JPH04287623A - 植物組織培養による球根類の増殖方法 - Google Patents
植物組織培養による球根類の増殖方法Info
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- JPH04287623A JPH04287623A JP5167191A JP5167191A JPH04287623A JP H04287623 A JPH04287623 A JP H04287623A JP 5167191 A JP5167191 A JP 5167191A JP 5167191 A JP5167191 A JP 5167191A JP H04287623 A JPH04287623 A JP H04287623A
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- Breeding Of Plants And Reproduction By Means Of Culturing (AREA)
Abstract
(57)【要約】本公報は電子出願前の出願データであるた
め要約のデータは記録されません。
め要約のデータは記録されません。
Description
【０００１】
【産業上の利用分野】本発明は、植物組織培養による球
根類の大量増殖法に関する。
根類の大量増殖法に関する。
【０００２】
【従来の技術】球根植物は従来、分球、リン片ざし、ム
カゴや木子の利用によって行われてきた。しかし、これ
らの増殖法は、広い土地と多くの人手を必要とするばか
りでなく、近年ウイルス病の蔓延により前記植物の種苗
の増殖速度の低下、生長速度の低下、花や球根類の品質
低下が問題となっている。これらの問題点を解決するた
めに、生長点を培養し、ウイルスフリー化した球根類を
植物組織培養により増殖する研究が報告されている。例
えば、特開昭５５−１５７３４号公報には、固体培地を
用いてユリ属植物の組織片から子球を形成させて増殖さ
せた後、これを液体培地に移して培養して肥大させるこ
とからなるユリ属植物の大量増殖方法が開示されている
。しかし、前記方法では肥大培養の前段において寒天を
用いた固体培地を使用しているため培養操作に多くの人
手がかかるだけでなく、培養器の立体的な利用が難しく
、培養の効率が悪いといった問題がある。
カゴや木子の利用によって行われてきた。しかし、これ
らの増殖法は、広い土地と多くの人手を必要とするばか
りでなく、近年ウイルス病の蔓延により前記植物の種苗
の増殖速度の低下、生長速度の低下、花や球根類の品質
低下が問題となっている。これらの問題点を解決するた
めに、生長点を培養し、ウイルスフリー化した球根類を
植物組織培養により増殖する研究が報告されている。例
えば、特開昭５５−１５７３４号公報には、固体培地を
用いてユリ属植物の組織片から子球を形成させて増殖さ
せた後、これを液体培地に移して培養して肥大させるこ
とからなるユリ属植物の大量増殖方法が開示されている
。しかし、前記方法では肥大培養の前段において寒天を
用いた固体培地を使用しているため培養操作に多くの人
手がかかるだけでなく、培養器の立体的な利用が難しく
、培養の効率が悪いといった問題がある。
【０００３】かかる背景のもとに本出願人は、特願昭６
０−１２８３４８号によって、ユリ種苗を増殖する方法
を提案した。前記方法を用いれば、効率良く種苗を大量
増殖できる。
０−１２８３４８号によって、ユリ種苗を増殖する方法
を提案した。前記方法を用いれば、効率良く種苗を大量
増殖できる。
【０００４】
【発明が解決しようとする課題】従来の組織培養法によ
る球根の増殖方法の多くは、実用技術として利用するた
めには培養方法を改良して、増殖効率ならびに技術の安
定化を達成することが必要である。例えば、球根植物の
組織培養による増殖では、培養物の一部がカルス化して
、球根の発育が抑制される現象が観察されており、回避
すべき重要な問題となっている。また、不定芽もしくは
小球根が次から次へと分化し続けて、先に分化した不定
芽もしくは小球根の肥大を妨げるといった問題もある。
る球根の増殖方法の多くは、実用技術として利用するた
めには培養方法を改良して、増殖効率ならびに技術の安
定化を達成することが必要である。例えば、球根植物の
組織培養による増殖では、培養物の一部がカルス化して
、球根の発育が抑制される現象が観察されており、回避
すべき重要な問題となっている。また、不定芽もしくは
小球根が次から次へと分化し続けて、先に分化した不定
芽もしくは小球根の肥大を妨げるといった問題もある。
【０００５】球根の肥大を誘起する方法として、チュー
リップ球根の増殖肥大技術として、寒天培地上で分化し
た不定芽をアブサイシン酸を含む寒天培地に移植するこ
とによって球根の肥大を促進する技術（Ｙ．， Ｎｉｓ
ｈｉｕｃｈｉ 著、Ｓｔｕｄｉｅｓ ｏｎ Ｖｅｇｉｔ
ａｔｉｖｅＰｒｏｐａｇａｔｉｏｎ ｏｆ Ｔｕｒｔｉ
ｐｓ． Ｖ． Ｅｆｆｅｃｔ ｏｆ ＧｒｏｗｔｈＲｅ
ｇｕｒａｔｏｒｓ ｏｎ Ｔｈｅ Ｂｕｌｂ Ｆｏｒｍ
ａｔｉｏｎ ｏｆ Ａｄｖｅｎｔｉｔｉｏｕｓ Ｂｕｄ
