JPH04258284A - 増殖速度を簡易に測定できる培養器 - Google Patents
増殖速度を簡易に測定できる培養器Info
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- JPH04258284A JPH04258284A JP1654991A JP1654991A JPH04258284A JP H04258284 A JPH04258284 A JP H04258284A JP 1654991 A JP1654991 A JP 1654991A JP 1654991 A JP1654991 A JP 1654991A JP H04258284 A JPH04258284 A JP H04258284A
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Classifications
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12M—APPARATUS FOR ENZYMOLOGY OR MICROBIOLOGY; APPARATUS FOR CULTURING MICROORGANISMS FOR PRODUCING BIOMASS, FOR GROWING CELLS OR FOR OBTAINING FERMENTATION OR METABOLIC PRODUCTS, i.e. BIOREACTORS OR FERMENTERS
- C12M23/00—Constructional details, e.g. recesses, hinges
- C12M23/02—Form or structure of the vessel
- C12M23/08—Flask, bottle or test tube
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
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- C12M37/00—Means for sterilizing, maintaining sterile conditions or avoiding chemical or biological contamination
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Abstract
(57)【要約】本公報は電子出願前の出願データであるた
め要約のデータは記録されません。
め要約のデータは記録されません。
Description
【０００１】
【産業上の利用分野】本発明は、植物細胞や微生物の増
殖速度を簡易に測定することのできる培養器に関する。
殖速度を簡易に測定することのできる培養器に関する。
【０００２】
【従来の技術】植物の細胞培養において、増殖速度の速
いものを得るための一次スクリーニングを行なうには、
細胞の増殖速度を簡易に測定することが必要である。
いものを得るための一次スクリーニングを行なうには、
細胞の増殖速度を簡易に測定することが必要である。
【０００３】この目的で従来行なわれて来た手段は、培
養液の一部をサンプリングして、細胞の容量または重量
を測定することである。 重量を測定するには細胞を
液から分離しなければならないが、容量は、メスシリン
ダーに液を入れて静置し、沈降した細胞の量を読みとる
ことにより測定できる。
養液の一部をサンプリングして、細胞の容量または重量
を測定することである。 重量を測定するには細胞を
液から分離しなければならないが、容量は、メスシリン
ダーに液を入れて静置し、沈降した細胞の量を読みとる
ことにより測定できる。
【０００４】しかし、いずれの測定法をとるにしても、
サンプリングにより培養液量が減少するという問題があ
る上、それにより増殖速度が影響を受け、正確な結果が
得られないおそれがある。 また、サンプリングに際
して、雑菌により汚染される可能性が高い。 このよ
うな問題を避けるため、多数の培養フラスコを並べて培
養し、一定時間経過したところで、そのうちのたとえば
３本をとり、細胞量を測定してそれらの平均値をもって
細胞量とすることが行なわれる。 いうまでもなく、
この方法は面倒であり費用が嵩む。
サンプリングにより培養液量が減少するという問題があ
る上、それにより増殖速度が影響を受け、正確な結果が
得られないおそれがある。 また、サンプリングに際
して、雑菌により汚染される可能性が高い。 このよ
うな問題を避けるため、多数の培養フラスコを並べて培
養し、一定時間経過したところで、そのうちのたとえば
３本をとり、細胞量を測定してそれらの平均値をもって
細胞量とすることが行なわれる。 いうまでもなく、
この方法は面倒であり費用が嵩む。
【０００５】サンプリングによる培養液の減少がなく雑
菌汚染の心配も少なく、細胞増殖速度を簡易に測定する
ことのできる培養器として、三角フラスコの側面に目盛
りつき試験管を、その底が若干下方に位置するよう傾斜
させて結合させた枝付三角フラスコが提案された（朝倉
