JPH03504246A - エイズのための化学療法剤組成物 - Google Patents

Abstract

(57)【要約】本公報は電子出願前の出願データであるため要約のデータは記録されません。

Description

【発明の詳細な説明】 エイズのための化学療法剤組成物 これは参照により本明細書に編入される１９８８年５月１６日に出願した係属中 の出願筒０７／１９４１７１号の一部継続出願である。

技　　　術　　　分　　　野 本発明は、エイズまたはその他の同様のウィルス疾患を治療する、または予防す ることに関する。より詳しくは、本発明は抗ウィルス剤と強化剤との組合せに関 し、この組合せは各薬剤を単独で使用するよりウィルスに対してより効果的であ る。

本発明の背景 後天性免疫不全症候群〔エイズ（ＡＩＤＳ））はヒト免疫不全症ウィルス（ＨＩ 　Ｖ）と呼ばれるレトロウィルスにより引き起こされると考えられている。現在 、ウィルス感染および疾患の進行を遅延させる以外に処置法がない。もし有効な 治療法が無いならば、エイズは致命的であることが知られている。

ある種の鎖伸長停止剤化合物、例えばアジドチミジン（ＡＺＴ）　、その他のジ デオキシヌクレオシド、ジデオキシヌクレオチドおよびそれらの類似体は、エイ ズウィルスに対しである程度の効果を有する〔ミツヤ（Ｍｉｔｓａｙｘ）等、１ ９８５年、ＰＮＡＳ、ＵＳＡ、８２　：　７０９６　；ヤルコーン（Ｙａｒｃｈ ｏ直ｎ）等、１９８８年、Ｌａｎｃｅｔ（ｉ）７６−８０；ダールバーグ（Ｄａ ｈｌｂｅｒｇ）等、１９８７年、ＰＮＡＳ、ＵＳＡ、８４　：２４６９：ｌ。そ れらは細胞内でリン酸化されて、そしてウィルスの逆転写酵素の存在下で形成さ れるＤＮＡ鎖を三リン酸塩の形態で停止させているように見える。これらの薬剤 は例えば生理的なヌクレオシドおよびヌクレオチドのリン酸化において活性な酵 素に対して拮抗することによるような付加的な機序により作用してもよい。

カスタノスペルミン（１，６，７，８−テトラヒドロキシオクタヒドロインドリ ジン）はα−グリコシダーゼＩを阻害することによりグリコジル化を改変する植 物アルカロイドである。これもまた抗ＨＩＶ活性を有することが示されている同 一の群のその他の化合物（それらは糖タンパク質のプロセシングの間のグルコー ス残基の通常の除去を阻害するから、トリミンググリコシダーゼ阻害剤と呼ばれ る）はジヒドロキシメチルジヒドロキシピロリジン（ＤＭＤＰ）およびデオキシ ノジリマイシン（ＤＮＪまたはＤＮＭ）Ｃグルターズ（Ｇｒｕｔｅｒｓ＞等、１ ９８７年、Ｎａｔｕｒｅ　　３３０ニア４；チームズ（Ｔｙｍｅｓ）等、１９８ ７年、Ｌａｎｃｅｔ　（ｉ）１０２５；ウォーカー（Ｗａｌｋｅｒ）等、１９８ ７年、ＰＮＡＳ、８４　：　８１２０〕を包含する。

ジピリダモル（ＤＰＭ）はベルサンチンとも呼ばれ、冠状動脈の血管拡張および 血小板凝集の阻害のために心臓血管の疾病に対し通常使用されている〔フィッッ ゲラルド（ＦｉｔｚＧｅｒｉｌｄ）、　　１９８７年、Ｎｅｗ　　Ｅｎｇｌ、Ｊ 。

Ｍｅｄ、３１６：１２４７）、その最も研究された作用機序はヌクレオシド輸送 の阻害である。この機序を介して、それはヌクレオチド産生のための［再利用Ｊ 経路に原理的に影響を及ぼす。それはまたｃＡＭＰホスホジェステラーゼを阻害 すること、プロスタグランジン産生を変更すること、アデノシンレベルおよびＣ Ｄ４発現を変更すること、細胞表面特性を変更すること、およびインターフェロ ン産生を刺激することも報告されている。ＤＰＭはまたいくつかのウィルスに対 して活性を有していることは報告されているが、しかしエイズウィルスまたはレ トロウィルスのいずれかに対する活性は報告されていない〔トネウ（Ｔｏｎｅｗ ）等、１９７７年、Ａｃｔａ　　Ｖｉｒｏｌ、２１：１４６−１５０）、さらに 、ＤＰＭまたは類似の強化剤と抗ウィルス剤との相乗的組合せはこれまで知られ ておらず、また記載されてもいない。

本発明の概要 それ故に本発明の目的は、単独で使用される各薬剤と同等のＨＩＶおよびその他 のレトロウィルス活性の阻害剤としての相乗的有利性を有する薬剤の組合せを提 供することである。

本発明のその他の目的は、ＨＩＶ感染細胞を本発明の薬剤の組合せに）ＩＩＶ複 製を防ぐためには十分な量で接触させることからなるＨＩＶ増殖を抑制する方法 を提供することである。

本発明のさらにもう一つの目的は、エイズウィルスに感染したまたは未感染の宿 主にエイズウィルス活性を阻害するために十分な量の本発明の薬剤の組合せを投 与することからなるエイズおよびその他のＨＩＶ関連症候群を治療するか、また は予防する方法を提供することである。

本発明の付加的な目的は、ヒトおよび動物におけるエイズ以外のレトロウィルス 疾患を治療するか、または予防することである。

本発明のその他の目的および利点は本発明の以下の詳細な記載から明らかになる であろう。

図面の簡単な説明 本発明のこれらのおよびその他の目的、態様および多（の付随的な利点は、添付 の図面と関連させて考慮したとき、以下の詳細な記載を読めばよりよ（理解され るであろう： 第１図は、ジピリダモル（ＤＰＭ）単独でおよび鎖伸長停止性のジデオキシヌク レオシドとの組合せでの、ヒト単球／マクロファージ（Ｍ／Ｍ）培養物における ＨＩＶ−１複製への効果を示している。Δ：ＡＺＴ単独、ＤＰＭ単独またはＡＺ ＴとＤＰＭとで処理した付着−精製され冷凍保存された単球／マクロファージ。

細胞は１日間に処理され、そして６．１１および１４日目に適当な薬剤濃度を含 有する培地と共に再流加された。上清の試料１００μｌのＨＩＶ−１ｐ２４が分 析された。図面は１４日目の結果を示す。ＡＺＴＯはＤＰＭ処理のみを示してい る。ＤＰＭがＡＺＴの抗ウィルス作用を増強することをデータは示す。６および １１日目は質的に同様の結果を示していた。Ｂ：洗浄された単球が使用された以 外はＡにおけるものと同様の試験。細胞は培養１８目に薬剤で処理され、そして ３−４日の間隔で培地（薬剤なし）１００μｌを置換することにより再流加され た。データは１７日目のｐ２４レベルを示し、そしてＤＰＭの抗ウィルス活性お よびＡＺＴの抗ウィルス活性の増強を示している。効果のパターンは１４日目に 類似していた。

