JPH0315326A - Ｐｉｎｅｌｌｉａ属植物の幼苗の生産方法 - Google Patents

Abstract

(57)【要約】本公報は電子出願前の出願データであるた
め要約のデータは記録されません。

Description

【発明の詳細な説明】 （産業上の利用分野） 本発明は，漢方薬として利用されるカラスビシャク．オ
オハンゲなどのＰｉｎｅｌｌｉａ属植物の幼苗を大量に
生産する方法に関する。

（従来の技術） カラスビシャク（Ｐｉｎｅｌｌｉａ　　ｔｅｒｎａｔａ
）およびオオハンゲ（Ｐｉｎｅｌｌｉａ　　紅丘旦旦田
）はＰｉｎｅｌｌｉａ属に属する植物であり，日本，中
国本土，朝鮮半島などに自生する多年草である。これら
の植物は．地下茎として直径１〜３ｃｍの球茎をつける
。この球茎の外皮を除去して乾燥したものはハンゲ（半
夏）と呼ばれ，古くから，漢方薬に利用されている。

この半夏は．漢方では，悪心嘔吐，つわり．胃部停水．
心痛，咳ｅ．ａ中雷鳴．咽痛などに対する処方の上薬と
して利用されている。半夏の有効威分は明らかにされて
はいないが，ホモゲンチジン酸．β−シトステロール，
トリテルペン類，各種配糖体．グルコン酸誘導体などが
知られている。

半夏を用いた漢方薬としては，半夏厚朴湯，半夏瀉心湯
，半夏白求麻湯，萩苓飲加半夏．小半夏加萩苓湯，半夏
散料．半夏揄湯．大柴胡湯，小柴胡湯，紫陥湯，柴胡加
竜骨牡賜湯，柴胡珪技湯，柴苓湯などがある。

Ｐｉｎｅｌｌｉａ属の植物体のうち生薬として使用され
るのは，球茎などの地下に存在する栄養貯留部分である
。例えば，半夏の母植物であるカラスビシャクの栽培は
比較的的容易であるが，球茎は．１草あたり，年間に通
常３〜６個の割合でしか得られない。植物をはり起こし
て球茎部を採取すると該植物体は枯死するため．毎年球
茎を採取するには，球茎を保存して，これを播種しなけ
ればならない。そのため，球茎を多量に得ることができ
ない。さらに，この植物体が栽培され得る季節および地
域には制限があり，かつ該植物体の球茎部に含有される
有効或分の比率は栽培される地域や気候により異なり，
品質が一定しないという欠点がある。所定の品質の生薬
を多量に得るために，Ｐｉｎｅｌｌｉａ属植物の幼苗を
短期間に効果的に生産する方法が望まれている。

（発明が解決しようとする課Ｂ） 本発明は上記従来の問題点を解決するものであり．その
目的とするところは．気候，土壌，季節などに関係なく
，短時間でＰｉｎｅｌｌｉａ属植物の幼苗を効果的に得
る方法を提供することにある。

（課題を解決するための手段） 本発明のＰｉｎｅｌｌｉａ属植物の幼苗の生産方法は．
Ｐｉｎｅｌｌｉａ属植物のＵ織を，植物ホルモンを含有
する不定胚誘導用培地を用いて培養し，不定胚を誘導す
る工程；該不定胚を．不定胚増殖用培地に移し，該不定
胚から生じる二次不定胚を得る工程；および該二次不定
胚を，再分化用培地に移し，光を照射して分化させ幼苗
とする工程：を包含しそのことにより上記目的が達威さ
れる。

本発明でいうＰｉｎｅｌｌｉａ属に属する植物とは．単
子葉類　サトイモ目　サトイモ科に属する植物をさして
いい，具体的には，例えばカラスビシャク（Ｐｉｎｅｌ
ｌｉａ　　ｔｅｒｎａｔａ），オオハンゲ（Ｐｉｎｅｌ
ｌｉａ扛鍾紅旦圏）などがある。

本発明に用いられる不定胚誘導用培地としては．植物組
織培養に通常，用いられるムラシゲースクーグの培地，
ホワイトの培地．リンスマイヤーースクーグの培地，ガ
ウスレソトの培地，ヘラーの培地．およびこれらの改変
培地が利用されうる。

培地としては．寒天培地などの固体培地および液体培地
のいずれもが使用され得る。不定胚誘導用培地には，通
常．不定胚の誘導を促進させるため？植物ホルモン（オ
ーキシン類．サイトカイニン類．ジベリン類など）が含
有される。オーキシン類としては．例えば，２．４−ジ
クロロフェノキシ酢酸（２．４−Ｄ），インドール酢酸
（ＩＡＡ　）　，ナフタレン酢酸（ＮＡＡ　）などがあ
る。サイトカイニン類には．例えば．カイネチン，ペン
ジルアデニンなどがある。ジベレリン類には，例えば，
遊離型ジベレリン，結合型ジベレリンなどが用いられ，
ｉＨＩ型ジベレリンとしては．例えば．ジベレリンＧＡ
，〜ＧＡ６■などが，結合型ジベレリンとしては，例え
ば，ジヘレリングリコシルエーテル（例えばジヘレリン
Ｉ’ｌ３，　　Ａ６＋　ＡＺ＆　＋　八ｚｔ　．　Ａｔ
＊　ｒ　Ａｓｓ　グリコシドなど），ジベレリングリコ
シルエステル（たとえばジベレリンＡｎ．　Ａｓ，　Ａ
Ｉ，　ＡＩ７．Ａ３１１．　Ａａａ．グリコシルエステ
ルなど）などがある。これらの植物ホルモンは，通常，
その各々の量が０．０１〜１０ρρｍとなるような割合
で培地中に含有される。