Ｃｕｌｔｕｒｅｄ ｉｎ ｖｉｔｒｏ．， Ｊｏｕｒ
ｎａｌ ｏｆ Ｈｏｋｋａｉｄｏ Ｕｎｉｖｅｒｓｉｔ
ｙ ｏｆ Ｅｄｕｃａｔｉｏｎ Ｖｏｌ．３４， Ｎｏ
．１：９−１５， １９８３） が知られている。また
、特開昭６１−５６０２２には、培地中に添加したアブ
サイシン酸がカルスの形成を抑え球根の肥大を促進する
ことが記載されている。
リップ球根の増殖肥大技術として、寒天培地上で分化し
た不定芽をアブサイシン酸を含む寒天培地に移植するこ
とによって球根の肥大を促進する技術（Ｙ．， Ｎｉｓ
ｈｉｕｃｈｉ 著、Ｓｔｕｄｉｅｓ ｏｎ Ｖｅｇｉｔ
ａｔｉｖｅＰｒｏｐａｇａｔｉｏｎ ｏｆ Ｔｕｒｔｉ
ｐｓ． Ｖ． Ｅｆｆｅｃｔ ｏｆ ＧｒｏｗｔｈＲｅ
ｇｕｒａｔｏｒｓ ｏｎ Ｔｈｅ Ｂｕｌｂ Ｆｏｒｍ
ａｔｉｏｎ ｏｆ Ａｄｖｅｎｔｉｔｉｏｕｓ Ｂｕｄ
Ｃｕｌｔｕｒｅｄ ｉｎ ｖｉｔｒｏ．， Ｊｏｕｒ
ｎａｌ ｏｆ Ｈｏｋｋａｉｄｏ Ｕｎｉｖｅｒｓｉｔ
ｙ ｏｆ Ｅｄｕｃａｔｉｏｎ Ｖｏｌ．３４， Ｎｏ
．１：９−１５， １９８３） が知られている。また
、特開昭６１−５６０２２には、培地中に添加したアブ
サイシン酸がカルスの形成を抑え球根の肥大を促進する
ことが記載されている。
【０００６】しかしながら、従来の方法で増殖肥大させ
た球根類は土壌移植後の発芽が抑制されるもしくは著し
く遅延するさらには発芽時期が斉一でなくバラツクとい
う問題がある。
た球根類は土壌移植後の発芽が抑制されるもしくは著し
く遅延するさらには発芽時期が斉一でなくバラツクとい
う問題がある。
【０００７】
【問題点を解決するための手段】本発明者らは、以上の
問題点の解決を目的として、組織培養による球根類の増
殖方法について詳細な検討を行なった結果、肥大培地中
の燐酸濃度を０．４０ｍＭ以下乃至零にまで下げて培養
することにより以上の問題点を解決することができるこ
とを見いだし、この新知見に基づいて本発明を完成した
ものである。
問題点の解決を目的として、組織培養による球根類の増
殖方法について詳細な検討を行なった結果、肥大培地中
の燐酸濃度を０．４０ｍＭ以下乃至零にまで下げて培養
することにより以上の問題点を解決することができるこ
とを見いだし、この新知見に基づいて本発明を完成した
ものである。
【０００８】したがって、本発明の球根類の増殖方法は
、植物組織培養による球根類の増殖方法において、球根
植物の組織片あるいは培養細胞を分化培地で培養し、不
定芽あるいは小球根類を分化させ、ついで燐酸濃度が０
．４０ｍＭ以下乃至燐酸を含まない培地で前記分化させ
た不定芽あるいは前記小球根類を培養して肥大させるこ
とを特徴とするものである。
、植物組織培養による球根類の増殖方法において、球根
植物の組織片あるいは培養細胞を分化培地で培養し、不
定芽あるいは小球根類を分化させ、ついで燐酸濃度が０
．４０ｍＭ以下乃至燐酸を含まない培地で前記分化させ
た不定芽あるいは前記小球根類を培養して肥大させるこ
とを特徴とするものである。
【０００９】以下に本発明の詳細を説明する。本発明は
次のＡＢ二つの工程からなる組織培養による球根類の増
殖法である。本発明では球根植物の組織培養は前記植物
の組織片または培養細胞を用いて行なうことができる。 前記組織片として具体的には茎頂、茎、葉、花、種子、
小球根、根またはその他の組織を小片に切断した球根植
物の組織片を例示することができ、これらの組織片は通
常、次亜塩素酸ソーダ、エチルアルコールや炎によって
殺菌した後に使用される。しかし、無菌的に培養もしく
は栽培した球根植物を使用する場合には、上記の殺菌操
作は不要である。また、無ウイルスの球根植物を増殖す
る場合には、培養材料として生長点近傍組織、生長点近
傍組織から得られた球根植物の前述した組織片等を用い
ることができる。 （Ａ）不定芽および小球根の形成 本発明では、分化培地を用いて球根植物の球根切片また
はその他の組織片を培養して不定芽および小球根を分化
させる。分化培地とは、不定芽および小球根が球根切片
またはその他の組織片から分化しやすいように従来知ら
れている培地及びこれら培地の成分を改良した改変培地
に多くの場合はオーキシンやサイトカイニンなどの植物
ホルモンを添加した培地である。そして、例えば、ムラ
シゲ・スクーグ培地、ホワイト培地、ニッチアンドニッ
チ培地、リンスマイヤースクーグ培地等の通常の組織培
養に使用される培地、あるいはこれらの培地を基本培地
として改変を行なった改変培地を用いることができる。 また、本発明の組織培養方法においては、培養中に組織
片または培養細胞が芽や根に分化するのを促進させるた
めに、ベンジルアデニン、カイネチン、ゼアチン、イソ
ペンテルアデニン、インドール酢酸、インドール酪酸、
ナフタレン酢酸、２，４−ジクロルフェノキシ酢酸など
の植物生長調節物質を前記培地に添加して培養を行なう
と良い。これらの植物生長調節物質の添加量は植物生長
調節物質の種類、球根植物の種類等によって異なるが、
一般に１０−４ｍｇ／Ｌから５０ｍｇ／Ｌが良い。しか
し、これらの植物調節物質の量が多すぎると、本発明の
球根植物の組織培養によって得られる球根を更に切断し
