JPH03185335A

JPH03185335A - 検体測定装置及び検体測定方法

Info

Publication number: JPH03185335A
Application number: JP1325001A
Authority: JP
Inventors: Yuji Ito; 勇二伊藤; Yoshiyuki Azumaya; 良行東家; Atsushi Saito; 斉藤　厚志; Tatsuya Kawasaki; 達也川崎
Original assignee: Canon Inc
Current assignee: Canon Inc
Priority date: 1989-12-15
Filing date: 1989-12-15
Publication date: 1991-08-13
Anticipated expiration: 2013-05-13
Also published as: JP2749912B2

Abstract

(57)【要約】本公報は電子出願前の出願データであるた
め要約のデータは記録されません。

Description

【発明の詳細な説明】［産業上の利用分野］本発明はサンプル中の個々の検体に光を照射し光学的測
定を行なうことで検体の解析や抗原抗体反応の測定等を
行なう検体検査装置に関する。

【従来の技術］従来の検体検査装置の一例としてフローサイトメータの
構成を第６図に示す。

適切な反応時間及び濃度に調整され、更に必要に応じて
蛍光試薬等で染色処理されたサンプル液は、第５図のサ
ンプル液容器１１５に入れられる。また、蒸留水や生理
食塩水等のシース液は、シース液容器１１４に入れられ
る。サンプル液容器１１５及びシース液容器１１４は各
々不図示の加圧機構により加圧される。そして、シース
フロー原理により、フローセル１０４内でサンプル液が
シース液に包まれて細い流れに収斂され、フローセル１
０４内の流通部のほぼ中央部を通過する。この時、サン
プル液に含まれる検体である個々の被検粒子は分離され
て１粒或いは１塊ずつ順次流れる。この被検粒子の流れ
に対して、レーザ光源１０１から出射されたレーザ光が
、母線方向が各々流通部方向、流通部方向と直交したシ
リンドリカルレンズ１０２，１０３の組によって任意の
形状に収斂され照射される。被検粒子に照射される光ビ
ームの形状は、一般には流れに対して直交する方向に長
径を有する楕円形状であることが好ましい。これは個々
の被検粒子の流れの位置が流体中で若干変動しても、被
検粒子に均一の強度で光ビームが照射されるようにする
ためである。

被検粒子に光ビームが照射されると散乱光が生しる。前
記散乱光の内、光路前方方向に発する前方散乱光は集光
レンズ１０５、光検出器１０６によって測光される。な
お照射された光ビームが直接、光検出器１０６に入射す
るのを防ぐため、光路中東光レンズ１０５の手前には光
吸収性の微小なストッパ１００が設けられ、照射光源か
らの直接光、及び被検粒子を光透過した透過光を除去す
るようになっている。これにより被検粒子からの散乱光
のみを測光することができる。

また前記散乱光の内、レーザ光軸及び被検粒子の流れに
それぞれ直交する側方方向に発する光は集光レンズ１０
７で集光される。集光された光はダイクロイックミラー
１０８で反射され、散乱光の波長即ちレーザ光の波長（
Ａｒ”レーザであれば４８８ｎｍ）を選択的に透過させ
るバンドパスフィルタ１２１を経て光検出器１１１にて
側方散乱光が測光される。また被検粒子が蛍光染色され
ている場合には、散乱光と共に発生する複数色の蛍光を
測光するため、集光レンズ１０７によって集光され、ダ
イクロイックミラー１０８を通過した蛍光の内、ダイク
ロイックミラー１０９、緑色蛍光波長用（５３０ｎｍ付
近）のバンドパスフィルタ１２２、光検出器１１２の組
によって緑色蛍光が検出され、また全反射主う−１１０
、赤色蛍光波長用（５７Ｏｎｍ付近）のバンドパスフィ
ルタ１２３、光検出器１１３の組によって赤色蛍光が検
出される。光検出器１０６，１１１．１１２％　１１３
の信号は各々演算回路１１６に入力され、該演算回路１
１６において、粒子の種類や性質等の解析、あるいは抗
原抗体反応の測定等の演算が行なわれる。

