JPH04275202A

JPH04275202A - 非毒性酵素的滅菌剤

Info

Publication number: JPH04275202A
Application number: JP3053885A
Authority: JP
Inventors: Kesler Jack; ジャック・ケスラー
Original assignee: Individual
Current assignee: Individual
Priority date: 1991-02-25
Filing date: 1991-02-25
Publication date: 1992-09-30

Abstract

(57)【要約】本公報は電子出願前の出願データであるた
め要約のデータは記録されません。

Description

【発明の詳細な説明】

【０００１】

【産業上の利用分野】本発明は非毒性の化学的殺菌剤お
よび水の存在下における病原体の滅菌方法に関する。

【０００２】

【従来の技術および課題】微生物は広範囲の環境に順応
している。単に細菌（殺菌剤）またはウイルス（殺ウイ
ルス剤）のみと比較して、すべての活性な病原体（細菌
、ウイルス、菌類、藻類および胞子）を不活性化する能
力を滅菌（ｓｔｅｒｉｌｉｚａｔｉｏｎ）と定義してい
る。滅菌剤は、活性範囲が限定されている殺菌剤とは対
照的にすべての病原体を不活性化する。

【０００３】滅菌は加熱、化学物質、照射および濾過を
用いることにより行うことができる。伝統的な化学的滅
菌剤および滅菌処方は、ホルムアルデヒド、グルタルア
ルデヒド、パーオキソ酢酸／熱、紫外線照射、塩素およ
び塩素誘導体を包含する。公知の化学的滅菌剤で、毒性
または腐食性のいずれかである滅菌剤はすべて、注意し
てかつ適切に処置されなければ、環境安全の問題を引き
起こすであろう。さらに、これらの化学物質の大部分は
眼、皮膚および嗅覚神経に対してヒト炎症をもたらす。すべての病原体を死滅させ、環境的に安全である非毒性
の化学的滅菌剤は、有意な有用性を有する。

【０００４】病原体に対する薬剤の活性を限定する他に
、毒物学的特性も化学的滅菌剤の重要な特性である。米国特許第４４７６２３１号および第４４７３５５０号
に記載されている先行技術は、パーオキシダーゼにより
酸化されると、毒性で、不快な薬剤に結合しうる、ドナ
ー分子としての有機化合物を使用している。本質的に、
これらの薬剤は、１）眼または皮膚を刺激せず、２）ア
レルギー反応の原因とならず、３）害なく付随的に摂取
でき、４）不快な臭いを有さず、５）突然変異誘発性で
ないことが重要である。不可能ではないとしても、すべ
ての病原体に対して速やかに毒性を示し、ヒトに対して
全く非毒性でかつ非刺激性である薬剤を見いだすことが
非常に困難であることが立証された。本発明は、すべて
の型の病原体（胞子、ウイルス、ミコバクテリウム・チ
ューバーキュロシス（Ｍｙｃｏｂａｃｔｅｒｉｕｍ　ｔ
ｕｂｅｒｃｕｌｏｓｉｓ）、脱水病原体、菌類）を不活
性化するパーオキシドに基づく殺菌性化学物質の使用を
開示している。加えて、１）発生期の滅菌環境を長期間
保持し；２）冷化学的滅菌剤用の理想的な毒物学的特性
を付与し、３）有意な有機的負荷（ｏｒｇａｎｉｃ　ｌ
ｏａｄ）の存在下にて活性を示し；４）１．５センチポ
イズ以上の粘度の下で活性を示し；５）パーオキシダー
ゼに基づく殺菌系において色相形成および持続期間を調
整し；６）病原体の不活性化速度を最大にする方法およ
び条件を記載している。

【０００５】パーオキシダーゼは、過酸化水素を水に還
元する酵素と定義されている。パーオキシダーゼは、ド
ナー分子から電子を取り出し、これらの還元当量を過酸
化水素に移動させることにより過酸化水素の還元を行う
。過酸化水素分子１個に付き２還元当量を必要とする。反応サイクルは、１）過酸化水素をパーオキシダーゼに
結合させ；２）第１のドナー分子から１つの電子を過酸
化水素に移動させ；および３）第２のドナー分子から１
電子を過酸化水素に移動させることを包含する。電子が
ドナー分子から取り除かれるたびに、対応するフリーラ
ジカルが生成される。

【０００６】米国特許第４４７６２３１号において、フ
リーラジカルの形成に基づく、選択されたパーオキシダ
ーゼ開始反応の抗菌作用に関する機構が記載されている
。該機構は、抗菌作用がフリーラジカルまたはフリーラ
ジカルの副生成物にあるとしている。

【０００７】殺細菌剤がウイルス、酵母および胞子を不
活性化することは予想できない。米国特許第４４８５０
２９号は、「意外であり、かつ予想しえないこと」とし
て、公知のグリセロールモノラウレートとパラヒドロキ
シ安息香酸の殺細菌性処方により、酵母であるカンジダ
・アルビカンス（Ｃａｎｄｉｄａ　ａｌｂｉｃａｎｓ）
およびアスペルギルス・フミガティス（Ａｓｐｅｒｇｉ
ｌｌｕｓ　ｆｕｍｉｇａｔｉｓ）が不活性化することを
記載している。

【０００８】

【課題を解決するための手段】本発明は、水の存在下、
胞子、ミコバクテリウム・チューバーキュロシス、菌類
、脱水細菌およびウイルスを包含するすべての病原体を
不活性化するに供する、パーオキシダーゼ、パーオキシ
ド生成化合物およびヨウ化物の処方を教示する。本発明
の組成物は数週間活性を維持し、有害な毒物学的特性を
示さないようにすることができる。

【０００９】環境を滅菌化した場合、限定期間、該滅菌
環境の活性を持続することがしばしば要求される。パー
オキシダーゼ、パーオキシド、ヨウ化物の系を用いる場
合に滅菌環境を活性的に維持する一つの方法は、細菌の
増殖に対する阻害剤として作用する濃度までパーオキシ
ドの濃度を増加させることである。この解決法での問題
点は、高濃度のパーオキシドが、本発明のパーオキシダ
ーゼ、パーオキシドおよびヨウ化物の系の作用能力を阻
害しうることである。高パーオキシド濃度では、パーオ
キシドの殺菌能は酵素触媒反応としてよりも殺細菌作用
能の一因となる。本発明の処方によれば、パーオキシド
濃度は、容量に対して下限は０．０００３重量％で、上
限は０．３重量％とすることができる。

【００１０】本発明は、パーオキシダーゼに基づくヨウ
化物含有系の滅菌特性が作用する速度を対数的に増加さ
せる方法を記載している。滅菌工程を行うに要する時間
は、適用可能性を抑制し、該工程の使用者容認に影響を
及ぼす。それゆえ、ドナー分子の条件および選択を注意
して調整することにより、パーオキシダーゼに基づく酵
素的化学物質を用いて滅菌速度を対数的に増加させるこ
とが可能であることが観察された。滅菌速度の増加は、
パーオキシダーゼに基づく滅菌剤が作用する環境のヨウ
化物の濃度およびｐＨを調整することにより得られる。環境ｐＨをｐＨ４と６．５の間に調整した場合、パーオ
キシダーゼに基づく滅菌剤が病原体を不活性化する速度
は有意に増加する。

