JPH04354522A - 微量滴定及び微量濾過用の膜を有するウェル - Google Patents

Abstract

(57)【要約】本公報は電子出願前の出願データであるた
め要約のデータは記録されません。

Description

【発明の詳細な説明】

【０００１】

【産業上の利用分野】本発明は微量滴定用のウェルに関
する。更に本発明は微量濾過の装置に関する。

【０００２】

【従来の技術】微量滴定用ウェルは、殆んどの免疫試験
の行為では標準的な部分となっている。このようなウェ
ルは単独で、又は例えばストリップ若しくはディスクの
形態と、又は通常の９６ウェル　　トレー（ｗｅｌｌ　
　ｔｒａｙ）の形態と共に結合して使用することができ
る。 例えば、米国特許第４，１５４，７９５号参照。ここに
示された標準サイズ及び配置によって数多くの装置が製
造され、種々の方法でウェルとして、保持し、移し、満
たし及び／又は空にし、そして他の使用で、採用されて
いる。

【０００３】或る場合には、膜を開口したウェルの底部
分に設け、そして熱シール、接着剤処理又は高周波溶接
によって膜をウェルの壁の低部面に設けている。例えば
、米国特許第４，４０７，９４３号参照。このような膜
は、ウェル内部に一種以上の反応成分を保持したり、ま
た試料及び溶液を膜を通して流すために、支持材として
有用であると記載されている。

【０００４】反応剤を支持するために使用する他に、膜
はまた例えば溶液から粒子を除去し濾液を得るためにも
使用される。シュライカー　　アンド　　シュエル社（
ケーン，ニューハンプシャー州）から入手できる微量濾
過用のマニホールドは、ウェル板に濾過デスクを使用し
シリコーンＯ−リングに重ねて用いている。分離用フィ
ルターの支持板は、試料用ウェル板に並べ、そしてこの
二つの板を共に重ねて締めている。使用後、例えば減圧
の適用及び試料の導入では、これらの板を再び分離し、
フィルター支持板の上にフィルターデスクを置いたまま
残すことになる。

【０００５】開口ウェルの底部に膜を付着したまま使用
する不利な点は、初期の不十分な密着性、長時間にわた
る付着性の損失（例えば、安定性）、接着剤と壁又は膜
との、及び／又は試料の成分との不適合性、各膜が各ウ
ェルに実際に接着する困難性、接着の不十分による溶液
の漏れ、及び例えば各膜が物理的に隣接しているために
、隣のウェルの膜によって溶液が吸収される如きウェル
とウェルとの漏話（ｃｒｏｓｓ　　ｔａｌｋ）があって
、これらのことによって、不正確又は間違った解析にな
ってしまう。

【０００６】

【発明が解決しようとする課題】本発明は、微量滴定又
は微量濾過を行うのに使用されるウェルを提供するもの
で、このウェルは、（１）中空の管状壁であって中心線
上の上部及び下部の空間端部、内部面、及びリップを有
し、このリップは下部端部において内部面の内側に円周
上に延び、中心からの末端面において開口部を形成し、
（２）膜は上部面及び下部面を有し円周状であって、膜
の形体及びサイズは円周部分でリップの上部面と接触し
、膜の中央部分は開口部にまたがって延びており、（３
）環状リングは、中心線上に外部面及び低部面を有し、
この低部面はリングの円周上の巾の面積を有し、これが
一般にリップの上部面の円周上の幅と同じであり、リン
グは壁の内部面に沿った所定の位置で、リングの下部面
と膜の上部面とが向い合って保持され、そして膜の円周
面をリップに対して押圧しており（４）リングの外側面
は壁の内側面と噛み合って壁に沿って所定の位置にリン
グを保持するようにしたものである。

【０００７】本発明はまたストリップ、デスク又は　　
９６ウェルトレイ（９６ｗｅｌｌ　　ｔｒａｙ）の形態
として共に結合した複数のウェルを提供する。

【０００８】

【課題を解決するための手段】本発明は微量滴定若しく
は微量濾過の手法、又は両者において使用されるウェル
を提供する。このようなウェルが例えば免疫分析の如き
微量滴定に使用される時には、抗原と抗体との間の免疫
反応の如き、一種以上の反応成分を保持するために膜が
一般に使用される。この成分は、例えば物理的に閉じ込
めるか、化学的結合及び／又は受動吸着によって、膜の
中、上及び／又は膜を通して含ませることができる。

【０００９】例えば、保持された成分が壁に存在するか
、又はウェル内に存在する範囲で、反応はウェル内で行
うことができる。反応はまた、溶液を膜に通して流し、
又は減圧によって膜を通して吸引して行うこともできる
。ウェルの底部に膜を保持した利点は、微孔膜の如き膜
が提供する添加できる表面積、及び膜を通して溶液を吸
引濾過できる点である。

【００１０】微量濾過に用いた場合、例えば、膜又は膜
に保持された物質と保持されている成分との間の物理的
、生物的及び／又は化学的相互作用に基づいて、溶液を
膜に通すことによって１つ以上の成分が除去されるのに
、一般に利用される。

