JPH04207195A - ウイルスの核酸成分採取方法及びウイルス検査法 - Google Patents
ウイルスの核酸成分採取方法及びウイルス検査法Info
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- JPH04207195A JPH04207195A JP2341083A JP34108390A JPH04207195A JP H04207195 A JPH04207195 A JP H04207195A JP 2341083 A JP2341083 A JP 2341083A JP 34108390 A JP34108390 A JP 34108390A JP H04207195 A JPH04207195 A JP H04207195A
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Abstract
(57)【要約】本公報は電子出願前の出願データであるた
め要約のデータは記録されません。
め要約のデータは記録されません。
Description
【発明の詳細な説明】
〈産業上の利用分野〉
本発明は、ウィルスを含む懸濁液からウィルスの核酸成
分を採取する方法及びその方法を用いたウィルス検査法
に関する。
分を採取する方法及びその方法を用いたウィルス検査法
に関する。
〈従来の技術〉
（ウィルスの核酸成分の採取） 通常のウィルスの核酸
成分採収法では、ウィルスを含む検体を溶液中でプロテ
ネースにのような酵素、あるいはドデシル硫酸ナトリウ
ムのような界面活性剤、あるいは水酸化ナトリウムのよ
うな７μカリを用いて溶解させたり、超音波、凍結融解
、あるいはミルのような物理的破砕方法でウィルスを含
んだ細胞とウィルスを破砕したりすることでまず粗精製
品を得る。その後、フェノール・クロロホルム抽出。
成分採収法では、ウィルスを含む検体を溶液中でプロテ
ネースにのような酵素、あるいはドデシル硫酸ナトリウ
ムのような界面活性剤、あるいは水酸化ナトリウムのよ
うな７μカリを用いて溶解させたり、超音波、凍結融解
、あるいはミルのような物理的破砕方法でウィルスを含
んだ細胞とウィルスを破砕したりすることでまず粗精製
品を得る。その後、フェノール・クロロホルム抽出。
エタノ−μ沈澱処理を施しＤＮＡのｆｉｔ＋製品を簿る
。
。
（ウィルス検査） また従来のウィルス同定について、
直接的に病原微生物を検出する方法としては、■標的ウ
ィルスの生育し易い培養細胞に、なるべく無菌的に検体
から回収したウィルス全感染させ、細胞病変効果（ｃｙ
ｔｏｐａｔｈｉｃ ｅｆｆｓｃｔ、 ＣＰＥ ）または
ブランクを検出する組織培養法、■乳呑みマウスなどの
動物に検体から回収しｔウィルス全感染させ、臨床変化
音検出する動物接種試験法、■ふ化鶏卵に検体から回収
したウィルス全接種して病変効果を検出するふ化鶏卵接
種法、■あるいけウィルスに固有の抗体をラテックス凝
集法に固定しこれを前記試料中に添加しビーズ表面の抗
体が菌体？認識することによりビーズが凝集すること金
利用するラテックス凝集法、■ポリエチレン製プレート
ビーズに１次抗体を結合させこれにウィルスを作用させ
抗原−抗体反応により結合するものとしないものと七よ
り分けさらに酵素や螢光物質により標識された２次抗体
を作用させＢ／Ｆ ’Ｗ離後後酵素活性螢光強度を測定
することで同定するサンドイッチ抗体法、■ウィルスの
核酸成分をメンブランフィルタ−に転写し特異的なりＮ
Ａ断片に酵素や放射活性物Ｗなどを標識したＤ Ｎ Ａ
プローブを作用させて遺伝子レベルで検出するＤＮＡプ
。−ブ法がある。この方法はコロニー中のＤＮＡ中にＤ