本発明に用いられる不定胚増殖用培地としては．植物組
織培養に通常用いられている培地（寒天培地などの固体
培地または液体培地）が利用されうる。上記培地は，液
体培地を用いる方が固体培地を用いた場合よりも不定胚
の増殖が効果的に行なわれ得る。不定胚増殖用培地に含
有される植物ホルモンは上記不定胚誘導用培地よりもオ
ーキシン活性を低くすることが好ましく，植物ホルモン
が全く含有されていなくてもよい。植物ホルモンは通常
，４ｐｐｍ以下の割合で培地中に含有される。

植物ホルモンの濃度が高すぎると．不定胚の増殖速度が
低下する。

再分化用培地としては，植物組織培養に通常，用いられ
ている培地が利用されうる。植物ホルモンは．上記不定
胚誘導用培地および不定胚増殖用培地よりもオーキシン
活性を低く設定するのが好ましい。植物ホルモンが全く
含有されていなくてもよい。上記培地中の無機塩類の含
有濃度は，不定胚から幼苗に再分化させるためには低濃
度であることが好ましい。例えば，上記不定胚誘導用培
地や不定胚増殖用培地に用いる培地の無機塩濃度よりも
１／３〜ｌ／１０の値に減した培地が好適に用いられる
。

本発明方法により，　Ｐｉｎｅｌｌｉａ属植物の幼苗を
得るには，まず，　Ｐｉｎｅｌｌｉａ属植物の根，茎，
葉などの植物組織の一部を切り取り．不定胚誘導用培地
に移植する。使用される組織片は．根，茎．葉などいず
れの部分であってもよいが，効率よく不定胚を誘導する
ためには．球茎部が好適である。

培養条件は植物体により若干異なるが，通常，１５〜３
５゜Ｃで，かつ５００〜ｔｏ，ｏｏｏルクスの光の照明
下で．１〜３ケ月培養を行う。このことにより球形また
は楕円形の不定胚を得ることができる。

次に，下記不定胚を，不定胚増殖用培地に移植して培養
を行う。培養条件は植物によって若干異なるが，通常１
５〜３５゜Ｃで，かつ５００〜１０，０００ルクスの光
の照明下で２０〜６０日間培養を行うことが好ましい。

その結果．肥大生長した不定胚が得られる。この不定胚
は，球形，楕円形の不定胚．あるいはさらにこれらから
変化した心臓型，魚雷型の不定胚であり．例えば．球形
の不定胚が多数集合した集合体，または不定胚を含む細
胞塊であり得る。これらの不定胚は適宜分割され，必要
に応じて新たな不定胚増殖用培地に移され，二次不定胚
（植物体から誘導された不定胚からさらに二次的に生し
た不定胚をさしていう）が得られる。このように継代培
養を行なうことにより，生長が速く，有効威分の含有量
の高い植物の幼苗を形威し得る不定胚が選抜される。

このようにして，適宜増殖・選択した不定胚を再分化用
培地に移植し培養を行なう。移植する不定胚の種類は特
に限定されないが，魚雷型胚もしくはＩ′ｆｃＰ胚の段
階の不定胚が好ましい。上記不定胚は１個のみを移植す
ると，再分化に長時間を要する場合もあるので．通常，
不定胚の集合体もしくは不定胚を有する細胞塊がそのま
ま移植される。

再分化の培養条件は．植物体によって若干異なるが．通
常１５〜３５゜Ｃで９かツ５００〜ｌＯ，ｏＯＯルクス
ノ光の照明下で行なわれる。光量が過少であると，分化
が起こりにくい。

このような条件下で培養を行うと，不定胚は，球状胚，
心臓胚，魚雷胚から成熟胚を経て生長し，出芽が起こる
。さらに．培養を続けると該組織から母植物と同様の葉
茎を伸ばし．次いで，培地との接触面から発根が起こる
。通常１〜３ケ月にわたり培養を行なうと．葉茎および
根を有する幼苗が得られる。

（作用） 本発明方法では，不定胚を利用してＰｉｎｅｌ　Ｉｉａ
属植物の幼苗が効果的に生産される。この植物の生長は
比較的遅いにもかかわらず，この不定胚の形態において
は比較的速やかに増殖が行なわれうる。

増殖した不定胚は，比較的再分化しやすく，再分化によ
り容易に幼苗が得られる。このように短期間で大量のＰ
ｉｎｅｌｌｉａ属植物の幼苗が得られる。不定胚増殖時
に増殖の速い不定胚を選択すれば．生長の速い植物の幼
苗が得られる。