、培養して不定芽もしくは小球根を分化させる場合に、
形態的異常や遺伝的変異を生じさせることがあるので、
より好ましくは、１０−３ｍｇ／Ｌから１ｍｇ／Ｌ程度
が良い。球根植物を培養するには、蔗糖、ブドウ糖、果
糖、麦芽糖などの炭素源を培地中に添加した方が良い。 炭素源の添加量は一般に５ｇ／Ｌ から１５０ｇ／Ｌが
よく、好ましくは１０ｇ／Ｌ から５０ｇ／Ｌ がよい
。培地のｐＨは、４．０から８．０が好適である。また
培養中に光は必ずしも必要ではないが、 １００から
１００００ルクスの光量の照明下で培養するとよい結果
が得られることもある。培養の温度は１５℃から３５℃
が好適である。
次のＡＢ二つの工程からなる組織培養による球根類の増
殖法である。本発明では球根植物の組織培養は前記植物
の組織片または培養細胞を用いて行なうことができる。 前記組織片として具体的には茎頂、茎、葉、花、種子、
小球根、根またはその他の組織を小片に切断した球根植
物の組織片を例示することができ、これらの組織片は通
常、次亜塩素酸ソーダ、エチルアルコールや炎によって
殺菌した後に使用される。しかし、無菌的に培養もしく
は栽培した球根植物を使用する場合には、上記の殺菌操
作は不要である。また、無ウイルスの球根植物を増殖す
る場合には、培養材料として生長点近傍組織、生長点近
傍組織から得られた球根植物の前述した組織片等を用い
ることができる。 （Ａ）不定芽および小球根の形成 本発明では、分化培地を用いて球根植物の球根切片また
はその他の組織片を培養して不定芽および小球根を分化
させる。分化培地とは、不定芽および小球根が球根切片
またはその他の組織片から分化しやすいように従来知ら
れている培地及びこれら培地の成分を改良した改変培地
に多くの場合はオーキシンやサイトカイニンなどの植物
ホルモンを添加した培地である。そして、例えば、ムラ
シゲ・スクーグ培地、ホワイト培地、ニッチアンドニッ
チ培地、リンスマイヤースクーグ培地等の通常の組織培
養に使用される培地、あるいはこれらの培地を基本培地
として改変を行なった改変培地を用いることができる。 また、本発明の組織培養方法においては、培養中に組織
片または培養細胞が芽や根に分化するのを促進させるた
めに、ベンジルアデニン、カイネチン、ゼアチン、イソ
ペンテルアデニン、インドール酢酸、インドール酪酸、
ナフタレン酢酸、２，４−ジクロルフェノキシ酢酸など
の植物生長調節物質を前記培地に添加して培養を行なう
と良い。これらの植物生長調節物質の添加量は植物生長
調節物質の種類、球根植物の種類等によって異なるが、
一般に１０−４ｍｇ／Ｌから５０ｍｇ／Ｌが良い。しか
し、これらの植物調節物質の量が多すぎると、本発明の
球根植物の組織培養によって得られる球根を更に切断し
、培養して不定芽もしくは小球根を分化させる場合に、
形態的異常や遺伝的変異を生じさせることがあるので、
より好ましくは、１０−３ｍｇ／Ｌから１ｍｇ／Ｌ程度
が良い。球根植物を培養するには、蔗糖、ブドウ糖、果
糖、麦芽糖などの炭素源を培地中に添加した方が良い。 炭素源の添加量は一般に５ｇ／Ｌ から１５０ｇ／Ｌが
よく、好ましくは１０ｇ／Ｌ から５０ｇ／Ｌ がよい
。培地のｐＨは、４．０から８．０が好適である。また
培養中に光は必ずしも必要ではないが、 １００から
１００００ルクスの光量の照明下で培養するとよい結果
が得られることもある。培養の温度は１５℃から３５℃
が好適である。
【００１０】なお、本発明は固体培地を用いても液体培
地を用いても行なうことができる。 （Ｂ）肥大培地による不定芽および小球根の培養上記（
Ａ）で不定芽あるいは小球根を形成させた後、培地を無
菌的に抜き取り、肥大培地に交換して培養することによ
って、不定芽もしくは小球根を効率的に肥大させること
ができる。肥大培地とは、不定芽および小球根が肥大生
長しやすいように糖濃度を高め、不定芽もしくは小球根
の肥大を促進するように改変した培地であって、前記培
地成分の燐酸濃度は０．４０ｍＭ以下であり、より好ま
しくは０．２０ｍＭ以下である。前記培地には必要に応
じて生長調節物質を存在させても良い。本発明では燐酸
を完全に抜いても良い結果が得られることがある。培地
中の燐酸濃度を減らす場合、他の無機成分も減少するこ
とがある。例えば、燐酸源としてＫＨ２ＰＯ４ を用い
る場合、ＫＨ２ＰＯ４ を減らすとカリウム（Ｋ）も減
ってしまうのでＫを他の物質で補う必要がある。他のカ
リウム源として例えば塩化カリウムＫＣｌ があげられ
る。糖濃度を高める場合は５％から１５％程度まで高め
ると良い。より好ましくは８％までである。また、添加
する生長調節物質としては、インドール酢酸、インドー
ル酪酸、ナフタレン酢酸、２，４−ジクロルフェノキシ
酢酸、アンシミドール、クロロコリン塩、Ｂ−ナイン等
が例示される。添加するこれら生長調節物質の濃度は、
１０−３ｍｇ／Ｌから２０ｍｇ／Ｌ程度が良い。 また、肥大培地は任意の期間培養の後、繰り返し培地を
更新することによって不定芽あるいは球根を効率的に肥
大させることもできる。
地を用いても行なうことができる。 （Ｂ）肥大培地による不定芽および小球根の培養上記（
