JPH04211094A - 抗生物質 - Google Patents
抗生物質Info
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- JPH04211094A JPH04211094A JP3019769A JP1976991A JPH04211094A JP H04211094 A JPH04211094 A JP H04211094A JP 3019769 A JP3019769 A JP 3019769A JP 1976991 A JP1976991 A JP 1976991A JP H04211094 A JPH04211094 A JP H04211094A
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- compound
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-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
- C07D493/00—Heterocyclic compounds containing oxygen atoms as the only ring hetero atoms in the condensed system
- C07D493/02—Heterocyclic compounds containing oxygen atoms as the only ring hetero atoms in the condensed system in which the condensed system contains two hetero rings
- C07D493/10—Spiro-condensed systems
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P31/00—Antiinfectives, i.e. antibiotics, antiseptics, chemotherapeutics
- A61P31/04—Antibacterial agents
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P31/00—Antiinfectives, i.e. antibiotics, antiseptics, chemotherapeutics
- A61P31/10—Antimycotics
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07H—SUGARS; DERIVATIVES THEREOF; NUCLEOSIDES; NUCLEOTIDES; NUCLEIC ACIDS
- C07H19/00—Compounds containing a hetero ring sharing one ring hetero atom with a saccharide radical; Nucleosides; Mononucleotides; Anhydro-derivatives thereof
- C07H19/01—Compounds containing a hetero ring sharing one ring hetero atom with a saccharide radical; Nucleosides; Mononucleotides; Anhydro-derivatives thereof sharing oxygen
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12P—FERMENTATION OR ENZYME-USING PROCESSES TO SYNTHESISE A DESIRED CHEMICAL COMPOUND OR COMPOSITION OR TO SEPARATE OPTICAL ISOMERS FROM A RACEMIC MIXTURE
- C12P17/00—Preparation of heterocyclic carbon compounds with only O, N, S, Se or Te as ring hetero atoms
- C12P17/18—Preparation of heterocyclic carbon compounds with only O, N, S, Se or Te as ring hetero atoms containing at least two hetero rings condensed among themselves or condensed with a common carbocyclic ring system, e.g. rifamycin
- C12P17/181—Heterocyclic compounds containing oxygen atoms as the only ring heteroatoms in the condensed system, e.g. Salinomycin, Septamycin
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- Preparation Of Compounds By Using Micro-Organisms (AREA)
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- Micro-Organisms Or Cultivation Processes Thereof (AREA)
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Abstract
(57)【要約】本公報は電子出願前の出願データであるた
め要約のデータは記録されません。
め要約のデータは記録されません。
Description
［０００１］本発明によれば、ジクチオカエタ・シンプ
レックス（Ｄｉｃｔｙｏｃｈａｅｔａ ｓｉｍｐｌｅｘ
）を培養することにより、抗真菌剤及び抗ニューモジス
テイス剤として有用な新規産物が発見された。新規産物
は下記式で示され：
レックス（Ｄｉｃｔｙｏｃｈａｅｔａ ｓｉｍｐｌｅｘ
）を培養することにより、抗真菌剤及び抗ニューモジス
テイス剤として有用な新規産物が発見された。新規産物
は下記式で示され：
【化２】
ケミカル・アブストラクツ（Ｃｈｅｍｉｃａｌ Ａｂｓ
ｔｒａｃｔｓ）名に従えば３”、４’、５”、６”−テ
トラヒドロ−３”。 ３．７−トリヒドロキシー６”−（ヒドロキシメチル）
−５”−〔〔テトラヒドロ−３，４，５−トリヒドロキ
シ−６−（（（８−ヒドロキシ−１−オキソ−２，４−
デカジェニル）オキシ〕メチル〕−２Ｈ−ピラン−２−
イル〕オキシ〕スピロ〔イソベンゾフラン−１（３Ｈ）
、 ２’ −（２Ｈ）−ピラン〕−４“−イル〕７
−ヒドロキシー８，１４−ジメチル−２，４，８，１０
−へキサデカテトラエノエートと命名される。
ｔｒａｃｔｓ）名に従えば３”、４’、５”、６”−テ
トラヒドロ−３”。 ３．７−トリヒドロキシー６”−（ヒドロキシメチル）
−５”−〔〔テトラヒドロ−３，４，５−トリヒドロキ
シ−６−（（（８−ヒドロキシ−１−オキソ−２，４−
デカジェニル）オキシ〕メチル〕−２Ｈ−ピラン−２−
イル〕オキシ〕スピロ〔イソベンゾフラン−１（３Ｈ）
、 ２’ −（２Ｈ）−ピラン〕−４“−イル〕７
−ヒドロキシー８，１４−ジメチル−２，４，８，１０
−へキサデカテトラエノエートと命名される。
【０００２】本化合物は下記物理的性質により特徴付け
られる白色固体物である。 ＮＭＲスペクトルデータ １３Ｃ−ＮＭＲスペクトルはパリアン（Ｖａｒｉａｎ）
Ｘ Ｌ ３００スペクトロメーターを用いＣＤｓ Ｏ
Ｄ中７５ＭＨｚにて記録された。ゼロｐｐｍにおけるテ
トラメチルシラン（ＴＭＳ）と比較した化学シフト（ｐ
ｐｍで表す）は下記のとおりである：１６９．０．１６
８．４．１６１゜６．１５４．５．１４６゜０、１４５
．５．１４３．０．１４１．６．１４１．３．１３７．
５．１３６．２．１３１゜５、１２７．６．１２７．１
．１２７．１．１２１．９．１２１．６．１１６．４．
１１１゜９、１０５．３．１０３．０．１００．０．７
７．６．７７．６．７６．３．７４．８．７４．６．７
４．０．７３．９．７３．２．７２．５．７１．８．７
０．４．６４．９．６１゜５、４０．０．３７．５．３
７．５．３５．２．３１．６．３１．１．３０．４．２
５．９゜１９．５．１２．２．１１．７．１０．４゜Ｉ
Ｈ−ＮＭＲスペクトルも同装置でＣＤ３ｏＤ中３００Ｍ
Ｈｚにて記録され、図１で示される。 赤外線スペクトルデータ ＩＲスペクトルは、Ｚｎ５ｅ多重内部反射（ＭＩＲ）結
晶上のフィルムとして、パーキン・エルマーＭＤＬ１７
５０フーリエ（Ｐｅｒｋｉｎ Ｅｌｍｅｒ ＭＤＬ １
７５０ Ｆｏｕｒｉｅｒ）変換赤外スペクトロメーター
を用いて得た。主要バンドは３４００、２９８０．２９
６０，２９３０．１７００．１６３６．１６１８．１２
６４．１１５３゜１０７０、１０４０．１００６．８６
９及び７０９ｃｎｒ ’で観察された。 質量スペクトルデータ フイネガン（Ｆｉｎｎｅｇａｎ）ＭＡＴ ９０装置で記
録された急速原子衝突質量スペクトルでは９０２の分子
量を示す（ｍ／ｅ９０３で（Ｍ＋Ｈ）がｍ／ｅ ９２５
で（Ｍ＋Ｎａ）が観察される）。１３Ｃ−ＮＭＲデータ
と組合せた場合、データは実験式Ｃ４７Ｈｅ ｅ Ｏ＋
７を示す。過トリメチルシリル化誘導体の電子衝突質
量スペクトルではｍ／ ｚ ６１７．３８３及び２５３
で特徴的断片イオンがみられた。 本化合物はメタノール、エタノール、ジメチルホルムア
ミド、ジメチルスルホキシドその他のような有機溶媒に
可溶性である。 ［０００３］本発明の化合物は糸状菌及び酵母双方に対
して抗真菌性を有する。それが特に有用な糸状菌の一部
としてはアルターナリア・ソラニ（Ａｌｔｅｒｎａｒｉ
ａ ５ｏｌａｎｉ）、セルコスポラ・ベチコラ（Ｃｅｒ
ｃｏｓｐｏｒａ ｂｅｔｉｃｏｌａ）、コチリオボラス
・ミャベアナス（Ｃｏｃｈｌｉｏｂｏｌｕｓ ｍ１ｙａ
ｂｅａｎｕｓ） 、スコプラリオプシス・コミュニス（
Ｓｃｏｐｕｌａｒｉｏｐｓｉｓ ｃｏｍｍｕｎｉｓ）
、ウスチラゴ・ゼアエ（Ｕｓｔｉｌａｇｏ ｚｅａｅ）
、ペニシリウム種（Ｐｅｎｉｃｉｌｌｉｕｍ ｓｐ、）
、フオフ種（Ｐｈｏｍａ ｓｐ、）、リゾムコール・
ミニヘイ（Ｒｈｉｚｏｍｕｃｏｒ ｍ１ｅｈｅｉ）、ト
リコデルマ種（ｔｒｉｃｈｏｄｅｒｍａ ｓｐ、）があ
る。それが特に有用な酵母の一部としてはカンジダ・ア
ルビカンス（Ｃａｎｄｉｄａ ａｌｂｉｃａｎｓ）、カ
ンジダ・トロピカリス（Ｃａｎｄｉｄａ ｔｒ。 ｐｉｃａｌ ｉｓ）、カンジダ・ルゴサ（Ｃａｎｄｉｄ
ａ ｒｕｇｏｓａ）、クリプトコツカス・ラウレンチイ
（Ｃｒｙｐｔｏｃｏｃｃｏｕｓ １ａｕｒｅｎｔｉｉ）
、サツカロミセス・セレビシアエ（Ｓａｃｃｈａｒｏｍ
ｙｃｅｓ ｃｅｒｅｖｉｓｉａｅ）その他がある。化合
物■は、後天性免疫不全症候群のような免疫無防備患者
に対して特に重度の肺炎を起こす病原体ニューモジステ
イス・カリニイ（Ｐｎｅｕｍｏｃｙｓｔｉｓ ｃａｒｉ
ｎｉｉ）の治療剤としても有用である。抗真菌剤及びニ
ューモジステイス・カリニイ感染の治療又は予防剤とし