【００１１】本発明の好ましいパーオキシダーゼである
ホースラディッシュ・パーオキシダーゼ（ｈｏｒｓｅｒ
ａｄｉｓｈ　ｐｅｒｏｘｉｄａｓｅ）は、ザ・インター
ナショナル・ユニオン・オブ・バイオケミストリー・ア
ンド・ザ・インターナショナル・ユニオン・オブ・ピュ
アー・アンド・アプライド・ケミストリー、エンザイム
・コミッションにより同定番号Ｅ．Ｃ．１．１１．１．
７と同定された。本発明の滅菌組成物におけるパーオキ
シダーゼ成分は、使用の間、０．００００５〜１．０ｍ
ｇ／ｍｌでなければならない。

【００１２】ヨウ化物は、意外にも、ドナー分子源とし
て、本発明の組成物に対して唯一かつ臨界的である。他
のドナー分子は、殺細菌剤作用を起こすのに効果的であ
るかもしれないが、他のドナー分子は滅菌をもたらさな
い。他のドナー分子は、１）４と６．５の間のｐＨ範囲
にて病原体死滅速度の増加；２）有意な有機的負荷の存
在下における病原体の不活性化；３）１．５センチポイ
ズ以上の粘度での媒体における滅菌；または４）脱水細
菌の不活性化を示さない。ヨウ化物が唯一的に有益な特
性を有する理由は理解されていない。

【００１３】本発明の適当なヨウ素源はヨウ化ナトリウ
ムおよびヨウ化カリウムを包含するが、他の多くのヨウ
化物の塩もまた好適である。水性塩基性溶媒に溶解後、
ヨウ素イオンを生成するいずれの化合物も、潜在的には
使用に適している。ヨウ化物の単純な塩は安価でかつ安
定している利点を有する。溶液中のヨウ化物の濃度は本
発明に対して臨界的であり、最低濃度１．０ミリモル（
ヨウ化ナトリウム０．１５ｍｇ／ｍｌ）にて存在しなけ
ればならなず、好ましくは３．３２ミリモル（ヨウ化ナ
トリウム０．５ｍｇ／ｍｌ）以上である。

【００１４】本発明の酸化剤は過酸化水素または水性塩
基性担体に溶解後に過酸化水素を生成する化合物である
。また、過酸化メチルを生成物において処方することが
できる。この使用に適当な物質は過酸化水素、パーサル
フェート、パーホスフェート、パーオキシエステル、過
酸化尿素、パーオキシ酸、アルキルパーオキシドおよび
過ホウ素酸塩を包含する。さらに、これら物質の２種以
上の混合物を用いることもできる。

【００１５】本発明の完全体をなすに絶対必要な成分は
、１）パーオキシド源；２）ｐＨをｐＨ４．０と６．５
の間に調整する緩衝成分；３）パーオキシダーゼ；およ
び４）ヨウ化物の塩を包含する。水性媒体との混合後、
ｐＨ緩衝剤が該媒体のｐＨをｐＨ４．０と６．５の間に
調整する。適当な緩衝剤は、シトレート、ホスフェート
、フタレートおよびエヌ・イー・グッド（Ｎ．Ｅ．Ｇｏ
ｏｄｅ）によりアナリティカル・バイオケミストリー（
Ａｎａｌｙｔｉｃａｌ　Ｂｉｏｃｈｅｍｉｓｔｒｙ）（
１９８０）、第１０４巻、３００頁において同定され、
「グッド緩衝剤」と称される緩衝剤を包含する。

【００１６】該処方は、滅菌特性を必要とするまで、酵
素反応が開始しないような仕方にて貯蔵しなければなら
ない。この目的を達成するために、パーオキシド源、ヨ
ウ化物またはパーオキシダーゼからなる群よりいずれか
２つの成分を組み合わせ、これら２種の成分を第３の成
分から分離することは容認できる。さらには、粉末また
はピルが適当な担体中にて混合される時点まで、酵素反
応が妨げされるような粉末またはピル形にて、この系の
成分を貯蔵することも可能である。反応を高パーオキシ
ド濃度にて操作することにより、限定期間、滅菌環境を
活性に維持することが望ましい場合には、反応のパーオ
キシド成分を最後に添加することが好ましい。例えば、
適当な担体中、高濃度のヨウ化物とパーオキシダーゼを
合し、最終工程として該担体にパーオキシドを添加する
ことができる。粉末またはピルを用いることが望ましい
場合、ヨウ化物および酵素が速やかに溶解し、パーオキ
シドが時間をかけてゆっくりと放出される処方を調製す
ることも可能である。

【００１７】したがって、本発明は、水の存在下、パー
オキシド源、Ｅ．Ｃ．１．１１．１．７を含む群から選
択されるパーオキシダーゼおよびヨウ化物を包含する３
種の成分を選択し、該３種の成分を未反応状態にて貯蔵
し、該３種の成分を水性媒体に導入し、ヨウ化物の塩か
ら該媒体を滅菌するための滅菌剤を生成する触媒反応を
起こし、実質的にすべての病原体を不在とさせる工程か
らなる、病原体を滅菌する方法を広くカバーする。

【００１８】滅菌の付加的な制御は、第４の成分として
緩衝剤を加え、液体担体のｐＨをｐＨ４．０とｐＨ６．
５の間に、最適にはｐＨ５．０と６．５の間にすること
でなされる。

【００１９】図面の簡単な記載図１は、ｐＨの作用として、５分間経過後に、粘性液体
処方中にて活性なアスペルギルス・フミガティス（Ａｓ
ｐｅｒｇｉｌｌｕｓ　ｆｕｍｉｇａｔｉｓ）が減少する
ことを示している。

【００２０】発明の好ましい具体例いずれの処方を貯蔵するにも必要な条件は、３種の主要
成分を涸渇させることにより、触媒反応が開始する条件
下にて、該成分が合することを妨げることである。滅菌
を意図する前に酵素成分を相互に作用させると、酵素の
基質分子（パーオキシドおよびヨウ化物）の必然的な涸
渇がもたらされ、それにより該処方の効果は弱まる。こ
の系の酵素成分（パーオキシド源、ヨウ化物およびパー
オキシダーゼ）のうちいずれかの２種を合し、それらを
第３の成分から分離して該目的を達成することは許容さ
れる。

【００２１】さらには、粉末またはピルが適当な担体中
にて混合される時点まで、酵素反応が妨げされるような
粉末またはピル形にてこの系の４種の成分を貯蔵するこ
とも可能である。滅菌環境を限定期間活性に維持するこ
とが要求される適用下で、粉末またはピルの使用が望ま
しい場合、ヨウ化物および酵素が速やかに溶解し、パー
オキシドが時間をかけてゆっくりと放出される処方を用
いることが可能である。

【００２２】本発明の滅菌酵素的化学物質を操作するた
めの好ましいｐＨ範囲は、ｐＨ６．５と４．０の間であ
る。滅菌速度は、ｐＨがｐＨ６．５から低くなるにつれて増
加する。滅菌はｐＨ６．０でよりもｐＨ５．５にてより
迅速に起きる。ｐＨがあまりにも低すぎると、酵素が迅
速に機能せず、該環境では、滅菌化学物質または滅菌化
学物質と接触した手段のいずれかと接触するヒト組織が
炎症を引き起こす可能性が大きくなる。