［発明が解決しようとする課題］しかしながら、従来は複数色の蛍光を測光するのに各蛍
光毎に専用の光検出器を使用している。

これまでは赤色蛍光と緑色蛍光の２色、あるいはこれに
黄色蛍光を加えた３色を同時に測光する構成が一般的で
あったが、近年、更なる多色化の要望が高まり、新たな
蛍光剤の開発も進んでいる。

これにより同時に使用する蛍光チャンネル数が増加する
と、それに応じて光検出器の数も増加してしまうことに
なる。即ち、光学配置が複雑化し、フォトマル等の高価
な光検出器が多数必要となってしまう問題点があった。

本発明は以上の’ａｍを解決すべくなされたもので、光
検出器の数置上の測定パラメータが得られる検体測定装
置の提供を目的とする。

［ｎ題を解決するｋめの手段］上述の課題を解決する本発明は、サンプル中の個々の検
体を順次流す手段と、第１、第２の照射光ビームを検体
の流れ方向に間隔を置いて第１の位置と第２の位置に照
射する手段と、前記第１、第２の被検位置を通過する検
体から発するそれぞれの光を受光する共通の光検出手段
と、検体が前記第１の位置を通過する際には検体から発
する第１の光学特性の光を選択的に前記光検出器に導き
、検体が前記第２の位置を通過する際には検体から発す
る第２の光学特性の光を選択的に前記光検出器に導く選
択手段とを有することを特徴とする。

［実施例］以下、本発明の実施例の基本的な構成図を第１図及び第
２図を用いて説明する。なお、基本形態を説明した後に
、より詳細な幾つかの実施例を後に説明する。第１図は
本発明の実施例の基本的構成図であり、第２図は第１図
を上方から見た図で、側方光学系を詳細に表わしている
。

図中１は検体である生体細胞やラテックス粒子等の被検
粒子をシースフロ一方式により１個ずつ順に流すための
フローセルで被検粒子が紙面上方から下方に向けて流れ
ている。２．３はレーザ光源であり、この分野では一般
的なＡｒ＋レーザ、Ｈｅ−Ｎｅレーザ、色素レーザ、半
導体レーザ等様々な光源が利用できる。４は照射光ビー
ムをフローセル部の被検領域に結像する集光レンズであ
り、レーザ光源２及び３からのレーザビームをそれぞれ
フローセル中の１ａ、１ｂの位置に結像する。結像ビー
ムの形状としては流れに直交する方向に長径を持つ楕円
形状が好ましい。ここで両照射位置１ａ、ｌｂの間の距
離は１００μｍ程度とする。ビーム直進方向に配置され
る部材５は光ストッパ、６は前方散乱光を集光する集光
レンズ、７は視野絞り、８は前方散乱光を検知する光検
出器であり、またビーム直進方向と直交する方向に配置
される部材１１は側方散乱光を集光する集光レンズ、２
１　ａ、　　２　ｌ　ｂ、　　３１　ａ、　３　ｌ　ｂ
は被検粒子より生じた側方散乱光及び蛍光を色分解する
ためのダイクロイックミラー　２５．３５．４５は側方
散乱光及び蛍光を検知するための光検出器であり、該光
検出器としては検出感度の高いフォトマルチプライヤが
好適である。

レーザ光源２より出射されたレーザ光は集光レンズ４に
より集光され被検領域１ａに照射される。この被検領域
１ａに被検粒子が通過すると該被検粒子によって光散乱
が起き、この時被検粒子が蛍光染色されていれば蛍光も
励起されて散乱光と共に発生する。前記発生する散乱光
の内の一部は光路前方方向に進み前方散乱光となる。こ
の前方散乱光は前記レーザ光の０次光を遮断するストッ
パ５、集光レンズ６、及び視野絞り７を経て、光検出器
８により強度検出され前方散乱信号が得られる。

