JPH03295465A - 液状検体の医学検査用保存液調製剤と調製方法 - Google Patents
液状検体の医学検査用保存液調製剤と調製方法Info
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- JPH03295465A JPH03295465A JP2099023A JP9902390A JPH03295465A JP H03295465 A JPH03295465 A JP H03295465A JP 2099023 A JP2099023 A JP 2099023A JP 9902390 A JP9902390 A JP 9902390A JP H03295465 A JPH03295465 A JP H03295465A
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Landscapes
- Investigating Or Analysing Biological Materials (AREA)
Abstract
(57)【要約】本公報は電子出願前の出願データであるた
め要約のデータは記録されません。
め要約のデータは記録されません。
Description
【発明の詳細な説明】
（産業上の利用分野）
本発明は、尿や胸腹水等の液状検体に添加混合して細胞
診その他の各種医学検査に供する保存液を調製するため
の調製剤と、これを用いた該保存液の調製方法に関する
。
診その他の各種医学検査に供する保存液を調製するため
の調製剤と、これを用いた該保存液の調製方法に関する
。
（従来の技術）
尿や胸腹水等の液状検体の細胞診においては、該検体中
に含まれる細胞や血液成分を固定化して検査に供し易い
形態とする必要があり、例えば従来の尿細胞診では一般
的に直接塗抹法もしくはサコマノ液法によって検査用の
固定化標本を作成ししいる。
に含まれる細胞や血液成分を固定化して検査に供し易い
形態とする必要があり、例えば従来の尿細胞診では一般
的に直接塗抹法もしくはサコマノ液法によって検査用の
固定化標本を作成ししいる。
そして上記の直接塗抹法は、採取した新鮮尿を遠心分離
して得られる残香を塗抹するか、もしくはオートスメア
−にて遠心塗抹したのち、これを９５％エタノールにて
固定して検査用標本とするものである。また、サコマノ
液法は、新鮮尿を遠心分離して得られる沈渣に２倍（容
量）以上のサコマノ液を添加し、よく混和したのちに再
度の遠心分離を行い、その沈渣を塗抹して乾燥後に９５
％エタノールで再固定して検査用標本とするものである
。
して得られる残香を塗抹するか、もしくはオートスメア
−にて遠心塗抹したのち、これを９５％エタノールにて
固定して検査用標本とするものである。また、サコマノ
液法は、新鮮尿を遠心分離して得られる沈渣に２倍（容
量）以上のサコマノ液を添加し、よく混和したのちに再
度の遠心分離を行い、その沈渣を塗抹して乾燥後に９５
％エタノールで再固定して検査用標本とするものである
。
（発明が解決しようとする！題）
しかしながら、上記従来の直接塗抹法では９５％エタノ
ールによる固定時に細胞の部分的な剥離が避けられず、
でたサコマノ液法では赤血球の破搏および胞変性を防止
できないことから、いずれも診断結果に全幅の信転を置
けないという問題があった。また、尿細胞診の診断はあ
くまでも検体が新鮮尿であることを前提としたものであ
るが実際には採尿から検査までにかなりの時間を要する
のが普通であり、上記従来の方法では経時的な細胞変性
も避けられないため、異常が発見されても悪性か否かの
判定は再検の結果によらざるを得なかった。
ールによる固定時に細胞の部分的な剥離が避けられず、
でたサコマノ液法では赤血球の破搏および胞変性を防止
できないことから、いずれも診断結果に全幅の信転を置
けないという問題があった。また、尿細胞診の診断はあ
くまでも検体が新鮮尿であることを前提としたものであ
るが実際には採尿から検査までにかなりの時間を要する
のが普通であり、上記従来の方法では経時的な細胞変性
も避けられないため、異常が発見されても悪性か否かの
判定は再検の結果によらざるを得なかった。
更に、上述のような直接塗抹法やザコマノ液法によって
検査用標本を作成すると、一般検査や沈渣検査等の他の
検査を同−尿にて行えず、これら他の検査用として再度
の採尿が必要となり、そのための手間や時間的ロスが大
きいという難点もあった。
検査用標本を作成すると、一般検査や沈渣検査等の他の
検査を同−尿にて行えず、これら他の検査用として再度