書店「植物バイオテクノロジー事典」第２２８頁）。こ
れは、測定時に容器を傾けて一定量の培養液を枝管の方
へ移し、枝管が垂直になるように保持して一定時間静置
し、沈降した細胞の容量を読むものである。
菌汚染の心配も少なく、細胞増殖速度を簡易に測定する
ことのできる培養器として、三角フラスコの側面に目盛
りつき試験管を、その底が若干下方に位置するよう傾斜
させて結合させた枝付三角フラスコが提案された（朝倉
書店「植物バイオテクノロジー事典」第２２８頁）。こ
れは、測定時に容器を傾けて一定量の培養液を枝管の方
へ移し、枝管が垂直になるように保持して一定時間静置
し、沈降した細胞の容量を読むものである。
【０００６】上記の目的はこのような工夫で達成できる
が、実用上はなお、この培養器にもいくつかの難点が残
っている。 すなわち、目盛りつきの枝管を垂直に保
持するために特別の治具が必要であるという問題は忍ぶ
としても、培養器を並べておく場所が枝管の分だけ余分
に必要であるし、使用後の洗淨が容易でない。 最大
の問題は、測定のため枝管に移行させた一部の培養液を
完全に容器に戻すことが難しいことで、そこに培養液が
残れば全体として培養条件が違ってくる。
が、実用上はなお、この培養器にもいくつかの難点が残
っている。 すなわち、目盛りつきの枝管を垂直に保
持するために特別の治具が必要であるという問題は忍ぶ
としても、培養器を並べておく場所が枝管の分だけ余分
に必要であるし、使用後の洗淨が容易でない。 最大
の問題は、測定のため枝管に移行させた一部の培養液を
完全に容器に戻すことが難しいことで、そこに培養液が
残れば全体として培養条件が違ってくる。
【０００７】
【発明が解決しようとする課題】本発明の目的は、上述
のような従来技術の問題を一掃し、培養に場所をとらず
、増殖速度を簡易に測定することができるとともに測定
が増殖に影響を与えることがなく、雑菌汚染の心配もな
く、かつ洗淨も容易な培養器を提供することにある。
のような従来技術の問題を一掃し、培養に場所をとらず
、増殖速度を簡易に測定することができるとともに測定
が増殖に影響を与えることがなく、雑菌汚染の心配もな
く、かつ洗淨も容易な培養器を提供することにある。
【０００８】
【課題を解決するための手段】本発明の増殖速度を簡易
に測定できる培養器は、図１に示すように、空気流路（
２）をそなえた容器である増殖部（１）と、その直上に
位置する、透明な材料で製作した有底管状の測定部（３
）とから成り、測定部の下端と増殖部の上端とは円錐面
のスリ合わせ（４）によってほぼ気密に結合することが
できるように組み合わされていることを特徴とする。
に測定できる培養器は、図１に示すように、空気流路（
２）をそなえた容器である増殖部（１）と、その直上に
位置する、透明な材料で製作した有底管状の測定部（３
）とから成り、測定部の下端と増殖部の上端とは円錐面
のスリ合わせ（４）によってほぼ気密に結合することが
できるように組み合わされていることを特徴とする。
【０００９】図１において、符号（５）は、増殖部のヘ
ッドスペースを外気と無菌的に連絡させるための、フィ
ルターである。 これはフィルターに限らず、カビや
細菌の侵入を防止して空気を通すものであれば、何でも
よい。 たとえば、綿栓、シリコーン栓を用いること
ができるし、簡易にはアルミ箔で覆うだけで足りること
もある。
ッドスペースを外気と無菌的に連絡させるための、フィ
ルターである。 これはフィルターに限らず、カビや
細菌の侵入を防止して空気を通すものであれば、何でも
よい。 たとえば、綿栓、シリコーン栓を用いること
ができるし、簡易にはアルミ箔で覆うだけで足りること
もある。
【００１０】測定部（３）は、上端が円い試験管底の形
であってもよい。 増殖部（１）と測定部（３）との
結合部分は、図１のように円錐形を組み合わせた形状の
ほか、これと逆の、増殖部の上端を先の拡大する形とし
、測定部の下端を先のすぼまる形とした組み合わせも可
能である。
であってもよい。 増殖部（１）と測定部（３）との
結合部分は、図１のように円錐形を組み合わせた形状の
ほか、これと逆の、増殖部の上端を先の拡大する形とし
、測定部の下端を先のすぼまる形とした組み合わせも可
能である。
【００１１】増殖部（１）および測定部（３）は、多く
の培養器がそうであるように、ともにガラス製とし、測
定部（３）には目盛りを設けることが好ましい。
の培養器がそうであるように、ともにガラス製とし、測
定部（３）には目盛りを設けることが好ましい。
【００１２】測定部（３）の内壁には、シリコーンのよ
うな撥水性の塗料でコーティングしておくとよい。
うな撥水性の塗料でコーティングしておくとよい。
【００１３】
【作用】この培養器は、培養に使用するときには在来の
三角フラスコ培養器などと同様であるが、単なる蓋に代
えて有底管状の測定部を増殖部にかぶせ、スリ合わせに
より気密に保つ。 測定部が増殖部の真上にあるため
、培養に当って上方のスペースは若干要するが、枝管が
張り出す形状でないから、配置の水平面積は単なる三角
フラスコなどと変らない。
三角フラスコ培養器などと同様であるが、単なる蓋に代
えて有底管状の測定部を増殖部にかぶせ、スリ合わせに
