JPH04233457A - 尿中成分の定量分析方法 - Google Patents
尿中成分の定量分析方法Info
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- JPH04233457A JPH04233457A JP41713990A JP41713990A JPH04233457A JP H04233457 A JPH04233457 A JP H04233457A JP 41713990 A JP41713990 A JP 41713990A JP 41713990 A JP41713990 A JP 41713990A JP H04233457 A JPH04233457 A JP H04233457A
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- Investigating Or Analysing Biological Materials (AREA)
Abstract
(57)【要約】本公報は電子出願前の出願データであるた
め要約のデータは記録されません。
め要約のデータは記録されません。
Description
【０００１】
【産業上の利用分野】この発明は水晶振動子を用いた尿
中の蛋白等特定成分の定量分析方法に関する。
中の蛋白等特定成分の定量分析方法に関する。
【０００２】
【従来の技術】尿中の蛋白の量を知ることは、生体の状
態に関する情報を得る方法として有用な方法である。そ
こで近時、図４に示しているように各家庭等のトイレ（
便器）１００に尿中成分の測定装置を設け、これを電話
回線１０２で医療機関１０４と結んで、各家庭等で得ら
れたデータをオンラインで医療機関１０４に送り、医療
機関１０４において患者の健康状態をチェックできるよ
うにすることが構想されている。
態に関する情報を得る方法として有用な方法である。そ
こで近時、図４に示しているように各家庭等のトイレ（
便器）１００に尿中成分の測定装置を設け、これを電話
回線１０２で医療機関１０４と結んで、各家庭等で得ら
れたデータをオンラインで医療機関１０４に送り、医療
機関１０４において患者の健康状態をチェックできるよ
うにすることが構想されている。
【０００３】このシステムは、早朝起床尿の成分を測定
出来るという点で大きなメリットがある。尿中成分は日
差変動が大きく、食事内容と運動負荷状態，環境等によ
って影響を受け易い。従って検尿の日時によって尿中成
分は大きく変動する。このような影響を受けにくいのが
臨床的に早朝起床尿（早朝第一尿）とされており、而し
て上記構想によれば、この早朝起床尿を容易に採尿でき
、尿中成分を測定できるメリットがあるのである。
出来るという点で大きなメリットがある。尿中成分は日
差変動が大きく、食事内容と運動負荷状態，環境等によ
って影響を受け易い。従って検尿の日時によって尿中成
分は大きく変動する。このような影響を受けにくいのが
臨床的に早朝起床尿（早朝第一尿）とされており、而し
て上記構想によれば、この早朝起床尿を容易に採尿でき
、尿中成分を測定できるメリットがあるのである。
【０００４】従来、尿中の蛋白の測定方法として主に臨
床的に用いられている方法は、採取した尿を含む液を酸
性として蛋白を正に帯電させ、そしてこれにスルホサリ
チル酸を加えて蛋白とスリホサリチル酸との反応による
塩を沈澱せしめ、その沈澱により液に濁りが出ることを
利用したものである。詳述すると、まず蛋白量が既知の
、且つその含量が種々異なった尿中にスルホサリチル酸
を加えて沈澱生成せしめる。一方蛋白量の未知の尿につ
いても同様の操作を施して濁りを生ぜしめる。そして蛋
白量未知の試料の濁度を蛋白量が既知のものの濁度と目
視で比較することにより、蛋白量を知るといったもので
ある。
床的に用いられている方法は、採取した尿を含む液を酸
性として蛋白を正に帯電させ、そしてこれにスルホサリ
チル酸を加えて蛋白とスリホサリチル酸との反応による