ＣおよびＤ：２’、３＋−ジデオキシシチジン（ｄｄＣ）および２１．ａｌ−ジ デオキシシチジン三リン酸（ｄｄｅＴＰ）をそれぞれ用いる他はＢにおけるのと 同じ試験から。再び、ＤＰＭはウィルス複製を阻害し、そしてｄｄＣおよびｄｄ ＣＴＰの抗ウイルス効果を増強した。効果のパターンは１４日目に類似していた 。４つのウェルの平均±Ｓ、Ｅ、Ｍ、　（標準誤差）：いくつかの棒はあまりに も小さくて見ることが不可能である。

第２図はＤＰＭ単独で処理された洗浄Ｍ／ＭにおけるＨＩＶ感染の時間経過研究 の結果を示す。第１Ｂ−Ｄ図におけるものと同じ試験。細胞は１日間に処理され 、そして培養上清の試料は示された時点で（すなわち、各々の再流加時に）ＨＩ Ｖ−１ｐ２４検定のために採取された。試料はウェル内の全容量２００μｌの中 の１００μｌから構成され、そして累積ｐ２４産生は前の時点で除去された抗原 を補正することにより計算された。ＤＰＭ単独で抗ウィルス活性を示したことが 記載される。４つのウェルの平均±Ｓ、　Ｅ、　Ｍ、。

第３図はヒト骨髄顆粒単球前駆体への細胞毒性効果におけるＡＺＴとＤＰＭとの 間の相互作用を示す。

ＣＦＵＧ、検定、組合せ指数（Ｃ，１，）の計算およびその他の試験の詳細は以 下の本明細書に記載されている。パネルＡおよびＢは、それぞれ相互排他的モデ ル（作用の同一部位／機序）および相互非排他的モデル（作用の非同一部位／機 序）に基づいて計算されたＣ、１．値を示す。異なる記号は異なる健康な供給者 からの細胞を表す。この結果は骨髄毒性においてＡＺＴとＤＰＭとの間に相乗作 用はないことを示す。

第４図はＨＩＶ−１に感染されたＴ−リンパ芽様細胞（ＣＥＭ−ＳＳ）１．：お けるＤＰＭ−ＡＺＴ　（パネルＡ　）およびＤＰＭ−カスタノスペルミン（パネ ルＢ）での組合せ化学療法の効果を示す。パネルＡは、細胞がＨＩＶ−１（Ｉ［ ［ｌｌ）を有するＨ９細胞との共培養により感染されたときの結果を示す。処理 は１日間に始められた。この、およびその他の同様の試験において、ＡＺＴの抗 ウイルス効力へのＤＰＭの効果は適度であったが、しかしＡＺＴ毒性からの細胞 の際立った保護があった。従って、試験管内での治療指数は顕著に高められてい た。パネルＢはＤＰＭおよびカスタノスペルミンに対する類似の研究の結果を示 す。高濃度でＤＰＭはカスタノスペルミンの抗ウイルス効果を強化した。この結 果は、広範囲の薬剤がＨＩＶおよびその他のウィルスの対してＤＰＭと好ましく 相互作用することを強調している。

第５Ａおよび５Ｂ図は、洗浄されたヒト単球／マクロファージとの３７℃での６ 時間の保温の間の３Ｈ−チミジンおよび’Ｈ−ＡＺＴのリン酸化誘導体の細胞内 蓄積に関するＤＰＭの効果を示しているＨＰＬＣプロフィールを与える。ＤＰＭ はリン酸化チミジン（ＴＨＹ）の出現を著しく減らしたが、しかしリン酸化ＡＺ Ｔの出現はわずかに減らすのみだった。

第６図は、ＤＰＭに類似しているヌクレオシド輸送の阻害剤であるニトロベンジ ルチオイノシン（ＮＢＴ　Ｉ　）と組み合わせたＡＺＴによるヒトＭ／Ｍにおけ るＨＩＶ−１の阻害を示す。付着−精製されたＭ／Ｍ培養物は新たに採血された 供給者の血液から調製され、冷凍保存された細胞でないことを除いて第１Ａ図の ものと実質的に同様に試験は行われた。試験された濃度でＮＢＴ　Ｉはウィルス 複製を阻害し、そしてＡＺＴの抗ＨＩＶ活性を強化した。１１日目の４つのウェ ルの平均±Ｓ、　Ｅ、　Ｍ、。

第７図はパパベリンと組み合わせたＡＺＴによるヒトＭ／ＭにおけるＨ　Ｉ　Ｖ −１の阻害を示す。パパベリン（ＰＡ）は細胞の環状ＡＭＰホスホジェステラー ゼの活性を阻害する性質をＤＰＭと分は合う。試験は第６図と同様に行われた。

試験された濃度でバパベリンはウィルス複製を阻害し、そしてＡＺＴの抗ＨＩＶ 活性を強化した。効果のパターンは１３および２１日目と同様だった。

１１日口の４つのウェルの平均±Ｓ、　Ｅ、　Ｍ、。

第８図はミオフラジンと組み合わせたＡＺＴによるヒトＭ／ＭにおけるＨ　ｒ　 Ｖ−１の阻害を示す。ＤＰＭと同様にミオフラジンはヌクレオシド輸送の阻害剤 である。

試験は第６図に対する試験と同様に行われた。試験された濃度でミオフラジンは ウィルス複製を阻害し、そしてＡＺＴの抗ＨＩＶ活性を強化した。ＭＦ：ミオフ ラジン。

効果のパターンは１３および２１日日間同様だった。４つのウェルの平均±Ｓ、 　Ｅ、　Ｍ、。

本発明の詳細な説明 本発明の上記および種々のその他の目的および利点は、抗ウィルス剤と強化剤と の組合せが各成分単独の活性から期待されるよりも高いウィルス阻害を生じる、 感染細胞においてウィルス復製を阻害するための有効量の抗ウィルス剤および有 効量の強化剤と、薬学的に許容性の担体とからなる薬剤組成物により達成される 。本発明の組成物および方法が使用され得るレトロウィルスまたはそれにより引 き起こされる疾病はＨＩＶ−１、ＨＩＶ−２、ＨＴＬＶ−１，ＨＴＬＶ−ｎ等を 包含する。もちろん、この組成物は無菌剤、アジュバント、非毒性無菌緩衝剤等 を包含してもよく、これらはそのような調剤において通常使用されるものであり 、そして当業者には十分に公知である。

