JPH035497A - 結晶性ゼオライトによる加水分解蛋白質の精製方法 - Google Patents

Abstract

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め要約のデータは記録されません。

Description

【発明の詳細な説明】 （産業上の利用分野） 本発明は、食品成分として有用な加水分解された蛋白質
組成物を精製する方法に関する。

（従来の技術および発明が解決しようとする課題） 蛋白質を加水分解して食品成分を得ることは周知である
１例えば、コルペット（Ｃｏｒｂｅｔｔ）に付与された
米国特許第４．１６５，３９１号には、食品に肉の風味
を付与しおよび／または食品の風味を高めるために、加
水分解された植物性蛋白質（ＨＶＰ）を使用することが
開示されている。この米国特許においては、植物性蛋白
質の酸加水分解が、食品の観点から、酵素加水分解およ
びアルカリ加水分解と比較して、最も重要な方法である
こと、および、塩化水素酸または硫酸がこの加水分解に
おいて広く使用されることが記載されている。

蛋白質の加水分解において塩化水素酸を使用することは
、「ツァイトシュリフト・ヒュエル・レーベンスミッテ
ル・ウンターズッフング・ラント・フオルシュング」　
（食品の調査と研究のための雑誌）　（Ｚ、　Ｌｅｂｅ
ｎｓｍ、　Ｕｎｔｅｒｓ、　Ｆｏｒｓｃｈｌ第１６７巻
、第２４乃至４４頁（１９７８年）に掲載のジ工−・ヴ
エリセク（Ｊ、　Ｖｅｌｉｓｅｋ）等の「クロロヒトリ
ンズ・イン・ヒドロリセイツ」（「蛋白質加水分解物中
のクロロヒドリンＪ　）　（”（：ｈｌｏｒｏｈｙｄｒ
ｉｎｓｉｎ　Ｐｒｏｔｅｉｎ　Ｈｙｄｒｏｌｙｓａｔｅ
ｓ″）と題する論文に記載されているように、蛋白質源
における残留グリセロールからのクロロヒドリンの製造
において考慮されている。ファシ（Ｆａｓｉｌ等の米国
特許第４．７５９９４４号には、クロロヒドリンを除去
する方法またはクロロヒドリンの形成を阻止する方法が
開示されている。この米国特許には、加水分解された蛋
白質即ち加水分解蛋白質（ｈｙｄｒｏｌｙｓｅｄ　ｐｒ
ｏｔｅｉｎ）の官能的性質（例えば、味）を変えること
なくクロロヒドリンの形成を阻止することは非実用的で
あると記載されている。同様に、炭素を用いた脱色また
は精留（例えば、分別蒸留）によりクロロヒドリンを除
去することも非実用的であるとされている。この米国特
許には、加水分解蛋白質の密度を実質上一定に保持しな
がら加水分解蛋白質を減圧下において水蒸気蒸留させる
ようにした、加水分解蛋白質からクロロヒドリンを除去
する方法が開示されている。

この米国特許に記載の水蒸気蒸留法は、加水分解蛋白質
中のクロロヒドリンの濃度を充分に低下させることがで
きるが、減圧下での水蒸気蒸留を行なうこの方法が、加
水分解蛋白質から揮発性の芳香および風味成分を如何に
して除去しないか、従って、如何にして蛋白質の官能的
性質を変えないかということを理解するのが困難である
。

（課題を解決するための手段） 本発明は、加水分解された蛋白質即ち加水分解蛋白質と
クロロヒドリンとの水性混合物を結晶性ゼオライト凝集
体と接触させて、前記水性混合物中のクロロヒドリンの
量を少なくする工程を備えたことを特徴とする加水分解
蛋白質の生成方法に関する。

本発明はまた、塩化物とグリセロールおよびその先駆物
質よりなる群から選ばれる物質（ｍｅｍｂｅｒ）とを含
む水性媒体において酸性ｐＨで蛋白質を加水分解する工
程と、前記加水分解後に前記水性媒体を結晶性ゼオライ
ト凝集体と接触させる工程とを備久たことを特徴とする
食品成分として有用な加水分解蛋白質の製造方法に関す
る。

結晶質ゼオライト凝集体は、加水分解された蛋白質即ち
加水分解蛋白質の官能的性質を有意に変えることなく加
水分解蛋白質からクロロヒドリンを除去するのに使用す
ることができることがわかった。

本発明に従って有利に処理することができる加水分解蛋
白質組成物は、一般に、少量ではあるが測定することが
できる量のクロロヒドリン、例えば、１．３−ジクロロ
プロパン−２−オール（ＤＣＰ）を含有する０本明細書
において使用されている「クロロヒドリンＪ　（”Ｃｈ
ｌｏｒｏｈｙｄｒｉｎ”）なる語は、酸の存在の下での
グリセロールと塩化物との反応による塩素化生成物（ｃ
ｈｌｏｒｉｎａｔｅｄｐｒｏｄｕｃｔ）を指すのに使用
されている。かくして、「クロロヒドリン」なる語は、
ＤＣＰだけでなく、３−クロロ−プロパン−１，２−ジ
オールおよび２．３−ジクロロ−プロパン−１−オール
も含む、しかじな・がら、本明細書において使用されて
いるように、「クロロヒドリン濃度」（”ｃｈｌｏ　−
ｒｏｌｌｙｄｒｉｎｃｏｎｃｅｎｔｒａｔｉｏｎ）なる
語は、別に特に指定しない限りは、以下に説明するよう
に測定されるＤＣＰの濃度について云うものである。

