JPH03216158A - 飼料中のカビ制御 - Google Patents

飼料中のカビ制御

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JPH03216158A
JPH03216158A JP2182565A JP18256590A JPH03216158A JP H03216158 A JPH03216158 A JP H03216158A JP 2182565 A JP2182565 A JP 2182565A JP 18256590 A JP18256590 A JP 18256590A JP H03216158 A JPH03216158 A JP H03216158A
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silage
bacteria
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    • C12R2001/125Bacillus subtilis ; Hay bacillus; Grass bacillus
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Abstract

(57)【要約】本公報は電子出願前の出願データであるた
め要約のデータは記録されません。

Description

【発明の詳細な説明】 (産業上の利用分野) 本発明は、抗真菌バクテリア株に関するものであり、よ
り詳細には貯蔵飼料(サイレージ)および干し草を含む
動物飼料組成物の保存に使用するためのバチルス ズブ
チルス(Bacillus  subtilis)およ
びセラチア(Serratia)の抗真菌バクテリア株
に関する。
(従来の技術) 動物飼料には穀粒、全作物、牧草、豆類、米、アルファ
ルファ、ルサーン( Iucerne)、モロコシ、お
よび干し草のような飼料が含まれる。この飼料は、乾燥
物または発酵工程により生産したこれら物質の貯蔵飼料
(サイレージ)の形態で通常保存される。貯蔵飼料(サ
イレージ)を生産するための発酵は一般的に無酸素状態
で酸生産バクテリアの存在下で行われる。この乾燥物ま
たはサイレジが必要に応じて飼料として採用される。
飼料を乾燥状態で保存しようとする時、自然に存在する
有害な微生物の集落化を最小にするために、保存の前に
さまざまな程度に乾燥する。例えば、畑の干し草には、
保存中に集落化し極端な場合には自発的酸化をひきおこ
す真菌、酵母、アクチノミセス、およびバクテリアの複
雑な混系が含まれている。またカビや真菌の成長は動物
および人間の双方にとって、味覚や健康上の問題を引き
起こす。微生物の成長の割合は湿度の程度に依存し、俵
状に束ねた干し草は湿度の含量として約15%が微生物
の活性が許容できる程度まで押さえられる上限として一
般的に好まれている。北アメリカではこの低い湿度含量
限界を達成するため、通常刈り入れ前に一定期間萎れさ
せたり、俵状にする前に乾燥することが行われる。
サイレージとは、すでにここで述べた作物の発酵産物で
あるが、収穫の際に存在する自然の乳酸生産菌によりも
たらされる。乳酸発酵は選択された乳酸生産バクテリア
を加えることにより改善される。そのようなバクテリア
は、ラクトバチルス(Lactobatillus)属
、ストレプトコッカス(Streptococcus)
属、エンテロコツカス(Enterococcus)属
、ラクトコッカス(Lactococcus)属、およ
びペディオコッカス(Pediococcus)属の中
から選択された乳酸生産株を含む。
良いサイレージを得るためには、嫌気的状態が重要であ
り、故に作物は通常保存され密閉された容器またはサイ
ロ中で発酵される。しかしながら嫌気的状態は迅速に達
成することが困難であり、またサイロ中の貯蔵物質に接
触する空気の程度に支配される。サイレージが空気、特
に空気中の酸素に晒されることは、結果としてサイレー
ジの劣化を引き起こし、この劣化の程度はサイレージの
好気耐性の程度に依存するであろう。また、サイレジは
サイロから取り出した後、動物に与える間に要する時間
にも依存して劣化する。このような実例は、劣化は主に
サイロ中に貯蔵した生牧草等の中の酵母またはカビの混
入によるものである。
飼料中の真菌類の増殖は、アンモニアまたは有機酸およ
びその塩のような化学的殺真菌剤を保存前に添加して、
または畑で萎れさせる期間を延長したり、ドライヤーの
使用、酸素含量の縮小、および/またはpHを変化させ
る等のさまざまな物理的手段により改良または避けるこ
とができる。
ハチルス ズブチルス(Bacillus subti
lis)種のバクテリア株は、米国特許第751382
号(1980年7月30日発行)において、かいば中の
スタチポトリスm)に対し特異的な殺菌活性を持つこと
