JPH0338598A - サイモペンチン類似体 - Google Patents

Abstract

(57)【要約】本公報は電子出願前の出願データであるた
め要約のデータは記録されません。

Description

【発明の詳細な説明】 たサイモベンチン（ＴＰ５）の新規な類似体、これら新
規化合物の製法及び医薬組成における使用に係る。さら
に詳述すれば、本発明の第１の目的は、下記一般式（Ｉ
）で表されるサイモベンチン類似体及び相当する薬学上
許容される酸又は塩基付加塩を１是供することにある。

二股Ａロユ ［式中、 Ｒは水素又はアシル基であり、 Ｒ１は一ＯＲ” 基（ここで、Ｒ３は水素原子又はＣ，−６直鎖状又は分
枝状アルキル基、Ｃ，−６直鎖状又は分枝状アルケニル
基又はアルキニル基、又はＣ？−Ｉ！アリールーアルキ
ル基又はアルキル−アリール基である）であり、＊を付
した炭素の配置はＤ一配装である。］上述の化学構造式
によって定義される本発明の新規化合物は、ペプチドに
関して国際的に認められているシンボルを使用する場合
、下記のように簡明に表示される。

Ｒ−Ｈ−ｇＡｒｇ−Ｄ−Ｌｙｓ−Ｄ−Ａｓｐ−Ｄ−Ｖａ
ｌ−ｍＴｙｒ−Ｒ’　　（　１　）（式中、Ｒ及びＲ１
は前記と同意義である。）かかる式において、ｇＡｒｇ
はカルボキシル基をアミノ基で交換することによってア
ルギニン（アミノ酸）から誘導されるジェム−ジアミノ
残基を示し、一方、ｍＴｙｒは２位においてチロシン（
アミノ酸）の側Ｓｎで置換されたマロニル残基を示す。

本発明の目的に関し、「アシル基」とは、Ｃ＋−ａの直
鎖状又は分枝状鎖を有するアルカノン酸から誘導される
アシル基（たとえばホルミル基、アセチル基、プロビオ
ニル基、スクシノイル基等）、及び安息香酸又は置換安
息香酸から誘導される芳香族アシル基（たとえばベンゾ
イル基、４−ニトロベンゾイル基、２．３．４−　トリ
メトキシベンゾイル基等）を意味する。

ここで使用する用語「薬学上許容される塩」とは、化合
物が付加塩の形で治療上有効な用量で投与される際、そ
れぞれ陰イオン又は陽イオンが比較的非毒性及び無毒性
であり、陰イオン又は陽イオンによる副作用が活性物質
の有益な効果を無効にしてしまうことのない酸又は塩基
の付加塩をいう。

一般式（Ｉ）の化合物と共に薬学上許容される酸付加塩
を生成する各種の酸としては、たとえば、塩酸、臭酸、
リン酸、硫酸等の如き無機酸、ギ酸、酢酸、プロピオン
酸、乳酸、マロン酸、コハク酸等の如き有機カルボン酸
、たとえばメタンスルホン酸及びナフタレンスルホン酸
の如き有機スルホン酸がある。

一般式（りの化合物と共に薬学上許容される塩を生成し
うる塩基としては、たとえば水酸化ナトリウム、水酸化
カリウム、水酸化アンモニウム等の如き無機塩基、及び
トリエチルアミン、トリエタノールアミン等の如き有機
塩基がある。

これらの付加塩は、新規レトロ逆転ペプチドの合成を介
して直接に、又は遊離塩基又は酸の形の一般式（Ｉ）で
表される化合物を原料として常法に従い、１以上の当量
の選ばれた酸又は塩基での処理によって調製される。必
要であれば、生成した酸付加塩を適当なイオン交換樹脂
と処理することにより［たとえばＲ，Ａ、Ｂｏｉｓｓｏ
ｎａｓら「ヘルベチ力・シミー・アクタ（Ｈｅｌｖ、Ｃ
ｈｉｏ＋、Ａｃｔａ、）Ｊ　４３，１３４９（Ｉ９６０
）］、他の形状に変換される。

本発明の好適な一群の化合物は、一般式（Ｉ）における
Ｒが水素原子、代謝系で活性なアシル基、又は生成物の
代謝過程の初期段階においてアミノ基との結合が速かに
開裂され、しかも一般式（Ｉ）の化合物が所望の薬理学
的効果を発揮する濃度で使用される際、治療上毒性又は
禁忌を示さないアシル基であり、ＲＩが前記と同意義で
あり、がが水素である化合物である。

より好適な化合物は、Ｒが水素原子であり、Ｒ１が前記
と同意義であり　Ｒ１が水素である一般式（Ｉ）で表さ
れる化合物である。

本発明の化合物は、免疫系において顕著な活性を発揮す
る。

過去１５年の間に、Ｇ、Ｇｏｌｄｓｔｅｉｎ及びそのグ
ループは、胸腺の上皮細胞によって分泌されるポリペプ
チドホルモン（すなわちサイモポイエチン；その−次配
列はアミノ酸４９個でなる）の生理活性及び可能な薬理
学的利用１と関し詳細に研究を行っている（Ｇ、Ｇｏｌ
ｄｓｔｅｉｎ　ｒネーチャー（Ｎａｔｕｒｅ）Ｊ　２４
７．１１（Ｉ９７４）ＨＤ、Ｈ，Ｓｃｈｌｅｓｉｎｇｅ
ｒら「セル（Ｃｅｌｌ）Ｊ　５．３６１（Ｉ９７５）：
　Ｔ、Ａｕｄｈｙａら「バイオケミストリー（Ｂｉｏ−
ｃｈｅｍｉｓｔｒｙＮ　２０．６１９５　（Ｉ９８１）
）。

サイモポイエチンは、神経筋伝達（Ｇ、Ｇｏｌｄｓｔｅ
ｉｎ「ランセット（Ｌａｎｃｅｔ）Ｊ　＠、　１１９　
（Ｉ９６８））、Ｔリンパ球とＢリンパ球との分別（Ｍ
、Ｐ、５ｃｈｅｉｄらｒＪ、Ｅｘｐ。

