JPH04290894A

JPH04290894A - Ｃｍｐ−シアル酸アナログ体

Info

Publication number: JPH04290894A
Application number: JP7589191A
Authority: JP
Inventors: Yasumaru Hatanaka; 保丸畑中; Yuichi Kaneoka; 金岡　祐一
Original assignee: Mect Corp
Current assignee: Mect Corp
Priority date: 1991-03-15
Filing date: 1991-03-15
Publication date: 1992-10-15

Abstract

(57)【要約】本公報は電子出願前の出願データであるた
め要約のデータは記録されません。

Description

【発明の詳細な説明】

【０００１】

【産業上の利用分野】本発明は、新規なシチジル誘導体
及びＣＭＰ−シアル酸誘導体に関する。

【０００２】

【従来の技術】ＣＭＰ−シアル酸（シチジン−５’−モ
ノりん酸−Ｎ−アセチルノイラミン酸）は、シアリルト
ランスフェラーゼの基質となる化合物であることが知ら
れている。また、シアリルトランスフェラーゼは、ガン
グリオシドの生合成経路において糖鎖にシアル酸を導入
する重要な酵素である。シアリルトランスフェラーゼは
、理論的には、４種類存在すると考えられているが、今
のところ２種類しか発見されていない。また、均一な酵
素として単離されているのは、１種類のみである。この
ような状況下、シアリルトランスフェラーゼについての
全容は、依然明らかにされていない。

【０００３】

【発明が解決しようとする課題】そこで本発明の目的は
、上記のようなシアリルトランスフェラーゼの機能等に
ついて研究を行う上で有用であると期待される、ＣＭＰ
−シアル酸のアナローグを提供することにある。

【０００４】

【課題を解決するための手段】本発明は、一般式（ＩＩ
）で表わされるＣＭＰ−シアル酸のアナローグ及びその
合成中間体である一般式（Ｉ）で表わされるシチジル誘
導体に関する。

【０００５】

【化３】

【０００６】

【化４】

【０００７】一般式（Ｉ）中、Ｒ１　は水素原子又はア
セチル基を表わし、Ｒ２　はＣ２Ｈ５ＯＣＯＣＨ＝ＣＨ
２−、Ｃ２Ｈ５Ｏ２ＣＣＨ２−　又はＨＯＣＨ２ＣＨ２
−　を表わす。又、一般式（ＩＩ）　中、Ｒ３　は水素
原子又はアセチル基を表わし、Ｒ４　は水素原子又は臭
素原子を表わし、Ｒ５　は水素原子又はメチル基を表わ
し、Ｒ６　はそれぞれ水素原子を表わすか、又は２つの
Ｒ６　が共同で（ＣＨ３）２Ｃ＝を表わす。

【０００８】本発明を以下、反応スキームに基づいて説
明する。

【０００９】

【化５】

【００１０】

【化６】

【００１１】

【化７】

【００１２】

【化８】

【００１３】化合物（１）　はＳ．デビット（Ｄａｖｉ
ｄ）らの方法（Ｓ．　Ｄａｖｉｄ，　Ｇ．　ｄｅ　Ｓｅ
ｎｎｙｅｙ，　Ｊ．　Ｃｈｅｍ．　Ｓｏｃ．　Ｐｅｒｋ
ｉｎ　Ｉ，　３９５−３９３（１９８２））　により入
手することができる。

【００１４】化合物（１）　は、例えばジクロロメタン
等の溶媒中、室温付近でＰｈ３Ｐ＝ＣＨＣＯ２Ｃ２Ｈ５
と反応させることにより化合物（２）　を得ることがで
きる。

【００１５】化合物（２）　は例えばＰｄ／Ｃ等の還元
触媒の存在下水素還元することにより化合物（３）　を
得ることができる。還元反応はエタノール等の溶媒中、
室温付近で行うことができる。

【００１６】化合物（３）　はメタノール中ＮａＯＣ２
Ｈ５　と反応させて、脱アセチルすることにより化合物
（４）　を得ることができる。この脱アセチル化は室温
付近で行うことができる。

【００１７】化合物（４）　は、ＴＨＦ（テトラヒドロ
フラン）等の溶媒中、ＬｉＡｌＨ４で還元して、化合物
（５）　を得ることができる。この還元反応は室温付近
で行うことができる。

【００１８】化合物（５）　は無水酢酸でアセチル化し
て化合物（６）　を得ることができる。アセチル化の溶
媒としてはジメチルスルホキシド（ＤＭＳＯ）−水を用
い、加熱下（約６０℃）で行うことが好ましい。