Ａ）で不定芽あるいは小球根を形成させた後、培地を無
菌的に抜き取り、肥大培地に交換して培養することによ
って、不定芽もしくは小球根を効率的に肥大させること
ができる。肥大培地とは、不定芽および小球根が肥大生
長しやすいように糖濃度を高め、不定芽もしくは小球根
の肥大を促進するように改変した培地であって、前記培
地成分の燐酸濃度は０．４０ｍＭ以下であり、より好ま
しくは０．２０ｍＭ以下である。前記培地には必要に応
じて生長調節物質を存在させても良い。本発明では燐酸
を完全に抜いても良い結果が得られることがある。培地
中の燐酸濃度を減らす場合、他の無機成分も減少するこ
とがある。例えば、燐酸源としてＫＨ２ＰＯ４ を用い
る場合、ＫＨ２ＰＯ４ を減らすとカリウム（Ｋ）も減
ってしまうのでＫを他の物質で補う必要がある。他のカ
リウム源として例えば塩化カリウムＫＣｌ があげられ
る。糖濃度を高める場合は５％から１５％程度まで高め
ると良い。より好ましくは８％までである。また、添加
する生長調節物質としては、インドール酢酸、インドー
ル酪酸、ナフタレン酢酸、２，４−ジクロルフェノキシ
酢酸、アンシミドール、クロロコリン塩、Ｂ−ナイン等
が例示される。添加するこれら生長調節物質の濃度は、
１０−３ｍｇ／Ｌから２０ｍｇ／Ｌ程度が良い。 また、肥大培地は任意の期間培養の後、繰り返し培地を
更新することによって不定芽あるいは球根を効率的に肥
大させることもできる。
【００１１】上記Ａ−Ｂの工程を経た球根の培地成分を
洗浄後、土壌に移植する。土壌として圃場の土はもちろ
んのこと、砂、バーミキライト、ピートモス、鹿沼土、
水苔等も単独あるいは適宜混合して利用できる。上記Ａ
−Ｂの工程を経て得られた球根を慣行の栽培条件で栽培
する限りは、移植の際の外部の環境に慣れさせるための
特別な順化操作は必要としない。
洗浄後、土壌に移植する。土壌として圃場の土はもちろ
んのこと、砂、バーミキライト、ピートモス、鹿沼土、
水苔等も単独あるいは適宜混合して利用できる。上記Ａ
−Ｂの工程を経て得られた球根を慣行の栽培条件で栽培
する限りは、移植の際の外部の環境に慣れさせるための
特別な順化操作は必要としない。
【００１２】なお本発明が適用できる球根植物としては
下記のものおよびそれらを材料として育成された品種が
例示される。 単子葉植物綱 ユリ目（Ｌｉｌｉｆｌｏｒａｅ） ユリ科（Ｌｉｌｉａｃｅａｓｅ） タマネギ（Ａｌｌｉｕｍ ｃｅｐａ） ヤマユリ（Ｌｉｌｉｕｍ ａｕｒａｔｕｍ）オニユリ（
Ｌｉｌｉｕｍ ｌａｎｃｉｆｏｌｉｕｍ）カノコユリ（
Ｌｉｌｉｕｍ ｓｐｅｃｉｏｓｕｍ）テッポウユリ（Ｌ
ｉｌｉｕｍ ｌｏｎｇｉｆｌｏｒｕｍ）スカシユリ（Ｌ
ｉｌｉｕｍ ｅｌｅｇａｎｓ）チュウリップ（Ｔｕｌｉ
ｐａ ｇｅｓｎｅｒｉａｎａ）ヘメロカリス（Ｈｅｍｅ
ｒｏｋａｒｉｏｓｕ ｓｐ．）ヒアシンス（Ｈｉａｃｉ
ｎｔｈｕｓ ｏｒｉｅｎｔａｒｉｓ）ヒガンバナ科（Ａ
ｍａｒｙｌｌｄｉａｃｅａｅ ｓｐ．）アルストロメリ
ア（Ａｌｓｔｒｏｍｅｒｉａ ｓｐ．）アマリリス（Ｈ
ｉｐｐｅａｓｔｒｕｍ ｓｐ．）スイセン（Ｎａｒｕｃ
ｉｓｓｕｓ ｓｐ．）ネリネ（Ｎｅｒｉｎｅ ｓｐ．） アヤメ科（Ｉｒｉｄａｃｅａｅ） クロッカス（Ｃｒｏｃｕｓ ｓｐ．） フリージア（Ｆｒｅｅｓｉａ ｓｐ．）グラジオラス（
Ｇｌａｄｉｏｌｕｓ ｓｐ．）ダッチアイリス（Ｉｒｉ
ｓ ｇｅｒｍａｎｉｃａ）サトイモ目（Ａｒａｌｅｓ） サトイモ科（Ａｒａｃｅａｅ） サトイモ（Ｃｏｌｏｃａｓｉａ ｅｓｕｃｕｌｅｎｔａ
）カラジウム（Ｃａｌａｄｉｕｍ ｂｉｃｏｌｏｒ）双
子葉植物綱 ヒルガオ科（Ｃｏｎｖｏｌｖｕｌａｃｅａｅ）サツマイ
モ（Ｉｐｏｍｏｅａ ｂａｔａｔａｓ Ｐｏｉｒ．）ナ
ス科（Ｓｌａｎａｃｅａｅ） ジャガイモ（Ｓｏｌａｎｕｍ ｔｕｂｅｒｏｓｕｍ Ｌ
．）次に実施例について説明する。
下記のものおよびそれらを材料として育成された品種が
例示される。 単子葉植物綱 ユリ目（Ｌｉｌｉｆｌｏｒａｅ） ユリ科（Ｌｉｌｉａｃｅａｓｅ） タマネギ（Ａｌｌｉｕｍ ｃｅｐａ） ヤマユリ（Ｌｉｌｉｕｍ ａｕｒａｔｕｍ）オニユリ（
Ｌｉｌｉｕｍ ｌａｎｃｉｆｏｌｉｕｍ）カノコユリ（
Ｌｉｌｉｕｍ ｓｐｅｃｉｏｓｕｍ）テッポウユリ（Ｌ
ｉｌｉｕｍ ｌｏｎｇｉｆｌｏｒｕｍ）スカシユリ（Ｌ
ｉｌｉｕｍ ｅｌｅｇａｎｓ）チュウリップ（Ｔｕｌｉ
ｐａ ｇｅｓｎｅｒｉａｎａ）ヘメロカリス（Ｈｅｍｅ
ｒｏｋａｒｉｏｓｕ ｓｐ．）ヒアシンス（Ｈｉａｃｉ
ｎｔｈｕｓ ｏｒｉｅｎｔａｒｉｓ）ヒガンバナ科（Ａ
ｍａｒｙｌｌｄｉａｃｅａｅ ｓｐ．）アルストロメリ
ア（Ａｌｓｔｒｏｍｅｒｉａ ｓｐ．）アマリリス（Ｈ
ｉｐｐｅａｓｔｒｕｍ ｓｐ．）スイセン（Ｎａｒｕｃ
ｉｓｓｕｓ ｓｐ．）ネリネ（Ｎｅｒｉｎｅ ｓｐ．） アヤメ科（Ｉｒｉｄａｃｅａｅ） クロッカス（Ｃｒｏｃｕｓ ｓｐ．） フリージア（Ｆｒｅｅｓｉａ ｓｐ．）グラジオラス（
Ｇｌａｄｉｏｌｕｓ ｓｐ．）ダッチアイリス（Ｉｒｉ
ｓ ｇｅｒｍａｎｉｃａ）サトイモ目（Ａｒａｌｅｓ） サトイモ科（Ａｒａｃｅａｅ） サトイモ（Ｃｏｌｏｃａｓｉａ ｅｓｕｃｕｌｅｎｔａ