より気密に保つ。 測定部が増殖部の真上にあるため
、培養に当って上方のスペースは若干要するが、枝管が
張り出す形状でないから、配置の水平面積は単なる三角
フラスコなどと変らない。
【００１４】細胞量を測定すべき時点に至ったならば、
全体を倒立させて測定部（３）を下に、増殖部（１）を
上にする。 このとき、空気流路（５）の反対側を通
って培養液が移行するようにする。 倒立したまま一
定の時間保持することによって、増殖した細胞は測定部
（３）の底に沈降するから、その容量を目盛りで読みと
ることによって、全く容易に増殖の度合を測定できる。 １８０°の倒立状態を保つことは特定の角度に保つ
ことにくらべてはるかに容易であって、測定部の底に図
示したようなフランジを設けることにより、転倒の防止
さえできれば、それ以上は特別の治具を要することなく
保持できる。
全体を倒立させて測定部（３）を下に、増殖部（１）を
上にする。 このとき、空気流路（５）の反対側を通
って培養液が移行するようにする。 倒立したまま一
定の時間保持することによって、増殖した細胞は測定部
（３）の底に沈降するから、その容量を目盛りで読みと
ることによって、全く容易に増殖の度合を測定できる。 １８０°の倒立状態を保つことは特定の角度に保つ
ことにくらべてはるかに容易であって、測定部の底に図
示したようなフランジを設けることにより、転倒の防止
さえできれば、それ以上は特別の治具を要することなく
保持できる。
【００１５】測定が終ったならば、全体を再び正立位置
に戻して、培養を続ける。 このときも、倒立移行時
と同様に、空気流路の方へ培養液が回らないように注意
すべきである。
に戻して、培養を続ける。 このときも、倒立移行時
と同様に、空気流路の方へ培養液が回らないように注意
すべきである。
【００１６】上記の原理から明らかなように、細胞量の
測定にはその培養器内の全培養液が関与するから、測定
値はきわめて正確である。 また外気と触れる機会が
ないから、雑菌汚染は生じない。 測定部に入った培
養液は、再び正立位置にしたときにすべて増殖部に戻る
から、培養条件は影響を受けない。 測定部内壁に撥
水性コーティングを施した好ましい態様によれば、この
効果はいっそう確実である。使用後は増殖部と測定部と
を分けることができるから、洗淨が容易なことは説明を
要しないであろう。
測定にはその培養器内の全培養液が関与するから、測定
値はきわめて正確である。 また外気と触れる機会が
ないから、雑菌汚染は生じない。 測定部に入った培
養液は、再び正立位置にしたときにすべて増殖部に戻る
から、培養条件は影響を受けない。 測定部内壁に撥
水性コーティングを施した好ましい態様によれば、この
効果はいっそう確実である。使用後は増殖部と測定部と
を分けることができるから、洗淨が容易なことは説明を
要しないであろう。
【００１７】なお、１個の増殖部に対して、容量の異な
る測定部を２個以上組み合わせることが可能である。
それにより、種々の培養物に対応できるほか、培養の
初期は後期とで測定部を交換して、細胞量の大小に応じ
て常に高精度の測定を行なうことができる。
る測定部を２個以上組み合わせることが可能である。
それにより、種々の培養物に対応できるほか、培養の
初期は後期とで測定部を交換して、細胞量の大小に応じ
て常に高精度の測定を行なうことができる。
【００１８】
【実施例】培地量１００ｍｌを予定して、容量５００ｍ
ｌの三角フラスコの口部を先のすぼまる円錐形に加工し
て増殖部とし、一方、その口径とほぼ同じ径の小型メス
シリンダーの口部を先の拡大する円錐形に加工して測定
部とし、両方をスリ合わせて、図１の形の培養器とした
。
ｌの三角フラスコの口部を先のすぼまる円錐形に加工し
て増殖部とし、一方、その口径とほぼ同じ径の小型メス
シリンダーの口部を先の拡大する円錐形に加工して測定
部とし、両方をスリ合わせて、図１の形の培養器とした
。
【００１９】この培養器にＭＳＫ２変成培地１００ｍｌ
を入れ、ゼニゴケの細胞２ｍｌを懸濁させて、温度２５
℃、１０，０００ルクスの照光下、１００ｒｐｍ で振
とうしながら培養を行なった。
を入れ、ゼニゴケの細胞２ｍｌを懸濁させて、温度２５
℃、１０，０００ルクスの照光下、１００ｒｐｍ で振
とうしながら培養を行なった。
【００２０】培養中、１日に１回、培養器を倒立させて
１５分間静置し、測定部に沈降した細胞の容量を読みと
ることにより、増殖の状況を測定した。
１５分間静置し、測定部に沈降した細胞の容量を読みと
ることにより、増殖の状況を測定した。
【００２１】培養日数に対する細胞容量の増加をプロッ
トして、図２の結果を得た。 増殖は順調で、測定が
それに何ら影響を与えていないことが確認できた。
トして、図２の結果を得た。 増殖は順調で、測定が
それに何ら影響を与えていないことが確認できた。
【００２２】
【発明の効果】本発明の培養器は、細胞量の測定が容易
であり、測定が培養に影響を与えず、雑菌汚染の心配も
ない。 培養時に占める面積は従来のフラスコなどと
変らないし、測定に特別の治具も必要としない。 こ
のことと、実験終了後は増殖部と測定部とを分離でき、
洗淨が容易であることを含め、実験に要する労力は少な
