JPH0351686B2 - - Google Patents

Description

【発明の詳細な説明】 （産業上の利用分野） 本発明は、式（） を有する化合物を活性成分として含有する、ミト
コンドリヤを調節し酸素消費を節約する医薬組成
物に関する。 （従来の技術） 上記式（）に相当する本発明の活性成分は、
英国特許No.1360426に記載されている。 本発明の医薬組成物は、不活性の固体状または
液体状の医薬用担体そして場合によつてはさらに
別の添加物とあわせて式（）の化合物を活性成
分として含有している。 式（）の化合物は、ヒトたとえば病人の治療
において、有用な、ミトコンドリヤを調節し酸素
消費を節約する性質を有する。式（）の化合物
の薬剤としての活性は実施例に示す。式（）の
化合物は非常に低毒性であるという大きな利点を
有する。 ミトコンドリヤの活動において示される好まし
い作用は二重の治療上の使用を可能にする。この
種の製剤により低酸素性心臓疾患の処置ばかりで
なく、また骨代謝障害の場合にこの製剤の好まし
い治療効果を期待できる。この点に関連して、同
種の若干の文献データを参考にすべきである：
Bioenergetics，６巻、Byrave F.L.中の今日の
話題中の文献：Mitochondrial calcium
transportの259〜318頁（1976年）の300頁には次
の記載がある：「ミトコンドリヤによるCa⁺⁺輸送
の関係を含む多くの特定の生理学的機能に、筋肉
収縮−弛緩〔Carafoli E.Recent，Adv.Sttud.
Card.Struct.Metab.，５，151〜163，1975年〕お
よび骨形成〔Lehninger A.L.，J.Biochem.，
119，129〜138，1970年〕がある。Shapiro等に
よれば〔Schapiro J.M.およびGreenspan J.S.，
Calc.Tiss.Res.，３，100，1969年〕、ミトコンド
リヤは生きている有機体の鉱物形成
（mineralization）に重要な役割を演じる。」。 本発明の組成物は、活性成分を適当な固体また
は液体担体と混合し、混合物を、直接的な薬剤と
しての使用に適当な形に処方することによる、医
薬産業において知られている方法により調製しう
る。本発明の医薬組成物は、経口投与に適当な形
で使用に供しうる。 本発明の組成物は、ふつうの担体たとえばタル
ク、殿粉、ゼラチン、水、ポリエチレングリコー
ル、ステアリン酸マグネシウム、炭酸カルシウム
等を含有しうる。本発明の組成物はまた、ふつう
の添加物、たとえば湿潤剤、緩衝剤等を含有しう
る。さらに医薬としての活性のある物質もまた組
成物中に含有しうる。有利な単位投与形態は錠剤
およびカプセルである。これらを製造するには、
砕きふるいにかけた成分を混合し、均一になつた
混合物をカプセルに詰めるるか、錠剤とする。 ７−イソプロポキシ−イソフラボンの１日の投
与量は、経口投与で約600mgから約1200mgであり
うる。組成物の活性成分の含量はやはり広範囲に
変動しうる。錠剤、カプセルにおける有利な投与
単位は、約100から約300mgの活性成分含量となし
うる。特に有利なのは、約200mgの投与単位であ
る。 本発明で述べる活性： (イ) ATP含量の増大 (ロ) グリセロリン酸デヒドロゲナーゼ活性 および (ハ) 酸素消費の節約 はミトコンドリア中のカルシウム含量および骨の
形成と密接に関係する（例えば、Biochemistry，
Vol.12，No.７，1438−1444，1973；Biochem.I
（1970）119，129−138；Calc.Tiss.Res.，３，
100−102（1969）；Current Topics in
Bioenergetics，Vol.6，303，1977） 本発明を実施例によりさらに詳細に説明する。
ただし、特許請求の範囲をこれらの例で限定する
ことはないものとする。 例 １ つぎに示す成分を示した比率に混合し十分に混
合した混合物をカプセルにみたすことにより、医
薬産業で知られている方法によりカプセルを調製