の採尿が必要となり、そのための手間や時間的ロスが大
きいという難点もあった。
本発明は、上述の事情に照らし、液状検体中の細胞変性
を防止すると共にその保存期間を従来に比較して飛躍約
６こ延長することを可能にする医学検査用保存液調製剤
とこれによる調製方法を提供することを目的としている
。
を防止すると共にその保存期間を従来に比較して飛躍約
６こ延長することを可能にする医学検査用保存液調製剤
とこれによる調製方法を提供することを目的としている
。
（課題を解決するための手段）
本発明に係る医学検査用保存液調製剤は、上記目的を達
成するめだに、エタノールを主成分とし、炭素数４また
は５の直鎖脂肪族ジオール１〜１００ｇ／ｌと、ポリエ
チレングリコール１〜５０ｇ／ｉ！、とを含有するアル
コール水溶液からなる構成を採用するものである。
成するめだに、エタノールを主成分とし、炭素数４また
は５の直鎖脂肪族ジオール１〜１００ｇ／ｌと、ポリエ
チレングリコール１〜５０ｇ／ｉ！、とを含有するアル
コール水溶液からなる構成を採用するものである。
また本発明では上記調製剤中に１００ｇ／４２以下のイ
ソプロピルアルコールを含有する構成を好適態様として
いる。
ソプロピルアルコールを含有する構成を好適態様として
いる。
一方、本発明に係る医学検査用細保存液の調製方法は、
上記の調製剤を液状検体に対して５〜５０重量％の割合
で添加混合することを特徴とするものである。
上記の調製剤を液状検体に対して５〜５０重量％の割合
で添加混合することを特徴とするものである。
（発明の細部構成と作用）
本発明の保存液調製剤は、前記のようにエタノールを主
成分として他に特定のジオールおよびポリエチレングリ
コールを含有するアルコール水溶液からなり、尿や胸腹
水等の液状検体に添加することにより、該検体中の細胞
や血液成分を固定化して検査用としての安定な保存液を
調製するものである。
成分として他に特定のジオールおよびポリエチレングリ
コールを含有するアルコール水溶液からなり、尿や胸腹
水等の液状検体に添加することにより、該検体中の細胞
や血液成分を固定化して検査用としての安定な保存液を
調製するものである。
かくして、得られる保存液は上記調製剤特有の優れた固
定化作用と細菌抑制作用とによって卓越した保存安定性
を示し、通常において保存細胞は３ケ月以上安定すると
共に６ケ月以上にわたる細菌抑制が可能となる。また尿
中血液成分の保存性に非常に優れ、特に赤血球では６ケ
月以上の保存を行えることから、例えばぼうこう癌に関
して重要な所見をもたらすことができる。
定化作用と細菌抑制作用とによって卓越した保存安定性
を示し、通常において保存細胞は３ケ月以上安定すると
共に６ケ月以上にわたる細菌抑制が可能となる。また尿
中血液成分の保存性に非常に優れ、特に赤血球では６ケ
月以上の保存を行えることから、例えばぼうこう癌に関
して重要な所見をもたらすことができる。
更に、この調製剤によれば、添加した時点で固定化がな
されるため、液状検体の採取直後に細胞保存することが
可能となり、もって検体採取から固定までの時間経過に
伴う細胞変性を最小限に抑えることができる。
されるため、液状検体の採取直後に細胞保存することが
可能となり、もって検体採取から固定までの時間経過に
伴う細胞変性を最小限に抑えることができる。
調製剤の主成分をなすエタノールは、従来の直接塗抹法
やザコマノ液法において最後に用いる９５％エタノール
と同様の固定化作用も有するが、本調製剤においては特
にポリエチレングリコール成分の細胞および血液成分中
への浸透を担う媒体としての作用ならびに細菌やバクテ
リアの繁殖抑制作用の点で重要である。
やザコマノ液法において最後に用いる９５％エタノール
と同様の固定化作用も有するが、本調製剤においては特
にポリエチレングリコール成分の細胞および血液成分中
への浸透を担う媒体としての作用ならびに細菌やバクテ
リアの繁殖抑制作用の点で重要である。
このエタノール濃度は、上記作用を充分に発揮させる上
で５０％以上とする必要があるが、高濃度すぎると液状
検体への添加初期において細胞が高濃度状態のエタノー
ルに接して悪影響を受けることから、５０〜８０％程度
が望ましい。
で５０％以上とする必要があるが、高濃度すぎると液状
検体への添加初期において細胞が高濃度状態のエタノー
ルに接して悪影響を受けることから、５０〜８０％程度
が望ましい。
調製剤中に含有させるジオール成分は主として核酸蛋白
を凝固させる作用を示すものであり、この凝固作用によ
って保存液は低アルコール濃度下でも細胞保存が良好と
なる。したがって、例えば酵素反応等の低アルコール濃
