JPH04158794A - 多糖類の抽出方法 - Google Patents
多糖類の抽出方法Info
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- JPH04158794A JPH04158794A JP28646190A JP28646190A JPH04158794A JP H04158794 A JPH04158794 A JP H04158794A JP 28646190 A JP28646190 A JP 28646190A JP 28646190 A JP28646190 A JP 28646190A JP H04158794 A JPH04158794 A JP H04158794A
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Abstract
(57)【要約】本公報は電子出願前の出願データであるた
め要約のデータは記録されません。
め要約のデータは記録されません。
Description
【発明の詳細な説明】
〔産業上の利用分野〕
本発明は多１１１の抽出方法に関し、さらに詳しくは強
酸または強アルカリを使用せずに微細藻体から多糖類を
抽出することができる多糖類の抽出方法に関する。
酸または強アルカリを使用せずに微細藻体から多糖類を
抽出することができる多糖類の抽出方法に関する。
従来、微細藻体から多糖類を抽出する方法として、強酸
や強アルカリを使用する方法が知られている（特開昭５
８−２０１９９３号公報）。しかしながら、この方法で
回収される多Ｉ！類は、強酸や強アルカリで加水分解を
受けて分子の一部が低分子化するという問題があった。
や強アルカリを使用する方法が知られている（特開昭５
８−２０１９９３号公報）。しかしながら、この方法で
回収される多Ｉ！類は、強酸や強アルカリで加水分解を
受けて分子の一部が低分子化するという問題があった。
またアルカリ処理中には硫酸基等の官能基が脱離したり
、アンヒドロ結合を形成するおそれがあった。
、アンヒドロ結合を形成するおそれがあった。
本発明の目的は、前記従来技術の問題を解決し、強酸や
強アルカリを使用せずに微細藻体がら多糖類を抽出する
ことができる多＊類の抽出方法を提供することにある。
強アルカリを使用せずに微細藻体がら多糖類を抽出する
ことができる多＊類の抽出方法を提供することにある。
本発明は、藻培養液中の湿藻体から多糖類を抽出するに
際し、上記湿藻体の細胞を破壊した後、タンパク質分解
酵素および／または脂肪酸エステル分解酵素により酵素
反応を行うことを特徴とする多ＩＩ類の抽出方法に関す
る。
際し、上記湿藻体の細胞を破壊した後、タンパク質分解
酵素および／または脂肪酸エステル分解酵素により酵素
反応を行うことを特徴とする多ＩＩ類の抽出方法に関す
る。
本発明に用いられる微細藻体には特に制限はないが、紅
藻類に属するボルフイリジウム・クルエンツム（Ｐｏｒ
ｐｈｙｒｉｄｉｕｍ ｃｒｕｅｎｔｕｍ海産性）、ポル
フィルシウム・アイロギニュウム（Ｐｏｒｐｈｙｒｉｄ
ｉｕｍａｅｒｕｇｉｎｅｕｍ淡水性）などが多ｖＭ類を
多く含むために好ましい。これらの微細藻体は、通常、
公知の方法で培養して用いられる。
藻類に属するボルフイリジウム・クルエンツム（Ｐｏｒ
ｐｈｙｒｉｄｉｕｍ ｃｒｕｅｎｔｕｍ海産性）、ポル
フィルシウム・アイロギニュウム（Ｐｏｒｐｈｙｒｉｄ
ｉｕｍａｅｒｕｇｉｎｅｕｍ淡水性）などが多ｖＭ類を
多く含むために好ましい。これらの微細藻体は、通常、
公知の方法で培養して用いられる。
本発明に用いられるタンパク質分解酵素としては、例え
ば、中性または弱アルカリ性のエンド型またはエキソ型
プロテアーゼの混合酵素剤である、パパイン、プロテア
ーゼＮ「アマノ」 （大野製薬社製商品名）などが挙げ
られる。
ば、中性または弱アルカリ性のエンド型またはエキソ型
プロテアーゼの混合酵素剤である、パパイン、プロテア
ーゼＮ「アマノ」 （大野製薬社製商品名）などが挙げ
られる。
本発明に用いられる脂肪酸エステル分解酵素としては、
α位またはβ位の脂肪酸を分解するリパーゼ、バクレア
チンなどが挙げられる。
α位またはβ位の脂肪酸を分解するリパーゼ、バクレア
チンなどが挙げられる。