加水分解蛋白質組成物は、蛋白質材料 （ｐｒｏｔｅｉｎａｃｅｏｕｓ　ｍａｔｅｒｉａｌｌの
酸加水分解により得られる１通常入手することができる
蛋白質材料は、一般に、グリセロールおよび／またはそ
の先駆物質、例えば、脂肪トリグリセリドが含まれる。

優れた官能的性質を得るために、塩化水素酸が蛋白質材
料の酸加水分解において一般に使用される。従って、グ
リセロールと塩化物は酸の存在下で利用することができ
、蛋白質の加水分解の際に反応してクロロヒドリンを形
成する。

加水分解された蛋白質中のクロロヒドリンの正確な濃度
は、蛋白質材料の性質（例えば、グリセロールおよびそ
の先駆物質の濃度）および選ばれる加水分解条件（例え
ば、加水分解媒体中の塩化物と水の濃度）に従って変化
する。ガスクロマトグラフィより測定される典型的なり
ロロヒドリン濃度は、加水分解された蛋白質組成物の約
１００乃至約１０００　ｐ　ｐ　ｂ　（ｐａｒｔｓ　ｐ
ｅｒ　ｂｉｌｌｉｏｎ）の範囲にある。

加水分解された蛋白質を得ることができる蛋白質材料源
は、広く変えることができる。動物源からの蛋白質（例
えば、牛肉からの牛肉エキスおよび魚からの魚肉蛋白質
ミール）または微生物源からの蛋白質［例えば、酵母か
らの乾燥蒸留可溶物（ｄｒｉｅｄ　ｄｉｓｔｉｌＬｅｒ
ｓ　５ｏｌｕｂｌｅｓ）　］を加水分解することができ
る。しかしながら、典型的には、加水分解された蛋白質
は、植物性蛋白質材料の加水分解により得られる加水分
解植物性蛋白質（ＨＶＰ）とされる、かかる材料は、−
Ｍに、［ケルダール（にｊｅｌｄａｈｌ）窒素分析によ
り分析した場合に］２５重量％よりも多い蛋白質を含む
べきである。

植物性蛋白質材料源−としては、例えば、小麦グルテン
（ｇｌｕｔｅｎ）、コーングルテン、抽出大豆粉、大豆
蛋白質濃縮物、ピーナツ粉、ピーナツ粉濃縮物、抽出綿
実ミール、綿実蛋白質濃縮物および抽出力ノラ（ｃａｎ
ｏｌａｌ　（即ち、低級エルカ酸なたね）粉がある。こ
れらの蛋白質は、単独であるいは種々組合わせて使用す
ることができる。

蛋白質材料の加水分解は、該材料を水性酸で処理するこ
とにより、例えば、２Ｎ乃至１２Ｎの塩化水素酸を使用
した通常の酸加水分解または同等の処理によって行なわ
れる。加水分解用の酸の好ましい規定度は、４Ｎ乃至６
Ｎである。典型的には、６Ｎの塩化水素酸を、スチーム
ジャケットと撹拌器とを備えかつガラスライニングまた
はエナメル被覆を施した反応がまにおいて、６０’乃至
９０℃、好ましくは、１１０°乃至１２０’Ｃ（７）温
度に加熱する０次に、（例えば、量が重量で塩化水素酸
よりも約５０％多い）蛋白質材料を高温の塩化水素酸に
添加し、還流下で撹拌を継続しなから２乃至１０時間、
好ましくは、約５乃至６時間加熱を続ける。加水分解の
程度により生成物は変わるが、典型的には、加水分解に
より、アミン窒素の少なくとも８０％が遊離アミンとし
て存在する生成物が形成される。得られた加水分解蛋白
質はろ過処理して、不溶分、主として、ヒューミン（ｈ
ｕｍｉｎｌ　を除去し、このろ過除去した物質を廃棄す
る。この第１のろ過処理は、加水分解された蛋白質即ち
加水分解蛋白質を濃縮アルカリ、典型的には、炭酸ナト
リウムで実質上中和する前または後に行なうことができ
る。加水分解蛋白質は、次に、ろ過その他の物理的手段
により、物質をゆっくり結晶化しかつコロイド粒子をゆ
っ（り凝集化させるために、例えば、数日乃至数週間熟
成させる（ａｇｅ）こ、とができる。

加水分解蛋白質は、結晶性ゼオライト凝集体と接触させ
る前または後に、従来の方法で活性炭を用いて任意に脱
色させることができる。この処理により、結晶性ゼオラ
イト凝集体を汚染する不溶分を除去することができ、従
って、接触前の脱色が好ましい。