Ｍｅｄ、Ｊ　１４７．１７２７（Ｉ９７ｇ））、及び免
疫応答（Ｃ，Ｙ、Ｌａｕら「ジャーナル・オブ・イミュ
ノロジー（Ｊ、Ｉｍｍｕｎｏｌ、）Ｊ止、　１６３４　
（Ｉ９８０））に影響を及ぼすことにより、身体の各種
の調節作用を行う。

構造−活性の関連性についての研究では、生理活性には
、サイモポイエチンの４９個のアミノ酸配列のすべてが
必要ではなく、アミノ酸配列３２−３６に相当するペン
タペプチド Ｈ−Ａｒｇ　−Ｌｙｓ　−Ａｓｐ　−Ｖａｌ　−Ｔｙｒ
　−ＯＨ（サイモペンチン；ＴＰ５）が、工ｚｚ崖及び
ｌ１旦において天然ホルモンの完全な生理活性を発揮す
ることが示されている（Ｇ、Ｇｏｌｄｓｔｅｉｎら「サ
イエンス（Ｓｃｉｅｎｃｅ月２０４．１３０９　（Ｉ９
７９））。

サイモペンチンは、自己免疫系の疾患（たとえば慢性関
節リウマチ）の治療、及びたとえば−次免疫不全症（胸
腺の不存在又は不完全な発達、これによるＴリンパ球の
成熟における変調による）及び急性又は再発性ウィルス
疾患の治療における身体の防御系の刺激剤として、又は
ワクチンにおける助剤として、既に臨床の分野で導入さ
れている。

しかしながら、治療上の基準法を定めることは、薬理効
果が投与方法及び投与期間によってかなり変動するため
、有効用量の決定が困難であり、非常に問題である（Ｔ
、　Ａｕｄｈｙａらｒｓｕｒｖ　、　Ｉｍｍｕｎｏｌ　
。

Ｒｅｓ、Ｊ　４ｔｈ、　呂戊ＬＬ、　　ｌ、　　１７　
（Ｉ９８５）；　Ｔ、Ａｕｄｈｙａらｒｌｎｔ、Ｊ、Ｐ
ｅｐｔｉｄｅ　Ｐｒｏｔｅｉｎ　Ｒｅｓ、Ｊ　２２．　
５６８（Ｉ９８３））。

このような例としては、Ｂｏｌｌａらによってｒｌｎｔ
、Ｊ。

Ｃｌ１ｎ、Ｐｈａｒｍ、Ｒｅｓ、Ｊ　ＩＶ（６）、　４
３１　（Ｉ９８４）に開示された例があり、これによれ
ば、皮下注射した場合のＴＰ５による抗体の生産に対す
る促進効果も、同じ用量を静脈内に投与した場合には完
全に抑制される。この理由は、血漿中におけるＴＰ５の
半減期が短いことにある。事実、ＴＰ５は各種のプロテ
アーゼの作用により血漿中で迅速に劣化される（ｔ＋／
＊＝１．５分）　　（Ｔ、Ｐ、ＴＬｓｃｈｉｏら　ｒｌ
ｎｔ、　　Ｊ、　　ＰｅｐｔｉｄｅＰｒｏｔｅｉｎ　Ｒ
ｅｓ、Ｊ　１４．４７９　（Ｉ９７９））。

最近では、プロテアーゼに対する抵抗性が増大されたＴ
Ｐ５類似体を得ることを目的として研究が行われている
。たとえば、ヨーロッパ特許公開第１３５．７２２号及
び米国特許第４，５０５，８５３号には、ペプチド配列
内の各アミノ酸を適当に変化させることによって得られ
たサイモペンチン類似体が開示されている。

この目的に関し、最近では、ペプチド鎖の酵素加水分解
に対して反応活性な結合部に１以上のレトロ逆転を有す
る一連のサイモペンチン類似体が合成されている（ヨー
ロッパ特許公開第２８２，８９１号及び特願平１−３３
６１８３号及び同２−１０３２６９号）。

このようにして得られた化合物は、ＴＰ５の免疫調節活
性を維持又は改善するものであり、天然ペプチドのタン
パク質分解酵素に対してかなり安定であることが証明さ
れている。特に、たとえばヘパリン処理したヒト血漿中
におけるＴＰ５の半減期は１．５分であるのに対し、（
Ｉ，２）ｒ、ｔ、ＴＰ５類似体の半減期は２２分である
。

ＴＰ５Ｐ２Ｏ３つのアミド基をレトロ逆転して変性する
ことにより、さらに長い半減期が得られている。

２種類の（Ｉ，２−３，４）ｒ、ｉ、ＴＰ５及び（Ｉ，
２−４，５）ｒ、ｉ。

ＴＰ５は、ＴＰ５のものと同じ免疫促進活性を維持しつ
つ、酵素分解に対して特に安定であり、半減期は６時間
以上である。

半面、２つの近接しないペプチド結合のレトロ逆転は、
これら２種類の類似体化合物の合成の間に、２つのアミ
ド官能基のアミノ官能基への変化及び２つの２−置換マ
ロン酸誘導体の生成を生ずる。

さらに、偽値ペプチド配列への２つのマロン酸残基の導
入のため、４種の異性体の混合物（ラセミ生成物）とし
て最終生成物が得られる。

異性体の分割（必要であれば）には、煩雑な調製クロマ
トグラフィー工程が必要である。

発明者らは、ＴＰ５分子中のすべての結合を逆転するこ
とにより、すなわちＣ末端アミノ酸のチロシンの代わり
に相当する２−置換マロニル残基を使用すると共に、Ｎ
末端アミノ酸のアルギニンの代わりにジェム−ジアミノ
残基を使用し、かつすべてのアミノ酸残基を逆転配置の
配列に挿入することによって、ＴＰ５のものよりも強い
免疫促進活性、及び上述の２種類の偽似ペプチドのもの
に匹敵するプロテアーゼに対する安定性を示す生成物が
等しく得られるとの知見を得た。

その調製に関しては、問題となる化学工程の数は少なく
、とりわけ生成物は２種類のジアステレオ異性体の混合
物（必要であれば、ＨＰＬＣ（高速液体クロマトグラフ
ィー）によって容易に分割される）として得られる。