特に規定しない限り、本明細書で使用される全ての技術的および科学的用語は本 発明の属する分野の通常の技術を有する者により普通に理解されているものと同 様の意味を存する。本明細書に記載されたものと同様または同等のあらゆる方法 および材料が本発明の実施または試験において使用され得るけれども、好ましい 方法および材料は今記載される。以下に記載する全ての刊行物は参照により本明 細書に編入される。特記しない限り、ここで使用される技術は当業者に十分公知 の標準的な方法論である。

本明細書で使用される「鎖伸長停止剤」は、伸長する核酸鎖の中に挿入されたと き該鎖の伸長を停止させる化合物またはその前駆体を意味する。これらの薬剤は 例えば生理的ヌクレオシドおよびヌクレオチドのリン酸化における酵素活性に対 して拮抗することによるような付加的な機序により作用してもよい。これらの化 合物は通常、しかし必ずではないが、一般式： （式中、「塩基」はアデニン、グアニン、シトシン、チミジンおよび代謝で処理 されてＤＮＡ鎖内に取り込まれ得る分子を得るか、または該分子の機能的に同等 な類似体として作用する、伸長するＤＮＡ鎖内に取り込まれ得る類似体、誘導体 またはそれらの塩からなる群から選択され、： ＲはＨ，アジド基または次のヌクレオチドの３′結合を可能にしない別の基を表 し、それにより逆転写酵素の影響下でレトロウィルスＤＮＡの鎖伸長を抑止し、 ：そして ＸはＨ，−−、ニー、三−またはその他のリン酸基およびそれらの類似体を表す 。）を有する。

リボースをベースとするジデオキシ糖はある種の機能的に類似の鎖伸長停止性化 合物例えばアデニルリン、シタルレンおよびＰＭＥＭ中の異なる有機部分により 置換される。

一般式（１）で表される化合物はＡＺＴまたはもう一つの２′、３′−ジデオキ シヌクレオシドまたはヌクレオチドであることが好ましい。鎖伸長停止剤ヌクレ オシドの代表的な例は以下のものであるごアジドチミジン、２１．３１−ジデオ キシシチジン、２１．３１−ジデオキシアデノシン、２Ｔ、３１−ジデオキシチ ミジン、２’、３’−ジデオキシグアノシン、２’、３’−ジデオキシイノシン 等。ジデオキシヌクレオチドはジデオキシヌクレオシドのｍ−、二〜および三リ ン酸塩を包含する。１個（またはそれ以上の）ホスフェート基がホスホロチオエ ート基、メチルホスホネート基またはその他の類似の基により置換されている同 様の化合物もまた包含される。そのような化合物（例えばホスホロチオエートお よびメチルホスホネート）は元のヌクレオチドに比べ代謝的により安定である。

「強化剤」という用語は、ジビリダモル（ＤＰＭ）およびニトロベンジルチオイ ノシン（ＮＢＴＩ）：ジラゼップ：リドフラジン：ヘキサベンジン：７−ブロモ −１゜５−ジヒドロ−３，６−シメチルイミダゾルー（２，１゜６）キナゾリン −２（３Ｈ）−オン、ミオフラジン等を包含する、重複する作用機序を育する類 似の薬剤を意味する。これらの薬剤はヌクレオシドおよび核塩基輸送の阻害剤で ある。環状ＡＭＰホスホジェステラーゼへの影響における重複はパパベリンおよ びモピダモルである。

これらの化合物の中でＤＰＭが好ましい。

本明細書で使用される「相乗」または「強化Ｊ効果という用語は、抗ウィルス剤 と強化剤との組合せが核成分単独の活性から期待されるより、より高い抗ウイル ス効果を生じることを意味する。

種々の細胞タイプ、例えば単球、Ｔリンパ球、Ｔリンパ球腫瘍、マクロファージ 等はウィルス感染または複製の試験のための宿主細胞として利用され得る。ウィ ルス活性、特にＨＩＶの活性はｐ２４産生、逆転写酵素活性、トランス活性化剤 またはその他のマーカー抗原産生により試験され得る。特定の細胞タイプの使用 またはウィルス活性を測定する方法は本発明の重要な部分ではなく、そして試験 管内系または生体内系のいずれかがウィルス活性の試験のための使用され得る。

本発明の重要な部分は、強化された抗ウイルス効果が非毒性投与量のＤＰＭまた は上記のその他の強化剤の一つと共に投与されるときに、鎖伸長停止剤により、 およびα−グルコシダーゼ阻害剤カスタノスペルミンにより生じるという発見で ある。ＤＰＭは試験管内でのヒト骨髄細胞に対するＡＺＴの活性を強化しないこ ともまた重要である。骨髄抑制はヒトにおけるＡＺＴの投与量を制限する毒性で あることが知られている。鎖伸長停止剤および／または強化性成分は組合せその ままで、またはリポソームもしくはその他の伝達ビヒクルにより担持された組合 せで投与され得ることはさらに記載され得る。リポソームの製造方法は当業者に は十分に公知であるか、またはそのような技術は本発明の重要な部分ではない。

強化剤はそのままで、またはポリマーの形態で投与され得る。

好ましい材料および方法が今記載されるが、それは説明のためだけのものであっ て、本発明を限定するものではない。

材料および方法 ■且 ジビリダモル〔２，６−ビス−ジェタノールアミノ−４，８−ジビベリジノピリ ミド−（５，４ｄ）−ピリミジン〕はシグマ社（Ｓｉｇｍａ）　　（ミズーリ州 セントルイス）から入手された。はとんどの試験において、それはエタノールに 溶解され、そして０．１Ｍ貯蔵溶液は試験濃度（ＥＴＯＨ＜ａ、（ｚ％）まで希 釈された。Ｏ，１ＮＨＣ１中の０．１ＭＤＰＭ貯蔵液（ｐＨを約３に再調整）か らの希釈は培地の最終ｐＨに検出できる程度には影響を与えず、そして実質的に 同一の結果を与えた。ＡＺＴはアシュ・ステイーブンス（Ａｓｈ　５ｔｅｖｅｎ ｓ）　　（ロット番号ＨＬＲＯ２２１）により調製され、そして開発治療部門。

エイズプログラム（Ｄｅｖｅｌｏｐｍｅｎｔａｌ　Ｔｈｅｒａｐｅｏ目ｃｓ　Ｂ ｒａｎｃｈ。

ＡＩＤＳ　Ｐｒｏｇｒａｍ）　、　Ｎ　Ｉ　Ａ　Ｉ　Ｄを通じて入手された。ｄ ｄＣおよびｄｄＣＴＰはモラベック・バイオケミカルズ（Ｍｏｒａｖｅｋ　Ｂｉ ｏｃｈｅｍｉｃａｌｓ）　（カリフォルニア州ブレア）から入手された。

３Ｈ−ｄｄｅＴＰは下記のようにＨＰＬＣにより再び精製された。ニトロベンジ ルチオイノシン（ＮＢＴＩ；ＮＢＭＰＲとも略称される）はウィスコンシン州ミ ルウオーキーのアルドリッチ社（Ａｌｄｏｒｉｃｈ）から入手され、そしてパパ ベリンはミズーリ州セントルイスのシグマ社から入手された。