本発明により行なわれる精製（ｐｕｒｉｆｉｃａｔｉｏ
ｎ）は、加水分解蛋白質を結晶性ゼオライト凝集体と接
触させる工程を備える。以下、ゼオライトの代表的な特
性と接触の典型的な手段について、詳細に説明する。し
か“しながら、「接触Ｊ　（”ｃｏｎｔａｃｔ−ｉ　ｎ
　ｇ　”　）なる詔は、本明細書では、加水分解蛋白質
を粒状ゼオライトと会合させる（ａｓｓｏｃｉａｔｅ）
させる、加水分解蛋白質中のクロロヒドリンを粒状ゼオ
ライトにより吸着させるのに有効な手段を含む、「凝集
体Ｊ　（”ａｇｇｌｏｍｅｒａｔｅ”）なる語は、ゼオ
ライトの個々の結晶よりも大きい粒度、典型的には、約
１００マイクロメートルよりも小さい粒度な有する結晶
性ゼオライトを意味するのに使用されている。即ち、「
凝集体」は、−Ｍ的には、２つ以上のゼオライト微結晶
（ｚｅｏｌｉｔｉｃ　ｃｒｙｓｔａｌ−１ｉｔｅｌが互
いに所定の物理的関係にあるゼオライトを云う。結晶性
ゼオライト凝集体は、典型的には、約４．２ｍｍ　（１
／６インチ）と約３．２ｍｍ（１／８インチ）程度のサ
イズを有するペレット、４ｘ８．８ｘ１２および１４ｘ
３０メツシユのビーズ、並びに、２０ｘ６０メツシユの
粒体として入手することができる。

結晶性ゼオライトは、Ｍ２／、、０・Ａ１□０３ｘ　Ｓ
　ｉ　Ｏｚ　・ｙ　Ｈｚ　Ｏという基本的な化学式を有
し、鎖式において、Ｍはｎ価のカチオンである。

結晶性ゼオライトは、ゼオライトと広く称されているゲ
ルタイプの非晶質アルミノ珪酸塩とは、化学組成は類似
しているが、区別されるべきである。

ゼオライト結晶構造の基本構成単位は、小さなシリコン
またはアルミニウムカチオンを包囲する４つの酸素アニ
オンからなる四面体（ｔｅｔｒａ−ｈｅｄｒｏｎｌ　で
ある、ナトリウムイオンその他のカチオンは、アルミナ
四面体の正荷電不足を補償する作用をなす、４つの各酸
素アニオンは、別のシリカまたはアルミナ四面体と順次
共有しあって結晶格子を３次元に拡げる。

得られる結晶は、比較的大きなキャビティを有するハニ
カム構造に形成されている点で通常のものではなく、各
キャビティは開口または孔を介して６つの隣接するキャ
ビティと接続している。水和水は、これらのキャビティ
内に含まれる１例えば、タイプ八は、直径が約１１オン
グストロームで体積が約９２５立方オングストロームで
、全結晶体積（ｃｒｙｓｔａｌｌｉｎｅ　ｖｏｌｕｍｅ
）のほぼ半分を占める略球形のキャビティを有している
。この体積は、吸着にとって有効である。す斗すウムを
担持する（ｓｏｄｉｕｍ−ｂｅａｒｉｎｇ）タイプＡ４
の自由開口（ｆｒｅｅａｐｅｒｔｕｒｅｌ　のサイズは
、直径が３．５オングストロームである。これにより、
通常の操作温度において、４オングストロームという大
きい有効直径を有する分子を通過させることができる。

一般に、入ってくる分子の弾性と運動エネルギとにより
、開口の自由直径（ｆｒｅｅ　ｄｉａｍｅｔｅｒ）より
も大きい最大０．５オングストロームの分子が容易に通
過することができる。交換性カチオンのサイズと位置は
、結晶性ゼオライトの自由開口のサイズに影響を及ぼす
、かくして、タイプ４Ａのナトリウムイオンをカルシウ
ムイオンで置換すると、４．２オングストロームの自由
開口サイズを有するタイプ５Ａが得られる。かかるカチ
オンはまた、これらの吸着剤にとっては独特の、非常に
強くて選択性を有する吸着力をもたらすものと考えられ
る。

本発明において使用するのが好ましいゼオライトは、ゼ
オライトタイプＡ　（ｚｅｏｌｉｔｅ　Ｔｙｐｅ　Ａｌ
である。ゼオライトは、ヒドロゲル法およびクレー変換
法（ｃｌａｙ　ｃｏｎｖｅｒｓｉｏｎ　ｐｒｏｃｅｓｓ
）をはじめとする種々の方法により、商業的規模で生産
されてきた。前者の方法によるゼオライトタイプＡの製
造は、ミルトン（Ｍｉｌｔｏｎ）の米国特許第２，８８
２．２４３号、センセル（Ｓｅｎｓｅｌ）の米国特許第
２，８４１，４７１号、エステス（Ｅｓｔｅｓ）の米国
特許第２．８４７．２８０号、ウェーバ−（Ｗｅｂｅｒ
ｌの米国特許第３．０５８．８０５号、マイケル（Ｍｉ
ｃｈｅｌ）等の米国特許第３．４３３．５８８号、ドジ
ールザノウスキー（Ｄｚｉｅｒｚａｎｏｗｓｋｉ）等の
米国特許第３．０９４，３８３号、ミチャルコ（Ｍｉｃ
ｈａｌｋｏ）の米国特許第３，３４８，９１１号、ミチ
ャルコの米国特許第３．５５６．４５１号、ミチャルコ
の米国特許第３、３５９．０６８号およびミチャルコの
米国特許第３、３８６．８０２号に記載されている。後
者のクレー変換法によるタイプＡの製造は、センセル（
Ｓｅｎｓｅｌｌの米国特許第３．００９．７７６号、ハ
ウエル（ｌ（ｏｗｅｌｌｌの米国特許第３．１１４．６
０３号、メイハー（Ｍａｈｅｒ）の米国特許第３．１８
５．’５４４号、メイハー等の米国特許第３、２０５．
０３７号およびヴエダ（Ｖｅｄａ）等の米国特許第３、
５３５．０７５号に記載されている。

