JPH03223674A - 反応容器 - Google Patents

Abstract

(57)【要約】本公報は電子出願前の出願データであるた
め要約のデータは記録されません。

Description

【発明の詳細な説明】 〈産業上の利用分野〉 本発明は、酵素免疫測定法、ＤＮＡ検出法等による生体
内微量物質の測定を簡便に実施するための反応容器に関
する。

〈従来の技術〉 生体内微量物質の測定は、各種疾患の診断および治療効
果の判定等を目的として頻繁に実施されており、目的に
応じ、手軽に操作を行うことができる簡易測定法や、高
感度で測定精度が高い測定方法が次々と開発されている
。　なかでも、簡易測定法は、非常に便利な方法であり
、測定機器や反応装置等を用いずに手軽に実施できるこ
とから、定性的もしくは半定量的測定のみで十分診断を
下すことができる用途で広く用いられている。　例えば
、尿中ブドウ糖の測定やその他の生化学的な検査、妊娠
診断等に用いられているが、さらに、核酸ハイブリダイ
ゼーション法によってＤＮＡを検出することによる病原
ウィルスの検出や、その他の反応にも応用が広まりつつ
ある。

ところで、現在、免疫反応（抗原抗体反応）を測定原理
として利用している簡易測定法としては、担体として赤
血球またはラテックスを用いる凝集反応もしくは凝集阻
止反応（以下、両者を合わせて凝集反応という）、およ
び、標識剤として酵素を用いる酵素免疫測定法（Ｅ　Ｉ
　Ａ）等がある。

凝集反応のうち、担体として、赤血球やその他の類似合
成物を用い、底面が球面状となったアンプル内で反応を
行なわせ、その球面上に形成される沈降リングもしくは
沈降スポットの大きさまたはそれらの有無によって判定
を行なう方法（凝集沈降反応法）は、操作が簡便であり
、測定感度は比較的高いが、その結果の判定が赤血球ま
たはその他の類似合成物の沈降に依存しているため、結
果が得られるまでに長時間を要する。　一方、担体とし
てラテックスを用い、スライド上で撹拌しながら、その
凝集像の凝集程度から判定を行う方法（ラテックス凝集
反応法）は、感度はやや低いが、操作は簡便で、短時間
で結果が得られる。　そのため、ラテックス凝集反応法
は、妊娠診断等、比較的に高感度を必要としない用途に
、現在、最も広く利用されている。　しかし、この方法
は、結果の判定に熟練が必要であるため、正確な判定を
行なえるのは、主として病院・診療所等の医療機関の医
師や検査技師に限られている。

簡易測定法としてのＥＩＡは、測定感度は他の方法に比
して高いが、その高感度を得るには、比較的長時間の反
応が必要である場合がある。　さらに、Ｂ／Ｆ分離操作
（抗原抗体反応において、抗原と抗体が結合して生じた
結合型（Ｂｏｕｎｄ：　Ｂ）と結合していない遊離型（
Ｆｒｅｅ：　Ｆ）とを物理的に分離すること）が煩雑で
あり、しかも、このＢ／Ｆ分離が正確になされないと、
次の工程である酵素反応において、非特異的な反応が生
じ、結果の判定を誤らせる等の欠点を有している。

上記のように、凝集反応法に基づ（簡易測定法は、物質
の存在の有無を検知することは可能であっても、物質の
存在量の測定、すなわち、定量的測定には不適当である
。　一方、ＥＩＡは、測定に長時間を要し、Ｂ／Ｆ分離
操作が煩雑であるという欠点を有するが、測定の結果を
反応液の色の変化、すなわち発色等の有無によって定性
的に判定、あるいは発色等の程度によって定量的に測定
する方法であるので、定性的判定はもとより、定量的測
定が可能であり、しかも、結果の判定を、誰でも容易に
、かつ正確に行うことができるという利点を有している
。　そこで、このような利点を有するＥＩＡについて、
反応時間を短縮したり、Ｂ／Ｆ分離操作等を簡便化する
ための研究が数多くなされているが、未だ、満足すべき
測定法が実用に供されていないのが実情である。

また、最近、簡易測定法が適用されつつあるが、核酸ハ
イブリダイゼーション法を利用して特定のＤＮＡまたは
ＲＮＡ　（以下、両者を合わせてＤＮＡ等と略す）を検
出する検査は、その反応様式が、ＤＮＡ等が特定のＤＮ
Ａ等と選択的に結合する性質を利用する点で、抗原抗体
反応を用いる免疫学的測定方法、とりわけＥＩＡに類似
している。　したがって、ＥＩＡと同様な工程が必要で
あり、従来の測定法では、反応に長時間を要する、Ｂ／
Ｆ分離操作が煩雑である等、ＥＩＡと同様の解決すべき
課題がある。

そこで、この課題を解決するための一手段として、特開
昭６３−２００６３号公報および特願昭６２−２１５９
９２号で、皿状の容器が提案されている。

実際、この容器を使用することにより、定性反応用ＥＩ
Ａの操作は著しく簡便化された。

しかし、この容器を用いても、定量性に優れるというＥ
ＩＡの利点は、最大限には活かされない。

さらに、ＥＩＡの実施には、例えば、試料分注、洗浄液
添加、酵素標識抗体溶液の添加、発色剤あるいは酵素基
質の添加等の複数の操作が必要であり、これらの複数の
操作を実施しなければならないという煩雑さと、操作回
数の多さに起因する測定までに要する時間の短縮に関し
ては、何ら解決がなされていない。

すなわち、定量的測定が可能な測定法の簡便化にあたり
、課題となるのは、Ｂ／Ｆ分離操作の簡便化と、試料お
よび試薬の添加操作の簡便化であるが、前記の皿状の容
器を用いても、これらの課題については未だ改良の余地
が残されている。

〈発明が解決しようとする課題〉 上記のように、高感度で、操作が簡便で、しかも正確な
測定を行いつる簡易測定法は、未だ開発されていない。

本発明は、このような実情に鑑みてなされたものであり
、感度の高い測定を、操作、特にＢ／Ｆ分離操作を正確
にしかも簡便に行うことができ、しかも、試料および試
薬の添加操作を簡便に行うことができる反応容器の提供
を目的とする。

また、本発明は、様々な反応、例えばＥＩＡや核酸ハイ
ブリダイゼーションの機構を利用した検出方法に広く適
用可能な容器の提供を目的とする。

さらに、本発明は、簡便な操作で多項目同時測定を行う
ことのできる反応客器の提供を目的とする。

く課題を解決するための手段〉 本発明は、ＥＩＡや核酸ハイブリダイゼーション法にお
いて、抗原抗体反応またはパイプリダイゼーション反応
、Ｂ／Ｆ分離操作、酵素反応、結果の判定等の一連の操
作を、比較的短時間に連続して実施できる反応容器に関
する。

本発明の反応容器は、通常の測定は、特別の機器を必要
とせずに実施可能である。　し　かも、多数の検体を連
続処理する場合や、定量的測定の目的で、自動測定機器
に適合させることも可能である。

そして、本発明の反応容器は、上記の特徴を具現化した
ものであって、構体内に、少なくとも１個の流体入口を
有する通路を有し、該通路の途中であって全ての流体入
口よりも下流側に少なくとも１個の試薬固定部分を有し
、がっ、通路と連通ずる排気機構を有する反応ユニット
を少なくとも１個有する構成となっている。

以下に、本発明の詳細な説明する。

本発明の反応容器は、少なくとも１個の反応ユニットを
有する。　従って、まず、１個の反応ユニットを有する
反応容器の構成を、図面に基づいて説明する。　本発明
は、その態様が多岐にわたるため、まず図面についての
説明を行なう。

第１ａ図は、本発明の一実施例の斜視図、第１ｂ図は、
その通路部分の断面図である。

第２ａ図は、本発明の一実施例の斜視図、第２ｂ図およ
び第２ｃ図は、そのＡ−Ａ線およびＢ−Ｂ線における矢
視図である。

第３ａ図、第３ｂ図および第３ｃ図は、本発明の一実施
例の各部品の平面図、第３ｄ図は、その側面図、第３ｅ
図および第３ｆ図は、そのＣ−Ｃ線およびＤ−Ｄ線にお
ける矢視図である。

第４図は、本発明の一実施例の斜視図である。

第５図は、本発明の一実施例の平面図である。

第６ａ図および第６ｂ図は、本発明の一実施例の各部品
の平面図、第６ｃ図はその側面図である。

第７ａ図および第７ｂ図は、本発明の一実施例の各部品
の平面図、第７ｃ図および第７ｄ図はその側面図である
。

第８ａ図、第８ｂ図および第８ｃ図は、本発明の一実施
例の各部品の平面図、第８ｄ図はその側面図、第８ｅ図
は第８ｂ図中のＡ部分の拡大縦断面図である。

第９ａ図および第９ｂ図は、本発明の一実施例の各部品
の平面図、第９ｃ図はそのＸ　−Ｘ　４９における断面
図である。

第１０図、第１１図および第１２図は、各々本発明の一
実施例の平面図である。

ここで説明する本発明の反応容器の一反応ユニットは、
その構成要件として、構体、構体内の少なくとも１個の
流体入口を有する通路、該通路の途中であって全ての流
体入口よりも下流側に位置する少なくとも１個の試薬固
定部分、前記通路と連通ずる排気機構を有する。

検体２は、第１ａ図に示すように、一部材で構成されて
いてもよいし、第２ａ図および第４図に示すように、２
個の構体の割型４．５で構成されていてもよいし、さら
には、第３ｄ図、第３ｅ図および第３ｆ図に示すように
、構体の蓋体３および割型４．５で、あるいはそれ以上
の多数の割型で構成されていてもよい。

さらには、第６Ｃ図に示すように、構体の蓋体３および
割型４と、同じく検体である脚９ａで構成されていても
よいし、第７ｃ図に示すように、割型４と、割型４を覆
って蓋の役目をはだすシート８製の蓋体３とで構成され
、割型４の下側が船底型となっていてもよい。　あるい
は、第８ｄ図に示すように、構体の蓋体３、割型４．５
と、同じく構体である台９ｂで構成されていてもよい。

本発明の反応容器の製造工程において、後述する通路内
の試薬固定部分および試薬付着部分の作製の容易さを考
慮すると、構体は、後述する通路を少なくとも１個に有
する複数の割型で構成されることが好ましい。　あるい
は、後述する通路を開放状態で有する構体と、該通路の
所要部のみを開口するようにした構体である蓋体で構成
されることが好ましい。

また、第６ｃ図、第７Ｃ図および第８ｄ図に示すような
構成とすると、反応が実質的に終了した時に、同図中矢
印で示した方向に反応容器が傾き、反応の終了、換言す
れば測定あるいは判定が可能となったことを知らせるの
で、このような構成も好ましい。　具体的には、反応容
器は、第７Ｃ図の状態から、反応が終了すると第７ｄ図
の状態となる。

検体の材質としては、ガラス、エポキシ樹脂、ポリアク
リル樹脂、ポリエステル樹脂、ポリスチレン樹脂、ポリ
塩化ビニル樹脂等の各種プラスチック等があげられるが
、これらはいずれも、親水性材料、あるいはフロスト処
理等の各種親水化処理が可能なプラスチックである。

また、構体の一部、例えば蓋体がシートの場合、シート
の材質としては、検体の材質として上記したものがあげ
られ、他に、アルミニウム等の金属等があげられる。　
シートは、構体の他の部分に熱圧着可能であるか、ある
いはシートの一方の面に接着剤が積層されているとよい
。

構体（含シート）の色は、特に限定されないが、反応結
果が色で示される場合は、透明、あるいは上方のシート
又は割型が透明で、下方の割型が白であることが好まし
く、蛍光による場合は、透明が好ましい。

構体内または検体を構成する割型には、通路が形成され
る。　この通路を、各種検体（例えば尿、血清等）、洗
浄液、反応用溶液等の液体および空気等が通る。　そし
て、この通路は、少なくとも１個の流体入口を有し、例
えば排気可能な出口等の排気機構に通じる。

流体入口１０（１１）は、第１ａ図、第２ａ図、第４図
、第５図、第６ｂ図、第８ａ図、第９８図、第１０図お
よび第１２図に示すように、一つだけでもよいし、第３
ａ図および第３ｂ図や第７ａ図に示すように、ニーつ、
あるいはそれ以上あってもよい。