一方、被検粒子より励起される前記蛍光は、前記散乱光
の一部である側方散乱光と共に集光レンズ１１で集光さ
れる。集光された光は集光レンズ１２、視野絞り１３、
集光レンズ１４を経てダイクロイックミラー２１ａ、２
１ｂに至る。視野絞り１３はｌａ、ｌｂの周位置からの
光を通過させる程度の大きさの開口を有している。ここ
で互いに異なる特性を有するダイクロイックミラー２１
ａ、２１ｂで色分解され反射した前記側方散乱光及び蛍
光は、前記反射光の特性に応じたバンドパスフィルタ２
２ａ、２２ｂを経て、メカニカルシャッタ等の光束を遮
断し得るシャッタ２３ａ。

２３ｂに至る。該シャッタ２３ａ、２３ｂは互いに独立
に駆動可能な高速シャッタであれば良く、使用できるシ
ャッタとしてはメカニカルシャッタ以外にも液晶シャッ
タやＡＯ，あるいはボッケルセル等の様々なものが使用
可能である。

次に実施例の装置の電気的処理手順について説明する。

光検出器８で得られた信号はアナログ処理回路５１と比
較回路５２に接続されている。そしてアナログ処理回路
５１の出力は、順次Ａ／Ｄコンバータ５３に接続され、
また光検出器２５．３５．４５の出力も同様にアナログ
処理回路６１．６２．６３、Ａ／Ｄコンバータ６４．６
５．６６に接続され、各Ａ／Ｄコンバータの出力は一つ
のＣＰＵ回路６７に導かれ、そのＣＰＵ回路６７にはメ
モリ６８が接続されている。また前述の比較回路５２に
は基準電圧ｖ０が共に入力され、その出力はシャッタ制
御回路５４に接続されており、更にシャッタ制御回路５
４の出力は２３ａ、２３ｂ、３３ａ、３３ｂ、４３ａ、
４３ｂの各シャッタに接続されている。シャッタの駆動
は、シャッタへの印加電圧が０の場合はシャッタが開い
て光を透過し、一定電圧ｖ１を印加することでシャッタ
が閉じて光を遮断する。

被検粒子がｌａの地点を通過しレーザ光を横切る時に光
検出器８で得られる前方散乱光強度の出力信号は第３図
（ａ）に示すような信号となる。

また第３図（ｂ）は光検出器２５．３５．４５の出力、
すなわち側方散乱光強度あるいは蛍光検出強度の出力信
号である。ここで前記第３図（ａ）に示す光検出器８の
出力信号と閾値である基準信号ｖ０を比較器５２で比較
することで第３図（Ｃ）のようなタイミングパルスが得
られる。

ここで被検粒子が１８を通過する時、レーザ光Ｌ１によ
る散乱光及び蛍光がシャッタ２３ａ。

３３ａ、４３ａのみを通過し、また粒子が１ｂを通過す
る時、レーザ光Ｌ２による散乱光及び蛍光がシャッタ２
３ｂ、３３ｂ、４３ｂのみを通過するようにするため、
２３ａ、３３ａ、４３ａの各シャッタの駆動ｆ３号は、
第３図（ｄ）のようにタイミングパルスの立ち下がりで
再びシャッタを閉じ、２３ｂ、３３ｂ、４３ｂの各シャ
ッタの駆動１３号の立ち上がりで再びシャッタを開くよ
うに、シャッタ制御回路５４により作り出される。また
２３ｂ、３３ｂ、４３ｂの各シャッタの駆動信号も前記
シャッタ制御回路５４にて作られる。これは第３図（ｅ
）のようにタイ主ングパルス信号（Ｃ）の立ち下がりか
ら、２木のレーザ間を被検粒子が通過するのに要する時
間よりも僅かに短い１１秒後、すなわち被検粒子が！ｂ
の直前に来た時点でシャッタを開け、そして被検粒子が
１ｂを通過し終る時間１７秒後に再びシャッタが閉じる
ようなタイミングの信号となる０以上の制御信号で各シ
ャッタの開閉が制御され、被検粒子がｌａの位置を通過
する際にはシャッタ２２ａ、３２Ａ　　　’）　　　＊
　　ｌ’、Ｉ　　ｋ　　　　　　９　　９　　　ｋ　　
　　　　１　　９　　　ｈ　　　　　　ｊ　　’）　　
ｈ　　Ａ（ｎ同じ、続いて同一被検粒子が１ｂの位置を
通過する際には各シャッタの開閉が反転する。