結晶性ゼオライトタイプＡの代表的な商業的規模の製造
においては、珪酸ナトリウム、アルミナ三水和物（ａｌ
ｕｍｉｎａ　ｔｒｉｈｙｄｒａｔｅ）および水酸化ナト
リウムを混合タンクの中へ自動回分秤量し、均質になる
まで撹拌する。得られたゲルを、厳密に制御された状態
に保持されている結晶化タンクに圧送する。結晶化の進
行は、Ｘ線回折をはじめとする幾つかの品質管理技術に
より監視される。

結晶化が完了してから、結晶スラリをろ過して洗浄する
。結晶のナトリウムをカルシウムその他のカチオンで置
換する場合には、ろ過ケークを加熱されたタンクに移し
、ここで適宜の金属塩の溶液と混合する１元の結晶スラ
リの処理と同様、交換した形態のものも洗浄してろ過す
る。

商業的な、約１／６ｃｍ（１／１６インチ）および約１
／３ｃｍ（１／８インチ）のペレットを形成する場合に
は、ろ過により得た（はとんどが０．１乃至１０マイク
ロメートルの範囲にある）結晶を（一般的には約２０重
量％のバインダ濃度で）クレーバイングと混合し、押出
し機にかける６次にペレットを乾燥し、スクリーン処理
し、回転キルンにおいて焼成する。

上記したように、加水分解された蛋白質即ち加水分解蛋
白質は、所望の程度の精製度を有する加水分解蛋白質が
得られる限りは、種々の手段を用いて、粒状結晶性ゼオ
ライトと接触させることができる。加水分解蛋白質は、
典型的には、水溶液として存在する。従って、ゼオライ
トは、加水分解蛋白質の水溶液にゼオライトが添加され
ている静的精製剤（ｓｔａｔｉｃ　ｐｕｒｉｆｙｉｎｇ
　ａｇｅｎｔｌとして使用することができる６次に、ゼ
オライトを回収する前に、十分な時間をかけて、例えば
、ろ過、遠心分離またはデカンテーションにより、所望
量のクロロヒドリンを除去する０回収されたゼオライト
は、再使用する前に、再生する（ｒｅｇｅｎｅｒａｔｅ
）ことができる、しかしながら、加水分解蛋白質溶液へ
の添加および該溶液からの回収のようにゼオライトを繰
返し処理すると、凝集体の形態が磨耗し、ゼオライトの
有用性が低下しまたは失われる可能性がある。従って、
ゼオライトを固定床（ｆｉｘｅｄｂｅｄ）に保持し、加
水分解蛋白質の水溶液を固定床に対して出し入れする動
的精製技術（ｄｙｎａｍｉｃｐｕｒｉｆｉｃａｔｉｏｎ
　ｔｅｃｈｎｉｑｕｅｓｌが好ましい。

動的精製技術により加水分解蛋白質を精製する場合、固
体のゼオライト吸着剤床に加水分解蛋白質を、例えば、
重力供給または強制圧送により装填する０次に、精製さ
れた加水分解蛋白質を吸着剤床から取出す０次に、脱離
剤（ｄｅｓｏｒｂｅｎｔ）を床に加えて、吸着されたク
ロロヒドリンを脱離させかつゼオライトを再生する０次
に、脱離されたクロロヒドリンと混合した状態にある脱
離剤を床から除去する。

ゼオライト吸着剤は、（例えば、回分法の）単一の床、
揺動床（ｓｗｉｎｇ−ｂｅｄ）操作が採用される複数の
床（例えば、一方の床を再生しながらもう一方の床で吸
着を行なう２床、２サイクル系）または擬似移動床（ｓ
ｉｍｕｌａｔｅｄ　ｍｏｖＬｎｇｂｅｄｌ　（例えば、
加水分解蛋白質供給および脱離剤供給と生成物抽出およ
び脱離剤除去との導入点を移動することができる装置を
備えた１つ以上の床）に含ませることができる。揺動床
技術は、１９７４年にアメリカ合衆国、ニューヨーク州
、ニエーヨーク市に所在するジョン・ワイリー・アンド
・サンズ（Ｊｏｈｎ　Ｗｉｌｅｙ　＆　５ｏｎｓ）から
発行された、ブレツク（Ｂｒｅｃｋｌ著の「ゼオライト
・モレキュラ・シーブズＪ　（Ｚｅｏｌｉｔｅ　Ｍｏ１
ｅｃｕｌａｒ　５ｉｅｖｅｓ）第７１５乃至７１８頁に
詳細に開示されており、擬似移動床技術は、１９７８年
に同じくジョン・ワイリー・アンド・サンズから発行さ
れ、カーク・オスマー（Ｋｉｒｋ−Ｏｔｈｍｅｒｌ　ｍ
集の第３版に係る「エンサイクロペディア・イブ・ケミ
カル・テクノロジー」ｆＥｎｃｙｃｌｏｐｅｄｉａ　ｏ
ｆ　Ｃｈｅｍｉｃａｌ　Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙｌ　、第
５６３乃至５８１頁に褐載された、ブルートン（Ｂｒｏ
ｕｇｈｔｏｎｌ著の「アトソーブチイブ・セパレイジョ
ン（リキッズ）」ビＡｄｓｏｒｐｔｉｖｅ　５ｅｐａｒ
ａｔｉｏｎ（Ｌｉｑｕｉｄｓ）　”Ｊ　　に詳細に記載
されている。