流体入口か複数ある場合、例えば検体と反応用溶液等、
複数の液体を同時にまたは所定の順序で添加することも
可能である。

尚、流体入口が複数ある場合は、第３ａ図、第３ｂ図、
第３Ｃ図、第３ｄ図、第３ｅ図および第３ｆ図に示す例
のように、流体入口１０．２１の配Ｕ位置を工夫するこ
とにより、最上流よりも下流側にある流体入口１０から
流入する液体が、最上流の流体入口１１から流入する液
体と実質的に同方向に走行するよう構成することが好ま
しい。

また、流体入口のうちのひとつは、最上流側に設けられ
る場合が多いが、例えば第９ｂ図に示す例のように、流
体入口ｌＯを通路５０の中間部分に設けてもよい。　第
９ｂ図に示す例の場合、流体入口１０よりも上流側（同
図中右側）に流入した液体も、最終的には下流に向って
流れる。

通路に通じる排気機構の一例は、通路の一部に設けられ
た排気可能な出口である。

具体例について述べると、第１ａ図、第２ａ図、第４図
、第５図および第１０図に示すように、通路の一端が、
検体等の添加された液体や空気等の気体が流出可能な、
検体の側面に開口した開放端となり、その開放端が出口
２０となっているもの、第３Ｃ図に示すように、通路の
一端が＃４体のＦ方にむかって開口し、出口２０となっ
ているもの等がある。

あるいは、第６ａ図および第６ｂ図、第７ａ図および第
７ｂ図、または第８ａ図に示すように、検体の上方、下
方あるいは側面にむかって開口する出口を２ケ所（出口
２０および出口２１）有するもの等がある。　ただし、
第６ａ図および第６ｂ図、第７ａ図および第７ｂ図、ま
たは第８　ａ図、第８ｂ図および第８ｃ図に分解した各
構成部品の平面図を示す例のように、後述する液体貯留
部９０を有し、液体貯留部９０の少なくとも一部に吸水
性材料８１が収納されている構成の場合には、出口２０
から液体が流出することは殆どなく、出口２０は排気の
ために供される。　また、出口２１は、後述する試薬付
着部分４０を有する試薬付着領域Ｔに液体を流入させる
ために設けたものであり、やはり排気口となる。

同じく出口が複数個ある例であるが、第１１図に示す例
は、後述する通路の下流側か枝分れして、その枝分れし
た通路（毛管部分５２゜５３．５４）それぞれの末端が
出口２０．２１．２２となっている構成である。

このように、出口は、検体等の添加された液体が排出さ
れるように設計することもできるし、添加された液体は
排出されずに通路内に留まり、通路内にあった気体のみ
が排出されるように設計することもできる。

本発明の反応容器を、通路に通じる排気機構を有する構
成とするために、通路に出口を設けることは、必ずしも
必要ではない。

例えば第９ａ図、第９ｂ図および第９Ｃ図に示す例のよ
うに、通路を有する割型４の上面の四周部のみが蓋体３
と接着され、通路部分の上面は、空間を介して蓋体３で
遅閉された構成としてもよい。　このような構成とする
と、流体入口１０から液体が添加された際に、通路内に
あった気体（空気）は、蓋体３と割型４との間の空間に
移動するので、通路に特に出口は設けていないが、液体
は、通路内を流れることができる。

通路自体の構成は、以下に説明するように、様々なバリ
エーションが可能である。

まず、通路の方向性であるが、例えば、第１ａ図および
第１ｂ図に示すように、検体２に対して通路５０が水平
であってもよいし、第３ｅ図および第３ｆ図に示すよう
に、構体２に対して水平の部分と垂直の部分とを有して
いてもよい。　あるいは、図示しないが、流体入口から
出口または液体貯留部にむかって傾斜していてもよい。

通路の平面形状は、全く任意でよく、例えば第１ａ図お
よび第１ｂ図に示すように、直線状であってもよいし、
第２ａ図、第４図、あるいは第３ｂ図および第３Ｃ図に
示すように、曲線状であってもよい。　さらには、第６
ｂ図、第７ｂ図、第８ｂ図、第９ｂ図および第１１図に
示すように、コーナーを有する、および／または枝分れ
しているといったような通路でもよい。

なお、通路は、一般的には、第１３ａ図にその平面図が
示されているような平坦な側面（壁面）を有するものが
考えられるが、これに限定されず、例えば第１３ｂ図や
第１３ｃ図にその平面図が示されているような、側面（
壁面）に突状部６３を有するもの等であってもよい。

また、通路５０の断面の形状は、第１４ａ図に示すＵ字
形、第１４ｂ図に示す四角形、第１４ｃ図に示す凸形、
第１４ｄ図に示す■字形、第１４ｅ図に示すＷ字形の他
、円形、楕円形等、どのようであってもよいが、第１４
ｃ図の例では凸部が、第１４ｄ図および第１４ｅ図の例
では先端鋭部が毛管部分５１．５２となっているため、
毛管現象も手伝って、添加された液体の移動がスムーズ
となる。　あるいは、第１４ｆ図に示すように、通路は
、ここを流れる液体を支持できる幅の空間として形成さ
れていてもよい。

なお、本発明において、「通路の毛管部分」とは、第１
４ｃ図、第１４ｄ図および第１４ｅ図の場合のように、
通路の断面形状における一部分を指すとは限らず、通路
の平面形状における一部分を指す場合もある。　ともか
く、通路において、毛管現象が生じるような形状の部分
は全て、毛管部分と呼ぶ。

通路の断面積は、第１ａ図および第１ｂ図に示すように
、全長にわたって同じ大きさ、すなわち通路５０の全て
が毛管部分５１であってもよいし、第２ａ図、第４図、
第３ｂ図および第３ｃ図に示すように、毛管部分５１．
５２．５３．５４の他に、狭隘部６０．６１や液体滞留
部７０．７１等を有するものであってもよい。　さらに
は、第５図、第６ｂ図、第７ｂ図および第１２図に示す
ように、毛管部分５１．５２．５３．５４．５５の他に
、液体滞留部７０、試薬付着部分を有する試薬付着領域
Ｓ、Ｔ、試薬固定部分を有する試薬固定領域Ｘ、Ｍ体貯
体部留部９０を有するものであってもよい。　また、第
７ｂ図および第８ｂ図に示すように、通路の一部が親水
性条体５９で代替されていてもよい。

ところで、本発明において、液体滞留部とは、流体入口
付近に設けられ、検体等の液体を滞留させて、その添加
を行いやすくする役割をになう。

このような液体滞留部の大きさは、添加される液体量や
通路全体の容積によって定まるが、特に、通路が後述す
る液体貯留部を有し、添加された液体が構体内に保持さ
れるような反応容器では、１回に添加される液体量を液
体滞留部の容積とした場合、（液体滞留部の容積Ｘ液体
添加回数〈液体貯留部の容積）の関係が成立する大きさ
とする。

なお、液体滞留部の容積を太き（したい場合には、第９
Ｃ図に示すように、液体滞留部７０を通路を有する割型
４の表面よりも突出させる等の手段を取ればよい。

また、狭隘部は、通路内を流れる液体の流入速度を調節
する役割と、液体の逆流を防ぐ役割をになう。

従って、第２ａ図、第４図、あるいは第３ａ図、第３ｂ
図および第３ｃ図に分解した各構成部品の平面図を示す
例のように、流体入口１０、ｌｌ付近に液体滞留部７０
．７１を有し、その近傍に狭隘部６０．６１を有すると
、添加される液体の流入速度を調節しやすい。

また、第３ａ図、第３ｂ図および第３ｃ図に分解した各
構成部品の平面図を示す例においては、狭隘部６０は、
最上流の流体入口１１から流入した液体が、最上流より
も下流側にある流体入口１０に連通ずる液体滞留部７０
へ流入するのを防ぐ役割もはたしている。

液体貯留部とは、反応終了後の検体、反応用溶液、洗浄
液等を貯留する部分である。　従って、液体貯留部は、
後述する試薬固定部分よりも下流側に形成される。

第４図に示される例では、毛管部分５２の中の試薬固定
部分３０よりも下流側が液体貯留部９０である。

第５図に示される例では、やはり試薬固定部分３０より
も下流側が液体貯留部９０であるが、この例では、多く
の液体を貯留させるために、液体貯留部９０の一部の断
面積を大きくして大容積とし、その部分を吸水性材料収
納領域８０とし、そこに吸水性材料８１を収納している
。　ま゛た、第６ｂ図、第７ｂ図、第８ｂ図および第９
ｂ図に示される例も、液体貯留部９０の一部または全部
が吸水性材料８１を収納している吸水性材料収納領域８
０となっている。

吸水性材料とは、ろ紙、吸水ポリマーと称されている高
分子材料、綿等の天然繊維等をいい、本発明においては
、液体貯留部の一部あるいは全体に収納されて用いられ
る。

尚、吸水ポリマーとしては、ポリビニルアルコールとア
クリル酸ナトリウムとの共重合体、セルロースなどがあ
げられる。　そして、自身の体積があまり大きくないも
のが好ましい。

吸水性材料は、固定せずに収納するだけでもよいが、固
定する場合は、接着、封入等の公知の方法で行なえばよ
い。

また、吸水性材料の使用量は、添加される液体量に応じ
、全ての液体を吸収できる量とする。

なお、吸水性材料は、一般的に通気性を有するが、吸収
、保持する液体量が増すにつれ、通気性が低下すること
もあるので、本発明の反応容器であって、吸水性材料収
納領域を有し、通路の上面が蓋体３で密閉されているも
のは、第６ｂ図および第７ｂ図に示すように、出口２０
を吸水性材料収納領域８０の極付追上流側に設け、吸水
性材料が液体を吸収、保持した後も排気可能とすること
が好ましい。

液体貯留部を有すると、出口を有する構成の場合であっ
ても、出口は排気のためにのみ用いられ、順次添加され
る検体等の液体が反応容器外に流出しないうちに全反応
を終了できるので、特に、検体が感染性あるいは汚染性
を有する物質を含有しているおそれがある場合等、その
廃棄処理を行ないやす（でよい、　また、液体貯留部の
一部または全部に吸水性材料が収納されていると、これ
らの吸水性材料は、検体等の液体を吸収、保持するので
、添加された検体等の液体が確実に容器外に流出せず、
かつ吸水性材料が液体を吸引し、流体入口から添加され
た液体の通路内の移動を円滑とするので、さらに好まし
い。

ところで、本発明の反応容器の通路が、毛管部分あるい
は毛管とはなっていないが相対的に断面積の小さい通路
部分と、それらに比べて断面積が大きく大容積となって
いる部分（以下、大容積部という。　尚、大容積部は、
試薬付着領域Ｓ、Ｔや試薬固定領域Ｘ等として機能する
。）とから構成されている場合、毛管部分等から大容積
部への遷移部分は、第６ｂ図および第７ｂ図に示すよう
に、所定の鋭角で広がる構成とすることが好ましい。　
これは、毛管部分等を流れてきた液体がひき続き大容積
部を濡らして流れていくために重要な因子である。　第
８ｂ図に示す例のように、前記遷移部分が鈍角で広がる
場合は、大容積部に傾斜をつけ（毛管部分から大容積部
へ遷移する側を高く、他方を低（する）、付加的重力の
作用も伴なって、毛管部分等を流れてきた液体がひき続
き大容積部を濡らして流れるように構成することが好ま
しい。

また、先に述べた通路の一部を親水性条体５９で代替し
た例（第７ｂ図、第８ｂ図）において、親水性条体５９
は、通路内を流れる液体の流速を、任意に調整、制御す
る役割をになう。

すなわち、反応容器において、容器内を流れる液体の流
速は、反応の精度と密接な係わりがある。　これを、免
疫反応（ＥＩＡ法）を行なわせる場合について述べると
、流速を、■免疫反応を完全に行なわしめるのに適した
速度、 ■Ｂ／Ｆ分離を完全に行なわしめるのに適した速度、 ■基質が発色体となり、該発色体が所定の位置に堅固に
沈着するのに適した速度、 のりち、最も遅い速度に制御すると、反応の精度が高く
なる。

そして、流速の制御は、構体の材質の選択や通路の断面
積の調整等によるのであるが、通路の断面積の調整は、
加工上の、すなわち技術的困難さがある場合があり、コ
ストアップにつながる場合がある。　そのような場合、
通路の一部を親水性条体に代替すると、親水性条体の太
さを選択するのみで、容易に精密に流速制御を行ない得
る。　特に、親水性条体で代替する部位を液体貯留部の
直前とすれば、反応の全工程の速度を制御できる。

