JPH03228673A - フザリン酸を無毒化する微生物およびそれを用いたフザリン酸の無毒化方法 - Google Patents
フザリン酸を無毒化する微生物およびそれを用いたフザリン酸の無毒化方法Info
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- JPH03228673A JPH03228673A JP2022957A JP2295790A JPH03228673A JP H03228673 A JPH03228673 A JP H03228673A JP 2022957 A JP2022957 A JP 2022957A JP 2295790 A JP2295790 A JP 2295790A JP H03228673 A JPH03228673 A JP H03228673A
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-
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- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
- C12N1/00—Microorganisms; Compositions thereof; Processes of propagating, maintaining or preserving microorganisms or compositions thereof; Processes of preparing or isolating a composition containing a microorganism; Culture media therefor
- C12N1/20—Bacteria; Culture media therefor
- C12N1/205—Bacterial isolates
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12R—INDEXING SCHEME ASSOCIATED WITH SUBCLASSES C12C - C12Q, RELATING TO MICROORGANISMS
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Abstract
(57)【要約】本公報は電子出願前の出願データであるた
め要約のデータは記録されません。
め要約のデータは記録されません。
Description
【発明の詳細な説明】
（産業上の利用分野）
本発明は、フザリウム属菌の代謝によって生じるウリ類
のつる割病、トマトの萎凋病などの原因物質となるフザ
リン酸を植物体に対して無毒化しつる微生物、およびそ
れを用いたフザリン酸の無毒化方法に関する。
のつる割病、トマトの萎凋病などの原因物質となるフザ
リン酸を植物体に対して無毒化しつる微生物、およびそ
れを用いたフザリン酸の無毒化方法に関する。
（従来の技術）
生育中の植物がしおれて枯死する疾病１例えばキュウリ
、スイカ、メロンなどのウリ類のつる割病、トマトの萎
凋病、ナスの半枯病、イチゴの萎黄病、コンニャクの乾
腐病、芝の春はげ病などは。
、スイカ、メロンなどのウリ類のつる割病、トマトの萎
凋病、ナスの半枯病、イチゴの萎黄病、コンニャクの乾
腐病、芝の春はげ病などは。
フザリウム（Ｆｕｓａｒ ｉｕｍ）属菌の感染により発
生することが知られている。このような感染症をひきお
こすフザリウム属菌としては、フザリウム オキシスポ
ラム（Ｆｕｓａｒｉｕｍ ｏｘｙｓｐｏｒｕｍ ）
、 フザリなど数多くの種類の菌がある。これらの菌
は土壌汚染菌であり、土中から植物体内へ吸収され、導
管を通って移行する。植物を枯死させる原因は。
生することが知られている。このような感染症をひきお
こすフザリウム属菌としては、フザリウム オキシスポ
ラム（Ｆｕｓａｒｉｕｍ ｏｘｙｓｐｏｒｕｍ ）
、 フザリなど数多くの種類の菌がある。これらの菌
は土壌汚染菌であり、土中から植物体内へ吸収され、導