塩を沈澱せしめ、その沈澱により液に濁りが出ることを
利用したものである。詳述すると、まず蛋白量が既知の
、且つその含量が種々異なった尿中にスルホサリチル酸
を加えて沈澱生成せしめる。一方蛋白量の未知の尿につ
いても同様の操作を施して濁りを生ぜしめる。そして蛋
白量未知の試料の濁度を蛋白量が既知のものの濁度と目
視で比較することにより、蛋白量を知るといったもので
ある。
【０００５】尿中蛋白の測定方法としては、この外、試
料の濁度を吸光度計により測定する方法も行われている
。即ち濁りを与えた試料に特定波長の光を当てて、試料
の吸光度を測定するといったものである。
料の濁度を吸光度計により測定する方法も行われている
。即ち濁りを与えた試料に特定波長の光を当てて、試料
の吸光度を測定するといったものである。
【０００６】
【発明が解決しようとする課題】しかしながら、これら
の方法は操作が煩雑であり、測定のために多大な手間と
時間とを要してしまう外、測定精度の点でも充分に満足
のいくものでなかった。また吸光度計を用いた方法では
セルの汚れが問題となり、これが測定誤差を生ぜしめる
といった問題が存していた。
の方法は操作が煩雑であり、測定のために多大な手間と
時間とを要してしまう外、測定精度の点でも充分に満足
のいくものでなかった。また吸光度計を用いた方法では
セルの汚れが問題となり、これが測定誤差を生ぜしめる
といった問題が存していた。
【０００７】そこで後者の方法にあっては、セルの汚れ
が影響しないように測定に当っては注意を払い、またセ
ルを清浄に保つように充分なメンテナンスを行うように
しており、こうした作業が面倒且つ煩雑な作業となって
いた。
が影響しないように測定に当っては注意を払い、またセ
ルを清浄に保つように充分なメンテナンスを行うように
しており、こうした作業が面倒且つ煩雑な作業となって
いた。
【０００８】またこれらの方法は、医療機関において行
う場合はよいが、上述のように家庭内のトイレにおいて
行う尿中成分の測定方法としては採用困難であり、前述
した構想を現実化する上においても簡便且つ容易，正確
に尿中成分を測定し得る方法の実現が望まれるところで
あった。
う場合はよいが、上述のように家庭内のトイレにおいて
行う尿中成分の測定方法としては採用困難であり、前述
した構想を現実化する上においても簡便且つ容易，正確
に尿中成分を測定し得る方法の実現が望まれるところで
あった。
【０００９】
【課題を解決するための手段】本発明はこのような課題
を解決するためになされたものであり、その要旨は、採
取した尿中に沈澱剤を加えて尿中の蛋白等特定種類の生
体関連物質を水晶振動子表面上に沈澱せしめ、その沈澱
前後における水晶振動子の発振周波数変化を測定するこ
とにより、前記特定関連物質の量を求めることにある。
を解決するためになされたものであり、その要旨は、採
取した尿中に沈澱剤を加えて尿中の蛋白等特定種類の生
体関連物質を水晶振動子表面上に沈澱せしめ、その沈澱
前後における水晶振動子の発振周波数変化を測定するこ
とにより、前記特定関連物質の量を求めることにある。
【００１０】［作用及び発明の効果］本発明者は、水晶
振動子表面上に付着物質がある場合、水晶振動子の発振
周波数が変化する性質を有することに着目し、これを尿
中成分の測定に適用できないかと考え、そこで尿中成分
の内の特定成分に所定の沈澱剤を作用させて水晶振動子
表面上に沈澱させ、その沈澱量と水晶振動子の発振周波
数変化とを求めたところ、それらの間に良好な比例関係
があることを見出し、本発明を完成させた。
振動子表面上に付着物質がある場合、水晶振動子の発振
周波数が変化する性質を有することに着目し、これを尿
中成分の測定に適用できないかと考え、そこで尿中成分
の内の特定成分に所定の沈澱剤を作用させて水晶振動子
表面上に沈澱させ、その沈澱量と水晶振動子の発振周波
数変化とを求めたところ、それらの間に良好な比例関係
があることを見出し、本発明を完成させた。