ＮＡプローブと相補的′ｌｘ塩基配列があると両者の間
に水素結合が生じることを利用して目的のウィルス等を
検出する方法である。
直接的に病原微生物を検出する方法としては、■標的ウ
ィルスの生育し易い培養細胞に、なるべく無菌的に検体
から回収したウィルス全感染させ、細胞病変効果（ｃｙ
ｔｏｐａｔｈｉｃ ｅｆｆｓｃｔ、 ＣＰＥ ）または
ブランクを検出する組織培養法、■乳呑みマウスなどの
動物に検体から回収しｔウィルス全感染させ、臨床変化
音検出する動物接種試験法、■ふ化鶏卵に検体から回収
したウィルス全接種して病変効果を検出するふ化鶏卵接
種法、■あるいけウィルスに固有の抗体をラテックス凝
集法に固定しこれを前記試料中に添加しビーズ表面の抗
体が菌体？認識することによりビーズが凝集すること金
利用するラテックス凝集法、■ポリエチレン製プレート
ビーズに１次抗体を結合させこれにウィルスを作用させ
抗原−抗体反応により結合するものとしないものと七よ
り分けさらに酵素や螢光物質により標識された２次抗体
を作用させＢ／Ｆ ’Ｗ離後後酵素活性螢光強度を測定
することで同定するサンドイッチ抗体法、■ウィルスの
核酸成分をメンブランフィルタ−に転写し特異的なりＮ
Ａ断片に酵素や放射活性物Ｗなどを標識したＤ Ｎ Ａ
プローブを作用させて遺伝子レベルで検出するＤＮＡプ
。−ブ法がある。この方法はコロニー中のＤＮＡ中にＤ
ＮＡプローブと相補的′ｌｘ塩基配列があると両者の間
に水素結合が生じることを利用して目的のウィルス等を
検出する方法である。
直接的に病原微生物全検出しない方法として）グ。
感染直後と感染から数週間後に患者または感染動物から
採血し、血清中の抗体価の増＃をみる方法が一般に行わ
れている。
採血し、血清中の抗体価の増＃をみる方法が一般に行わ
れている。
〈発明が解決しようとする課題〉
前記従来の方法ではＣＰＥ 、−！たけプラックを検出
するのに、−週間以上の培養を必要とし、−般継代細胞
においては、６５から７５％の血清型のウィルスしか成
育できないことから・あまり有用とは言えない。乳呑み
マウスに接種する方法の場合は、その他多くの血清型の
ウィルスを増殖させることができるが１時間がかかり１
手間がかかることから、必ずしも広く利用されていない
のが爽秋である・ 免疫学的検定法や、血清学的技術も、血清形量に抗原的
多用性があることから、十分なものとは言えない。
するのに、−週間以上の培養を必要とし、−般継代細胞
においては、６５から７５％の血清型のウィルスしか成
育できないことから・あまり有用とは言えない。乳呑み
マウスに接種する方法の場合は、その他多くの血清型の
ウィルスを増殖させることができるが１時間がかかり１
手間がかかることから、必ずしも広く利用されていない
のが爽秋である・ 免疫学的検定法や、血清学的技術も、血清形量に抗原的
多用性があることから、十分なものとは言えない。
核酸へイブリダイセーションを行うアプローチは、たく
さんの異なった血清形のウィルスを識別することができ
１組織培養法に比べてはるかに短時間で検出できるので
、きわめて将来性がある。
さんの異なった血清形のウィルスを識別することができ
１組織培養法に比べてはるかに短時間で検出できるので
、きわめて将来性がある。
しかし、検体からのウィルスの核酸の抽出方法が煩雑な
ため、まだ広く使われるには至っていない。
ため、まだ広く使われるには至っていない。
本発明の第一の目的は、自動化が可能で迅速かつ簡便に
試料懸濁液からウィルスの核酸成分を得ることができる
方法を提供することにある。本発明の第二の目的は、前
述の方法を用いて簡便に同定し得るウィルス検査方法？
