-07-26 | The General Hospital Corporation | Torsin, torsin-related genes and methods of detecting neuronal disease |
| EP0989995A2 (en) | 1997-06-19 | 2000-04-05 | The General Hospital Corporation | Torsin, torsin genes, and methods of use |
| US6932024B2 (en) * | 2003-01-09 | 2005-08-23 | Cargill, Incorporated | Compact pedigrees showing heritable traits for many individuals |
| US9082156B2 (en) * | 2005-08-17 | 2015-07-14 | Jeffrey A. Matos | Emergency management system |
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| US9408891B2 (en) * | 2003-11-12 | 2016-08-09 | The Trustees Of The University Of Pennsylvania | Methods of using gelsolin to treat or prevent bacterial sepsis |
| CN1980694B (zh) * | 2004-05-12 | 2012-09-26 | 布赖汉姆妇女医院有限公司 | 凝溶胶蛋白治疗感染的用途 |
| JP2009530613A (ja) * | 2006-03-15 | 2009-08-27 | ザ・ブリガム・アンド・ウイメンズ・ホスピタル・インコーポレイテッド | 多発性硬化症を治療するため、および神経疾患を診断するための、ゲルゾリンの使用 |
| US8198094B2 (en) | 2006-03-15 | 2012-06-12 | The Brigham And Women's Hospital, Inc. | Methods of using gelsolin levels to characterize a subject's risk of developing rheumatoid arthritis |
| EP2708603B1 (en) | 2008-01-25 | 2017-04-19 | The General Hospital Corporation | Diagnostic and therapeutic uses of gelsolin in renal failure |
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|---|---|---|---|---|
| US4666828A (en) * | 1984-08-15 | 1987-05-19 | The General Hospital Corporation | Test for Huntington's disease |
| GB8709652D0 (en) * | 1987-04-23 | 1987-05-28 | Williamson R | Diagnosis of cystic fibrosis |
-
1990
- 1990-05-07 CA CA002016227A patent/CA2016227A1/en not_active Abandoned
- 1990-05-17 EP EP19900305327 patent/EP0398709A3/en not_active Ceased
- 1990-05-18 JP JP2130121A patent/JPH03103200A/ja active Pending
-
1991
- 1991-07-03 US US07/725,083 patent/US5407821A/en not_active Expired - Fee Related
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| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| US7325472B2 (en) | 2003-01-15 | 2008-02-05 | Tokyo Automatic Machinery Works, Ltd. | Film cutting device |
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
| US5407821A (en) | 1995-04-18 |
| EP0398709A2 (en) | 1990-11-22 |
| EP0398709A3 (en) | 1992-01-08 |
| CA2016227A1 (en) | 1990-11-18 |
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