管を通って移行する。植物を枯死させる原因は。
これら菌の代謝により生じるフザリン酸にあると考えら
れている。フザリン酸は、上記２種類のフザリウム属菌
をはじめフザリウム属に属するほとんどすべての植物病
原菌によって生産される。このフザリン酸は非特異的毒
素として働き、宿主植物はもとより他の植物個体に対し
ても害作用を示す。フザリン酸は植物の原形質膜の透過
性を高め。
れている。フザリン酸は、上記２種類のフザリウム属菌
をはじめフザリウム属に属するほとんどすべての植物病
原菌によって生産される。このフザリン酸は非特異的毒
素として働き、宿主植物はもとより他の植物個体に対し
ても害作用を示す。フザリン酸は植物の原形質膜の透過
性を高め。
その結果１葉などの植物体表面に［ａ２＋、に＋、 Ｎ
ａ＋などのカチオンや種々のアミノ酸を含む組織液が浸
出するにいたる。これが乾燥すると植物体表面の浸透圧
が高くなり、水分の蒸散がますます高まる。その結果、
植物がしおれて枯死することになる。
ａ＋などのカチオンや種々のアミノ酸を含む組織液が浸
出するにいたる。これが乾燥すると植物体表面の浸透圧
が高くなり、水分の蒸散がますます高まる。その結果、
植物がしおれて枯死することになる。
フザリウム属菌感染症を予防する薬剤としては。
例えば、下記の構造式を有するＯ−）ユニレンジアミン
誘導体（商品名ニドツブジン−Ｍ）が土壌殺菌剤として
利用されている。
誘導体（商品名ニドツブジン−Ｍ）が土壌殺菌剤として
利用されている。
１）
０
この薬剤は土壌に生息するフザリウム属菌を死滅させる
効果を有するが、土壌表面に散布しただけでは効果が得
られず、播種もしくは植物を定植する前にあらかじめ土
壌と混合しておく必要がある。
効果を有するが、土壌表面に散布しただけでは効果が得
られず、播種もしくは植物を定植する前にあらかじめ土
壌と混合しておく必要がある。
このような作業は多大な労力を要する。さらに。
感染症の症状が現れたあとでは疾病の進行を阻止する効
果がほとんど得られないという欠点がある。
果がほとんど得られないという欠点がある。
他方、フザリウム属菌による感染症に抵抗性を有するト
マトの品種が存在する。このトマトの植物組織内では、
下記のように、フザリン酸（Ｉ）が代謝・分解され、Ｎ
−メチルフザリン酸アミド（ｎ）となることが知られて
いる。さらに、このフザリン酸分解作用はフザリウム抵
抗性の強い品種はど大きい。
マトの品種が存在する。このトマトの植物組織内では、
下記のように、フザリン酸（Ｉ）が代謝・分解され、Ｎ
−メチルフザリン酸アミド（ｎ）となることが知られて
いる。さらに、このフザリン酸分解作用はフザリウム抵
抗性の強い品種はど大きい。
Ｈ３
（、Ｉ ）（Ｉ［）
（発明が解決しようとする課題）
このように、フザリン酸が原因となり、つ１ノ類のつる
割病やトマトの萎凋病が発生する。上言己感染症に抵抗
性を有するトマトの例を考慮すると。
割病やトマトの萎凋病が発生する。上言己感染症に抵抗
性を有するトマトの例を考慮すると。
フザリン酸による植物の疾病は９例えば、フザＩＪン酸
を分解したり、フザリン酸を化学的に修飾するなどの方
法を用いて、フザリン酸を植物体（こ対して無毒な物質
に変えることにより、防除されうると考えられる。
を分解したり、フザリン酸を化学的に修飾するなどの方
法を用いて、フザリン酸を植物体（こ対して無毒な物質
に変えることにより、防除されうると考えられる。
本発明の目的は、フザリウム属菌により生じるつる割病
、萎凋病などの植物疾病を予防もしく（よ阻止するうえ
で有効な微生物を提供することにある。本発明の他の目
的は、フザリウム属菌の代謝によって生じるフザリン酸
を無毒化しつる微生物を提供することにある。本発明の
さらに他の目的は、上記微生物を用いたフザリン酸の無
毒化方法を提供することにある。
、萎凋病などの植物疾病を予防もしく（よ阻止するうえ
で有効な微生物を提供することにある。本発明の他の目
的は、フザリウム属菌の代謝によって生じるフザリン酸
を無毒化しつる微生物を提供することにある。本発明の
