JPH0449236A - ニカルジピン含有ホスホリパーゼａ↓２阻害剤 - Google Patents

Abstract

(57)【要約】本公報は電子出願前の出願データであるた
め要約のデータは記録されません。

Description

【発明の詳細な説明】 及粟上二■凪分団 本発明は、２，６−ジメチル−４−（３’−ニトロフェ
ニル）−１，４−ジヒドロピリジン−３，５−ジカルボ
ン酸３−メチルエステル−５−β−（Ｎ−ベンジル−Ｎ
−メチルアミノ）エチルエステル又はその塩を有効成分
として含有するホスホリパーゼＡ２阻害剤に関する。

光凱ｑ背且 ホスホリパーゼＡ２阻害剤は、ホスホリパーゼＡ２の酵
素活性を阻害することにより生体内細胞膜リン脂質から
のアラキドン酸やりプリン脂質の生成を抑え、これらの
代謝産物で炎症に関与するプロスタグラシンやロイコト
リエンなどのメデイエータ−の生成を抑制しようとする
ものである。

これまで知られているホスホリパーゼＡ２阻害剤の中で
最も強力な阻害活性を示すものはステロイド抗炎症剤（
グルココルチコイド）である。しかしながら、グルココ
ルチコイドが重篤な副作用を示すことはよく知られてい
る。

これに対し、インドメタシンなどの非ステロイド系抗炎
症剤は、アラキドン酸カスケードのシクロオキシゲナー
ゼを阻害してプロスタグラシンＥ２の産生を抑制して抗
炎症活性を示すものであるが、プロスタグラシンＥ２の
もつ胃粘膜保護作用をも損なうため、胃粘膜障害などの
副作用を伴なうこともよく知られている。

最近のホスホリパーゼＡ２阻害剤の研究によれば、ホス
ホリパーゼＡ２には、その−次構造や基質特異性が異な
る二種の型、すなわちＩ型と■型のホスホリパーゼ＾２
の存在がｒａ認され、胃粘膜にあるホスホリパーゼＡ２
は、膵臓のそれと同一であって、ｌ型のホスホリパーゼ
Ａ２であることが証明されており、かつ炎症に関ってい
る酵素はむしろその他の組織で見出される■型のもので
あるとの考えが強くなっている。

従って、■型のホスホリパーゼＡ２に対する阻害活性を
示すものであれば、胃粘膜障害などの副作用がない抗炎
症剤となり得ると考えられる。

これまで、ホスホリパーゼＡ２阻害剤としては種々のも
のが知られており、中でも■型ホスホリパーゼＡ２に対
して阻害活性を示すものもいくつか知られているが、こ
れら従来公知の阻害剤は経口投与すると効力を失うとか
、阻害活性が弱いなどいずれかの問題を含んでいる。

従って、経口投与可能でかつ強力な■型ホスホリパーゼ
阻害剤の開発が切望されている。

−４、ジヒドロピリジン系カルシウム拮抗剤として上布
されているニフェジピンやニソルジピンがホスホリパー
ゼＡ２に対して阻害活性を示すことは公知である〔ｌｎ
ｆｌａｍｍａｔｉｏｎ、　Ｖｏｌ、　１１．　　Ｎ（１
３３５３（１９８７）　）。

本発明者らの研究によれば後記実験例からも明らかなよ
うにこれらの薬剤は■型のホスホリパーゼ八２に対する
阻害活性が弱く、前記課題を克服しうるものではないこ
とが確認された。また、この報文にも示されているよう
に、ホスホリパーゼ＾２とカルシウム拮抗作用とは独立
しており、カルシウム拮抗作用を有する化合物といえど
も、ホスホリパーゼＡｚ（■型を含めて）阻害活性を有
するとは限らないことも確認された。

１Ｗ°　　るための このような技術水準下に、■型ホスホリパーゼ＾２をス
クリーニング系の酵素として用い、これに対する阻害活
性を種々の化合物で確認したところ２．６−ジメチル−
４−（３’−ニトロフェニル）−１，４−ジヒドロピリ
ジン−３，５−ジカルボン酸　３−メチルエステル−５
−β−（Ｎ〜ヘンシル−Ｎ−メチルアミノ）エチルエス
テル又はその塩が従来公知のニフェジピンなどのジヒド
ロピリジン系カルシウム拮抗剤に比し、顕著な■型ホス
ホリパーゼへ２阻害活性を示すことを知見して、本発明
に至ったものである。

２．６−ジメチル−４−（３’−二トロフェニル）−Ｌ
４−ジヒドロピリジン−３，５−ジカルボン酸　３−メ
チルエステル−５−β−（Ｎ−ベンジル−Ｎ−メチルア
ミノ）エチルエステルは以下の構造式で示され、−Ｇ名
ニカルジピンと称され、その塩酸塩は塩酸ニカルジピン
と称される。