親水性条体に代替する部分は、構体自体には、通路を形
成してもしなくてもよいが、形成する場合であっても、
構成自体に形成する通路はラフ加工でよいので、加工費
の点および技術的な点で問題はない。

尚、第８ｂ図および第８ｅ図に示す例のように、親水性
条体５９を構体に形成した通路内に展張する場合は、親
水性条体５９の少なくとも一部分が通路に形成された中
空室５８内に展張されるようにする。　第８ｅ図につい
て説明すると、中空室５８部分以外では、親水性条体５
９があっても、通路の断面積は毛管部分５５の断面積と
なってしまうが、中空室５８部分では、毛管部分５５よ
りも断面積の小さい親水性条体５９のみが通路となるの
で、流速を完全に制御でき、反応に必要かつ充分な時間
を確保できる。

親水性条体の材質としては、糸、紙、布等が例示でき、
また、その断面積は、所要反応時間によって適宜選択さ
れるが、例えば免疫反応の場合には、親水性条体の断面
形状が円の場合、直径０．２〜１ｍｍ程度が好ましい。

以上、本発明の反応容器の通路について説明したが、次
に、通路の形成方法について述べる。

第１ａ図に示す例のように、構体２の内部に通路５０が
ある場合は、構体２を切削する等の方法によって形成す
ればよい。　また１例えば第２ａ図に示す例のように、
構体２が割型４．５から構成される場合は、通路を有す
る割型４．５各々に対応する型を作り、その型に樹脂組
成物を入れ、硬化させ、型から抜くことで製造すること
ができる。　あるいは、第７Ｃ図に示す例のように、構
体２が蓋体３と割型４から構成される場合は、蓋体３お
よび通路を有する割型４を、同様に型成形することがで
きる。

もちろん、割型、あるいは蓋体と割型となっている場合
も、切削等の方法によって通路を形成してもよい。

そして、割型同士、あるいは蓋体と割型とは、適当な接
着剤で接着して構体とする。

ところで、構体２が割型４．５から構成される場合、あ
るいは蓋体３と割型４．５で構成される場合、蓋体３、
割型４．５は、互いに、通路５０以外の平面全てで接触
している必要はない。

第１５図は、隔壁で画された通路を有する本発明の一実
施例の断面図である。　第１５図に示すように、割型４
に形成された通路５０を画する隔壁６７の部分だけが、
接着剤６５によって蓋体３と接着されていてもよい。

尚、接着剤６５を十分、かつ均一に塗布するために、通
路５０を形成するための隔壁６７の幅Ｗは小さいことが
好ましい。

また、第９ａ図、第９ｂ図および第９Ｃ図に示す例は、
その上面が直接的には閉鎖されていない通路を有する本
発明の一実施例である。

第９Ｃ図に示すように、蓋体３は、割型４の四周部のみ
で接着されていてもよい。

さらに、他の方法としては、平板状の割型間に、接着剤
自体を隔壁とすることによって通路を形成する方法があ
る。

第１６ａ図および第１６ｂ図は、平板状の蓋体３と割型
４との間に、接着剤６５自体を隔壁とすることによって
通路を形成する方法を説明するための図である。　尚、
第１６ａ図は分解斜視図、第１６ｂ図は部分断面図であ
る。

この方法では、割型４に、通路５０形成用隔壁となるよ
うに、通路５０の形状に対応して接着剤６５を塗布し、
次に、通路５０の高さと同じ厚さのスペーサー（図示せ
ず）を蓋体３と割型４との間にはさんで蓋体３と割型４
を圧着し、接着剤６５を硬化させる。　それにより、硬
化した接着剤６５自体が隔壁となって通路５０が画され
た反応容器ができる。

蓋体と割型、あるいは割型同士の接着に用いる接着剤は
、適当な粘度を有し、硬化時に収縮しない室温硬化型接
着剤が好ましい。　そして、粘度は、接着面積が大きい
場合は低粘度のもの、接着面積が小さい場合はやや高粘
度のものが好ましく、第１６ａ図および第１６ｂ図に示
す例のように、接着剤自体によって通路を形成する場合
は、盛り上り接着が可能な接着剤が好ましい。　接着剤
の一例をあげると、エポキシ系接着剤、酢酸ビニル系接
着剤、合成ゴム系接着剤、シアノアクリレート系接着剤
等があげられる。

尚、割型同士の接着あるいは接着剤による通路の形成は
、本発明の反応容器の製造工程における最終工程とする
ことが好ましい。

ところで、構体の材質が親水性である場合はよいが、そ
うでない場合は、少なくとも通路の一部は、親水化させ
るとよい、　これにより、添加された液体が通路内を濡
らし、円滑に通路内に流入するようになる。

通路を親水化させる方法は、特に限定されないが、通路
部分の横体材料として、表面に親水性基が導入されたも
のを用いる方法、ブラスト処理、プラズマ処理、レーザ
ー処理、フロスト処理等の粗面化処理の利用、あるいは
、陽イオン性界面活性剤等の帯電防止剤や蛋白質等の親
水性物質を塗布する方法等が例示される。　なお、親水
化のためには、横体材料が（メタ）アクリル樹脂であれ
ば、メチル（メタ）アクリレートと硫酸（メタ）アクリ
レートとの共重合体が、また、スチレン系樹脂であれば
、同じくスチレン系の共重合体が好適に使用される。

また、構体が、３個以上の部品（割型、あるいは蓋体お
よび割型）で構成され、その割型間に通路が形成される
場合は、例えば第３ａ図、第３ｂ図、第３ｃ図、第３ｄ
図、第３ｅ図および第３ｆ図に示す例のように、割型４
に形成されている通路の毛管部分５２は、通路の連通部
５６で、割型５に形成されている通路の毛管部分５４の
通路の連通部５７に連通ずるように構成する。　これに
より、蓋体３、割型４．５で構成される構体の面積が小
さくても、長い通路を有する反応容器が得られる。

さらに、第７ａ図、第７ｂ図、第７Ｃ図および第７ｄ図
や、第８ａ図、第８ｂ図、第８Ｃ図、第８ｄ図および第
８ｅ図に示す例のように、通路の一部が親水性条体５９
で代替されている場合、親水性条体５９の末端あるいは
屈曲点における固定は、接着剤等を用い、通常の方法で
行なえばよい。

本発明の反応容器の一反応ユニットは、以上説明してき
たような構成の通路内に、少なくとも１個の試薬固定部
分を有するものである。

試薬固定部分とは、通路内に有り、測定しようとする物
質に特異的に結合する物質（試薬）が固定されている部
分であり、ここで、本発明の反応容器内における最終の
反応が行われるので、この部分を観察する（定性反応）
ことにより、あるいは計測する（定量反応）ことにより
、検体中の被測定物質の有無あるいは被測定物質量を検
出、測定することができる。

試薬固定部分に固定される試薬は、測定が免疫反応によ
る場合は、抗体、抗原またはハブテン、あるいはそれら
の誘導体であり、核酸パイプリダイゼーション反応によ
る場合は、ＤＮＡまたはＲＮＡである。　この他、レク
チン、受容体、リガンド等、被測定物質と特異的に結合
する物質であれば、固定用試薬として用いることができ
る。

試薬固定部分は、通路内で、かつ全ての流体入口よりも
下流側にある。　ただし、試薬固定部分よりも下流側の
通路の長さは、特に限定されない。　そして、添加され
た液体を排出する構成とする場合は、試薬固定部分を最
下流側に設け、添加された液体が検体から排出されない
構成（通路の試薬固定部分よりも下流側が液体貯留部で
ある構成）とする場合は、試薬固定部分を上流側に設け
ることが好ましい。

試薬固定部分の形状は、特に限定されず、四角形、円形
、楕円形、六角形等適宜の形状とすることができる。

ところで、試薬固定部分は、前記のように、検体中の被
測定物質の有無あるいは被測定物質量を検出、測定する
場であるので、第３ａ図、第３ｂ図および第３Ｃ図に示
す例のように、試薬固定部分３０に通路が重畳しない構
成となっていると、特に肉眼判定や光学器械による測定
を行なう場合に、精度が高くなる。

また、同じ（第３ａ図、第３ｂ図および第３ｃ図に示す
例のように、蓋体３および試薬固定部分３０を有さない
割型４の試薬固定部分３０に対応する部分６．７が無色
透明の材料で構成されていると、特に色によって判定や
測定を行なう場合に、測定精度が高くなる。

さらに、試薬固定部分３０を有する割型５も無色透明の
材料で構成されていると、特に透過光によって測定を行
なう場合に、測定精度が高くなる。

ところで、試薬固定部分は、通路に前記固定用試薬を固
定することで形成できるが、通路の一部を大容積部とし
、該大容積部を試薬固定領域とし、該試薬固定領域内に
１個あるいは複数の試薬固定部分を設けてもよい。　ま
た、試薬固定領域も１個に限定されず、複数個あっても
よい。

試薬固定部分が複数ある場合は、試薬固定部分の配置パ
ターンを工夫することにより、検査結果の判定を、より
容易に、より高精度にすることができる。　あるいは、
多項目同時測定が可能となる。

ここで、多数の試薬固定部分を有する場合の試薬固定部
分の配置パターンの例を、図面に基づき説明する。

第１２図は、１個の試薬固定領域Ｘに２個の試薬固定部
分３０．３１を有する例、第７ｂ図は、１個の試薬固定
領域Ｘに３個の試薬固定部分３０．３１，３２を有する
例、第８ｂ図および第１０図は、通路の毛管部分に、２
個または３個の試薬固定部分３０．３１．３２を有する
例、また、第１１図は、分岐した毛管部分５２．５３．
５４の各々に、各１個の試薬固定部分３０．３１．３２
を有する例である。

第７ｂ図、第８ｂ図、第１０図および第１２図に示す例
においては、試薬固定部分に、互いに干渉しない試薬２
種または３種が固定されている。　即ち２例えば検体中
の被測定物質を免疫反応によって測定するに際して用い
る反応容器であれば、互いに交差反応性を有しない複数
の抗体、抗原あるいはハブテンが固定されている。

また、第１１図に示す例においては、固定される試薬は
５互いに干渉するものであってもよい。

このように、複数の試薬を固定する場合は、例えば１種
を検出用、他を対照用試薬としてもよいし、多項目同時
測定を行なうために、異なる種類の検出用試薬を固定し
てもよい。　もちろん、１種の試薬を複数箇所に固定し
てもよい。

さらに、第１７ａ図、第１７ｂ図および第１７ｃ図に、
試薬固定領域Ｘ内の複数の試薬固定部分の配置パターン
の例を示した。

第１７ａ図に示す例は、試薬固定部分を扇形に設けたも
のであり、例＾ば、要の位置（同図中３０）には検出用
試薬を、弧の位置（同図中３１）には標準品（希釈系列
とするとよい）を固定する。　試薬固定領域Ｘ内の試薬
固定部分の配置パターンがこのような構成の容器を使用
し、検体中の被測定物質と標準品希釈系列とを同時に測
定すると、例えば発色の程度により、被測定物質量を標
準品と比較できるので、より正確な半定量を実施するこ
とができる。

第１７ｂ図に示す例は、試薬固定部分を「＋」形に配置
したものである。　この例では、例えば、横に並んだ３
個の試薬固定部分（同図中３１）には、検体中に常に存
在する物質であって、被測定物質とは交差反応しない物
質と結合または反応する試薬を、他の２個の試薬固定部
分（同図中３０）には、被測定物質と選択的に結合また
は反応する試薬を固定する。　このような配置とすると
、被測定物質が検体中に存在する場合は、全て（５個）
の試薬固定部分で結合または反応が起こり、その結合ま
たは反応を発色等によって検出すると、「＋」状に読め
、検体中に被測定物質が存在しない場合には、第１７ｂ
図において、３１で示される３個の試薬固定部分のみで
結合または反応が起こり、ｒ−Ｊ状に読める。　従って
、結果の判定が容易となる。

尚、前記した第８ｂ図に示す例も、同図中で横となって
いる試薬固定部分３１には、検体中に常に存在する物質
であって、被測定物質とは交差反応しない物質と結合ま
たは反応する試薬を、同図中で縦となっている試薬固定
部分３０には、被測定物質と選択的に結合または反応す
る試薬を固定すれば、第１７ｂ図に示す例と同様に、検
体中に被測定物質が存在すると「＋」状、存在しないと
「−」状に読める。