さらに他の目的は、上記微生物を用いたフザリン酸の無
毒化方法を提供することにある。
（課題を解決するための手段および作用）本発明のフザ
リン酸を無毒化する微生物は、クレブジエラ（Ｋｌｅｂ
ｓｉｅｌｌａ）属に属し、そのことにより上記目的が達
成される。
リン酸を無毒化する微生物は、クレブジエラ（Ｋｌｅｂ
ｓｉｅｌｌａ）属に属し、そのことにより上記目的が達
成される。
本発明のフザリン酸の無毒化方法は、クレブジエラ（Ｋ
ｌｅｂｓｉｅｌｌａ）属に属し、フザリン酸を植物体に
対して無毒化する微生物、その菌体、その培養液、該菌
体破砕物、および該菌体抽出物からなる群から選択され
る少なくとも一種をフザリン酸に接触させて、該フザリ
ン酸を植物体に対して無毒化する工程を包含し、そのこ
とにより上記目的が達成される。
ｌｅｂｓｉｅｌｌａ）属に属し、フザリン酸を植物体に
対して無毒化する微生物、その菌体、その培養液、該菌
体破砕物、および該菌体抽出物からなる群から選択され
る少なくとも一種をフザリン酸に接触させて、該フザリ
ン酸を植物体に対して無毒化する工程を包含し、そのこ
とにより上記目的が達成される。
本発明の微生物は、タレブジエラ属に属する細菌である
。好ましくはクレブジエラ オキシト力であり、特に１
発明者らが大阪府東大阪市の土壌から分離したクレブジ
エラ オキシト力ＨＹ−１株が好ましい。本発明の微生
物は植物体に対して非病原性である。上記クレブジエラ
オキシトカＨＹ−１株は後述の菌学的性質をもとにパ
ージエイズ マニュアルオブ システマチック バクテ
リオロジー第、１巻 （Ｂｅｒｇｅｙ’ｓ Ｍａｎｕａ
ｌ ｏｆ Ｓｙｓｔｅｍａｔｉｃ Ｂａｃｔｅｒｉｏｌ
ｏｇｙ Ｖｏｌｕｍｅ １）により、同定された。本菌
は。
。好ましくはクレブジエラ オキシト力であり、特に１
発明者らが大阪府東大阪市の土壌から分離したクレブジ
エラ オキシト力ＨＹ−１株が好ましい。本発明の微生
物は植物体に対して非病原性である。上記クレブジエラ
オキシトカＨＹ−１株は後述の菌学的性質をもとにパ
ージエイズ マニュアルオブ システマチック バクテ
リオロジー第、１巻 （Ｂｅｒｇｅｙ’ｓ Ｍａｎｕａ
ｌ ｏｆ Ｓｙｓｔｅｍａｔｉｃ Ｂａｃｔｅｒｉｏｌ
ｏｇｙ Ｖｏｌｕｍｅ １）により、同定された。本菌
は。
フザリン酸無毒化能を有することが特徴である。
菌学的性質
本発明のクレブジエラ オキシトカＨＹ−１株の形態、
各培地における生育状態、生理学的性質、およびその他
の性質を表１に示す。
各培地における生育状態、生理学的性質、およびその他
の性質を表１に示す。
表１
菌株の同定
上記菌学的住質から本菌株は、上記のように。
同定され、クレブジエラ オキシト力ＨＹ−１株と金品
された（微工研菌寄第１１２２７号）。
された（微工研菌寄第１１２２７号）。
当番条件
培地は格別である必要はない。カリウム、ナトウム、マ
グネシウムなどのリン酸塩、硫酸塩。
グネシウムなどのリン酸塩、硫酸塩。
１化物などを含有する最少培地に、炭素源として一ルコ
ース、シヨ糖などの各種糖質、カザミノ酸：どが加えら
れる。この最少培地に用いられる窒舅源としては、硝酸
塩、アンモニウム塩などの無１窒素、アミノ基の有機窒
素などがある。栄養源してコーンステイープリカー、酵
母エキスなど一必要に応じて添加することも可能である
。培養ユ度は１０〜４５℃、好ましくは３７℃前後であ
る。培、ｐＨは４．５〜９．５． 好ましくは６．０
〜８．０であり。
ース、シヨ糖などの各種糖質、カザミノ酸：どが加えら
れる。この最少培地に用いられる窒舅源としては、硝酸
塩、アンモニウム塩などの無１窒素、アミノ基の有機窒
素などがある。栄養源してコーンステイープリカー、酵
母エキスなど一必要に応じて添加することも可能である
。培養ユ度は１０〜４５℃、好ましくは３７℃前後であ
る。培、ｐＨは４．５〜９．５． 好ましくは６．０
〜８．０であり。
〜５日にわたり好気的に撹拌または振盪しなが培養を行
う。固体培地（寒天培地）での培養も能である。
う。固体培地（寒天培地）での培養も能である。
本微生物を上記適当な培地で生育させ、得られた菌体、