【００１１】図３はかかる本発明の原理をモデル的に示
したものである。図に示しているように本発明では、尿
を含む液１中に沈澱剤を作用させて、尿中に溶けている
蛋白２等特定成分を水晶振動子３の表面上に沈澱させる
。すると水晶振動子３の発振周波数が変化し、そしてそ
の周波数変化は水晶振動子３表面の沈澱量に比例するこ
とから、水晶振動子３の周波数変化を測定し、以て尿中
成分の量を定量的に求めようとするものである。
したものである。図に示しているように本発明では、尿
を含む液１中に沈澱剤を作用させて、尿中に溶けている
蛋白２等特定成分を水晶振動子３の表面上に沈澱させる
。すると水晶振動子３の発振周波数が変化し、そしてそ
の周波数変化は水晶振動子３表面の沈澱量に比例するこ
とから、水晶振動子３の周波数変化を測定し、以て尿中
成分の量を定量的に求めようとするものである。
【００１２】かかる本発明によれば、従来の方法のよう
に尿中成分の測定に際して成分濃度が既知の且つ濃度の
異なった（濁度の異なった）複数の比較サンプルを用意
するといったことが必要でなく、簡単な操作で且つ短い
時間で測定を行うことができる。また吸光度測定の場合
のように、セルの汚れが測定値に影響を与えるといった
不具合を回避できる。
に尿中成分の測定に際して成分濃度が既知の且つ濃度の
異なった（濁度の異なった）複数の比較サンプルを用意
するといったことが必要でなく、簡単な操作で且つ短い
時間で測定を行うことができる。また吸光度測定の場合
のように、セルの汚れが測定値に影響を与えるといった
不具合を回避できる。
【００１３】尚、本発明方法によれば尿中成分を自動的
に、装置的に簡便に測定することが可能となり、これに
より上述したように各家庭等と医療機関とをオンライン
で結んで患者の健康状態のチェックを行う構想を現実の
ものとすることができる。
に、装置的に簡便に測定することが可能となり、これに
より上述したように各家庭等と医療機関とをオンライン
で結んで患者の健康状態のチェックを行う構想を現実の
ものとすることができる。
【００１４】本発明方法の場合、尿中成分を高精度で定
量分析することができる。例えば尿中蛋白の場合、５ｍ
ｇ／ｄｌまで正確に測定できることが確認されている。
量分析することができる。例えば尿中蛋白の場合、５ｍ
ｇ／ｄｌまで正確に測定できることが確認されている。
【００１５】尿中蛋白の測定において、蛋白尿陽性と判
定される下限値は、尿中に蛋白が１５０ｍｇ／日検出さ
れた場合であり、これを１回あたりの尿中蛋白の量に換
算すると、１５ｍｇ／ｄｌとなる。即ち１５ｍｇ／ｄｌ
以下であれば健常人であり、１５ｍｇ／ｄｌ以下の数値
は特に問題とならないのである。
定される下限値は、尿中に蛋白が１５０ｍｇ／日検出さ
れた場合であり、これを１回あたりの尿中蛋白の量に換
算すると、１５ｍｇ／ｄｌとなる。即ち１５ｍｇ／ｄｌ
以下であれば健常人であり、１５ｍｇ／ｄｌ以下の数値
は特に問題とならないのである。
【００１６】このため、従来尿中蛋白の測定方法として
簡便に行われている試験紙を用いた方法、具体的には尿
中に試験紙を浸漬してその色の変化により蛋白が出てい
るか否かを判定する方法においても、判定可能な量が１
５ｍｇ／ｄｌとされている。これより少ない蛋白量につ
いてはこの試験紙による方法では判別困難であり、また
前述した濁りを目視により判定する方法においても、１
５ｍｇ／ｄｌ以下の量は目視による判定は困難である。 しかるに本発明によれば、５ｍｇ／ｄｌまでも容易に測
定することができ、高精度で尿中蛋白量を知ることがで
きるのである。
簡便に行われている試験紙を用いた方法、具体的には尿
中に試験紙を浸漬してその色の変化により蛋白が出てい
るか否かを判定する方法においても、判定可能な量が１
５ｍｇ／ｄｌとされている。これより少ない蛋白量につ
いてはこの試験紙による方法では判別困難であり、また
前述した濁りを目視により判定する方法においても、１
５ｍｇ／ｄｌ以下の量は目視による判定は困難である。 しかるに本発明によれば、５ｍｇ／ｄｌまでも容易に測