本発明の化合物は、一般式（Ｉａ） （式中、Ｒ８はＲ又はα−アミノ官能基の保護基であり
：ＰＧはグアニジノ官能基の保ｆｉ基であり、ＰＬは側
鎖のアミノ官能基の保護基であり；Ｐはカルボキシル官
能基の保護基であり；Ｐｌはチロシンのヒドロキシル官
能基の保護基であり；Ｒ＋は前記と同意義であり、本を
付した炭素の配置はＤ−配置である）で表される相当す
る化合物から保護基を除去することによって容易に調製
される。

このような保護基の除去は、当分野で公知の方法に従っ
て実施される。一般に、チロシンのカルボキシル基及び
ヒドロキシル基に関して第３級ブチル基又は第３級アミ
ル基、リシンのアミノ基に関して第３級ブトキシカルボ
ニル基又はペンジルオキシカルボニル基、及びアルギニ
ンのグアニジノ基に関してベンゼンスルホニル基の如き
一般的な保護基を使用する場合、酸性溶媒中、少量のエ
タンジチオール、アニソール、チオアニソール又はレゾ
ルシノール（生成するカルボカチオンを柿集するスカベ
ンジャーとして使用される）の存在下、酢酸中に希釈し
た塩酸、トリフルオロ酢酸又はトリフルオロ酢酸−トリ
フルオロメタンスルホン酸屁合物による酸分解によって
簡単に除去される。

反応終了後、一般式（Ｉ）で表される所望の生成物をそ
のままで又は付加塩として回収し、常法に従って精製す
る。

このようにして得られた化合物の均質性についてはＴＬ
Ｃ又はＨＰＬＣによってテストし、純度に関してはアミ
ノ酸分析及びＮＭＲによって測定する。

一般式（Ｉａ）（Ｒ”がＲである）で表される化合物は
、一般式（ＩＶ） の相当する末端アミドを１４−ビス−トリフルオロアセ
トキシ−ヨードベンゼン（ＴｒＢ）で処理し、ついで形
成された末端アミノ官能基をアシル化することによって
得られる。一方、この一般式（ＩＶ）で表される中間体
自体は、一般式（Ｖ）（式中、Ｐ′は前記と同意義であ
る）で表されるアミドを、好適に保護されたＤ−リジン
、Ｄ−アスパラギン酸及びＤ−バリンの残基と順次縮合
させて、一般式（Ｖｌ） （式中、Ｐ、　Ｐ’、ｐＬは前記と同意義であり、＊を
付した炭素の配置はＤ−配置であり、Ｐ′は水素又はα
−アミノ官能基の保護基であり、これらは他の保護基の
除去を生じない条件下で容易に除去される）で表される
中間体化合物を生威し、ついで、該化合物を、いったん
保護基Ｐ′を除去した後、シラン化剤の存在下、フェノ
ール基部が保護基Ｐｌで保護されたチロシンの側鎖によ
って５位が好適に置換されているメルドラム酸（Ｍｅｌ
ｄｒｕｍ’ｓ　ａｃｉｄ）（■） と反応させることによって調製される。

第１の縮合に関して、これらの縮合反応は、ペプチド合
成に関する技術文献において公知の方法の１つに従って
実施される。得られる生成物の収率及び純度に関して最
良の結果は、いずれの場合においても、カルボジイミド
（たとえばジシクロへキシルカルボジイミド又はジイソ
プロピルカルボジイミド及びｌ−ヒドロキシベンゾトリ
アゾール）の使用によって達成される。このような縮合
反応（室温において有利に行われる）に関し、反応体を
溶解させかつ反応の進行にマイナスの影響を及ぼさない
一般的な非プロトン性、極性の有機溶媒を使用する。使
用できる溶媒としては、ジメチルホルムアミド、アセト
ニトリル、ジメチルスルホキシドがあり、たとえばハロ
ゲン化脂肪族炭化水素（塩化メチレン、ジクロロエタン
等）の如き極性の劣る溶媒を混合することも可能である
。

この合成において有利に使用される保護基は、文献にお
いて公知であり、従来のペプチド合成で一般的に使用さ
れている基である。特にＰＬは、好ましくは第３級ブト
キシカルボニル基又はベンジルオキシカルボニル基にド
ロー又はハロー置換されていてもよい）であり：ＰＧは
、好ましくは各種置換されたベンゼンスルホニル基［ア
ルキルベンゼンスルホニル基（たとえばトルエンスルホ
ニル基）、又はアルキルアルコキシベンゼンスルホニル
基（たとえば４−メトキシ−２，３，６−）リメチルベ
ンゼンスルホニル基）コであり；及び最後に、Ｐは末端
カルボキシル官能基の各種保護基［アルキル基（たとえ
ば第３級ブチル基又は第３級アミル基）、又はアリール
アルキル基（たとえばベンジル基又は置換ベンジル基）
］である。

一連の縮合反応（進行はＴＬＣによって容易に追跡され
る）の完了後、一般式（ｒＶ）に相当する得られた生成
物を常法によって回収する。

特に、好適な態様によれば、カップリング剤としてカル
ボジイミドを使用する場合、回収法は、生成する尿素の
濾去による分離、溶媒の留去、残渣又は該残渣の有機溶
媒溶液の弱塩基性又は弱酸性溶液での洗浄を包含するも
のであり、最後に晶出又はクロマトグラフィーを介して
精製を行う。

いったん保護基Ｐ′を除去した後、中間体化合物を、特
願平１−３３６１８２号の開示に従って（詳細について
は、当該特許出願明細書を参照する）、シラン化剤の存
在下、メルドラム酸（■）と接触させる。

最後に、このようにして得られた生成物（ＩＶ）を、特
開昭５８−１４６５３８号に従ってＴＩＢと反応させる
。

すなわち、ジメチルホルムアルデヒド、アセトニトリル
等の如き不活性溶媒の水性混合物中において、アミド物
質をわずかに過剰量のＴＩＢと反応させる。該反応は、
不活性ガス（代表的には窒素）を反応混合物中に吹込み
、その進行をＴＬＣによって監視して行われる。アミド
のアミンへの変換の完了を確認した後、有機溶媒を除去
し、凍結乾燥によって生成物を回収する。