その培養液、その菌体破砕物、およびその菌体抽出物か
らなる群から選択される少なくとも１種をフザリン酸に
接触させると、フザリン酸が植物に対して無毒化する（
ここでは、植物に対する毒性をなくすること、もしくは
軽減することをいう）。このような本微生物のフザリン
酸無毒化能は、フザリン酸を分解および／または化学的
に修飾することに由来すると考えられる。
その培養液、その菌体破砕物、およびその菌体抽出物か
らなる群から選択される少なくとも１種をフザリン酸に
接触させると、フザリン酸が植物に対して無毒化する（
ここでは、植物に対する毒性をなくすること、もしくは
軽減することをいう）。このような本微生物のフザリン
酸無毒化能は、フザリン酸を分解および／または化学的
に修飾することに由来すると考えられる。
本発明の微生物はフザリウム属菌による植物疾病の防除
に利用されうる。例えば１本微生物、その菌体、その培
養液、その菌体破砕物、およびその菌体抽出物からなる
群から選択される少なくとも１種を植物体に散布する方
法、植物体に注入する方法１種子表面に付着させる方法
、土壌に混合する方法等によりフザリン酸が無毒化する
ため。
に利用されうる。例えば１本微生物、その菌体、その培
養液、その菌体破砕物、およびその菌体抽出物からなる
群から選択される少なくとも１種を植物体に散布する方
法、植物体に注入する方法１種子表面に付着させる方法
、土壌に混合する方法等によりフザリン酸が無毒化する
ため。
フザリン酸に起因する疾病の防除が可能である。
（実施例）
以下に本発明を実施例につき説明する。
実施例１
東大阪市小若江の土壌を滅菌水に懸濁させ、得られた上
清を希釈し１表２に示すスクリーニング培地（フザリン
酸を含有する）に塗布し、 ３０℃で４８時間培養した
。
清を希釈し１表２に示すスクリーニング培地（フザリン
酸を含有する）に塗布し、 ３０℃で４８時間培養した
。
表２
培地組成
培養後、生じたコロニー内から短桿菌で、ペン毛がなく
、かつ糖発酵能を有する菌を分離した。
、かつ糖発酵能を有する菌を分離した。
分離した菌を同一培地に植え継ぎ、得られた菌株の菌学
的性質を調べたところ表１と同一であった。
的性質を調べたところ表１と同一であった。
その結果、得られた菌株がクレブジエラ オキシト力Ｈ
Ｙ−１株であることがｍｉ忍された。
Ｙ−１株であることがｍｉ忍された。
実施例２
実施例１で得られたクレブジエラ オキシトカＨＹ−１
株を１０９個／ｒｎ１．の割合で水（精製水）に懸濁さ
せた。コントロールとして水（精製水）を準備した。５
〜６節期のトマト切枝５本ずつを用い。
株を１０９個／ｒｎ１．の割合で水（精製水）に懸濁さ
せた。コントロールとして水（精製水）を準備した。５
〜６節期のトマト切枝５本ずつを用い。
その切口をそれぞれの上記菌懸濁液または水に３時間浸
漬した。切口を水洗後、３００μｇ／ｍｌのフザリン酸
水溶液約２０艷に漬け、その１０ｍ１を吸収させた。切
口を水洗後該切口を水に浸して２０℃で放置した。
漬した。切口を水洗後、３００μｇ／ｍｌのフザリン酸
水溶液約２０艷に漬け、その１０ｍ１を吸収させた。切
口を水洗後該切口を水に浸して２０℃で放置した。
上記水を吸収させた場合は、フザリン酸水溶液に浸漬開
始後８〜１６時間で全ての葉に萎凋症状が見られ、茎や
葉脈が褐変して枯死した。しかし上記）ＩＹ−１株懸濁
液を吸収させた場合は、７２時間後においても５本とも
全く異常が認められなかった。
始後８〜１６時間で全ての葉に萎凋症状が見られ、茎や
葉脈が褐変して枯死した。しかし上記）ＩＹ−１株懸濁
液を吸収させた場合は、７２時間後においても５本とも
全く異常が認められなかった。
実施例３
実施例１で得られたクレブジエラ オキント力ＨＹ−１
株を表２に示す培地（フザリン酸を含有する）を用いて
培養した。培養開始０．２４．４８および７２時間後に
、培養液の一部を取り、 ３０００Ｇで１０分間遠心分
離にかけ、上清部分を採取した。これを１次いで、０．
２μｍのミリポアフィルタ−で濾過した。
株を表２に示す培地（フザリン酸を含有する）を用いて
培養した。培養開始０．２４．４８および７２時間後に