クロロヒドリンを脱離することによりゼオライトを再生
するのに選ばれる脱離剤は、ゼオライトと適合したもの
でなければならず、即ち、ゼオライトを分解するもので
あってはならない、適宜のゼオライトの例としては、炭
化水素溶媒、例えば、ペンタンおよび／またはエチルエ
ーテルがある。脱離剤は、再生されたゼオライトで精製
されるその後の加水分解蛋白質の品質に悪影響を及ぼす
危険性を避けるためにゼオライト中の残留脱離剤または
脱離剤中の不純物を除去する必要性を回避するように、
食品等級のものとすべきである。

好ましい脱離剤としては、低級アルカノール、例えば、
メタノール、エタノールおよびプロパツールのような水
混和性の有機溶媒がある。水混和性の有機溶媒を使用す
ると、追加の加水分解蛋白質を導入する前に、床を水で
洗浄することにより、床から残留溶媒を除去することが
できる。脱離剤によっては、再生において使用した脱離
剤を、例えば、分別蒸留により回収することができる。

エタノールは、脱離剤として特に有用であることがわか
った。エタノールは、実際の滞留時間において、クロロ
ヒドリンをゼオライトから有効に除去することが判明し
、エタノールは水で洗浄することによりゼオライト床か
ら有効に除去され、生成された加水分解蛋白質にエタノ
ールが少量残留しても生成された加水分解蛋白質の食品
成分としての使用に対して障害とはならない。

加水分解蛋白質中のクロロヒドリン濃度の減少の程度は
、当然のことであるが、接触時間（ｃａｎ　−ｔａｃｔ
　ｔｉｍｅｌと接触レベル（ｃｏｎｔａｃｔ　１ｅｖｅ
ｌ）　、即ち、結晶性ゼオライトと接触する加水分解蛋
白質溶液の重量パーセントとしての該結晶性ゼオライト
の率とによる０例λば、１．５％の接触レベルで接触時
間が約１００乃至約２００秒であると、ＤＣＰ濃度を約
８０乃至約９０％まで減少させることがわかった。この
ような濃度の減少は、約１００ｐｐｂ乃至約４０，０Ｏ
Ｏｐｐｂの範囲のＤＣＰの試験レベルに亘って、加水分
解蛋白質中のＤＣＰの濃度とは実質上無関係であやごと
がわかった。一般に、接触時間は、公称パーセントより
も多いＤＣＰを特定のサンプルから除去するように約３
０秒よりも長くすべきである。接触時間は少なくとも約
１分、典型的には１乃至２分とするのが好ましい、接触
レベルは、上記した接触時間の場合、一般的には約０．
０５％よりも大きく、好ましくは約０．１％乃至約１％
とすべきである。

加水分解蛋白質は、ファシ（Ｆａｓｉ）等の米国特許第
４．７５９，９４４号に記載の方法により、ＤＣＰの存
在に関して分析することができる。以下の実施例に示す
結果は、この方法に従って得られたものである。以下の
実施例においては９部、パーセントおよび比率はいずれ
も、別に指定しない限り、重量に関するものである。

（実施例） Ｋ立！ユ 加水分解された大豆粉（２％窒素、３６％ｄ、ｓ、）（
以下、ｒＨＳＭＪという）をＤＣＰに関して分析したと
ころ、９３ｐｐｂ含有していることがわかった。１リツ
トルの分離漏斗に２７５グラムのＨＳＭを装填した。ユ
ニオン・カーバイド・コーポレイション（Ｕｎｉｏｎ　
Ｃａｒｂｉｄｅ　Ｃｏｒｐｏ　−ｒａｔｉｏｎｌからモ
レキュラ・シーブ・タイプ８２Ａ（Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ
　５ｉｅｖｅ　Ｔｙｐｅ　８２Ａ）　（ロット番号：１
３３５６）（以下、ｒＺＡ−８２Ｊという。）として入
手することができる２０ｘ６０メツシユの粒体からなる
粒状結晶性ゼオライト凝集体をカラムに装填し、深さが
１２．５ｃｍで直径が２，７５ｃｍの円筒状装填床を形
成した。２７５グラムの８３Ｍを、ＨＳＭが床を出て６
．５ｍｌ／分の割合で留分コレクタ（ｆｒａｃｔｉｏｎ
　ｃｏｌｌｅｃｔｏｒ）へ向かうことができる速度で、
床に重力供給した。溶出液（ｅｌｕａｔｅ）をＤＣＰに
関して分析したが、検出されなかった。