・　　　　　　　　　マ　ロフ　−１ 細胞は調製され、そしてガードナー（Ｇａｒｔｎｅｒ）等（１９８６、Ｓｃｉｇ ｉｃｇ、２３３，２１５−２１９）により記載されたようなＨＩＶ−１の単離体 であるＭ／Ｍから回収されそしてその中で増殖させたＨＩＶ−ＩＮＩＨ／ＵＳＡ ／１９８５／ＨＴ　Ｌ　Ｖ　　ｍ−ＡＬに感染させた。要するに、末梢血単核白 血球が白血球搬出された健康なＨＩ　Ｖ−１抗体陰性の供給者からフィコール− ハイバーク分離により得られた。

−晩付着させる精製により〉９５％非特異的エステラーゼ陽性細胞を有するＭ／ Ｍ集団が得られた。精製された細胞は２０％加熱不活性化ウシ胎児血清（Ｆｅ２ ）および１０％（最終濃度）ＤＭＳＯを含有するＲＰＭＩ　１６４０中で標準法 に従って冷凍保存された。感染に先立って、細胞は融解され、洗浄してＤＭＳＯ を除去し、そして１０％のプールされたヒト血清、２０％ＦＣＳおよび抗生物質 が補足されたＲＰＭ１１６４０中に懸濁された。

感染は、０．５−１．Ｏｘｌ　Ｏ’ｃｐａ　ＲＴ活性を含有するウィルス接種材 料１−に、１０’個のペレット化細胞を３７℃で４５−６０分間暴露することに より行われた。感染の後、細胞を洗浄し、モして９６ウエルのコスタ−・マイク ロタイター・プレート（Ｃｏｓｔｅｒ　Ｍｌｃｒｏｔｉｔｅｒ　Ｐｌａｔｅ）の ２０％加熱不活性化ＦＣ５および抗生物質が補足されたＲＰＭ１１６４０培養培 地中に接種された（８×１０”　細胞／ウェル）。

′　　　２　　　マ　ロフ　−ジ 末梢血単球は、無ピロゲンリン酸緩衝液が洗浄工程において使用されたことを以 外、標準向流遠心洗浄〔ウオール（Ｗａｈｌ）等、　１９８４．　ＣｅＬＬ　Ｉ ＊ｍｕｎｏＬ、　８５．３７３−３８３；　　ウオール等、　１９８４．　Ｃｅ ＬＬ　ＩｍｗｒｕｎｏＬ、　８５．３８４−３９５　）に従って得られた。新た に調製されたＭ／Ｍは上記のように感染させた。それらは次に洗浄され、そして ９６ウエルのコスクープレートのｌＯ％ＦＣ３，２ｓＭグルタミンおよび抗生物 質が補足されたダルベツコの変性イーグル培地（Ｄ−ＭＥＮ）中１ｃ２Ｘ１０’ 細胞／ウェルで接種された。ブレーティングおよび洗浄の後、洗浄単球培養物は Ｌ　ｅ　ｕ　Ｍ　３および非特異的エステラーゼに対し〉９９％陽性であること がわかった。

の　　　　　゛　　　　　　　　　　　　の感染１日後、培養された細胞は完全 培地で１回洗浄され、そして試験する薬剤はマイクロタイターのウェルに添加さ れた。培養物は細胞上清の半分（１００μｉ）を新鮮培地（示したように薬剤と 共に、または薬剤なしで）に置換することにより３ないし４日間隔で再流加され た。上清試料は、酵素結合免疫検定〔エリザ（ＥＬＩＳＡ））キット〔プラウエ ア州つイルミントンのデュポン社（Ｄｕｐｏｎｔ　Ｃｏ、）　；カタログ番号Ｎ ＥＫＯ４１）を用いてＨＩｖ−１ｐ２４抗原が分析された。ＮＢＴＩ、ババベリ ンおよびミオフラジンでの試験は同様に行われた。

゛　　　　　　　　の　　　　。

ｄｄｅＴＰは未感染の洗浄されたＭ／Ｍ（５Ｘ１０“細胞／ウェル）と共にウィ ルス研究における通常の条件下で保温された。上滑の試料はセントリフリー・フ ィルター（Ｃｅｎｔｒｉｆｒｅｅ　ｆｉｌｔｅｒ）　　Ｃマサチューセッツ州ダ ンバーズのアミコン社（Ａｓｉｃｏｎ　Ｃｏ、））を通して遠心分離され、そし てＶＹＤＡＣ３０３ＮＴ４０５ヌクレオチドカラム〔カリフォルニア州へスペリ アのセパレーションズ・グループ（Ｓｅｐａｒｉ口ｏｎｓ　Ｇｒｏｕｐ）　］を 用いるＨＰＬＣによりｄｄｃＴＰの代謝産物が分析された。カラムは０．０３５ ｓＭギ酸アンモニウムｐＨ４，６５と０．５　Ｍ　ＩＪン酸ナナトリウムｐＨ２ ８の０−５０％の直線グラジェント（１０分かけて形成された）で溶出させた。

ｄｄｅＴＰの細胞の取り込みは、１μＭ　’Ｈ標識ｄｄｅＴＰを未感染の洗浄Ｍ ／Ｍ培養物（５ｘｌＯ’細胞／ウエル）と共に保温し、次に細胞の十分な洗浄（ 水冷生理的食塩水で４回）、プレートからの除去（０，５％トリトンＸ−１００ で）および細胞関連放射活性の測定により同様の条件下で評価された。

の　コ　　−　　　ｘｌ　゛　　　　　ゴ　　−　　　　　　の　　　　　ｌ」 ＬＪ−Ｚｌして 洗浄された単球は６ウエルのマイクロタイター・プレート（コスタ−）内に５Ｘ ｌＯ’細胞／ウエルで接種された。取り込み試験は細胞の調製後２日目に始めら れた。

培地は８Ｈ−チミジン（デュポン）または’Ｈ−ＡＺＴ（モラベツク）のいずれ かと０．５μＭの未標識ＡＺＴを含むＤＭＥＭ−１０％ＦＣ３ｌ−で置換された 。保温は次にＣＯ７恒温槽中３７℃で続けられた。種々の時点で上清が除去され 、そしてウェルは２０μＭ　　ＤＰＭを含む氷冷されたＤＭＥＭで３回迅速に洗 浄された（さらに輸送されることを防ぐため）。０，５％トリトンＸ−１０００ ，９−が次に各ウェルに添加され、そしてプレートは室温で３０分間揺動された 。内容物は１．５−ポリプロピレン遠心管〔エツペンドルフ（Ｅｐｐｅｎｄｏｒ ｆ）　）に移され、そして５０％トリクロロ酢酸０．１４が添加された。この遠 心管を次にマイクロタイージ（Ｍｊｃｒｏｆｕｇｅ）内置高速度で１０分間回転 させた。上清が集められ、２０％トリーｎ−オクチルアミン（トリクロロトリフ ルオロエタン中の）１．２ｉで中和され、そして渦巻き混合された。この抽出操 作の後に、水相はもう一つの管に移され、そして凍結乾燥された。試料は次に蒸 留水１２０μβ中に溶解され、そして渦巻き混合された。試料（１００μｌ）は ＶＹＤＡＣカラムおよび上記の溶出スキームを用いるＨＰＬＣにより検定された 。各操作からの５０の両分がシンチレーションバイアル中で計測された。一般に ２つのウェルが集められ、そして各時点で分離操作がなされた。