が開示されIこ 。
米国特許第4266028号(1981年5月5日発行
)は、バクテリア性セラチア マーセスセンス(Ser
atia marcescens)R−2の培養による
抗真菌抗生物質ブロジギオシン(prodigiosi
n)調製について示している。
(発明が解決しようとする課題) サイレージまたは乾燥飼料中にて使用される生物学的制
御剤に対しては、複雑な状況変化にさいしても作用し、
および自然の微生物群と競合する能力が要求されている
驚くべきことには、飼料中の真菌、アクチノミセスおよ
びバクテリアの成長を効果的に制御するために使用でき
るバクテリア株を発見した。これらのバクテリア株はサ
イレージを生産および保存するために使用する乳酸生産
バクテリア株と混合して用いられる。特にバチルス ズ
ブチルス(Bacillus  subtilis)種
およびセラチア(Serrat ia)属のバクテリア
株が飼料中の数種のカビおよびバクテリアの生物学的制
御ができる抗真菌および抗バクテリアの双方の性質を示
すことが分かった。
それ故に本発明の目的のひとつは適当な材料を抗真菌バ
クテリア株および乳酸生産バクテリア株の混合物ととも
にサイロにいれて処理をすることにより、より良いサイ
レージを調製し保存することである。
さらに本発明の目的は、通常よりもかなり湿度含量が高
い状態で、干し草または他の乾燥飼料を俵状にしたり貯
蔵(保存)するために使用できる抗真菌バクテリアを提
供することである。
さらに本発明の目的は、飼料を処理する際に使用する組
成物に形成しうるバクテリア株を提供することである。
(課題を解決するための手段) 故に、本発明のひとつの観点は、飼料、バチルスズブチ
ルス(Bacillus  subtilis)FB2
6Gおよびセラチア(Serratia)属の抗真菌株
よりなる群から選択された抗真菌バクテリア株の抗真菌
有効量よりなる動物飼料組成物を提供することである。
好ましくは、抗真菌バクテリア株は、セラチアなる群か
ら選択された種である。より好ましくは、抗真菌株は、
セラチアルビダエア(Serra口a rubidae
x)FB299のようなセラチアルビダエア(Serr
atis rubidaea)種である。
好ましくは飼料の動物用飼料材料組成物は干し草である
本発明の好ましい実施態様として、動物飼料組る群から
選択された属の乳酸生産バクテリア株を含んでいる。動
物飼料組成物はがサイレージであることが望まれる場合
は、サイレージを生産するために効果を与えるために乳
酸生産有効量の乳酸生産バクテリア株を存在させる。好
ましくは、乳酸生産株はラクトバチルス(Lactob
aeillus)属のものである。より好ましくは乳酸
生産株はラクトバチルス プランタルム(Lactob
acillus plantarum)である。さらに
好ましくは、乳酸生産株はラクトバチルス プランタル
ム(Lactobacillus plantarum
)MTDlであり、その培養物はNational C
ollections ofIndustrial a
nd Marine Bicterix (NCIMB
).Aberdeen,Scotlandに寄託番号N
CIMB 40027で寄託されている。
本発明のさらなる観点は、サイレージおよびバチルス 
ズブチルス(Bacillus  subtilis)
FB260およびセラチア(Serrafia)属の抗
真菌株よりなる群から選択された抗真菌バクテリア株の
抗真菌有効量よりなるサイレージ組成物を提供すること
にある。好ましくは、抗真菌バクテリア株は、セラア 
リクエフ7 ’7 エンス(Serratix liq
uefaciens)よりなる群から選択された種であ
る。より好ましくは、抗真菌株は、セラチアルビダエア
(Serra目arubidaea)FB299のよう
なセラチアルビダエア(Serrajia rubid
aei)種である。
このサイレージ組成物はさらに、該組成物の調製に、す
でにここで定義した乳酸生産株のバクテリアが使用され
る場合には、そのようなバクテリアも含むことが理解さ
れるであろう。
本発明のさらなる観点のひとつは、サイレージを調製お
よび保存する際に使用するバクテリア組成物を提供する
ことであり、上記組成物は、バチルスズブチルス(Ba
cillus  subtilis)FB260および
セラチア(Serratia)属の抗真菌株よりなる群
から選択された抗真菌バクテリア株;およびラクトバチ
ルス(Lactobatillns)、ストレプトコッ
カス(Streptococcus)、エンテロコツカ
ス(Enterococcus)、ラクトコッカス(L
actococcus)、およびペディオコツカス(p
ediococcus)よりなる群から選択された属の
乳酸生産バクテリアの株より成る。好ましくは、抗真菌