去１目江旦 ８１００ｇのＨＳＭのサンプルを、４００ｐｐｂのレベ
ルのＤＣＰでスパイク（ｓｐｉｋｅ）　Ｌ／た。このサ
ンプルを、実施例１の装置に実施例１に記載したように
供給したが、装置は新鮮な乙Ａ−８２を含むものであっ
た。溶出液のサンプルを８つの異なった間隔で採取し、
ＤＣＰの分析を行なった。間違った量として後に確認さ
れた読みを除いたところ、溶出液の８つの連続したサン
プルのいずれにも、または全溶出液の複合体（ｃｏｍｐ
ｏｓｉｔｅ）にもＤＣＰは検出されなかった。このよう
に、０．６％の接触レベルでは、４００ｐｐｂのレベル
でスパイクされたＨＳＭのサンプルから、全でのＤＣＰ
が除去されていた。

実Ｗ凱旦 対向重力流（ｃｏｕｎｔｅｒ−ｇｒａｖｉｔｙ　ｆｌｏ
ｗ）装置を構成し、以下のようにして使用した。４００
ｐｐｂのレベルのＤＣ，Ｐでスパイクした）ＩＳＭを、
６６ｋｇの溜めからフレキシブルチューブを介して０．
６リツトル／時の速度でパラスタティックポンプ（ｐａ
ｒａｓｔａｔｉｃ　ｐｕｍｐｌ　により引出した。８３
Ｍを、深さが４２ｃｍで直径が３．５ｃｍの、新鮮なＺ
Ａ−８２を装填した床の底部に供給し、それから留分コ
レクタに供給した。サンプルを８つの異なる間隔で溶出
液流から取出したが、これらの連続するサンプルにはＤ
ＣＰは検出されなかった。溶出液を２つの別の複合体、
即ち、全溶出液の約第１の半分からなる一方と全溶出液
の約第２の半分からなる他方とを集めた。いずれの複合
体にもＤＣＰは検出されなかった。

Ｋ皿五Ａ 新鮮なＺＡ−８２を装填した実施例３の対向重力流装置
を使用して、高度にスパイクしたＨＳＭのサンプル、即
ち、４０，０００ｐｐｂのレベルでＤＣＰによりスパイ
クした８５Ｍのサンプル２１ｋｇを精製した。下記の第
１表は、該表に示す）（ＳＭの量の溶出後に集めた種々
のサンプルとそのＤＣＰ含量を示す。

サンプル　処　　　　　　　理　　　ＤＣＰＮｏ、　　
　　　　　　　　　　　　　　　ｂｌ　　　　１．３−
ＤＣＰスパイク供給　３３．０９０２　　　最初のカラ
ム溶出液　　　非検出３　　　１．２ｋｇ溶出液後　　
　　　非検出４　　　２．５ｋｇ溶出液後　　　　　　
１０３５　　　４．３ｋｇ溶出液後　　　　　　９６６
　　　６．７ｋｇ溶出液後　　　　　　１２１７　　　
１５．８ｋｇ溶出液後　　　　　　１１１８　　　１８
．６ｋｇ溶出液後　　　　　　　９６９　　　２１．０
ｋｇ溶出液後　　　　　　２７３１０　　　　操作終了
時の供給　　　３０．４３０１１　　　　全溶出液の複
合体　　　　　１１１最終溶出液のサンプルにみられる
２７３ｐｐｂのレベルのＤＣＰは、このサンプルよりも
早期のサンプルと比較すると、ゼオライトがＤＣＰの吸
着に関してその能力に近づいていたことを示していると
みることができる。

東１ｕｉ旦 実施例４から装填した（ｐａｃｋｉｎｇ）使用済みのＺ
Ａ−８２の別体をなす２つのサンプルを、２つの異なる
有機溶媒で処理し、該溶媒からＤＣＰを抽出または洗浄
した。

第１のサンプルを乾燥し、装填に対する溶媒の比率（ｓ
ｏｌｖｅｎｔ　ｔｏ　ｐａｃｋｉｎｇ　ｒａｔｉｏ）を
２０＝１にして、ペンタンとエチルエーテルとの混合物
を用いて抽出した。溶媒は１．１９２．０００　ｐ　ｐ
　ｂのＤＣＰを含んでいることがわかり、従って、装填
サンプル中のＤＣＰの８８．４％が回収された。

第２のサンプルを装填に対する溶媒の比率を２：１にし
て９５％エタノール水溶液で洗浄した。溶媒は３２５．
８００　ｐ　ｐ　ｂのＤＣＰを含んでいることがわかり
、従って、装填サンプル中のＤＣＰの５８．０％が回収
された。

１立五互 新鮮なＺＡ−８２を装填した実施例３の対向重力流装置
を使用して、３０．５秒の接触時間と下記の第２表に示
す接触レベルで、加水分解されたコーングルテン（２％
窒素、３６％ｄ、ｓ、）（以下、ｒＨｃＧＪという、）
を処理した６次に、カラムをエタノールで洗浄した。複
合溶出液のＤＣＰ含量とＤＣＰ回収は、下記の第２表に
示す通りであった。