【００２３】溶液中のヨウ化物の濃度が病原活性の範囲
およびその活性速度を決定するため、該濃度は本発明に
対して臨界的である。ヨウ化物の濃度範囲は、１．０ミ
リモル（ヨウ化ナトリウム０．１５ｍｇ／ｍｌ）〜３３
．４ミリモルである。ヨウ化物の好ましい範囲は３．３
４ミリモル〜３３．４ミリモルである。上限の量が望ま
しい。

【００２４】本発明の滅菌組成物は、いずれの水性媒体
、たとえそれが１．５センチポイズ以上の粘度を有して
いるとしても滅菌をもたらす。後者の場合において、該
滅菌組成物を、水と混合して石鹸処方を形成するように
配合し、表皮クリーナーおよび滅菌剤として用いてもよ
い。

【００２５】次に実施例を挙げて本発明をさらに詳しく
説明する。特に断らない限り、すべての部および％は重
量によるものである。

【００２６】

【実施例】実施例１ホースラディッシュ・パーオキシダーゼ１０ｍｇ、ヨウ
化ナトリウム１ｇ、過ホウ素酸ナトリウム０．１５８ｇ
およびリン酸ナトリウム３００ｍｇを含有する粉末を水
道水１リットルに溶かし、６．５以下の最終ｐＨを得た
。ミコバクテリウム・チューバーキュロシスの臨床的陽性
試料をローウェンスタイン−ジェンセン培地スラント（
Ｌｏｗｅｎｓｔｅｉｎ−Ｊｅｎｓｅｎ　ｍｅｄｉｕｍ　
ｓｌａｎｔｓ）（ＢＢＬ＃２０９０９）から取り、ミド
ルブローク７Ｈ−９ブロス（ＢＢＬ＃９７１５１）５ｍ
ｌを用いて培養した。１週間培養した後、該培養物０．
０１０ｍｌを塩水中にて、逐次、１０倍に希釈し、培養
してコロニー形成単位（ｃｆｕ）の数を測定した。約１
〜２００００００ｃｆｕを上記パーオキシダーゼ含有溶
液２ｍｌに、および塩水対照物に加えた。該パーオキシ
ダーゼ含有試料を室温にてインキュベートした。試料（
０．０５ｍｌ）を３０、６０、１２０および２４０分に
採取し、培養した。これらの試料をローウェンスタイン
−ジェンセン培地上で３週間３６℃にてインキュベート
し、週単位で増殖を検査した。３週間のインキュベーシ
ョン後、ミコバクテリウム・チューバーキュロシスの典
型的「ラフ」コロニーの数を計数した。

【００２７】　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　
　　　　　　　　結　　果　　　　　　　　　　　　時
間に対するミコバクテリウム・チューバーキュロシス　
　　　　　　　　　　　１ｍｌ当たりの活性なコロニー
数　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　
　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　時間（
分）　　　　試料　　　　　　　　　　　　　　　　　
　　　３０　　　　　　　　　　６０　　　　　　　　
　　１２０　　２４０塩水対照物　　　　　　　　　　
　　　　　　　　１０６　　　　　　　　　１０６　　
　　　　　　　１０６　　　１０６パーオキシダーゼ化
学物質　　　　５．０×１０５　　５．０×１０５　　
１０　　　　　　２

【００２８】塩水対照物は期待され
るようなミコバクテリウム・チューバーキュロシスのい
ずれの不活性化も示さなかった。パーオキシダーゼに基
づく滅菌化学物質で処理したミコバクテリウム・チュー
バーキュロシス試料は、活性な微生物の数が０分で１０
６個／ｍｌから２４０分で２個／ｍｌまで減少した。

【００２９】実施例２シュードモナス・アエルギノサ（Ｐｓｅｕｄｏｍｏｎａ
ｓ　ａｅｒｕｇｉｎｏｓａ）（ＡＴＣＣ＃１５４４２）
、スタフィロコッカス・アウレウス（Ｓｔａｐｈｙｌｏ
ｃｏｃｃｕｓ　ａｕｒｅｕｓ）（ＡＴＣＣ＃６５３８）
およびサルモネラ・コレラエスイス（Ｓａｌｍｏｎｅｌ
ｌａ　ｃｈｏｌｅｒａｅｓｕｉｓ）（ＡＴＣＣ＃１０７
０８）を、５％子ウシ血清を補足したアナトン栄養ブロ
ス（ＡＯＡＣ　ｐ．６５，４００１ａ）中にて一夜増殖
させた。ステンレススチール・ペニシリンダー（ｐｅｎ
ｉｃｙｌｉｎｄｅｒ）１８０個を１Ｎ水酸化ナトリウム
に一夜浸し、水中にて洗浄し、０．１％アスパラギン中
にてオートクレーブに付し、細菌のキャリアーとして使
用した。該ステンレススチールキャリアーを、以下のよ
うに１つの型の微生物に暴露した。滅菌ステンレススチ
ール・ペニシリンダー６０個を前記培養物２０ｍｌに１
５分間浸し、３５℃にて４０分間、滅菌パトリ皿におけ
る濾紙上にて乾燥させた。各ペニシリンダーでのコロニ
ー形成単位（ｃｆｕ）の数を測定するのに、キャリアー
を塩水中にて３分間撹拌し、付着している微生物を取り
除き、ペニシリンダー当たりのｃｆｕ数を決定した。

【００３０】ホースラディッシュ・パーオキシダーゼ１
０ｍｇ、ヨウ化ナトリウム１ｇ、過ホウ素酸ナトリウム
０．１５８ｇおよびリン酸ナトリウム０．３０ｇを含有
する粉末を水道水１リットルに溶かし、６．５以下のｐ
Ｈを得た。汚染され、乾燥された各キャリアーシリンダ
ーを、温度調整水浴中、２０℃にて１０分間、殺菌剤１
０ｍｌ含有の分離管に入れた。ついで、各処理キャリア
ーを、鉤針により、３０秒間ずらしてレシチンおよびツ
ウィーン−８０含有のレテーン（Ｌｅｔｈｅｅｎ）ブロ
ス１０ｍｌに移した。これらの試料を３５℃にて４８時
間インキュベートし、微生物が生存するかどうかを測定
した。活性な微生物が検出されない場合、培地を１００
またはそれ以下のｃｆｕの攻撃微生物で処理し、中和化
を証明した。このプロトコルを３回繰り返し、合計１８
０個のキャリアーを各微生物（シュードモナス・アエル
ギノサ、スタフィロコッカス・アウレウスおよびサルモ
ネラ・コレラエスイス）で試験した。

【００３１】同一の実験方法を用い、有機ドナー分子で
あるフェノールとパラ−クレゾールの脱水細菌を不活性
化する能力を試験した。各試験では、６０個のステンレ
ススチール・ペニシリンダーを用いる代わりに、８個の
シリンダーを試験した。各細菌については３本のシリン
ダーを使用し、該シリンダーを塩水中にて撹拌し、溶液
中に移されたコロニー形成単位の数を測定することによ
って、シリンダー当たりの活性な細菌数を測定した。殺
菌剤の処方は、使用ドナー分子が０．１０ミリモル濃度
のフェノールおよびパラ−クレゾールである以外は前記
使用の処方（水道水１リットル中のホースラディッシュ
・パーオキシダーゼ１０ｍｇ、過ホウ素酸ナトリウム０
．１５８ｇ、リン酸ナトリウム０．３０ｇで、６．５以
下のｐＨを得た）と同じであった。