一方、光検出器２５．３５．４５の各出力は、アナログ
処理回路６里、６２．６３にそれぞれにおいてレーザ光
照射域を被検粒子が通過する際に生じるパルス信号のピ
ーク値、面積積分値等が計測される。更にそれらの出力
であるアナログ信号はＡ／Ｄコンバータ６４．６５．６
６のそれぞれによりデジタル信号に変換され、更に変換
された各デジタル信号はＣＰＵ回路６７に入力されメモ
リ６８に記憶される。こうしてメモリ６８に蓄積された
測定データを基に、粒子解析回路６９にて粒子の種類や
性質等の解析や、抗原抗体反応の検出等の演算を行ない
、その結果はＣＲＴやプリンタ等の出力部７０に出力さ
れる。

さて　次に本発明に係る測定原理について説明する。

通常はシャッタ２３ａ、３３ａ、４３ａが開、２３ｂ、
３３ｂ、４３ｂが閉の状態となっていここで被検粒子が
被検領域１ａを通過する時には、シャッタ２３ａの光路
が選択されるため、被検領域１ａにある被検粒子によっ
て生じた散乱光及び蛍光の内、ダイクロイックミラー２
１ａで反射し、バンドパスフィルタ２２ａを経た、特定
の波長（バンドパスフィルタ２２ａの波長）を有する光
のみが光検出器２５に選択的に到達し検知されることに
なる。同様にダイクロイックミラー２１ａ、２１ｂを透
過した散乱光及び蛍光は、互いに異なる波長特性を有す
るダイクロイックミラー３１ａ、３１ｂで色分解され、
反射した光は同様にシャッタ３３ａ、３３ｂに至るが、
ここではシャッタ３３ａに至った光のみが選択される。

よって光検出器３５ではダイクロイックよラー２１ａを
透過してダイクロイックミラー３１ａで反射し、バンド
パスフィルタ３２ａを経た特定の波長（バンドパスフィ
ルタ３２ａの波長）の光のみが検知されることになる。

更にダイクロイックミラー３１ａ、３１ｂを透過した光
は、ミラー４１ａ、４１ｂで反射し、互いに異なる波長
特性を有するバンドパスフィルタ４２ａ、４２ｂを経て
シャッタ４４ａ、４４ｂに至るが、シャッタ４４ａかに
至った光のみが選択される。よって光検出器４５ではダ
イクロイックミラー２１ａ。

３１ａ及びバンドパスフィルタ４２ａを透過した特定の
波長（バンドパスフィルタ４２ａの波長）の光のみが検
知されることになる。

一方、前記被検領域１ａを通過した被検粒子が移動し、
所定時間の後に被検領域１ｂに至る時点では、制御回路
にてシャッタを開閉を駆動して、先とは逆にシャッタ２
３ａ、３３ａ、４３ａが閉、２３ｂ、３３ｂ、４３ｂが
開の状態となり、被検領域から光検出器に至る光路が切
換えられる。よってこの切換えられた光路中に配される
バンドパスフィルタ２２ｂ、３２ｂ、４２ｂで選別され
る特定波長の光が各検出器でそれぞれ検知される。

以上のように、各々の光検出器の手前に配置される２分
割のシャッタの開閉が被検粒子の通過に同期して制御さ
れるようになっている。これは換言すれば、被検領域か
ら光検出器に至る光路が２分割されて、被検粒子の通過
に同期して光路が切換えられるような構成となっている
。よって第１のレーザ光による光信号と第２のレーザ光
による光信号を時系列的に区別してサンプリングするこ
とが可能となり、同一の光検出器、アナログ処理系を用
いて、各検出器につき２種類の光信号を測定することが
できる。すなわち、側方系に３個の光検出器を備える本
実施例の装置においては、これら検出器で６種類の異な
るパラメータの蛍光及び側方散乱光を得ることができる
。