する。 ７−イソプロポキシ−イソフラボン 200mg コロイド状珪酸 20mg タルク 20mg ステアリン酸マグネシウム 40mg ばれいしよ殿粉 80mg 乳 糖 80mg 全重量 440mg 例 ２ つぎの組成の錠剤を医薬産業の方法で調製す
る。 ７−イソプロポキシ−イソフラボン 200mg ばれいしよでんぷん 36mg 乳 糖 60mg PVP／ポリビニルピロリドン 13mg Esmaspreng（Dinamit Nobel Ａ Ｇ
Witten，DBR.） 30mg ステアリン酸マグネシウム ４mg タルク ７mg 全重量 350mg 200Kgの７−イソプロポキシ−イソフラボンを
36Kgのばれいしよ殿粉および60Kgの乳糖とこね、
13Kgのポリビニルピロリドンを注入する。湿つた
塊は粒状とし、30KgのEsmaspreng、４Kgのステ
アリン酸マグネシウムおよび７Kgのタルクを加え
る。被覆した粒を乾燥し、常法で圧縮して錠剤と
する。 錠剤の特徴はつぎのようである。 直径 10mm 平均重量 350mg±５％ 崩壊時間 15分以内 摩耗強度 ３％以下 例 ３ つぎの組成の坐薬を調製する。 ７−イソプロポキシ−イソフラボン 0.30ｇ Witepsol Ｗ（Dynamit Nobel Ａ Ｇ
Witten Ｄ Ｂ Ｒ） 200ｇ 全重量 2.13ｇ 上記のWitepsol Ｗ坐薬用基材を融解させほう
まつ形成用の容器に木綿のフイルターを通して加
える。ふるいにかけた活性成分は、上記の融解物
を40から45度Ｃに冷却したものの少量で注意して
拭き取り、ほうまつ形成用の容器に加える。全体
が冷却するまでかくはんを続ける。坐薬は34から
35度Ｃの温度で成型する。マイナス５からマイナ
ス８度Ｃで凍らせる。 この経口用組成物はすぐれた安定性を示し、光
を避けて適当な包装中で５年間室温で貯蔵しう
る。薬学および生化学上の性状 機能および酸素消費試験 【表】 同じ系統、体重および年の雄ラツトを実験に用
いる。 雄ラツトの休息時のO₂消費を調べてみると、
イプリフラボン１／３mg／100体重／日経口で４
週処理のあと、それらの出発時の値および処理し
てない対照に比してO₂消費は有意に減少してい
る（前者はＰ＜0.001、後者はＰ＜0.01）。 【表】 実験群には、食餌に混入して3.3mg／Kg体重の
イプリフラボンを６週投与している。泳ぐ時の負
荷は、４ｇ／100ｇ体重で、水温は29度Ｃ、動物
の平均体重は180ｇ。ラツトは酸素環境中で水タ
ンク中でガラス槽中で泳がせる。生ずる炭酸ガス
を吸収させる。Ｐ＜0.05。 実験中、甲状腺機能の低下による酸素消費の減
少の可能性を除外する必要があると思われた。
the State Institute of Public Hygieneのthe
Iodine Isotope Laboratoryでの試験では、イプ
リフラボンの甲状腺への影響はないことが分つ
た。肝ミトコンドリヤについての試験 ブタペストのSemmelweis大学医学部生化学研
究所でミトコンドリヤレベルでの酸化プロセスに
及ぼすイプリフラボンの効果をみた。 肝ミトコンドリヤの膨潤についての研究 実験中の膨潤の程度は、Specord UV−VIS分
光光度計を用い520nmでのミトコンドリヤ懸沈液
の吸光値の減少より結論した。イプリフラボン処
理の結果として肝ミトコンドリヤの膨潤の増加が
観察された（表３および４）。 この増加は、３−ヒドロキシブチレートの存在
でのチロキシンでひきおこされる膨潤で特に著し
い。それで、イプリフラボンは、基質が肝細胞ミ
トコンドリヤに浸透するのに有利な条件を与える
と結論されうる。 【表】 対照は正常の飼料 処理は５ｇ／ｑ（クウオート）の割合にイプリ
フラボン添加、６週間、Ｐ＜0.01 【表】 ラツト肝ミトコンドリヤ中のグリセロリン酸活
性表５からイプリフラボンが肝ミトコンドリヤの
グリセロリン酸活性を増加さすことは明らかであ
る。グリセロリン酸活性の増加は、イプリフラボ
ン投与の結果として、回路系の活性が増加し、細
胞質に生ずる還元されたNADの水素がミトコン
ドリヤ中でより大きな割合で酸化されうるためと