度を必要とする検査が可能になるという利点がある。
を凝固させる作用を示すものであり、この凝固作用によ
って保存液は低アルコール濃度下でも細胞保存が良好と
なる。したがって、例えば酵素反応等の低アルコール濃
度を必要とする検査が可能になるという利点がある。
このようなジオール成分は、上記作用に優れると共に、
この作用を充分に発揮する上で細胞膜に対する透過性が
大きく、且つ取扱い上で臭気の少ないものである必要が
あることから、前記の炭素数が４または５の直鎖脂肪族
ジオールに限られる。
この作用を充分に発揮する上で細胞膜に対する透過性が
大きく、且つ取扱い上で臭気の少ないものである必要が
あることから、前記の炭素数が４または５の直鎖脂肪族
ジオールに限られる。
その具体例としては、ｌ・４−ブタンジオール、１・２
−ブタンジオール、１・３−ブタンジオール、２・３−
ブタンジオール、１・５−ベンタンジオール、２・４−
ベンタンジオール等が挙げられ、これらは単独使用して
もよいし、２種以上を併用してもよい。
−ブタンジオール、１・３−ブタンジオール、２・３−
ブタンジオール、１・５−ベンタンジオール、２・４−
ベンタンジオール等が挙げられ、これらは単独使用して
もよいし、２種以上を併用してもよい。
上記ジオール成分の調製剤中の配合量は、１〜１００ｇ
／ Ｉ！、の範囲であり、過少では上記作用が充分番こ
発揮されず、逆に過多では細胞質内の遊離蛋白の凝固を
惹起して細胞質の形状の変化ならびに細胞質の染色性の
変化をきたすという問題がある。
／ Ｉ！、の範囲であり、過少では上記作用が充分番こ
発揮されず、逆に過多では細胞質内の遊離蛋白の凝固を
惹起して細胞質の形状の変化ならびに細胞質の染色性の
変化をきたすという問題がある。
一方、調製剤中に配合させるポリエチレングリコールは
、専ら液状検体中の細胞や血液成分の固定化作用を担う
ものであり、通常では平均分子量１０００〜４０００程
度の低分子量のものが好適に使用される。そして、この
ポリエチレングリコールの調製剤中の配合量は、１〜５
０ｇ／ｌの範囲であり、過少では上記作用が充分に発揮
されず、逆に過多になると細胞径の収縮を招くと共に細
胞膜の破壊を生じる恐れがある。
、専ら液状検体中の細胞や血液成分の固定化作用を担う
ものであり、通常では平均分子量１０００〜４０００程
度の低分子量のものが好適に使用される。そして、この
ポリエチレングリコールの調製剤中の配合量は、１〜５
０ｇ／ｌの範囲であり、過少では上記作用が充分に発揮
されず、逆に過多になると細胞径の収縮を招くと共に細
胞膜の破壊を生じる恐れがある。
なお、調製剤中には上記のジオール成分およびポリエチ
レングリコールの他に必要に応じて種々の成分を配合し
てもよい。例えば、液体検体の種類によってアルコール
の浸透性をより大きくする必要がある場合、イソプロピ
ルアルコールを１００ｇ／１２以下の濃度範囲で配合す
ることが推奨される。
レングリコールの他に必要に応じて種々の成分を配合し
てもよい。例えば、液体検体の種類によってアルコール
の浸透性をより大きくする必要がある場合、イソプロピ
ルアルコールを１００ｇ／１２以下の濃度範囲で配合す
ることが推奨される。
上記構成の調製剤にて医学検査用保存液を調製するには
、該調製剤を尿や胸腹水等の液状検体に対して４〜５０
％の割合で添加混合すればよい、そして、この添加量が
４％未満では保存液の細菌抑制作用および染色性が共に
不充分になり、また５０％より多くなると通常のスライ
ド塗抹法において使用されるスライドから細胞が離脱し
易くなり、そのためにスライドに細胞を付着させる支持
剤が必要になり、また薬剤コストが高くつくことになる
。
、該調製剤を尿や胸腹水等の液状検体に対して４〜５０
％の割合で添加混合すればよい、そして、この添加量が
４％未満では保存液の細菌抑制作用および染色性が共に
不充分になり、また５０％より多くなると通常のスライ
ド塗抹法において使用されるスライドから細胞が離脱し
易くなり、そのためにスライドに細胞を付着させる支持
剤が必要になり、また薬剤コストが高くつくことになる
。
かくして調製される医学検査用保存液は、ジオール成分
の電位触媒作用によって細胞核内の蛋白が荷電凝固して
固定される一方で、蛋白のアミノ酸荷電電位の遅いから
、ジオール成分の酸化還元電位によって電位の低い他の
遊離蛋白が還元されて主鎖を存在させない形となってお
り、またバパニー７０染色やＳＭ （スティンベルブマ
イヤー）染色が可能であることから、細胞診検査および
沈渣検査に適用できると共に、例えば尿蛋白の定性と定