第１７ｃ図に示す例は、第１７ｂ図に示されると同様の
５個の試薬固定部分（同図中３０および３１）の他に、
４個の試薬固定部分（同図中３２）を設けたものである
。　第１７ｃ図中、３２で示された試薬固定部分で結合
または反応が起こり、それに基づく発色等がみられる場
合は、洗浄操作が不十分である等の操作の誤りがあるこ
とを示すように、３２で示された試薬固定部分に適切な
試薬を固定するとよい。

このように、複数の試薬固定部分を有する構成とすると
、多項目同時測定や、検体中の被測定物質と対照物質と
の同時測定が可能である。

尚、通路の毛管部分や試薬固定領域への試薬の固定は、
公知の方法で行えばよく、通常の取扱いで試薬が離脱し
ないように固定できる方法であれば、その固定は、化学
的結合によるものであっても、物理的吸着によるもので
あってもよい。　−例をあげると、加温して吸着させる
方法がある。

また、試薬固定領域を設ける場合の試薬固定領域の大き
さは、通路の他の部分の大きさとも関係するが、例えば
その平面形状が四角形の場合について述べると、−辺が
ｌＯ〜１５ｍｍ程度が好ましい。

以上の構成に加え、本発明の反応容器の通路内であって
、試薬固定部分よりも上流に試薬付着部分があると１反
応容器使用時の反応用溶液等の分注回数を低減すること
ができ、操作がさらに簡便となる。

ここで、試薬付着部分とは、反応に係わる試薬が付着し
ている部分であり、その付着力は、試薬付着部分を液体
が流れることによって、付着している試薬が離脱可能な
程度でなければならない、　従って４例えば、試薬の水
溶液を通路内の適当な場所に付巧し、それを凍結乾燥す
るというような方法で試薬を付着させ、試薬付着部分と
するとよい。

尚、試薬付着部分は、通路内であって、試薬固定部分よ
りも上流側にあればよいので、例えば第３ａ図、第３ｂ
図、第３ｃ図、第３ｄ図、第３ｅ図および第３ｆ図に示
す例は、試薬付着部分４０が毛管部分５２の途中にある
が、この例において、液体滞留部７１内に試薬付着部分
があってもよい。

また、第９ｂ図に示す例のように、流体入口１０よりも
上流側の通路内に、試薬付着部分４０を設けてもよい。

　このような構成とすると、試薬付着部分４０に付着せ
られた試薬は、検体中の被測定物質が試薬固定部分３０
の試薬が充分反応した後に試薬固定部分３ｏに到達する
。

さらに、第６ｂ図、第７ｂ図および第８ｂ図に示す例の
ように、通路の途中に大容積部を設け、該大容積部を試
薬付着領域Ｓ、Ｔとし、該試薬付着領域Ｓ、Ｔ内に試薬
付着部分４ｏ、４１を設けてもよい。　そして、１個の
試薬付着領域内には１ケ所だけ試薬が付着されるとは限
らず、第８ｂ図のように、試薬付着領域Ｔ内に２個の試
薬付着部分４１があってもよい。　このような反応容器
が例えば検体中の抗原をサンドイツチ法によってＥＩＡ
法で測定する容器であれば、酵素標識抗体と酵素の基質
とを付着させておくと、検体を添加するだけで、全ての
反応を行なわせ得る。

尚、試薬付着部分に付着される試薬としては、検体中の
被測定物質あるいは試薬固定部分に固定されている試薬
と結合する例えば標識抗原、標識抗体、標識ハブテン、
標識ＤＮＡ等、あるいは、標識剤が酵素である場合の酵
素の基質等があげられる。

また、試薬付着領域が設けられ、その断面積が通路の毛
管部分の断面積よりも大であると、反応が十分行なわれ
得るので好ましい。

ところで、前記試薬固定部分、または前記試薬付着部分
は、通路の毛管部分や試薬固定領域または試薬付着傾城
に所定の試薬を固定または付着させるだけで形成される
が、通路の毛管部分や試薬固定領域および／または試薬
付着領域に凹部および／または小突起集合体を形成し、
凹部あるいは小突起に試薬を固定または付着させて試薬
固定部分または試薬付着部分とすると、検体中の被測定
物質と試薬との接触、反応がより確実に行なわれ得る。

第１８ａ図は、通路５０内に凹部３３ａが設けられた検
体２の凹部形成部分の断面図である。　また、第１８ｂ
図は、通路５０内に小突起３５ａ、３５ｂ、３５ｃが設
けられた構体２の小突起形成部分の断面図である。　さ
らに、第１８ｃ図は、通路５０内に凹部３３ａが設けら
れ、その凹部３３ａに、小突起３５ａ、３５ｂ、３５ｃ
、３５ｄ、３５ｅが設けられた構体２の凹部および小突
起形成部分の断面図である。　このような凹部や小突起
集合体は、公知の方法で作ることが出来、それらは通路
の形成と同時に作ってもよいし、後で作ってもよい。

尚、通路内の所定の位置に凹部を設け、その凹部に試薬
を固定する場合、先に説明した第１７ａ図、第１７ｂ図
および第１７ｃ図のように、試薬固定領域Ｘを形成し、
該試薬固定領域Ｘ内に、凹部３３ａ、３３ｂ、３３ｃ、
３３ｄ、３３ｅ、３３ｆ、３３ｇ、３３ｈ、３３ｉを、
扇形、ｒ＋Ｊ形等に形成することが好ましい。

また、試薬固定部分を小突起集合体で形成する場合も、
小突起集合体を扇形や「＋ｊ形等に配置することが好ま
しい。

小突起集合体３５を構成する個々の小突起３５ａ、　　
３５ｂ、　　３５ｃ、　　３５ｄ、　　３５ｅ　、３５
ｆの形状は、第１９ａ図、第１９ｂ図および第１９ｃ図
に示すように、円柱あるいは角柱、さらには先端がふく
らんだ円柱が適当である。

小突起の横断面の径あるいは辺の大きさは、０．３μｍ
”−□１．Ｏｍｍ程度であるのが好ましい。

小突起の高さは、通路の断面積に関係するが、０．５〜
２．０ｍｍ程度であるのが好ましい。

小突起の間隔の大きさは、この小突起の間に液体が保持
される程度とする。

このような液体の保持は、表面張力や毛細管現象により
生じるものと考えられるから、表面張力や毛細管現象が
働く程度の大きさが好ましい、　しかし、あまり小さす
ぎると、検体や反応用溶液等の液体の小突起間への侵入
がスムーズに行なわれなかったり、Ｂ／Ｆ分離の際の洗
浄が十分に行なわれなかったりする不都合が生ずるので
、そのような不都合の生じない程度の大きさが必要であ
る。　そのような大きさとしては、小突起間の距離が０
．５〜１．５ｍｍ程度であるのが好ましい。

凹部や小突起の集合体を設けると、表面積が大きくなる
ので、固定あるいは付着される試薬量が増え、また、液
体が凹部や小突起間に保持されるので、特に試薬固定部
分（領域）での判定や測定を色によって行なう場合、そ
の深さ（高さ）のために、色が濃くみえるようになり、
測定精度が高くなる。

本発明は、この他、以上説明してきた様々な構成の反応
ユニットが、複数個並列されてなる反応容器も包含する
。　例えば、第２０図や第２１図にその部分平面図を示
す反応容器である。

本発明の反応ユニットが複数個並列されてなる反応容器
では、多数の検体を、あるいは検体と対照溶液または標
準溶液とを、同時に、同条件で反応させつる。

また、通路ごとに固定する試薬をかえれば、第１０図、
第１１図あるいは第１２図に示した容器を用いるよりも
、さらに多項目の同時測定が可能である。

以上、本発明の反応容器の構成について説明してきたが
、次に、本発明の反応容器使用時の液体の動きについて
説明する。

本発明の反応容器を用いる場合、添加された液体の動き
は、概ね５種類に分けられる。

その第一は、例えば第１ａ図や第２ａ図に示される容器
を用いる場合であって、検体等の液体が次々添加され、
通路内が満たされると、順次液体が排出されるものであ
る。

その第二は、第４図で示される例のように、試薬固定部
分３０が通路５０の比較的上流側にあり、通路５０の試
薬固定部分３０よりも下流側が、液体貯留部９０になっ
ている容器における液体の動きである。

検体中の被測定物質が抗原であり、試薬固定部分３０に
は被測定物質に対するモノクローナル抗体が固定され、
試薬付着部分４０には酵素標識モノクローナル抗体が付
着されている場合を例に、第４図について説明する。

■　検体が、同図中■で示される位置まで添加される。

■　洗浄液が添加され、検体の先端は、同図中■で示さ
れる位置となる。

■　酵素の基質溶液が添加され、検体の先端は、同図中
ｍで示される位置となる。

■　洗浄液が添加され、検体の先端は、同図中＋Ｖで示
される位置となる。

■　クロモーゲン溶液が添加され、検体の先端は、同図
中■で示される位置となる。

このように、順次添加された液体は、全て反応容器内に
保持され、流出しない。

尚、第５図に示す例のように、液体貯留部９０の少なく
とも一部が吸水性材料８】が収納された吸水性材料収納
領域８０となっている場合、添加された液体は、順次、
全てが吸水性材料８１に吸収され、保持されるが、液体
の動きは第二の場合と同様である。

その第三は、例えば第６ｂ図や第８ｂ図に示される容器
のように、液体入口が１個で、かつ通路が分岐している
容器における液体の動きである。

検体中の被測定物質が抗原であり、試薬固定領域Ｘ内の
試薬固定部分３０には被測定物質に対するモノクロナー
ル抗体が固定され、試薬付着領域Ｓ内の試薬付着部分４
０には酵素標識モノクロナール抗体が、また、試薬付着
領域Ｔ内の試薬付着部分４１には酵素の基質が付着され
ている場合を例に、第６ｂ図について説明する。

■　検体が流体入口１０から添加され、液体滞留部７０
を満たす。

■　検体が、毛管部分５１および５２を通って試薬付着
領域Ｓに、同時に、毛管部分５１および５５を通って試
薬付着領域Ｔに達する。

■　毛管部分５５、試薬付着領域Ｔが検体で満たされた
後は、検体は、液体滞留部７０→毛管部分５１−毛管部
分５２−試薬付着領域Ｓ−毛管部分５３−試薬固定領域
Ｘ→毛管部分５４−吸水性材料収納領域８０のように動
（。

■　液体滞留部７０および毛管部分５１が空になったら
、続いて切れ目なく、毛管部分５５、試薬付着領域Ｔに
満たされた検体が、毛管部分５２→試薬付看領域Ｓ→毛
管部分５３→試薬固定領域Ｘ→毛管部分５４−吸水性材
料収納領域８０のように動（。

このように、通路を分枝させ、反応の順序に従って試薬
が供給されるように試薬を通路内の適当な位置に付着さ
せておけば、検体のみの添加により、全反応を終了させ
ることができる。

その第四は、前記第三の場合の変形であり、例えば第９
ｂ図に示す例のように、試薬付着部分４０が流体入口１
０よりも上流側にある容器における液体の動きである。

　なお、前記したように、第９ａ図、第９ｂ図および第
９Ｃ図に示す例は、通路上面が直接密閉されていないた
め、特に出口は設けていない。

検体中の被測定物質が抗原であり、試薬固定部分３０に
は被測定物質に対するモノクローナル抗体が固定され、
試薬付着部分４０には蛍光標識モノクローナル抗体が付
着されている場合を例に、第９ｂ図について説明する。

■　検体が流体入口１０から添加され、液体滞留部７０
を満たす。

■　検体が、液体貯留部９０および試薬付着領域Ｔにむ
かって、同図中、液体沸留部７０の左右の通路５０ａお
よび５０ｂに流入する。

■　通路５０ａに流入した検体が、試薬固定領域Ｘに到
達し、検体中の抗原がここに固定され、検体は、さらに
、通路５０ｃ−吸収性材料収納領域８０と移動する。

■　液体滞留部７０が空になったら、続いて切れ目なく
、通路５０ｂにある、蛍光標識モノクローナル抗体を溶
解した検体が、通路５０ａ−試薬固定領域Ｘ→通路５０
ｃ→吸収性材料収納領域８０と移動する。