）カラジウム（Ｃａｌａｄｉｕｍ ｂｉｃｏｌｏｒ）双
子葉植物綱 ヒルガオ科（Ｃｏｎｖｏｌｖｕｌａｃｅａｅ）サツマイ
モ（Ｉｐｏｍｏｅａ ｂａｔａｔａｓ Ｐｏｉｒ．）ナ
ス科（Ｓｌａｎａｃｅａｅ） ジャガイモ（Ｓｏｌａｎｕｍ ｔｕｂｅｒｏｓｕｍ Ｌ
．）次に実施例について説明する。
【００１３】
【実施例１】無菌のオリエンタルハイブリッド系のユリ
品種球根のリン片切片を用い、ショ糖４％、ナフタレン
酢酸０．０１ｍｇ／Ｌ、ベンジルアデニン０．０２ｍｇ
／Ｌを含有するｐＨ ５．８の無菌の １／２ムラシゲ
スクーグの液体培地 （分化培地；組成を表１に示す）
５０ｍｌを入れた培養器 （容量 １５０ｍｌ） に
切片０．５ｇ を仕込んだ。培養容器には、０．２２μ
ｍの除菌フィルターを通過させた空気を３ｍｌ／分の速
度で液体培地中に吹き込みながら、２５℃、暗所で１．
５ケ月培養し小球根を分化させた。その後培地を燐酸濃
度を０．４０ｍＭに下げて糖濃度を５％に高めた培地
（肥大培地） と交換して３ケ月培養した。この間１ケ
月おきに培地を更新した。
品種球根のリン片切片を用い、ショ糖４％、ナフタレン
酢酸０．０１ｍｇ／Ｌ、ベンジルアデニン０．０２ｍｇ
／Ｌを含有するｐＨ ５．８の無菌の １／２ムラシゲ
スクーグの液体培地 （分化培地；組成を表１に示す）
５０ｍｌを入れた培養器 （容量 １５０ｍｌ） に
切片０．５ｇ を仕込んだ。培養容器には、０．２２μ
ｍの除菌フィルターを通過させた空気を３ｍｌ／分の速
度で液体培地中に吹き込みながら、２５℃、暗所で１．
５ケ月培養し小球根を分化させた。その後培地を燐酸濃
度を０．４０ｍＭに下げて糖濃度を５％に高めた培地
（肥大培地） と交換して３ケ月培養した。この間１ケ
月おきに培地を更新した。
【００１４】本培養により、培養１．５ケ月までに切片
０．５ｇから、６０から８０個の球根が分化し、その後
の培養で、３０から５０の球根が新たに分化し、培養終
了時には、８０から１３０ の球根が得られた。得られ
た球根の平均球径は４．５ｍｍであった。また、球根以
外のカスル状培養物は全量（球根を含む培養物の全量、
以下同じ）の２０％以下であった。
０．５ｇから、６０から８０個の球根が分化し、その後
の培養で、３０から５０の球根が新たに分化し、培養終
了時には、８０から１３０ の球根が得られた。得られ
た球根の平均球径は４．５ｍｍであった。また、球根以
外のカスル状培養物は全量（球根を含む培養物の全量、
以下同じ）の２０％以下であった。
【００１５】なお、得られた球根をバーミキライトに植
え付けて２３℃明条件で発芽試験を行ったところ、植え
付け後１ケ月までに９７％が発芽した。
表１ ＭＳ培地の組成 塩化カ
ルシウム・２水塩
４４０ｍｇ 硝酸
アンモニウム
１６５０ｍｇ
硝酸カリウム
１９００ｍｇ
硫酸マグネシュウム・７水塩
３７０ｍｇ
リン酸第一カリウム
１７０ｍｇ
Ｎａ２ ＥＤＴＡ・２水塩
４２．１ｍｇ 硫酸マンガン・
４水塩
２２．３ｍｇ 硫酸亜鉛・
７水塩
１．０ｍｇ ホ
ウ酸
６．２ｍｇ
モリブデン酸ソーダ・２水塩
０．２５ｍｇ
硫酸銅
０
．０２５ｍｇ 塩化コバルト・６水
塩
０．０２５ｍｇ イノシトール
１００ｍｇ ニ
コチン酸
０．５０ｍｇ
塩酸ピリドキシン
０．５０ｍｇ
グリシン
２．０ｍｇ ビオチン
０．５ｍｇ
え付けて２３℃明条件で発芽試験を行ったところ、植え
付け後１ケ月までに９７％が発芽した。
表１ ＭＳ培地の組成 塩化カ
ルシウム・２水塩
４４０ｍｇ 硝酸
アンモニウム
１６５０ｍｇ
硝酸カリウム
１９００ｍｇ
硫酸マグネシュウム・７水塩
３７０ｍｇ
リン酸第一カリウム
１７０ｍｇ
Ｎａ２ ＥＤＴＡ・２水塩
４２．１ｍｇ 硫酸マンガン・
４水塩
２２．３ｍｇ 硫酸亜鉛・
７水塩
１．０ｍｇ ホ
ウ酸
６．２ｍｇ
モリブデン酸ソーダ・２水塩
０．２５ｍｇ
硫酸銅
０
．０２５ｍｇ 塩化コバルト・６水
塩
０．０２５ｍｇ イノシトール
１００ｍｇ ニ
コチン酸
０．５０ｍｇ
塩酸ピリドキシン
０．５０ｍｇ
グリシン
２．０ｍｇ ビオチン
０．５ｍｇ
【００１６】
【実施例２】実施例１で、肥大培地の燐酸濃度を０．０
ｍＭにしたこと以外は実施例１と同様に行なった。本培
養により、切片０．５ｇ から培養１．５ケ月までに６
０から８０個の球根が分化し、その後の培養で１０球程
度の球根が新たに分化し、培養終了後には、６５から９
０個の球根が得られた。得られた球根の平均球径は３．
９ｍｍであった。また、球根以外のカルス状の培養物は
全重の１０％以下であった。
ｍＭにしたこと以外は実施例１と同様に行なった。本培
養により、切片０．５ｇ から培養１．５ケ月までに６
０から８０個の球根が分化し、その後の培養で１０球程
度の球根が新たに分化し、培養終了後には、６５から９
０個の球根が得られた。得られた球根の平均球径は３．
９ｍｍであった。また、球根以外のカルス状の培養物は
全重の１０％以下であった。
【００１７】なお、得られた球根をバーミキライトに植
え付けて２３℃明条件で発芽試験を行ったところ、植え
付け後１ケ月までに９２％が発芽した。
え付けて２３℃明条件で発芽試験を行ったところ、植え
付け後１ケ月までに９２％が発芽した。