提供することにある。
試料懸濁液からウィルスの核酸成分を得ることができる
方法を提供することにある。本発明の第二の目的は、前
述の方法を用いて簡便に同定し得るウィルス検査方法？
提供することにある。
く課題を解決するための手段〉
（１）第１の発明に係るウィルスの核酸成分採取方法は
、ウィルスを含む懸濁液からウィルスの核酸成分を採取
する方法である。
、ウィルスを含む懸濁液からウィルスの核酸成分を採取
する方法である。
この方法は、懸濁液中にウィルス吸着中Ｆ４”ｃ加えて
ウィルスを樹脂上に捕捉することと。
ウィルスを樹脂上に捕捉することと。
フィルターによって前記樹脂をフィルター上に分離する
ことと。
ことと。
前記フィルターにウィルス溶解剤を流通させて。
ウィルスの核酸成５ｆヲ含む液を得ることと・全含んで
いる。
いる。
（２）第２の発明に係るウィルス検査方法は、第１の発
明による方法で得られたウィルスの核酸成分を含むｌ？
ｉ−、ＰＣＲ法（Ｐｏｌｙｍｅｒａｓｅ Ｃｈａｉｎ
Ｒｅａｃｔｉｏｎ法）に付して、所望のウィルスのＤＮ
Ａを増幅することと。
明による方法で得られたウィルスの核酸成分を含むｌ？
ｉ−、ＰＣＲ法（Ｐｏｌｙｍｅｒａｓｅ Ｃｈａｉｎ
Ｒｅａｃｔｉｏｎ法）に付して、所望のウィルスのＤＮ
Ａを増幅することと。
前記項部したＤＮＡを用いて、前記懸濁液中の所望のＤ
ＮＡウィルスの有無を検査することと。
ＮＡウィルスの有無を検査することと。
を含んでいる。
なお、第２の発明に汀、第１の方法で得られたＲＮＡウ
イ〃スの核酸成分を含む液を逆転写酵素の反応に付して
コンプリメンタリ−ＤＮＡを作製することと。
イ〃スの核酸成分を含む液を逆転写酵素の反応に付して
コンプリメンタリ−ＤＮＡを作製することと。
前記ＤＮＡをＰＣＲ法に付して、所望のウィルスのＲＮ
Ａのコンプリメンタリ−ＤＮ Ａ全増幅することと。
Ａのコンプリメンタリ−ＤＮ Ａ全増幅することと。
前記増幅したＤＮＡを用いて、前記懸濁液中の所望のＲ
ＮＡウィルスの有無を検査することと。
ＮＡウィルスの有無を検査することと。
ケ含んでいる。
〈作用〉
（１）第１の発明に係るウィルスの核酸成分採取方法で
は、ウィルス吸着位１脂を用いることで、ウィルス粒子
よりはるかに大きな粒子としてウィルスを扱うことが出
来るので、操作がしやすく、自動化が可能で迅速かつ簡
便に試料懸濁液からウィルスの該ｆｙ成分？得ることが
できる。
は、ウィルス吸着位１脂を用いることで、ウィルス粒子
よりはるかに大きな粒子としてウィルスを扱うことが出
来るので、操作がしやすく、自動化が可能で迅速かつ簡
便に試料懸濁液からウィルスの該ｆｙ成分？得ることが
できる。
（２）第２の発明に係るウィルス検査方法では、第１の
発明に係る迅速かつ簡便なウィルスの核酸成分採取方法
金床用しているので、ウィルス検査全体としても迅速か
つ簡ｆｉＩ！なものとなる。
発明に係る迅速かつ簡便なウィルスの核酸成分採取方法
金床用しているので、ウィルス検査全体としても迅速か
つ簡ｆｉＩ！なものとなる。
〈実施例〉
まず、本発明に係るウィルスの核酸成分採取方法の一例
を説明する。なお、第１図に本発明の生業工程を示す。
を説明する。なお、第１図に本発明の生業工程を示す。
（試料液の調製ニステップｌ）
ウシ胎児血清１ｍｌに、センダイウィルス（林原生物化
学研究所製）ｌｏ８＠を懸濁させ、試料液金得た。
学研究所製）ｌｏ８＠を懸濁させ、試料液金得た。
（吸着処理ニステップ２．３）
予め水洗したウィルス吸着樹脂ＰＢ−１００（花王製）
ｌｏｍｇ ｋ試料液に加え、これについてシリンジ（
１ｍｌ用２図示せず）で吸引、排出を数回繰り返してウ
ィルス粒子を樹脂に吸着させた。