ての化合物■の使用も本発明の一面をなす。 ［０００４］産生 ＭＦ５２４７としてメルク・カルチャー・コレクション
（Ｍｅｒｃｋ Ｃｕ１ｔｕｒｅ Ｃｏ１１ｅｃｔｉｏｎ
）に保持され、ブダペスト条約下で１２３０／パークロ
ーン・ドライブ、ロックビル、ＭＤ ２０８５２ （１
２３０／ Ｐａｒｋｌａｗｎ Ｄｒｉｖｅ、Ｒｏｃｋｖ
ｉｌｌｅ、ＭＤ ２０８５２）の培養機関アメリカン・
タイプ・カルチャー・コレクション（Ａｍｅｒｉｃａｎ
Ｔｙｐｅ Ｃｕ１ｔｕｒｅ Ｃｏ１１ｅｃｔｉｏｎ）
に寄託されかつ受理Ｎｏ、 ＡＴＣＣ２０９６０と付さ
れたコジナエア・シンプレックス（Ｃｏｄｉｎａｅａ
ｓｉｍｐｌｅｘ）とも称されるジクチオカエタ・シンプ
レックスを培養することで、本発明の化合物■は、好都
合に生産される。 ［０００５］ジクチオカエタ・シンプレックスＡＴＣＣ
２０９６０のコロニー及び形態学的説明は以下で記載さ
れている：コーンミール寒天上のコロニーは不規則に拡
がり、ぺったりとし、細かなビロード毛でおおわれ、ビ
ロード状であるか又は白粉におおわれ、横から見るとや
や凸レンズ状で、７日間で径１５ｍｍ以内で、オリーブ
グレー、オリーブ−ブラック、淡−濃グレーがかったブ
ラック、 ダークグリ−ニッシュオリーブ、 ダークオ
リーブ、 ダークグレイッシュオリーブ、 オリベイジ
ャスブラック、 ミネラルグレー スモークグレーで
ある〔 はＲ，リッジウェー “カラー標準及び命名”
′、ワシントン、Ｄ、Ｃ，，１９１２年（Ｒ，Ｒｉｄｇ
ｗａｙ。 ”Ｃｏ１ｏｒ ５ｔａｎｄａｒｄｓａｎｄ Ｎｏｍｅｎ
ｃｌａｔｕｒｅ”、Ｗａｓｈｉｎｇｔｏｎ、Ｄ。 Ｃ，、１９１２）による色名）。菌糸体はやや寒天中に
沈み、隔壁を有し、分岐し、１〜５μｍ幅で、ＫＯＨ中
で透明乃至グレーブラウン又はオリーブグレーであった
。小剛毛は存在しない。分生子柄は栄養菌糸体から直接
出現し、太線状又は単線状で、２３〜１４０Ｘ３〜５μ
ｍ、単純に分岐、又はほとんど分岐せず、直線状乃至や
や屈曲し、０乃至４の隔壁を有し、栄養菌糸体との付着
箇所で円柱形又は時々やや細くなり、先端に向けて時々
ふくらみ、多くが連続増殖性で、ＫＯＨ中で透明乃至淡
オリーブブラウンの薄壁乃至やや厚い壁を有する。分生
子細胞は鉢状体で、末端又は側面捲縮輪で集合されてい
る。捲縮輸は薄い円柱形〜はぼ半球形で、４μｍ幅×２
．５μｍ深さの透明薄壁を有する。分生子は１３〜１９
． ５Ｘ３Ｘ４．５μｍで、２つの小剛毛を有し、狭い
三日月形〜紡錘形で、滑壁で、隔壁はなく、細粒状細胞
質で、ＫＯＨ中透明〜淡グレー状イエローである。分生
子の遠位末端に直線状ないしやや曲線状で透明な３〜６
μｍ小剛毛がある。新規化合物の産生は主に特定株に関
して以下で記載されているが、属ＡＴＣＣ２０９６０及
び変異体のすべての株が本発明の範囲内に属すると考え
られる。 ［０００６］化合物■は下記条件下適切な栄養培地でジ
クチオカエタ・シンプレックスを培養し、しかる後適切
な溶媒で発酵培地から活性成分を抽出し、所望成分含有
溶液を濃縮し、次いで濃縮物質をクロマトグラフィー分
離に付し、培地中に同時に存在する他の代謝産物から化
合物■を分離することで得られる。発酵を行うために適
した栄養培地は微生物で資化しうる炭素及び窒素源を含
有し、更に低レベルの無機塩も含有している。加えて、
たとえ炭素及び窒素の複合栄養源が用いられる場合であ
っても、培地に微量金属を補充してもよいが、それらは
複合栄養源中に通常存在している。最終培地は固体でも
又は液体であってもよいが、しかしながら液体種培地が
通常最初に用いられ、そこからの増殖物が産生培地に接
種するため用いられる。 ［０００７］よく用いられる２種の種培地は以下である
：
られる白色固体物である。 ＮＭＲスペクトルデータ １３Ｃ−ＮＭＲスペクトルはパリアン（Ｖａｒｉａｎ）
Ｘ Ｌ ３００スペクトロメーターを用いＣＤｓ Ｏ
Ｄ中７５ＭＨｚにて記録された。ゼロｐｐｍにおけるテ
トラメチルシラン（ＴＭＳ）と比較した化学シフト（ｐ
ｐｍで表す）は下記のとおりである：１６９．０．１６
８．４．１６１゜６．１５４．５．１４６゜０、１４５
．５．１４３．０．１４１．６．１４１．３．１３７．
５．１３６．２．１３１゜５、１２７．６．１２７．１
．１２７．１．１２１．９．１２１．６．１１６．４．
１１１゜９、１０５．３．１０３．０．１００．０．７
７．６．７７．６．７６．３．７４．８．７４．６．７
４．０．７３．９．７３．２．７２．５．７１．８．７
０．４．６４．９．６１゜５、４０．０．３７．５．３
７．５．３５．２．３１．６．３１．１．３０．４．２
５．９゜１９．５．１２．２．１１．７．１０．４゜Ｉ
Ｈ−ＮＭＲスペクトルも同装置でＣＤ３ｏＤ中３００Ｍ
Ｈｚにて記録され、図１で示される。 赤外線スペクトルデータ ＩＲスペクトルは、Ｚｎ５ｅ多重内部反射（ＭＩＲ）結
晶上のフィルムとして、パーキン・エルマーＭＤＬ１７
５０フーリエ（Ｐｅｒｋｉｎ Ｅｌｍｅｒ ＭＤＬ １
７５０ Ｆｏｕｒｉｅｒ）変換赤外スペクトロメーター
を用いて得た。主要バンドは３４００、２９８０．２９
６０，２９３０．１７００．１６３６．１６１８．１２
６４．１１５３゜１０７０、１０４０．１００６．８６
９及び７０９ｃｎｒ ’で観察された。 質量スペクトルデータ フイネガン（Ｆｉｎｎｅｇａｎ）ＭＡＴ ９０装置で記
録された急速原子衝突質量スペクトルでは９０２の分子
量を示す（ｍ／ｅ９０３で（Ｍ＋Ｈ）がｍ／ｅ ９２５
で（Ｍ＋Ｎａ）が観察される）。１３Ｃ−ＮＭＲデータ
と組合せた場合、データは実験式Ｃ４７Ｈｅ ｅ Ｏ＋
７を示す。過トリメチルシリル化誘導体の電子衝突質
量スペクトルではｍ／ ｚ ６１７．３８３及び２５３
で特徴的断片イオンがみられた。 本化合物はメタノール、エタノール、ジメチルホルムア
ミド、ジメチルスルホキシドその他のような有機溶媒に
可溶性である。 ［０００３］本発明の化合物は糸状菌及び酵母双方に対
して抗真菌性を有する。それが特に有用な糸状菌の一部
としてはアルターナリア・ソラニ（Ａｌｔｅｒｎａｒｉ
ａ ５ｏｌａｎｉ）、セルコスポラ・ベチコラ（Ｃｅｒ
ｃｏｓｐｏｒａ ｂｅｔｉｃｏｌａ）、コチリオボラス
・ミャベアナス（Ｃｏｃｈｌｉｏｂｏｌｕｓ ｍ１ｙａ
ｂｅａｎｕｓ） 、スコプラリオプシス・コミュニス（
Ｓｃｏｐｕｌａｒｉｏｐｓｉｓ ｃｏｍｍｕｎｉｓ）
、ウスチラゴ・ゼアエ（Ｕｓｔｉｌａｇｏ ｚｅａｅ）
、ペニシリウム種（Ｐｅｎｉｃｉｌｌｉｕｍ ｓｐ、）
、フオフ種（Ｐｈｏｍａ ｓｐ、）、リゾムコール・
ミニヘイ（Ｒｈｉｚｏｍｕｃｏｒ ｍ１ｅｈｅｉ）、ト
リコデルマ種（ｔｒｉｃｈｏｄｅｒｍａ ｓｐ、）があ
る。それが特に有用な酵母の一部としてはカンジダ・ア
ルビカンス（Ｃａｎｄｉｄａ ａｌｂｉｃａｎｓ）、カ
ンジダ・トロピカリス（Ｃａｎｄｉｄａ ｔｒ。 ｐｉｃａｌ ｉｓ）、カンジダ・ルゴサ（Ｃａｎｄｉｄ
ａ ｒｕｇｏｓａ）、クリプトコツカス・ラウレンチイ
（Ｃｒｙｐｔｏｃｏｃｃｏｕｓ １ａｕｒｅｎｔｉｉ）
、サツカロミセス・セレビシアエ（Ｓａｃｃｈａｒｏｍ
ｙｃｅｓ ｃｅｒｅｖｉｓｉａｅ）その他がある。化合
物■は、後天性免疫不全症候群のような免疫無防備患者
に対して特に重度の肺炎を起こす病原体ニューモジステ
イス・カリニイ（Ｐｎｅｕｍｏｃｙｓｔｉｓ ｃａｒｉ
ｎｉｉ）の治療剤としても有用である。抗真菌剤及びニ
ューモジステイス・カリニイ感染の治療又は予防剤とし
ての化合物■の使用も本発明の一面をなす。 ［０００４］産生 ＭＦ５２４７としてメルク・カルチャー・コレクション
（Ｍｅｒｃｋ Ｃｕ１ｔｕｒｅ Ｃｏ１１ｅｃｔｉｏｎ
）に保持され、ブダペスト条約下で１２３０／パークロ
ーン・ドライブ、ロックビル、ＭＤ ２０８５２ （１
２３０／ Ｐａｒｋｌａｗｎ Ｄｒｉｖｅ、Ｒｏｃｋｖ
ｉｌｌｅ、ＭＤ ２０８５２）の培養機関アメリカン・
タイプ・カルチャー・コレクション（Ａｍｅｒｉｃａｎ
Ｔｙｐｅ Ｃｕ１ｔｕｒｅ Ｃｏ１１ｅｃｔｉｏｎ）
に寄託されかつ受理Ｎｏ、 ＡＴＣＣ２０９６０と付さ
れたコジナエア・シンプレックス（Ｃｏｄｉｎａｅａ
ｓｉｍｐｌｅｘ）とも称されるジクチオカエタ・シンプ
レックスを培養することで、本発明の化合物■は、好都
合に生産される。 ［０００５］ジクチオカエタ・シンプレックスＡＴＣＣ
２０９６０のコロニー及び形態学的説明は以下で記載さ
れている：コーンミール寒天上のコロニーは不規則に拡
がり、ぺったりとし、細かなビロード毛でおおわれ、ビ
ロード状であるか又は白粉におおわれ、横から見るとや
や凸レンズ状で、７日間で径１５ｍｍ以内で、オリーブ
グレー、オリーブ−ブラック、淡−濃グレーがかったブ
ラック、 ダークグリ−ニッシュオリーブ、 ダークオ
リーブ、 ダークグレイッシュオリーブ、 オリベイジ
ャスブラック、 ミネラルグレー スモークグレーで
ある〔 はＲ，リッジウェー “カラー標準及び命名”
′、ワシントン、Ｄ、Ｃ，，１９１２年（Ｒ，Ｒｉｄｇ
ｗａｙ。 ”Ｃｏ１ｏｒ ５ｔａｎｄａｒｄｓａｎｄ Ｎｏｍｅｎ
ｃｌａｔｕｒｅ”、Ｗａｓｈｉｎｇｔｏｎ、Ｄ。 Ｃ，、１９１２）による色名）。菌糸体はやや寒天中に
沈み、隔壁を有し、分岐し、１〜５μｍ幅で、ＫＯＨ中
で透明乃至グレーブラウン又はオリーブグレーであった
。小剛毛は存在しない。分生子柄は栄養菌糸体から直接
出現し、太線状又は単線状で、２３〜１４０Ｘ３〜５μ
ｍ、単純に分岐、又はほとんど分岐せず、直線状乃至や
や屈曲し、０乃至４の隔壁を有し、栄養菌糸体との付着
箇所で円柱形又は時々やや細くなり、先端に向けて時々
ふくらみ、多くが連続増殖性で、ＫＯＨ中で透明乃至淡
オリーブブラウンの薄壁乃至やや厚い壁を有する。分生
子細胞は鉢状体で、末端又は側面捲縮輪で集合されてい
る。捲縮輸は薄い円柱形〜はぼ半球形で、４μｍ幅×２
．５μｍ深さの透明薄壁を有する。分生子は１３〜１９
． ５Ｘ３Ｘ４．５μｍで、２つの小剛毛を有し、狭い
三日月形〜紡錘形で、滑壁で、隔壁はなく、細粒状細胞
質で、ＫＯＨ中透明〜淡グレー状イエローである。分生
子の遠位末端に直線状ないしやや曲線状で透明な３〜６
μｍ小剛毛がある。新規化合物の産生は主に特定株に関
して以下で記載されているが、属ＡＴＣＣ２０９６０及
び変異体のすべての株が本発明の範囲内に属すると考え
られる。 ［０００６］化合物■は下記条件下適切な栄養培地でジ
クチオカエタ・シンプレックスを培養し、しかる後適切
な溶媒で発酵培地から活性成分を抽出し、所望成分含有
溶液を濃縮し、次いで濃縮物質をクロマトグラフィー分
離に付し、培地中に同時に存在する他の代謝産物から化
合物■を分離することで得られる。発酵を行うために適
した栄養培地は微生物で資化しうる炭素及び窒素源を含
有し、更に低レベルの無機塩も含有している。加えて、
たとえ炭素及び窒素の複合栄養源が用いられる場合であ
っても、培地に微量金属を補充してもよいが、それらは
複合栄養源中に通常存在している。最終培地は固体でも
又は液体であってもよいが、しかしながら液体種培地が
通常最初に用いられ、そこからの増殖物が産生培地に接
種するため用いられる。 ［０００７］よく用いられる２種の種培地は以下である
：
【表１】
腹口賭茜 且Ｕ吹鐵」／ヱ
辺 トマトペースト ４０．０ Ｋ
ＨＲＰ ０４ １５．０コーンスチー
プリカ−５−１） セレロース
２０．０オート粉 １０−０
アルクミンＰＩ（” ｌ−［１セ
レロース １Ｏ１０ファルマメディア”
ｔｓ−。 微量元素ミックス １０．珈ｌ 乳酸（８５
％） ２．０１１１滅菌前１ｐｆ１６
．８ 微電元素ミックス