スーパー　　ｒ　・ 未感染の洗浄された単球／マクロファージ培養物におけるＯ２−産生は、ウオー ル等（１９８７，Ｊ、　Ｉ麿ｍｕｎｏｒ、　１３９、１３４２−１３４７）によ り記載されたように、チトクロームＣの０１−依存産生を測定することにより評 価された。

１４４日目、４つのウェルの各々の中の培地は１６０μＭフェリチトクロームＣ を含むアールの均衡塩溶液１００μｌにより置換された。細胞は次に３７℃で３ 時間保温され、そしてＯｘ−産生はＡ、１を測定することにより決定された。値 は、還元されたチトクロームＣのモル消衰係数から計算され、酸化されたタンパ ク質の存在およびウェル容量を通る３■の垂直光路に対して補正されたナノモル Ｏ３−／ウェルとして表現された。基底のＯ！−産生は、存在するあらゆるＯｌ −を破壊するためにウェルにスーパーオキシドジスムターゼ（最終濃度６００ｕ ｇ／＋Ｊ）を添加することにより評価され：ホルボールエステル刺激された産生 は、ホルボールミリステートアセテート（最終濃度１０ｎｇ／＋＋／）を添加す ることにより評価され；自然産生は刺激物を添加することなく決定された。

１１」０［」１ 健康なボランティアからの骨髄試料の収集および顆粒球／単球コロニー形成（Ｃ ＦＵｃ、）検定のために、ファイン（Ｆｉｎｅ）等（１９８７，Ｃ１１ｎ、　０ ｎｃｏ１．５．４８９−４９５）により記載されたように、標準操作が用いられ た。すなわち、細胞はフィコール−ハイバーク上で分離され、そして２０％加熱 不活性化ＦＣ３，２ｍＭグルタミンおよびヒト骨髄性白血病系（Ｐ−３８）の上 清から誘導された１５％（ｖ／ｖ）　Ｈｒ　Ｖ陰性コロニー刺激性因子（Ｃ３Ｆ ）で補足されたマツコイの５Ａ培地中に懸濁された。細胞はソフトアガー法〔パ イク（Ｐｉｋｅ）等、　１９７０．　Ｊ、　ＣｅＬＬ　ＰｈｙｓｉｏＬ。

７６、７７−８４３により、２０％ＦＣ３および１５％Ｃ３Ｆを有する０、３％ アガーの最終濃度でブレーティングされた。９−１２日間の保温後、〉４０細胞 のコロニーが計測された。ブレーティングされた２ＸｌＯ’単核細胞から約１０ ０個のコロニーが形成された。細胞は形態学的試験のためにクボタ（Ｋｕｂｏｔ ａ）等＜１９８０．Ｅｘｐ、　Ｈｅ＊ａｔｏＬ、　８゜３３９−３４４）の方法 により染色された。各供給者に対して、ＡＺＴおよびＤＰＭ１７）単独の効果、 並びにＡＺＴ／ＤＰＭの比率が０．１６ないし２０に及ぶ２ないし１０種の異な る組合せが試験された。

１ンバ　　　　、におｌ　　　　　Ｖ’　　　　　の亙且ｌ且 ＣＤ４”、ＯＥＭ−ＳＳおよびＭＴ−２７リンパ芽様系の細胞を、１０％ＦＣ３ 含有のＲＰＭＩ−１６４０中で増殖させた。細胞は次に無ＨＩＶ−１（Ｉ［［、 ）貯蔵物またはＨＩＶ−１（ＲＦ）感染Ｈ９細胞のいずれかに感染させ、そして ９６ウエルのマイクロタイター・プレートに接種された。培養７日後、テトラゾ リウム塩“ＸＴＴ”（１■／−）および電子受容体フェナジンメトスルフェート （０，０１−０，０２ｍＭ）を含有する溶液５０−が各ウェルに添加された。薬 剤により保護され、そして増殖し続ける未感染細胞または細胞は、その０．Ｄ、 が４５０ｎ−で読み取れる可溶のオレンジホルマザンを産生ずる。健康な細胞と 関係づけられたデータは、未処理の対照ホルマザンの％＝（試験０．Ｄ、Ｘ　１ ００）　／　（細胞対照０．０．）として表示される。このテトラゾリウム染料 試験とその他の検定例えばｐ２４抗原捕捉、シンシチウム形成およびトリバンブ ルー排除と相関があることは記載されるべきである。

１ヒ　　Ｉゞパ 健康なボランティアからの単核細胞をフィトヘマグルチニン（ＰＨＡ）（５μｇ 　／　ｙｔ　）の存在下で２日間増殖させ、そして次に１５％ＦＣ３，１％Ｌ− グルタミンおよび０．１％ゲンタマイシンを有するＲＰＭ１１６４０中のＩＬ２ で刺激した。３日後、細胞は種々の力価のＨＩｖ−ｔ（Ｉ［［ｅ）で３７°Ｃ９ ０分間感染させた。洗浄後、細胞はマイクロタイター・ウェル内に３Ｘ１０’細 胞１０．５＋ｎｌで接種された。薬剤はブレーティング後すぐに添加され、そし てそれらの濃度はその後、各再流加で一定に保持された。細胞は上清の半分を置 換することにより２−３日毎に再流加された。感染１０日後、ｐ２４は標準エリ ザにより測定され、そして細胞はトリバンブルー排除で試験された。

ヱニヱ豆丘 試験された薬剤の５０％阻害投与量（ＩＤＳ。）は、Ｌｏｇ　［ｆ、／　（１− ｆ、））対しｏｇＤ　（中間有効プロット）（式中、ｆ、は影響された分数値で あり（すなわちパーセント阻害／１００）　、そしてＤは薬剤投与量である）を プロットすることにより計算された〔チュー（Ｃｈｏｕ）等、１９８４．　Ａｄ ｖ、　Ｅｎｚｙｍｅ　ＲｅｇｕＬ、　２２．２７−５５；チュー等、１９Ｂ？、 　ｒニュー・アベニューズ・イン・デベロップメンタル・カンサー・ケモセラピ ーＪ　（Ｎｅｗ　Ａｖｅｎｕｅｓ　ｉｎ　Ｄｅｖｅｌｏｐｅｍｅｎｔａｌ　Ｃａ ｎｃｅｒ　Ｃｈｅｍｏｔｈｅｒａｐｙ）　、　ハラツブ、ケー。