ｌｏｍｇ ｋ試料液に加え、これについてシリンジ（
１ｍｌ用２図示せず）で吸引、排出を数回繰り返してウ
ィルス粒子を樹脂に吸着させた。
（ウィルス粒子の洗浄、ステップ４〜６）吸着処理後、
試料液を前記ンリンジ内に全量吸い上げた後、シリンジ
の先端に第２図に示すフィルターユニット全装着し、試
料Ｓｔ排出し、フィルター上に樹脂を担持させた。なお
、第２図中。
試料液を前記ンリンジ内に全量吸い上げた後、シリンジ
の先端に第２図に示すフィルターユニット全装着し、試
料Ｓｔ排出し、フィルター上に樹脂を担持させた。なお
、第２図中。
１はフィルターユニットのボディー、２はフィルターを
抑えるパツキン、３はガラス繊維ろ紙ＯＦ’／Ｂ（ワッ
トマン社Ｉｌり、４はガラス＊維ろ紙ＧＦ／Ｆ（同社Ｉ
ＩＩ）でおる。純水１ｍｌをこのシリンジで吸引、排出
しく２度）、ウィルス粒子に付いた血清成分を洗い落と
した。
抑えるパツキン、３はガラス繊維ろ紙ＯＦ’／Ｂ（ワッ
トマン社Ｉｌり、４はガラス＊維ろ紙ＧＦ／Ｆ（同社Ｉ
ＩＩ）でおる。純水１ｍｌをこのシリンジで吸引、排出
しく２度）、ウィルス粒子に付いた血清成分を洗い落と
した。
（ウィルス粒子の溶解：ステクツ゛７）前記シリンジに
界面活性剤（１％ＳＤＳ水溶液２００μｍ）を吸引し、
フィルター二二ツ）内廻ｉ通させた。
界面活性剤（１％ＳＤＳ水溶液２００μｍ）を吸引し、
フィルター二二ツ）内廻ｉ通させた。
（核酸成分の沈澱ニステップ８〜１０）さらに４００μ
ｍのエタノールと２０μｍの３Ｍ酢酸ナトリウム水溶液
の混液４２０μｌ′ｆ！：ｏ’ｃにて前記シリンジに吸
引し、これを排出して、フィルター上に核酸成分を沈澱
の状態で担持した。次いで１ｍｌの７０％エタノール（
０°Ｃ）の吸引・排出。
ｍのエタノールと２０μｍの３Ｍ酢酸ナトリウム水溶液
の混液４２０μｌ′ｆ！：ｏ’ｃにて前記シリンジに吸
引し、これを排出して、フィルター上に核酸成分を沈澱
の状態で担持した。次いで１ｍｌの７０％エタノール（
０°Ｃ）の吸引・排出。
１ｍｌの９０９６エタノールの吸引・排出により、この
核酸成分の沈澱物を洗浄した。
核酸成分の沈澱物を洗浄した。
（核酸成分の溶出ニステップ１１）
次いで０．５ ＊Ｔｗａ＠ｎ２０ 、０．５４Ｎｏｎｉ
ｄｅｔ Ｐ −４０水溶！１００μｍを前記シリンジに
吸引し、フィルターユニット内に流通させ、６０″Ｃで
１０分間インキ−ベート後この液を排出して核酸成分の
溶液を得た。
ｄｅｔ Ｐ −４０水溶！１００μｍを前記シリンジに
吸引し、フィルターユニット内に流通させ、６０″Ｃで
１０分間インキ−ベート後この液を排出して核酸成分の
溶液を得た。
（逆転写反応及びコンプリメンタリ−ＤＮＡの増幅ニス
テップ１２） 上記溶出液′！！１ｌ−３μｍ取り、ＲＮＡの特定の領
域に。
テップ１２） 上記溶出液′！！１ｌ−３μｍ取り、ＲＮＡの特定の領
域に。
ついて相補的なりＮＡを合成する逆転写反応と。
特異的に目的ＤＮＡｆ増幅する方法であるＰＣＲ法（５
ａｉｋｉ、Ｒ，に、ｅｔ ａｌ、５ｃｉｅｎｃｅ ２３
９４８７−４９１（１９８８））を行った。
ａｉｋｉ、Ｒ，に、ｅｔ ａｌ、５ｃｉｅｎｃｅ ２３
９４８７−４９１（１９８８））を行った。
すなわち、蒸留水１２．２μｍ、１ライマ一２５μｍ（
２０μＭ ） ２ 櫟、 ｄＮＴＰ４．８μｌ （１，
２５ｍＭ各ｄＮＴＰ）。
２０μＭ ） ２ 櫟、 ｄＮＴＰ４．８μｌ （１，
２５ｍＭ各ｄＮＴＰ）。
リバ〜ストランスクリフ゛テース０，５μ＋（２００ユ
ニット／ｍｌ ； ＢＲＬ製） 、 ＲＮａｓｉｎ ｌ
μＩ （４０−Ｌ ＝ ７ト／ｍ’ ； ＴＯＹＯＢ
Ｏ製） 、０．５９６Ｎｏｎ＋ｄｅｔ Ｐ−４０゜０