【００３２】有機ドナー分子（フェノールおよびパラ−
クレゾール）のどちらも、いずれのステンレススチール
・ペニシリンダー上の脱水細菌をもまったく不活性化し
なかった。これは、高濃度の脱水細菌で、有機ドナー分
子が殺細菌剤としてよりも阻害剤として作用することを
示す、前の有機ドナー分子を用いる観察と一致している
。反対に、ドナーとしてヨウ化物を用いて処理した後で
は、いずれのキャリアーにも活性な微生物は発見できな
かった。これは、明らかに、固体表面に乾燥された微生
物のパーオキシダーゼに基づく不活性化において、ヨウ
化物が有効なドナー分子として供する能力を有すること
を示す。

【００３３】　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　ドナーとし
てのヨウ化物の試験結果　　　　　　　　微生物　　　
　　　　　　　　　最初の微生物の数　　　　　　　　
処理後に活性な細菌　　　　　　　　　　　　　　　　
　　　　　　　　　　／キャリアー　　　　　　　　　
　　　のいるキャリアー１．シュードモナス・　　　　
　　　　２．０×１０５　　　　　　　　　　　　　　
０／６０　　　　　　アエルギノサ　　　　スタフィロコッカス・　　　　２．０×１０７
　　　　　　　　　　　　　　０／６０　　　　　　ア
ウレウス　　　　サルモネラ・　　　　　　　　　　　　３．６
×１０４　　　　　　　　　　　　　　０／６０　　　
　　　コレラエスイス２．シュードモナス・　　　　　　　　２．２×１０５
　　　　　　　　　　　　　　０／６０　　　　　　ア
エルギノサ　　　　スタフィロコッカス・　　　　３．０×１０５
　　　　　　　　　　　　　　０／６０　　　　　　ア
ウレウス　　　　サルモネラ・　　　　　　　　　　　　２．０
×１０４　　　　　　　　　　　　　　０／６０　　　
　　　コレラエスイス３．シュードモナス・　　　　　　　　２．１×１０５
　　　　　　　　　　　　　　０／６０　　　　　　ア
エルギノサ　　　　スタフィロコッカス・　　　　２．８×１０５
　　　　　　　　　　　　　　０／６０　　　　　　ア
ウレウス　　　　サルモネラ・　　　　　　　　　　　　１．９
×１０５　　　　　　　　　　　　　　０／６０　　　
　　　コレラエスイス　　　　　　　　　　　　　　　　　　　ドナーとして
フェノールを用いた場合４．シュードモナス・　　　　
　　　　４．６×１０５　　　　　　　　　　　　　　
５／５　　　　　　アエルギノサ　　　　スタフィロコッカス・　　　　１．８×１０５
　　　　　　　　　　　　　　５／５　　　　　　アウ
レウス　　　　サルモネラ・　　　　　　　　　　　　６．０
×１０４　　　　　　　　　　　　　　５／５　　　　
　　コレラエスイス　　　　　　　　　　　　　　　　ドナーとしてパラ−
クレゾールを用いた場合５．シュードモナス・　　　　
　　　　４．６×１０５　　　　　　　　　　　　　　
５／５　　　　　　アエルギノサ　　　　スタフィロコッカス・　　　　１．８×１０５
　　　　　　　　　　　　　　５／５　　　　　　アウ
レウス　　　　サルモネラ・　　　　　　　　　　　　６．０
×１０４　　　　　　　　　　　　　　５／５　　　　
　　コレラエスイス

【００３４】実施例３パーオキシダーゼに基づく滅菌／殺菌化学物質を、１０
０万匹の微生物／ｍｌのバシラス・パミラス（Ｂａｃｉ
ｌｌｕｓ　ｐｕｍｉｌｕｓ）胞子に対して試験し、クロ
ロックス・ブリーチ（Ｃｈｏｌｏｒｏｘ　ｂｌｅａｃｈ
）（ＮａＯＣｌ）およびスポロシジン（Ｓｐｏｒｏｃｉ
ｄｉｎ）Ｌｏｔ＃ＬＯ８５３の活性と比較した。用いた
試薬を以下に示す：Ａ−　　ヨウ化ナトリウム１５０ｍｇをリン酸塩緩衝塩
水（ＰＢＳ）１００ｍｌに溶かした。Ｂ−　　３０％過酸化水素１部を、ＰＢＳ中にて１００
００部に希釈した。Ｃ−　　クロロックスは、ＰＢＳ中にて０．８５％であ
った。Ｄ−　　ホースラディッシュ・パーオキシダーゼを０．
５および０．０５ｍｇ／ｍｌで溶かした。Ｅ−　　クロロックスを油中にて０．５％に、水中にて
０．０１％に希釈した。Ｆ−　　スポロシジンを製造業者の指示により薄めずに
、１／１６に希釈して使用した。Ｇ−　　微生物を遠心分離に付し、培養培地を除去し、
ＰＢＳ中にて希釈し、１００万匹の微生物／ｍｌを得た
。

【００３５】試薬を、指定量で以下に示す順序にて混合
した：　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　
　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　
　　ｍｌ　　　　リン酸塩緩衝塩水　　　　　　　　　
　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　１．７５
　　　　バシラス・パミラス　　　　　　　　　　　　
　　　　　　　　　　　　　　　　０．０５　　　　ヨ
ウ化ナトリウム　　　　　　　　　　　　　　　　　　
　　　　　　　　　　　　１．７５　　　　過酸化水素
　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　
　　　　　　　　　　　０．５０　　　　ホースラディ
ッシュ・パーオキシダーゼ　　　　　　　　　　０．０
５

【００３６】３０００万匹の胞子を有するバシラス・
パミラス０．５０ｍｌ容量を、クロロックス、スポロシ
ジンおよび本発明のパーオキシダーゼに基づく滅菌化学
物質の種々の希釈物４．５ｍｌに加えた。１０、２０お
よび６０分で、および２４時間で試料を取り出し、２％
ツウィーン−２０および０．５％レシチンを有するトリ
プチカーゼ大豆ブロスにて希釈した。クロロックス処理
試料では、０．１％硫酸ナトリウムを該トリプチカーゼ
大豆ブロス混合物に加えた。活性なコロニーの数を４８
時間インキュベートした後の各時点で測定し、活性なバ
シラス・パミラスを１０分の１に減少させるのに要する
時間を測定した。

【００３７】　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　
　　　　　　　試験結果　　　　化学物質　　　　　　
　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　１
０分の１に減少させるのに要す　　　　　　　　　　　
　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　
　　　　　　る時間パーオキシダーゼ（０．０５０ｍｇ
／ｍｌ）　　　　　　　　　　　　　９．８分パーオキ
シダーゼ（０．００５０ｍｇ／ｍｌ）　　　　　　　　
　　　１２．８分クロロックス（０．５％）　　　　　
　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　１
．８分クロロックス（０．１％）　　　　　　　　　　
　　　　　　　　　　　　　　　　　　　１．８分クロ
ロックス（０．０１％）　　　　　　　　　　　　　　
　　　　　　　　　　　　　１．８分スポロシジン（未
希釈）　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　
　　　　　　　　２．７８分スポロシジン（１／１６希
釈）　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　３
１．８分