【００１８】
【実施例３】実施例１で鉄砲ユリの無菌培養球根を用い
たこと以外は実施例１と同様に行った。本培養により、
切片０．５ｇ から培養１．５ケ月までに６０から８０
個の球根が分化し、その後の培養で、３０から４０個の
球根が新たに分化し、培養終了時には、８０から１２０
個の球根が得られた。得られた球根の平均球径は４．４
ｍｍであった。また、球根以外のカルス状の培養物は全
重の２５％以下であった。
たこと以外は実施例１と同様に行った。本培養により、
切片０．５ｇ から培養１．５ケ月までに６０から８０
個の球根が分化し、その後の培養で、３０から４０個の
球根が新たに分化し、培養終了時には、８０から１２０
個の球根が得られた。得られた球根の平均球径は４．４
ｍｍであった。また、球根以外のカルス状の培養物は全
重の２５％以下であった。
【００１９】なお、得られた球根をバーミキライトに植
え付けて２３℃明条件で発芽試験を行ったところ、植え
付け後１ケ月までに９８％が発芽した。
え付けて２３℃明条件で発芽試験を行ったところ、植え
付け後１ケ月までに９８％が発芽した。
【００２０】
【実施例４】実施例１の分化培地で液体培地を固体培地
（寒天８ｇ／Ｌ）に変え、又ベンジルアデニンを用い
ずナフタレン酢酸の濃度を０．１ｍｇ／Ｌにし、更に肥
大培地において糖濃度を４％にすること以外は実施例１
と同様に行った。本培養により、切片０．５ｇ から培
養１．５ケ月までに２０から２７個の球根が分化し、そ
の後の培養で、８から１５個の球根が新たに分化し、培
養終了時には、２４から４０個の球根が得られた。得ら
れた球根の平均球径は６．４ｍｍであった。また、球根
以外のカルス状の培養物は全重の２５％以下であった。
（寒天８ｇ／Ｌ）に変え、又ベンジルアデニンを用い
ずナフタレン酢酸の濃度を０．１ｍｇ／Ｌにし、更に肥
大培地において糖濃度を４％にすること以外は実施例１
と同様に行った。本培養により、切片０．５ｇ から培
養１．５ケ月までに２０から２７個の球根が分化し、そ
の後の培養で、８から１５個の球根が新たに分化し、培
養終了時には、２４から４０個の球根が得られた。得ら
れた球根の平均球径は６．４ｍｍであった。また、球根
以外のカルス状の培養物は全重の２５％以下であった。
【００２１】なお、得られた球根をバーミキライトに植
え付けて２３℃明条件で発芽試験を行ったところ、植え
付け後１ケ月までに８８％が発芽した。 比較例１ 実施例１で、肥大培地の燐酸濃度を０．５ｍＭにしたこ
と以外は実施例１と同様に行なった。
え付けて２３℃明条件で発芽試験を行ったところ、植え
付け後１ケ月までに８８％が発芽した。 比較例１ 実施例１で、肥大培地の燐酸濃度を０．５ｍＭにしたこ
と以外は実施例１と同様に行なった。
【００２２】本培養により、切片０．５ｇ から球根が
培養１．５ケ月までに６０から８０個の球根が分化し、
その後の培養で、 １００から １２０個の球根が新た
に分化し、培養終了後には、分化した球根数は １６０
から ２００個と増大した。 そのため得られた球根の平均球径は３．６ｍｍと実施例
１のものに比べて小さかった。また、球根以外のカルス
状の培養物は全重の６０から７５％に増加した。
培養１．５ケ月までに６０から８０個の球根が分化し、
その後の培養で、 １００から １２０個の球根が新た
に分化し、培養終了後には、分化した球根数は １６０
から ２００個と増大した。 そのため得られた球根の平均球径は３．６ｍｍと実施例
１のものに比べて小さかった。また、球根以外のカルス
状の培養物は全重の６０から７５％に増加した。
【００２３】なお、得られた球根をバーミキライトに植
え付けて２３℃明条件で発芽試験を行ったところ、植え
付け後１ケ月までに９６％が発芽した。 比較例２ 実施例１で、肥大培地の燐酸濃度を０．９０ｍＭにした
こと以外は実施例１と同様に行なった。
え付けて２３℃明条件で発芽試験を行ったところ、植え
付け後１ケ月までに９６％が発芽した。 比較例２ 実施例１で、肥大培地の燐酸濃度を０．９０ｍＭにした
こと以外は実施例１と同様に行なった。
【００２４】本培養により、切片０．５ｇ から培養１
．５ケ月までに６０から８０個の球根が分化し、その培
養で、７０から８０個の球根が新たに分化し、培養終了
後には、分化した球根数は １３０から １６０個と増
大した。得られた球根の平均球径は４．０ｍｍであった
。また、球根以外のカルス状の培養物は全重の７０から
８０％と増加した。なお、得られた球根をバーミキライ
トに植え付けて２３℃明条件で発芽試験を行ったところ
、植え付け後１ケ月までに９２％が発芽した。
．５ケ月までに６０から８０個の球根が分化し、その培
養で、７０から８０個の球根が新たに分化し、培養終了
後には、分化した球根数は １３０から １６０個と増
大した。得られた球根の平均球径は４．０ｍｍであった
。また、球根以外のカルス状の培養物は全重の７０から
８０％と増加した。なお、得られた球根をバーミキライ
トに植え付けて２３℃明条件で発芽試験を行ったところ
、植え付け後１ケ月までに９２％が発芽した。
【００２５】比較例３
比較例２で肥大培地にアブシジン酸を０．８ｐｐｍ添加