従って、本発明の他の目的は、新規化合物の合成法及び
この方法において得られる一般式（Ｉａ）、（ＩＶ）及
び（Ｖｌ）で表される新規の中間体にある。

本発明の化合物は各種の異性体の形で存在しうる。

実際、構造式（Ｉ）では少なくとも５つの不斉炭素原子
が存在し、ジェム−ジアミノ誘導体とマロニル残基との
間に挿入されたアミノ酸（本が付されている）の継体配
置はＤ−配置である（このような予め確立された配置は
、合成に当たり好適なり一アミノ酸誘導体を使用するこ
とにより簡単に得られる）が、ジェム−ジアミノ炭素原
子の絶対配置も、ジェム−ジアミノフラグメントが相当
するＤ−アミノ酸アミドを原料として得られるため一定
であり、一方、マロニル残基の炭素原子はＲ−又はＳ−
配置をとりうる。この結果、本発明の化合物は２種類の
ジアステレオ異性体の混合物として得られ、必要であれ
ば、該混合物は公知の分割法によって各異性体に分割さ
れる。

一般式（Ｉ）の化合物は、光学活性形として、及び異性
体の混合物としてのいずれでも使用される。

本発明の化合物は、サイモペンチンと比べて血漿ペプチ
ダーゼの作用に対してより安定であることが証明された
。

特に、酵素加水分解に対する［ｇＡｒｇ’　、Ｄ　−Ｌ
ｙｓ”。

Ｄ　−Ａｓｐ”　、Ｄ　−Ｖａｔ’　、　（Ｒ、Ｓ）ｍ
Ｔｙｒ’１ＴＰ５［（ｃ　、　ｒ、　ｉ　、　）ＴＰ５
］のレイビリティ−（Ｉａｂ４１Ｈｙ）のテストを、Ｔ
Ｐ５と並行して、ヘパリン処理したヒト血漿を使用し、
これらのペプチドを濃度約３０ナノモル／−（血漿）で
別々にインキュベートすることにより行った。

インキュベーションを３７℃で行い、各時間毎に血漿混
合物のサンプル各１００μＱを抽出し、トリフルオロ酢
酸を１０％程度で添加して反応を停止させ、ＩＱＯＯＯ
Ｘ　ｇで５分間遠心分離１−た。上澄液の一定量につい
て、各時間毎のペプチド濃度の変化を示すに好適な条件
下でクロマトグラフィー処理した。

このようにして得られる酵素反応速度から、半減期（す
なわち、被テストペプチドの５０％を減成させるために
必要な３７℃におけるインキュベーションの時間）を算
定し、結果を第１表に示す。

コＬ−よ−」と ヒト血漿中での酵素加水分解に対する安定性Ａ　　　　
　　　　　　　」シ１ＱＬＬＴＰ５　　　　　　　　　
　　　　　　　１　、５（ｃ、ｒ、１）ＴＰ５　　　　
　　　　　　　　３６０ＴＰ５と比較して新規なレトロ
逆転類似体の安定性の増大は、単離した酵素（ロイシン
アミノペプチダーゼ及びカルボキシペプチダーゼ）を使
用する場合にも認められた。

このような新規な類似体の免疫刺激活性を、上記ＴＰ５
と比較してインビボでテストした。

詳しくは、テストに当たって溶血反応プレート法（ＰＦ
Ｃ）を使用し、Ｊｅｒｎｅ及びＮｏｒｄｉｎによって開
示された方法によって実施した。

生後１０−１２週、体重約ｚｓｇのＣ３＋（／　ＨｅＮ
Ｃｒ１Ｂｒ近親交配雄マウス（Ｃａｌｃｏ　−［ｔａｌ
ｉａ）にヒツジ赤血球（ＳＲＢＣ）１−２Ｘ１０１を含
有する無発熱原性塩溶液（０，２ｍ１））を静脈注射す
ることによってテストを行った。２時間後、マウス３匹
からなる各群に、塩ｆｆｊ液０．２ｍ０（コントロール
）、被検ペプチドを含有する塩溶液０．２−を経口投与
した。４日後、マウスを殺し、牌臓を摘出し、機械的に
破壊してリンパ球を分離した。このようにして単離した
リンパ球を、Ｅａｒｌｅ塩を含有する最小必須培地（Ｍ
ＥＭ）（３Ｘ１５ｍＱ）で洗浄し、最終濃度１５０，０
００（細胞）で同じ培地（Ｉ−）に懸濁化させた。つい
で、各細胞懸濁液（０，１ｍ０）をＭＥｌｉｌにより１
：１００で希釈し、各希釈液１００μＱを、ＭＥＭ２５
μＱ１１０％５ＲＢＣ抗原溶液２５μＱ及びモルモット
補体２５μＱを収容するマイクロプレートの穴に、穴２
つを１組として最終希釈ｌ・６４で充填した。全懸濁液
を直ちに毛管現象によって各式から積層されたガラスホ
ルダースライドに移動させた。スライドの縁をパラフィ
ンで閉止し、３７℃に制御したチャンバーで１時間・ｆ
ンキュベートした。

この時間の経過後、抗体（ＰＦＣ）を分泌したリンパ球
の数を示す直接溶血反応プラークを光コントラストビュ
ーア−によって計数した。発現された抗体は１ｇＭクラ
ス、すなわち−次抗体応答である。

結果（コントロールに対する％で表示）を第２表に示す
。

」　　２−」Ｌ 化 物 プラーク形成 コントロール１こ文・　　　る　　ユ ｃ、ｒ、１−ＴＰ５ ００ｎｇ ４４ 第２表において、ｒｃ、ｒ、ｉ、Ｊは「すべてがレトロ
逆転されている」を意味する（本明細書の他の部位にお
いても同じ）。

これらの生理学的特性のため、本発明のペプチドは、身
体の免疫応答を妨げ、不充分な場合には、これを刺激す
る。従って、本発明の化合物は、免疫不全に関連する一
連の異常状態の治療に有用である。これらの異常状態と
しては、たとえば胸腺の先天的欠損、又は慢性又は長期
間のウィルス感染、真菌感染、又はマイクロプラズマ感
染によるＤｉＧｅｏｒｇｅ症候群が含まれる。

従って、本発明の他の目的は、一般式（Ｉ）に相当する
化合物の１以上を治療上有効な量で含有する医薬組成物
を提供することにある。

免疫刺激剤又は免疫調節剤としての治療分野での使用に
関して、本発明の化合物は非経口、経口又は舌下投与さ
れる。新規な化合物を含有する処方は、常法に従い、活
性物質を不活性ビヒクル及び必要により適当に選択され
る添加剤と配合することによって調製される。