（実施例） 本発明を以下の実施例について説明する。

尖施明上 （Ａ）不定胚の誘導 カラスビシャク（Ｐｉｎｅｌｌｉａ　　ｔｅｒｎａｔａ
）の球茎を７０％エタノールで洗浄した後，次亜塩素酸
ナトリウム水溶液（ＣＩ濃度２％）にて表面殺菌した。

この球茎より花芽を摘出した後．５〜１５ｍｍ位に切断
し，不定胚誘導用培地で培養を行なった。不定胚誘導用
培地としては，植物ホルモンとして２．４−Ｄを１．０
　ｐｐｍの割合で含有し，かつ無機塩濃度を％としたム
ラシゲースクーグの液体培地を用いた。２５゜Ｃで１０
００ルクスの蛍光灯照明下にて．４９日間低速回転培養
（３回／分）を行なったところ不定胚が形威された。

（Ｂ）不定胚の増殖 （八）項で形成された不定胚を，不定胚増殖用培地に移
植した。不定胚増殖用培地としては植物ホルモンとして
ＮＡＡを１．０　ｐｐｍ，そしてＢＡを１．０　ｐｐｍ
の割合で含有するムラシゲースクーグの液体培地を用い
た。２５゜Ｃで３０００ルクスの蛍光灯照明下にて２８
口間培養して．不定胚を増殖させた。増殖肥大した不定
胚の細胞塊を分割切断して得た小断片を．同条件で２８
日間低速回転培養した。上記分割した切片より二次不定
胚が発生した。

（Ｃ）不定胚の再分化 （Ｂ）項で得られた不定胚（二次不定胚を含む細胞塊）
を再分化用培地に移植した。培地としては，植物ホルモ
ンを添加せず．無機塩類濃度を１／５としたムラシゲー
スクーグの寒天固形培地を用いた。

２５℃で，　１６時間／日．　２０００ルクスの照明下
にて培養した。移植後約５０日間で不定胚は戒熟胚の過
程を経て出芽し，子葉に分化した。子葉の分化後，発根
が見られた。

上記のようにして得られた幼苗は実生と同様の完全な植
物体であり，これを土壌に移植して栽培を行なった。

夫旌明呈 実施例１（Ｂ）項で得られた二次不定胚を含む細胞塊を
分割切断して得た小断片を．実施例１（Ｂ）項と同条件
で２８日間低速回転培養した。上記分割した切片より同
様に，さらに不定胚が発生した。

このようにして約１カ月毎に継代培養を続け，２４ヶ月
間培養を行なった。次に，増殖した不定胚を実施例１と
同様の再分化用培地に移植したところ，実施例１と同じ
幼苗が得られた． 実ＪＩＪＬよ （Ａ）不定胚の誘導 カラスビシャクの代わりにオオハンゲ（Ｐｉｎｅｌｌｉ
ａ江拝紅旦只）の球茎を用い，液体培地代わりに寒天培
地を用いたこと以外は．実施例１　（Ａ）項と同様であ
る。球茎切片にはカルスおよび不定胚が形威された。

（Ｂ）不定胚の増殖 植物ホルモンを添加せず，無機塩類濃度を％としたムラ
シゲースクーグの寒天培地を不定胚増殖用培地としたこ
と以外は．実施例１（Ｂ）項と同様である。

（Ｃ）不定胚の再分化 無機塩類濃度を１／１０としたムラシゲースクーグの寒
天培地を用いたこと以外は，実施例１　（Ｃ）項と同様
に操作し，不定Ｏを再分化させた。実施例１とほぼ同様
の経過を経て，多数のオオハンゲの幼苗が得られた。

尖搭拠土 実施例２（Ｂ）項で得られた二次不定胚を含む細胞塊を
分割切断して得た小断片を，実施例２（Ｂ）項と同条件
で２８日間低速回転培養した。上記分割した切片より同
様に，さらに不定胚が発生した。

このようにして約１カ月毎に継代培養を続け，２４ヶ月
間培養を行なった。次に，増殖した不定胚を実施例２と
同様の再分化用培地に移植したところ，実施例２と同じ
幼苗が得られた． （発明の効果） 本発明によれば，このように，　Ｐｉｎｅｌｌｉａ属植
物の幼苗が気候．土壌，季節などに左右されることなく
，短期間のうちに効果的に得られる。不定胚を増殖する
ときに，不定胚を適宜選択することにより，有効成分を
多量に含む植物体を形威し得る苗が得られる。本法より
，カラスビシャク，オオハンゲなどの漢方薬として有用
な植物が安価に生産され得る。

以上

Claims (1)

1. 【特許請求の範囲】 １、￥Ｐｉｎｅｌｌｉａ￥属植物の組織を、植物ホルモ
   ンを含有する不定胚誘導用培地を用いて培養し、不定胚
   を誘導する工程； 該不定胚を、不定胚増殖用培地に移し、該不定胚から生
   じる二次不定胚を得る工程；および該二次不定胚を、再
   分化用培地に移し、光を照射して分化させ幼苗とする工
   程； を包含する￥Ｐｉｎｅｌｌｉａ￥属植物の幼苗の生産方
   法。