バクテリア株は、セラチアルビダエア(Serrati
a rubidaea)、セラチア プリムチカ(Se
rratiaplymutica),およびセラチア 
リクエファシエンス(Serratia Iiquef
aciens)よりなる群から選択された種:および乳
酸生産株はラクトバチルス ブランタルム(Lacto
bacillus plantaram)種である。
より好ましくは、抗真菌バクテリア株は、バチルスズブ
チルス(Bacillus  subLilis) F
B26Gおよびセラチアルビダエア(SerraLia
 rubidaea) FB299より成る群から選択
される。さらに好ましくは、乳酸生産株はラクトバチル
ス プランタルム(laclobNational  
Collections  of  Industri
al  and  Marine Bacteria 
(NCIMB),Aberdeen,Scotland
に寄託番号NCIMB 40027で寄託されている。
本発明の動物飼料組成物中に使用される抗真菌バクテリ
ア株、サイレージ組成物、およびバクテリア組成物の好
ましい性質には、抗真菌活性(″抗菌活性″とはカビお
よび酵母に対する活性も含む)を有することに加えて、
:pH約4.0から約8.0の間で成長する能力;約l
5゜Cから約50’C,好ましくは約25゜Cから約5
 0 ’Oの間で成長する能力;炭素源として炭水化物
グルコース、シュクロース、メリビ才−ス、ラフィノー
ス、セルビオース、およびキシロースを使用する能力;
プ口テアーゼの微量生産:セルラーゼおよび/またはへ
ミセルラーゼ(キシラナーゼを含む)を生産する能力;
好気性かつ胞子形成性のダラム陽性バクテリア細胞;条
件的嫌気性かつ非胞子形成性のダラム陰性バクテリア細
胞;および塩化ナトリウムの濃度約1%から15%で成
長できる能力により示される浸透耐性(osno−to
lerance)、が含まれる。
サイレ ジを生産するのに適当なラク トバチル 属、ラク トコツカス(Lactococcns)属、およびベデ
イオコッカス(Pediococcus)属のどのよう
な乳酸生産株もここに定義した動物飼料組成物およびサ
イレ ジ組成物に使用され得る。適当なバクテリア株S)、ス
トレプトコッカス サーモフィルス(Streptoc 種の乳酸生産株を含む。
すでに定義した、動物飼料、サイレージおよびバクテリ
ア組成物に加えて、他の乳酸生産株でサイレージに適す
る、すでに定義した組成物のバクテリリアも存在すると
思われる。
さらに本発明の観点は、バチルス ズブチルス(Bac
illus snbtilis)の新規のバクテリア株
FB260、(その培養物はブタベスト条約のもと、N
ational CalIeclions of In
dustrial and Marine Bacte
ria (NCIMB),Aberdeen,Scot
lindに寄託番号NCIMB 4006(1990年
5月23日)で寄託されている)および、セラチアルビ
ダエア(Serratix rubidaCa)の新規
のバクテリア株FB299(その培養物は、ブタペスト
条約のもと、National Collection
s of Industrial and Marin
e Bacteria (NCIMB),Aberde
sn,Scotlandに寄託番号NCIMB 402
85(1990年5月23日)で寄託されている)を提
供する。
さらに本発明の観点は、飼料(好ましくは干し草または
サイレージ)の保存またはすでに定義した飼料材料また
はサイレージ組成物の調製に使用される抗真菌組成物で
あり、該真抗菌組成物が、バチ299;およびその受容
されるキャリアーより成る組成物を提供することである
さらに本発明の観点はすでに定義したバチルスズブチル
ス(Bacillus  subjilis)FB26
0、およびセラチア(Serratia)属の抗真菌株
よりなる群から選択した抗真菌バクテリア株のバクテリ
ア細胞の有効量で飼料を処理することにより、すでに定
義した動物飼料の調製および保存の方法を提供すること
である。好ましくは、抗真菌バクテリア株は、ens)
よりなる群から選択された種である。より好ましくは、
抗臭菌株は、すでに定義したセラチアルビダエア(Se
rratia rabidaea)FB299である。
場合により、この方法は、該飼料をラクトバチルス(L
acjobalillus)、ストレプトコッカス(S
treptococcus)、エンテロコツカス(En
Lerococcus)、ラクトコッカス(Lacto
coccus)、およびベデイオコツカス(Fedio
coccus)よりなる群から選択された属の乳酸生産
株のバクテリアの有効量で処理することをさらに含む。
好ましくは乳酸生産株はラクトバチルスプランタルム(
LacLobacillus plxntxrulll
)種であり、より好ましくはすでに定義したラクトバチ