．５μｌｗｅｅｎ２０水溶２３μ１．１０倍ｍ東液３μ
ｍ（パーキンエルマーシータス社％）、Ｔａｑポリメラ
ーゼ１５ユニット（同社製）、■合計３０μｍにミネラ
ル油５０μｍを蒸発防止剤として重層して・ＤＮＡ Ｔ
ｈｅｒｍａｌ （：ｙｃｌｅｒ （同社製）にセットし
たつここで言うプライマーとは、２０塩基対のオリゴヌ
クレオチドである。また、ここで言う１０倍緩衝液とは
１００ｍＭ）リスｑ酸緩衝Ｈ（ｐＨ９，０） 。
ニット／ｍｌ ； ＢＲＬ製） 、 ＲＮａｓｉｎ ｌ
μＩ （４０−Ｌ ＝ ７ト／ｍ’ ； ＴＯＹＯＢ
Ｏ製） 、０．５９６Ｎｏｎ＋ｄｅｔ Ｐ−４０゜０
．５μｌｗｅｅｎ２０水溶２３μ１．１０倍ｍ東液３μ
ｍ（パーキンエルマーシータス社％）、Ｔａｑポリメラ
ーゼ１５ユニット（同社製）、■合計３０μｍにミネラ
ル油５０μｍを蒸発防止剤として重層して・ＤＮＡ Ｔ
ｈｅｒｍａｌ （：ｙｃｌｅｒ （同社製）にセットし
たつここで言うプライマーとは、２０塩基対のオリゴヌ
クレオチドである。また、ここで言う１０倍緩衝液とは
１００ｍＭ）リスｑ酸緩衝Ｈ（ｐＨ９，０） 。
５００ｍＭＫｔ、：ｌ 、 １５ｔｎＭ ＭｇＣｌ２
である。
である。
逆転写反応の条件は４２°Ｃ４０分、 ＰＣＲ反応の温
度サイク／Ｌ／は変性９４°Ｃ１分、アニーリング５０
°Ｃ１分・鎖長伸長７２°Ｃ１分、１サイク／Ｌ１５．
７分、４２サイクルで行っ友。
度サイク／Ｌ／は変性９４°Ｃ１分、アニーリング５０
°Ｃ１分・鎖長伸長７２°Ｃ１分、１サイク／Ｌ１５．
７分、４２サイクルで行っ友。
（検出）
上記ｐｃＲ１の溶液を１０μｍとり、エチジウムブロマ
イドを含む２％アガロースゲルで１００Ｖ３５分関電Ｒ
激動を行った浸、トランスイルミネーター上にゲ／Ｌ’
をおき、ｅ長３２０ｎｍのＵＶ光を照射したところＰＣ
Ｒ反応で増幅したＤＮＡは螢光を発した。その螢光をイ
ンスタントフィルムを装着したカメラにて書影した結果
金第３図に示した。
イドを含む２％アガロースゲルで１００Ｖ３５分関電Ｒ
激動を行った浸、トランスイルミネーター上にゲ／Ｌ’
をおき、ｅ長３２０ｎｍのＵＶ光を照射したところＰＣ
Ｒ反応で増幅したＤＮＡは螢光を発した。その螢光をイ
ンスタントフィルムを装着したカメラにて書影した結果
金第３図に示した。
センタイウィルスがサンプル中に含まれている懸濁液に
ついて本発明による方法５ｒ実施した後の電気泳動パタ
ーンを第３図のレーア１に示す。その結果、予想される
１７３塩基対の位置にバンドが出現した。これは同時に
ｔ貧泳動したポジティブコントロールサンプル（Ｚ３１
Ｊのレーン３）、！：同じ位置であることからもセンダ
イウィルス金特異的に検出でき几ことがわかる。ここで
言うポジティブコントロールとはセンダイフィルスを界
面活性剤で溶解した彼、フエノートクロロホルム抽出、
エタノール沈＃を施して得たＤＮＡ浴液？用いたもので
ある。
ついて本発明による方法５ｒ実施した後の電気泳動パタ
ーンを第３図のレーア１に示す。その結果、予想される
１７３塩基対の位置にバンドが出現した。これは同時に
ｔ貧泳動したポジティブコントロールサンプル（Ｚ３１
Ｊのレーン３）、！：同じ位置であることからもセンダ
イウィルス金特異的に検出でき几ことがわかる。ここで
言うポジティブコントロールとはセンダイフィルスを界
面活性剤で溶解した彼、フエノートクロロホルム抽出、
エタノール沈＃を施して得たＤＮＡ浴液？用いたもので
ある。
なお、レーン２け故意にウィルスを入れずに血清だけ？
試料液と同様に処理したパターン、レーン４は溶出附を
入れずにＰＣＲ法を行ったもの。
試料液と同様に処理したパターン、レーン４は溶出附を
入れずにＰＣＲ法を行ったもの。