【００１９】化合物（６）　は化合物（７）　とＡｇＯ
Ｔｆ　等の触媒の存在下反応させることにより化合物（
８）　を得ることができる。この反応はトルエン−ＣＨ
３ＮＯ３等の溶媒中、不活性ガス雰囲気下、室温付近で
行うことができる。尚、化合物（７）　はＫ．オカモト
らの方法（Ｋ．　Ｏｋａｍｏｔｏ，　　Ｋ．　Ｋｏｎｄ
ｏ，　　Ｔ．　Ｇｏｔｏ，　　Ｂｕｌｌ．　Ｃｈｅｍ．
　Ｓｏｃ．　Ｊｐｎ．，　６０　、６３１−６３６（１
９８７））により入手することができる。

【００２０】化合物（８）　は（ｎ−Ｂｕ）３ＳｎＨ　
と例えばベンゼン等の溶媒中で反応させることにより化
合物（９）　を得ることができる。この反応は還流条件
下、不活性ガス雰囲気中で行うことが好ましい。

【００２１】化合物（９）　は、ＣＦ３ＣＯ２Ｈ　水溶
液と有機溶媒、例えばジクロロメタンで処理することに
より化合物（１０）を得ることができる。この処理は室
温付近で行うことができる。

【００２２】化合物（１０）は、脱保護（脱メチル及び
アセチル）することにより化合物（１１）を得ることが
できる。脱アセチルは、化合物（１０）と例えばＫＯＣＨ３　と
をメタノール−ＴＨＦ等の溶媒中、不活性雰囲気下、室
温付近で反応させることにより行うことができる。次い
で、脱メチル及びアミド部分の脱アセチルは、例えばＮ
ａＨＣＯ３と室温付近で反応させることにより行うこと
ができる。さらに必要により中和して、化合物（１１）
を得ることができる。

【００２３】

【有用性】本発明の化合物（１）　〜（１１）は、いず
れも新規化合物である。化合物（１１）はシアリルトラ
ンスフェラーゼ阻害活性を有し、シアリルトランスフェ
ラーゼの代謝拮抗型化合物として、シアリルトランスフ
ェラーゼ用化学修飾試薬のリガンドとして有用である。又、化合物（１）　〜（１０）は化合物（１１）の合成
中間体として有用である。

【００２４】

【実施例】以下、本発明を実施例によりさらに説明する
。

【００２５】実施例１（化合物（１）　→（２））化合
物（１）　１．８７２ｇ（５．７９ｍｍｏｌ）を５０ｍ
ｌのジクロロメタンに溶解し、次いで５．５ｍｌのジク
ロロメタンに溶解したＰｈ３Ｐ＝ＣＨＣＯ２Ｃ２Ｈ５　
　２．０１１ｇ（５．７７ｍｍｏｌ）を加え、室温で撹
拌した。４時間後にさらに０．７３１ｇ（２．１０ｍｍ
ｏｌ）のＰｈ３Ｐ＝ＣＨＣＯ２Ｃ２Ｈ５を追加し、一晩
放置した。その後、反応混合物を減圧蒸留し、得られた残渣をシリ
カゲルカラム（アセトン：ジクロロメタン＝１：４）で
精製した。さらに酢酸エチル−ｎ−ヘキサンから再結晶
して０．８９１ｇ（２．２６ｍｍｏｌ）の白色固体とし
て化合物（２）　を得た（収率：３９％）

【００２６】実施例２（化合物（２）　→（３））化合
物（２）　０．８６８ｇ（２．２１ｍｍｏｌ）を６０ｍ
ｌのエタノールに溶解し、０．０７７ｇのＰｄ／Ｃを添
加して、水素雰囲気下室温で２４時間撹拌した。Ｐｄ／
Ｃをセライト５４５でろ別し、ろ液を減圧蒸留した。残
渣をシリカカラム（酢酸エチル）で精製し、０．６８９
ｇ（１．７４ｍｍｏｌ）の白色ガラス状の化合物（３）
　を得た。（収率７９％）ＦＡＢ−ＭＳ（ＣＨＣｌ３）３９６（ＭＨ＋　）　、ＨＲ　　Ｃ１８Ｈ２６Ｏ７Ｎ３

【００２７】実施例３（化合物（３）　→（４））化合
物（３）　１．２０４ｇ（３．０４ｍｍｏｌ）を蒸留エ
タノール４２ｍｌに溶解し、７．３ｍｌ（３．０２ｍｍ
ｏｌ）のＮａＯＣ２Ｈ５　の蒸留エタノール溶解を加え
た。その後室温で１時間撹拌し、１０％硫酸水溶液でｐ
Ｈを７．２に調節した。反応混合液を減圧蒸留し、得ら
れた白色ガラス状物をシリカカラム（メタノール：クロ
ロホルム＝１：６）で精製して、１．００３ｇ（２．８
４ｍｍｏｌ）の白色ガラス状化合物（４）　を得た（収
率９３％）。