藻培養液から多ＩＩを抽出するには、例えば次のように
して行うことができる。
して行うことができる。
まず、藻培養液を遠心分離、濾過等の固液分離操作によ
り上清と湿藻体に分ける。
り上清と湿藻体に分ける。
得られた湿藻体を密閉容器に入れて５〜７倍容の水を加
えた後、加熱および／またはホモジナイザー、ボールミ
ル等により細胞破壊を行う。細胞破壊の方法は藻体の状
態によって適宜選択されるが、細胞内の色素タンパクを
変性し、後述する酵素反応を容易にするためには加熱す
るのが好ましい。しかし、高温で長時間細胞破壊を行う
と細胞内の多糖類が分解されて低分子化するおそれがあ
るため、７０〜１２０ ’Ｃの温度で１０分〜６０分間
程度で行うことが好ましく、より好ましくは１２０°Ｃ
で１０分ないしは７０°Ｃで３０分加熱を行う。加熱の
前後にホモジナイザー、ボールミル等で充分破壊するの
がさらに好ましい。
えた後、加熱および／またはホモジナイザー、ボールミ
ル等により細胞破壊を行う。細胞破壊の方法は藻体の状
態によって適宜選択されるが、細胞内の色素タンパクを
変性し、後述する酵素反応を容易にするためには加熱す
るのが好ましい。しかし、高温で長時間細胞破壊を行う
と細胞内の多糖類が分解されて低分子化するおそれがあ
るため、７０〜１２０ ’Ｃの温度で１０分〜６０分間
程度で行うことが好ましく、より好ましくは１２０°Ｃ
で１０分ないしは７０°Ｃで３０分加熱を行う。加熱の
前後にホモジナイザー、ボールミル等で充分破壊するの
がさらに好ましい。
次に破壊された細胞にタンパク質分解酵素および／また
は脂肪酸エステル分解酵素を添加して酵素反応を行う。
は脂肪酸エステル分解酵素を添加して酵素反応を行う。
タンパク質分解酵素と脂肪酸エステル分解酵素は単独で
用いても、併用して用いてもよい。併用する場合には別
々に添加しても同時に添加してもよい。湿藻体１００−
に対する添加量は、タンパク質分解酵素では通常１０，
０００〜５０，０ＯＯＵ（ユニット）であり、脂肪酸エ
ステル分解酵素では通常７，５００〜３０．０００Ｕで
ある。酵素反応は、通常３０〜８０’Ｃ１より好ましく
は４０〜６０°Ｃの温度で、攪拌または振とうを行いな
がら３０分〜２４時間程度行う。
用いても、併用して用いてもよい。併用する場合には別
々に添加しても同時に添加してもよい。湿藻体１００−
に対する添加量は、タンパク質分解酵素では通常１０，
０００〜５０，０ＯＯＵ（ユニット）であり、脂肪酸エ
ステル分解酵素では通常７，５００〜３０．０００Ｕで
ある。酵素反応は、通常３０〜８０’Ｃ１より好ましく
は４０〜６０°Ｃの温度で、攪拌または振とうを行いな
がら３０分〜２４時間程度行う。
酵素反応終了後、水混和性有機溶媒を反応物の２〜３倍
容になるまで加え、多Ｍ類を浮遊物として析出させる。
容になるまで加え、多Ｍ類を浮遊物として析出させる。
水混和性有機溶媒としては、エタノール、イソプロパツ
ール等のアルコールなどが用いられる。浮遊物の回収は
濾過等の手段により行う。浮遊物を回収した後、必要に
応して水への再溶解工程および水混和性有機溶媒による
浮遊物の回収工程を数回繰り返し、多糖類の精製を行う
。
ール等のアルコールなどが用いられる。浮遊物の回収は
濾過等の手段により行う。浮遊物を回収した後、必要に
応して水への再溶解工程および水混和性有機溶媒による
浮遊物の回収工程を数回繰り返し、多糖類の精製を行う
。
さらに必要に応して透析等による脱塩を行った後、乾燥
する。乾燥は、通常の真空乾燥、スプレー乾燥、凍結乾
燥等の方法により行う。
する。乾燥は、通常の真空乾燥、スプレー乾燥、凍結乾
燥等の方法により行う。
本発明の方法により得られる多糖類は、強酸および強ア
ルカリを使用しないため、多糖の分子が壊されることが
なく、高分子量の多糖を多く含む。
ルカリを使用しないため、多糖の分子が壊されることが
なく、高分子量の多糖を多く含む。
この高分子量の多糖を多く含む多糖類は、流体摩擦の抵
抗低減効果に優れ、種々の流体摩擦低減剤として有用で
ある。
抗低減効果に優れ、種々の流体摩擦低減剤として有用で
ある。
以下、本発明を実施例により詳しく説明する。
実施例１
微小藻体（ポリフイリジウム・タルエンツム）を、培地