１０．０１１１ＭｉＨＮ−１７，０ １酵母自己分析産物：イースト・プロダクツ社（Ｙｔｍ
ｔ ■−■ｔｓ、 Ｉｎｃ、 ）クリフトン、ニューー
シャーシー州 １に綿実からの非加水分解球状タンパク質：トレーダー
ズ、プロティン。 バックアイ−セルロース社（１’ｒａｄｅｒｓ Ｐｒｏ
ｔｅｉｎ、 Ｂｏｃｋｅｙｅ ｌ１ｚｌｌｕｌｏ、ｙ
Ｃａｒｐ、 ） 。 メンノイス、テネシー州
辺 トマトペースト ４０．０ Ｋ
ＨＲＰ ０４ １５．０コーンスチー
プリカ−５−１） セレロース
２０．０オート粉 １０−０
アルクミンＰＩ（” ｌ−［１セ
レロース １Ｏ１０ファルマメディア”
ｔｓ−。 微量元素ミックス １０．珈ｌ 乳酸（８５
％） ２．０１１１滅菌前１ｐｆ１６
．８ 微電元素ミックス
１０．０１１１ＭｉＨＮ−１７，０ １酵母自己分析産物：イースト・プロダクツ社（Ｙｔｍ
ｔ ■−■ｔｓ、 Ｉｎｃ、 ）クリフトン、ニューー
シャーシー州 １に綿実からの非加水分解球状タンパク質：トレーダー
ズ、プロティン。 バックアイ−セルロース社（１’ｒａｄｅｒｓ Ｐｒｏ
ｔｅｉｎ、 Ｂｏｃｋｅｙｅ ｌ１ｚｌｌｕｌｏ、ｙ
Ｃａｒｐ、 ） 。 メンノイス、テネシー州
【表２】
微訛心ルりｌ
諺
ＦｅＳＯ４−７）１＊Ｏｔ、 ［１
油唖損、・４ルＯＬ口
（：ｕＣｌ、 −２Ｈ１００，Ｄ２５
ＣａＣ１ｇ −ｚｕ＊ｏ
ｏ、 ＩＨ３１１０，０，０５６ （Ｉ＠４）ｌｌｌｌＩ＋］７０□＊−４０Ｊ
０．０１９ム（至）、−７１１２０’
０．２０．６ＮＩＩＣ１１℃中 種培地は使用前に１２１℃及び１５ｐｓｉ （約１
ｋｇ／ｃｍ２）で２０分間オートクレーブ処理される。 産生培地において、炭素源としてはグリセロール、糖、
デンプン及び他の炭水化物又はデキストラン、セレロー
スのような炭水化物誘導体並びにオート粉、コーンミー
ル、雑穀、コーンその他のような複合栄養素がある。培
地で用いられる炭素源の正確な景は培地中の他成分に一
部依存しているが、通常培地中０．５〜５重量％の量の
炭水化物で満足しうろことがわかっている。これらの炭
素源は個別的に用いてもよく又は数種のかかる炭素源が
同一培地で組合されてもよい。窒素源としては、グリシ
ン、アルギニン、トレオニン、メチオニン等のようなア
ミノ酸及び酵母加水分解産物、酵母自己分解産物、酵母
細胞、トマトペースト、大豆ミール、カゼイン加水分解
産物、酵母エキス、コーンスチープリカー、ディスティ
ラーズソリュブル、綿実ミール、肉エキス等のような複
合源がある。 様々な窒素源は培地中０．２〜９０重量％の量で単独で
又は組合せて用いることができる。培地中に配合しつる
栄養無機塩としては、ナトリウム、カリウム、マグネシ
ウム、アンモニウム、カルシウム、リン酸、硫酸、塩化
物、炭酸等のイオンを生じうる慣用塩がある。コバルト
、マンガン、鉄、モリブデン、亜鉛、カドミウム等のよ
うな微量金属も含まれる。 ［０００８］代表的産生培地としては下記の固体産生培
地がある：
ｏ、 ＩＨ３１１０，０，０５６ （Ｉ＠４）ｌｌｌｌＩ＋］７０□＊−４０Ｊ
０．０１９ム（至）、−７１１２０’
０．２０．６ＮＩＩＣ１１℃中 種培地は使用前に１２１℃及び１５ｐｓｉ （約１
ｋｇ／ｃｍ２）で２０分間オートクレーブ処理される。 産生培地において、炭素源としてはグリセロール、糖、
デンプン及び他の炭水化物又はデキストラン、セレロー
スのような炭水化物誘導体並びにオート粉、コーンミー
ル、雑穀、コーンその他のような複合栄養素がある。培
地で用いられる炭素源の正確な景は培地中の他成分に一
部依存しているが、通常培地中０．５〜５重量％の量の
炭水化物で満足しうろことがわかっている。これらの炭
素源は個別的に用いてもよく又は数種のかかる炭素源が
同一培地で組合されてもよい。窒素源としては、グリシ
ン、アルギニン、トレオニン、メチオニン等のようなア
ミノ酸及び酵母加水分解産物、酵母自己分解産物、酵母
細胞、トマトペースト、大豆ミール、カゼイン加水分解
産物、酵母エキス、コーンスチープリカー、ディスティ
ラーズソリュブル、綿実ミール、肉エキス等のような複
合源がある。 様々な窒素源は培地中０．２〜９０重量％の量で単独で
又は組合せて用いることができる。培地中に配合しつる
栄養無機塩としては、ナトリウム、カリウム、マグネシ
ウム、アンモニウム、カルシウム、リン酸、硫酸、塩化
物、炭酸等のイオンを生じうる慣用塩がある。コバルト
、マンガン、鉄、モリブデン、亜鉛、カドミウム等のよ
うな微量金属も含まれる。 ［０００８］代表的産生培地としては下記の固体産生培
地がある：
【表３】
嬰 獅叫
ム四１２之Δ２ ／２５ｍ１フ
ラスコひき割コーン １［１−０ｇ
雑穀 １５．に基本液 １０．
ｖ 基本液 １０− Ｗ
ラスコひき割コーン １［１−０ｇ
雑穀 １５．に基本液 １０．
ｖ 基本液 １０− Ｗ
【表４
］ 基本液 ヅｌ アルクミン■ ０．２Ｋ）１．１
η４０．１ Ｍｇ５Ｏ７ｌ−７ｅ２ｏ ｏ、
１酒石酸ナトリウム ０−１ＦＩｌ！Ｓ０
４・７Ｈ，０１１，０１ ＺｎＳＯ，−７８ＩｌＯ［１，１１１ 扉末調袈 使用前に、培地は１２１℃及び１５ｐｉｓ （約１ｋ
ｇ／ｃｍ２）で１５分間オートクレーブ処理し、しかる
後蒸留水１５、 ０ｍｌを加えて、２０分間オートクレ
ーブ処理する。 ［０００９］液体培地も用いられる。大規模な発酵は一
般に液体培地を用いる方が都合がよい。化合物■は下記
組成の培地Ｃのような慣用的培地中で培養を行うことに
よっても得られるが、それら培地は所望化合物を高収率
で得るには適していないことがわかった：【表５】 境地ｑ
境地ＵＯ社 テキストロース １０，０
デキストロース
５０，０コーンミール ｌ０
９０
グリセロール １［１−ログリシン
１０
コーンミール １０．
［１ペクチン １０−０
グリシン
２．０トマトペースト
５，０
ペクチン １０・Ｏタラ肝油
２．０１１１１
トマトベースｌ−Ｆｌ−０１θ ヶｊ−＞ｔｉｌｔ−３−ト＋）つｈ ２．０
タラ肝
油 ２・−１（ＮＩＩＪ ｔ’；０
４２．０
クエン醍ナトリウム ２，０ＣｏＣｆ
ｆ ａ ’６Ｈ，０（１，０１ｆ＊、ｔｌ １ｌ−８Ｏ
４２，０しかしながら、約４．５〜約７．５重量％のデ
キストロースを配合すれば、高収率で化合物■が得られ
る。約０．５〜１．５重量％程度の少量のグリセロール
を追加すると更に良い効果が得られる。このため、液体
培地で化合物■を産生するための方法及び組成物も本発
明の一面をなす。使用可能な培地を以下に示す。好まし
い培地の１つは培地りである。
］ 基本液 ヅｌ アルクミン■ ０．２Ｋ）１．１
η４０．１ Ｍｇ５Ｏ７ｌ−７ｅ２ｏ ｏ、
１酒石酸ナトリウム ０−１ＦＩｌ！Ｓ０
４・７Ｈ，０１１，０１ ＺｎＳＯ，−７８ＩｌＯ［１，１１１ 扉末調袈 使用前に、培地は１２１℃及び１５ｐｉｓ （約１ｋ
ｇ／ｃｍ２）で１５分間オートクレーブ処理し、しかる
後蒸留水１５、 ０ｍｌを加えて、２０分間オートクレ
ーブ処理する。 ［０００９］液体培地も用いられる。大規模な発酵は一
般に液体培地を用いる方が都合がよい。化合物■は下記
組成の培地Ｃのような慣用的培地中で培養を行うことに
よっても得られるが、それら培地は所望化合物を高収率
で得るには適していないことがわかった：【表５】 境地ｑ
境地ＵＯ社 テキストロース １０，０
デキストロース
５０，０コーンミール ｌ０
９０
グリセロール １［１−ログリシン
１０
コーンミール １０．
［１ペクチン １０−０
グリシン
２．０トマトペースト
５，０
ペクチン １０・Ｏタラ肝油
２．０１１１１
トマトベースｌ−Ｆｌ−０１θ ヶｊ−＞ｔｉｌｔ−３−ト＋）つｈ ２．０
タラ肝
油 ２・−１（ＮＩＩＪ ｔ’；０
４２．０
クエン醍ナトリウム ２，０ＣｏＣｆ
ｆ ａ ’６Ｈ，０（１，０１ｆ＊、ｔｌ １ｌ−８Ｏ
４２，０しかしながら、約４．５〜約７．５重量％のデ
キストロースを配合すれば、高収率で化合物■が得られ
る。約０．５〜１．５重量％程度の少量のグリセロール
を追加すると更に良い効果が得られる。このため、液体
培地で化合物■を産生するための方法及び組成物も本発
明の一面をなす。使用可能な培地を以下に示す。好まし
い培地の１つは培地りである。
【表６］
部層
匹
デキストロース ５０．０グリセロール
１０．０グリシン
２．０ラード水 ５．０大
豆ミール ５．０ クエン酸ナトリウム ２．ＯＫ、ＨＰｌ）、
２．０ＣｏＣＩ１２・６Ｈ
１＋０ ０．０ＩＰ−２０００２，０
ｗ＋１ 【表７】 項部 Ｖ多 デキストロース ４０．０グリセロール
２０．０１−ンスチーブリ力−５，０ グリシン ２．０ラード水
５．０ベクナン
１０．Ｏクエン酸ナトリウｈ ２．０（Ｎ
Ｆｌ、） 、！５０． ２．０Ｋ
）Ｉ−９４２，Ｏ
１０．０グリシン
２．０ラード水 ５．０大
豆ミール ５．０ クエン酸ナトリウム ２．ＯＫ、ＨＰｌ）、
２．０ＣｏＣＩ１２・６Ｈ
１＋０ ０．０ＩＰ−２０００２，０
ｗ＋１ 【表７】 項部 Ｖ多 デキストロース ４０．０グリセロール
２０．０１−ンスチーブリ力−５，０ グリシン ２．０ラード水
５．０ベクナン
１０．Ｏクエン酸ナトリウｈ ２．０（Ｎ
Ｆｌ、） 、！５０． ２．０Ｋ
）Ｉ−９４２，Ｏ
【表８】
ＣｏＣ４−６−００１１
［００１０１化合物■の好ましい産生プロセスにおいて
、ジクチオカエタ・シンプレックスＡＴＣＣ２０９６０
含有発酵ブロスは抗生物質産生生物の胞子又は菌糸体を
適切な培地に接種し、しかる後好気性条件下で培養する
ことにより製造される。操作では通常、最初に保存され
た培養菌を栄養種培地に接種し、抗真菌剤の産生の種菌
となる菌を、好ましくは２ステップ操作で生育させる。 接種後、フラスコは約１５〜約３０℃、好ましくは２０
〜２８℃範囲の温度で攪拌下又は非攪拌下にてインキュ
ベートされる。攪拌する場合は４００ ｒｐｍ以内、好
ましくは約２００〜２２ Ｏｒｐｍである。インキュベ
ートは２〜３０日間、好ましくは２〜４日間にわたり行
われる。増殖が盛んになったとき、通常２〜５日目口重
培養菌を抗真菌剤産生用の産生培地に接種する。第二段
階発酵を行ってもよい。その場合、培養増殖物の一部を
同様のインキュベート条件で時間を短くして用いる。接
種後、発酵産生培地は３〜３０日間、通常７〜１４日間
インキュベートされる。好ましくは攪拌下であるが、但
し攪拌しなくてもよい。発酵は約２０〜約４０℃範囲の
温度で好気的に行われ、攪拌は２００〜５００ ｒｐｍ
の速度である。最も良い結果を得るためには、温度は約
２４〜約３０℃、最も好ましくは約２４〜２８℃の範囲
内である。本化合物の産生に適した栄養培地のｐＨは約
５．０〜８．５、好ましくは約６．０〜７．５の範囲内
である。所望化合物の産生に関して適切な期間後、これ
は後記のように回収される。 ［００１１１活性物質は下記ステップにより回収される
： （１）アルコールを上記培地に加え、攪拌し、浸漬し、
しかる後濾過して、得られるアルコール溶液中に活性成
分を回収する； （２）アルコール溶液に水を加えてそれを主として水性
の溶液に変え、あるいは濃縮して一部のアルコールを除
去ししかる後場合により水又は塩水を加える。 （３）エステル又はケトンのような非水混和性の含酸素
有機溶媒を水性溶液に加え、液相をよく混和させて活性
成分を非水混和性溶媒層に抽出又は分配し、しかる後非
水性溶液を分離かつ濃縮する； （４）ステップ（３）で回収された物質を吸着クロマト
グラフィー又は吸着及び分配クロマトグラフィーに付し
、各クロマトグラフィー分離においてカンジダ・シュー