ニカルジピンや塩酸ニカルジピンを含むニカルジピンの
塩は、本出願人会社研究員によって初めて合成されたも
のであり、血管拡張作用、血圧陸上作用、鎮痙作用を有
し、降圧剤、鎮痙剤、血管拡張剤、特に冠及び脳血管拡
張剤として有用であることは公知であり（特公昭５６−
６４１７号）、これらの作用がカルシウム拮抗作用に基
づくものであることも知られている。また、塩酸ニカル
ジピンは、脳出血後遺症、脳梗塞後遺症等の脳血流障害
及び高血圧症の治療剤として既に臨床的に汎用されてい
る。

また、ニカルジピンやその塩に脂質低下作用や抗動脈硬
化症作用があることも公知である（特開昭５９−７１６
３号）。

しかしながら、ニカルジピンや塩酸ニカルジピンを含む
ニカルジピンの塩が、ホスホリパーゼ八２、殊に■型の
ホスホリパーゼＡ２阻害剤として有用であることは全く
知られていない。

本発明は、ニカルジピン又はその塩を含有することを特
徴とするホスホリパーゼＡ２阻害剤をその構成とし、そ
の提供を目的とする。

以下、に本発明医薬につき詳述する。

本発明のニカルジピンは塩を形成する。本発明医薬の有
効成分としては、ニカルジピンの薬理学上許容される塩
も含まれるものであり、その塩としては具体的には、上
記塩酸塩の他、硫酸、硝酸、リン酸、臭化水素酸なとの
鉱酸、ギ酸、酢酸、プロピオン酸、シュウ酸、マロン酸
、コハク酸、フマール酸、マレイン酸、乳酸、リンゴ酸
、クエン酸、酒石酸、炭酸、サリチル酸、没食子酸、ピ
クリン酸、メタンスルホン酸、エタンスルホン酸などの
有機酸、グルタミン酸、アスパラギン酸などの酸性アミ
ノ酸との酸付加塩やアンモニウム塩が挙げられる。　ま
た、ニカルジピンやその塩は、不斉炭素原子を有してお
り、光学異性体が存在する。本発明の医薬化合物にはこ
れら光学異性体の単離されたもの及びその混合物が含ま
れる。

これらの化合物は、前記特公昭５６−６４１７号公報な
ど種々の文献でその合成法が開示されており、これら公
知の全ての方法、殊にＨａｎｔｓｃｈの１，４−ジヒド
ロピリジン合成法を応用した製法を適用することにより
容易に入手することができる。

発浬紹ぢ九果 次に本発明の化合物のホスホリパーゼＡ２阻害作用につ
いて実験例をあげて説明する。

ホスホリパーゼＡ２阻害活性の測定 試験方法 ジャーナル　オブ　バイオロジカル　ケミストリー（Ｊ
、　Ｂｉｏｌ、　Ｃｈｅｍ、、　２６しく９）、　４２
３９−４２４６（１９８６））に記載の方法に準じ、以
下の方法で測定した。

１３．５＋＋＋Ｍ塩化カルシウムと２７０μｇ／ｌｄの
牛血清アルブミンを含む１３５ｍＭ　）リス塩酸緩衝液
（ｐＨ８，０）１００μｉにウサギ血小板由来ホスホリ
パーゼＡ２２．５μｌを加え水中で３０分間インキュベ
ーションを行う。

次に本発明の化合物１０μ！、及びトリチウム標識オレ
イン酸でラベルした大腸菌のオートフレイブ標品２５μ
ｆ（約２０万ｃｐｍ）を反応液に加え、６°Ｃで１０分
間反応させる。反応は２規定塩酸５０μｌの添加によっ
て停止させる。反応停止後２０■／ｌｌ１１！の生血清
アルブミン５０μｌを加えて氷中３０分間放置したのち
遠心し、遠心上清のカウントを測定した。

なお、ホスホリパーゼＡ２阻害活性の測定に基質として
用いたトリチウム標識オレイン酸でラベルした大腸菌の
オートフレイブ標品は以下のようにして調製した。−夜
種培養した大腸菌培養液を１００−のトリプトンメディ
ウム（１％ハタトドリプトン−０，５％塩化ナトリウム
）に加えて３７°Ｃで０Ｄ５ｓ。

が０．４となるまでインキュベーションする。次にＢｒ
１ｊ　３５（界面活性剤）を１／１００量とトリチウム
標識オレイン酸５＋＋＋Ｃ４を加え、さらに３７°Ｃで
５時間インキュベーションを続けた後、１２０°Ｃ２０
２０°Ｃ２０分間オートフレイブ４°Ｃに放置する。そ
の後、菌体を０．１％牛血清アルブミンと１０１Ｍ塩化
カルシウムを含む０．７Ｍ　）リス塩酸緩衝液でよく洗
浄した後、０．２％アジ化ナトリウムと１０ｍＭ塩化カ
ルシウムを含む０．７Ｍ　）リス塩酸緩衝液に懸濁し、
使用時まで４°Ｃで保存する。この方法で測定した本発
明化合物のホスホリパーゼＡ２阻害活性のＩＣ６゜値を
表に示す。