としてＡＳＷを使用し、光源としてハロゲンランプを使
用して５〜１０ｋｐ！、ｘの光を照射し、２５°Ｃにお
いて、約２週間、ＣＯ□５％を含む空気を通気しながら
培養を行い、藻培養液を得た。
としてＡＳＷを使用し、光源としてハロゲンランプを使
用して５〜１０ｋｐ！、ｘの光を照射し、２５°Ｃにお
いて、約２週間、ＣＯ□５％を含む空気を通気しながら
培養を行い、藻培養液を得た。
得られた藻培養液を遠心分離にかけ、上清と湿藻体に分
離した。湿藻体（固形分１３重量％）ｌ廟に対し、蒸留
水５ｒを加えて１０．ＯＯＯｒｐｍで５分間ホモジナイ
ズした。次にこれを８０゛ｃで１０分間加熱した後、４
０°Ｃに冷却し、タンパク質分解酵素であるパパイン（
大野製薬社製）を１３ｇ加え、５０°Ｃで２４時間酵素
反応を行った。
離した。湿藻体（固形分１３重量％）ｌ廟に対し、蒸留
水５ｒを加えて１０．ＯＯＯｒｐｍで５分間ホモジナイ
ズした。次にこれを８０゛ｃで１０分間加熱した後、４
０°Ｃに冷却し、タンパク質分解酵素であるパパイン（
大野製薬社製）を１３ｇ加え、５０°Ｃで２４時間酵素
反応を行った。
反応終了後、エタノールを等量加え、浮遊する多Ｗ類を
ナイロンメツシュで濾過し、水およびエタノールを除去
した。得られた多ＩＩＩを再び蒸留水５１に溶解させ、
パパインを１３ｇｊＪＯえ、５０°Ｃで２４時間酵素反
応を充分に行った。その後、エタノールを等量加えて浮
遊する多Ｗ、類を回収した。
ナイロンメツシュで濾過し、水およびエタノールを除去
した。得られた多ＩＩＩを再び蒸留水５１に溶解させ、
パパインを１３ｇｊＪＯえ、５０°Ｃで２４時間酵素反
応を充分に行った。その後、エタノールを等量加えて浮
遊する多Ｗ、類を回収した。
この多＃Ｍ類をエタノールで充分洗浄し、真空乾燥法で
乾燥した。
乾燥した。
得られた多ＩＩの分子量分布を、ＧＰＣ（ｇｅｌｐｅｒ
ｍｅａｔｉｏｎ ｃｈｒｏｍａｔｏｈｒａｐｈｙ）を用
いて測定し、結果を第１図に示した。
ｍｅａｔｉｏｎ ｃｈｒｏｍａｔｏｈｒａｐｈｙ）を用
いて測定し、結果を第１図に示した。
比較例Ｉ
藻体を含む培養液にＮａ ＯＨを加えてｐＨ１０〜１２
に調整し、１００°Ｃで１〜２時間加熱した。
に調整し、１００°Ｃで１〜２時間加熱した。
これを室温まで冷却した後、ＨＣＩを加えてｐＨ２〜４
に調整し、エタノールを２〜３倍容加え、浮遊した多糖
を回収した。回収した多糖を２ＭのＣａＣｌ２を含む蒸
留水に溶解させた。その後、９０°Ｃで多糖が完全に溶
解するまで攪拌し、溶解したら、３５°Ｃまで冷却し、
これにさらにエタノールを２〜３倍容加えて多１！類を
回収し、４０°Ｃで真空乾燥させた。
に調整し、エタノールを２〜３倍容加え、浮遊した多糖
を回収した。回収した多糖を２ＭのＣａＣｌ２を含む蒸
留水に溶解させた。その後、９０°Ｃで多糖が完全に溶
解するまで攪拌し、溶解したら、３５°Ｃまで冷却し、
これにさらにエタノールを２〜３倍容加えて多１！類を
回収し、４０°Ｃで真空乾燥させた。
得られた多糖類の分子量分布を実施例１と同様にして測
定し、その結果を第３図に示した。
定し、その結果を第３図に示した。
第１図と第３図の比較から、本発明の方法で得られた多
糖類は、酸・アルカリ処理による場合よりも、高分子量
の多糖を多く含むことがわかった。
糖類は、酸・アルカリ処理による場合よりも、高分子量
の多糖を多く含むことがわかった。
実施例２
実施例１で用いた藻培養液を遠心分離にかけて上清と湿
藻体に分離した。得られた湿藻体１ｋｇ’こ対して蒸留
水３βを加え、１００°Ｃで３０分間加熱した。加熱後
、蒸留水を３１加え、さらにプロテアーゼＮ「アマノ」
（大野製薬社製商品名）２５ｇを加えて４０゛Ｃで２
４時間酵素反応を行った。
藻体に分離した。得られた湿藻体１ｋｇ’こ対して蒸留
水３βを加え、１００°Ｃで３０分間加熱した。加熱後
、蒸留水を３１加え、さらにプロテアーゼＮ「アマノ」
（大野製薬社製商品名）２５ｇを加えて４０゛Ｃで２
４時間酵素反応を行った。
反応後、エタノール７１を加えて浮遊する多糖類を濾過
により回収した。この多糖類を再び蒸留水に溶解し、プ
ロテアーゼＮ「アマノ」を２５ｇを加えて２４時間酵素
反応を充分に行った。その後、エタノールを加えて多糖
類を浮遊させ、濾過により回収した。この多糖類を蒸留