【００２８】実施例４（化合物（４）　→（５））化合
物（４）　０．８９２ｇ（２．５２ｍｍｏｌ）を蒸留Ｔ
ＨＦ（テトラヒドロフラン）５５ｍｌに溶解し、次いで
０．１１７ｇ（３．０８ｍｍｏｌ、１．２当量）のＬｉ
ＡｌＨ４を加えた。窒素雰囲気下室温で撹拌し、０．５
時間後に０．１０６ｇ（２．７９ｍｍｏｌ）のＬｉＡｌ
Ｈ４を追加し、さらに２．５時間撹拌した。次いで反応
混合物に５ｍｌの水、数ｍｌの１５％ＮａＯＨ水溶液、
５ｍｌの水を加えた。得られたスラッジをセライト５４
５でろ過し、ろ液を減圧蒸留した。残渣をシリカカラム
（メタノール：クロロホルム＝１：４）で精製して、０
．６８８ｇ（２．２１ｍｍｏｌ）の化合物（５）　を得
た（収率：８８％）ＦＡＢ−ＭＳ（ＣＨ３ＯＨ）ｍ／ｚ　　３１２（ＭＨ＋　）　、６２３（２Ｍ　＋Ｈ
　＋）ＨＲ　　３１２　　　　Ｃ１４Ｈ２２Ｏ５Ｎ３　
（ＭＨ＋　）

【００２９】実施例５（化合物（５）　→
（６））化合物（６）　０．６４９ｇ（２．０８ｍｍｏ
ｌ）を４０ｍｌのＤＭＳＯ（ジメチルスルホキシド）と
２ｍｌの水に溶解し、０．６８ｍｌ（７．２１ｍｍｏｌ
、３．５当量）の無水酢酸を加えた。６０℃で１時間撹
拌し、さらに１ｍｌ（１０．６０ｍｍｏｌ）の無水酢酸
を追加し、さらに６０℃で１時間撹拌した。反応混合物
をジクロロメタン−水に注入し、水相をジクロロメタン
で５回洗浄した。有機相をＭｇＳＯ４で乾燥し、アスピ
レーターで減圧蒸留し、さらに７０℃でオイルポンプを
用いさらに蒸留した。残渣を酢酸エチル−ｎ−ヘキサン
で再結晶し、さらにシリカカラム（酢酸エチルからメタ
ノール：クロロホルム＝１：６）で精製し、さらに酢酸
エチル−ｎ−ヘキサンで再結晶して、０．４６３ｇ（１
．３１ｍｍｏｌ）の化合物（６）　を得た。（収率：６
３％）ＦＡＢ−ＭＳ（ＣＨＣｌ３）ｍ／ｚ　　３５４（ＭＨ＋　）　、７０７（２Ｍ＋Ｈ　
＋　）ＨＲ　　Ｃ１６Ｈ２４Ｏ６Ｎ３　（ＭＨ＋　）

【
００３０】実施例６（化合物（６）　＋（７）　→（８
））化合物（６）　０．１３９ｇ（０．４０ｍｍｏｌ）
を６ｍｌの蒸留トルエン及び１ｍｌの蒸留ＣＨ３ＮＯ２
に溶解し、１．７００ｇのモレキュラーシーブ（ＭＳ）
４Ａ及び０．１７１ｇ（０．２７ｍｍｏｌ）の化合物（
７）　を加え、さらに０．１６０ｇ（０．６２ｍｍｏｌ
、２．３当量）のＡｇＯＴｆ　を溶解した４ｍｌの蒸留
トルエンを加えた。この混合物を暗所、室温で窒素雰囲
気下撹拌した。３時間後セライト５４５でろ過し、酢酸
エチルで洗浄し、シリカカラム（酢酸エチル：塩化メチ
レン＝１：１）で精製して０．１０４ｇ（０．１２ｍｍ
ｏｌ）の化合物（８）　を得た。（収率：４３％）

【００３１】実施例７（化合物（８）　→（９））化合
物（８）　０．０７３ｇ（８０．６μｍｏｌ　）及び０
．０１２ｇ（８８．１μｍｏｌ　）のＡＩＢＮ（α，α
’−アゾビスイソブチロニトリル）を３ｍｌの蒸留ベン
ゼンに溶解し、さらに０．５ｍｌ（１．８６ｍｍｏｌ）
の（ｎ−Ｂｕ）３ＳｎＨ　を加え、窒素雰囲気下還流温
度で撹拌した。１．５時間後に０．０４７ｇ（全量で０
．１３２ｍｍｏｌ）の化合物（８）　９２ｍｌの蒸留ベ
ンゼン溶液を加え、さらに０．５時間同一条件で撹拌し
た。反応混合液を減圧蒸留し、残渣をシリカカラム（酢酸エ
チル：ジクロロメタン：１：１０→酢酸エチル→酢酸エ
チル：クロロホルム＝１：８）で精製し、０．１０２ｇ
（０．１２ｍｍｏｌ）のガラス状の化合物（９）　を得
た。（収率：９３％）ＦＡＢ−ＭＳ（ＣＨ３Ｃｌ３）ｍ／ｅ　　８２７（ＭＨ＋　）