このように、試薬付着領域Ｔを流体入口ｌＯよりも上流
側に設けると、検体中の被測定物質と標識物との試薬固
定領域Ｘへの到達時間の差が太き（なり、被測定物質が
試薬固定領域Ｘに十分に固定される。

なお、必要に応じ、流体入口１０から洗浄液を添加し、
未反応の蛍光標識モノクローナル抗体を試薬固定領域か
ら十分に除去するとよい。

その第五は、例えば第３ａ図、第３ｂ図および第３Ｃ図
にその分解した各構成部品の平面図を示す例や、第７ａ
図および第７ｂ図にその分解した各構成部品の平面図を
示す例のように、流体入口が複数ある容器における液体
の動きである。

第３ａ図、第３ｂ図および第３ｃ図にその分解した各構
成部品の平面図を示す例では、流体入口１０から添加さ
れた検体が、液体滞留部７０−毛管部分５３−狭隘部６
〇−毛管部分５４−出口２０のように動き、一方、流体
入口１１から添加された緩衝液または反応用溶液等は、
液体滞留部７１→毛管部分５１−狭隘部６１−毛管部分
５２→通路の連通部５６−通路の連通部５７−毛管部分
５４−出口２０のように動く。　従って、流体入口ｌＯ
から添加された検体が試薬固定部分３０を通過した後に
、流体入口１１から添加された液体が試薬固定部分３０
を通過する。

第７ａ図および第７ｂ図にその分解した各構成部品の平
面図を示す例も、流体入口ｌＯから添加された検体が、
はじめに試薬固定領域Ｘを通過し、その後、流体入口１
１から添加された検体、緩衝液または反応用溶液等が試
薬固定領域Ｘを通過する構成である。

また、第１１図も複数の流体入口を有する容器であるが
、このような容器は、試薬固定部分３０．３１．３２の
各々に固定された試薬と各々反応する試薬や検体を混合
して添加することが出来ない場合に有利である。

第１１図に示される容器では、流体入口１０から添加さ
れた検体が試薬固定部分３０．３１．３２を通過した後
に、流体入口１１．１２．１３から添加された反応用溶
液等が試薬固定部分３０．３１．３２を通過するという
ように構成してもよいし、逆に、流体入口１１．１２．
１３から相異なる試薬や検体を添加し、各々試薬固定部
分３０．３１．３２を通過させた後、流体入口１０から
添加された反応用溶液が、試薬固定部分３０．３１．３
２を通過する構成としてもよい。

続いて２本発明の反応容器の使用方法を、被測定物質が
抗原である場合を例に説明する。

本発明の抗体が固定された例えば第１ａ図に示すような
反応容器を使用して、検体中の抗原をサンドイツチ法で
測定する場合の操作手順は、以下の通りである。

■　流体入口１０より、被測定物質である抗原が含有さ
れていることが予測される検体を入れ、通路５０内の試
薬固定部分３０に固定されている抗体と検体中の抗原と
を結合させる。

■　流体入口１０より、標識抗体の溶液を入れ、試薬固
定部分３０に固定されている抗体と結合した抗原と標識
抗体とを結合させる。

■　必要であれば洗浄後、標識の示すシグナルに基づき
、抗原量を測定、あるいは抗原の有無を判定する。

また、競合法で測定する場合の操作手順は、以下の通り
である。

■　流体入口１０より、検体を入れ、毛管通路５０内の
試薬固定部分３０に固定されている抗体と検体中の抗原
とを結合させる。

■　流体入口１０より、標識抗原の溶液を入れ、通路５
０内の試薬固定部分３０に固定されている抗体と結合さ
せる。

■　必要であれば洗浄後、標識の示すシグナルに基づき
、抗原量を測定、あるいは抗原の有無を判定する。

なお、サンドイツチ法の場合は検体と標識抗体を、また
、競合法の場合は検体と標識抗原とを、単一の流体入口
から、同時に流入させてもよい。

ここで、標識とは、色素、放射性同位元素、酵素、蛍光
または発光物質等のいわゆる標識剤を指し、抗体や抗原
、ハブテン等へのこれらの標識剤の結合は、公知の方法
によればよい。

また、標識の示すシグナルの測定は、標識剤が酵素であ
る場合は、基質を添加して酵素活性を測定し、標識剤が
放射性同位元素である場合は、その放射活性を測定し、
標識剤が色素、蛍光または発光物質である場合は、各々
それらを測定すればよい。

第２ａ図に示すような試薬付着部分４０を有する反応容
器を使用して、抗原をサンドイツチ法で測定する場合の
操作手順は、以下の通りである。

■　流体入口１０より、検体を入れ、通路の毛管部分５
２内の試薬付着部分４０に付着されている標識抗体と検
体中の抗原とを結合させ、続いて、試薬固定部分３０に
固定されている抗体と結合させる。

■　必要であれば洗浄後、標識の示すシグナルに基づき
、抗原量を測定、あるいは抗原の有無を判定する。

また、競合法の場合は、試薬付着部分４０に標識抗原が
付着されており、試薬固定部分３０には抗体が固定され
ている反応容器を用い、サンドイツチ法の場合同様、検
体を通路に流入させ、検体中の抗原と標識抗原とを、競
合させて試薬固定部分３０に固定されている抗体と結合
させた後、標識の示すシグナルを測定すればよい。

さらに、第３ａ図、第３ｂ図、第３Ｃ図、第３ｄ図、第
３ｅ図および第３ｆ図に示すような、試薬付着部分４０
に蛍光標識抗体が付着されている反応容器を使用し、抗
原をサンドイツチ法で測定する場合は、流体入口１０よ
り検体を、流体入口１１より緩衝液を流入させれば、試
薬固定部分３０には、まず、検体中の抗原が到達し、こ
こに固定されている抗体と、結合し、その後、蛍光標識
抗体が到達し、ここに固定されている抗原−抗体結合物
と反応するので、必要であれば洗浄後、蛍光強度を測定
すればよい。

第６ａ図、第６ｂ図および第６Ｃ図に示す例の場合は、
流体入口１０から検体を入れるだけでよい、　すなわち
、この例が酵素標識抗体を用いるサンドイツチ法用の容
器である場合、試薬固定領域Ｘの試薬固定部分３０には
モノクローナル抗体が固定され、試薬付着領域Ｓの試薬
付着部分４０には酵素標識抗体、試薬付着領域Ｔの試薬
付着部分４１には酵素の基質が付着されている。　そこ
で、流体入口ｌＯより検体を流入させれば、はじめに検
体中の抗原と試薬付着領域Ｓの試薬付着部分４０にある
酵素標識抗体とが結合し、これが試薬固定領域Ｘの試薬
固定部分３０にあるモノクローナル抗体と結合して固定
され、ここに試薬付着領域Ｔの試薬付着部分４１に付着
されていた基質が到達し、発色等のシグナルを示すので
、そのシグナルを測定すればよい。

多項目同時測定を行う場合は、例えば第１０図に示すよ
うな反応容器を用い、以下のように操作する。

■　流体入口１０より、検体を入れ、検体中の３種の抗
原と、試薬固定部分３０．３１．３２に固定されている
互いに交差反応性を有しない各抗原に対応する抗体とを
、各々結合させる。

■　流体入口ｌＯより、標識抗体３種の混合液を入れ、
試薬固定部分３０．３１．３２に固定されている各抗体
に結合した各抗原と、対応する標識抗体とを結合させる
。

■　必要であれば洗浄後、標識の示すシグナルを測定す
る。

尚、３種の標識抗体の標識剤の種類は、同じであっても
異なっていてもよい、　ま、た、試薬固定部分３０．３
１．３２に、検体中の被測定物質に対応する抗体と対照
物質に対応する抗体とが固定されていれば、被測定物質
と対照物質との同時測定が行える。

また、例えば第７ａ図、第７ｂ図、第７Ｃ図および第７
ｄ図に示すような容器を用い、３種の被測定物質を同時
測定する場合は、以下のように操作する。

■　流体入口１０より、検体を入れ、必要に応じて撹拌
を行ない、検体中の３種の抗原と試薬付着領域Ｓの試薬
付着部分４０に付着されている、例えば前記３種の抗原
の共通認識部位に対して形成された酵素標識抗体とを結
合させる。　続いて、３種の抗原−酵素標識抗体結合物
を、試薬固定領域Ｘの試薬固定部分３０．３１．３２に
固定された３種の抗原の非共通認識部位に対して形成さ
れた抗体と結合させ、固定する。

■　流体入口１１より、検体または緩衝液を入れ、試薬
付着領域Ｔの試薬付着部分４１に付着されている酵素の
基質を溶解する。　酵素の基質は、前記抗原−酵素標識
抗体結合物が試薬固定領域Ｘの試薬固定部分３０．３１
．３２に固定された後に、試薬固定領域Ｘに到達する。

■　必要であれば洗浄後、その状態が第７ｃ図から第７
ｄ図に変化したら、基質の示すシグナルを測定する。

このような反応容器は、検体が乳幼児の血清である場合
等、少量である場合に有効である。

尚、上記反応容器において、試薬付着領域Ｓには、３種
の抗原の非共通認識部位に対して形成された３種の標識
抗体の混合物が付着されていてもよい。　さらには、上
記反応容器は、１種または２種の被測定物質を測定する
ために、試薬固定領域Ｘや試薬付着領域Ｓに、各々１種
または２種の試薬が固定されたものであってもよい。

検体と標準溶液とを同時測定する場合は、例えば第１１
図に示すような反応容器を用い、以下のように操作する
。

■　流体入口１１より検体を、流体入口１２および１３
より、濃度の異なる標準溶液を入れ、試薬固定部分３０
．３１．３２に固定されている同一の抗体と、各々の試
料（検体および標準溶液）中の抗原とを結合させる。

■　流体入口１０より、単一の標識抗体の溶液を入れ、
試薬固定部分３０．３１．３２に固定されている抗体に
結合した抗原と結合させる。

■　必要であれば洗浄後、標識の示すシグナルを測定す
る。

以上、本発明の反応容器について説明してきたが、ここ
で、図示した好適実施例について、簡単にその特徴を述
べる。

第１ａ図および第１ｂ図に示された例は、本発明の反応
容器の最も単純なものである。

第２ａ図、第２ｂ図および第２ｃ図に示された例は、液
体滞留部７０．狭隘部６０および試薬付着部分４０を有
するので、流速が制御され、十分な反応時間が確保され
、かつ反応用試薬の添加回数が少なくてすむ。

第３ａ図、第３ｂ図、第３ｃ図、第３ｄ図、第３ｅ図お
よび第３ｆ図に示された例は、流体入口が２ケ所あるの
で、複数の液体を同時に添加できる。

第４図、第５図、第６ａ図、第６ｂ図および第６Ｃ図、
第７ａ図、第７ｂ図、第７Ｃ図および第７ｄ図、さらに
は第８ａ図、第８ｂ図、第８ｃ図、第８ｄ図および第８
ｅ図に示された例や、第９ａ図、第９ｂ図および第９ｃ
図に示された例は、液体貯留部があるので、添加された
液体が容器外に流出しない。　そのため、汚染や感染が
生じないので好ましい。

また、第６ａ図、第６ｂ図および第６Ｃ図、第７ａ図、
第７ｂ図、第７ｃ図および第７ｄ図、第８ａ図、第８ｂ
図、第８ｃ図、第８ｄ図および第８ｅ図に示された例は
、通路の液体滞留部を含む上流通路部分と、液体貯留部
を含む下流通路部分が、構体の重心の互いに反対側に存
在する反応容器であり、前記流体入口から液体滞留部に
流入した液体が、橋体内の通路を経て所定の反応を行な
いつつ液体貯留部に向って流れ、所定の反応が実質的に
終了した時に、流入した液体の移動の結果として、構体
の液体貯留部の存在する側が下降するように揺動手段が
設けられているものである。　揺動手段は、脚（第６０
図中９８）、曲面を有する台（第７Ｃ図参照、ただし、
第７Ｃ図は割型と台が一体成形されている）、あるいは
平面を有する台（第８ｄ図中９ｂ）である。

さらに、第６ａ図、第６ｂ図および第６Ｃ図に示された
例では、検体のみの１回の添加で全工程の反応を終了さ
せつるという特徴も有し、また、このような容器を型成
形するに際し、出口２０が第６ｂ図中で示される位置に
あるために、離型を行ない易いという特徴もある。