ルス ブランタルムLactobacillus pl
anLxrum)MTD Iである。また場合により、
この方法は飼料をすでに定義したバクテリア組成物の有
効量で処理することより成る。好ましくは飼料は干し草
である。
さらに本発明の観点はすでに定義したバチルスズブチル
ス(Bacillus  subtilis)FB26
0、およびセラチア(Serrajia)属の抗真菌株
よりなる群から選択した抗真菌バクテリア株のバクテリ
ア細胞の有効量,およびラクトバチルス(Lact+b
aNIlns)、ストレブトコッカス(Strepto
coccus)、エンテロコツカス(Enteroco
ccus)、ラクトコツカス(Lactococcus
)、およびペディオコッカス(Pediococcus
)よりなる群から選択された属の乳酸生産株のバクテリ
アの有効量で適当な飼料を処理することより成るすでに
定義したサイレージ組成物の調製および保存に関する方
法を提供するものである。好ましくは、抗真菌バクテリ
ア株は、セラチアルビダエア(SerraLia ru
bidaea)、セラチア プリムチカ(Seら選択さ
れた種;乳酸生産株はラクトバチルス プランタルム(
Lactobacillus plxntitum)種
である。
より好ましくは抗真菌バクテリア株はバチルスズブチル
ス(Bacillus  subtilis)FB26
Gおよびセラチアルビダエア(Serratix ru
bidaea)FB299より成る群から選択される。
さらに好ましくは、乳酸生産株はすでに定義したように
ラクトバチルスブランタルム(Lactobacil!
us plantarum)MTD Iである。場合に
よりこの方法は飼料をすでに定義したバクテリア組成物
の有効量で処理することより成る。
以下に本発明を詳細に説明する。
本発明の組成物の中の抗真菌株および乳酸生産株の適当
なバクテリア細胞は、相対的な割合として1:9と9=
1の範囲に適当に存在する。好ましくはそれらは実質的
に等しい割合で存在する。
この抗真菌バクテリア株は、本発明によれば、適当な培
地および条件の下で該株のサンプルを発酵させることに
より、要求されるどのような量でも調製されるであろう
。この条件および培地は当業者には周知である。培地は
、例えば一般的に窒素源(例えば魚肉またはトリプトフ
ァン)およびでんぷんやグルコース等の炭水化物源を含
む。適当な条件は約20゜Cから約40゜Cの間の温度
で中性pHである。発酵はハッチ法で、典型的には1−
2日でまたは運統培養にて簡便に行えるであろう。生存
しているバクテリア株は、発酵液を、例えば遠心、ミク
ロまたは限外濾過をして濃縮し、次に所望される適当な
加工剤を加える。加工剤としては、例えば湿潤剤のよう
な界面活性剤、固形希釈剤、分散剤およびUV安定化剤
が含まれ得る。所望すれば、既知の方法で固形加工を施
すことも可能であろう。
本発明の実際的な方法としては、バクテリア組成物は、
溶液状または固形の粒子状にて適用される。溶液状で適
用される時は、キャリアーは水であり、一方固形状で適
用される時は、キャリアは固形物である。一般的に固形
として適用される組成物は、使用者にキャリアーを含む
完全な形で供給されるであろう。しかし組成物が液状で
適用される時は、一般的に使用者が使用前に適当な量の
水と懸濁するために適するバクテリア細胞として供給さ
れる。
本発明のバクテリア組成物が固形で適用される時、該組
成物中のキャリアーとしては適当などのような物質も使
用され得る。例えば適当なキャリアーとしては、粉砕の
トウモロコシの穂軸、オオムギ、コムギなどの穀物およ
び粘土、白亜(チョーク)、マグネサイト、石灰石、お
よび滑石(タルク)等の他の物質を含む。
キャリアーおよびバクテリアに加えて、本組成物は、さ
まざまな理由からサイレージの調製に使用するだめの一
般的な物質をさらに含むであろう。
さらに加えられるどのような物質も本発明のバクテリア
組成物とは別の成分として添加される。さらに加える物
質としては、栄養素(例えばシュークロース、ラクトー
スなどの糖);ある種のバクテリアの成長に必要な成長
因子(酵母エキス、コーンスティプリカー(corn 
steep liquor),ビタミン、およびアミノ
酸を含む);バクテリアの生存能力を保護するための添
加物;抗酸化剤;酸素吸収を補助するための物質;添加
物の粉塵化を減らしたり、作物との接着を向上させるた
めのオイルその他の物質、を含む。
サイレージの調製に使用する組成物に含まれるキャリア
ーおよびバクテリアの相対的な割合は、その使用する各
バクテリア株の性質および生存能力に依存する。固形物
として適用される特に適当なバクテリア組成物は、粉砕
トウモロコシ穂軸(メイズグリッツ)のような固形キャ
リア−8691を含む。
バクテリア細胞が液体添加物の一部として形成され適用