【００３８】これらの結果は、パーオキシダー
ゼに基づく滅菌化学物質が、現在使用されている殺胞子
剤に匹敵する、時間内に胞子を不活性化しうる能力を有
することを示す。

【００３９】実施例４バクテリオファージＴ２をエスケリチア・コリー（Ｅｓ
ｃｈｅｒｉｃｈｉａ　ｃｏｌｉ）株Ｂにて増殖させ、１
００ｍｍペトリ皿における二重寒天層技法により検定し
て、１ｍｌ当たり１０００プラーク形成単位（ｐｆｕ）
の力価を得た。４０ｍｇ／ｍｌの濃度のヨウ化カリウム（０．０１０ｍ
ｌ）、０．０３％での過酸化水素（０．０１０ｍｌ）お
よびリン酸塩緩衝剤（１００ｍＭ、ｐＨ５．０および７
．０）をＴ２（０．８ｍｌ）に加えた。ホースラディッ
シュ・パーオキシダーゼ１０μｌを該試料に加えた：最
終混合物１ｍｌ当たりのパーオキシダーゼの最低量が０
．０００７ｍｇ／ｍｌであるように、パーオキシダーゼ
の保存溶液（水中にて５ｍｇ／ｍｌ）を希釈した。該懸
濁液を５分間インキュベートした。該懸濁液の一部を取
り出し、エスケリチア・コリー株Ｂ含有の温寒天の懸濁
液に加えた。該寒天混合物をプレート上に流し、その表
面全体に均等に広げた。室温にて固体化させた後、該プ
レートを３７℃にてインキュベートした。該プレートを
プラーク形成についてチェックした。

【００４０】ｐＨ５．０で、プラークはまったく形成さ
れなかった；ｐＨ７．０では、いくつかのプレートにお
いて０．０７０ｍｇ／ｍｌのパーオキシダーゼ濃度にて
プラーク形成が観察された。

【００４１】実施例５２つの一致するスカペルス（ｓｃａｐｅｌｓ）およびフ
ォーセプス（ｆｏｒｃｅｐｓ）をオートクレーブに付し
、１００００ｐｆｕ／ｍｌでのエスケリチア・コリー株
Ｂ中、Ｔ２ウイルスの懸濁液を含有するガラス容器の振
盪プラットホームに置いた。２つの器具を取り出し、１
００ｍＭのリン酸ナトリウム５０ｍｌ（ｐＨ５．５）、
ヨウ化カリウム０．５０ｍｌ（４０ｍｇ／ｍｌ）および
過酸化水素０．５０ｍｌ（０．３％）を含有する混合物
に置いた。ホースラディッシュ・パーオキシダーゼ０．
５０ｍｌ（５ｍｇ／ｍｌ）を加え、該溶液を静かに振盪
した。対照物を、パーオキシダーゼを省略する以外は同
様にて処理した。

【００４２】反応を１０分間進行させ、ついでフッ化ナ
トリウム２０ｍｌを加えた（２．３ｇ／リットル）。該
スカペルスおよびフォーセプスを該溶液から取り出し、
エスケリチア・コリー株Ｂ含有の軟寒天に置いた。

【００４３】該寒天を室温にて固体化させ、固定インキ
ュベーター中、３７℃にてインキュベートし、プラーク
形成についてチェックした。対照物はプラーク形成を示
したが、ホースラディッシュ・パーオキシダーゼで処理
した試料はプラークをまったく形成しなかった。

【００４４】実施例６シュードモナス・アエルギノサを用い、ｐＨ値４．０、
５．０、６．０および７．０での細菌不活性化の相対的
速度を測定した。シュードモナス・アエルギノサの一夜
培養物を増殖させ、ヨウ化カリウム０．０１０ｍｌ（４
０ｍｇ／ｍｌ）、過酸化水素０．０１０ｍｌ（０．０３
％）、指示ｐＨの５０ｍＭシトレートおよびパーオキシ
ダーゼ０．０１０ｍｌ（０．５ｍｇ／ｍｌ）を含有する
溶液中に懸濁させた。該溶液から一部を種々の時間にて
取り出し、逐次、１０倍に希釈し、培養基で培養して１
ｍｌ当たりの活性なコロニーの数を測定した。

【００４５】シュードモナス・アエルギノサ濃度を１０
分の１に減少させるのに要する時間を測定した。インキ
ュベーション時間を、最初の微生物の数のｌｏｇ値から
各時間の生存している微生物の数のｌｏｇ値を引いて得
られた値で割ることにより、時間（秒）／ｌｏｇ減少を
算定した。シュードモナス・アエルギノサの不活性化速
度は、ｐＨ７．０での不活性化速度と比較すると、４．
０と６．５の間のｐＨ値にてより大きかった。

【００４６】　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　シュー
ドモナス・アエルギノサ　　　　　　　　　　　　　細
菌の１０倍減少を達成するのに要する時間（秒）サンプ
リング時間　　　　ｐＨ４．０　　　　　　ｐＨ５．０
　　　　　　ｐＨ６．０　　　　　　ｐＨ７．０　　　
　　　４５　　　　　　　　　　＜７．７　　　　　　
　　　２７．８　　　　　　　　　４０　　　　　　７
０．３　　　　　　９０　　　　　　　　　　＜７．７
　　　　　　　　　２８．４　　　　　　　　　３７　
　　　　　６８．７　　　　１８０　　　　　　　　　
　＜７．７　　　　　　　　　　　−　　　　　　　　
　　　　　　　　　３４　　　　　　６５

【００４７】実施例７ヨウ化ナトリウム、過酸化水素およびリン酸ナトリウム
を以下のように混合した：　　　　　　ヨウ化ナトリウム，１０．０ｍｇ／ｍｌ　
　　　　　　　　　　０．４０ｍｌ　　　　　　過酸化
水素，０．００３％　　　　　　　　　　　　　　　　
　　　　　０．１０ｍｌ　　　　　　リン酸ナトリウム
，ｐＨ５．０，０．１０Ｍ　　　　　　　　　０．４０
ｍｌ

【００４８】該混合物を、０．５ｍｇ／ｍｌから０
．００００５ｍｇ／ｍｌまで変化する濃度でのホースラ
ディッシュ・パーオキシダーゼ０．１０ｍｌを含有する
数本の試験管に加えた。５分間インキュベートした後、
得られた混合物の分光光度活性を、溶液中のバシラス・
パミラス胞子を用いて予め測定した反応体の公知殺胞子
活性と比較することにより、これら混合物の活性を評価
した。

【００４９】０．０５〜０．０００５ｍｇ／ｍｌの間の
濃度で、殺胞子活性は最も大きかった。濃度が０．００
０００５ｍｇ／ｍｌに減少するまで、該活性は有意に衰
えなかった。

【００５０】実施例８ヨウ化ナトリウム、パーオキシド、過酸化水素およびリ
ン酸ナトリウムの混合物の経口毒性を、雄および雌の生
体アルビノのスプラギュー・ダウレイ（Ｓｐｒａｇｕｅ
−Ｄａｗｌｅｙ）系のラットを用い、体重１ｋｇ当たり
５ｇの用量レベルを投与することで測定した。ヨウ化ナ
トリウム（６００部）、過ホウ素酸ナトリウム（６３部
）、ホースラディッシュ・パーオキシダーゼ（１部）お
よび一塩基性リン酸ナトリウム（１２０部）の混合物３
．５ｇを水道水１０００ｍｌに加え、溶かし、６．５以
下のｐＨに調整した。５匹の雌と５匹の雄のラットには
２４時間餌を与えておらず、体重２００ｇに付き試験溶
液（比重１．０３）０．９７ｍｌを投与した。