したこと以外は比較例２と同様に行なった。本培養によ
り、切片０．５ｇ から培養１．５ケ月までに６０から
８０の球根が分化し、その後の培養で、３０から４０の
球根が新たに分化し、培養終了後には、 １００から
１１２０ の球根が得られた。得られた球根の平均球径
は４．２ｍｍであった。また、球根以外のカルス状の培
養物は全重の４０から５０％であった。
したこと以外は比較例２と同様に行なった。本培養によ
り、切片０．５ｇ から培養１．５ケ月までに６０から
８０の球根が分化し、その後の培養で、３０から４０の
球根が新たに分化し、培養終了後には、 １００から
１１２０ の球根が得られた。得られた球根の平均球径
は４．２ｍｍであった。また、球根以外のカルス状の培
養物は全重の４０から５０％であった。
【００２６】これらの球根をバーミキライトに植え付け
て２３℃明条件で発芽試験を行ったところ、植え付け後
１ケ月までの発芽率は３９％であり、９０％以上が発芽
するまでに２ケ月以上かかった。表２に上記各実施例及
び比較例の一覧表を示す。
て２３℃明条件で発芽試験を行ったところ、植え付け後
１ケ月までの発芽率は３９％であり、９０％以上が発芽
するまでに２ケ月以上かかった。表２に上記各実施例及
び比較例の一覧表を示す。
【００２７】
【００２８】
【発明の効果】本発明によれば、カルスの形成と肥大に
よる栄養分の浪費や、球根が次から次へと分化すること
による栄養分の浪費を抑制でき、一時期に分化させた不
定芽もしくは小球根を効率良く肥大させることができる
。そのためより小さい培養容器を用いて少ない培地量で
球根類を増殖することができる。また、得られた球根を
土壌に移植したところ、速やかに発芽させることができ
た。
よる栄養分の浪費や、球根が次から次へと分化すること
による栄養分の浪費を抑制でき、一時期に分化させた不
定芽もしくは小球根を効率良く肥大させることができる
。そのためより小さい培養容器を用いて少ない培地量で
球根類を増殖することができる。また、得られた球根を
土壌に移植したところ、速やかに発芽させることができ
た。
Claims (1)
- 【請求項１】 植物組織培養による球根類の増殖方法
において、球根植物の組織片あるいは培養細胞を分化培
地で培養し、不定芽あるいは小球根類を分化させ、つい
で燐酸濃度が０．４０ｍＭ以下乃至燐酸を含まない培地
で前記分化させた不定芽あるいは前記小球根類を培養し
て肥大させることを特徴とする球根類の増殖方法。
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP5167191A JP2901021B2 (ja) | 1991-03-15 | 1991-03-15 | 植物組織培養による球根類の増殖方法 |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP5167191A JP2901021B2 (ja) | 1991-03-15 | 1991-03-15 | 植物組織培養による球根類の増殖方法 |
Publications (2)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| JPH04287623A true JPH04287623A (ja) | 1992-10-13 |
| JP2901021B2 JP2901021B2 (ja) | 1999-06-02 |
Family
ID=12893347
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| JP5167191A Expired - Lifetime JP2901021B2 (ja) | 1991-03-15 | 1991-03-15 | 植物組織培養による球根類の増殖方法 |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| JP (1) | JP2901021B2 (ja) |
Cited By (14)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| JPH06233639A (ja) * | 1992-07-13 | 1994-08-23 | Akihiko Matsuyama | ユリなどの液体リン片培養方法及び培養装置 |
| JP2011016760A (ja) * | 2009-07-09 | 2011-01-27 | Noevir Co Ltd | ユリ属植物の球根及び／又はカルス抽出物を有効成分とする皮膚外用剤、経口用剤、保湿剤、抗老化剤、美白剤、抗酸化剤 |
| CN103314864A (zh) * | 2013-07-16 | 2013-09-25 | 李锋 | 一种由郁金香鳞片获得脱毒幼苗的方法 |
| CN103493738A (zh) * | 2013-10-14 | 2014-01-08 | 云南省农业科学院花卉研究所 | 一种朱顶红标准化离体培养种苗的方法 |