マウス耳浮腫の抑制作用の測定 雄性ＩＣＲマウス（体重３０〜３５ｇ）の両耳に供試サ
ンプルを塗布し、その３０分後に右耳のみに、フォルボ
ール １μｇ／ｅａｒを塗布する。４時間後にそれぞれの耳を
切り取り、その重量を測定する。

結果を次表にＰＬＡ２阻害作用と併せて示す。

Ｃａ”拮抗作用とＰＬＡ２阻害作用あるいはＴＰＡ耳浮
腫抑制作用との相関性 ＩＣｓｏ（４／Ｍ）　　　　　ＥＤｓｏ（μｇ／ｅａｒ
）（ｎｉｆｅｄｉｐｉｎｅ） 〉１００ 〉３００ ニトレンジピン （ｎｉｔｒｅｎｄｉｐｉｎｅ） 〉１００ 〉３００ ニカルジピン （ｎｉｃａｒｄｉｐｉｎｅ）　　　　　４５　　　　　
　　２３０また、塩酸ニカルジピンは低毒性の化合物で
あり、このことはマウスおよびラットによる急性毒性試
験により確認された。

その結果は次表の通りである。

上記の実験結果から明らかな如く、本発明の医薬化合物
は、殊に■型ホスホリパーゼＡ２に対して優れた阻害活
性及び抗炎症活性を有し、経口投与で失活せず胃粘膜障
害などの副作用も伴わずに、アラキドン酸及びリゾリン
脂質双方の生合成を抑制することができる強力なホスホ
リパーゼＡ２阻害剤として有用である。

従って、本発明ホスホリパーゼＡ２阻害剤は、各種の炎
症に対する抗炎症剤、抗リウマチ剤、喘息、アトピー性
疾患などのアレルギー疾患の治療剤、ホスホリパーゼＡ
２が関与しているといわれる虚血性血管障害、潰瘍、敗
血症、膵炎等の治療剤として用いられる。

投与方法、投与量 ニカルジピンまたはその塩を含有するホスホ１．＋バー
上Ａ２阻害剤は、特に経口投与しても有効であるので経
口投与製剤、例えば錠剤、カプセル剤、散剤、細粒剤、
顆粒剤、火剤、経口用液剤などにするのが望ましいが、
注射剤、坐剤、軟膏、乳剤、貼付剤、経鼻剤などの非経
口投与製剤や舌下投与製剤とすることを妨げるものでは
なく、アレルギー性皮膚炎などの皮膚疾患に対しては局
所投与が好ましい。

かかる製剤は、通常用いられる製剤用担体や賦形剤やそ
の他の添加剤を用いて当分野において従来慣用の製剤化
手段によって調製できるが、中でも一日一回投与、三日
投与が可能な特公昭６４−７０４７号公報、特願平２−
６６１９０号明細書に記載の製剤とするのが投与による
患者の負担を軽減し、コンプライアンスを向上させる上
で好適である。

本発明医薬の有効成分の投与量は、適用される患者の症
状、体重、年令や性別等を考慮して適宜決定されるが、
通常成人１日当り、経口で５〜５００■、好ましくは１
０〜２５０　ｍｇ１、静注で１〜２００■、好ましくは
５〜１００■であり、これを前記の如く、−日１〜２回
で、あるいは通常の如く３〜４回に分けて投与する。

実施例１ １錠中に１０■の塩酸ニカルジピンを含む錠剤が下記処
方により調製された。

塩酸ニカルジピン　　　　　　　・・・・・・・・・　
１０ｇ乳　　　糖　　　　　　　　　　　　　　　　・
・・・・・・・・　８０ｇ澱　　粉　　　　　　　　　
　　・・・・・・・・・　２９ｇマグマグネシウムステ
アレート　・・・・・・・・・　１ｇ製錠：上記塩酸ニ
カルジピンを微粉砕し、そして乳糖と澱粉と混合する。

その混合物を常法により顆粒となし、更にマグネシウム
ステアレートを加え、１個０．１２ｇの錠剤１０００個
を打錠する。

実施例２ １−中にＯ，１■の塩酸ニカルジピンを含む無菌の注射
液が下記処方によって調製された。

塩酸ニカルジピン　　　　　　　・・・・・・・・・　
ｌＯ■塩化ナトリウム　　　　　　　　・・・・・・・
・・９００■注射用蒸留水　　　　　　　　　・・・・
・・・・・ＬｏｏＩｎｌ調製；上記塩酸ニカルジピンを
約８０ｍの注射用蒸留水に溶かし、次いで得られた溶液
に注射用蒸留水を加え、総量１００ｍにする。そしてこ
れを無菌濾過する。

得られた無菌注射液を遮光）＜４アル瓶本に分注し、 シールする。

Claims (1)

【特許請求の範囲】
1. ニカルジピン［２，６−ジメチル−４−（３′−ニトロ
   フェニル）−１，４−ジヒドロピリジン−３，５−ジカ
   ルボン酸３−メチルエステル−５−β−（Ｎ−ベンジル
   −Ｎ−メチルアミノ）エチルエステル］又はその塩を有
   効成分として含有するホスホリパーゼＡ＿２阻害剤。