なお、以上の説明では側方の光検出器の数が３個の実施
例を示したが、検出器の個数はこれに限定されるもので
は無い、１個であれば一般的な従来例と同様、２色の蛍
光を単一の光検出器で得ることができる。この時ダイク
ロイックミラーは不要であるため装置構成が非常に簡略
なものとなる。又、光検出器の数が４個以上であれば更
に多くのパラメータを得ることができる。なお、測定゛
する各パラメータは必ずしも異なる光学特性である必要
はなく、同一の光学特性の光を複数検出することで測定
値の信頼性をより高めるようにしても良い。

また、更なる発展形態としては、照射光の照射位置、及
びダイクロイックミラー　バンドパスフィルタ、シャッ
タの分割数を３以上とすることで、光検出器の数を増や
すことなく更に多くの種類のパラメータを得ることがで
きる。例えば３分割するのであれば、光の照射位置を流
れ方向に３か所に行ない、シャッタ等の形状は第５図の
ように均等に３分割したものとすれば良い。

さて、以上は本発明の実施例の装置の基本的構成を説明
したものであるが、より具体的な幾つかの実施例を以下
説明する。なお、使用できる蛍光の種類及び組合わせが
これらに限定されるものではないことは言うまでもない
。

［実施例１］実施例１では、被検粒子を３種類の蛍光で染色して、２
個の光検出器で側方４チヤンネル検出するものである。

これに前方散乱光のパラメータを加えた計５種類の測定
パラメータを得ることができる。なお光検出器４５を含
む検出光学系は本実施例では使用しないためこれは省略
しても良い。

第１図、第２図において、レーザ光源−２及び３に波長
４８８ｎｍの２個の同−Ａｒ”レーザ光源を用いる。な
お、レーザ光源を２個用意せずに第４図のように単一の
光源からのレーザビームをハーフミラ−と全反射ミラー
を用いて光学的に２光束に分けるような構成としても良
い。この時、２木のレーザビームの強度比を変えて各蛍
光剤の励起効率に適した強度とすると更に好ましい。

被検粒子を染色する蛍光の種類は、波長４８８ｎｍの励
起光で励起される蛍光を選択する０例えばＦＩＴＣ（５
３０ｎｍ）、ＰＥ　（５７０ｎｍ）。

ｄｕｏｃｈｒｏｍｅ　　（６貫Ｏｎｍ）の３種類の蛍光
で染色するものとすると、被検粒子からは４８８ｎｍ。

５３０ｎｍ、５７０ｎｍ、６１０ｎｍの４種類の波長の
光が同時に発生することになる。なお、ｄｕｏｃｈｒｏ
ｍｅは直接４８８ｎｍの波長では励起されないが、−旦
ＰＥが励起されて発生する蛍光（５７０ｎｍ）でｄｕｏ
ｃｈｒｏｍｅが励起されるという段階的な励起過程を有
する。

ダイクロイックミラー２１ａ、２１ｂ。

３１ａ、３１ｂの光分別波長をそれぞれ、５１０ｎｍ、
５９０ｎｍ、４５０ｎｍ、６５０ｎｍ程度に設定し、バ
ンドパスフィルタ２２ａ、２２ｂ。

３２ａ、３２ｂとしてそれぞれ５３０ｎｍ。

４８８ｎｍ、５７０ｎｍ、６１０ｎｍ付近の波長の光を
選択的に透過させる特性のものを用いて、それぞれの光
学系でＦＩＴＣ，３３（側方散乱光）　、　Ｐ　Ｅ　、
　ｄｕｏｃｈｒｏｍｅの強度検出を行なう。

被検粒子が１８の位置を通過する時、上記４種類の光が
ｒ発生するが、この時シャッタ２３８゜３３ａが開いて
、２３ｂ、３３ｂが閉じているため、検出器２５におい
てはバンドパスフィルタ２２ａで選択されたＦＩＴＣの
蛍光強度が検出され、検出器３５においてはバンドパス
フィルタ３２ａで選択されたＰＥの蛍光強度が検出され
る０次に同一被検粒子が１ｂの位置を通過する時には、
シャッタ２３ａ、３３ａが閉じ、２３ｂ。