アール、およびコナーズ、ティー、　ｘ　イ、　（Ｈａｒｒａｐ、に、　Ｒ。

＆　Ｃｏｎｎｏｒｓ、　Ｔ、　Ａ、）編集（ブリストルー？イヤーズ・シンポジ ウム・シリーズ（Ｂｒｉｓｔｏｌ　Ｍｙｅｒｓ　Ｓｙ＠ｐｏｓｉｕｍ　５ｅｒｉ ｅｓ）、アカデミツク・プレス（Ａｃａｄｅ＋ｓｉｃ　Ｐｒｅｓｓ）、ニューヨ ーク）、３７−６４頁〕。投与量−効果の関係を直線化し、そしてＸ軸での切片 としてＩＤ、。を与えるプロットはマイクロコンピュータプログラムの使用によ り構築された（チュー等、１９８６）。マイクロコンピュータでの投与量−効果 分析：アップル　■またはＩＢＭ　　ＰＣ用のコンピュータソフトウェア〔英国 ケンブリッジのエリセビエール・バイオソフト（Ｅｌｉｓｅｖｉｅｒ　Ｂｔｏｓ ｏｆｔ）　〕。

ＣＦＵｃｖ検定における薬剤相互作用は、「組合せ指数（Ｃ。

１、）Ｊ、すなわち単独で使用された場合および組合せで使用された場合の薬剤 の等効果投与量の比較から誘導されるパラメータを計算することにより分析され た（チュー等、同上：チュー等、同上）。０．１と０．９の間の異なる分数値の 効果のレベルでのＡＺＴ単独およびＤＰＭ単独の等効果投与量は中間有効プロッ トから得られた。

結　　　　果 ヒ　　　　マ　ロフ　−：′に冒　　　　ルス第１Ａ図に示されたように、ＡＺ Ｔは冷凍保存され、付着精製された細胞においてウィルス複製を阻害した。

０、０８−１０μＭの範囲にあるジピリダモルはそれ自体はとんど効果をもたな いが、しかし予期されなかったことにＡＺＴの抗ウイルス効果を著しく強化した 。２μＭのＤＰＭの存在下、例えばＡＺＴのＴＤ、。およびＩＤ５ｓレベル（表 １）はそれぞれ５倍および１０倍により多く減少した（すなわち、ＡＺＴ単独で の値の１８および８％まで）。第１Ｂ図は、ＤＰＭの強化作用が相対的な意味で 洗浄Ｍ／Ｍ培養物においてさらに高められたことを示す。２または１０８ＭのＤ ＰＭの存在下で、ｐ２４発現は最低の１．６　ｎ　Ｍを含む各ＡＺＴ濃度で基底 レベルに近かった。阻害のこの程度は、ＡＺＴが単独で使用された場合１μＭレ ベルでのみ達成された。予期されなかったことにジピリダモルはまた、ｄｄｅお よび２’、３’−ジデオキシシチジン三リン酸（ｄｄＣＴＰ）の抗ＨＴＶ効果を 強化した。これらの薬剤に対するＩＤ＊−値は≧２μＭのＤＰＭの存在下、少な くとも５倍に減少した（第１Ｃ−Ｄ図）。洗浄Ｍ／Ｍ系において、ＤＰＭそれ自 体は阻害的であるように見え、ｐ２４発現の顕著なそして予期されなかった減少 を引き起こした（第２図）。

ＤＰＭ単独のこの効果は２ないし２０μＭの範囲では濃度に依存しないことがわ かった。

の　　　　　　゛　　　　　　　　の ヌクレオチドは容易に細胞内に入らないから、ｄｄＣＴＰそれ自体は細胞内ウィ ルスＲＴに対して比較的効果がないと考えられた。しかしながら、ｄｄＣＴＰは 培養培地巾約１２−１４時間のｔ、７．でもってｄｄｅ−リン酸からｄｄｅへ分 解することがＨＰＬＣ分析により見出された。この時間経過は、”Ｈ−ｄｄＣＴ Ｐとともに保温された細胞内の３Ｈ蓄積の時間経過に相当した。−緒に取り込ま れると、これらの観察は、ｄｄｃＴＰのｄｄＣへの変換が取り込みを速度限定し 得、そして細胞に入る優先種はおそら＜　ｄｄＣだったことを示している。

マ　ロフ　−ジに 倒立顕微鏡での培養ウェル中の細胞計測は、ＡＺＴおよび／またはＤＰＭでの処 理２週間後、未感染細胞に対する対照群と処理群との間に違いがないこと示した 。感染Ｍ／Ｍ細胞の細胞生存可能性は、トリパンブルー排除により評価されたよ うに、各々の群において〉９５％だった。

スーパーオ　Ｓ　′ 表２はＡＺＴおよび／またはＤＰＭで処理された未感染Ｍ／ＭによるＯ７　産生 を示す。これらのデータの原理的な重要性は、それらが適用された濃度で、ＡＺ Ｔありでまたは無しで識別できるＤＰＭ毒性が見られなかったことである。しか しながら、いくつかは数字的には小さいが、しかし統計的には有意な傾向が見ら れた。自然発生のスーパーオキシドレベルは増加するＡＺＴで減少したが（ｐ＜ ０．００１：後半の２種）、一方自然発生（ｐ＝０．０１３）およびＰＭＡ刺激 されたスーパーオキシドの両方は増加するＡＺＴで増加した（　ｐ　＜　０．　 ＯＯｌ）。観察された抗ウィルス活性に対するこれらの関係は決定されずに残っ ている。

ｍ二 ＡＺＴとＤＰＭとの種々の組合せの骨髄毒性を評価するために、ＣＦＵＧ、検定 が７人の健康な供給者からの骨髄試料で行われた。ＡＺＴの平均ＩＤ６．は検定 の有効な動的範囲（５−９５％阻害）においてプールされた値から計算サレタカ 、これハｓ、　６　ｕＭ＋：ｏ、　１　ｕＭ　（Ｓ、Ｅ、Ｍ、；ｎ−２１）だっ た。高い濃度でもＤＰＭはまたコロニー形成を阻害した（　Ｉ　Ｄ　ｓ　ａ　＝ 　１０．０　±４．５　ｕ　Ｍ　：　ｎ　＝　１９　）第３ＡＦＸＪに示したよ うに、広範囲の阻害レベルにわたる６人の供給者から得られたＣ、　１．値は「 相互排他ノモデルにおいて１近傍に集まっていたが、これは実質的な毒性を示唆 する。「相互非排他」モデルにおいて、Ｃ，１，値は第３Ｂ図では優に〉１であ り、これは毒性の相乗に向かうよりもむしろ毒性の拮抗に向かう予期されなかっ た傾向を示唆する。純粋な顆粒球、純粋な単球コロニーおよび混合顆粒球−単球 コロニーの相対的な頻度は処理により影響を受けなかった。抗ウィルスの研究と 共にこれらの結果は、ＡＺＴが≦２μＭのＤＰＭと組み合わせられたならば、Ａ ＺＴ単独の場合に比べより低い骨髄毒性を有する等しい抗ウイルス効果を得るこ とができ、そして予期されなかったことだが試験管内での治療指数は従って高め られることを示唆する。