経口又は舌下投与に関しては、本発明の化合物は、キャ
リヤー／添加剤（たとえばデンプン、砂糖、水、アルコ
ール等）を使用して調製され、香料、安定剤、保存料、
滑沢剤等を含有しうる錠剤、カプセル剤、滴剤、エリキ
シル剤等として投与される。非経口投与に関しては、選
ばれるキャリヤーは注射用の滅菌水である。公知のよう
に添加剤を添加できる。治療上有効な１日当たりの用量
は、処置の対象（体重、年令及び容体）及び投与方法に
応じて変動する。しかしながら、本発明の化合物は、一
般に２ないし２００ｎｇ／ｋｇの１日当たりの用量で投
与される際に有効である。従って、本発明の医薬処方は
、上述の範囲の１日当たりの用量が達成される滑で一般
式（Ｉ）の化合物を含有する。

下記の実施例は、本発明を代表するいくつかの化合物及
びこれらの合成法を詳述するものである。

実施例 Ａｒ　’　Ｄ−Ｌ　ｓ”　Ｄ−Ａｓ　”　Ｄ−Ｖａｌ’
　　ＲＳ　ｍＴ　ｒ’工 １　）　Ｆｍｏｃ−Ｄ−Ａｒ　　Ｍｔｒ　−Ｎ８０℃に
冷却したＦｍｏｃ−Ｄ−Ａｒｇ（Ｍｔｒ）−０Ｈ（７，
９９，１３，０ミリモル）のジメチルホルムアミド（Ｄ
ＭＦ、５０ｍＱ）溶液に、攪拌しながら、Ｎ−ヒドロキ
シベンゾトリアゾール（）［０Ｂｔ）のアンモニウム塩
（２，４９ｇ、１５．２６ミリモル）のＤＭＦ（Ｉ５ｍ
Ｑ）溶液及びジシクロへキシルカルボジイミド（ＤＣＣ
；３．２１ｇ、１５．６ミリモル）のＤＭＦ（Ｉ５＋ｒ
＋Ｑ）溶液を添加した。

約１時間後、温度を室温に上昇させ、攪拌をさらに１時
間続けた。

ついで、生成したＤＣＵを濾去し、溶媒を蒸発させて油
状残渣を得た後、該残渣をＡｃＯＥｔ（７０ｍＱ）で採
取し、初めに５％ＮａＨＣＯ，水溶液（３Ｘ５０ｍＱ）
及びついで飽和Ｎａω水溶液（３Ｘ５０ｍＱ）で洗浄し
た。

ついで、有機溶液をＭ　ｇ　Ｓ　Ｏａで乾燥し、蒸発乾
固させた。このようにして得られた固状残渣をＥｔｔＯ
（Ｉ００μＱ）と共に粉砕して、無色の粉末（７６ｇ、
収率９６％）を得た。

融点：　１６８−１７２℃ ＴＬＣ（クロロホルム／メタノール／酢酸＝８５／１０
１１０１５）（ＣＲｆ＝０．４４ＨＰＬＣカラム；　Ｈ
ｉｂａｒ、　Ｌｉｃｈｒｏｓｏｒｂ（登録商標）ＲＰ−
１８（Ｉ０μ） 溶離剤：最初の２０分間はＡ溶液中Ｂ溶液がＯから４０
％へ、次の１０分間はＡ溶液中Ｂ溶液が４０から８０％
へ、さらに５分間はＢ溶液が８０％を維持するグラデイ
エンド（ここでＢ＝０．１％ＴＦＡのＣ８ｍＣＮ溶液；
　Ａ＝　１０％水性ＣＨ，ＣＮ中に０．１％ＴＦＡを含
む溶液）。

流ｆｉ：１．５ｍｏ／分 検出　：　Ｕ、Ｖ、　２３０ｎｍ シングルビークＴ、、：　２６．１９分２）Ｈ−Ｄ−Ａ
ｒ　　Ｍｔｒ　−ＮＯ−ＨＣＱＤＭＦ／ジエチルアミン
混合物（８０／　２０）　（Ｉ００ｍＱ　）中に前記工
程の化合物（７，９ｇ、１３．０　ミリモル）を含む懸
濁液を１時間攪拌した。ついで、減圧下で溶媒を留去し
、残渣をＡｃＯＥｔ（Ｉ００ｍＱ　）で採取した。有機
溶液を０．１Ｎ　Ｈ（Ｊ：！水溶液（３Ｘ５０ｍｌｌ）
）で抽出し、合わせた水性抽出酸をＡｃ０Ｅｔ　５０−
で洗浄し、数回凍結乾燥を行って、フレーク状の生成物
（３，２５ｇ、収率６５％）を得た。

この生成物は正確な融点を有していなかった。

’　ＨＮＭＲ分析により、生成物の構造を確認した。

前記工程１）の条件下で行ったＨＰＬＣ分析では、Ｔ、
＝１２．６９分にシングルピークを示した。

ＴＬＣ（ブタノール／Ｈ１０／酢酸＝　４／　１−　（
ＢＷＡ）　）Ｒｆ＝０．３６ ３　）　Ｚ−Ｄ−Ｌ　ｓ　Ｂｏｃ　−Ｄ−Ａｒ　　Ｍｔ
ｒ　−ＮＨ窒素雰囲気下、０℃に維持し、攪拌しながら
、Ｚ−Ｄ−Ｌｙｓ（ＢｏＣ）ＯＨ（２，８５Ｑ、７．４
８　ミＩＪ　モル）ノｃＨｔｃＱ＊（３０＋ｙ＋Ｑ　）
溶液に、ｌ−ヒドロキシベンゾトリアゾール（ＨＯＢｔ
）（Ｉ，１７ｇ、８．１６ミ’Ｊ　モル）（７）　ＣＨ
ｔＣＱ　＊　（３０ｍＱ）溶液及びジシクロへキシルカ
ルボジイミド（ＤＣＣ）（Ｉ，５４ｇ、７４８ミリモル
）のＣＨ，■、（５ｍＱ）溶液を添加した。３０分後、
水浴を取去り、さらに３０分間攪拌を続けた。ついで工
程２）で得られた化合物（２，６２Ｑ、７．４８ミ’）
　モル）ノＣＨＩＣＱ　ｔ／　ＤＭＦ混合物（ｌ／２、
容量／容ｆｆ１）（３０＋ｒｔ））溶液を添加した。