定することができ、高精度で尿中蛋白量を知ることがで
きるのである。
【００１７】
【実施例】次に本発明を更に明確にすべく、以下にその
実施例を詳述する。標準用蛋白としてのＢＳＡ（牛血清
アルブミン）溶液（０．１Ｍ，リン酸緩衝液ＰＨ＝７．
０）５００μｌに５％酢酸を加えて液を酸性状態とし、
その液中に水晶振動子を浸漬状態で発振周波数を測定し
た。次に液中に２０％スルホサリチル酸を３０μｌ加え
て、液中に溶解していたＢＳＡを液中に浸漬状態の水晶
振動子表面上に沈澱させ、水晶振動子の発振周波数を測
定した。このようにしてＢＳＡ量の種々異なる液につい
て同様の試験を行い、水晶振動子の発振周波数変化とＢ
ＳＡ量の関係を求めた。図２はこの結果を表している。 図２から、ＢＳＡ量と周波数変化とは比例関係にあるこ
と、また発振周波数変化を測定することによってＢＳＡ
量５ｍｇ／ｄｌ程度まで精度良く検出できることが分か
る。
実施例を詳述する。標準用蛋白としてのＢＳＡ（牛血清
アルブミン）溶液（０．１Ｍ，リン酸緩衝液ＰＨ＝７．
０）５００μｌに５％酢酸を加えて液を酸性状態とし、
その液中に水晶振動子を浸漬状態で発振周波数を測定し
た。次に液中に２０％スルホサリチル酸を３０μｌ加え
て、液中に溶解していたＢＳＡを液中に浸漬状態の水晶
振動子表面上に沈澱させ、水晶振動子の発振周波数を測
定した。このようにしてＢＳＡ量の種々異なる液につい
て同様の試験を行い、水晶振動子の発振周波数変化とＢ
ＳＡ量の関係を求めた。図２はこの結果を表している。 図２から、ＢＳＡ量と周波数変化とは比例関係にあるこ
と、また発振周波数変化を測定することによってＢＳＡ
量５ｍｇ／ｄｌ程度まで精度良く検出できることが分か
る。
【００１８】次に図１は、便器に受けた尿の中の蛋白を
自動的に測定する場合の例を示したもので、図中１０は
測定セルであり、水晶振動子１２及びこれをサンドイッ
チ状に挟む一対の電極１４を有している。この測定セル
１０は、恒温槽１３の水の循環流によって一定温度に保
持されるようになっている。
自動的に測定する場合の例を示したもので、図中１０は
測定セルであり、水晶振動子１２及びこれをサンドイッ
チ状に挟む一対の電極１４を有している。この測定セル
１０は、恒温槽１３の水の循環流によって一定温度に保
持されるようになっている。
【００１９】１６は発振回路でこれには周波数カウンタ
ー１８が接続され、この周波数カウンター１８にマイク
ロコンピューター２０が接続されている。マイクロコン
ピューター２０は、測定データの演算処理を行う。
ー１８が接続され、この周波数カウンター１８にマイク
ロコンピューター２０が接続されている。マイクロコン
ピューター２０は、測定データの演算処理を行う。
【００２０】上記恒温槽１３内には、酢酸溶液２４，ス
ルホサリチル酸溶液２６をそれぞれ収容する容器が保持
されており、それぞれ反応コイル２８の上流側及び下流
側において管路２９に接続されている。スルホサリチル
酸２６を収容する容器と管路２９との接続部には電磁弁
３０が配設されており、流路の切替がなされるようにな
っている。尚３４は便器３６に設けられた採尿シリンダ
で、３２は定量ポンプである。
ルホサリチル酸溶液２６をそれぞれ収容する容器が保持
されており、それぞれ反応コイル２８の上流側及び下流
側において管路２９に接続されている。スルホサリチル
酸２６を収容する容器と管路２９との接続部には電磁弁
３０が配設されており、流路の切替がなされるようにな
っている。尚３４は便器３６に設けられた採尿シリンダ
で、３２は定量ポンプである。
【００２１】この実施例では、便器３６中に放出された
尿の一部が採尿シリンダ３４に採取されてここから管路
２９中に送られ、そしてその途中でこれに酢酸２４が加
えられてそれらが反応コイル２８を通過する際に充分に
混合される。混合液は電磁弁３０を経てセル１０内に送
られ、水晶振動子１２がその液中に浸漬される。この状
態で水晶振動子１２が発振させられ、その発振周波数が