【００５１】合計１４日の間、動物を疾患徴候および死
亡について観察した。すべての動物が生存しており、１
４日にＣＯ２窒息により殺して検死した。

【００５２】すべての動物が、試験期間を通して該試験
物質を経口投与することにより影響を受けないのは明ら
かであった。すべての動物が、該試験期間の間に体重が
増加した。雄のラットでの試験期間の間の平均体重増加
は１１３．２ｇであった。雌のラットでの試験期間の間
の平均体重増加は３９．２ｇであった。この実験に使用
した１０匹のラットの検死は、各ラットにおいて陰性で
あった。

【００５３】この組成物が強力な殺細菌、殺菌類、殺ウ
イルスおよび殺胞子活性を付与し、該処方が体重１ｋｇ
当たり５ｇの用量で経口的に非毒性であることは意外な
ことであり、かつ予期せぬことであった。

【００５４】実施例９ヨウ化ナトリウム、パーオキシド、過酸化水素および一
塩基性リン酸ナトリウムの混合物の眼性毒性を、６匹の
種々の３月齢の雄および雌のニュージーランド・ホワイ
ト・ラビット（Ｎｅｗ　Ｚｅａｌａｎｄ　ｗｈｉｔｅ　
ｒａｂｂｉｔ）（体重２〜３ｋｇ）を用いて測定した。ヨウ化ナトリウム（６００部）、過ホウ素酸ナトリウム
（６３部）、ホースラディッシュ・パーオキシダーゼ（
１部）および一塩基性リン酸ナトリウム（１２０部）の
混合物３．５ｇを水道水１０００ｍｌに加え、溶かして
６．５以下のｐＨを得た。この溶液を用いて各ラビットの眼を灌注した。１ｃｃシ
リンジを用いて該試験溶液０．１０ｍｌを各ラビットの
左眼の下部結膜嚢に滴注した。

【００５５】該試験溶液の滴注後、１秒間、各ラビット
は眼瞼を閉じた。各ラビットの反対の眼は未処理のまま
であって比較対照に供した。

【００５６】試験物質の滴注前、すべての試験および対
照眼について有意な眼性炎症のないことを判断した。先
在する角膜損傷を検出しまたは確認するため、該眼を蛍
光染料で処理し、暗室にて紫外線で観察した。

【００５７】試験物質滴注の１時間後、さらには１日、
２日、３日、４日、７日、１４日および２１日にて、該
眼を眼性反応について試験した。蛍光染色操作を、各イ
ンターバルの間に行った。

【００５８】この組成物が強力な殺細菌、殺菌類、殺ウ
イルスおよび殺胞子活性を付与し、該処方が、試験期間
の間、いずれの動物においても角膜混濁および虹彩炎を
まったく引き起こさないことは意外なことであり、かつ
予期せぬことであった。処理後、２４時間以内で６匹の
うち２匹の動物において最小限の一過性結膜炎が観察さ
れた。この症状は２日には消滅した。いずれの動物にも
、周囲の眼構造への付属眼窩の成長および炎症は観察さ
れなかった。すなわち、この試験条件下、本発明の滅菌
化学物質は、非灌注眼の眼組織に対する刺激物ではなか
った。

【００５９】実施例１０ヨウ化ナトリウム、パーオキシド、過酸化水素および一
塩基性リン酸ナトリウムの混合物の、無傷のおよび擦り
むいた皮膚に対する皮膚炎症強度を、６匹の種々の３月
齢の雄および雌のニュージーランド・ホワイト・ラビッ
ト（体重２〜３ｋｇ）を用いて測定した。試料を塗布す
る前に、各ラビットの左脇腹を電気クリッパーで柔毛が
ないように刈り取った。ヨウ化ナトリウム（６００部）
、過ホウ素酸ナトリウム（６３部）、ホースラディッシ
ュ・パーオキシダーゼ（１部）および一塩基性リン酸ナ
トリウム（１２０部）の混合物３．５ｇを水道水１００
０ｍｌに加え、溶かして６．５以下のｐＨを得た。この
溶液を用いて皮膚炎症性を試験した。

【００６０】パーオキシダーゼに基づく滅菌試験溶液の
試料０．５ｍｌを、１×１インチの２層ガーゼパッチの
下方に挿入することにより皮膚部位（１部位／ラビット
）に適用した。該パッチを非炎症性テープで覆い、試験
部位全体を空気透過性整形外科用メリヤスで包んだ。４時間暴露した後、該メリヤスおよび試験溶液を取り除
いた。試験部位を水道水でふき取り、残っている試験溶
液を除去した。紅斑および浮腫の観察を、塗布の４、２
４、４８および７２時間後に行った。

【００６１】この組成物が強力な殺細菌、殺菌類、殺ウ
イルスおよび殺胞子活性を付与し、該処方が、試験期間
の間、いずれの動物においてもまったく炎症をもたらさ
ないことは意外なことであり、かつ予期せぬことであっ
た。すなわち、パーオキシダーゼに基づく本発明の滅菌
化学物質は、ラビットの皮膚に対して非刺激性である。

【００６２】実施例１１本発明のパーオキシダーゼに基づく滅菌化学物質による
アレルギー反応強度を、実験群として５匹の雄および５
匹の雌のハートレー（Ｈａｒｔｌｅｙ）系モルモットを
、対照として３匹の雄および３匹の雌のモルモットを用
いて測定した。この測定に用いた方法は、感作部位の局
所的炎症作用を利用した。アジュバントの投与およびパ
ーオキシダーゼに基づく滅菌化学物質の繰り返し塗布を
１週間以内に行い、過敏性獲得を増強させた。

【００６３】これらの測定結果は、本発明のパーオキシ
ダーゼに基づく滅菌化学物質が局所アレルギー反応を引
き起こさないことを示す。

【００６４】ヨウ化ナトリウム（６００部）、過ホウ素
酸ナトリウム（６３部）、ホースラディッシュ・パーオ
キシダーゼ（１部）および一塩基性リン酸ナトリウム（
１２０部）の混合物３．５ｇを水道水１０００ｍｌに加
え、溶かして６．５以下のｐＨを得た。この溶液をすべ
ての測定に用いた。対照動物を用いてパーオキシダーゼ
に基づく滅菌化学物質の皮膚炎症強度を測定した。４種
の濃度（１００％、５０％、２５％、１０％）のパーオ
キシダーゼに基づく殺菌化学物質０．５ｍｌ用量を、１
インチ平方のガーゼ・パッチの下方に挿入することによ
り、６匹の各モルモットの右および左皮膚部位に塗布し
た。動物当たり各４つの皮膚部位をエラストプラストお
よびマスキングテープにより閉塞的に覆った。

【００６５】２４時間後、該パッチを取り外し、皮膚部
位を直ちに、さらには４８時間および７２時間後に紅斑
について評価した。いずれも膚炎症を発現しなかったの
で、薄めていない処方を過敏性攻撃に使用した。