ｌ＃間後、反応の終点をクロマトグラフィーテストで確
認したところで、生成されたＮ、Ｎ’−ジシクロヘキシ
ル尿素（ＣＣＵ）を濾去し、濾液を乾固させた。このよ
うにして得られた残渣をテトラヒドロフラン（ＴＨＦ）
　（４０ｍＱ　）で採取し、−２０℃で一夜放置した。

ついで、濾過によって固状沈殿物を除去し、減圧下でＴ
ＨＦを留去した。残渣をＡｃＯＥｔ（７０ｍＱ）で採取
し、室温において５％ＮａＨＣＯ，水溶液（５ｈｙＱ）
で２０分間処理し、ついで有機相を分離し、同じ水溶液
（２ｘ５０ｍＱ）、ツイテ飽和ＮａＣＱ水溶液（３Ｘ５
０１ＴＩＱ）、０．１Ｎ　Ｈω水溶液（３Ｘ５０ｍｌｌ
））、最後に再び飽和Ｈａ印氷水溶液３Ｘ５０ｍＱ）で
洗浄した。

有機相をＭｇ５Ｏａで乾燥し、乾固したところ、ガラス
状コンシスチンシーのオフホワイト固状物４．９０ｇ（
収率９３．５％）が得られた。

’ＨＮＭＲ及び質量スペクトル分析によって生成物の構
造を確認した。

工程１）の条件下でのＨＰＬＣ分析では、ＴＲ＝２５．
５分にシングルピークを示した。

ＴＬＣ（ＣＭＡ）　Ｒｆ＝０．５３ ４）Ｈ→−１５ＢＯＣ−０−Ａｒ　　Ｍｔｒ　−ＮＨ前
記工程で得られた化合物（２，９９ｇ、４ミリモル）の
ＣＨａＯＩ（（５０ｍＱ　）溶液に、ギ酸アンモニウム
（０，５９，８ミリモル）のＣＨ，ＯＨ／　Ｈ，０（９
／　１　：　ｌＯｍＱ　）溶液及び活性炭に担持したパ
ラジウム（Ｉ０％Ｐ（Ｐｄ／Ｃ）、１．５ｇ）（少量ず
つ）を添加した。ついで、反応混合物を攪拌しながら、
窒素雰囲気下、室温に３０分間維持し、シーライト上で
濾過した。濾液を乾固させ、得られた残渣を）１．０（
７０ｍＱ）で採取し、ｐＨを５％Ｎａ、ＣＯ，水溶液で
９に調節した。水相をＡｃＯＥｔ（３ｘ７０ｍＱ）で抽
出し、有機相を集め、Ｍｇ５Ｏａで乾燥し、乾固させた
。所望の生成物１．６７ｇが収率６９％で得られた。

クロマトグラフィー分析では、微量の不純物も存在しな
いことを示した。

工程１）の条件下でのＨＰＬＣ分析では、ＴＲ＝１９．
４分にシングルピークを示した。

ＴＬＣ（ＣＭＡ）　Ｒｆ＝０．５２ ５　）　Ｆｍｏｃ−Ｄ−Ａｓ　　ＯＢｕ’　−Ｄ−Ｌ　
ｓ　Ｂｏｃ−Ｄ−Ａｒ　　Ｍｔｒ−山 窒素雰囲気下、０℃に冷却し、攪拌しながら、Ｆｍｏｃ
−Ｄ−Ａｓｐ（ＯＢｕ’）　（Ｂａｃｈｅｍ）　（Ｉ，
２３Ｑ、２．９９ミリモル）のＣＨ＊Ｃｆ）　２／　Ｄ
ＭＦ（３７／　１　：３８ｒｍｌ）　）溶液に、ＨＯＢ
ｔ（４６７■、３．２６ミリモル）のＤＭＦ（３ｍｌｌ
））溶液及びＤＣＣ（６１７■、２．９９ミリモル）の
ＣＨ＊Ｃｆ：ｌ　＊（５ｍＱ）溶液を添加した。

３０分後、温度を室温まで上昇させ、攪拌を１５分間続
けた。ついで、工程４）で得た化合物（Ｉ，６７ｇ、２
．７２　ミ！Ｊ　モル）ノＣＨ＊（Ｑ　ｓ（ｌＯｍＱ）
溶液を添加した。

反応混合物を室温で１．５時間ｆｌｕｔｅ、た。ついで
、生成したＤＣＵを濾過によって除去し、減圧下で溶媒
を留去し、残渣をＴＨＦ（Ｉ１）ｍｌｌ））で採取した
。溶液を一１５℃に冷却し、−夜この温度に維持し、再
度濾過し、蒸発により濾液からＴＨＦを除去した。この
ようにして得られた油状残渣をＡｃ０Ｅｔ　１００−で
採取し、５％ＮａＨＣＯｓ水溶液（３Ｘ５０ｍＯ）、飽
和ＮａＣＱ水溶液（３Ｘ５０ｍＱ）、０．１Ｎ　ＨＣＱ
水溶液（３ｘ５０ｍＱ）、最後に再度飽和Ｎａω水溶液
（３Ｘ５０ｍＯ）で順次洗浄した。洗浄した有機相をＭ
ｇ５Ｏ，で乾燥し、蒸発乾固させた。ついで、油状残渣
をヘキセンで摩砕して白色の微粉体（２，２６ｇ、収率
８２％）を得た。

融点＝　１４２．５℃ ’　）ＩＮＭＲ及び質量スペクトル分析により生成物の
構造を確認した。

工程１）の条件下でのＨＰＬＣ分析では、Ｔｌ１＝３０
．６４分にシングルピークを示した。

Ｔ１、Ｃ（ＣＭＡ）　Ｒｆ＝０．６ ６）　Ｈ−Ｄ−Ａｓ　　ＯＢｕ’　−Ｄ−Ｌ　ｓ　Ｂｏ
ｃ　−Ｄ−Ａｒ　　Ｍｔｒ　−島 窒素雰囲気下、室温において、前記工程の化合物（２，
２６ｇ、２，２４ミリモル）の８０／２０　ＤＭＦ／ジ
エチルアミン混合物（２５ｍＱ　）溶液を１時間攪拌し
た。減圧下、溶媒を留去し、残渣をＡｃＯＥｔ（５０ｍ
Ｑ）で採取した。有機溶液を０．１ＮＨω水溶液（３Ｘ
４０ｄｌ）で抽出し、合わせた水性抽出液をＩＭ　Ｎａ
ＯＨでｐＨ８に調節し、再びＡｃ０Ｅｔ（３Ｘ７０ｍＱ
）で抽出した。ついで、有機相をＭｇ５Ｏａで乾燥し、
乾固させたところ、油状残渣を得た。これをｎ−ヘキサ
ンで摩砕し、白色の微粉体（Ｉ，３ｇ、収率７４％）を
得た。