される時、それらは使用者により十分量の水に懸濁され
る。コロニー形成単位(CFU;Colony For
ming Units)にて定義される生細胞の濃度が
、適用する割合を決定する指標として用いられ得る。
ひとつの目安として、飼料の性質および状態によって、
バテリア細胞は、処理される飼料1gあたり約I X 
10’ CFU7)’ら約I X 10’ CFHノ濃
度で懸濁液または固形添加物中に含まれて適用され得る
。好ましくはこの濃度は、1gの飼料あたり約IXIO
5から約I XIG’の範囲である。
本発明の動物飼料、サイレージ組成物およびバクテリア
組成物の調製においては、バクテリアは例えば凍結乾燥
またはスプレー乾燥のような手段で通常乾燥され、もし
くは生細胞は水に再懸濁されて、その後通常の混合/調
合工程により他の成分と混合される。
本発明による動物飼料およびサイレージ組成物の調製は
、適当なバクテリア株のバクテリア細胞またはすでに定
義したバクテリア組成物をスプレーなどにより、さまざ
まな微生物に自然に侵入されるまたはされ易い高湿度の
穀物飼料に適用される。
生存微生物材料(バクテリア細胞)は、損傷防止を必要
とされる抗真菌および抗バクテリア活性を与えつつ、ラ
イフサイクルを経験する。
本発明による新規のバクテリア株およびバクテリア組成
物はカビの侵入を受けがちなサイレージおよび干し草を
含む広範な飼料の調製および保存に使用されうる。いく
つかの例では大腸菌群および酵母に対する活性も観察さ
れ、特にバチルス ズブチルス(Bacillus s
ubtilis)FB 26Gにおいて、その活性が顕
著である。他の利点には、本発明の動物飼料組成物また
はサイレージ組成物の調製および/または保存における
、色調の保存および加熱管理が含まれる。これは特に色
調により等級される干し草を保存する時に重要でる。本
発明により保護される、商業上特に重要な例はアルファ
ル7ア、ルサーンを含む豆類、トウモロコシ、高湿度の
トウモロコシ粒、コーンサイレージ、穀粒のサイレージ
、牧草のサイレージ、野菜サイレージ、牧草および豆類
の干し草である。
99は乳酸を生産し、このような場合、必要であれば添
加する乳酸生産菌バクテリアの存在は最小にできること
が分かった。
本発明のさらなる利点は、家畜およびその副産物に望ま
しくない影響を与えず、そしてその副産物中に残留する
ことがない為に、各国の飼料に関する規則に適合するバ
クテリア株、飼料組成物、サイレージ組成物およびバク
テリア組成物を提供するものである。
本発明のさらなる利点は、使用者にとって安全であり、
機械の腐食および損害を及ぼさないバクテリア株および
該組成物を提供することである。
以下の実施例は本発明をさらに説明するものであるが、
本発明がここに示す実施例に限定されることは意図して
いない。
実施例1. 以下の例は、セラチア ルビダエア(5erraLia
rubidaea)株FB299およびバチルスズブチ
ルス(Bzcillus subtilis)株FB2
60の単離を説明する。
干し草のサンプルは、セントバレリアンケベック カナ
ダ(SI Valerien Quebec Cana
da)より、サイレージのサンプルは同じくケベックの
″ブエルメブリオニマン”(Ferme Brioni
man)より入手した。
FB299およびFB26Gの単離は0.Lgの干し草
またはサイレージ(Igの穀物)をそれぞれIOmlの
0.05%ペブトンに移し、どの程度サンプルが濁るか
によって、10′から107倍までの連続希釈系を作成
し行った。
(濁度)が一定以上の希釈物0.1mlを分散プレート
法により蒔いた。プレートの栄養素としては、酵母モル
ト、サポーランド(5abouraud)一デキストロ
ースおよびL−Sディファレンシャルメディウム(De
ffereiial Media)を用いた。このプレ
ートは、5日間室温にインキユペートされ検定された。
コロニーが選別され単離された培地で純化された。選別
したコロニーのスライドが作成され、ダラム染色されて
さらに特徴ずけを行うために顕微鏡(油浸レンズを使用
し1000倍の倍率で)の下で観察された。バクテリア
の単離物は、使用するまで寒天の栄養斜面培養基に移さ
れ、4゜Cで保存された。
表1ではバチルス ズブチルス(bacillus s
ubLi1is) FB260株およびセラチアルビダ
エア(SerraLia rubidaea) FB2
99株の形態学的および微生物学的特徴をあげる。
表1 形態学的および微生物学的特徴 FB260: 好気的および胞子形成バクテリア、ダ ラム陽性、個体細胞、バチルス種に特徴的なコロニーの
形態 pH4.5から11.0の間で成長が観察される25か
ら50℃の間の温度で成長が観察される NaCIの終濃度が1から15%の間で成長が観察され
る 本株は炭素源としてグルコース、シュクロース、メリビ