【００３２】実施例８（化合物（９）　→（１０））化
合物（９）　０．１２８ｇ（０．１５ｍｍｏｌ）を８．
５ｍｌの９０％　　ＣＦ３ＣＯ２Ｈ　水溶液：ジクロロ
メタン＝１：８に添加し、室温で３時間撹拌した。次い
で飽和　ＮａＨＣＯ３　水溶液で中和し、水相を酢酸エ
チルで抽出した。酢酸エチル相をＮａ２ＳＯ４で乾燥し
、シリカカラム（メタノール：クロロホルム＝１：９）
で精製して、０．０５１ｇ（６４．８μｍｏｌ）の化合
物（１０）を得た。（収率：４２％）

【００３３】実施
例９（化合物（１０）→（１１））化合物（１０）０．
０４２ｇ（５３．４μｍｏｌ）を蒸留ＴＨＦ２ｍｌに溶
解し、２ｍｌ（５２０μｍｏｌ）のＫＯＣＨ３　の蒸留
メタノール溶液を加え、窒素雰囲気下室温で１時間撹拌
した。反応混合物を減圧蒸留し、残渣（黄色ガラス状）
を２ｍｌの０．２Ｍ　　ＮａＨＣＯ３水溶液に溶解し、
室温で２時間撹拌した。この水溶液をセルロースカラム
（１−ＢｕＯＨ−ＡｃＯＨ−Ｈ２Ｏ　＝３：１：１）で
精製し、減圧蒸留した。残渣の上澄み水溶液をさらにセ
ルロースカラム（エタノール：水＝３：１）を通し、水
に可溶性の画分を中和した。中和物は減圧蒸留し、残渣
をエタノールで数回再沈して茶色の沈澱物として０．０
３４ｇ（６０．４μｍｏｌ）の化合物（１１）を得た。ＦＡＢ−ＭＳ（Ｈ２Ｏ）ｍ／ｅ　　５６３（ＭＨ＋　）　、５８５（Ｍ＋Ｎａ）
＋　ＨＲ−ＦＡＢ（ＭＨ＋　）計算値　　　Ｃ２２Ｈ３５Ｎ４Ｏ１３　　　５６３．２
２０１実測値　　　　　　　　　　　　　　　　　５６
３．２１９７

【００３４】参考例（シアリルトランスフ
ェラーゼ活性阻害実験）アッセイは以下の通り行った。１０ｍＭ　　ＭｎＣｌ２
　、１０ｍＭ　　ＭｇＣｌ２　、１０ｍＭ　　２−メル
カプトエタノール及び０．４％トライトン（Ｔｒｉｔｉ
ｎ）　ＣＦ−５４を含む１５０ｍＭカコジル酸緩衝液（
ｐＨ６．６）に、１．８ｍＭ　　ＣＭＰ−〔９−３Ｈ〕
ＮＡＮＡ（０．８μＣｉ／μｍｏｌ　、０．１５ｍＭラ
クトシルセラミドあるいはＧＭ３　及びラット肝ゴルジ
画分（蛋白質として４０μｇ）を加え、阻害剤（化合物
（１１）終濃度１７５ｍＭ）　の存在下あるいは非存在
下、３７℃で１時間反応を行った（反応液量３０μｌ）
。反応液をＢｏｎｄ　Ｅｌｕｔ（Ｃ１８−逆相シリカゲ
ルカラム）にのせ、３０ｍｌの水で洗浄した後、２ｍｌ
のメタノール−クロロホルム（１：１）及び２ｍｌのク
ロロホルムで溶出を行った。溶出画分を集め、溶媒を除
去して乾固した後、溶出画分に含まれる放射活性を測定
した。結果を表１に示す。

【００３５】

【表１】

Claims

【特許請求の範囲】

【請求項１】　　下記一般式（Ｉ）で表わされる化合物
。【化１】（式中、Ｒ１　は水素原子又はアセチル基を表わし、Ｒ
２　はＣ２Ｈ５ＯＣＯＣＨ＝ＣＨ２−、Ｃ２Ｈ５Ｏ２Ｃ
ＣＨ２−　又はＨＯＣＨ２ＣＨ２−　を表わす。）
【請求項２】　　下記一般式（ＩＩ）　で表わされる化
合物。【化２】（式中、Ｒ３　は水素原子又はアセチル基を表わし、Ｒ
４　は水素原子又は臭素原子を表わし、Ｒ５　は水素原
子又はメチル基を表わし、Ｒ６　はそれぞれ水素原子を
表わすか、又は２つのＲ６　が共同で（ＣＨ３）２Ｃ＝
を表わす。）