JPH0430734A

JPH0430734A - タイムの不定根形成方法

Info

Publication number: JPH0430734A
Application number: JP2139379A
Authority: JP
Inventors: Shiho Shoji; 東海林　志保; Koji Osada; 光司長田; Yoshifumi Karizume; 慶文狩集; Akiko Yamane; 山根　明子
Original assignee: Matsushita Electric Works Ltd
Current assignee: Panasonic Electric Works Co Ltd
Priority date: 1990-05-28
Filing date: 1990-05-28
Publication date: 1992-02-03

Abstract

(57)【要約】本公報は電子出願前の出願データであるた
め要約のデータは記録されません。

Description

【発明の詳細な説明】〔産業上の利用分野〕この発明は、タイムの組織片から不定根を効率良く形成
（または誘導）する方法に関する。

〔従来の技術〕

ハーブ系植物は、薬用効果を持つ植物として、生薬、ハ
ーブティー、入浴剤など幅広く利用されている。その中
でも、タイムは、チモール等の有用精油成分を多く含有
しており、頭痛、のどの痛み、風邪、痛風やリューマチ
によるむくみ、座骨神経痛、らい病、てんかん等の治療
薬になると言われ、これらの医薬的特質は実際に証明さ
れている（「ハーブのたのしみＪＡ、ハツトフィールド
著）。

他方、品質の安定な植物原料を大量に入手する方法とし
て、植物の組織培養を工業的に実施するようになってき
ている。たとえば、特開平１−２１８５８２号公報では
、セージ、ラヘンダー、ローズマリー、スペアミント、
レモンパームなどの植物カルスを、オーキシンおよびサ
イトカイニンを含む栄養培地で培養後、エタノールの添
加によりカルスより大量の植物精油成分を得るという方
法が示されている。

〔発明が解決しようとする課題〕

しかし、いま現在、タイムからの前記有用成分の大量生
産を目的とした組織培養技術はほとんど確立されておら
ず、一般に二次代謝物を蓄積しやすいと言われている不
定根の培養による生産技術はない。

一般に、オーキシン類を培養培地に添加すると、植物組
織片より不定根が容易に形成されると言われているが、
タイムの場合、得られる根は、太くて短く、増殖も遅い
という問題がある。

そこで、この発明は、タイムの組織片から不定根を誘導
する組織培養方法を提供することを課題とする。

〔課題を解決するための手段〕

上記課題を解決するために、この発明は、サイトカイニ
ン類１０−ｓ〜１０−８Ｍおよびオーキシン類１０−４
〜１０−＠Ｍを含む培地を用いてタイムの組織片から不
定根を形成するタイムの不定根形成方法を要旨とする。

タイム（Ｔｈｙｍｕｓ　ｖｕｌｇａｒｉｓ　Ｌ、）は、
シソ科の多年草であり、いずれの時期の植物体を使用し
てもよい。タイムの組織片としては、どの部位を使用し
てもよいが、たとえば、葉と葉の間の茎の部分、葉を含
む茎の部分などが使用される。

この発明では、培地は、たとえば、無機成分、炭素源お
よび植物ホルモンを必須成分とし、更に必要に応じてビ
タミン類やアミノ酸類を添加した培地が使用される。

使用する培地は、植物ホルモンである、サイトカイニン
類およびオーキシン類を含んでいる必要がある。サイト
カイニン類が含まれオーキシン類が含まれていないと発
根せずカルスのみが形成される。また、上述したように
、オーキシン類が含まれサイトカイニン類が含まれてい
なくても発根するが、両者を下記特定濃度で併用する場
合に比べて、太くて短い根が形成され、また、成長速度
も遅い。

サイトカイニン類としては、たとえば、ベンジルアデニ
ン、カイネチン、ゼアチンなどが挙げられ、いずれか１
つまたは２以上が使用されるが、ここに挙げたものに限
定されない。オーキシン類としては、たとえば、インド
ール酢酸、２．４ジクロロフエノキシ酢酸（２，４−Ｄ
とも言う）、ナフタレン酢酸などが挙げられ、いずれが
１つまたは２Ｌ）、上が使用されるが、ここに挙げたも
のに限定されない。