【００６６】本発明のパーオキシダーゼに基づく滅菌化
学物質に対するアレルギー感応性は以下のようにして誘
発した。１０種の異なる実験動物の毛を、＃４０ブレー
ドを用い、オスター・アニマル・クリッパーで刈り取っ
た。未希釈のパーオキシダーゼに基づく滅菌化学物（４
×０．５ｍｌ）を、サンドペーパーで擦りむいた肩の皮
膚部に局所的に貼用されている１インチ平方の２層ガー
ゼ・パッチの下方に加えた。パーオキシダーゼに基づく
滅菌化学物質の各投与前に、該膚を再度擦りむいた。表
面を剥離することでケラチンを遊離させて除去し、出血
させないで、表面を赤熱状態にした。ついで、該適用部
位をエラストプラストおよびマスキングテープの閉塞ラ
ップで覆った。誘導投与は０、２、４および７日に行っ
た。

【００６７】処理の２４、４８および７２時間後、該動
物をアレルギー性接触皮膚炎について試験した。各動物
に、未反応性の０から小胞形成を伴う深赤紅斑の３まで
の範囲の評点を付与した。

【００６８】この組成物が強力な殺細菌、殺菌類、殺ウ
イルスおよび殺胞子活性を付与し、５匹の雄または５匹
の雌のモルモットがこの処方を用いる試験レジメに対し
ていずれの反応も有しなかったことは意外なことであり
、かつ予期せぬことである。

【００６９】さらに、６匹の動物を同様に２５％イソオ
イゲノール／石油で感作させ、陽性対照群に供した。こ
れらのすべての動物は、温和なまたは中程度のいずれか
のアレルギー性接触皮膚炎を示した。

【００７０】実施例１２イー・コリーを脳心臓浸出物（ＢＨＩ）のスターター培
養より増殖させた。細胞を遠心分離により採取し、標準
塩水にて２回洗浄した。該細胞を標準塩水３ｍｌに懸濁
させ、ＢＨＩ寒天プレートを用いて標準プレートカウン
ト（ＳＰＣ）を行った。この懸濁液を標準塩水に希釈し
、約２．３８×１０７コロニー形成単位（ｃｆｕ）／ｍ
ｌ濃度を得た。実験直前に該懸濁液を滅菌水にて１／１
００に希釈し、該実験用の保存溶液として使用した。

【００７１】リン酸ナトリウムおよび水酸化ナトリウム
を用い、ｐＨ値が５．５、６．０、６．５、６．８およ
び７．０の反応緩衝液を製造した。パーオキシダーゼ以
外のすべての反応体を含有する対照反応物を各ｐＨ値に
て実験し、各ｐＨで生存する微生物の数を測定した。ｐ
Ｈがパーオキシダーゼ触媒殺菌の速度に対して有する相
対的効果を、各ｐＨの対照に基づき、活性な微生物のパ
ーセントを測定することにより算定した。

【００７２】反応条件は、１００ｍＭの反応緩衝液０．
７０ｍｌ、ドナー（２．２１ｍＭのチロシンまたは１ｍ
ｇ／ｍｌのヨウ化ナトリウム）０．１０ｍｌ、０．３％
過酸化水素０．１０ｍｌ、細菌０．０５０ｍｌおよび０
．５０ｍｇ／ｍｌの濃度でのホースラディッシュ・パー
オキシダーゼ溶液０．１０ｍｌからなる。対照反応物は
蒸留水０．１０ｍｌを加え、パーオキシダーゼを含めな
かった。各ｐＨ値にて、細菌および緩衝液を混合し、つ
いでこの懸濁液０．８ｍｌを２つの分離試験管にアリコ
ートした。これら試験管の一方を対照に供し、他方にパ
ーオキシダーゼを加えた。

【００７３】反応を開始し、３７℃にて１５分間インキ
ュベートした。試料を各試験管から採取し、フッ化ナト
リウムの溶液中に希釈し（０．２５モル）、各反応物に
ついてＳＰＣを作製した。チロシンの対照反応物におい
て活性な微生物の数は１６％以上変化しなかった。パー
オキシダーゼとのドナー分子としてヨウ化ナトリウムを
用いた場合、すべての細菌は不活性化された。ドナー分
子としてチロシンを用いた場合のｐＨの作用のように、
活性な微生物の数は有意に変化しなかった。チロシンお
よびヨウ化ナトリウムについての各ｐＨにて生存してい
る微生物％を以下に示す。

【００７４】　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　活
性な微生物のパーセント　　　　　　　　　　　　　　
　　　　　　　　　　　　　　　チ　　ロ　　シ　　ン
ｐＨ　　　　　　　　　　　　　　　　５．５　　　　
　　　６．０　　　　　６．５　　　　　６．８　　　
　　７．０イー・コリー　　　　　　　　７０　　　　
　　　　６７　　　　　　７５　　　　　　７１　　　
　　　７３　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　
　ヨ　　ウ　　化　　ナ　　ト　　リ　　ウ　　ムｐＨ
　　　　　　　　　　　　　　　　５．５　　　　　　
　６．０　　　　　６．５　　　　　６．８　　　　　
７．０イー・コリー　　　　　　　　０　　　　　　　
　　　０　　　　　　　　０　　　　　　　　０　　　
　　　　　０

【００７５】実施例１３パーオキシダーゼに基づく殺菌反応において、ドナー分
子として供せられるヨウ化物、フェノールおよびｏ−ク
レゾールの活性を、粘度の作用として、１と２．６セン
チポイズ（ｃｐ）の範囲にある粘度で測定した。

【００７６】スタフィロコッカス・アウレウス（ＡＴＣ
Ｃ　　６５３８）を脳心臓浸出物（ＢＨＩ）にてスター
ター培養より一夜増殖させ、遠心分離により収集した。細胞を標準塩水に２回洗浄し、標準塩水５ｍｌに再度懸
濁させた。標準プレート・カウント（ＳＰＣ）を行い、
コロニー形成単位（ｃｆｕ）数／ｍｌを測定し、ストッ
クを標準塩水において０．１モルのリン酸ナトリウム、
ｐＨ７．０にて８．２０×１０Ｅ７ｃｆｕ／ｍｌに希釈
した。フェノール（１０．６ｍＭ）、ｏ−クレゾール（９２．
４ｍＭ）およびヨウ化ナトリウム（１．５ｍｇ／ｍｌ）
の保存溶液をドナー分子として用いるのに製造した。

【００７７】グルコース、グリセロールおよびフルクト
ースを用いて粘度を増加させた。滅菌反応を、最終粘度
が１と２．６ｃｐの間にあるように、種々のレベルの増
粘剤（グルコース、フルクトースまたはグリセロール）
を含有する溶液中にて操作した。増粘剤の各濃度で、対
照反応は、パーオキシダーゼを有することなく実験した
。対照における微生物の数を、反応における微生物の数
と比較し、所定の粘度での相対効果を測定した。

【００７８】殺菌反応は、保存細菌懸濁液０．５ｍｌ、
０．０５ｍｇ／ｍｌのパーオキシダーゼ０．１ｍｌ、ド
ナー分子０．１ｍｌ、０．０３％過酸化水素０．１ｍｌ
および種々の濃度での増粘剤０．８ｍｌを混合すること
により実施した。初期反応における微生物濃度は、５．
１２×１０Ｅ６／ｍｌであることを測定した。該反応物
を３７℃にて１５分間インキュベートした。一部を取り
出し、フッ化ナトリウム溶液に１／１０に希釈し、ＳＰ
Ｃを行って、活性な微生物の濃度を測定した。