３３ｂが開くように制御されており、検出器２５におい
てはバンドパスフィルタ２２ｂで選択されたＳＳ強度が
検出され、検出器３５においてはバンドパスフィルタ３
２ｂで選択されたｄｕｏｃｈｒｏｍｅの蛍光強度が検出
される。

こうして２個の検出器で４種類の異なる光学特性の光の
測定値を得ることができる。これに光検出器８で得られ
る前方散乱光強度を加えて、計５種類の測定パラメータ
が得られる。

［実施例２］次に側方６チヤンネル検出が可能な実施例２を説明する
。

第１図１、第２図において、レーザ光源２として波長４
８８ｎｍのＡｒ”レーザ光源を、またレーザ光源３とし
て波長６００ｎｍの色素レーザ光源を用いる。なお、レ
ーザ光源として複数波長の光を同時に出力するマルチ発
振レーザ光源を用い、先の第４図でのハーフミラ−の代
わりにダイクロイックミラーを配置した構成として、単
一の光源で異なる波長の複数ビームを得るようにしても
良い。

被検粒子を染色する蛍光の種類は、波長４８８ｎｍの励
起光で励起される蛍光、及び波長６００ｎｍで励起され
る蛍光を選択する０例えば４８８ｎｍに適したものとし
てＦＩＴＣ（５３０ｎｍ）。

ＰＥ　（５７０ｎｍ）を用い、６００ｎｍに適したもの
としてＴＲ（６１０ｎｍ）、ＡＰＣ（６６０ｎｍ）を用
い、計４種類の蛍光で染色する。

ダイクロイックよラー２１ａ、２１ｂ。

３１ａ、３１ｂの光分別波長をそれぞれ、５７０ｎｍ、
６０５ｎｍ、５５０ｎｍ、６３０ｎｍ程度に設定し、バ
ンドパスフィルタ２２ａ、２２ｂ。

３２ａ、３２ｂ、４２ａ、４２ｂとしてそれぞれ４８８
ｎｍ、６００ｎｍ、５３０ｎｍ、６１０ｎｍ、５７０ｎ
ｍ、６６０ｎｍ付近の波長の光を選択的に透過させる特
性のもの選択する。

被検粒子がＡｒ”レーザ光が照射される１ａの位置を通
過する時、４８８ｎｍの照射光でＦＩＴＣ，ＰＥが励起
され、４８８ｎｍ、５３０ｎｍ。

５７０ｎｍの３種類の光が発生する。この時シャツタ２
２ａ、３２ａ、４３ａが開いて、２２ｂ。

３２ｂ、４３ｂが閉じているため、検出器２５にてＳＳ
　（４８８ｎｍ）が、検出器３５でＦＩＴＣが、検出器
４５でＰＥがそれぞれ検出される０次に所定時間の後に
同一の被検粒子が色素レーザ光が照射されるｌｂの位置
を通過する時は、６００ｎｍの照射光でＴＲ，ＡＰＣが
励起され、６００ｎｍ、６１０ｎｍ、６６０ｎｍの３種
類の光が発生する。この時点では、先とは逆にシャッタ
２２ａ、３２ａ、４２ａが閉じ、２２ｂ、３２ｂ。

４２ｂが開くように制御されているため、検出器２５に
てＳＳ　（６００ｎｍ）が、検出器３５でＴＲが、検出
器４５でＡＰＣがそれぞれ検出される。

さて、本実施例においては各シャッタは必ずしも必要で
はない、１ａ位置に照射されるＡｒ”レーザ光では４８
８ｎｍ、５３０ｎｍ、５７０ｎｍの光しか発生せず、シ
ャッタが無くても各光検出器ではこれらの波長の光のみ
が選択的に検出される。又、ｌｂ位置に照射される色素
レーザ光では６００ｎｍ、６１０ｎｍ、６６０ｎｍの光
しか発生しないため、シャッタが無くても各光検出器で
はこれらの波長の光のみが選択的に検出される。すなわ
ち、照射光波長、蛍光の種類、波長選択特性の組合わせ
によっては、シャッタが無くてもそれぞれのパラメータ
を区別して検出することができるのである。