要するに本明細書に提示されたデータは、ＤＰＭがＨＴＶに対して固有の効果を 有し、そしてそれはＡＺＴ、ｄｄＣおよびｄｄＣＴＰの抗ウィルス作用をヒト単 球／マクロファージにおいて強化することを明らかに示している。特に、治療の 観点からの関連はＡＺＴ／ＤＰＭの組合せにおいて、ＤＰＭはＡＺＴの骨髄毒性 を強化せず、そして予期しないことに試験管内での治療指数がそれ故に高まった という発見だった。驚くべきことに、ＤＰＭは、ＤＰＭ感受性ヌクレオシド輸送 を介して主に細胞に入る〔チンメルマン（Ｚ［ｍｓ＋ｅｒｍａｎｎ）等、　１９ ８７．　Ｊ、　ＢｉｏＬ、　Ｃｏｈｅｍ、　２６２．５７４８−５７５４　）　 ｄ　ｄ　ｅの抗ＨＩＶ活性を強化したこともまた見出された。しかしながら、ｄ ｄｅは生理的ヌクレオシドであるｄＣに比べ、ヒドロキシル基が１側受ないので 、より脂肪親和性である。それ故に、ｄＣの輸送の際のＤＰＭのより大きい阻害 効果がｄｄｅ活性の強化を説明し得るかもしれない。

ヒ　　１゛パ　　　　　　こ゛（ルス 第４Ａ図に示された結果は、ヒトＴリンパ芽様細胞系（ＣＥＭ−３Ｓ）のへＺＴ 処理に際してのＤＰＭの有益な効果を示しており、ＤＰＭはこれらの細胞におけ るＡＺＴの毒性を消すが、ＨＩ　Ｖ−１（ＨＴＬＶ−１［［Ｒｖ）に対する活性 を高めるか、または影響を与えない。結果的に、試験管内での治療指数は予想さ れなかった様式で高まった。もう一つのヒトＴリンパ芽様細胞系であるＭＴ−２ ９胞はＡＺＴおよびＤＰＭの両方の毒性作用により感受性だった。第４Ｂ図に提 示された結果はまた、ＤＰＭの高い濃度でのＣＥＭ−５Ｓ細胞においてカスタノ スペルミンの抗ＨＩＶ活性の驚くべき強化を示している。

に冒　　　−の Ａ　　　　　　　−４・ 表３はＰＨＡ刺激されたＴリンパ球での試験の結果を示す。データは０．０７４ μＭと予期されなかった低いＤＰＭ濃度によりＡＺＴ活性の顕著な強化を示す。

細胞計測およびトリパンブルー排除はＡＺＴの最高の投与量（１０μＭ）でのみ 細胞に対し主要な薬剤毒性を示した。

これらの結果は、ＤＰＭがＴリンパ様細胞並びにＭ／Ｍにおいて鎖伸長停止薬剤 の抗ウイルス効果を強化し得ることを示すから重要である。これらはＨＩＶ感染 において最も重要な２つの細胞系統である。

「六　　　　　　　゛　　　　−めの　　　　　六第５Ａおよび５Ｂ図は、３Ｈ −チミジンおよび３Ｈ−ＡＺＴに対する試験において得られた結果を示す。ＤＰ Ｍはリン酸化されたチミジン種の出現を著しく減らしたが、一方リン酸化された ＡＺＴの出現にはわずかな効果のみを有していた。２つの独立した試験は、リン 酸化された３Ｈ−チミジンの細胞内出現に際しＤＰＭの質的に同等な効果を示し た。３つの分離した試験において、ＤＰＭは細胞内のリン酸化された”Ｈ−ＡＺ Ｔの量を高めるか、または変化させなかった。

−ひ」ヒｙ」１１」１ ＤＰＭのある種の類似体はまた、ＨＩＶに対するそれらの固有の活性に対して、 および鎖伸長停止性抗ウィルス剤ＡＺＴの活性を強化するそれらの能力に対して 評価された。第６図に示されたように、ヌクレオシド輸送阻害剤ＮＢＴ　Ｉはヒ トＭ／ＭにおいてＨＩＶ−Ｊ複製に対する固有の阻害効果を有し、そしてまたＡ ＺＴの阻害効果を強化した。第７図に示されたように、バパベリンは同様の結果 を与えた。第８図に示されたように、ミオフラジンもまた固有の阻害効果を有し 、そしてＡＺＴの阻害効果を強化した。ＤＰＭと同様に、ミオフラジンはヌクレ オシド輸送を阻害するが、しかしＤＰＭに比べより容易に血液−脳関門を通過す る可能な利点を有している〔ディカート（Ｄｅｃｋｅｒｌ）等、　　１９８８． 　Ｌｉｆｅ　５ｃｉｅｎｃｅ　４２゜１３３１−１３４５．ウォキアー（Ｗａｕ ｑｕｉｅｒ）等、　１９８７．　Ｐｓｙｃｈｏｐｈａｒ鳳、ｊｌｌ、　４３４− ４３９］。従って、予期されず、そして驚くべき抗ウイルス効果がこれらのＤＰ Ｍ類似体単独で、そしてＡＺＴとの組合せで得られた。

あらゆる理論と結びつけられることなく、ＤＰＭまたはその類似体が強化するか 、または相乗的に作用する機序はヌクレオシド輸送の阻止および／または環状Ａ ＭＰホスホジェステラーゼ活性の阻害におけるＤＰＭの十分に確立された活性に ほとんど起因するものであることが予想される。

ｌＯμＭの過剰であるＤＰＭの血漿濃度はヒトでは維持され得る。それ故に、実 施例１に記載された研究が（１０％−２０％ウシ胎児血清中）２μＭそしていく つかの試験ではより低いのＤＰＭ濃度でジデオキシヌクレオシド−仲介ＨＩＶ阻 害の強化を示したことは重要である。ＤＰＭは血液中で大部分タンパク質に結合 されている。従って、与えられた全体の濃度で遊離の薬剤レベルは生体内より組 織培養試験においてより高いことが期待される。その他の強化剤はＤＰＭと同様 に用いられる。

本発明はエイズまたはその他のウィルス疾患を治療する化学療法を今提供する。

その方法は、エイズウィルス感染を含むウィルス感染に苦しむ宿主に、前記疾患 を引き起こすウィルスの複製を阻害するための本発明の薬剤組合せの有効量を投 与することからなる。この薬剤組合せはあらゆる適当な経路、例えば経口、非経 口、を髄内等により投与され得、そして許容される日毎に投与され得る。未感染 の個人またはウィルスに暴露された人は、感染を防ぐために同様の方法で処置さ れ得る。抗ウィルス剤、例えばＡＺＴ、ｄｄｅ等は、ＤＰＭおよび／またはその 類似体と共に、組合せでまたは交互の予定で投与され得る。