【００７９】各々の粘度レベルで、ヨウ化物は溶液中の
すべての微生物を不活性化した。ドナーとしてフェノー
ルまたはｏ−クレゾールを用いた場合、粘度を１ｃｐ以
上に増加させると不活性化される微生物のパーセントは
減少した。粘度を２．４センチポイズ以上に増加させた
場合、フェノールおよびｏ−クレゾールはいずれもまっ
たく効果を有さなかった。

【００８０】　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　増
粘剤としてのグルコース　　　　　　　　　　　　　　
　　　　　　　残存している微生物のパーセント　　　
　　　　　　　　　　　　　　　ヨウ化物　　　　　　
フェノール　　　　　　　　ｏ−クレゾール　　粘度（
ｃｐ）　　１．０　　　　　　　　　　　　　　　　　０　　
　　　　　　８０．８　　　　　　　　　　　　　　　
８４．６　　１．１９４　　　　　　　　　　　　　０
　　　　　　　　９９．３　　　　　　　　　　　　　
　　９４．８　　１．４５９　　　　　　　　　　　　
　０　　　　　　　　１０３　　　　　　　　　　　　
　　１０８　　２．４５３　　　　　　　　　　　　　
０　　　　　　　　９７．３　　　　　　　　　　　　
　１０１

【００８１】　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　増粘
剤としてのフルクトース　　　　　　　　　　　　　　
　　　　　　　残存している微生物のパーセント　　　
　　　　　　　　　　　　　　　ヨウ化物　　　　　　
フェノール　　　　　　　　ｏ−クレゾール　　粘度（
ｃｐ）　　１．０　　　　　　　　　　　　　　　　　０　　
　　　　　　８６．０　　　　　　　　　　　　　　　
８６．３　　１．１９６　　　　　　　　　　　　　０
　　　　　　　　９３．０　　　　　　　　　　　　　
　　９７．４　　１．４８０　　　　　　　　　　　　
　０　　　　　　　　９６．５　　　　　　　　　　　
　　　　９５．９　　２．５５７　　　　　　　　　　
　　　０　　　　　　１０１　　　　　　　　　　　　
　　　　１０４

【００８２】　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　増粘
剤としてのグリセロール　　　　　　　　　　　　　　
　　　　　　　残存している微生物のパーセント　　　
　　　　　　　　　　　　　　　ヨウ化物　　　　　　
フェノール　　　　　　　　ｏ−クレゾール　　粘度（
ｃｐ）　　１．０　　　　　　　　　　　　　　　　　０　　
　　　　　　９１．５　　　　　　　　　　　　　　　
８６．３　　１．２１８　　　　　　　　　　　　　０
　　　　　　　　９８．６　　　　　　　　　　　　　
　　９７．４　　１．５３０　　　　　　　　　　　　
　０　　　　　　　　９５．２　　　　　　　　　　　
　　　　９５．９　　２．６３２　　　　　　　　　　
　　　０　　　　　　　　９９．４　　　　　　　　　
　　　　１０４

【００８３】

【発明の効果】本発明によれば、水の存在下、胞子、ミ
コバクテリウム・チューバーキュロシス、菌類、脱水細
菌およびウイルスを包含するすべての病原体を滅菌する
非毒性の滅菌剤を得ることができる。

【図面の簡単な説明】

【図１】　　ｐＨの作用として、５分間経過後、粘性液
体処方中にて活性なアスペルギルス・フミガティスが減
少していることを示す図である。

Claims

【特許請求の範囲】

【請求項１】　　ヨウ素アニオンを連続的に発生させる
ことからなることを特徴とする、水の存在下、胞子およ
びミコバクテリウム・チューバーキュロシスを包含する
病原体の滅菌方法。
【請求項２】　　さらに、緩衝剤を添加し、水性媒体の
ｐＨを４．０〜６．５の好ましいｐＨ範囲に調整するこ
とからなる請求項１記載の方法。
【請求項３】　　（ａ）４種の成分：パーオキシド源、
Ｅ．Ｃ．１．１１．１．７を包含する群より選択される
パーオキシダーゼ、ｐＨを６．５以下に維持するｐＨ緩
衝剤および最低濃度１．６７ミリモルのヨウ化物の塩を
選択し；（ｂ）該４種の成分を未反応状態にて貯蔵し；および（
ｃ）該４種の成分を水性媒体と接触させ、該ヨウ化物の
塩から病原体を滅菌するための滅菌剤を生成する触媒反
応を起こす工程からなることを特徴とする、水の存在下
、胞子およびミコバクテリウム・チューバーキュロシス
を包含する病原体の滅菌方法。
【請求項４】　　パーオキシドに対するヨウ化物の塩の
濃度が０．５〜５．０ｍｇ／ｍｌである請求項３記載の
水の存在下における病原体の滅菌方法。
【請求項５】　　パーオキシダーゼが活性組成物中に０
．００００５〜１．０ｍｇ／ｍｌの量にて存在し、パー
オキシドが活性組成物の容量に対して０．０００３重量
％〜０．３重量％にて存在する請求項３または請求項４
記載の滅菌方法。
【請求項６】　　さらに、緩衝剤を添加し、水性媒体の
ｐＨを４．０〜６．５の好ましいｐＨ範囲に調整するこ
とからなる請求項３記載の方法。
【請求項７】　　ｐＨをｐＨ５．０とｐＨ６．５の間に
調整する請求項６記載の方法。
【請求項８】　　該成分を、１．５センチポイズ以上の
粘度の水性塩基性環境において合する請求項３〜請求項
７記載のいずれか１つの方法。
【請求項９】　　該成分を、１種以上の界面活性剤、起
泡剤、増粘剤、湿潤剤および発泡安定剤を含有する水性
塩基性環境にて合する請求項８記載の方法。
【請求項１０】　　ヨウ化物の塩がヨウ化ナトリウムま
たはヨウ化カリウムであり、パーオキシドに対するヨウ
化物のモル比が０．５と５．０の間にある請求項３記載
の組成物。
【請求項１１】　　ヨウ化物の塩が最終濃度１．５ｍｇ
／ｍｌのヨウ化ナトリウムで、過ホウ素酸ナトリウム０
．１５７ｍｇ／ｍｌと、ホースラディッシュ・パーオキ
シダーゼ０．００５ｍｇ／ｍｌと、一塩基性リン酸ナト
リウム０．３０ｍｇ／ｍｌとからなる請求項３記載の組
成物。
【請求項１２】　　得られた組成物が哺乳動物細胞およ
び組織に対して非毒性である請求項３〜請求項７記載の
いずれか１つの方法。
【請求項１３】　　得られた組成物が、哺乳動物への経
口投与後、非毒性である請求項３〜請求項７記載のいず
れか１つの方法。
【請求項１４】　　得られた組成物が未灌注眼の哺乳動
物眼組織に対して非炎症性である請求項３〜請求項７記
載のいずれか１つの方法。
【請求項１５】　　得られた組成物が哺乳動物表皮組織
に対して非炎症性である請求項３〜請求項７記載のいず
れか１つの方法。
【請求項１６】　　得られた組成物が哺乳動物に対して
非アレルギー性である請求項３〜請求項７記載の方法。