トトロピカリス（Ｃａｎｄｉｄａ ｐｓｅｕｄｏｔｒｏ
ｐｉｃａｌｉｓ）に対して活性を示す溶出液中の活性成
分を合併し、濃縮して、化合物■を回収する。正確には
ステップは、発酵が液体又は固体培地のいずれで行われ
たか、どの溶媒が用いられるか、及びどの吸着剤又は吸
着剤組合せが用いられるかに応じてやや変わる。発酵が
固体培地で行われる場合、第一ステップはアルコール溶
媒を発酵培地に加え、十分に混合し、しかる後濾過し、
水性アルコール濾液を回収かつ濃縮する。濾液を非水混
和性含酸素有機溶媒又は芳香族もしくはハロゲン炭化水
素溶媒で抽出又は分配し、得られた非水混和性溶媒溶液
を濃縮し、吸着クロマトグラフィーによる少なくとも１
回、通常数回の分離を行うが、分配クロマトグラフィー
と組合せてもよい。発酵が液体培地で行われる場合、菌
糸体固体物は発酵培地から濾過により回収される。アル
コールを菌糸体ケークに加え、菌糸体固体物をアルコー
ルと十分に混合した後濾過し、濾液を回収かつ濃縮する
。次いで固体培地からの単離に関して記載された場合と
同様に、アルコール水性溶液を非水混和性含酸素有機溶
媒と完全に混合して生成物を有機相に抽出又は分配し、
しかる後得られた溶液がクロマトグラフィー分離に用い
られる。固体栄養培地又は菌糸体パッドからの活性物質
の初回抽出で用いられるアルコール溶媒は、メタノール
、エタノール、イソプロパツールその他のような低級ア
ルコールのいずれであってもよい。メタノールが好まし
い。アルコール溶液から活性物質を抽出又は分配する上
で有用な非水混和性有機溶媒は、酢酸エチル、酢酸イソ
プロピル、酢酸ブチル等のようなエステル及びメチルエ
チルケトン（ブタノン）のようなケトンである。酢酸エ
チル又はブタノンが好ましい。クロマトグラフィー分離
は非イオン性樹脂を用いた慣用的カラムクロマトグラフ
ィーにより行われる。抗生物質化合物■含有分画はカン
ジダ・シュードトロピカリスを用いたバイオオートグラ
フィーにより検出される。 シリカゲルが好ましい吸着剤であるが、但し他の吸着剤
に代えてもよい。様々なグレード及びサイズのシリカゲ
ルが〔Ｅ、メルク（Ｅ、 Ｍｅｒｃｈ）から又はＥ、
Ｍ、サイエンス（Ｅ、 Ｍ、 Ｓｃ １ｅｎｃｅ）から
キーゼルゲル（Ｋｉｅｓｅｌｇｅｌ）として〕市販され
ている。ダイアイオン（Ｄｉａｉｏｎ） ＨＰ −２０
、ＨＰ−３０、ＨＰ−４０（三菱化成）及びアンバーラ
イト（Ａｍｂｅｒｌｉｔｅ） ＸＡＤ−２、ＸＡＤ−４
、ＸＡＤ１６〔ローム・アンド・ハース社（Ｒｏｈｍ
ａｎｄ Ｈａａｓ Ｃｏ、 ）〕として市販されるスチ
レン−ジビニルベンゼンコポリマーや、アルミナのよう
な他の吸着剤も用いてよい。 シリカゲルを吸着剤とする場合、メタノール／塩化メチ
レンのようなアルカノール／クロロ炭化水素混合液が溶
出液として有用である。次いで生物活性分画を合わせ、
精製のためプレパラティブＨＰＬＣカラムに付される。 溶出液を生成物回収のために濃縮するが、これは更にケ
トン抽出、最初にＮａ２ＳＯ４乾燥しかる後トルエンと
の共沸で精製してもよい。 ［００１２１本発明の化合物が広域抗真菌活性を有する
ことは、化合物■が様々な糸状菌及び酵母に対して活性
を示すディスク拡散アッセイの結果かられかる。かかる
アッセイで用いられる生物は糸状菌及び酵母である。真
菌の保存菌株はポテトデキストロース寒天〔デイフコ（
Ｄｉｆｃｏ） 〕で維持され、標準微生物技術を用いて
２週間間隔で継代される。酵母は２０％水性グリセロー
ル中−８０℃で凍結維持される。接種寒天アッセイプレ
ートはアッセイ株のタイプに応じて調製される。糸状菌
の接種原は、ストックプレートの表面を湿らせた無菌ダ
クロン綿棒でこすりとることで得られる。次いで胞子及
び菌糸体を無菌ポテトデキストロースブロス（ＰＤＢ）
１０ｍｌに懸濁し、６６０ｎｍで７０％の透過率になる
よう調整する。酵母の接種原は一夜ブロス培養物から得
られる。この培養物を６６０ｎｍの透過率が４０％又は
７０％になるようＰＤＢにより希釈する。アッセイプレ
ートは接種原を４５℃に冷却された適切な溶融寒天培地
で希釈して最終濃度４％とすることにより調製する。サ
ンプルを６゜２ｍｍ濾紙ディスクにしみ込ませ（２５μ
ｌ／デイスク）、２４℃で風乾する。次いでディスクを
無菌ピンセットで接種アッセイプレート上に置いてから
、２５％無菌水性ジメチルホキシト（ＤＭＳＯ）で再湿
潤する。アッセイプレートは２８℃又は３７℃で２４時
間インキュベートされる。インキュベート後、阻害ゾー
ンを測定し、かつ記録する。測定はその増殖がバックグ
ラウンドローンとは異なるゾーンの最遠端から行う。阻
害ゾーンは外観上次のように表される：綿毛状−ディス
クの周囲が透明で、周縁が綿毛状であるゾーン；濁状−
全体的に濁状であるゾーン；やや濁状−低レベルの増殖
が阻害ゾーン全体で識別しうるゾーン；非常に濁状−バ
ツクグラウンドローンと阻害ゾーンとの差異がほとんど
識別しえないゾーン；環状−増殖促進ゾーンがゾーンの
端部でみられる。 ［００１３］本発明の生産物は前記試験において広い抗
菌スペクトルを示した。本物質は糸状菌及び酵母に対し
て有効であり、一部の細菌に対してもある程度の活性を
示す。活性がみられる代表的真菌生物としては、アルタ
ーナリア・ソラニ（Ａｌｔｅｒｎａｒｉａ ５ｏｌａｎ
ｉ）、アスペルギルス・フラブス（Ａｓｐｅｒｇｉｌｌ
ｕｓ ｆｌａｖｕｓ）、アスペルギルス・フミガタス（
Ａｓｐｅｒｇｉｌｌｕｓ ｆｕｍｉｇａｔｕｓ）、アス
ペルギルス・ニガー（Ａｓｐｅｒｇｉｌｌｕｓ ｎｉｇ
ｅｒ）、セルコスポラ・ベチコラ（Ｃｅｒｃｏｓｐｏｒ
ａ ｂｅｔｉｃｏｌａ）、コクリオボラス・ミャベアナ
ス（Ｃｏｃｈｌｉｏｂｏｌｕｓ ｍ１ｙａｂｅｎｕｓ）
、ボトリチス・アリイ（Ｂｏ ｔｒｙｔ １ｓａ１１ｉ
ｉ）、スコプラリオプシス・コミュニス（Ｓｃｏｐｕｌ
ａｒｉｏｐｓｉｓ ｃｏｍｍｕｎｉｓ）、ペニシリウム
種、フオフ種、トリコダーマ種、カンジダ・トロピカリ
ス及びサツカロミセス・セレビシアエがある。 ［００１４］化合物■は広域抗真菌剤であるばかりでな
く、特にカンジダ・アルビカンス及びカンジダ・トロピ
カリスのような真菌感染を起こす生物に対して強力な殺
真菌性を有する。真菌感染の治療に関する優れた性質は
、培地として１％デキストロース含有イースト・ナイト
ロジェン・ベース（Ｙｅａｓｔ Ｎｉｔｒｏｇｅｎ Ｂ
ａ５ｅ） （ＹＮＢＤ） （デイフコ）を用いたマ
イクロブロス希釈アッセイによる前記生物に対する試験
結果の最少殺真菌濃度（ＭＦＣ）で示される。アッセイ
を行う場合、化合物■は１０％ジメチルスルホキシド（
ＤＭＳＯ）に溶解され、２５６０μｇ／ｍｌに希釈され
た。次いで化合物はＹＮＢＤで２５６μｇ／ｍｌに希釈
された。しかる後この懸濁液０．１５ｍ１を９６ウエル
プレートの第一列に加え（各ウェルはＹＮＤＢｏ、１５
ｍ１を含有する）、各列の第一ウェルを最終薬物濃度１
２８μｇ／ｍｌにした。次いで端から２倍希釈を行い、
１２８〜０．０６μｇ／ｍｌ範囲の最終薬物濃度を得た
。サブロー（Ｓａｂｏｕｒａｕｄ）デキストロース寒天
上で維持された酵母培養菌各種をＹＭブロス（デイフコ
）に移し、振盪下（２５Ｏｒｐｍ） ３５℃で一夜イン
キユベートした。インキュベート後、各培養物を無菌水
で希釈し、１〜５×１０６コロニ一形成単位（ＣＦＵ）
／ｍｌの最終濃度に調製した。９６六マイクロプレート
にＭＩＣ−２０００〔ダイナチック（Ｄｙｎａ ｔｅｃ
ｈ）〕を用いて１． ５μｍ／ウェルを接種し、最終菌
濃度を１．５〜７．５Ｘ１０３細胞／ウエルとした。マ
イクロプレートは３５℃で２４時間インキュベートされ
た。最少阻害濃度（ＭＩＣ）は、増殖が肉眼で認められ
ない薬物の最少濃度として記録された。ＭＩＣを記録し
た後、プレートは細胞を再懸濁させるために振盪された
。しかる後、９６六マイクロプレート中各ウエルからの
サンプル１．５μｌをサブローデキストロース寒天含有
トレーに移した。接種されたトレーは２８℃で２４時間
インキュベートされ、しかる後最少殺真菌濃度（ＭＦＣ
）が読取られた。ＭＦＣは無増殖又は３コロニ一／スポ
ツト未満を示す薬物の最少濃度として定義される。 ［００１５］７株のＣ，アルビカンスに対するＭＦＣは
１、 ０〜２． Ｏｕｇ ／ｍｌ Ｃ，）ロピカリス
に対するＭＦＣは１． ０μｇ／ｍｌであった。 ［００１６］本発明の抗真菌性質は、真菌のコントロー
ルが望まれる領域、患者又は対象に抗真菌量の化合物■
を投与することにより有効に利用できる。用いられる化
合物■の量は、コントロールされる具体的真菌生物及び
それが投与される具体的環境に依存している。様々な試
験結果から、治療用抗真菌用途としては通常約１０〜約
１００ ｍｇ／ｋｇ体重の化合物■を、薬物応答に影響
を与える患者の健康、体重、年令及び他のファクターを
考慮した上で用いうろことがわかった。これらの量はヒ
トに適した用量として示した場合、経口又は非経口投与
で１日約５００〜約５０００■の範囲内である。 ［００１７］化合物■は、後天性免疫不全症候群のよう
な免疫系がダメージを受けた患者において特に厄介なニ
ューモジステイス・カリニイ感染に対しても有用である
。Ｐ、カリニイに対する有効性はマウスを用いた研究で
証明される。代表的研究において、各々体重２２〜２４
ｇの雄Ｃ３Ｈ／Ｈｅｊマウス１０匹がＰ、カリニイ感染
の発生を誘導するため６週間にわたる飲料水へのデキサ
メタシン（８，０ｍｇ／ｌ）の添加で免疫抑制された。 感染を促進するため、マウスは低タンパク食で飼育を行
った。７週目の始めにマウスを２群に分け、双方の群に
残りの研究期間中低タンパク食と飲料水からのデキサメ
タシンを摂取させ続けた。群■のマウスには担体コント
ロールとして１日２回１０％ＤＭＳＯ溶液０． ５ｍｌ
で腹腔的注射を行った。群＝のマウスには化合物ＩＯ，
０６２５ｍｇ含有無菌水０． ５ｍｌを１日２回腹腔内
注射した（ＤＭＳＯに溶解；ＤＭＳＯの最終濃度１０％
；実用量２゜５ ｍｇ／ｋｇ）。処置は１週間継続した
。処置期間（全７週間の免疫抑制）終了後に動物を層殺
し、肺組織を摘出した。次いで組織を処理して各動物の
嚢胞数を調べた。化合物■は、コントロール動物と比較
して９３％嚢胞数を低下させた。 ［００１８］前記試験結果及びヒトに適用されるトリメ
トプリムースルファメトカゾール（ＴＭＰ−３ＭＺ）の
既知用事範囲から、ニューモジステイス・カリニイ感染
を治療又は予防するため、薬物応答に影響を与える患者
の健康、体重、年令及び他のファクター並びにヒト患者
又は動物のいずれに適用されるかを考慮して、通常約０
．５〜約２０．０■／ｋｇの化合物■が用いうろことが
わかった。これらの量はヒトに適した用量として示した
場合、好ましくは非経口投与で１日約３５〜約１５００
ｍｇの範囲内である。抗真菌又は抗ニューモジステイス
性質は、化合物■が医薬用のケースでも薬学上許容され
る生物不活性キャリアと共に治療組成物中に処方された
場合に最も有効に利用される。本組成物は、通常界面活
性分散剤の助けを借りて、慣用的配合技術に従い生物不
活性キャリアと共に処方されるが、使用がヒト又は動物
に感染する病原体のコントロールのためか、あるいは真
菌を対象とする場合に、使用が土壌もしくは植物部分の
ような農業上真菌のコントロールのためであるか又は非
生物容体における真菌のコントロールのためかに応じて
性質が変わる。新規組成物は５重量％以上の活性化合物
を含有していることが好ましい。高濃度組成物は１５％