量、尿糖の定性と定量、ウロビリノーゲン定性、尿潜血
の定性と定量等の一般検査や原生化学検査にも供するこ
とができ、更にＥＩＡ法（免疫酸素抗体法）による尿の
腫瘍マーカーの測定も可能である。しかも、これら各種
検査は全て同じ保存液つまり同一検体を用いて実施する
ことができる。
の電位触媒作用によって細胞核内の蛋白が荷電凝固して
固定される一方で、蛋白のアミノ酸荷電電位の遅いから
、ジオール成分の酸化還元電位によって電位の低い他の
遊離蛋白が還元されて主鎖を存在させない形となってお
り、またバパニー７０染色やＳＭ （スティンベルブマ
イヤー）染色が可能であることから、細胞診検査および
沈渣検査に適用できると共に、例えば尿蛋白の定性と定
量、尿糖の定性と定量、ウロビリノーゲン定性、尿潜血
の定性と定量等の一般検査や原生化学検査にも供するこ
とができ、更にＥＩＡ法（免疫酸素抗体法）による尿の
腫瘍マーカーの測定も可能である。しかも、これら各種
検査は全て同じ保存液つまり同一検体を用いて実施する
ことができる。
（実 施 例）
第１表
保存液調製剤
上記第１表で示す組成の保存液調製剤（ＡＸ〜Ａ３・・
・実施例、Ｂ−Ｅ・・・比較例）をそれぞれ採取直後の
尿４５ｃｃに添加混合して保存液を作成し、これら保存
液を常温にて放置して所定日数経過毎に細胞変性と細菌
汚染の状況を顕微鏡にて調べて下記の４段階で評価した
。その結果を、健康者の尿に関して第２表、糖尿病患者
の尿に関して第３表に示す。
・実施例、Ｂ−Ｅ・・・比較例）をそれぞれ採取直後の
尿４５ｃｃに添加混合して保存液を作成し、これら保存
液を常温にて放置して所定日数経過毎に細胞変性と細菌
汚染の状況を顕微鏡にて調べて下記の４段階で評価した
。その結果を、健康者の尿に関して第２表、糖尿病患者
の尿に関して第３表に示す。
評価
細胞変性・細胞汚染
全くなし
僅かにあり
かなりあるが検査は可
著しく検査用として不適
Ｏ・ ・
Ｏ・ ・
Δ ・ ・
× ・ ・
（発明特有の効果）
本発明の保存液調製剤および調製方法によれば、尿や胸
腹水等の液状検体に該調製剤を単に添加混合するだけで
細胞や診検査を始めとして沈渣検査、−膜検査、原生化
学検査等の各種医学検査に供し得る信顛性の高い検体保
存液を提供でき、しかも該保存液が４越した保存安定性
を示して長期にわたり細胞変性および細菌汚染を生じに
くいものとなり、また検体の細胞や血液成分を検体採取
直後に固定できることから、従来の固定化標本作成手段
の如き固定化までの時間経過に伴う変性を回避できると
共に、同一検体にて上記各種の検査が実施可能となるた
め、従来に比較して検体採取の手間および時間が大幅に
低減されるという利点がある。
腹水等の液状検体に該調製剤を単に添加混合するだけで
細胞や診検査を始めとして沈渣検査、−膜検査、原生化
学検査等の各種医学検査に供し得る信顛性の高い検体保
存液を提供でき、しかも該保存液が４越した保存安定性
を示して長期にわたり細胞変性および細菌汚染を生じに
くいものとなり、また検体の細胞や血液成分を検体採取
直後に固定できることから、従来の固定化標本作成手段
の如き固定化までの時間経過に伴う変性を回避できると
共に、同一検体にて上記各種の検査が実施可能となるた
め、従来に比較して検体採取の手間および時間が大幅に
低減されるという利点がある。
Claims (3)
- （１）、エタノールを主成分とし、炭素数４または５の
直鎖脂肪族ジオール１〜１００ｇ／ｌと、ポリエチレン
グリコール１〜５０ｇ／ｌとを含有するアルコール水溶
液からなる液状検体の医学検査用保存液調製剤。 - （２）、１００ｇ／ｌ以下のイソプロピルアルコールが
含有された請求項（１）記載の液状検体の医学検査用保
存液調製剤。 - （３）、請求項（１）または（２）に記載の調製剤を液
状検体に対して４〜５０重量％の割合で添加混合するこ
とを特徴とする液状検体の医学検査用保存液の調製方法
。
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP2099023A JPH0652264B2 (ja) | 1990-04-13 | 1990-04-13 | 液状検体の医学検査用保存液調製剤と調製方法 |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP2099023A JPH0652264B2 (ja) | 1990-04-13 | 1990-04-13 | 液状検体の医学検査用保存液調製剤と調製方法 |