周波数カウンタ１８によってカウントされ、マイクロコ
ンピュータ２０に送られる。
尿の一部が採尿シリンダ３４に採取されてここから管路
２９中に送られ、そしてその途中でこれに酢酸２４が加
えられてそれらが反応コイル２８を通過する際に充分に
混合される。混合液は電磁弁３０を経てセル１０内に送
られ、水晶振動子１２がその液中に浸漬される。この状
態で水晶振動子１２が発振させられ、その発振周波数が
周波数カウンタ１８によってカウントされ、マイクロコ
ンピュータ２０に送られる。
【００２２】次に電磁弁３０が操作されて尿と酢酸２４
との混合液中にスルホサリチル酸２６が加えられ、それ
らの混合液がセル１０内に導かれる。而してスルホサリ
チル酸２６が加えられ、その混合液がセル１０に導かれ
ると、水晶振動子１２表面上に蛋白とスルホサリチル酸
との塩が沈澱する。そこで沈澱後の水晶振動子１２の発
振周波数を再び周波数カウンタ１８にてカウントし、マ
イクロコンピュータ２０に送るとそこで演算処理が行わ
れ、蛋白の量が導き出される。
との混合液中にスルホサリチル酸２６が加えられ、それ
らの混合液がセル１０内に導かれる。而してスルホサリ
チル酸２６が加えられ、その混合液がセル１０に導かれ
ると、水晶振動子１２表面上に蛋白とスルホサリチル酸
との塩が沈澱する。そこで沈澱後の水晶振動子１２の発
振周波数を再び周波数カウンタ１８にてカウントし、マ
イクロコンピュータ２０に送るとそこで演算処理が行わ
れ、蛋白の量が導き出される。
【００２３】本方法によれば、特別な操作を施さなくて
も尿中の蛋白を自動的に測定することができ、場合によ
ってその測定データをオンラインで医療機関へ送るよう
にすることができる。このようにすれば、便器使用者で
ある患者の健康状態を、通常の日常生活の中で自動的に
チェックできるようになる。
も尿中の蛋白を自動的に測定することができ、場合によ
ってその測定データをオンラインで医療機関へ送るよう
にすることができる。このようにすれば、便器使用者で
ある患者の健康状態を、通常の日常生活の中で自動的に
チェックできるようになる。
【００２４】尚、本方法においてスルホサリチル酸２６
と反応して沈澱した蛋白は水晶振動子１２表面に付着せ
ず、次の液が送られてくると自動的に洗い流されるが、
スルホサリチル酸２６と反応する前の未反応の蛋白につ
いては、水晶振動子１２表面に付着する恐れがある。而
してこのような付着が次々と行われて累積していくと、
測定誤差を生じる原因となる。
と反応して沈澱した蛋白は水晶振動子１２表面に付着せ
ず、次の液が送られてくると自動的に洗い流されるが、
スルホサリチル酸２６と反応する前の未反応の蛋白につ
いては、水晶振動子１２表面に付着する恐れがある。而
してこのような付着が次々と行われて累積していくと、
測定誤差を生じる原因となる。
【００２５】このような場合、１回の測定毎に水晶振動
子１２表面上の蛋白を脱離させるための脱離剤を流すよ
うにすると好都合である。ここで蛋白の脱離剤としては
ペプシン，プロテアーゼ等の蛋白分解酵素や界面活性剤
，酸その他のものを用いることができる。因みに１０回
の測定において２回目以降にプロテアーゼを用いて蛋白
の脱離処理を行った場合、処理を行わなかったものに比
較し、ＣＶ値において約３倍の再現性が見られた。表１
はその比較結果を示している。尚ここでＣＶ値とは、式
数１に表わされる値であって標準偏差Ｓの、平均値Ｘバ
ーに対する相対値で、変動係数と呼ばれる。
子１２表面上の蛋白を脱離させるための脱離剤を流すよ
うにすると好都合である。ここで蛋白の脱離剤としては
ペプシン，プロテアーゼ等の蛋白分解酵素や界面活性剤
，酸その他のものを用いることができる。因みに１０回
の測定において２回目以降にプロテアーゼを用いて蛋白
の脱離処理を行った場合、処理を行わなかったものに比
較し、ＣＶ値において約３倍の再現性が見られた。表１
はその比較結果を示している。尚ここでＣＶ値とは、式