以上、及び非治療用の場合には９０％以上まで含有して
いてもよい。本組成物を製造する場合、化合物■は適切
な慣用的キャリアと完全に混合される。非治療用の場合
、本発明の生成物は単独で又は混合物として不活性キャ
リアと共に組成物中で用いられるが、キャリアとしては
微細乾燥又は液体希釈剤、増量剤、フィラー、コンディ
ショナー及び賦形剤、例えば様々なりレー、ケイソウ士
、タルクその他、又は水及び低級アルカノールのような
様々な有機液体、例えばエタノール及びイソプロパツー
ル、又はケロセン、ベンゼン、トルエン及び他の石油蒸
留分あるいはそれらの混合物がある。治療又は医療用の
場合、本化合物は薬学上許容されるキャリアと混合され
るがその性質はその組成物が局所、非経口又は経口用の
いずれであるかに応じである程度変わる。経口投与の場
合、本化合物は水、グリコール、油、アルコール等のよ
うな液体を含めたキャリアと共に用いられるが、それに
は緩衝剤、塩化ナトリウム、デキストロース及び様々な
懸濁化、安定化、可溶化又は分散化剤を加えてもよい。 固体キャリアとしてはデンプン、糖、カオリン、エチル
セルロース、炭酸カルシウム、炭酸ナトリウム、リン酸
カルシウム、タルク、ラクトース、ステアリン酸カルシ
ウムのような滑沢剤、結合剤、崩壊剤その他がある。非
経口用の場合、本化合物は水又は他の薬学上許容される
組成物中で０．８５％塩化ナトリウム又は５％デキスト
ロースのような慣用的非経口溶液として処方される。局
所用の場合、薬剤は白色ワセリン、無水ラノリン、セチ
ルアルコール、コールドクリーム、モノステアリン酸グ
リセリル、ローズ水等のような慣用的クリーム及び軟膏
として処方される。通常５％クリーム又は溶液が製造さ
れ、治療される面に適用される。投与の容易性及び投薬
の均一性のためは単位剤形として組成物を処方すること
が特に有利である。単位剤形の組成物も本発明の一面を
なす。“単位剤形″という用語は物理的に非連続の単位
量のことで、各単位は製造キャリアと一緒になって望ま
しい治療効果を生じるよう計算された既定量の活性成分
を含有している。このような単位剤形の例は錠剤、カプ
セル、ピル、粒末色、カシェ剤、アンプル又は多用量容
器に入った測定済単位量等である。化合物■の単位剤形
は抗真菌用の場合で５００〜５０００■及び抗ニューモ
ジステイス用の場合で３５〜１５００ｍｇを含有してい
る。次いでこれらの組成物は望ましい抗真菌、抗ニュー
モジステイス又は他の抗生物質効果を得るために十分な
量で投与される。治療適用のため、本方法では治療の必
要な患者に治療上有効な抗真菌量の化合物■を投与する
。適切な用量は年令、重篤塵、体重及び他の条件に応じ
て変わる。体内投与のため、本組成物は注射で適用され
ても又は経口投与されてもよい。局所適用では、それは
コントロールが望まれる部位に適用される。それは更に
経皮デリバリ−又は吸入のような他のデリバリ−法で適
用してもよい。下記実施例は本発明について説明してい
るが、但し限定として解釈されるべきではない。
、ジクチオカエタ・シンプレックスＡＴＣＣ２０９６０
含有発酵ブロスは抗生物質産生生物の胞子又は菌糸体を
適切な培地に接種し、しかる後好気性条件下で培養する
ことにより製造される。操作では通常、最初に保存され
た培養菌を栄養種培地に接種し、抗真菌剤の産生の種菌
となる菌を、好ましくは２ステップ操作で生育させる。 接種後、フラスコは約１５〜約３０℃、好ましくは２０
〜２８℃範囲の温度で攪拌下又は非攪拌下にてインキュ
ベートされる。攪拌する場合は４００ ｒｐｍ以内、好
ましくは約２００〜２２ Ｏｒｐｍである。インキュベ
ートは２〜３０日間、好ましくは２〜４日間にわたり行
われる。増殖が盛んになったとき、通常２〜５日目口重
培養菌を抗真菌剤産生用の産生培地に接種する。第二段
階発酵を行ってもよい。その場合、培養増殖物の一部を
同様のインキュベート条件で時間を短くして用いる。接
種後、発酵産生培地は３〜３０日間、通常７〜１４日間
インキュベートされる。好ましくは攪拌下であるが、但
し攪拌しなくてもよい。発酵は約２０〜約４０℃範囲の
温度で好気的に行われ、攪拌は２００〜５００ ｒｐｍ
の速度である。最も良い結果を得るためには、温度は約
２４〜約３０℃、最も好ましくは約２４〜２８℃の範囲
内である。本化合物の産生に適した栄養培地のｐＨは約
５．０〜８．５、好ましくは約６．０〜７．５の範囲内
である。所望化合物の産生に関して適切な期間後、これ
は後記のように回収される。 ［００１１１活性物質は下記ステップにより回収される
： （１）アルコールを上記培地に加え、攪拌し、浸漬し、
しかる後濾過して、得られるアルコール溶液中に活性成
分を回収する； （２）アルコール溶液に水を加えてそれを主として水性
の溶液に変え、あるいは濃縮して一部のアルコールを除
去ししかる後場合により水又は塩水を加える。 （３）エステル又はケトンのような非水混和性の含酸素
有機溶媒を水性溶液に加え、液相をよく混和させて活性
成分を非水混和性溶媒層に抽出又は分配し、しかる後非
水性溶液を分離かつ濃縮する； （４）ステップ（３）で回収された物質を吸着クロマト
グラフィー又は吸着及び分配クロマトグラフィーに付し
、各クロマトグラフィー分離においてカンジダ・シュー
トトロピカリス（Ｃａｎｄｉｄａ ｐｓｅｕｄｏｔｒｏ
ｐｉｃａｌｉｓ）に対して活性を示す溶出液中の活性成
分を合併し、濃縮して、化合物■を回収する。正確には
ステップは、発酵が液体又は固体培地のいずれで行われ
たか、どの溶媒が用いられるか、及びどの吸着剤又は吸
着剤組合せが用いられるかに応じてやや変わる。発酵が
固体培地で行われる場合、第一ステップはアルコール溶
媒を発酵培地に加え、十分に混合し、しかる後濾過し、
水性アルコール濾液を回収かつ濃縮する。濾液を非水混
和性含酸素有機溶媒又は芳香族もしくはハロゲン炭化水
素溶媒で抽出又は分配し、得られた非水混和性溶媒溶液
を濃縮し、吸着クロマトグラフィーによる少なくとも１
回、通常数回の分離を行うが、分配クロマトグラフィー
と組合せてもよい。発酵が液体培地で行われる場合、菌
糸体固体物は発酵培地から濾過により回収される。アル
コールを菌糸体ケークに加え、菌糸体固体物をアルコー
ルと十分に混合した後濾過し、濾液を回収かつ濃縮する
。次いで固体培地からの単離に関して記載された場合と
同様に、アルコール水性溶液を非水混和性含酸素有機溶
媒と完全に混合して生成物を有機相に抽出又は分配し、
しかる後得られた溶液がクロマトグラフィー分離に用い
られる。固体栄養培地又は菌糸体パッドからの活性物質
の初回抽出で用いられるアルコール溶媒は、メタノール
、エタノール、イソプロパツールその他のような低級ア
ルコールのいずれであってもよい。メタノールが好まし
い。アルコール溶液から活性物質を抽出又は分配する上
で有用な非水混和性有機溶媒は、酢酸エチル、酢酸イソ
プロピル、酢酸ブチル等のようなエステル及びメチルエ
チルケトン（ブタノン）のようなケトンである。酢酸エ
チル又はブタノンが好ましい。クロマトグラフィー分離
は非イオン性樹脂を用いた慣用的カラムクロマトグラフ
ィーにより行われる。抗生物質化合物■含有分画はカン
ジダ・シュードトロピカリスを用いたバイオオートグラ
フィーにより検出される。 シリカゲルが好ましい吸着剤であるが、但し他の吸着剤
に代えてもよい。様々なグレード及びサイズのシリカゲ
ルが〔Ｅ、メルク（Ｅ、 Ｍｅｒｃｈ）から又はＥ、
Ｍ、サイエンス（Ｅ、 Ｍ、 Ｓｃ １ｅｎｃｅ）から
キーゼルゲル（Ｋｉｅｓｅｌｇｅｌ）として〕市販され
ている。ダイアイオン（Ｄｉａｉｏｎ） ＨＰ −２０
、ＨＰ−３０、ＨＰ−４０（三菱化成）及びアンバーラ
イト（Ａｍｂｅｒｌｉｔｅ） ＸＡＤ−２、ＸＡＤ−４
、ＸＡＤ１６〔ローム・アンド・ハース社（Ｒｏｈｍ
ａｎｄ Ｈａａｓ Ｃｏ、 ）〕として市販されるスチ
レン−ジビニルベンゼンコポリマーや、アルミナのよう
な他の吸着剤も用いてよい。 シリカゲルを吸着剤とする場合、メタノール／塩化メチ
レンのようなアルカノール／クロロ炭化水素混合液が溶
出液として有用である。次いで生物活性分画を合わせ、
精製のためプレパラティブＨＰＬＣカラムに付される。 溶出液を生成物回収のために濃縮するが、これは更にケ
トン抽出、最初にＮａ２ＳＯ４乾燥しかる後トルエンと
の共沸で精製してもよい。 ［００１２１本発明の化合物が広域抗真菌活性を有する
ことは、化合物■が様々な糸状菌及び酵母に対して活性
を示すディスク拡散アッセイの結果かられかる。かかる
アッセイで用いられる生物は糸状菌及び酵母である。真
菌の保存菌株はポテトデキストロース寒天〔デイフコ（
Ｄｉｆｃｏ） 〕で維持され、標準微生物技術を用いて
２週間間隔で継代される。酵母は２０％水性グリセロー
ル中−８０℃で凍結維持される。接種寒天アッセイプレ
ートはアッセイ株のタイプに応じて調製される。糸状菌
の接種原は、ストックプレートの表面を湿らせた無菌ダ
クロン綿棒でこすりとることで得られる。次いで胞子及
び菌糸体を無菌ポテトデキストロースブロス（ＰＤＢ）
１０ｍｌに懸濁し、６６０ｎｍで７０％の透過率になる
よう調整する。酵母の接種原は一夜ブロス培養物から得
られる。この培養物を６６０ｎｍの透過率が４０％又は
７０％になるようＰＤＢにより希釈する。アッセイプレ
ートは接種原を４５℃に冷却された適切な溶融寒天培地
で希釈して最終濃度４％とすることにより調製する。サ
ンプルを６゜２ｍｍ濾紙ディスクにしみ込ませ（２５μ
ｌ／デイスク）、２４℃で風乾する。次いでディスクを
無菌ピンセットで接種アッセイプレート上に置いてから
、２５％無菌水性ジメチルホキシト（ＤＭＳＯ）で再湿
潤する。アッセイプレートは２８℃又は３７℃で２４時
間インキュベートされる。インキュベート後、阻害ゾー
ンを測定し、かつ記録する。測定はその増殖がバックグ
ラウンドローンとは異なるゾーンの最遠端から行う。阻
害ゾーンは外観上次のように表される：綿毛状−ディス
クの周囲が透明で、周縁が綿毛状であるゾーン；濁状−
全体的に濁状であるゾーン；やや濁状−低レベルの増殖
が阻害ゾーン全体で識別しうるゾーン；非常に濁状−バ
ツクグラウンドローンと阻害ゾーンとの差異がほとんど
識別しえないゾーン；環状−増殖促進ゾーンがゾーンの
端部でみられる。 ［００１３］本発明の生産物は前記試験において広い抗
菌スペクトルを示した。本物質は糸状菌及び酵母に対し
て有効であり、一部の細菌に対してもある程度の活性を
示す。活性がみられる代表的真菌生物としては、アルタ
ーナリア・ソラニ（Ａｌｔｅｒｎａｒｉａ ５ｏｌａｎ
ｉ）、アスペルギルス・フラブス（Ａｓｐｅｒｇｉｌｌ
ｕｓ ｆｌａｖｕｓ）、アスペルギルス・フミガタス（
Ａｓｐｅｒｇｉｌｌｕｓ ｆｕｍｉｇａｔｕｓ）、アス
ペルギルス・ニガー（Ａｓｐｅｒｇｉｌｌｕｓ ｎｉｇ
ｅｒ）、セルコスポラ・ベチコラ（Ｃｅｒｃｏｓｐｏｒ
ａ ｂｅｔｉｃｏｌａ）、コクリオボラス・ミャベアナ
ス（Ｃｏｃｈｌｉｏｂｏｌｕｓ ｍ１ｙａｂｅｎｕｓ）
、ボトリチス・アリイ（Ｂｏ ｔｒｙｔ １ｓａ１１ｉ
ｉ）、スコプラリオプシス・コミュニス（Ｓｃｏｐｕｌ
ａｒｉｏｐｓｉｓ ｃｏｍｍｕｎｉｓ）、ペニシリウム
種、フオフ種、トリコダーマ種、カンジダ・トロピカリ
ス及びサツカロミセス・セレビシアエがある。 ［００１４］化合物■は広域抗真菌剤であるばかりでな
く、特にカンジダ・アルビカンス及びカンジダ・トロピ
カリスのような真菌感染を起こす生物に対して強力な殺
真菌性を有する。真菌感染の治療に関する優れた性質は