’）ＩＮＭＲ及び質量スペクトル分析により生成物の構
造を確認した。

工程１）の条件下でのＨＰＬＣ分析では、丁、＝２１．
７４分にシングルピークを示した。

予じめ０℃に冷却し、窒素雰囲気に維持したＺ−Ｄ−Ｖ
ａｔ（Ｂａｃｈｅｍ）（４５６ｎ＠、１．８５ミリモル
）のＣＨ，ω。

（Ｉ２ｍＱ’）溶液に、ＨＯＢｔ（２８３■、１．９８
ミリモル）のＤＭＦ（３−）溶液及びＤＣＣ（３７５ｍ
ｇ、　１．８１５ミリモル）のＣＨ，ωｓ（５ｍＱ）溶
液を添加した。３０分後、温度を室温に上昇させ、溶液
をさらに３０分間攪拌した。ついで、前記工程で得られ
た化合物（Ｉ，３ｇ、１．６５ミリモル）（’）　２／
　ｌ　ＣＨ＊（Ｑ　＊／　ＤＭＦ混合物（Ｉ５ｍｃｉ）
溶液を添加した。

このようにして生成した沈殿を濾取し、イソプロパノー
ルから再結晶させ、ミクロ結晶性の白色固状物７３３ｍ
ｇ　（収率４４％）を得た。

’　ＨＮＭＲ及び質量スペクトル分析によって生成物の
構造を確認した。

工程１）の条件下での）ＩＰＬＣ分析では、Ｔ＊＝２８
．５２分にシングルビークを示した。

前記工程で得られた化合物（５００ｍｇ、　０．４９ミ
リモル）のＣＬＯＤ（Ｉ０ｍＱ　）溶液に、ＣＨ，０Ｈ
（３，５ｍ１））及びＨ，０（０，２ｍＱ）中に溶解し
たギ酸アンモニウム（９４ｍｇ。

１．４９ミリモル）及び活性炭に担持したパラジウムｌ
Ｏ％Ｐ（Ｐｄ／Ｃ）　（５００１′ＩＩｇ、少量ずつ）
を添加した。ついで、室温、窒素雰囲気下において反応
を行った。

２時間後、反応混合物をシーライト上で濾過し、減圧下
での蒸発によって溶媒を除去した。

残渣をＨＩ３（４０ｍＱ）で採取した。ついで、水溶液
を希塩酸でｐＨ４に調節し、Ａｃ０Ｅｔ（３Ｘ　２０ｍ
１＞）で抽出し、炭酸水素ナトリウム飽和溶液を添加す
ることによってｐＨ８に調節し、Ａｃ０Ｅｔ（３Ｘ　２
０ｍ０）で抽出した。ついで、有機抽出液を集め、減圧
下で乾固させたところ、無色の泡状固状物４００ｍｇ（
収率９２３％）を得た。

’　ＨＮＭＲ分析によって生成物の構造を確認した。

工程１）に記載の条件下でのクロマトグラフィー分析で
は、Ｔ＊＝２２．２０分にシングルピークを示した。

前記工程で得られた生成物（４００ｍｇ、　０．４５ミ
リモル）のテトラヒドロフラン（Ｉ５ｍｌｌ））溶液に
、順次、２２−ジメチル−５−（４−第３級ブトキシ〉
ベンジル−１，３−ジオキサン−４，６−ジオン（（Ｍ
）Ｔｙｒ（Ｂｕ’　））（Ｉ６５ｍｇ、　０．５４ミリ
モル）、Ｎ、Ｏ−ビス−（トリメチルシリル）アセトア
ミド（ＢＳＡ）（０，２２４ｍＱ、０．９ミリモル）、
及びトリメチルシリルクロリド（ＴＭＳＣ）（０，０５
７ｍ０Ｓ０．４５ミリモル）を添加した。

４時間攪拌した後、さらにＢＳＡ（０，０４４ｄ、０　
、０１８ミリモル）を添加し、反応をさらに２０時間続
けた。

ついで、水（７０ｍｌｌ））を添加し、溶液をＡｃ０Ｅ
ｔ（３ｘ　５０−）で抽出した。有機抽出液を集め、Ｍ
ｇＳＯ４で乾燥し、減圧下で蒸発させた。無色の油状生
成物２７０ｍｇ（収率５３．７％）を得た。

’　ＨＮＭＲ及び質量スペクトル分析によって生成物の
構造を確認した。

工程１）の条件下でのＨＰＬＣ分析では、Ｔ＊＝２８．
０３分及び２８．８９分にジアステレオ異性体の２つの
ピークを示した。

前記工程で得られた化合物（２７０ｍｇ、　０．２４ミ
リモル）を、窒素雰囲気下、室温に維持しながら、ＣＨ
，ＣＮ（３ｍＱ　）、ＤＭＦ（Ｉｍｌｌ））及びＨ，０
（２，５＋ｎＱ）を含有する混合物に溶解させた。つい
で、ＴＩＢ（Ｉ２２■、０２８ミリモル）のＣＩ（Ｉｃ
Ｎ（ＩｍＱ）溶液を添加した。３時間後、２０％に等し
いｆｉｌ（２５＋ｎｇ、　０．６ミリモル）のＴＩＢを
添加し、溶液をさらに２時間攪拌した。ついで、反応混
合物を乾固させ、残渣をＣＨ，０）！（２ＱｍＱ）で採
取し、再度乾固させ、当該操作を繰返し数回行った。こ
のようにして得られた残渣は、所望生成物を８５％以上
の純度（工程１）の条件下でのＨＰＬＣにより測定；該
分析では、ダブルビークの存在が明らかになった）で含
有していた。