| CN104429561A (zh) * | 2014-12-22 | 2015-03-25 | 南京农业大学 | 一种打破老鸦瓣鳞茎休眠和增产的方法 |
| CN104686330A (zh) * | 2015-02-21 | 2015-06-10 | 杨业云 | 一种大花朱顶红组培快繁殖方法 |
| CN104719164A (zh) * | 2015-03-30 | 2015-06-24 | 青岛农业大学 | 一种甘薯脱毒原原种薯的快速繁殖方法 |
| CN108450333A (zh) * | 2018-04-17 | 2018-08-28 | 长江师范学院 | 一种卷丹百合愈伤组织的诱导方法 |
| CN109042337A (zh) * | 2018-09-30 | 2018-12-21 | 天津大学 | 一种利用马铃薯叶芽愈伤快速育苗的方法 |
| CN109220791A (zh) * | 2018-09-12 | 2019-01-18 | 上海市农业科学院 | 一种利用鳞茎繁育朱顶红的组培方法 |
| KR20190103054A (ko) * | 2018-02-27 | 2019-09-04 | 재단법인한택식물원 | 참나리 신품종 '오렌지 뷰티' 및 이를 판별하기 위한 분자마커 |
| CN116369203A (zh) * | 2023-03-20 | 2023-07-04 | 江苏省中国科学院植物研究所 | 一种石蒜属植物花序再生培养基和花序再生方法 |
| CN117426300A (zh) * | 2023-11-06 | 2024-01-23 | 邯郸市农业科学院 | 一种朱顶红再生植株幼苗的培养方法及其应用 |
| CN121100807A (zh) * | 2025-11-17 | 2025-12-12 | 广东良田农林科技有限公司 | 一种液体培养基育种郁金的方法及其应用 |
-
1991
- 1991-03-15 JP JP5167191A patent/JP2901021B2/ja not_active Expired - Lifetime
Cited By (18)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
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| CN103314864A (zh) * | 2013-07-16 | 2013-09-25 | 李锋 | 一种由郁金香鳞片获得脱毒幼苗的方法 |
| CN103493738A (zh) * | 2013-10-14 | 2014-01-08 | 云南省农业科学院花卉研究所 | 一种朱顶红标准化离体培养种苗的方法 |
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| CN104429561A (zh) * | 2014-12-22 | 2015-03-25 | 南京农业大学 | 一种打破老鸦瓣鳞茎休眠和增产的方法 |
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| CN108450333A (zh) * | 2018-04-17 | 2018-08-28 | 长江师范学院 | 一种卷丹百合愈伤组织的诱导方法 |
| CN109220791A (zh) * | 2018-09-12 | 2019-01-18 | 上海市农业科学院 | 一种利用鳞茎繁育朱顶红的组培方法 |
| CN109220791B (zh) * | 2018-09-12 | 2021-10-08 | 上海市农业科学院 | 一种利用鳞茎繁育朱顶红的组培方法 |
| CN109042337A (zh) * | 2018-09-30 | 2018-12-21 | 天津大学 | 一种利用马铃薯叶芽愈伤快速育苗的方法 |
| CN116369203A (zh) * | 2023-03-20 | 2023-07-04 | 江苏省中国科学院植物研究所 | 一种石蒜属植物花序再生培养基和花序再生方法 |
| CN116369203B (zh) * | 2023-03-20 | 2024-03-15 | 江苏省中国科学院植物研究所 | 一种石蒜属植物小花再生培养基及小花再生方法 |
| CN117426300A (zh) * | 2023-11-06 | 2024-01-23 | 邯郸市农业科学院 | 一种朱顶红再生植株幼苗的培养方法及其应用 |
| CN121100807A (zh) * | 2025-11-17 | 2025-12-12 | 广东良田农林科技有限公司 | 一种液体培养基育种郁金的方法及其应用 |
| CN121100807B (zh) * | 2025-11-17 | 2026-02-03 | 广东良田农林科技有限公司 | 一种液体培养基育种郁金的方法及其应用 |
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
| JP2901021B2 (ja) | 1999-06-02 |
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