第７ａ図、第７ｂ図、第７Ｃ図および第７ｄ図に示され
た例は、さらに、検体が少量であっても、多項目同時測
定を行なえる点、および通路の一部が親水性条体５９で
代替されているので、流速が精密に制御され、反応の精
度が高いという特徴も有する。　また、型成形の場合の
離型性については、第６ａ図、第６ｂ図および第６ｃ図
に示された例と同様である。

第８ａ図、第８ｂ図、第８Ｃ図、第８ｄ図および第８ｅ
図に示された例は、検体のみの１回の添加で全工程の反
応を終了させ得る点、また、二種の被測定物質を同時に
測定し得るという特徴を有する。　さらに、この例も、
第７ａ図、第７ｂ図、第７Ｃ図および第７ｄ図に示され
た例と同様に、通路の一部が親水性条体５９で代替され
ているので、流速が精密に制御され得る。

第９ａ図、第９ｂ図および第９ｃ図に示された例は、被
測定物質と試薬固定領域Ｘに固定された試薬との反応時
間を十分に確保できるという特徴を有する。

第１Ｏ図や第１２図に示された例は、単純な構成である
が、多項目同時測定が行なえるという特徴がある。

第１１図に示された例は、多項目同時測定に用いれば、
互いに干渉する被測定物質を同時に測定できるという特
徴があり、また、別の用途として、多種検体の同時測定
にも供せるという特徴を有する。

第２０図や第２１図に示された例は、集団健診等に有用
な、多項目、多検体同時測定が可能な容器である。

このように、本発明の反応容器は、その構成がバリエー
ションに冨んでおり、いろいろな測定方法に適応させる
ことができる。

本発明の反応容器は、手作業による測定、判定はもちろ
んのこと、自動化装置による測定、判定にも用いること
ができる。　例えば特開昭６３−６９５３９号公報記載
の化学反応装置において、毛細管のかわりに本発明の反
応容器を搬送手段に保持させれば、自動化測定が可能で
ある。

具体的には、ベルトコンベア等の搬送手段と、検体、試
薬、洗浄液等の供給部と、例えば光学的な測定手段とを
有する装置に、通路内に抗体が固定され、酵素標識抗体
が付着された本発明の反応容器を載せ、抗原を含有する
ことが予測される検体、洗浄液、酵素の基質溶液を順次
自動的に注入した後、基質の示す色を吸光度として測定
すればよい。　尚、注入された液体は、出口から吸引除
去してもよい。　測定値は、必要であればコンピュータ
によって解析し、診断の一部とする。

〈実施例〉 以下に、実施例に基づき、本発明を具体的に説明する。

（実施例１） 第２ａ図、第２ｂ図および第２Ｃ図に示す形状の反応容
器を用いる妊娠反応について説明する。

■　反応容器の製造 白色のプラスチック（ポリアクリル樹脂製）からなる割
型５の通路の毛管部分５２の試薬固定部分３０に、モノ
クローナル抗ヒト絨毛性ゴナドトロピン（ｈＣＧ）抗体
を、抗体を不溶化担体に結合させるための公知の方法に
より固定化する。

次に、同じく割型５の通路の毛管部分５２の試薬付着部
分４０に、アルカリフォスファターゼで標識されたモノ
クローナル抗ｈＣＧ抗体（以下、標識抗体Ａという）の
溶液（５０μｇ／ｍ℃）を０．０５ｍβ滴下する。

これを凍結乾燥した後、上部に、無色透明のプラスチッ
ク（ポリアクリル樹脂製）からなる割型４を接着する。

尚、通路の毛管部分５１および５２は、各々横幅３ｍｍ
、深さ０．２ｍｍである。

■　　測　　定 妊娠した女性の尿少量をピペットに採取し、流体入口１
０から滴下し、液体滞留部７０に充満させる。　尿は、
狭隘部６０で進入速度をコントロールされ、徐々に通路
の毛管部分５２内に進入する。　尿が試薬付着部分４０
に達すると、ここに付着されている標識抗体Ａを溶解し
、標識抗体Ａを尿中のｈＣＧと結合させながら、さらに
通路の毛管部分５２内を進入する。

尿が試薬固定部分３０に達すると、ｈＣＧと標識抗体Ａ
との結合物が、ここに固定されているモノクローナル抗
ｈＣＧ抗体と結合し、固定化される。　その後、尿はさ
らに通路の毛管部分５２内を進入し、固定化されなかっ
た余分の標識抗体Ａを多量に溶解している尿は、出口２
０に達する。　尚、液体滞留部７０が空になると、尿の
進入は停止する。

次に、酵素の基質であるクロモーゲンＢ（ｊＰ　（５−
ｂｒｏｍｏ−４−ｃｈｌｏｒｏ−３−ｉｎｄｏｌｙｌ　
Ｐｈｏｓｐｈａｔｅ）の溶液（以下、基質溶液Ａという
）を液体滞留部７０に充満すると、該基質溶液Ａが通路
の毛管部分５２内に進入すると同時に、尿が再び進入し
、ついには尿全てが排出される。

前記基質溶液Ａが試薬固定部分３０に達すると、ここに
固定化された酵素の働きでＢＣＩＰが青色に変色する。

　これは、尿中にｈＣＧが存在することを示し、妊娠と
判定することができる。　妊娠していない人の尿を用い
ると、尿中にｈ　ＣＧが存在しないので、標識抗体Ａは
試薬固定部分３０に固定化されず、全て出口２０から流
出してしまう。　従って、試薬固定部分３０は着色しな
い。

（実施例２） 第３ａ図、第３ｂ図、第３Ｃ図、第３ｄ図、第３ｅ図お
よび第３ｆ図に示す形状の反応容器を用いる妊娠反応に
ついて説明する。　ただし、図示されている試薬付着部
分４０の他に、液体滞留部７０内にも試薬が付着された
試薬付着部分を有する容器を用いた。

■反応容器の製造 白色のプラスチック（ポリスチレン樹脂製）からなる割
型５の通路の毛管部分５４の試薬固定部分３０に、モノ
クローナル抗ｈＣＧ抗体を、抗体を不溶化担体に結合さ
せるための公知の方法により固定化する。

次に、同じく割型５の液体滞留部７０内に、標識抗体Ａ
（既出）の溶液（１００μｇ／ｍＡ）を０．０５ｍ４２
滴下し、狭隘部６０より先に進入しないように注意して
凍結乾燥する。　これとは別に１図中７で示した部分は
透明で、他は白色のプラスチックからなる割型４の通路
の毛管部分５２の試薬付着部分４０に、基質溶液Ａ（既
出、１０μｇ　／　ｍ　Ｑ　）を滴下し、凍結乾燥する
。

上記処理を行なった割型５の上に割型４を接着し、さら
にその上に、図中６で示した部分は透明で、他は白色の
プラスチック（ポリスチレン樹脂製）からなる蓋体３を
接着する。

尚、通路の毛管部分５１．５２．５３．５４は、各々横
幅２ｍｍ、深さ０．２ｍｍである。

■　　測　　定 妊娠した女性の尿少量をピペットに採取し、流体入口１
０から滴下し、液体滞留部７０に充満させると同時に、
ここに付着されている標識抗体Ａを溶解する。　ついで
、直ちに、同じ尿を流体入口１１から滴下し、液体滞留
部７１に充満させる。

液体滞留部７０に充満された尿は、狭隘部６０を通り、
徐々に通路の毛管部分５４内に進入する。　この際、尿
中のｈＣＧと標識抗体Ａが結合しながら、通路の毛管部
分５４内を進入する。　尿が試薬固定部分３０に達する
と、ｈＣＧと標識抗体Ａとの結合物が、ここに固定され
ているモノクローナル抗ｈＣＧ抗体と結合し、固定化さ
れる。　その後、尿はさらに通路の毛管部分５４内を進
入し、固定化されなかった余分の標識抗体Ａを多量に溶
解している尿は、出口２０に達する。

一方、液体滞留部７１に充満された尿は、狭隘部６１を
通り、通路の毛管部分５２内を蛇行して前進し、試薬付
着部分４０に到達し、ここに付着されているＢＣＩＰ　
（基質、既出）を溶解する。　尿は、通路の連通部５６
．５７を経て、通路の毛管部分５４内に進入する。　尚
、通路の毛管部分５２の全長は、通路の毛管部分５４の
全長より長（しである。　従って、基質を溶解した尿は
、標識抗体Ａを溶解した尿全てが試薬固定部分３０を通
過した後、試薬固定部分３０に到達する。

基質を溶解した尿が試薬固定部分３０に達すると、ここ
に固定化された酵素の働きで、基質は時間の経過と共に
青色に変化し、尿中にｈＣＧが存在すること、即ち使用
された尿が妊娠尿であることが、蓋体３の６部分および
割型４の７部分を通して確認される。　尿中にｈＣＧが
存在しない場合は、標識抗体Ａは試薬固定部分３０に固
定化されず、全て出口２０から流出してしまう。　従っ
て、試薬固定部分３０は青色とならない。

（実施例３） 第２０図に示す形状の反応容器を用いる癌マーカー３種
の同時自動化測定について説明する。

■　反応容器の製造 白色のプラスチック（ポリスチレン樹脂製）からなる割
型のひとつの通路５０内の試薬固定部分３０．３１．３
２に、ｈＣＧ、ＣＥＡ、ａ−フェトプロティン（以下３
種の癌マーカーという）に対するモノクローナル抗体を
、抗体を不溶化担体に結合させるための公知の方法によ
り、各々固定化する。　他の通路５０内にも、同様に、
３種の癌マーカーを固定化する。

次に、上記の割型の上部に、無色透明のプラスチック（
ポリスチレン樹脂製）からなる蓋体を接着する。

このようにして得られた反応容器１は、横幅３ｍｍ、深
さ０．３ｍｍの通路５０が、平行に１０本並んだもので
ある。

■　自動化測定装置 ここで用いる自動化測定装置は、一定のピッチで縦横に
動かすことのできる搬送手段と、検体、試薬、洗浄液等
の供給部と１毛管通路内の流体を出口から吸引する吸引
手段と、光学的な測定手段とを有する。

尚、ここで用いる自動化測定装置は、測定手段を除き、
１０検体を同時に処理できる構造となっている。

■　　測　　定 自動化装置の搬送手段に、反応容器を載置する。

反応容器が搬送され、所定の位置に達すると、ヒト血清
ＮＩＩＬＩ〜Ｎｌｌ０が、検体供給部にある１０本の検
体供給用ノズルから、各流体入口１０を経て各通路５０
に供給され、血清中の被測定物質（３種の癌マーカー）
が、試薬固定部分３０．３１．３２に固定された各抗体
に結合し、固定化される。

５分経過後（この間に、反応容器は洗浄液供給部まで搬
送される）、ヒト血清ＮＬＬ１〜ＮＩＬＩＯは、各通路
５０の各出口２０から吸引除去される。　続いて、各通
路５０に洗浄液が供給され、これも吸引除去される。　
尚、洗浄、吸引操作は５回行われる。

反応容器が試薬供給部まで搬送されると、酵素標識抗体
（この場合、前記ｈＣＧ、ＣＥＡ、α−フェトプロティ
ン各々に対する抗体にアルカリフォスファターゼを標識
したものの混合物）を溶解した緩衝液が供給される。

酵素標識抗体は、対応する癌マーカーと結合すること゛
により、試薬固定部分３０．３１．３２に固定されてい
る抗体と結合し、固定化される。　癌マーカーが固定化
されていない固定化抗体とは結合しない。

５分経過後（この間に、反応容器は洗浄液供給部まで搬
送される）、酵素標識抗体溶液は吸引除去される。　続
いて、各通路５０に洗浄液が供給され、これも吸引除去
される。　面、洗浄、吸引操作は５回行われる。

この操作が終了し、反応容器が試薬供給部まで搬送され
ると、各通路５０に基質溶液Ａ（既出）が供給される。

本実施例の場合、癌マーカーが存在するために酵素標識
抗体が固定化された試薬固定部分は青色に変化する。　
この青色の呈色は、検体血清中に含有される癌マーカー
の濃度に比例する。