得られた生成物を、さらに精製することなく、次の操作
に利用した。

前記工程で得られた生成物約２６０ｍｇ（約０．２３　
ミリモル）を、トリフルオル酢酸、トリフルオルメタン
スルホン酸及び１．２−エタンジチオールを含有する新
たに調製した混合物（ＴＦＡ／ＴＦＭＳＡ／ＥＤＴ＝　
８９／　１／　１０）　（２０ｍＱ　）で、室温、窒素
雰囲気下において２０分間処理した。２０分後、反応混
合物を０℃に冷却し、ＴＥＦ（０，３ｍｌ：ｌ、１．４
４ミリモル〉を部用し、ついで溶液を窒素流下で乾固さ
せた。残渣をＨ，０（７０ｍＯ）で採取し、水溶液をＥ
ｔ、０（５０ｗ＋ｌ１））で抽出し、エーテル相をＨ，
０（３０ｄ）で洗浄した。ついで２つの水相を集め、Ｅ
ｔ、０（３Ｘ　５０ｍＣｌ　”）で洗浄した。減圧下で
水相を蒸発させ、油状残渣をＣＭ　−５ｅｐｈａｄｅｘ
　Ｃ−２５（２ｇ）を充填したカラム（Ｉ５Ｘ０．９ｃ
ｍ）を使用し、０１５から０．６Ｍまでの酢酸アンモニ
ウム（ｐＨ５，５）の直線状インダレデイエンド（８時
間、流ｆｆｉ　０　、８　ｍＱ　７分）で展開するイオ
ン交換クロマトグラフィーによって精製した。

所望の生成物を含有するフラクションを集め、少滑に濃
縮し、数回凍結乾燥させた。

生成物を、Ｌｙｃｈｒｏｐｒｅｐ　ＲＰ　−１８を使用
し、０．０５ＭＣ）ＩｓＣＯＯＮＨ４／　ＣＨｓＣＮ（
９２／　８　：容徂／容量）（ｐＨ５，５）により流量
８−７分で溶出することによって、さらにクロマトグラ
フィー処理した。

所望の生成物を含有するフラクションを集め、濃縮して
小容量とし、数回凍結乾燥させた。

生成物ｌＯ■が得られた（収率１５％）。

’　ＨＮＭＲ及び質量スペクトル分析によって生成物の
構造を確認した。一方、工程１）の基準条件下でのＨＰ
ＬＣ分析（生成物の純度を確認する）を行ったところ、
Ｔ、＝　１０．６９分及び１２３７分に一対のジアステ
レオ異性体による２つのピークのみの存在を示した。

Claims (1)

1. 【特許請求の範囲】 １　下記一般式（ I ）で表されるサイモペンチン類似
   体及び相当する薬学上許容される塩基又は酸付加塩。 一般式（ I ） ▲数式、化学式、表等があります▼ ［式中、Ｒ＾は水素又はアシル基であり、Ｒ＾１は−Ｏ
   Ｒ＾２基（ここで、Ｒ＾２は水素原子又はＣ＿１＿−＿
   ６直鎖状又は分枝状アルキル基、Ｃ＿３＿−＿６直鎖状
   又は分枝状アルケニル基又はアルキニル基、又はＣ＿７
   ＿−＿１＿２アリール−アルキル基又はアルキル−アリ
   ール基である）であり、＊を付した炭素の配置はＤ−配
   置である。］ ２　請求項１記載のものにおいて、Ｒが水素又は代謝系
   で活性なアシル基であり、Ｒ＾１が前記のものであり、
   Ｒ＾２が水素である、サイモペンチン類似体。 ３　請求項２記載のものにおいて、Ｒが水素である、サ
   イモペンチン類似体。 ４　請求項１記載の化合物を有効成分として含有する、
   医薬組成物。 ５　医薬品として使用される請求項１記載の化合物。 ６　一般式（ I ） ▲数式、化学式、表等があります▼ ［式中、Ｒは水素又はアシル基であり、Ｒ＾１は−ＯＲ
   ＾２基（ここで、Ｒ＾２は水素原子又はＣ＿１＿−＿６
   直鎖状又は分枝状アルキル基、Ｃ＿３＿−＿６直鎖状又
   は分枝状アルケニル基又はアルキニル基、又はＣ＿７−
   ＿１＿２アリール−アルキル基又はアルキル−アリール
   基である）であり、＊を付した炭素の配置はＤ−配置で
   ある］で表されるサイモペンチン類似体及び相当する薬
   学上許容される塩基又は酸付加塩の製法において、一般
   式（ I ａ） ▲数式、化学式、表等があります▼ （式中、Ｒ＾３はＲ又はα位のアミノ官能基の保護基で
   あり；Ｐ＾Ｇはグアニジノ官能基の保護基であり；Ｐ＿
   Ｌは側鎖のアミノ官能基の保護基であり；Ｐはカルボキ
   シル官能基の保護基であり；Ｐ＾Ｉはチロシンのヒドロ
   キシル官能基の保護基であり；Ｒ＾１は前記と同意義で
   ある）で表される相当する化合物から保護基を除去する
   ことを特徴とする、サイモペンチン類似体の製法。 ７　下記一般式で表される中間体化合物。 一般式（ I ａ） ▲数式、化学式、表等があります▼ 一般式（IV） ▲数式、化学式、表等があります▼ 又は一般式（VI） ［式中、Ｒ＾３は水素、アシル基又はα位のアミノ官能
   基の保護基であり；ＰＧはグアニジノ官能基の保護基で
   あり；Ｐ＾Ｌは側鎖のアミノ官能基の保護基であり；Ｐ
   はカルボキシル官能基の保護基であり；Ｐ＾Ｉはチロシ
   ンのヒドロキシル官能基の保護基であり；Ｐ＾Ｈは水素
   又はα−アミノ官能基の保護基であり；及びＲ＾１は−
   ＯＲ＾２基（ここで、Ｒ＾２は水素原子又はＣ＿１＿−
   ＿６直鎖状又は分枝状アルキル基、Ｃ＿３＿−＿６直鎖
   状又は分枝状アルケニル基又はアルキニル基、又はＣ＿
   ７＿−＿１＿２アリール−アルキル基又はアルキル−ア
   リール基である）であり、＊を付した炭素の配置はＤ−
   配置である。］