信ぜられる。 【表】 兎肝ミトコンドリヤの酸化に関する研究 Schneider等の方法でミトコンドリヤを調製し
た。正常の飼料のみおよびイプリフラボン添加飼
料で飼育し、６週間経過後しらべた。分離肝ミト
コンドリヤの酸素消費は、10mM ３−オキシブ
チレートの存在でClark型酸素電極
（Radiometer製）で測定する。（表６） 【表】 PCPはペンタクロルフエノールである。 ４c.c.の容量中のインキユベーシヨン培地の組成
は、３から６mgのミトコンドリヤ蛋白質、
0.225Mのしよ糖、10μMのリン酸カリ緩衝液、PH
7.4、5μMのMgCl₂、20μMのトリス、PH7.4。ス
テート３での測定の場合200μMADP。 酸素消費を基準として、問題とする基質を特徴
づけるQo₂（μlO₂／mg蛋白質／時）の値はChance
の方法に準じて計算する。ステート３はADP過
剰の場合の非調節か活性化された状態で、ステー
ト４は、ADPなしの調節された状態である。ミ
トコンドリヤの最大酸化能力測定のためには３・
10^-6および５・10^-6モルのペンタクロルフエノー
ルの存在で酸素消費をも測定する。 グルタメート＋マレエートまたはヒドロキシル
ブチレートの存在でのミトコンドリヤQo₂値は、
ステート４（調節状態）で減少し、ステート３（活
性化状態）で増加する。それでイプリフラボン処
理動物に由来するミトコンドリヤの呼吸調節値
は、未処理対照のそれらより高い。 ミトコンドリヤ酵素についての試験 ハンガリー、KeResteto、the National
Therapeutic Instituteで実施。 ミトコンドリヤでの酸化プロセスに及ぼすイプ
リフラボンの効果 検定に使用する酵素 チトクロームの吸収スペクトル 大部分が酸化された状態の最初の酵素をPH7.4
（Ｍ／30）のリン酸塩緩衝液に溶解する。 1.0mg／c.c. 0.5mg／c.c.および0.25mg／c.c.の濃度
で試験する。SPectromom361で１cmキユベツト
で510から570nmまでの波長を5nmの間隔で吸収
を測定する。 Triton X100およびリン酸緩衝液を同時に使用
してイプリフラボンの溶液を調製する。酵素溶液
３c.c.についてTriton0.05c.c.を使用する。 5.0mgおよび2.5mgの物質を使用するので酵素と
試験物質の比率は、１mg／c.c.の酵素濃度で、１対
1.63となり、３c.c.の酵素溶液は３mgの酵素蛋白質
を含有する。2.5mgでは比率は１対0.83となる。
0.5mg／c.c.の濃度での比率は１：3.25および１対
1.63となる。他方0.25mg／c.c.の値は、１対6.50お
よび１対3.25である。 いくらか反応が遅れて現わる傾向もあるので吸
収スペクトルの変化は、日数をかけておこなつ
た。 【表】 【表】 表７の結果からつぎのことが分る。 ａ ５mgイプリフラボンで肝組織の酵素活性増
加。チトクロームＣ酵素蛋白質各mgについて
1.63mgの化合物が反応。 ｂ イプリフラボンで酵素活性は約10％増加。 ｃ 2.5mgのイプリフラボンでは、１mgのチトク
ロームＣ酵素蛋白質が0.82mgの化合物と反応す
る時にチトクロームオキシダーゼの活性は不変
である。 ｄ 化合物（イプリフラボン）の効果として還元
チトクロームＣの酸化は促進される。 要約：イプリフラボンは、呼吸系の末端部の電
子受容体となることが分つた。550nmでの吸収極
大の減少は還元された酵素チトクロームＣが化合
物の効果で減少することを示す。同様にマンガン
−くえん酸塩−ジエチルパラフエニレンジアミン
複合物にも影響する。これは、チトクローム系の
人為的な電子伝達系である。化合物は550nmで測
定した複合物の色の強度を増加させる。この効果
は弱い酸化に相当する。イプリフラボンは肝組織
のチトクロームオキシダーゼ活性を10％増加させ
る。この効果は使用量で変化する。 兎の横紋筋の酸に不安定なホスフエートの測定 ブタペスト、Semmelweis大学医学部の生化学
研究所で行なつた。 筋の酸に不安定なホスフエート含量そしてもつ
ともありうることとしてそれらのATP生産能は、