次に、反応容器は測定手段の位置まで搬送される。　こ
こで、試薬固定部分３０．３１゜３２の呈色が連続的に
測光され、各血清中の各癌マーカーが定量される。

反応容器は順次自動送りされ、次々と多数の血清が処理
される。

（実施例４） 第２１図に示す形状の反応容器を用いる癌マーカー３種
の同時自動化測定について説明する。

■　反応容器の製造 白色のプラスチック（ポリスチレン樹脂製）からなる割
型の第１ユニツト１００の通路の毛管部分５２．５３．
５４内の各試薬固定部分３０．３１．３２に、各々、ｈ
ＣＧ、ＣＥＡ、α−フェトプロティン（以下３種の癌マ
ーカーという）に対するモノクローナル抗体を、抗体を
不溶化担体に結合させるための公知の方法により固定化
する。　同様に、第２ユニツト２００以降のユニット同
様の通路内にも、同位置に、３種の癌マーカーを固定化
する。

次に、上記の割型の上部に、無色透明のプラスチック（
ポリスチレン樹脂製）からなる蓋体を接着する。

尚、このようにして得られた反応容器ｌの通路の毛管部
分５１．５２．５３．５４は、各々横幅５ｍｍ、深さ０
．５ｍｍである。

■　自動化測定装置 ここで用いる自動化測定装置は、一定のピッチで動かす
ことのできる搬送手段と、検体、試薬、洗浄液等の供給
部と、毛管通路内の流体を出口から吸引する吸引手段と
を有する。

■　　測　　定 自動化装置の搬送手段に、反応容器を載置する。

反応容器が搬送され、所定の位置に達すると、ヒト血清
胤、１が、検体供給部から、第１ユニツト１００の流体
入口１０を経て第１ユニツト１００の通路の毛管部分５
１に供給される。

血清は、通路の毛管部分５１から通路の毛管部分５２．
５３．５４に進入し、試薬固定部分３０．３１．３２に
到達すると、血清中の被測定物質（３種の癌マーカー）
が、試薬固定部分３０．３１．３２に固定された各抗体
に結合し、固定化される。

２．５分経過後（この間に、反応容器１は、洗浄液供給
部Ａに第１ユニツト１００の流体入口１ｏが、検体供給
部に第２ユニツト２００の流体入口１０が位置するよう
搬送される）、ヒト血清胤２が、検体供給部から、第２
ユニツト２００の流体入口ｌＯを経て第２ユニツト２０
０の通路の毛管部分５１に供給される。

同時に、第１ユニツト１００の出口２０゜２１．２２か
らのヒト血清Ｎｏ、　　１の吸引除去操作と、それに続
く第１ユニツト１００の流体入口１０からの洗浄液の供
給および出口２０．２１．２２からの吸引除去（５回）
が行なわれる。

さらに、ヒト血清Ｎα、１の吸引除去操作後２．５分が
経過したら（この間に、反応容器１は、試薬供給部Ａに
第１ユニツト１００の流体入口１１．１２．１３が、検
体供給部に図示しない第３ユニツトの流体入口が位置す
るよう搬送される）、第１ユニツト１００の流体入口１
１から、ｈＣＧに対する抗体にアルカリフォスターゼを
標識したものを溶解した緩衝液が、流体入口１２から、
ＣＥＡに対する抗体にアルカリフォスターゼを標識した
ものを溶解した緩衝液が、流体入口１３から、α−フェ
トプロティンに対する抗体にアルカリフォスターゼを標
識したものを溶解した緩衝液が供給される。

これらの酵素標識抗体は、対応する癌マーカーと結合す
ることにより、試薬固定部分３０．３１．３２に固定さ
れている抗体と結合し、固定化される。　癌マーカーが
固定化されていない固定化抗体とは結合しない。

酵素標識抗体供給後２．５分が経過したら（この間に、
反応容器１は、洗浄液供給部Ｂに第１ユニツト１００の
流体入口１０が、検体供給部に図示しない第４ユニツト
の流体入口が位置するよう搬送される）、第１ユニツト
１００の出口２０．２１．２２からの酵素標識抗体を溶
解した緩衝液の吸引除去操作と、それに続く第１ユニツ
ト１００の流体入口ｌＯからの洗浄液の供給および出口
２０．２１．２２からの吸引除去（５回）が行われる。

さらに、酵素標識抗体を溶解した緩衝液の吸引除去操作
後２．５分が経過したら（この間に、反応容器１は、試
薬供給部Ｂに第１ユニツトｌＯＯの流体入口１０が、検
体供給部に図示しない第５ユニツトの流体入口が位置す
るよう搬送される）、第１ユニツト１００の流体入口１
０から、基質溶液Ａ（既出）が供給される。

本実施例の場合、癌マーカーが存在するために酵素標識
抗体が固定化された試薬固定領域には、基質が固定化さ
れ、青色に着色する。

この着色は、基質溶液Ａを除去した後も残留するので、
基質溶液Ａ供給後２．５分が経過したら（この間に、反
応容器１は、洗浄液供給部Ｃに第１ユニツト１００の流
体入口１０が、検体供給部に図示しない第６ユニツトの
流体入口が位置するよう搬送される）、第１ユニツト１
００の出口２０．２１．２２からの基質溶液Ａの吸引除
去操作と、それに続く第１ユニツト１００の流体入口１
０からの洗浄液の供給および出口２０．２１．２２から
の吸引除去（５回）までを自動化装置に行わせた後、肉
眼で試薬固定部分３０．３１．３２を観察し、癌マーカ
ーの有無を判定する。

尚、第２ユニツト２００以降の通路に供給された血清も
、順次、ワンステップ遅れで同様に処理される。

（実施例５） 第２ａ図、第２ｂ図および第２Ｃ図に示す形状の反応容
器を用いるＢ型肝炎診断について説明する。

■　反応容器の製造 白色のプラスチック（ポリスチレン樹脂製）からなる割
型５の通路の毛管部分５２の試薬固定部分３０に、Ｂ型
肝炎ウィルスＤＮＡに対応するＤＮＡ片の熱変性溶液（
５μｇ／ｍｌ２）を２０１Ｌρ滴下し、２５℃で２４時
間静置した後、吸引除去を行い、さらに紫外線照射を行
い、ＤＮＡ片を固定する。

次に、同じく割型５の通路の毛管部分５２の試薬付着部
分４０に、ビオチン標識したＢ型肝炎ウィルスのＤＮＡ
プローブの溶液（０，０２ｕ　ｇ　／　ｍ　Ｅ　）をｌ
Ｏμｎｆ４下する。

これを凍結乾燥した後、上部Ｉこ、無色透明のグラスチ
ック（ポリスチレン樹脂製）からなる蓋体３を接着する
。

尚、通路の毛管部分５１および５２は、各々横幅３ｍｍ
、深さ０．２ｍｍである。

■　　測　　定 肝炎患者の血清よりＤＮＡを抽出し、検体とした。

検体を、流体入口１０から滴下し、液体滞留部７０に充
満させる。　検体は、狭隘部６０で進入速度をコントロ
ールされ、徐々に通路の毛管部分５２内に進入する。　
検体が試薬付着部分４０に達すると、ここに付着してい
るビオチン標識ＤＮＡプローブを溶解し、ビオチン標識
ＤＮＡプローブとＢ型肝炎ウィルスとを結合させながら
、さらに通路の毛管部分５２内を進入する。　検体が試
薬固定部分３０に達すると、ここに固定されているＢ型
肝炎ウィルスに対応するＤＮＡ片に結合し、固定化され
る。　その後、検体はさらに通路の毛管部分５２内を進
入し、固定化されなかった余分のビオチン標識プローブ
を多量に溶解している検体は、出口２０に達する。　尚
、液体滞留部７０が空になると、検体の進入は停止する
。

次に、あらかじめ調製しておいたアビジン−ビオチン標
識ペルオキシダーゼ結合体溶液（ｌ　ＯＯｕｇ／ｍｌ２
）を流体入口１０から滴下し、液体滞留部７０に充満さ
せる。　アビジン−ビオチン標識ペルオキシダーゼ結合
体溶液が通路の毛管部分５１内に進入すると同時に、検
体が再び進入し、ついには検体全てが排出される。

アビジン−ビオチン標識ペルオキシダーゼ結合体が試薬
固定部分３０に達すると、ここに固定化されているビオ
チンに結合し、固定化される。　その後、アビジン−ビ
オチン標識ペルオキシダーゼ結合体溶液は、さらに通路
の毛管部分５２内を進入し、出口２ｏに達する。　尚、
液体滞留部７０が空になると、アビジン−ビオチン標識
ペルオキシダーゼ結合体溶液の進入は停止する。

この後、０．０７６Ｍリン酸緩衝生理食塩水（ｐＨ７，
０）（ＰＢＳ）を流体入口１０から滴下し、液体滞留部
７ｏに充満させる。

ＰＢＳは徐々に通路の毛管部分５１がら狭隘部６０を通
って通路の毛管部分５２内に進入し、アビジン−ビオチ
ン標識ペルオキシダーゼ結合体溶液を押し出す。　ＰＢ
Ｓが試薬固定部分３０に達すると、洗浄が開始される。

　その後、ＰＢＳは、さらに通路の毛管部分５２内を進
入し、出口２ｏに達する。　尚、液体滞留部７０が空に
なると、ＰＢＳの進入は停止する。

液体滞留部７ｏが空になったら、過酸化水ｇ（基質）と
オルトフェニレンジアミン（クロモーゲン）との混合溶
液を液体滞留部７ｏに充満させる。　該混合溶液が通路
の毛管部分５１内に進入すると同時に、ＰＢＳは排出さ
れる。

前記混合溶液が試薬固定部分３０に達すると、ここ、に
固定化された酵素の働きで、クロモーゲンが黄色に変色
する。　これは、血清中にＢ型肝炎ウィルスが存在する
ことを示し、感染性が強いと判定することができる。　
血清中にＢ型肝炎ウィルスが存在しない場合は、酵素は
試薬固定部分３０に固定化されず、全て出口２０から流
出してしまう。　従って、試薬固定部分３０は着色しな
い。

（実施例６） 第８ａ図、第８ｂ図、第８ｃ図、第８ｄ図および第８ｅ
図に示す形状の反応容器を用いるＬＨの測定について説
明する。

■　反応容器の製造 形成型により、無色透明のプラスチック（エポキシ樹脂
製）からなる蓋体３と割型４、Ｓを成形する。　尚、通
路の毛管部分５１．５２．５３．５４および５５は、各
々横幅０．７ｍｍ、深さ０．７ｍｍである。　次に、割
型４の通路の中空室５８を含む毛管部分５５に、直径０
．５ｍｍの円形の断面を有する木綿製糸（親水性条体５
９）を、接着剤で固定する。

割型４の試薬固定領域Ｘの試薬固定部分３０（この部分
は、割型４の下側に通路が形成されている）に抗ＬＨ−
β抗体を、抗体を不溶化担体に結合させるための公知の
方法によって固定化した後、割型５を接着する。　また
、試薬固定部分３１（この部分は、割型４の上側に通路
が形成されている）に抗マウスＩｇＧ抗体を、抗体を不
溶化担体に結合させるための公知の方法により固定化す
る。

次に、同じ（割型４の試薬付着領域Ｓに、アルカリフォ
スファターゼで標識されたモノクローナル抗ＬＨ−〇抗
体（以下、標識抗体Ｂという）溶液（ｌｏｌｉｇ／ｍｇ
）を０．５ｍｊ２滴下する。

さらに同しく割型４の試薬付着領域Ｔに、基質溶液Ａ（
既出、２　ｍ　ｇ　／　ｍ　１２　）を０．２ｍｊ２滴
下し、凍結乾燥する。

その後、同じく割型４の吸水性材料収納領域８０に不織
布を３０ｍｇ収納し、蓋体３を接着し、さらに台９ｂを
接着する。

■　　測　　定 尿をピペットに４００μρ採取し、流体入口１０から滴
下し、液体滞留部７０に充満させる。　尿は、通路の毛
管部分５１内に侵入し、通路の毛箸部分５２を通って試
薬付着領域Ｔに達し、ここに付着されているＢＣｒＰ（
基質、既出）を溶解する。　試薬付着領域Ｔが尿で満た
されると、液体滞留部７０内の尿は試薬付着領域Ｓに達
し、ここに付着されている標識抗体Ｂを溶解するが、同
時に尿中のＬＨが標識抗体Ｂと結合する。　尿は、さら
に、通路の毛管部分５３、試薬固定部分３０、通路の毛
管部分５４、試薬固定部分３１．木綿製糸（親水性条体
５９）を通って吸水性材料収納領域８０に達し、不織布
（吸水性材料８］）に吸収、保持される。　この過程で
、ＬＨと標識抗体Ｂとの結合物（Ｌ　Ｈ−標識抗ＬＨ−
〇抗体）は、試薬固定部分３０に固定されている抗ＬＨ
−β抗体と結合し、同時に、試薬固定部分３１に固定さ
れている抗マウスＩｇＧ抗体と結合し、各々固定化され
る。　液体滞留部７０が空になると、基質を溶解した尿
が試薬付着領域Ｔから流出し、通路の毛管部分５２、通
路の毛管部分５１、試薬付着領域Ｓ、通路の毛管部分５
３、試薬固定部分３０、通路の毛管部分５４、試薬固定
部分３１、木綿製糸（親水性条体５９）を通って吸水性
材料収納領域８０に達し、不織布（吸水性材料８ｉ）に
吸収、保持される。　この過程で、基質は試薬固定部分
３０および３１に固定化された酵素の働きで青色に変色
し、「＋」と読める。　これは、尿（検体）中にＬＨが
存在することを示し、陽性と判定することができる。　
一方、ＬＨが存在しない人の尿を用いると、標識抗体Ｂ
は試薬固定部分３０に固定化されずに試薬固定部分３１
にだけ固定化される。