培地中のサイトカイニン類の濃度は１０−ｓ〜１０−８
Ｍ、好ましくは１０−６〜１０−’Ｍである。培地中の
オーキシン類の濃度は１０−４〜１０−＠Ｍ、好ましく
は１０−５〜１０−’Ｍである。培地中のサイトカイニ
ン類の濃度が前記範囲の上限を上回ると細胞が褐変化し
て死亡するおそれがあり、下型を下回ると発根が起こら
ないおそれがある。オーキシン類の濃度が前記範囲を外
れた場合も同様である。

培地の無機成分として、たとえば、窒素、リン、カリウ
ム、ナトリウム、カルシウム、マグネシウム、鉄、マン
ガン、亜鉛、モリブデン、銅、コバルト、イオウ、ホウ
素、塩素、ヨウ素等の元素を含む無機塩を挙げることが
できる。具体的にはたとえば、硝酸カリウム、硝酸ナト
リウム、硝酸アンモニウム、塩化カリウム、塩化カルシ
ウム、リン酸二水素カリウム、リン酸二水素ナトリウム
、硫酸マグネシウム、硫酸アンモニウム、硫酸ナトリウ
ム、硫酸第一鉄、硫酸第二鉄、硫酸マンガン、硫酸銅、
硫酸亜鉛、モリブデン酸ナトリウム、ヨウ化カリウム、
ホウ酸、塩化コバルト等の化合物を例示できる。

前記培地の炭素源としては、たとえば、ショ糖等の炭水
化物とその誘導体、脂肪酸等の有機酸およびエタノール
等の１級アルコールを例示できる前記培地のビタミン類
としては、たとえば、ビオチン、チアミン、ピリドキシ
ン、ピリドキサール、ピリドキサミン、パントテン酸カ
ルシウム、アスコルビン酸、イノシトール、ニコチン酸
、ニコチン酸アミド等が例示できる。

前記培地のアミノ酸類としては、たとえば、グリシン、
アラニン、グルタミン酸、システィンおよびフェニルア
ラニンなどを例示できる。

前記培地は、通常は、前記無機成分を約１０−’Ｍない
し約０．１Ｍ、前記炭素源を約１０ｇ／ｌないし約５０
　ｇ　／　Ａ’、前記ビタミン類を約０．１■／ｌない
し約１５０■／Ｉ！、前記アミノ酸を０ないし約１ｇ／
ｌ、および、植物ホルモン類を前記の濃度で含ませて使
用する。これらの成分が、それぞれ、前記の範囲の上限
よりも多いと、細胞が褐変化して死亡するおそれがあり
、下限よりも少ないかゼロだと、細胞の生育が悪くなる
おそれがある。しかし、前記植物ホルモン類以外の成分
の種類や量などは特に限定されるものではない。

この発明のタイムの組織片の培養に用いられる前記培地
として具体的には、従来から知られている植物の組織培
養に用いられている培地、たとえば、ムラシゲ・スクー
グの培地、リンスマイヤー・スクーグの培地、ホワイト
の培地、ガンボルグのＢ−５培地、ニッチ・ニッチの培
地等に前記した炭素源および植物ホルモン類を添加し、
更に必要に応じて前記のビタミン類およびアミノ酸類を
添加して調製される培地を例示できるが、この発明では
特にムラシゲ・スクーグの培地を用いて調製される培地
が望ましい。

この発明では、前記培地は、たとえば、寒天等の多糖類
を０．１〜１重量％含有させた固体培地として使用され
る。多糖類がこの範囲の上限を越えると細胞がひからび
て死亡するおそれがあり、下限を下回ると培地が固まら
ないおそれがある。

〔作　　　用〕

タイムの組織片を培養するための培地として、サイトカ
イニン類およびオーキシン類を上記特定の濃度で含む培
地を用いることにより、タイムの不定根が形成される。

しかも、オーキシン類を用い、サイトカイニン類を用い
ない場合に比べて、細くて長く、増殖も早い。

〔実　施　例〕

以下に、この発明の具体的な実施例および比較例を示す
が、この発明は下記実施例に限定されない。

一実施例１１００ｄ容培養シヤーレ中に、ベンジルアデニン１０−
’Ｍ、ナフタレン酢酸１０−％Ｍを含有するムラシゲス
クーグ培地〔ショ糖３重量％、植物ガム質（ジェランガ
ム）０．３重量％含有〕の固体培地を作製し、この培地
にタイムの茎（葉と葉の間の部分、または、葉を含む部
分。長さ１〜２ｃｍ）を置床して２５℃、１６時間暗の
条件で１５日間培養した。その結果、すべての組織片よ
り多数の不定根が形成された。