イプリフラボン処理の結果として増加する。高エ
ネルギーリン酸塩生成能は、酸に不安定なリン酸
塩を測定して調べられた。 【表】 嫌気的解糖に及ぼすイプリフラボンの効果 ブタペスト、Semmelweis大学、生化学研究所
で実施 強直けいれんをおこした筋肉の解糖能の増加は
筋機能の点から有利である。24時間絶食させ、内
在する基質のみの存在で測定する。 血液の乳酸含量および半膜性の筋（半膜性、強
直した筋）の乳酸生成をそれぞれ測定する。乳酸
は酵素法で測定する。H.U.Bergmeyer、
Methods of Enjyme Analysisによる。 イプリフラボン含有飼料で飼育した兎の血中乳
酸含量は、正常対照に比して有意に高い。同様に
これら動物の強直した筋の乳酸生産も高い。 【表】 【表】 筋肉および肝臓のグリコーゲン含量 兎およびラツトで試験 【表】 これらの実験で、12時間絶食させてからフラク
トース負荷。６時間後兎を処理。 顕著なこととして、イプリフラボン処理動物の
筋肉の平均グリコーゲン含量は変化せず、肝臓の
グリコーゲン含量は、平均して40％以上増加す
る。 【表】 高い。
ラツトのこれらの結果は、イプリフラボン処理
が筋のグリコーゲン含量を変化させないが、肝の
グリコーゲン貯蔵能を増加さすことが分る。 以上の結果からつぎのように結論しうる。 分離された、インタクトのミトコンドリヤで
は、イプリフラボンを投与すると、NAD依存性
の基質の酸化に影響する。非活性化状態での酸化
力を減少させ、活性化状態での酸化を増加させ
る。 これだけでも、イプリフラボン投与が酸化効率
を改良することを示している。 作用機構は記述的になるのがやむをえぬとして
も、恐らくは、回路機構の強化によるのである。
このことは、エネルギー消費の増加するミトコン
ドリヤの膨潤より結論される。またグリセロリン
酸活性の増加からも分る。 これら２つの現象、つまり、細胞質中の水素輸
送の増加およびミトコンドリヤの酸化能力の増加
は、ミトコンドリヤエネルギー変換の経済性の増
加を示す。 他方強直性筋肉の解糖の増加は、嫌気的エネル
ギー生産を促進し、酸素節約効果を強める。 治療効果 １ 抗狭心症効果 試験No. 全部で10人の患者に試みた。ECGで調べて狭
心症の発作のおこつていることを確めておく。つ
まりST抑制およびＴ波陰性である。４例では、
コロナリオグラフイーによつても狭心症が示され
た。２週間観察すると患者のNitromint要求が確
実となる。第２週において、７−イソプロポキシ
−イソフラボン処理を受けた患者のNitromint要
求量は、プラセボーを与えたものの半分になる。
ここで、イソフラボン投与量は600mg／日であつ
た。７−イソプロポキシ−イソフラボンの治療を
受けて狭心症の発作の減少した患者に、ベーター
リセプター遮断剤およびRigedal（イソソルビツ
トージ硝酸塩）をそれぞれ与えると、発作の回数
はさらに減少した。７−イソプロポキシ−イソフ
ラボンに代えて新たにプラセボーを与えると、発
作数は増加した。 治療第２週の発作数はつぎのようである。 【表】 試験No. 実験計画：全体で15人の狭心症患者について調
べた。実験は薬剤を投与しない期間、ついでプラ
セボー投与期間、そしてふたたび薬剤を投与しな
い期間とした。ついで、錠剤とした７−イソプロ
ポキシ−イソフラボン活性物質を200mg宛３回毎
日投与した。治療期間は４週間である。 【表】 数

Claims (1)

1. 【特許請求の範囲】 １ 活性成分として７−イソプロポキシ−イソフ
   ラボンを含有することを特徴とする、ミトコンド
   リアにおけるATP含量増大、グリセロリン酸デ
   ヒドロゲナーゼ増大および酸素消費節約用医薬組
   成物。 ２ 心臓不全および肺不全治療用である、請求項
   １記載の医薬組成物。 ３ 100〜300mgの７−イソプロポキシ−イソフラ
   ボンを含有する、タブレツトまたはカプセルの形
   である、請求項１または２記載の医薬組成物。 ４ １日の投与量が約600〜1200mgである、請求
   項１から３のいずれか１項記載の医薬組成物。