これを一般化すると、各照射光の波長を異ならせ、光検
出器の手前に配置されるバンドパスフィルタ等の第１の
波長選択部材及び第２の波長選択部材の特性を、第１の
波長選択部材では第１の照射光で発生して第２の照射光
では発生しない波長の光を選択する特性を持たせ、第２
の波長選択部材では第２の照射光で発生して第１の照射
光では発生しない波長の光を選択する特性を持たせるこ
とでシャッタは不要となる。

以上のように本実施例では側方３個の検出器で６チヤン
ネル検出が可能で、これに前方散乱光を加えた計７種類
の異なる光学特性の光が検出可能となる。

［発明の効果］以上本発明によれば、光検出器の数置上の種類のパラメ
ータを得ることができる。これにより従来と同等の性能
がよりコンパクト・低コストで実現できる。また従来、
光学配置的に困難であった４種類以上の光学特性の異な
る光の検出も容易に行なえる。

【図面の簡単な説明】

第一図は従来の検体検査装置の構成図、であり、図中の
主な符号は、１・・フローセル、２．３・・レーザ光源、８・・光検
出器、７．１３・・視野絞り、２１ａ、２１ｂ、３１ａ
、３１ｂ、４１ａ。４１ｂ・・ダイクロイックミラー２２ａ、２２ｂ、３２ａ、３２ｂ、４２ａ。４２ｂ・・バンドパスフィルタ、２３ａ、２３ｂ、３３ａ、３３ｂ、４３ａ。ｂ・・シャッタ、２５．３５、５・・光検出器、鵠Ｚ図ｔｔ　　ｔｚ金床１１ミう−

Claims

【特許請求の範囲】

（１）サンプル中の個々の検体を順次流す手段と、第１、第２の照射光を検体の流れ方向に間隔を置いて第
１の位置と第２の位置に照射する手段と、前記第１、第２の被検位置を通過する検体から発するそ
れぞれの光を受光する共通の光検出手段と、検体が前記第１の位置を通過する際には検体から発する
第１の光学特性の光を選択的に前記光検出器に導き、検
体が前記第２の位置を通過する際には検体から発する第
２の光学特性の光を選択的に前記光検出器に導く選択手
段と、を有することを特徴とする検体測定装置。
（２）前記選択手段は、前記各被検位置から前記光検出
器まで光路を第１、第２の光路に分割して、検体が前記
第１の被検位置を通過する際には前記第１の光路を選択
し、検体が前記第２の被検位置を通過する際には前記第
２の光路を選択する請求項（１）記載の検体測定装置。
（３）前記選択手段は、光路中前記光検出器の手前に光
路を分割するように配置される第１の光学選択部材とシ
ャッタ、及び第２の光学選択部材とシャッタの組であり
、被検粒子が前記第１の位置を通過する際には前記第１
のシャッタを開けて前記第２のシャッタを閉じ、被検粒
子が前記第２の位置を通過する際には前記第１のシャッ
タを閉じて前記第２のシャッタを開けるように制御する
請求項（２）記載の検体測定装置。
（４）前記第１、第２の照射光は単一の光源からの光ビ
ームを光学的に２光束に分割したものである請求項（１
）記載の検体測定装置。
（５）前記第１、第２の照射光はそれぞれ異なる波長の
光である請求項（１）記載の検体測定装置。
（６）前記選択手段は、光路中前記光検出器の手前に光
路を分割するように配置される第１の光学選択部材及び
第２の光学選択部材であり、前記第１の光学選択部材は
前記第１の照射光で発生して前記第２の照射光では発生
しない波長の光を選別する特性を有し、前記第２の光学
選択部材は前記第２の照射光で発生して前記第１の照射
光では発生しない波長の光を選別する特性を有する請求
項（５）記載の検体測定装置。
（７）前記検体は複数種の蛍光で染色される請求項（１
）記載の検体測定装置。
（８）サンプル中の個々の検体を順次流す行程と、複数の照射光を検体の流れ方向に間隔を置いて照射する
行程と、各照射位置を通過する検体から発する異なる波長の光を
、共通の光検出器にて時系列的に受光する行程と、を有することを特徴とする検体測定方法。