【００１１】好ましいウェルは、例えば本発明において
引用文献として示す米国特許第４，１５４，７９５号に
開示されているウェル及び微量テスト用板の如き、標準
微量滴定ウェルと実質的に同じものである。このような
好ましいウェルは、全体の高さが約０．４から約０．６
インチであって、特に好ましいものは、約０．５インチ
の高さのウェルである。このように、好ましいウェルは
、通常の微量滴定に一般に使用される溶液処理システム
及び読み取り器を有する装置及び機具の中に又は共に組
み入れて使用される。

【００１２】本発明の好ましい容器について、更に図面
を参考にして説明する。図１において、各個別のウェル
（１２）を３個組み合せたストリップ（１０）の部分的
な詳細な断面を示す。ウェル（１２）は、中空の管状壁
（１４）を含み、軸上に上部（１６）及び下部（１８）
の空間端部によって内部表面を形成し、そしてリップ（
２２）は該下部の端部で内部表面内に放射状に延び、末
端面で間隙（２２）を形成している。

【００１３】ウェルの壁は低部に向って、例えば約０．
５から約５度の角度で次第に細くなるのが好ましい。例
えば、特に好ましい態様として、ウェルの上端部の直径
は約０．２７２インチであり、そしてリップのすぐ上部
の所定の位置においては内径は約０．２４７インチにな
るように壁は先細りになっている。このテイバー（先細
り）は、膜とリングを簡単に、壁に沿ってリップ上の膜
の位置を定め、誘導し、そして押え、最後にリングを所
定の位置に置くようにできる。

【００１４】管状壁は好ましくは円筒状であり、しかし
任意には例えば５角形、６角形、７角形若しくは８角形
、又は、平坦な及び丸い部分を組み合せた種々の形態を
形成するために、多数の平坦側面を有することができる
。

【００１５】膜（２４）は上面（２６）と下面（２８）
を有し、円形で、使用に際し膜の周辺部分（３０）は、
リップの上面と円周的に接触し、膜の中央部は開口部を
またがって存在している。

【００１６】当業者は、容器の使用目的に応じて膜を選
定することは、よく認識している。例えば、反応成分を
保持したり、又は濾過を目的として，定性的又は定量的
（例えば重量分析）をも含めて、適切な膜を使用するこ
とができる。好ましい膜は、吸収性、湿潤強度、表面積
，湿潤性（例えば、親水度又は疎水度）、濾過速度、保
留能力、気孔の大きさ、熱安定性、結合能力、空気透過
性、色、厚さ及び費用の如き種々の性質を考慮して、好
適なものが選定される。

【００１７】限定するものではないが、好ましい膜の例
としては、ニトロセルローズ、再生セルローズ、ナイロ
ン（ナイロン６６の如き）、ポリスルホン、ジアゾ化紙
、ガラス繊維、インフレートミクロ繊維及び紙から出来
たものである。好ましい膜は、例えばシュライカー　　
アンド　　シュエル社（ケーン，ニューハンプシャ州）
、及びミルポアー社（ベットホード，マサチューセッツ
州）から、種々のものが入手できる。免疫試験に使用さ
れる好ましい膜の例は、微気孔の膜である。

【００１８】本発明の容器は、一般には円形状のリング
（３２）を有し、外表面（３４）と低部面（３６）とで
あって、低部面でのリングの円周面の幅は、リップの上
面の円周面の幅と通常同じであり、リングは、所定の位
置で壁の内側の面に沿って、リングの低部面と膜の上面
とが押圧して保持し、そしてリップに対し膜の円周部分
を押圧している。

【００１９】リングは、回復力、試料又は反応成分との
化学的適合性及び費用の如き面を考慮して、これらの好
ましい組み合せを提供できる物質から製造される。リン
グを製造するための好ましい物質の例は、ゴム、シリコ
ーン及びスチレン６６６（ダウ　　ケミカル社から入手
できる）の如きスチレンが含まれる。好ましい具体例と
して、約０．０１インチから約０．０５インチの厚さ、
好ましくは約０．０１インチから約０．０３インチの厚
さのスチレンシートを形抜き又は切り出したものである
。

【００２０】本発明のウェルは、更に壁に沿って所定の
位置にリングを保持するため、壁の内側面とかみ合わす
ためにリングの外側面を保持する手段を有する。図１に
おいて、リングは所定の位置において容器の壁と摩擦的
に保持している。摩擦的な保持は、所定の位置において
、リングの外径のサイズとウェルの内径とを適当に調節
して行うことができる。他の好ましい態様として図２に
示したように、リング（３２）は所定の位置においてウ
ェルの壁にへこんだ環状の溝をウェル（３８）内に設け
て保持されている。

【００２１】本発明のウェルは、当該技術分野の技術者
によって知られている技術によって製造することができ
る。リップを含んだ壁自体は、好ましくは単一物品とし
て射出成形される。好ましい形状の膜は、膜物質のシー
トを形抜き又は切断されて得られる。リングもまた個々
の物質のシートを切断して得られる。