Publications (2)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| JPH03295465A true JPH03295465A (ja) | 1991-12-26 |
| JPH0652264B2 JPH0652264B2 (ja) | 1994-07-06 |
Family
ID=14235636
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| JP2099023A Expired - Lifetime JPH0652264B2 (ja) | 1990-04-13 | 1990-04-13 | 液状検体の医学検査用保存液調製剤と調製方法 |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| JP (1) | JPH0652264B2 (ja) |
Cited By (4)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| JP2001128662A (ja) * | 1999-09-10 | 2001-05-15 | Becton Dickinson & Co | 診断検査用細胞に長期安定性をもたらす組成物 |
| JP2001128661A (ja) * | 1999-09-13 | 2001-05-15 | Becton Dickinson & Co | 診断検査用細胞に長期安定性をもたらす方法 |
| US7309468B2 (en) | 2002-05-13 | 2007-12-18 | Becton, Dickinson And Company | Protease inhibitor sample collection system |
| JP2009522542A (ja) * | 2005-12-30 | 2009-06-11 | キアゲン ゲゼルシャフト ミット ベシュレンクテル ハフツング | 生物試料を処理するための方法 |
-
1990
- 1990-04-13 JP JP2099023A patent/JPH0652264B2/ja not_active Expired - Lifetime
Cited By (7)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| JP2001128662A (ja) * | 1999-09-10 | 2001-05-15 | Becton Dickinson & Co | 診断検査用細胞に長期安定性をもたらす組成物 |
| JP2001128661A (ja) * | 1999-09-13 | 2001-05-15 | Becton Dickinson & Co | 診断検査用細胞に長期安定性をもたらす方法 |
| US7309468B2 (en) | 2002-05-13 | 2007-12-18 | Becton, Dickinson And Company | Protease inhibitor sample collection system |
| US7645425B2 (en) | 2002-05-13 | 2010-01-12 | Becton, Dickinson And Company | Protease inhibitor sample collection system |
| EP2260942A2 (en) | 2002-05-13 | 2010-12-15 | Becton, Dickinson and Company | Protease Inhibitor Sample Collection System |
| JP2009522542A (ja) * | 2005-12-30 | 2009-06-11 | キアゲン ゲゼルシャフト ミット ベシュレンクテル ハフツング | 生物試料を処理するための方法 |
| US8796028B2 (en) | 2005-12-30 | 2014-08-05 | Qiagen Gmbh | Method for treating a biological sample with a composition containing at least one polyol and excluding water |
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
| JPH0652264B2 (ja) | 1994-07-06 |
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