水に再溶解し、水に対して４°Ｃにおいて４８時間透析
を行い、その後凍結乾燥させた。
により回収した。この多糖類を再び蒸留水に溶解し、プ
ロテアーゼＮ「アマノ」を２５ｇを加えて２４時間酵素
反応を充分に行った。その後、エタノールを加えて多糖
類を浮遊させ、濾過により回収した。この多糖類を蒸留
水に再溶解し、水に対して４°Ｃにおいて４８時間透析
を行い、その後凍結乾燥させた。
得られた多糖類の分子量分布を実施例１と同様にして測
定したが、本発明の方法で得られた多糖類は、比較例１
と比較して高分子量の多糖を多く含むことがわかった。
定したが、本発明の方法で得られた多糖類は、比較例１
と比較して高分子量の多糖を多く含むことがわかった。
実施例３
実施例１で用いた藻培養液を遠心分離にかけて上清と湿
藻体に分離した。湿藻体１ ｋ、ｇに対し、蒸留水５ｒ
を加えて１０．ＯＯＯｒｐｍで５分間ホモジナイズし、
その後、８０ ”Ｃで１０分間加熱した。これを２０°
Ｃに冷却した後、リパーゼ（天野製薬社製）を３５ｇ加
え、３０″Ｃで２４時間反応させた。反応終了後、エタ
ノールを等量加えて浮遊する多１ｍをナイロンメツシュ
で濾過し、水およびエタノールを除去した。得られた多
糖類を再び水５ｒに充分溶解させた後、パパイン１３ｇ
を加え、５０″Ｃで２４時間酵素反応を充分に行い、エ
タノールを等量加えて浮遊する多糖類を回収した。これ
をエタノールで充分に洗浄し、室温で真空乾燥した。
藻体に分離した。湿藻体１ ｋ、ｇに対し、蒸留水５ｒ
を加えて１０．ＯＯＯｒｐｍで５分間ホモジナイズし、
その後、８０ ”Ｃで１０分間加熱した。これを２０°
Ｃに冷却した後、リパーゼ（天野製薬社製）を３５ｇ加
え、３０″Ｃで２４時間反応させた。反応終了後、エタ
ノールを等量加えて浮遊する多１ｍをナイロンメツシュ
で濾過し、水およびエタノールを除去した。得られた多
糖類を再び水５ｒに充分溶解させた後、パパイン１３ｇ
を加え、５０″Ｃで２４時間酵素反応を充分に行い、エ
タノールを等量加えて浮遊する多糖類を回収した。これ
をエタノールで充分に洗浄し、室温で真空乾燥した。
得られた多糖類の分子量分布を実施例１と同様に測定し
、結果を第２図に示したが、本発明の方法で得られた多
糖類は、比較例１と比較して高分子量の多糖を多く含む
ことがわかった。
、結果を第２図に示したが、本発明の方法で得られた多
糖類は、比較例１と比較して高分子量の多糖を多く含む
ことがわかった。
実施例４
実施例１で用いた藻培養液を遠心分離にかけて上清と湿
藻体に分離した。湿藻体１ｋｇに対し、蒸留水２１を加
え、８０°Ｃで２０分間加熱を行った。
藻体に分離した。湿藻体１ｋｇに対し、蒸留水２１を加
え、８０°Ｃで２０分間加熱を行った。
その後、７０００ｒｐｍで５分間ホモジナイズし、蒸留
水２ｐを加えて攪拌した。３０’Ｃに冷却させた後、バ
ンクレアチン（天野製薬社製）５０ｇを加えて４０°Ｃ
で２４時間反応を行った。反応紡了後、等量のエタノー
ルを加えて浮遊する多ｔｌＴをナイロンメツシュでｔ７
．遇し、水とエタノールを除去した。回収した多糖類Ｑ
こさらにＴ留水５ｒを加えて溶解し、パンクレアチン５
０ｇ’ｕｌｌえ、４０°Ｃ２４時間反応を行った。再び
エタノールを等量加えて多糖類を回収し、水に対して透
析を４°Ｃで４８時間行った後、凍結乾燥した。
水２ｐを加えて攪拌した。３０’Ｃに冷却させた後、バ
ンクレアチン（天野製薬社製）５０ｇを加えて４０°Ｃ
で２４時間反応を行った。反応紡了後、等量のエタノー
ルを加えて浮遊する多ｔｌＴをナイロンメツシュでｔ７
．遇し、水とエタノールを除去した。回収した多糖類Ｑ
こさらにＴ留水５ｒを加えて溶解し、パンクレアチン５
０ｇ’ｕｌｌえ、４０°Ｃ２４時間反応を行った。再び
エタノールを等量加えて多糖類を回収し、水に対して透
析を４°Ｃで４８時間行った後、凍結乾燥した。
得られた多糖類を実施例１と同様にして分子量分布を測
定したが、本発明の方法で得られた多糖類は、比較例１
と比較して高分子量の多糖を多く含むことがわかった。
定したが、本発明の方法で得られた多糖類は、比較例１
と比較して高分子量の多糖を多く含むことがわかった。
［発明の効果〕
本発明の抽出方法によれば、強酸や強アルカリを使用し
ないため、多ＩＩの分子を損なうことなく、高分子量の