数１に表わされる値であって標準偏差Ｓの、平均値Ｘバ
ーに対する相対値で、変動係数と呼ばれる。
【００２６】
【数１】
【００２７】
【表１】
【００２８】以上本発明の実施例を詳述したが、これは
あくまで本発明の一例示であり、本発明はその主旨を逸
脱しない範囲において、当業者の知識に基づき様々な変
更を加えた態様で実施可能である。
あくまで本発明の一例示であり、本発明はその主旨を逸
脱しない範囲において、当業者の知識に基づき様々な変
更を加えた態様で実施可能である。
【図１】本発明において得られたＢＳＡ濃度と水晶振動
子の発振周波数変化との関係を示す図である。
子の発振周波数変化との関係を示す図である。
【図２】本発明の一実施例を示す系統図である。
【図３】本発明の原理の説明図である。
【図４】本発明の一利用形態を示す説明図である。
１０ 測定セル
１２ 水晶振動子
１６ 発振回路
１８ 周波数カウンタ
２４ 酢酸
２６ スルホサリチル酸
Claims (1)
- 【請求項１】 採取した尿中に沈澱剤を加えて、尿中
の蛋白等特定種類の生体関連物質を水晶振動子表面上に
沈澱せしめ、その沈澱前後における水晶振動子の発振周
波数変化を測定することにより、前記特定関連物質の量
を求めることを特徴とする尿中成分の定量分析方法。
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP2417139A JPH0760157B2 (ja) | 1990-12-28 | 1990-12-28 | 尿中成分の定量分析方法 |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP2417139A JPH0760157B2 (ja) | 1990-12-28 | 1990-12-28 | 尿中成分の定量分析方法 |
Publications (2)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| JPH04233457A true JPH04233457A (ja) | 1992-08-21 |
| JPH0760157B2 JPH0760157B2 (ja) | 1995-06-28 |
Family
ID=18525272
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| JP2417139A Expired - Fee Related JPH0760157B2 (ja) | 1990-12-28 | 1990-12-28 | 尿中成分の定量分析方法 |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| JP (1) | JPH0760157B2 (ja) |
Cited By (1)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN114930163A (zh) * | 2020-02-25 | 2022-08-19 | 喜利得股份公司 | 用于电容式确定材料中的物质的比例的装置和方法 |
-
1990
- 1990-12-28 JP JP2417139A patent/JPH0760157B2/ja not_active Expired - Fee Related
Cited By (1)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN114930163A (zh) * | 2020-02-25 | 2022-08-19 | 喜利得股份公司 | 用于电容式确定材料中的物质的比例的装置和方法 |
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
| JPH0760157B2 (ja) | 1995-06-28 |
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