、培養液の一部を取り、 ３０００Ｇで１０分間遠心分
離にかけ、上清部分を採取した。これを１次いで、０．
２μｍのミリポアフィルタ−で濾過した。
得られた濾液とＭＳ培地（＞Ｊｕｒａｓｈ ｉｇｅ−３
ｋｏｏｇ培地。
ｋｏｏｇ培地。
Ｐｈｙｓｉｏｌ、 Ｐｌａｎｔ、 １５．４７３ （１
９６２））とをｌ：９の容量比で混合した。これにトマ
ト（Ｌｙｃｏｐｅｒｓ ｉｃｏｎｅｓｃｕｌｅｎｆｕｍ
Ｍｉｌｌ ｃｖ、Ｚｕｉｋｏ ）の茎の形成層部位か
ら誘導されたカルスの遊離単細胞を１０４〜１Ｏ５ｃｅ
ｌｌｓ／ ｍｌｌになるように加えて、２５℃で２４時
間放置した。２４時間後にフルオレセインニ酢酸（ＦＤ
Ａ）によりカルス細胞を螢光染色した。これを螢光顕微
鏡を用いて目視観察し、カルス細胞の生存率（％）を算
出した（ｎ＝５００）。対照としては上記混合液の代わ
りにＭＳ培地を用いた。その結果を表３に示す。
９６２））とをｌ：９の容量比で混合した。これにトマ
ト（Ｌｙｃｏｐｅｒｓ ｉｃｏｎｅｓｃｕｌｅｎｆｕｍ
Ｍｉｌｌ ｃｖ、Ｚｕｉｋｏ ）の茎の形成層部位か
ら誘導されたカルスの遊離単細胞を１０４〜１Ｏ５ｃｅ
ｌｌｓ／ ｍｌｌになるように加えて、２５℃で２４時
間放置した。２４時間後にフルオレセインニ酢酸（ＦＤ
Ａ）によりカルス細胞を螢光染色した。これを螢光顕微
鏡を用いて目視観察し、カルス細胞の生存率（％）を算
出した（ｎ＝５００）。対照としては上記混合液の代わ
りにＭＳ培地を用いた。その結果を表３に示す。
（以下余白）
表３
（発明の効果）
本発明によれば、このように、フザリン酸無毒化能を有
するクレブジエラ属菌が提供される。この微生物、その
菌体、その培養液、その菌体破砕物、およびその菌体抽
出物からなる群から選択される少なくとも１種を土壌ま
たは植物体に適用すると、たとえ土壌または植物体が７
ザリウム属菌に感染していてもフザリウム属菌の生産す
るフザリン酸が無毒化される。従って、つる割病、萎凋
病などのフザリウム属菌の感染によって生じる疾病が発
現しない。すでに感染症の発現した植物体やその土壌に
適用しても、フザリン酸が無毒化するため、感染症のそ
れ以上の進行が抑制される。
するクレブジエラ属菌が提供される。この微生物、その
菌体、その培養液、その菌体破砕物、およびその菌体抽
出物からなる群から選択される少なくとも１種を土壌ま
たは植物体に適用すると、たとえ土壌または植物体が７
ザリウム属菌に感染していてもフザリウム属菌の生産す
るフザリン酸が無毒化される。従って、つる割病、萎凋
病などのフザリウム属菌の感染によって生じる疾病が発
現しない。すでに感染症の発現した植物体やその土壌に
適用しても、フザリン酸が無毒化するため、感染症のそ
れ以上の進行が抑制される。
以上
Claims (1)
- 【特許請求の範囲】 １、クレブジエラ（￥Ｋｌｅｂｓｉｅｌｌａ￥）属に属
し、フザリン酸を植物体に対して無毒化する微生物。 ２、クレブジエラオキシトカ（￥Ｋｌｅｂｓｉｅｌｌａ
ｏｘｙｔｏｃａ￥）である、請求項１に記載の微生物。 ３、クレブジエラオキシトカ（￥Ｋｌｅｂｓｉｅｌｌａ
ｏｘｙｔｏｃａ￥）ＨＹ−１（微工研菌寄第１１２２７
号）株である請求項２に記載の微生物。 ４、クレブジエラ（￥Ｋｌｅｂｓｉｅｌｌａ￥）属に属
し、フサリン酸を植物体に対して無毒化する微生物、そ
の菌体、その培養液、該菌体破砕物、および該菌体抽出
物からなる群から選択される少なくとも一種をフザリン
酸に接触させて、該フザリン酸を植物体に対して無毒化
する工程を包含するフザリン酸の無毒化方法。 ５、前記微生物がクレブジエラオキシトカ （￥Ｋｌｅｂｓｉｅｌｌａｏｘｙｔｏｃａ￥）である請
求項４に記載の方法。 ６、前記微生物がクレブジエラオキシトカ （￥Ｋｌｅｂｓｉｅｌｌａｏｘｙｔｏｃａ￥）ＨＹ−１
（微工研菌寄第１１２２７号）株である請求項５に記載
の方法。
Priority Applications (3)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP2022957A JPH03228673A (ja) | 1990-01-31 | 1990-01-31 | フザリン酸を無毒化する微生物およびそれを用いたフザリン酸の無毒化方法 |