、培地として１％デキストロース含有イースト・ナイト
ロジェン・ベース（Ｙｅａｓｔ Ｎｉｔｒｏｇｅｎ Ｂ
ａ５ｅ） （ＹＮＢＤ） （デイフコ）を用いたマ
イクロブロス希釈アッセイによる前記生物に対する試験
結果の最少殺真菌濃度（ＭＦＣ）で示される。アッセイ
を行う場合、化合物■は１０％ジメチルスルホキシド（
ＤＭＳＯ）に溶解され、２５６０μｇ／ｍｌに希釈され
た。次いで化合物はＹＮＢＤで２５６μｇ／ｍｌに希釈
された。しかる後この懸濁液０．１５ｍ１を９６ウエル
プレートの第一列に加え（各ウェルはＹＮＤＢｏ、１５
ｍ１を含有する）、各列の第一ウェルを最終薬物濃度１
２８μｇ／ｍｌにした。次いで端から２倍希釈を行い、
１２８〜０．０６μｇ／ｍｌ範囲の最終薬物濃度を得た
。サブロー（Ｓａｂｏｕｒａｕｄ）デキストロース寒天
上で維持された酵母培養菌各種をＹＭブロス（デイフコ
）に移し、振盪下（２５Ｏｒｐｍ） ３５℃で一夜イン
キユベートした。インキュベート後、各培養物を無菌水
で希釈し、１〜５×１０６コロニ一形成単位（ＣＦＵ）
／ｍｌの最終濃度に調製した。９６六マイクロプレート
にＭＩＣ−２０００〔ダイナチック（Ｄｙｎａ ｔｅｃ
ｈ）〕を用いて１． ５μｍ／ウェルを接種し、最終菌
濃度を１．５〜７．５Ｘ１０３細胞／ウエルとした。マ
イクロプレートは３５℃で２４時間インキュベートされ
た。最少阻害濃度（ＭＩＣ）は、増殖が肉眼で認められ
ない薬物の最少濃度として記録された。ＭＩＣを記録し
た後、プレートは細胞を再懸濁させるために振盪された
。しかる後、９６六マイクロプレート中各ウエルからの
サンプル１．５μｌをサブローデキストロース寒天含有
トレーに移した。接種されたトレーは２８℃で２４時間
インキュベートされ、しかる後最少殺真菌濃度（ＭＦＣ
）が読取られた。ＭＦＣは無増殖又は３コロニ一／スポ
ツト未満を示す薬物の最少濃度として定義される。 ［００１５］７株のＣ，アルビカンスに対するＭＦＣは
１、 ０〜２． Ｏｕｇ ／ｍｌ Ｃ，）ロピカリス
に対するＭＦＣは１． ０μｇ／ｍｌであった。 ［００１６］本発明の抗真菌性質は、真菌のコントロー
ルが望まれる領域、患者又は対象に抗真菌量の化合物■
を投与することにより有効に利用できる。用いられる化
合物■の量は、コントロールされる具体的真菌生物及び
それが投与される具体的環境に依存している。様々な試
験結果から、治療用抗真菌用途としては通常約１０〜約
１００ ｍｇ／ｋｇ体重の化合物■を、薬物応答に影響
を与える患者の健康、体重、年令及び他のファクターを
考慮した上で用いうろことがわかった。これらの量はヒ
トに適した用量として示した場合、経口又は非経口投与
で１日約５００〜約５０００■の範囲内である。 ［００１７］化合物■は、後天性免疫不全症候群のよう
な免疫系がダメージを受けた患者において特に厄介なニ
ューモジステイス・カリニイ感染に対しても有用である
。Ｐ、カリニイに対する有効性はマウスを用いた研究で
証明される。代表的研究において、各々体重２２〜２４
ｇの雄Ｃ３Ｈ／Ｈｅｊマウス１０匹がＰ、カリニイ感染
の発生を誘導するため６週間にわたる飲料水へのデキサ
メタシン（８，０ｍｇ／ｌ）の添加で免疫抑制された。 感染を促進するため、マウスは低タンパク食で飼育を行
った。７週目の始めにマウスを２群に分け、双方の群に
残りの研究期間中低タンパク食と飲料水からのデキサメ
タシンを摂取させ続けた。群■のマウスには担体コント
ロールとして１日２回１０％ＤＭＳＯ溶液０． ５ｍｌ
で腹腔的注射を行った。群＝のマウスには化合物ＩＯ，
０６２５ｍｇ含有無菌水０． ５ｍｌを１日２回腹腔内
注射した（ＤＭＳＯに溶解；ＤＭＳＯの最終濃度１０％
；実用量２゜５ ｍｇ／ｋｇ）。処置は１週間継続した
。処置期間（全７週間の免疫抑制）終了後に動物を層殺
し、肺組織を摘出した。次いで組織を処理して各動物の
嚢胞数を調べた。化合物■は、コントロール動物と比較
して９３％嚢胞数を低下させた。 ［００１８］前記試験結果及びヒトに適用されるトリメ
トプリムースルファメトカゾール（ＴＭＰ−３ＭＺ）の
既知用事範囲から、ニューモジステイス・カリニイ感染
を治療又は予防するため、薬物応答に影響を与える患者
の健康、体重、年令及び他のファクター並びにヒト患者
又は動物のいずれに適用されるかを考慮して、通常約０
．５〜約２０．０■／ｋｇの化合物■が用いうろことが
わかった。これらの量はヒトに適した用量として示した
場合、好ましくは非経口投与で１日約３５〜約１５００
ｍｇの範囲内である。抗真菌又は抗ニューモジステイス
性質は、化合物■が医薬用のケースでも薬学上許容され
る生物不活性キャリアと共に治療組成物中に処方された
場合に最も有効に利用される。本組成物は、通常界面活
性分散剤の助けを借りて、慣用的配合技術に従い生物不
活性キャリアと共に処方されるが、使用がヒト又は動物
に感染する病原体のコントロールのためか、あるいは真
菌を対象とする場合に、使用が土壌もしくは植物部分の
ような農業上真菌のコントロールのためであるか又は非
生物容体における真菌のコントロールのためかに応じて
性質が変わる。新規組成物は５重量％以上の活性化合物
を含有していることが好ましい。高濃度組成物は１５％
以上、及び非治療用の場合には９０％以上まで含有して
いてもよい。本組成物を製造する場合、化合物■は適切
な慣用的キャリアと完全に混合される。非治療用の場合
、本発明の生成物は単独で又は混合物として不活性キャ
リアと共に組成物中で用いられるが、キャリアとしては
微細乾燥又は液体希釈剤、増量剤、フィラー、コンディ
ショナー及び賦形剤、例えば様々なりレー、ケイソウ士
、タルクその他、又は水及び低級アルカノールのような
様々な有機液体、例えばエタノール及びイソプロパツー
ル、又はケロセン、ベンゼン、トルエン及び他の石油蒸
留分あるいはそれらの混合物がある。治療又は医療用の
場合、本化合物は薬学上許容されるキャリアと混合され
るがその性質はその組成物が局所、非経口又は経口用の
いずれであるかに応じである程度変わる。経口投与の場
合、本化合物は水、グリコール、油、アルコール等のよ
うな液体を含めたキャリアと共に用いられるが、それに
は緩衝剤、塩化ナトリウム、デキストロース及び様々な
懸濁化、安定化、可溶化又は分散化剤を加えてもよい。 固体キャリアとしてはデンプン、糖、カオリン、エチル
セルロース、炭酸カルシウム、炭酸ナトリウム、リン酸
カルシウム、タルク、ラクトース、ステアリン酸カルシ
ウムのような滑沢剤、結合剤、崩壊剤その他がある。非
経口用の場合、本化合物は水又は他の薬学上許容される
組成物中で０．８５％塩化ナトリウム又は５％デキスト
ロースのような慣用的非経口溶液として処方される。局
所用の場合、薬剤は白色ワセリン、無水ラノリン、セチ
ルアルコール、コールドクリーム、モノステアリン酸グ
リセリル、ローズ水等のような慣用的クリーム及び軟膏
として処方される。通常５％クリーム又は溶液が製造さ
れ、治療される面に適用される。投与の容易性及び投薬
の均一性のためは単位剤形として組成物を処方すること
が特に有利である。単位剤形の組成物も本発明の一面を
なす。“単位剤形″という用語は物理的に非連続の単位
量のことで、各単位は製造キャリアと一緒になって望ま
しい治療効果を生じるよう計算された既定量の活性成分
を含有している。このような単位剤形の例は錠剤、カプ
セル、ピル、粒末色、カシェ剤、アンプル又は多用量容
器に入った測定済単位量等である。化合物■の単位剤形
は抗真菌用の場合で５００〜５０００■及び抗ニューモ
ジステイス用の場合で３５〜１５００ｍｇを含有してい
る。次いでこれらの組成物は望ましい抗真菌、抗ニュー
モジステイス又は他の抗生物質効果を得るために十分な
量で投与される。治療適用のため、本方法では治療の必
要な患者に治療上有効な抗真菌量の化合物■を投与する
。適切な用量は年令、重篤塵、体重及び他の条件に応じ
て変わる。体内投与のため、本組成物は注射で適用され
ても又は経口投与されてもよい。局所適用では、それは
コントロールが望まれる部位に適用される。それは更に
経皮デリバリ−又は吸入のような他のデリバリ−法で適
用してもよい。下記実施例は本発明について説明してい
るが、但し限定として解釈されるべきではない。
［００１９］
実施例１
固体発酵
土壌管として入手した培養菌を発酵に用いた。ガラスさ
じ一杯分の土壌をＫＦ種培地５０ｍ１含有の２５０ｍ１
エーレンマイヤーフラスコ内に接種した。次いで種フラ
スコを温度８５％、２６℃、２２ Ｏｒｐｍで４８時間
インキュベートした。次いで種フラスコを用いて産生培
地に接種した。２タイプの産生フラスコ、即ち（１）４
０個のバッフルのない２５０ｍ１エーレンマイヤーフラ
スコ及び（２）４個のバッフルのない２Ｌエーレンマイ
ヤーフラスコを調製した。小さな方の産生フラスコは、
基本液１０、 ０ｍｌを粉砕コーン１０．０ｇに加えて
１２１℃、１５ｐｓｉ （約１ｋｇ／ｃｍっで１５分
間オートクレーブ処理し、蒸留水１５．０ｍｌを加え、
しかる後１２１℃、１５ｐｓｉで２０分間オートクレー
ブ処理することで調製した。２Ｌフラスコは基本液８０
ｍ１を２Ｌフラスコ当たり粉砕コーン８０．０ｇに加え
て調製した。次いでフラスコを１２１℃、１５ｐｓｉで
１５分間オートクレーブ処理して滅菌し、しかる後蒸留
水１２０ｍ１を各フラスコに加え、その後に再度オート
クレーブ処理した。種増殖物を２５０ｍ１フラスコには
２． ０ｍｌ、 ２Ｌフラスコは１６ｍ１を無菌的に移
すことで１つの種フラスコで１０の２５０ｍ１フラスコ
及び１つの２Ｌフラスコを接種した。次いですべての産
生フラスコを２６℃、湿度８５％でインキュベートした
。８つの２５０ｍ１フラスコ、即ち各種フラスコで接種
されたフラスコ２個づつは静置的にインキュベートし、
他方残りは２２ Ｏｒｐｍでインキュベートした。 すべての場合において、インキュベート時間は１４日間
であった。産生フラスコは、フラスコ内容物を６５％メ
タノール（２５０ｍｋフラスコの場合４５ｍ１及び２Ｌ
フラスコの場合３６０ｍ１）で抽出した。菌糸体増殖物
を手で破壊し、ついで後フラスコを２２ Ｏｒｐｍで６
０分間攪拌することにより抽出し回収した。 ［００２０１単離 上記６５％メタノール（ＭｅＯＨ）約２Ｌを減圧蒸発で
ＩＬに濃縮した。水性残渣（ＩＬ）を飽和塩水溶液（Ｉ
Ｌ）で希釈し、２−ブタノンで抽出した。ブタノン抽出
液は減圧下で濃縮乾固したところ、全固体物２．１ｇを
含有していた。残渣をＭｅＯＨ／ ＣＨ２ＣＩ２ （
５／ ９５）に溶解し、シリカゲルクロマトグラフィー
カラム［：３０ｍ１のキーゼルゲル（Ｋｉｅｓｅｌｇｅ
ｌ） ６０． ０． ０４０〜０． ０６３ｍｍ〕に供
した。カラム５／９５ＭｅＯＨ／ＣＨ２ＣＩ２ （２
４０ｍｌ） 、７．５／９２．５ＭｅＯＨ／ＣＨ２ＣＩ
２ （７５ｍ１） 、１０／ ９０ＭｅＯＨ／ＣＨ２
ＣＩ２ （２４０ｍｌ） 、２０／８０ＭｅＯＨ／Ｃ
Ｈ２Ｃｌ２ （６０ｍ１）及び１００％Ｍｅ ＯＨ（
２４０ｍ１）からなる段階的勾配で溶出させた。６ｍｌ
づつ分画した。最強生物活性は１０／ ９０Ｍｅ ＯＨ
／ ＣＨ２ＣＩ ２で溶出した（分画６６−９５）。こ
れらの分画を合わせて濃縮し、残渣２２１ｍｇを得た。 この活性の強い分画物をｐＨ６，５の４６１５４アセト
ニトリル／１０ｍＭリン酸カリウム緩衝液２ｍｌで再調
製し、調製用ＨＰＬＣカラム〔ワットマン・マグナム（
Ｗｈａｔｍａｎ Ｍａｇｎｕｍ） ９ Ｃ＋ ｓ ９