従って、基質は試薬固定部分３１に固定化された酵素の
働きで青色に変色するが、試薬固定部分３０は着色せず
、「−」と読める。

尚、全反応時間は約５分間であり、尿中のＬＨが５０ｍ
ＩＵ／ｍρ以上の濃度であれば、「＋」と判定すること
ができる。

〈発明の効果〉 本発明により、感度の高い測定を、操作、特にＢ／Ｆ分
離操作を正確にしかも簡便に行うことができる反応容器
が提供される。

本発明の反応容器は、様々な反応、例えばＥＴＡや核酸
ハイブリダイゼーションの機構を利用した検出方法に広
く適用可能であり、簡便な操作での多項目測定にも適用
でき、さらに、測定機器を使用しない測定にも、自動測
定機器を使用する測定にも適用可能であるので、非常に
有用性が高い。

本発明の反応容器は、定性的判定はもとより定量的測定
にも適用可能であり、特に、従来困難であった定量的測
定の簡便化を達成したという点で、非常に有益である。

【図面の簡単な説明】

第１ａ図は、本発明の一実施例の斜視図、第１ｂ図は、
その通路部分の断面図である。 第２ａ図は、本発明の一実施例の斜視図、第２ｂ図およ
び第２ｃ図は、そのＡ−Ａ線およびＢ−Ｂ線における矢
視図である。 第３ａ図、第３ｂ図および第３ｃ図は、本発明の一実施
例の分解した各構成部品の平面図、第３ｄ図は、その側
面図、第３ｅ図および第３ｆ図は、そのＣ−Ｃ線および
Ｄ　−Ｄ　Ｉ！における矢視図である。 第４図は、本発明の一実施例の斜視図である。 第５図は、本発明の一実施例の平面図である。 第６ａ図および第６ｂ図は、本発明の一実施例の分解し
た各構成部品の平面図、第６ｃ図は、その側面図である
。 第７ａ図及び第７ｂ図は、本発明の一実施例の分解した
各構成部品の平面図、第７ｃ図および第７ｄ図は、その
側面図である。 第８ａ図、第８ｂ図および第８Ｃ図は、本発明の一実施
例の分解した各構成部品の平面図、第８ｄ図は、その側
面図、第８ｅ図は、第８ｂ図のＡ部分の拡大断面図であ
る。 第９ａ図および第９ｂ図は、本発明の一実施例の分解し
た各構成部品の平面図、第９ｃ図は、そのＸ−Ｘ線にお
ける断面図である。 第１０図は、本発明の一実施例の平面図である。 第１１図は、本発明の一実施例の平面図である。 第１２図は、本発明の一実施例の平面図である。 第１３ａ図、第１３ｂ図および第１３ｃ図は、本発明の
反応容器の通路形状の一例を示す平面図である。 第１４ａ図、第１４ｂ図、第１４ｃ図、第１４ｄ図、第
１４ｅ図および第１４ｆ図は、本発明の反応容器の通路
形状の一例を示す断面図である。 第１５図は、本発明の反応容器の一形成方法を説明する
ための分解断面図である。 第１．６　ａ図は、本発明の反応容器の一形成方法を説
明するための分解斜視図、第１６ｂ図は、その反応容器
の通路部分を示す断面図である。 第１．７　ａ図、第１７ｂ図および第１７ｃ図は、複数
の試薬固定部分の配置パターンを説明するための模式図
である。 第１８ａ図は、通路に設けられた凹部な、第１８ｂ図は
、通路に設けられた小突起集合体を、そして、第１８ｃ
図は、通路に設けられた凹部および小突起集合体を説明
するための断面模式図である。 第１９ａ図、第１９ｂ図および第１９ｃ図は、小突起集
合体の一例を示す模式図である。 第２０図は、 である。 第２１図は、 である。 本発明の一実施例の部分平面図 本発明の一実施例の部分平面図 符号の説明 １・・・反応容器、 ２・・・構体、 ３・・・（構体の）蓋体、 ４．５・・・（構体の）割型、 ６．７・・・試薬固定部分に対応する部分。 ８・・・シート、 ９ａ・・・脚、 ９ｂ・・・台、 ｉｏ、１１．１２．１３・・・流体入口、２０．２１．
２２・・・出口、 ｘ、ｙ、ｚ・・・試薬固定領域、 ３０．３１．３２・・・試薬固定部分、３３ａ、３３ｂ
、３３ｃ、３３ｄ、３３ｅ、３３ｆ、３３ｇ、３３ｈ、
３３ｉ・・・凹部、３５・・・小突起集合体、 ３５ａ、３５ｂ、３５ｃ、３５ｄ、３５ｅ、３５ｆ・・
・小突起、 Ｓ、Ｔ・・・試薬付着領域、 ４０．４１．４２・・・試薬付着部分、５０．５０ａ、
５０ｂ、５０　ｃ−通路、５１．５２．５３．５４．５
５・・・毛管部分、５６．５７・・・通路の連通部、 ５８・・・中空室、 ５９・・・親水性条体、 ６０．６１・・・狭隘部、 ６３・・・突状部 ６５・・・接着剤、 ６７・・・隔壁、 ７０．７１・・・液体滞留部、 ８０・・・吸水性材料収納領域、 ８１・・・吸水性材料、 ９０・・・液体貯留部、 １００・・・第１ユニツト、 ２００・・・第２ユニツト Ｆ　Ｉ　Ｇ、　１ａ 〆 ＦＩＧ、１ｂ ５０（５１） ２ ０ ７６０５３ ＦＩＧ、３ｄ １ ０］ 口０ １ ７゜ ７ １）４ Ｆ　Ｉ　Ｇ、　４ ＼ ＦＩＧ、５ ０ Ｆ　Ｉ　Ｇ、　６ａ ６ｂ ０ ＦＩＧ、６ｃ Ｆ　Ｉ　Ｇ、　８ｄ Ｆ　Ｉ　Ｇ、　８ｅ ８ ＦＩＧ、９ａ ０ ＦＩＧ、９ｂ Ｆ　Ｉ　Ｇ、　１０ ＦＩＧ、１２ ２ Ｆ　Ｉ　Ｇ、１３ａ Ｆ　Ｉ　Ｇ、１３ｂ ＦＩＧ、１３ｃ Ｆ　Ｉ　０．１４ａ Ｆ　Ｉ　０．１４ｂ ｌＧ４４ｃ １ Ｆ　Ｉ　Ｇ、１４ｄ ＦＩＧ、１４ｅ ＦＩＧ、１４ｆ Ｆ　Ｉ　Ｇ、　１６ｂ ５０ ３３ｂ（３１） ３ａ ５ｄ ５ａ ”Ｆ　　３５ａ　３５ｂ　３５ｃ ＼　　　＼ ５ａ ５ｂ ｌＧ ２０ ／

Claims (1)

1. 【特許請求の範囲】 （１）構体内に、少なくとも１個の流体入口を有する通
   路を有し、該通路の途中であって全ての流体入口よりも
   下流側に少なくとも１個の試薬固定部分を有し、かつ、
   通路と連通する排気機構を有する反応ユニットを少なく
   とも１個有することを特徴とする反応容器。（２）前記
   排気機構が、前記通路に設けられた少なくとも１個の排
   気可能な出口である請求項１に記載の反応容器。 （３）前記試薬固定部分よりも上流側に、少なくとも１
   個の試薬付着部分を有する請求項１または２に記載の反
   応容器。 （４）前記試薬付着部分のうちの少なくとも１個が前記
   流体入口よりも上流側にある請求項３に記載の反応容器
   。 （５）前記試薬固定部分および／または前記試薬付着部
   分が凹部および／または小突起集合体である請求項１〜
   ４のいずれかに記載の反応容器。 （６）前記通路の流体入口付近に少なくとも１個の液体
   滞留部を有する請求項１〜５のいずれかに記載の反応容
   器。 （７）前記通路の前記試薬固定部分よりも下流側に、液
   体貯留部を有する請求項１〜６のいずれかに記載の反応
   容器。 （８）前記液体貯留部に吸水性材料を収納してなる請求
   項７に記載の反応容器。 （９）前記吸水性材料が脱脂綿である請求項８に記載の
   反応容器。 （１０）前記吸水性材料収納部付近に前記排気可能な出
   口を有する請求項８または９に記載の反応容器。 （１１）前記試薬固定部分と前記吸水性材料との間の通
   路の少なくとも一部が親水性条体からなる請求項８〜１
   ０のいずれかに記載の反応容器。 （１２）前記親水性条体の少なくとも一部が前記通路に
   形成された中空室内に展張されてなる請求項１１に記載
   の反応容器。 （１３）前記通路が水平である請求項１〜１２のいずれ
   かに記載の反応容器。 （１４）前記通路が毛管部分を有する請求項１〜１３の
   いずれかに記載の反応容器。 （１５）前記通路の一部に狭隘部を有する請求項１〜１
   ４のいずれかに記載の反応容器。（１６）前記通路に、
   試薬固定部分を有する試薬固定領域および／または試薬
   付着部分を有する試薬付着領域が形成され、該試薬固定
   領域および／または試薬付着領域の断面積が、通路液体
   滞留部および液体貯留部を除く他の部分の断面積より大
   きい請求項１〜１５のいずれかに記載の反応容器。 （１７）前記構体が、前記通路を少なくとも１個に有す
   る複数の割型で構成される請求項１〜１６のいずれかに
   記載の反応容器。 （１８）前記構体が、前記通路を有する割型と、通路を
   有さない蓋体で構成される請求項１７に記載の反応容器
   。 （１９）前記蓋体が、前記通路を有する割型と密着して
   いる請求項１８に記載の反応容器。 （２０）前記蓋体と前記通路を有する割型との間に空間
   を有する請求項１８に記載の反応容器。 （２１）前記構体が３個以上の割型または蓋体および割
   型で構成され、隣接する割型間に形成されている通路は
   、隣接する他の通路と連通している請求項１〜２０のい
   ずれかに記載の反応容器。 （２２）前記少なくとも１個の流体入口のうち、最上流
   よりも下流側にある流体入口から流入する液体は、最上
   流の流体入口から流入する液体と実質的に同方向に走行
   するよう構成された請求項１〜２１のいずれかに記載の
   反応容器。 （２３）前記構体のの少なくとも一部が親水性材料で構
   成される請求項１〜２２のいずれかに記載の反応容器。 （２４）前記通路の液体滞留部を含む上流通路部分と、
   液体貯留部を含む下流通路部分が、構体の重心の互いに
   反対側に存在する反応容器であつて、前記流体入口から
   液体滞留部に流入した液体が、構体内の通路を経て所定
   の反応を行ないつつ液体貯留部に向って流れ、所定の反
   応が実質的に終了した時に、流入した液体の移動の結果
   として、構体の液体貯留部の存在する側が下降するよう
   構成した請求項７〜２３のいずれかに記載の反応容器。 （２５）前記構体は、請求項２４に記載の液体移動の結
   果、液体貯留部を含む下流通路部分が存在する側が下降
   するような位置において、揺動手段を有する請求項２４
   に記載の反応容器。 （２６）前記揺動手段は、前記構体の底部に設けられた
   脚または平面あるいは曲面を有する台である請求項２５
   に記載の反応容器。 （２７）請求項１〜２６のいずれかに記載の反応ユニッ
   トが複数個並列されてなることを特徴とする反応容器。