い。 また、測定対象によって測定部の容量を変えることもで
きる。
であり、測定が培養に影響を与えず、雑菌汚染の心配も
ない。 培養時に占める面積は従来のフラスコなどと
変らないし、測定に特別の治具も必要としない。 こ
のことと、実験終了後は増殖部と測定部とを分離でき、
洗淨が容易であることを含め、実験に要する労力は少な
い。 また、測定対象によって測定部の容量を変えることもで
きる。
【００２３】このように、本発明の培養器は、増殖速度
の大きい細胞を選別する用途に好適である。 さらに
、培養の対象は、植物細胞に限らず、凝集性をもつ沈降
しやすい微生物にも拡げることができる。
の大きい細胞を選別する用途に好適である。 さらに
、培養の対象は、植物細胞に限らず、凝集性をもつ沈降
しやすい微生物にも拡げることができる。
【図１】 本発明の増殖速度を簡易に測定できる培養
器の代表的な例を示す、半ば断面を示した側面図。
器の代表的な例を示す、半ば断面を示した側面図。
【図２】 本発明の培養器を使用してゼニゴケの細胞
を培養し、細胞増殖を測定した結果を示すグラフ。
を培養し、細胞増殖を測定した結果を示すグラフ。
１ 増殖部
２ 空気流路
３ 測定部
４ スリ合わせ
５ フィルター
Claims (3)
- 【請求項１】 空気流路をそなえた容器である増殖部
と、その直上に位置する、透明な材料で製作した有底管
状の測定部とから成り、測定部の下端と増殖部の上端と
は円錐面のスリ合わせによってほぼ気密に結合すること
ができるように組み合わされていることを特徴とする、
増殖速度を簡易に測定できる培養器。 - 【請求項２】 増殖部および測定部がともにガラス製
であって、測定部には目盛りを設けてある請求項１の培
養器。 - 【請求項３】 測定部の内壁に撥水性コーティングを
施した請求項１の培養器。
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP3016549A JP2536312B2 (ja) | 1991-02-07 | 1991-02-07 | 増殖速度を簡易に測定できる培養器 |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP3016549A JP2536312B2 (ja) | 1991-02-07 | 1991-02-07 | 増殖速度を簡易に測定できる培養器 |
Publications (2)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| JPH04258284A true JPH04258284A (ja) | 1992-09-14 |
| JP2536312B2 JP2536312B2 (ja) | 1996-09-18 |
Family
ID=11919357
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| JP3016549A Expired - Lifetime JP2536312B2 (ja) | 1991-02-07 | 1991-02-07 | 増殖速度を簡易に測定できる培養器 |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| JP (1) | JP2536312B2 (ja) |
Cited By (1)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| JP2008253150A (ja) * | 2007-03-30 | 2008-10-23 | Hamamatsu Photonics Kk | 光合成サンプル計測容器及び容器ホルダ |
Citations (1)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| JPH0165646U (ja) * | 1987-10-20 | 1989-04-26 |
-
1991
- 1991-02-07 JP JP3016549A patent/JP2536312B2/ja not_active Expired - Lifetime
Patent Citations (1)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| JPH0165646U (ja) * | 1987-10-20 | 1989-04-26 |
Cited By (1)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| JP2008253150A (ja) * | 2007-03-30 | 2008-10-23 | Hamamatsu Photonics Kk | 光合成サンプル計測容器及び容器ホルダ |
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
| JP2536312B2 (ja) | 1996-09-18 |
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