【００２２】ウェルを形成するに当り、膜をウェルの上
端部に送入し、そして適当な方法によって、リップの位
置に達するまでウェルの中に押し入れる。次いでリング
を容器の上端部に送入し、そして同様にして膜と接触す
る所定の位置まで容器内に押し入れ、膜をリップに保持
する。膜が反り返えったり、折れたり、又引裂れたりし
ないように注意すべきである。好ましくは、膜の全円周
部分がリップと接触し、そしてリングの全下部面が膜の
周円部分の上面と接触すると、膜の周辺から液体が流れ
出ることがないようにウェルをシールすることになる。

【００２３】好ましくはウェルを製造する全工程は、例
えば膜を切断して送入し、次いでリングを切断して送入
するように、連続して逐次的に行うのが良い。

【００２４】本発明のウェルは、保持膜を用いた微量滴
定及び／又は微量濾過に対して使用することができる。 例えば、ザリィ氏等の“簡単な装置を用いて多種の血清
を一定の方法で分析する方法”免疫誌第１０１巻第２６
１−２６４頁（１９８７年）、ロング氏のシュレイカー
及びシュウエル社発行最近までの出願、ハイブリドーマ
ス（ｈｙｂｒｉｄｏｍａｓ）の分離（１９８６年）、米
国特許第４，４０７，９４３号（免疫分析）、同第４，
４９３，８１５号（フィルター分析及び流体保持の適用
）、同第４，６４２，２２０号（少なくとも−培養工程
による分析）、欧州特許出願第２８８，７９３号（固相
免疫分析）及び英国特許出願ＧＢ２　　１９９　　９４
６Ａ（診断装置）、はすでに本発明において文献として
引用したが、参照されたい。

【００２５】微量滴定用のウェルとして使用した場合、
このような状況で一般に生成し、そして読める信号は、
適切な方法によって解読することができる。例えば、ウ
ェル内の溶液での解読できる信号又は吸収によって容器
から取り出すものである。同様に、ドットブロット分析
（ｄｏｔ　　ｂｌｏｔ　　ａｓｓａｙ）と通常いわれて
いる如き，膜の表面で直接読み取ることのできる信号で
ある。また膜を通過しそして分離回収された溶液で信号
を読み取ることもできる。

【００２６】微量滴定又は微量濾過のいづれも、膜を通
してウェルから流体を回収するために、適切な方法とし
て減圧にて行う手段が採用される。例えば、このような
ウェルのデスク又は皿を、マニホールドの如き装置に入
れ、ウェルの底の部分を空気が入らないように密封し、
所望の時間、所望の力で膜を通して試料又は溶液を取り
出すに十分な減圧にする手段を採用する。

【００２７】微量滴定の分析での課程で生じた信号を、
適当な手段、例えば視覚による解析、又は蛍光分析、分
光光度分析、放射線測定分析若しくは化学蛍光信号によ
る検出によって読み取ることができる。

【００２８】すでに述べたことは、主として本発明を説
明する目的で提示したものである。既に種々の態様を開
示したが、本発明はすでに述べた特定の構造物及び操作
に限定されるものではない。特許請求の範囲に示した本
発明の技術思想及びその範囲から逸脱することなく種々
の改良及び変形することは、当業者において明らかであ
ろう。

【図面の簡単な説明】

【図１】ウェルを３個組み合せた断面図

【図２】リング
を組み入れた断面図

【符号の説明】

１０…ストリップ、 １２…ウェル、 １４…中空の管状壁、 １６，１８…軸線上の上下の端部、 ２０…リップ、 ２２…間隙すきま、 ２４…膜、 ２６，２８…膜の上下面、 ３０…周辺部、 ３２…リング、 ３４…リングの外表面、 ３６…リングの低部面、 ３８…ウェル、

Claims (1)

【特許請求の範囲】
1. 【請求項１】　　微量滴定又は微量濾過を行うのに使用
   するウェルであって、（１）中空の管状壁は中心線上の
   上部及び下部の空間端部、内部面及びリップを有し、該
   リップは該下部端部において該内部面の内側に円周上に
   延びそして中心からの末端面において開口部を形成し、
   （２）膜は上部面及び下部面を有しそして円周状であっ
   て、膜の形体及びサイズは円周部分で該リップの上部面
   と接触し、該膜の中央部分は該開口部にまたがって延び
   ており、（３）環状リングは中心線上に外部面及び低部
   面を有し、そしてこの低部面は該リングの円周上の幅の
   面積を有し、これが該リップの上部面の円周上の幅と大
   体同じであり、該リングは該壁の内部面に沿った所定の
   位置で、該リングの下部面と膜の上部面とが向い合って
   保持され、そして該膜の円周面をリップに対して押圧し
   ており、（４）該壁に沿った該所定の位置で該リングを
   保持することにより、該壁の内部面と該リングの該外周
   面とを保持する手段、を含む該ウェル。