本明細書に記載された実施例および実施態様は説明だけのだめのものであること 、およびこれらの情報において種々の修正および変更は当業者には示唆されるで あろうし、そして本明細書の精神および範囲、および添付した請求の範囲の範囲 内に包含されるべきであることは、理解される。

表１．ＤＰＭの存在下および不在下での付着精製ヒトＭ／Ｍ培養物におけるＨＩ Ｖ−１ｐ２４抗原発現の５０％および９５％阻害を誘引するＡＺＴのレベルＩＤ Ｓ。およびＩＤ□値は中間有効プロットの式から計算された（データ分析の項参 照）。ｒニブロットのための線形回帰係数。カッコ内の％はＡＺＴ単独のときの ＩＤ、。およびＩＤ５ｓ値に対する値に関する。

ＡＺＴ（μＭ） 処　　理　　　　　　　　　ＩＤ５ａ　　　　　　　　ＩＤｅｓ　　　　　　　 ｒ表２．洗浄ヒトＭ／Ｍ培養物におけるスーパーオキシド（０，−）産生へのＡ ＺＴおよびＤＰＭの効果スーパーオキシド産生（培養１４日日間は健康な細胞の 機能的指数として採用される。試験の詳細は、細胞がＨＴＶ−１に感染されなか ったことを除いて第１Ｂ−Ｄ図の場合と同様だった。値はナノモルＯ３−／ウェ ルとして表されている。４つのウェルの平均±Ｓ、　Ｅ、　Ｍ、。データは処理 されたいずれかの傾向の非パラメータ試験のためにジョンクヒーア（Ｊｏｎｃｋ ｈｅｅｒｅ）（３０）の方法により分析さ表３．ＰＨＡ刺激されたヒトＴ細胞に おけるＨＩＶ−１複製に対するＡＺＴ活性のＤＰＭによる強化ＤＰＭ（μＭ） ０．０　　　２１３　３４４　　３４１　　３４１　２１９　１６２０．１５６ 　　３１３　　９３　　　８　　　８　　０　　００．６２５　　１２５　　３ 　　　０　　　０　　０　　０２．５　　　　１７　　０　　　０　　　０　　 ０　　０１０．０　　　　７　　０　　　０　　　０　　０　　０分数効果 分数効果 ＦＩＧ、　４Ａ ＬＯＧ　２　　カスタノスペルミン濃度Ｃμｇ／ｍ１ノ ＦＩＧ、　４Ｂ Ｈ−３Ｈ−３ ｐ２４　（ｎｇ／ｍ１ノ ロロ■ ｐ２４　（ｎｇ／ｍ１ノ ロ田■ ｐ２４　　（ｎｇ／ｍ１ノ ロロロ母■ 国際調査報告

Claims (1)

1. 【特許請求の範囲】 １．抗ウイルス剤と強化剤との組合せが各成分単独の活性から期待されるよりも より高い抗ウイルス効果を生じる、感染細胞においてウイルス複製を阻害するた めの有効量の抗ウイルス剤および強化剤と、薬学的に許容性の担体とからなる薬 剤組成物。 ２．前記抗ウイルス剤が鎖伸長停止剤である請求項１記載の組成物。 ３．抗ウイルス剤、強化剤またはそれらの組合せがリボソーム内にカプセル化さ れている請求項１記載の組成物。 ４．前記鎖伸長停止剤がヌクレオシドまたは一一、二一もしくは三リン酸化され たヌクレオシドである請求項２記載の組成物。 ５．前記鎖伸長停止剤がリボースをベースとするジデオキシ糖なしのリン酸化さ れた、またはリン酸化されていないヌクレオシド類似体である請求項４記載の組 成物。 ６．一一、二一または三リン酸塩部分がホスホネートまたはホスホロチオエート により置換されている請求項４記載の組成物。 ７．前記鎖伸長停止剤がアジドチミジン、ジデオキシシチジン、ジデオキシアデ ノシン、ジデオキシチミジン、ジデオキシグアノシン、ジデオキシイノシンもし くはリン酸化誘導体およびそれらの混合物からなる群から選択される請求項４記 載の組成物。 ８．前記鎖伸長停止剤がジデオキシシチジンまたはジデオキシシチジン三リン酸 である請求項７記載の組成物。 ９．前記鎖伸長停止剤がアジドチミジンである請求項７記載の組成物。 １０．前記抗ウイルス剤が、カスタノスペルミン、ジヒドロキシメチルヒドロキ シピロリドン、デオキシノジリマイシンおよびそれらの混合物からなる群から選 択されるグルコシダーゼ阻害剤植物アルカロイドまたはそれらの誘導体もしくは 類似体である請求項１記載の組成物。 １１．前記アルカロイドがカスタノスペルミンである請求項１０記載の組成物。 ｌ２．前記強化剤がニトロベンジルチオイノシン；ジラゼップ；リドフラジン； ヘキソベンジン；ミオフラジン；７−ブロモ−１，５−ジヒドロ−３，６−ジメ チルイミダゾルー（２，１，６）キナゾリン−２（３Ｈ）−オン；またはそれら の誘導体および類似体からなる群から選択される請求項１記載の組成物。 １３．前記強化剤がジピリダモル、モピダモル、パパベリンおよびそれらの混合 物、類似体または誘導体からなる群から選択される請求項１記載の組成物。 １４．前記強化剤がジピリダそルである請求項１３記載の組成物。 １５．前記鎖伸長停止剤がＡＺＴ、ｄｄＣまたはｄｄＣＴＰであり、そして前記 強化剤がＤＰＭである請求項１記載の組成物。 １６．前記鎖伸長停止剤がＡＺＴであり、そして前記強化剤がＮＢＴＩ、パパベ リンまたはミオフラジンである請求項１記載の組成物。 １７．疾患を引き起こすウイルスの増殖を阻害するか、または予防するための、 請求項１記載の組成物の有効量を、通常の宿主またはウイルス感染で罹患した宿 主に投与することからなるウイルス疾患を治療するか、または予防する方法。 １８．前記ウイルスの症状が、ＨＴＬＶ１、ＨＴＬＶ２、ＨＩＶ−１およびＨＩ Ｖ−２からなる群から選択されるレトロウイルスと関連している請求項１７記載 の方法。 １９．第１の薬剤として抗ウイルス剤、および該抗ウイルス剤の効力を同じ程度 まで低下させることなく、宿主に対する抗ウイルス剤の毒性を低下させる第２の 薬剤からなる薬剤組成物。 ２０．疾患を引き起こすウイルスの増殖を阻害するか、または予防するための、 請求項１９記載の組成物の有効量を、通常の宿主またはウイルス感染で罹患した 宿主に投与することからなるウイルス疾患を治療するか、または予防する方法。