ＭはψＸ１７４ＤＮＡを制限酵素）１ ｉ ｎ ｃ ｌ
Ｉで完全消化して得られた分子量マーカーであり、Ａ
、Ｂ。
Ｉで完全消化して得られた分子量マーカーであり、Ａ
、Ｂ。
Ｃ，Ｄ、Ｅけ対応する塩基対′７１′数である。
上記結果力・ら、この発明のウィルスの核酸成分採取法
分よひウィルスＳ査法（てよれば、血清中のセンダイウ
ィルスを上記方法により簡便かつ５時間程度と１ハう短
時間′″′′検出ることがわかった。
分よひウィルスＳ査法（てよれば、血清中のセンダイウ
ィルスを上記方法により簡便かつ５時間程度と１ハう短
時間′″′′検出ることがわかった。
〈発明の効果〉
第１の発明によれば、ウィルス吸着樹脂？採用し九ので
、ウィルスの取扱が容易になり、ウィルスの核酸成分の
抽出の自動化が可能となり、迅速かつ簡便に操作が行え
るようになるつ 第２の発明（てよれば、第１の発明を用いてＤＮＡウィ
ルスの該；１！成分を潟、ＰＣＲ反応？施すので。
、ウィルスの取扱が容易になり、ウィルスの核酸成分の
抽出の自動化が可能となり、迅速かつ簡便に操作が行え
るようになるつ 第２の発明（てよれば、第１の発明を用いてＤＮＡウィ
ルスの該；１！成分を潟、ＰＣＲ反応？施すので。
第１の発明と同様に簡便かつ迅速にＤＮＡウィルス金検
歪検査ことができる。
歪検査ことができる。
更に、第１の発明を用いてＲＮＡウィルスの核酸成分ケ
得、逆転写反応及びＰＣＢ反応を施すので、第１の発明
と同様に簡便かつ迅速にＲＮＡウィルスを検査すること
ができる。
得、逆転写反応及びＰＣＢ反応を施すので、第１の発明
と同様に簡便かつ迅速にＲＮＡウィルスを検査すること
ができる。
第１図は本発明の一実施例の作業？：ｒ程に示すフロー
チャート、第２図はフィルターユニットの構造を示すも
の、第３図はこの発明の方法ケ実旌し急談の電電泳動パ
ターンである。 （′外２名）ミ、５４〜 Ａ＝−１，Ｑ５７ｂｐ ８−−＝７７０ ０、−、 ＋＋−ｅ １２ Ｄ−−−２−−−４９５ Ｅ−＋＋３５０
チャート、第２図はフィルターユニットの構造を示すも
の、第３図はこの発明の方法ケ実旌し急談の電電泳動パ
ターンである。 （′外２名）ミ、５４〜 Ａ＝−１，Ｑ５７ｂｐ ８−−＝７７０ ０、−、 ＋＋−ｅ １２ Ｄ−−−２−−−４９５ Ｅ−＋＋３５０
Claims (2)
- （１）ウィルスを含む懸濁液からウィルスの核酸成分を
採取する方法であって、前記懸濁液中にウィルス吸着樹
脂を加えてウィルスを樹脂上に捕捉することと、前記ウ
ィルスを捕捉した樹脂をフィルター上に分離することと
、前記フィルター上に分離したウィルス捕捉樹脂にウィ
ルス溶解剤を流通させて、ウィルスの核酸成分を含む液
を得ることとを含むウィルスの核酸成分採取方法。 - （２）請求項１の方法で得られたウィルスの核酸成分を
含む液を直接又は逆転写酵素の反応を介した後ＰＣＲ法
に付して、所望のウィルスのＤＮＡを増幅することと、
前記増幅したＤＮＡを用いて、前記懸濁液中の所望のＤ
ＮＡウィルスの有無を検査することとを含むウィルス検
査法
Priority Applications (2)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP2341083A JPH04207195A (ja) | 1990-11-30 | 1990-11-30 | ウイルスの核酸成分採取方法及びウイルス検査法 |