、４ｍｍ ＩＤＸ５０ｃｍ、８ｍｌ／ｍｉｎ、ｐＨ６，
５の４６１５４アセトニトリル／１０ｍＭリン酸カリウ
ム緩衝液）に供した。最も強い生物活性分画（４ｍｌ）
は１８．０〜１８．５分で溶出したが、これを水（４ｍ
ｌ）で希釈し、２−ブタノン（８ｍｌ）で抽出した。有
機層を（Ｎａ２５Ｏ４）乾燥し、溶媒を減圧除去し、ト
ルエンとの共沸で乾燥させ、白色固体物２３■を得た。 その固体物はメタノール及びトルエンには事実上不溶性
であった。乾燥された固体物は１６８−１７３℃（分解
）の融点を有していた。ＵＶスペクトル（ＭｅＯＨ）は
２６２ｎｍ（ε＝２９，７００） 、２４０ｎｍ （ε
＝２３，７００）にλ を、及び２３０ｎｍ（ε＝２
１，６００）にショルダーを示した。 この生成物は既に詳述したＩＨＮＭＲ１１３ＣＮＭＲ１
■Ｒスペクトル及び質量スペクトルデータを有していた
。 ［００２１１実施例２ 液体発酵 メルク・カルチャー・コレクションでＭＦ５２４７とし
て維持されたジクチオカエタ・シンプレックスの凍結バ
イアル培養物（２，０ｍ１）を２５０ｍ１バツフルのな
いエーレンマイヤーフラスコ内のＫＦ種培地５０ｍ１に
接種した。次いで種フラスコを２６℃、２０ Ｏｒｐｍ
及び湿度８５％で７２時間インキュベートした。第二段
階の種培養では、接種原各１０ｍ１を４つのＫＦ種培地
５００ｍ１含有２Ｌバッフルのないエーレンマイヤーフ
ラスコの各々に接種した。種フラスコを２６℃、１８０
ｒｐｍ及び湿度８５％で４８時間インキュベートした。 第二段階種培養物２Ｌを用いて、チエマツプ（Ｃｈｅｍ
ａｐ）発酵槽内の２つの産生培地５０Ｌの各々に接種し
た。産生培地は下記組成であった：セレロース５５．０
ｇ／ｌ、グリセロール１０．０ｇ／ｌ、グリシン２．０
ｇ／ｌ、ラード水５．０ｇ／ｌ、大豆ミール５． ０ｇ
／ Ｌ ＫＨ２ＰＯ４２，Ｏｇ／ｌ、ＣＯＣｌ２ ・
６Ｈ２００，Ｏ１ｇ／ｌ、クエン酸ナトリウム２．０ｇ
／ｌ及びポリプロピレングリコールＰ２Ｏ００消泡剤〔
ダウ・ケミカル社（Ｄｏｗ Ｃｈｅｍｉｃａｌ Ｃｏ、
）） 、滅菌前にｐＨをＮａＯＨで７，０に調整し、発
酵を２６℃において空気流量１５Ｌ／ｍｉｎ及びインペ
ラー速度４００ ｒｐｍで１９２時間行った。培養期間
終了後、２つの培地を化合物■の単離のために合わせた
。 ［００２２］単離 前記８日間深部発酵の全ブロス１００Ｌを高速遠心機に
入れて、菌糸体を分離した。遠心したブロスをＨＰＬＣ
分析すると、既に得られた化合物■のサンプルと比較し
て、５％未満の所望化合物が存在するだけであることを
示したため、遠心ブロスは廃棄した。菌糸体ケーク１゜
２ｋｇを各８０／２０ＭｅＯＨ／Ｈ２０４Ｌを用い一夜
攪拌抽出を２回行った。抽出液をセライトで濾過して８
０ ／ ２０ Ｍ ｅ ＯＨ／ Ｈ２０抽出液８Ｌを得
たが、これは全固体物１６０ｇ及び所望化合物■約１０
ｇを含有すると計算された。ヘキサン４Ｌを前記で得た
メタノール／水抽出液と十分に接触させ、各層を分離し
て、ヘキサン層を捨てた飽和ＮａＣ１溶液４Ｌを抽出液
に加え、得られた溶液を塩化メチレン６Ｌで３回抽出し
た。塩化メチレン抽出液を合わせ、無水硫酸ナトリウム
で乾燥し、濃縮して、暗色残基的８０ｇを回収した。残
渣をメタノールに溶解し、シリカゲル約４００ｇに吸着
させた。メタノールを減圧除去した。次いで残渣被覆シ
リカゲルを塩化メチレンで充填したシリカゲルクロマト
グラフィーカラム（キーゼルゲル６０１．５Ｌ）の最上
部に充填した。カラムをＣＨ２ＣＩ２ （３Ｌ） 、
５／９５ＭｅＯＨ／ＣＨ２ＣＩ２ （１，３Ｌ） 、
７．５／９２．５ＭｅＯＨ／ＣＨ２ＣＩ２ （１，２
Ｌ） 、１０／９０ＭｅＯＨ／ＣＨ２ＣＩ２ （２，
５Ｌ）、１５／８５ＭｅＯＨ／ＣＨ２ＣＩ２ （ＬＬ
） 、２０／８０ＭｅＯＨ／ＣＨ２Ｃｌ２（ＩＬ）及び
１００％ＭｅＯＨ（ＬＬ）の段階的勾配により２０ｍｌ
／ｍｉｎで溶出させた。各層５００ｍ１づつの分画を集
めた。分画は既に得た化合物■を標準として用いた薄層
クロマトグラフィーにより調べた（ＴＬＣ条件：ワット
マンＫＣ＋ｓＦ、ｐＨ７，２の８０／２０ＭｅＯＨ１５
０ｍＭリン酸カリウム、Ｒｆｏ、３２、ＵＶ及び■２検
出）。化合物■は１０／ ９０Ｍｅ ＯＨ／ ＣＨ２Ｃ
Ｉ ２溶出分画であることがわかった。その分画を合わ
せ、濃縮して、暗色残渣６．２ｇを得た。残渣をメタノ
ール約２０ｍ１に溶解し、逆相フラッシュクロマトグラ
フィーカラム〔ベーカー（Ｂａｋｅｒ）オクタデシル５
０ｍ１．０．０４ｍｍ） ）の最上部のｐＨ６，５の５
０ ｍＭＫＨＰ ０４緩衝液４０ｍ１に加えた。カラム
を３３ ／ ６７ Ｍ ｅ ＯＨ／ Ｈ２０（１００ｍ
ｌ） 、５０１５０ＭｅＯＨ／Ｈ２０（２００ｍｌ）
、６０／４０ＭｅＯＨ／Ｈ２０（２００ｍ１） 、６５
／３５ＭｅＯＨ／Ｈ２０（２００ｍｌ） 、７０／３０
ＭｅＯＨ／Ｈ２０（２００ｍ１） 、８０／ ２０Ｍｅ
ＯＨ／Ｈ２０（２００ｍ１）及び１００％Ｍｅ ＯＨ
（２００ｍ１）からなる段階的勾配により５ｍｌ／ｍｉ
ｎで溶出させた。１０ｍ１づつの分画を集めた。化合物
■は６０％〜７０％分画で得られた。その分画を濃縮し
、合わせて、黄褐色固体物３．１ｇを得た。固体物３９
■を４６１５４アセトニトリル／水２ｍｌで再調製し、
プレパラティブＨＰＬＣカラム（ワットマン・マグナム
２０ ＣＩ２２２ｍｍ Ｉ ＤＸ ２５ｃｍ）に供し、
４６／２４アセトニトリル／水により１０ｍ１／ ｍｉ
ｎで溶出させた。３２〜３９分で溶出する分画を合わせ
、溶媒を減圧除去して、既に同定かつ特徴付けられた物
質と同一の］ＨＮＭＲ及びＵＶスペクトルを有する白色
固体物２３■を得た。 ［００２３］実施例３以下は化合物■含有の代表的処方
である： 処方Ａ 各々化合物１５００■を含有した圧縮錠剤１０００個は
下記処方から製造される： 化合物■
５００デンプン
７５〇二塩基性リン酸カルシウム水和物
５０００ステアリン酸カルシウム
２．５各微細粉末成分をよく
混合し、１０％デンプンペーストで造粒する。顆粒を乾
燥し、錠剤に圧縮する。 ［００２４］ ：処方用 各々化合物１５００■を含有した硬ゼラチンカプセル１
０００個は下記処方から製造される： 化合物■
５００デンプン
２５０ラクトース
７５０タルク
２５０ステアリン酸カルシウ
ム １０諸成分の均一混
合物をブレンドにより製造し、ツーピース硬ゼラチンカ
プセルに充填するために用いる。 ［００２５］下記処方を有する注射溶液２５０ｍｌは慣
用的操作により製造される： デキストロース
１２． ５ｇ水
２５０ ｍｌ化合物１
４００ ■諸成
分をブレンドし、しかる後使用のため滅菌する。 ［００２６］ ′処方ｐ 下記成分のエアゾール組成物が製造される：／キャニス
タ− 化合物Ｉ
２４■レシチン、ＮＦ液体濃縮物
１．２■トリクロロフルオロメタン
４．０２５ｇジクロロジフルオロ
メタン １２．１５ｇ
じ一杯分の土壌をＫＦ種培地５０ｍ１含有の２５０ｍ１
エーレンマイヤーフラスコ内に接種した。次いで種フラ
スコを温度８５％、２６℃、２２ Ｏｒｐｍで４８時間
インキュベートした。次いで種フラスコを用いて産生培
地に接種した。２タイプの産生フラスコ、即ち（１）４
０個のバッフルのない２５０ｍ１エーレンマイヤーフラ
スコ及び（２）４個のバッフルのない２Ｌエーレンマイ
ヤーフラスコを調製した。小さな方の産生フラスコは、
基本液１０、 ０ｍｌを粉砕コーン１０．０ｇに加えて
１２１℃、１５ｐｓｉ （約１ｋｇ／ｃｍっで１５分
間オートクレーブ処理し、蒸留水１５．０ｍｌを加え、
しかる後１２１℃、１５ｐｓｉで２０分間オートクレー
ブ処理することで調製した。２Ｌフラスコは基本液８０
ｍ１を２Ｌフラスコ当たり粉砕コーン８０．０ｇに加え
て調製した。次いでフラスコを１２１℃、１５ｐｓｉで
１５分間オートクレーブ処理して滅菌し、しかる後蒸留
水１２０ｍ１を各フラスコに加え、その後に再度オート
クレーブ処理した。種増殖物を２５０ｍ１フラスコには
２． ０ｍｌ、 ２Ｌフラスコは１６ｍ１を無菌的に移
すことで１つの種フラスコで１０の２５０ｍ１フラスコ
及び１つの２Ｌフラスコを接種した。次いですべての産
生フラスコを２６℃、湿度８５％でインキュベートした
。８つの２５０ｍ１フラスコ、即ち各種フラスコで接種
されたフラスコ２個づつは静置的にインキュベートし、
他方残りは２２ Ｏｒｐｍでインキュベートした。 すべての場合において、インキュベート時間は１４日間
であった。産生フラスコは、フラスコ内容物を６５％メ
タノール（２５０ｍｋフラスコの場合４５ｍ１及び２Ｌ
フラスコの場合３６０ｍ１）で抽出した。菌糸体増殖物
を手で破壊し、ついで後フラスコを２２ Ｏｒｐｍで６
０分間攪拌することにより抽出し回収した。 ［００２０１単離 上記６５％メタノール（ＭｅＯＨ）約２Ｌを減圧蒸発で
ＩＬに濃縮した。水性残渣（ＩＬ）を飽和塩水溶液（Ｉ
Ｌ）で希釈し、２−ブタノンで抽出した。ブタノン抽出
液は減圧下で濃縮乾固したところ、全固体物２．１ｇを
含有していた。残渣をＭｅＯＨ／ ＣＨ２ＣＩ２ （
５／ ９５）に溶解し、シリカゲルクロマトグラフィー
カラム［：３０ｍ１のキーゼルゲル（Ｋｉｅｓｅｌｇｅ
ｌ） ６０． ０． ０４０〜０． ０６３ｍｍ〕に供
した。カラム５／９５ＭｅＯＨ／ＣＨ２ＣＩ２ （２
４０ｍｌ） 、７．５／９２．５ＭｅＯＨ／ＣＨ２ＣＩ
２ （７５ｍ１） 、１０／ ９０ＭｅＯＨ／ＣＨ２
ＣＩ２ （２４０ｍｌ） 、２０／８０ＭｅＯＨ／Ｃ
Ｈ２Ｃｌ２ （６０ｍ１）及び１００％Ｍｅ ＯＨ（
２４０ｍ１）からなる段階的勾配で溶出させた。６ｍｌ
づつ分画した。最強生物活性は１０／ ９０Ｍｅ ＯＨ
／ ＣＨ２ＣＩ ２で溶出した（分画６６−９５）。こ
れらの分画を合わせて濃縮し、残渣２２１ｍｇを得た。 この活性の強い分画物をｐＨ６，５の４６１５４アセト
ニトリル／１０ｍＭリン酸カリウム緩衝液２ｍｌで再調
製し、調製用ＨＰＬＣカラム〔ワットマン・マグナム（
Ｗｈａｔｍａｎ Ｍａｇｎｕｍ） ９ Ｃ＋ ｓ ９
、４ｍｍ ＩＤＸ５０ｃｍ、８ｍｌ／ｍｉｎ、ｐＨ６，
５の４６１５４アセトニトリル／１０ｍＭリン酸カリウ
ム緩衝液）に供した。最も強い生物活性分画（４ｍｌ）
は１８．０〜１８．５分で溶出したが、これを水（４ｍ
ｌ）で希釈し、２−ブタノン（８ｍｌ）で抽出した。有
機層を（Ｎａ２５Ｏ４）乾燥し、溶媒を減圧除去し、ト
ルエンとの共沸で乾燥させ、白色固体物２３■を得た。 その固体物はメタノール及びトルエンには事実上不溶性
であった。乾燥された固体物は１６８−１７３℃（分解
）の融点を有していた。ＵＶスペクトル（ＭｅＯＨ）は
２６２ｎｍ（ε＝２９，７００） 、２４０ｎｍ （ε
＝２３，７００）にλ を、及び２３０ｎｍ（ε＝２
１，６００）にショルダーを示した。 この生成物は既に詳述したＩＨＮＭＲ１１３ＣＮＭＲ１
■Ｒスペクトル及び質量スペクトルデータを有していた
。 ［００２１１実施例２ 液体発酵 メルク・カルチャー・コレクションでＭＦ５２４７とし
て維持されたジクチオカエタ・シンプレックスの凍結バ
イアル培養物（２，０ｍ１）を２５０ｍ１バツフルのな
いエーレンマイヤーフラスコ内のＫＦ種培地５０ｍ１に
接種した。次いで種フラスコを２６℃、２０ Ｏｒｐｍ
及び湿度８５％で７２時間インキュベートした。第二段
階の種培養では、接種原各１０ｍ１を４つのＫＦ種培地
５００ｍ１含有２Ｌバッフルのないエーレンマイヤーフ
ラスコの各々に接種した。種フラスコを２６℃、１８０
ｒｐｍ及び湿度８５％で４８時間インキュベートした。 第二段階種培養物２Ｌを用いて、チエマツプ（Ｃｈｅｍ