サンプ ルＮｏ。

サンプルの特徴 最初のＨＣＧ供給 最終ＨＣＧ供給 １％接触レベルでの 最初の溶出液 ０．１％接触レベルで の最初の溶出液 ０．０５％接触レベル での最初の溶出液 ＤＣＰ　　　回　　収 ｂ　　％ ５８ ２４ ３０ ５１ ４９ ６０．１％接触レベル　　　２７９　　１２．２での複
合溶出液 ７　　０．０５％接触レベル　　３１２　　　８．６で
の複合溶出液 ８　　エタノール洗浄　　７，６６８　　１３０．０支
五見ユ ＨＳＭのサンプルをＤＣＰでスパイクし、スパイク後に
分析したところ８，５２０ｐｐｂ含んでいた。新鮮なＺ
Ａ−８２を装填した実施例３の対向重力流装置を以下の
ように使用した。ＨＳＭを実施例３に記載のように床に
供給して、０．５％の接触レベルで４３．３秒の接触時
間を得た。次に、残留ＨＳＭを床から排出した１次に、
床を２床容量（ｔｗｏ　ｂｅｄ　ｖｏｌｕｍｅｓ）の脱
イオン水で洗浄し、排水した。床を、次に、４床容量の
エタノールを用いてＨＳＭと同じ流量の対向重力流で処
理し、更に２床容量の脱イオン水で洗浄してから排水し
た。この゛ようにして得られた再生床を使用して別のア
リコート（ａｌｉｑｕｏｔ）の８５Ｍを上記したように
精製し、その後床を上記したようにして３回連続して再
生した。第１および２回目の再生において使用したエタ
ノールは、工業等級（ｔｅｃｈｎｉ−ｃａｌ　ｇｒａｄ
ｅ）　（即ち、食品等級）の９５％エタノール水溶液で
あり、第３および４回目の再生に使用したエタノールは
、産業等級（ｉｎｄｕｓｔｒｉａｌ　ｇｒａｄｅ）（即
ち、変性）３Ａエタノールであった。８３Ｍ溶出液のＤ
ＣＰ含量、エタノール溶出液および（エタノール溶出液
に含まれるＤＣＰの量とＨＳＭ溶ａ溶炉液除去されたＤ
ＣＰに基づく）回収パーセントは、下記の第３表に示す
湧りであった。

サンプ　サンプルの特徴　　　ＤＣＰ　　回　収ルＮｏ
、　　　　　　　　　　　　ｂ　　重　％Ｉ　　　ＤＣ
Ｐでスパイク　　　８，５２０したＨ５Ｍ供給 ２　　最初の複合溶出液　　３．４１０　　４０３　　
最初のエタノール　２５３，４４０　１２９．３再生溶
出液 ４　　第２回目のＨＳ　Ｍ　　　３，２３０　　３７．
９複合溶出液 ５　　第２回目のエタノ　　２２９，５６０　１１８．
７−ル再生溶出液 ６　　第３回目のＨＳ　Ｍ　　　２．９００　　３４．
０複合溶出液 ７　　第３回目のエタノ　　２０９，０４０　１０６．
９−ル再生溶出液 ８　　第４回目のＨＳ　Ｍ　　　２，９８０　　３５．
０複合溶出液 ９　　第４回目のエタノ　　２１４．５６０　１０３．
６−ル再生溶出液 １０　　　操作の最後におけ　　７．１００　　−るＨ
５Ｍ供給 １１　　８３Ｍ溶出液の複　　３゜１５０　　−合体 上記結果が示すように、粒状結晶性ゼオライト凝集体は
、有効に使用することができ、かつ、エタノールで再生
することができ、しかも加水分解蛋白質供給体中のＤＣ
Ｐが著しく高レベルにありかつゼオライトの能力または
該能力付近であっても、ＤＣＰをほぼ完全に除去するこ
とができるとともに、ＤＣＰの除去に関する活性度を有
効に保持することができる。

之較１ 上記したユニオン・カーバイド・コーポレイションから
モレキュラ・シーブ・タイプ８２Ａとして入手すること
ができる粉末状の結晶性ゼオライ！〜を用いて、ＨＣＧ
のサンプルの回分祠製を下記のようにして行なった。粉
末結晶性ゼオライトと加水分解蛋白質を開放式の１リツ
トル容器に充填し、下記の第Ａ表に示す接触時間をかけ
て室温で電磁撹拌を行なった。それぞれの量を調整して
、第Ａ表に示す接触レベル（加水分解蛋白質溶液の重量
パーセントとしての結晶性ゼオライトの重量）を得た。

第Ａ表に示す接触時間の経過後に、加水分解蛋白質を、
Ｎｏ、２ホワツトマンろ紙（Ｎｏ、２　Ｗｈａｔｍａｎ
　ｆｉｌｔｅｒ　ｐａｐｅｒ）を用いて重力によりろ液
として集めた０種々の接触レベルと接触時間での処理の
結果は、 第Ａ表に示す通りであつ た。