多糖を多く含む多糖類を回収することができる。この高
分子量の多糖を多く含む多ｉ類は流体摩擦低減効果に優
れるため、種りの流体摩擦低減剤として有用である。
ないため、多ＩＩの分子を損なうことなく、高分子量の
多糖を多く含む多糖類を回収することができる。この高
分子量の多糖を多く含む多ｉ類は流体摩擦低減効果に優
れるため、種りの流体摩擦低減剤として有用である。
第１図は、プロテアーゼで酵素処理して得られた多ＩＲ
類の分子量分布曲線、第２図は、リパーゼとプロテアー
ゼで酵素処理して得られた多糖類の分子量分布曲線、第
３図は、酸およびアルカリ処理して得られた多ＩＲ類の
分子量分布曲線である。
類の分子量分布曲線、第２図は、リパーゼとプロテアー
ゼで酵素処理して得られた多糖類の分子量分布曲線、第
３図は、酸およびアルカリ処理して得られた多ＩＲ類の
分子量分布曲線である。
Claims (1)
- （１）藻培養液中の湿藻体から多糖類を抽出するに際し
、上記湿藻体の細胞を破壊した後、タンパク質分解酵素
および／または脂肪酸エステル分解酵素により酵素反応
を行うことを特徴とする多糖類の抽出方法。
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP28646190A JPH074266B2 (ja) | 1990-10-24 | 1990-10-24 | 多糖類の抽出方法 |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP28646190A JPH074266B2 (ja) | 1990-10-24 | 1990-10-24 | 多糖類の抽出方法 |
Publications (2)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| JPH04158794A true JPH04158794A (ja) | 1992-06-01 |
| JPH074266B2 JPH074266B2 (ja) | 1995-01-25 |
Family
ID=17704693
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| JP28646190A Expired - Lifetime JPH074266B2 (ja) | 1990-10-24 | 1990-10-24 | 多糖類の抽出方法 |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| JP (1) | JPH074266B2 (ja) |
Cited By (1)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| KR100810135B1 (ko) * | 2006-09-08 | 2008-03-06 | (주)완도해조생약마을 | 김 또는 파래의 효소분해액을 제조하는 방법 |
Families Citing this family (1)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN104938762A (zh) * | 2015-02-12 | 2015-09-30 | 南昌大学 | 一种发酵用浮萍蛋白粉的制备方法 |
-
1990
- 1990-10-24 JP JP28646190A patent/JPH074266B2/ja not_active Expired - Lifetime
Cited By (1)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| KR100810135B1 (ko) * | 2006-09-08 | 2008-03-06 | (주)완도해조생약마을 | 김 또는 파래의 효소분해액을 제조하는 방법 |
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
| JPH074266B2 (ja) | 1995-01-25 |
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