オース、ラフィノース、セロビオースおよびキシロース
を使用 本株はプロテアーゼを弱く生産し、しかしアミラーゼお
よびキシラナーゼを強く生産する 多くのカビ、特にペニシリウム Sp,アブシディア 
sp(Absidi為sp).アスベルギルス ニガー
およびアスベルギルスフラブスに抗臭菌効果を示す FB299: 条件的嫌気性および非胞子形成バク テリア、ダラム陰性個体細胞、 p[I4.0から8.0の間で成長が観察され、25か
ら50℃の間の温度で成長が観察される NaCIの終濃度が1からIO%の間で成長が観察され
る 本株は炭素源としてグルコース、シュクロース、メリビ
オース、ラフィノース、セロヒオースおよびキシロース
を使用 多くのカビ、特にベニシリウムsp,アブシディア s
p(Absidia sp),アスベルギルス ニガー
およびアスペルギルス フラブスに抗真菌効果を示す 実施例2 この実施例ではバクテリア株FB260およびFB29
9をアルファルファの干し草に適応する例を説明する。
秤りの上に置いたプラスチック製バケツにて500gの
アルファルファの干し草を計った。それぞれのサンプル
をプラスチックンート上に別個の堆積物として置いた。
ひとつの処理について8つの反復を用い、すなわち一度
に8つの堆積物を調製した。各々の堆積物は、スポット
ガンーラーマーク(SpojG[IN−Lurmark
)スプレー銃を用い、lOmlの適当な処理株をスプレ
ーした。干し草は再度各堆積物に配置され、さらにlO
miを各々のサンプルにスプレーされた。この操作は、
より良い処理がいき渡ったアルファルファを得るために
行った。各サンプルは、その後アルファルファをナイロ
ンメッシュの袋にきつく詰めた″俵″状にし、針金で袋
を閉じてラベルをつけた。この工程を3回行って湿度が
40%および28%の”俵″を24個得た。これらの俵
は湿度含量に従って、26゜C1相対湿度70%の環境
チャンバー内の床上に2つの堆積物として積み重ねられ
た。2週間後、それぞれの湿度レベルから俵1つが開け
られ、電子レンジおよび秤りにて湿度含量が測定された
実験を中止し、カビによる損傷評価を行った。統計的な
検査のために、視覚で確認できるカビの評価に使われた
+/−の割合系は、以下に基づいて離散値に転換された
。(−)には、0%の値を与えた。(+)は33%であ
り、(++)は66%であり、(十++)には、99%
の値を与えた。これらの割合は、サンプルが次に高い割
合に分類される前に受けたカヒの成長の最大量に基づく
この結果は表2に示され、28%の干し草において、F
B299およびFB260ともカビの良い制御を提供し
た。40%の干し草においては、FB299がカビの特
に良い制御を示した。
■.28%湿度; 表2 各″俵″中のカビの存在 処理 l.対照 2. FB260 3. FB299 +   +++  ++   +++  ++   +
+   +十十++++十十÷++++++ +++++   ++    +    +    −
   ++    +視覚観察でのカビの 平均パーセント 対照 処理 FB299 FB260 ■.40%湿度 各″ 俵″ 中のカビの存在 処理 l. 対照    十+十+++  +++  ++十
+++  ++十+++  +++2.  FB260
    +++   +   +++   +   十
++  +++  ++   +++3.FB299 
 −  ++  +  +  −  ++  ++++
++視覚観察でのカビの  対照 平均バーセント     99 視覚観察におけるカビの説明: 一:カビの成長無し +:わずかなカビの成長 ++:かなりのカビの成長 十++:大量のカビの成長 処理 FB299 FB260 実施例3 以下に示す実施例では、FB260またはFB299を
単せて密閉した高湿のモロコシ粒に適用した時の比較を
示す。
2Kgの高湿のモロコシ粒が各々のサンプルとして計ら
れ、酸素を通過させないポリエチレンの袋に入れられた
。100mlの適当な処理液を各々のサンプル袋に注ぎ
、その後きつく袋を閉じて全体に処理液か行きわたるよ
うlO回反転させた。適用した生細胞の終濃度は、1g
のモルコシ粒あたりIXIO’からIXIO’の範囲(
 ” E c o s y l ”と共に使用する場合
FB260およびFB299は過剰であった)にあった
。4サンプル各々について3回の反復を行い、すなわち
処理用に12袋が用意された。各処理の12袋のうちの
9袋は別々に75−Lの亜鉛メッキした鉄製のゴミ箱に
入れ、201’igの砂袋を乗せてサイロ圧力を真似た
。最後にlθ個の″サイ口”に蓋をした。1回の処理あ
たり残る3袋のサンプルはO時間を表し、サンプルが視
覚で分析できるようになる前にどのような活性も止める
ように冷蔵庫に置いて、次の日にそれらの上溝を集めた
。室温にて7日後に、各処理の残りの反復系を25.2