１八五 粉末結晶性ゼオライトによる 理のＤＣＰ　　　の サンプル　　　処　　　　理 対照　　　　未処理 Ｉ　Ａ　　　　０．００１％７４０分 ２　Ａ　　　　０．００１％７２０分 ３　Ａ　　　　０．００１％７１０分 ４Ａ　　　　　　　ロ、０１％７４０分５Ａ　　　　　
０．０１％７２０分 ６Ａ　　　　　　０．０１％７１０分 ７Ａ　　　　０．１％７４０分 ８Ａ　　　　０．１％７２０分 ９Ａ　　　　０．１％７１０分 １０Ａ　　　１．０％７４０分 １１Ａ　　　１．０％７２０分 １２Ａ　　　１．０％７１０分 ＤＣＰ 　９６ ０６ ７８ ４５ ７７ １２ ４９ ２９ ０６ ９６ ７２ ５４ ６４ １３Ａ　　　１．０％／６０分　　　２５２１４Ａ　　
０１００１％７２６分　　　２３９１５Ａ　　　０．０
０１％／６０分　　　２９４１６Ａ　　　０．１％／２
０分　　　２２３１７Ａ　　　　０．１％／１２０分　
　　　　　２４８１８　Ａ　　　　０．００１％７１６
時間　　　２８６１．９Ａ　　　　０．１％７１６時間
　　　　１８１上記結果から明らかなように、ＤＣＰの
除去に関しては、有意の活性度は認められない、接触レ
ベルに関しても有意な相違は認められず、実際の接触時
間ではＤＣＰのご（わずかな、おそらく静的には意味の
ない（約５％）減少が認められたに過ぎない、接触時間
を長くしたところ、わずかな、静的には意味のないＤＣ
Ｐの減少が認められている。

宜ＩＬ旦 ６５．７ｐｐｍの３−クロロ−１，２−プロパンジオー
ルを含むＨＣＧのサンプルを、床を深さが２０ｃｍで直
径が１．５ｃｍのカラムに包含させ、かつ、ＨＣＧを１
．０リットル／時の流量で供給した点を除いて、実施例
３に従って処理した。３−クロロ−１，２−プロパンジ
オールの濃度は、４５．９ｐｐｍに低下し、減少率は約
３０％であった。ＨＣＧ床中の３−クロロ−１，２−プ
ロパンジオールの濃度が著しく高かったことおよびカラ
ムのサイズが小さかったことにより床は飽和に達したた
めに、わずか３０％の減少にとどまったものと考えられ
る。典型的なレベルの３−クロロ−１，２−プロパンジ
オール（例えば、約１乃至２ｐｐｍ）を有するＨＣＧで
あれば、減少率は遥かに大きく、従って、３−クロロ−
１，２−プロパンジオールをより有効に減少させること
ができるものと認められる。

Claims (10)

【特許請求の範囲】
1. （１）約５０ｐｐｂよりも大きいクロロヒドリン濃度を
   有する加水分解された蛋白質の水性混合物を結晶性ゼオ
   ライト凝集体と接触させて前記水性混合物中のクロロヒ
   ドリンの量を減少させることを特徴とする加水分解蛋白
   質の精製方法。
2. （２）前記結晶性ゼオライト凝集体は約１００マイクロ
   メートルよりも大きい粒度を有することを特徴とする請
   求項１に記載の方法。
3. （３）前記結晶性ゼオライト凝集体はゼオライト粒体、
   ゼオライトペレットおよびゼオライトビーズよりなる群
   から選ばれることを特徴とする請求項１に記載の方法。
4. （４）前記結晶性ゼオライト凝集体はタイプＡゼオライ
   トであることを特徴とする請求項１に記載の方法。
5. （５）前記ゼオライトはタイプ８２Ａであることを特徴
   とする請求項４に記載の方法。
6. （６）前記接触はクロロヒドリン濃度を約５０ｐｐｂよ
   りも大きくない濃度まで低下させるのに充分な接触時間
   と接触レベルで行なわれることを特徴とする請求項１に
   記載の方法。
7. （７）前記接触は約１０秒乃至約１，０００秒の接触時
   間と、約０．０１％乃至約１０％の接触レベルで行なわ
   れることを特徴とする請求項１に記載の方法。
8. （８）前記加水分解された蛋白質は前記接触前に約１０
   ０ｐｐｂ乃至１，０００ｐｐｂのクロロヒドリンを含有
   し、しかも前記接触は前記接触後のクロロヒドリンのレ
   ベルを約５０ｐｐｂよりも大きくないレベルまで低下さ
   せるの充分な接触レベルとかつ接触時間で行なわれるこ
   とを特徴とする請求項１に記載の方法。
9. （９）前記加水分解された蛋白質を前記ゼオライトから
   取出し、前記ゼオライトを水混和性の有機溶媒からなる
   脱離剤と接触させてクロロヒドリンを前記ゼオライトか
   ら除去し、次に、前記ゼオライトからの水混和性有機溶
   媒を水で洗浄することを特徴とする請求項１に記載の方
   法。
10. （１０）塩化物とグリセロールおよびその先駆物質より
    なる群から選ばれる物質とを含む水性媒体において酸性
    ｐＨで蛋白質を加水分解し、 前記加水分解後に前記水性媒体を結晶性ゼオライト凝集
    体と接触させることを特徴とする食品成分として有用な
    加水分解蛋白質の製造方法。