| EP91120362A EP0488270A1 (en) | 1990-11-30 | 1991-11-28 | Method for collecting the nucleic acid component of virus and method for identifying virus |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP2341083A JPH04207195A (ja) | 1990-11-30 | 1990-11-30 | ウイルスの核酸成分採取方法及びウイルス検査法 |
Publications (1)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| JPH04207195A true JPH04207195A (ja) | 1992-07-29 |
Family
ID=18343095
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| JP2341083A Pending JPH04207195A (ja) | 1990-11-30 | 1990-11-30 | ウイルスの核酸成分採取方法及びウイルス検査法 |
Country Status (2)
| Country | Link |
|---|---|
| EP (1) | EP0488270A1 (ja) |
| JP (1) | JPH04207195A (ja) |
Families Citing this family (1)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| AU1602295A (en) * | 1994-01-14 | 1995-08-01 | Jockey Club, The | Non-invasive sampling method for nucleic acid analysis |
Family Cites Families (3)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| SE452336B (sv) * | 1978-06-16 | 1987-11-23 | Boehringer Mannheim Gmbh | Forfarande for pavisning av sjukdomsalstrande mikroorganismer vilka adsorberats extrakorporalt pa en selektivt bindande adsorbent |
| GB8331071D0 (en) * | 1983-11-22 | 1983-12-29 | Karayiannis P | Assay for dna/rna |
| US5077192A (en) * | 1988-10-25 | 1991-12-31 | The General Hospital Corporation | Method of detecting antigenic, nucleic acid-containing macromolecular entities |
-
1990
- 1990-11-30 JP JP2341083A patent/JPH04207195A/ja active Pending
-
1991
- 1991-11-28 EP EP91120362A patent/EP0488270A1/en not_active Withdrawn
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
| EP0488270A1 (en) | 1992-06-03 |
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