℃、相対湿度70%の環境室に、残る8日間放置した。
各サンプル回収時に、適当なサンプルはカヒの視覚的評
価が行われ、揮発酸、可溶性炭水化物、等の分析用に回
収するために水で洗われた。
処理は以下のように行った: 処理1:対照 処理2 : FB260 処理3 : FB299 十FB260 処理6:ラクトバチルス ズランタルム+ FB299 この結果を表3に掲げる。この結果は上述した条件では
サイレージを15日後に検定した時、処理#5のカヒの
混入は対照よりも少ないことを表している。好気耐性に
ついては、処理#3および#6が5日間空気にさらして
もカビの良い制御を示し、温度の上昇は少なかった。p
Hについては、対照と比較して#5および#6で良い値
( < 4.2 )が観察された。FB260およびF
B299の各々について、ラクトバチルス プランタル
ム(Lactobacillus plaia『uII
1)と組み合わせたほうが、ラクトバチルス ズランタ
ルム(Lac(obac:IIus pIanrsru
m)株単独よりもより良いサイレージを導いた。
表3 1       77%       4.35   
 77%(29.7°C)2      55%   
    4.35    66%(29.3°C)3 
     55%       4.32    33
%(23.7℃)4      55%       
4.21    55%(21+.7℃)5     
 22%       116    66%(26.
7°C)6      44%       4.14
    44%(25.0℃)本:15日後のサイレー
ジについての検査零本:サイ口につめた材料を5日間室
温で空気にさらした後、検査した。百分率の数字は、カ
ビによる損傷を表し、一方カツコ内の数字は平均温度で
ある。

Claims (1)

  1. 【特許請求の範囲】 1、飼料(forage)およびバチルスズブチルス(
    ¥Bacilius¥¥subtilis¥)FB26
    0(National Collections of
     Industrial and Marine Ba
    cteria(NCIMB)、Aberdeen、Sc
    otland、に寄託番号NCIMB40286にて寄
    託されている)、およびセラチア(¥Serratia
    ¥)属の抗真菌株からなる群から選択される抗真菌バク
    テリア株の抗真菌的に有効な量からなる動物飼料組成物
    。 2、上記抗真菌バクテリア株がセラチアルビダエア(¥
    Serratia¥¥rubidaea¥)FB299
    (National Collections of 
    Industrial and Marine Bac
    teria(NCIMB)、Aberdeen、Sco
    tland、に寄託番号NCIMB40285で寄託さ
    れている)である請求項1に記載の動物飼料組成物。 3、上記飼料が干し草である請求項1または2に記載の
    動物飼料組成物。 4、さらにサイレージを生産する発酵をもたらすための
    乳酸を生産するために有効な量のラクトバチルス(¥L
    actobacillus¥)、ストレプトコッカス(
    ¥Streptococcus¥)、エンテロコッカス
    (¥Enterococcus¥)、ラクトコツカス(
    ¥Lactococcus¥)、およびペデイオコツカ
    ス(¥Pediococcus¥)よりなる群から選択
    される属の乳酸生産バクテリア株を含む請求項1ないし
    3のいずれか1項に記載の動物飼料組成物。 5、上記乳酸生産株がラクトバチルスプランタルム(¥
    Lactobacillus plantarum¥)
    MTDl、(National Collection
    s of Industrial and Marin
    e Bacteria(NCIMB)に受託番号NCI
    MB40027で寄託されている)である請求項4に記
    載の動物飼料組成物。6、サイレージおよびバチルスズ
    ブチルス(¥Bacillus¥¥subtilis¥
    )FB260(National Collectio
    nsof Industrial and Marin
    e Bacteria(NCIMB)、Aberdee
    n、Scotland、に寄託番号NCIMB4028
    6にて寄託されている)およびセラチア(¥Scrra
    tia¥)属の抗真菌株からなる群から選択される抗真
    菌バクテリア株の抗真菌的に有効な量からなるサイレー
    ジ組成物。 7、上記抗真菌バクテリア株がセラチアルビダエア(¥
    Serratia¥¥rubidaea¥)FB299