この培地にジェランガム３０００■／ｌｔｒ加えて固体
培地とする。

実施例２一実施例１で用いたムラシゲスクーグ培地の代わりにＢ−
５培地〔植物ガム質（ジェランガム）０゜３重量％含有
〕の固体培地を用い、実施例Ｉと同様の条件で培養を行
った。その結果、９０％以上の組織片より多数の不定根
が形成された。

この培地にジェランガム３０００■／ｌを加えて固体培
地とする。

一実施例３− １００−容培養シャーレに、カイネチン１０１Ｍ、２．
４−Ｄを１０−’Ｍ金含有るホワイト培地〔ショ糖３重
量％、植物ガム質（ジェランガム）０．３重量％含有〕
の固体培地を作製し、実施例１と同条件で培養を行った
。その結果、９０％以上の組織片より多数の不定根が形
成された。

実施例４一実施例３での植物ホルモン組成を、カイネチン１０４Ｍ
、ナフタレン酢酸１０−’Ｘ３Ｍにして同条件で培養を
行った結果、すべての組織片より多数の不定根が形成さ
れた。

一実施例５一実施例３で用いたホワイト培地の代わりにムラシゲスク
ーグ培地を用いた培地で、実施例３と同様の条件で培養
を行った結果、すべての組織片より多数の不定根が形成
された。

一実施例６一実施例１においてサイトカイニン類としてゼアチン１０
４Ｍ、オーキシン類としてインドール酢酸１０−’Ｍを
用いたこと以外は実施例１と同様にした結果、９０％以
上の組織片より多数の不定根が形成された。

一実施例７実施例１においてサイトカイニン類の濃度を１０−＠Ｍ
、および、オーキシン類の濃度を１０−＠Ｍとしたこと
以外は実施例１と同様にした結果、７０％以上の組織片
より多数の不定根が形成された一比較例１実施例１において植物ホルモン組成を、ヘンシルアデニ
ン１０−’Ｍ、２．４−Ｄを１０−’Ｍにして同条件で
培養を行った結果、すべての組織片より少しだけカルス
化が起こったが、間もなく褐変化してしまった。

比較例２実施例３での植物ホルモン組成を、カイネチン１０−’
Ｍ、インドール酢酸１０−８Ｍにして同条件で培養を行
った結果、どの組織片も褐変化してしまい、不定根は形
成されなかった。

−比較例３一実施例１においてサイトカイニン類の濃度を１０−８Ｍ
、および、オーキシン類の濃度を１０１Ｍとしたこと以
外は実施例１と同様にした結果、どの組織片も褐変化し
て死亡した。

なお、植物ホルモンとして号イトカイニン類を含まずオ
ーキシン類のみを含む培地を用いて培養した不定根は、
上記実施例１〜７で形成された不定根に比べて、太くて
短く、増殖も遅い。

〔発明の効果〕

この発明にかかるタイムの不定根形成方法は、以上に述
べたように、タイムの組織片を容易に発根させることが
できる。また、この発明によれば、植物ホルモンとして
オーキシン類のみを含む培地を用いる場合に比べて、不
定根の形成が良好である。これにより、タイムからの有
用物を大量に得ることが期待される。

代理人　弁理士　　松　本　武　彦手続補正書（自発１゜２゜３゜４゜１呵牛の耘特願平０２−１３９３７９号発明の名称タイムの不定根形成方法補正をする者事件との関係　　　特許出願人住　　　所　　　　大阪府門真市大字門真１０４８番地
名　称（５８３）松下電工株式会社

Claims

【特許請求の範囲】１　サイトカイニン類１０＾−＾５〜１０＾−＾８Ｍお
よびオーキシン類１０＾−＾４〜１０＾−＾８Ｍを含む
培地を用いてタイムの組織片から不定根を形成するタイ
ムの不定根形成方法。２　サイトカイニン類がベンジルアデニン、カイネチン
およびゼアチンからなる群の中から選ばれる少なくとも
１つであり、オーキシン類がインドール酢酸、２，４−
ジクロロフェノキシ酢酸およびナフタレン酢酸からなる
群の中から選ばれる少なくとも１つである請求項１記載
のタイムの不定根形成方法。