| EP91300693A EP0441520A1 (en) | 1990-01-31 | 1991-01-30 | Microorganisms detoxifying fusaric acid and method for detoxifying fusaric acid by the use of the same |
| US07/648,177 US5178863A (en) | 1990-01-31 | 1991-01-30 | Microorganisms detoxifying fusaric acid and method for detoxifying fusaric acid by the use of the same |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP2022957A JPH03228673A (ja) | 1990-01-31 | 1990-01-31 | フザリン酸を無毒化する微生物およびそれを用いたフザリン酸の無毒化方法 |
Publications (1)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| JPH03228673A true JPH03228673A (ja) | 1991-10-09 |
Family
ID=12097090
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| JP2022957A Pending JPH03228673A (ja) | 1990-01-31 | 1990-01-31 | フザリン酸を無毒化する微生物およびそれを用いたフザリン酸の無毒化方法 |
Country Status (3)
| Country | Link |
|---|---|
| US (1) | US5178863A (ja) |
| EP (1) | EP0441520A1 (ja) |
| JP (1) | JPH03228673A (ja) |
Families Citing this family (16)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| JP3115340B2 (ja) * | 1990-02-28 | 2000-12-04 | サントリー株式会社 | フザリン酸耐性遺伝子 |
| US5492829A (en) * | 1990-12-20 | 1996-02-20 | Lotte Confectionery Co., Ltd. | Klebsiella oxytoca No. 19-1 capable of producing α-cyclodextrin |
| US5879705A (en) * | 1993-07-27 | 1999-03-09 | Euro-Celtique S.A. | Sustained release compositions of morphine and a method of preparing pharmaceutical compositions |
| FI97148C (fi) * | 1994-07-14 | 1996-10-25 | Lahden Polttimo Ab Oy | Menetelmä kasvien käsittelemiseksi siementen laatuominaisuuksien parantamiseksi |
| US6025188A (en) * | 1994-08-12 | 2000-02-15 | Pioneer Hi-Bred International, Inc. | Fumonisin detoxification compositions and methods |
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