    (National Collections of 
    Industrial and Marine Bac
    teria(NCIMB)、Aberdeen、Sco
    tland、に寄託番号NCIMB40285で寄託さ
    れている)である請求項6に記載のサイレージ組成物。 8、さらにラクトバチルス(¥Lactobacill
    us¥)、ストレプトコッカス(¥Streptoco
    ccus¥)、エンテロコッカス(¥Enteroco
    ccus¥)、ラクトコッカス(¥Lactococc
    us¥)、およびペディオコッカス(¥Pedicoc
    cus¥)よりなる群から選択される属の乳酸生産バク
    テリア株を含む請求項6に記載のサイレージ組成物。 9、上記組成物がバチルスズブチルス(¥Bacill
    us¥¥subtilis¥)FB260(Natio
    nal Collections of Indust
    rial Bacteria(NCIMB)、Aber
    deen、Scotand、に寄託番号NCIMB40
    286で寄託されている)およびセラチア(¥Serr
    atia¥)属の抗真菌株よりなる群から選択される抗
    真菌株のバクテリア、およびラクトバチルス(¥Lac
    tobacillus¥)、ストレプトコッカス(¥S
    treptococcus¥)、エンテロコッカス(¥
    Enterococcus¥)、ラクトコッカス(¥L
    actococcus¥)、およびペディオコッカス(
    ¥Pediococcus¥)よりなる群から選択され
    る属の乳酸生産株バクテリアより成るサイレージの調製
    および保存に使用されるバクテリア組成物。 10、バチルスズブチルス(¥Bacilus¥¥su
    btilis¥)FB260(NCIMB40286)
    およびセラチアルビダエア(¥Serratia¥¥r
    ubidaea¥)FB299(NCIMB40285
    )(これらのカルチャーはNational Coll
    ections of Industrial and
     Marine Bacteria(NCIMB)、A
    berdeen、Scotlandに寄託されている)
    よりなる群から選択されるバクテリア株の生物学的に純
    粋なカルチャー。 11、請求項10で定義されるバチルスズブチルス(¥
    Bacillus¥¥subtilis¥)FB260
    およびセラチアルビダエア(¥Scrratia¥¥r
    ubidaea)FB299よりなる群から選択される
    バクテリアの有効量およびそれらの受容できるキャリア
    ーよりなり、請求項1または4に定義される飼料組成物
    または請求項6または8に定義されるサイレージ組成物
    の保存または調製に使用する抗真菌組成物。 12、バチルスズブチルス(¥Bacillus¥¥s
    ubtilis¥)FB260(National C
    ollections of Industriala
    nd Marine Bacteria(NCIMB)
    、Aberdeen、Scotlandに寄託番号NC
    IMB40286で寄託されている)およびセラチア(
    ¥Serratia¥)属の抗真菌株よりなる群から選
    択される抗真菌バクテリア株のバクテリア細胞の有効量
    で飼料を処理することより成る、請求項1に定義した動
    物飼料組成物を調製または保存する方法。 13、バチルスズブチルス(¥Bacillus¥¥s
    ubtilis¥)FB260(National C
    ollections of Industriala
    nd Marine Bacteria(NCIMB)
    、Aberdeen、Scotlandに寄託番号NC
    IMB40286で寄託されている)およびセラチア(
    ¥Serratia¥)属の抗真菌株よりなる群から選
    択される抗真菌バクテリア株のバクテリア細胞の有効量
    およびラクトバチルス(¥Lactobacillus
    ¥)、ストレプトコッカス(¥Streptococc
    us¥)、エンテロコッカス(¥Enterococc
    us¥)、ラクトコッカス(¥Lactococcus
    ¥)、およびペディオコッカス(¥Pediococc
    us¥)より成る群の属から選択される乳酸生産バクテ
    リア株のバクテリア細胞の有効量、で適当な飼料を処理
    することより成る、請求項8に定義したサイレージを調
    製または保存する方法。
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