ａｐ）発酵槽内の２つの産生培地５０Ｌの各々に接種し
た。産生培地は下記組成であった：セレロース５５．０
ｇ／ｌ、グリセロール１０．０ｇ／ｌ、グリシン２．０
ｇ／ｌ、ラード水５．０ｇ／ｌ、大豆ミール５． ０ｇ
／ Ｌ ＫＨ２ＰＯ４２，Ｏｇ／ｌ、ＣＯＣｌ２ ・
６Ｈ２００，Ｏ１ｇ／ｌ、クエン酸ナトリウム２．０ｇ
／ｌ及びポリプロピレングリコールＰ２Ｏ００消泡剤〔
ダウ・ケミカル社（Ｄｏｗ Ｃｈｅｍｉｃａｌ Ｃｏ、
）） 、滅菌前にｐＨをＮａＯＨで７，０に調整し、発
酵を２６℃において空気流量１５Ｌ／ｍｉｎ及びインペ
ラー速度４００ ｒｐｍで１９２時間行った。培養期間
終了後、２つの培地を化合物■の単離のために合わせた
。 ［００２２］単離 前記８日間深部発酵の全ブロス１００Ｌを高速遠心機に
入れて、菌糸体を分離した。遠心したブロスをＨＰＬＣ
分析すると、既に得られた化合物■のサンプルと比較し
て、５％未満の所望化合物が存在するだけであることを
示したため、遠心ブロスは廃棄した。菌糸体ケーク１゜
２ｋｇを各８０／２０ＭｅＯＨ／Ｈ２０４Ｌを用い一夜
攪拌抽出を２回行った。抽出液をセライトで濾過して８
０ ／ ２０ Ｍ ｅ ＯＨ／ Ｈ２０抽出液８Ｌを得
たが、これは全固体物１６０ｇ及び所望化合物■約１０
ｇを含有すると計算された。ヘキサン４Ｌを前記で得た
メタノール／水抽出液と十分に接触させ、各層を分離し
て、ヘキサン層を捨てた飽和ＮａＣ１溶液４Ｌを抽出液
に加え、得られた溶液を塩化メチレン６Ｌで３回抽出し
た。塩化メチレン抽出液を合わせ、無水硫酸ナトリウム
で乾燥し、濃縮して、暗色残基的８０ｇを回収した。残
渣をメタノールに溶解し、シリカゲル約４００ｇに吸着
させた。メタノールを減圧除去した。次いで残渣被覆シ
リカゲルを塩化メチレンで充填したシリカゲルクロマト
グラフィーカラム（キーゼルゲル６０１．５Ｌ）の最上
部に充填した。カラムをＣＨ２ＣＩ２ （３Ｌ） 、
５／９５ＭｅＯＨ／ＣＨ２ＣＩ２ （１，３Ｌ） 、
７．５／９２．５ＭｅＯＨ／ＣＨ２ＣＩ２ （１，２
Ｌ） 、１０／９０ＭｅＯＨ／ＣＨ２ＣＩ２ （２，
５Ｌ）、１５／８５ＭｅＯＨ／ＣＨ２ＣＩ２ （ＬＬ
） 、２０／８０ＭｅＯＨ／ＣＨ２Ｃｌ２（ＩＬ）及び
１００％ＭｅＯＨ（ＬＬ）の段階的勾配により２０ｍｌ
／ｍｉｎで溶出させた。各層５００ｍ１づつの分画を集
めた。分画は既に得た化合物■を標準として用いた薄層
クロマトグラフィーにより調べた（ＴＬＣ条件：ワット
マンＫＣ＋ｓＦ、ｐＨ７，２の８０／２０ＭｅＯＨ１５
０ｍＭリン酸カリウム、Ｒｆｏ、３２、ＵＶ及び■２検
出）。化合物■は１０／ ９０Ｍｅ ＯＨ／ ＣＨ２Ｃ
Ｉ ２溶出分画であることがわかった。その分画を合わ
せ、濃縮して、暗色残渣６．２ｇを得た。残渣をメタノ
ール約２０ｍ１に溶解し、逆相フラッシュクロマトグラ
フィーカラム〔ベーカー（Ｂａｋｅｒ）オクタデシル５
０ｍ１．０．０４ｍｍ） ）の最上部のｐＨ６，５の５
０ ｍＭＫＨＰ ０４緩衝液４０ｍ１に加えた。カラム
を３３ ／ ６７ Ｍ ｅ ＯＨ／ Ｈ２０（１００ｍ
ｌ） 、５０１５０ＭｅＯＨ／Ｈ２０（２００ｍｌ）
、６０／４０ＭｅＯＨ／Ｈ２０（２００ｍ１） 、６５
／３５ＭｅＯＨ／Ｈ２０（２００ｍｌ） 、７０／３０
ＭｅＯＨ／Ｈ２０（２００ｍ１） 、８０／ ２０Ｍｅ
ＯＨ／Ｈ２０（２００ｍ１）及び１００％Ｍｅ ＯＨ
（２００ｍ１）からなる段階的勾配により５ｍｌ／ｍｉ
ｎで溶出させた。１０ｍ１づつの分画を集めた。化合物
■は６０％〜７０％分画で得られた。その分画を濃縮し
、合わせて、黄褐色固体物３．１ｇを得た。固体物３９
■を４６１５４アセトニトリル／水２ｍｌで再調製し、
プレパラティブＨＰＬＣカラム（ワットマン・マグナム
２０ ＣＩ２２２ｍｍ Ｉ ＤＸ ２５ｃｍ）に供し、
４６／２４アセトニトリル／水により１０ｍ１／ ｍｉ
ｎで溶出させた。３２〜３９分で溶出する分画を合わせ
、溶媒を減圧除去して、既に同定かつ特徴付けられた物
質と同一の］ＨＮＭＲ及びＵＶスペクトルを有する白色
固体物２３■を得た。 ［００２３］実施例３以下は化合物■含有の代表的処方
である： 処方Ａ 各々化合物１５００■を含有した圧縮錠剤１０００個は
下記処方から製造される： 化合物■
５００デンプン
７５〇二塩基性リン酸カルシウム水和物
５０００ステアリン酸カルシウム
２．５各微細粉末成分をよく
混合し、１０％デンプンペーストで造粒する。顆粒を乾
燥し、錠剤に圧縮する。 ［００２４］ ：処方用 各々化合物１５００■を含有した硬ゼラチンカプセル１
０００個は下記処方から製造される： 化合物■
５００デンプン
２５０ラクトース
７５０タルク
２５０ステアリン酸カルシウ
ム １０諸成分の均一混
合物をブレンドにより製造し、ツーピース硬ゼラチンカ
プセルに充填するために用いる。 ［００２５］下記処方を有する注射溶液２５０ｍｌは慣
用的操作により製造される： デキストロース
１２． ５ｇ水
２５０ ｍｌ化合物１
４００ ■諸成
分をブレンドし、しかる後使用のため滅菌する。 ［００２６］ ′処方ｐ 下記成分のエアゾール組成物が製造される：／キャニス
タ− 化合物Ｉ
２４■レシチン、ＮＦ液体濃縮物
１．２■トリクロロフルオロメタン
４．０２５ｇジクロロジフルオロ
メタン １２．１５ｇ
【図１】本化合物についてＣＤ３０Ｄ中３００ＭＨｚで
測定された’ＨＮＭＲスペクトル図である。
測定された’ＨＮＭＲスペクトル図である。
【図１】
フロントページの続き
Claims (10)
- 【請求項１】 下記式： 【１】 を有しかつ３“、４”、５”Ｊ−、＋−テトラヒドロ−
３”、 ５． ７−）リヒドロキシ−６”−（ヒドロ
キシメチル）−５“−〔〔テトラヒドロ−３，４，５−
トリヒドロキシ−６−［：［（８−ヒドロキシ−１−オ
キソ−２，４−デカジェニル）オキシコメチル） −２
Ｈ−ピラン−２−イル〕オキシ〕スピロ〔イソベンゾフ
ラン−１（３Ｈ）、２“ （２Ｈ）ピラン〕−４”−イ
ル〕７−ヒトロキシー８，１４−ジメチル−２，４，８
，１０−へキサデカテトラエノエートと命名される化合
物。 - 【請求項２】 薬学上許容されるキャリアと共に請求項
１記載の化合物を含む抗生物質組成物。 - 【請求項３】 単位剤形として投薬単位当たり約３５〜
５０００ｍｇの請求項１記載の化合物を含む、請求項２
記載の組成物。 - 【請求項４】 抗真菌有効量の請求項１記載の化合物を
投与することからなる、真菌感染の治療方法。 - 【請求項５】 抗感染量の請求項１記載の化合物を哺乳
動物に投与することからなる、哺乳動物におけるニュー
モジステイス・カリニイ感染の治療又は予防方法。 - 【請求項６】 景が請求項１記載の化合物約１０〜約１
００■珈体重である、請求項５記載の方法。 - 【請求項７】 量が請求項１記載の化合物的０． ５〜
約２０．０■／ｋｇ体重である、請求項８記載の方法。 - 【請求項８】 約４．５〜約７．５重電％のデキストロ
ースを配合した液体栄養培地中で、ジクチオカエタ・シ
ンプレックス（Ｄｉｃｔｙｏｃｈａｅｔａｓｉｍｐｌｅ
ｘ）ＡＴＣＣ２０９６０株である真菌を実質量の化合物
を産生するまで培養することからなる、請求項１記載の
化合物Ｉの製造方法。 - 【請求項９】 ジクチオカエタ・シンプレックスＡＴＣ
Ｃ２０９６０に請求項１記載の化合物を産生させるのに
適した培地であって、デキストロース約４．５〜約７゜
５重量％を添加して資化性炭素、資化性窒素及び無機塩
からなる栄養培地であることを特徴とする培地。 - 【請求項１０】 栄養培地中に約０．５〜１．５重量
％のグリセロールも配合されている、請求項９記載の培
地。
Applications Claiming Priority (2)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| US479482 | 1990-02-13 | ||
| US07/479,482 US5091413A (en) | 1990-02-13 | 1990-02-13 | Antibiotic agent |
Publications (1)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| JPH04211094A true JPH04211094A (ja) | 1992-08-03 |
Family
ID=23904194
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| JP3019769A Withdrawn JPH04211094A (ja) | 1990-02-13 | 1991-02-13 | 抗生物質 |
Country Status (4)
| Country | Link |
|---|---|
| US (1) | US5091413A (ja) |
| EP (1) | EP0443654A3 (ja) |
| JP (1) | JPH04211094A (ja) |
| CA (1) | CA2036120A1 (ja) |
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|---|---|---|---|---|
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| CN110881479A (zh) * | 2019-12-04 | 2020-03-17 | 昆明理工大学 | 淡水真菌Dictyochaeta aquatica的抑菌用途 |
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|---|---|---|---|---|
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-
1991
- 1991-02-06 EP EP19910200245 patent/EP0443654A3/en not_active Withdrawn
- 1991-02-11 CA CA002036120A patent/CA2036120A1/en not_active Abandoned
- 1991-02-13 JP JP3019769A patent/JPH04211094A/ja not_active Withdrawn
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
| EP0443654A2 (en) | 1991-08-28 |
| EP0443654A3 (en) | 1992-09-02 |
| US5091413A (en) | 1992-02-25 |
| CA2036120A1 (en) | 1991-08-14 |
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Legal Events
| Date | Code | Title | Description |
|---|---|---|---|
| A300 | Application deemed to be withdrawn because no request for examination was validly filed |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A300 Effective date: 19980514 |